पुरुषों और महिलाओं में जननांग पथ की सूजन संबंधी बीमारियों के निदान में पीसीआर विधि। पीसीआर रक्त परीक्षण क्या है और इसकी आवश्यकता क्यों है?

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन के उपयोग पर आधारित एक तकनीक है, जिसका उपयोग किसी व्यक्ति को संक्रामक और के लिए जांच करने के लिए किया जा सकता है। वंशानुगत रोग. 12 संक्रमणों के लिए पीसीआर विश्लेषण एक परिणाम दिखाते हैं, चाहे रोग तीव्र हो या पुराना।कुछ विशेषज्ञ पीसीआर 12 . पर विचार करते हैं अनिवार्य विश्लेषणऔर इसके बिना एक निश्चित निदान न करें। रोग के लक्षणों की शुरुआत से बहुत पहले ही परिणाम सकारात्मक हो सकते हैं।

20 वीं शताब्दी में, यूएसए के कैरी मुलिस ने पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन की घटना की खोज की। वर्तमान में, पीसीआर पद्धति चिकित्सा के कुछ क्षेत्रों में स्वर्ण मानक है। सक्रिय चरण में किसी बीमारी का पता लगाने के लिए विधि सबसे प्रभावी है, क्योंकि ऐसे मामले हैं जब पारंपरिक तरीके सक्रिय चरण में ऐसा परिणाम नहीं देते हैं। सटीक परिणाम.

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स के लाभ

पीसीआर का उपयोग कर संक्रामक प्रक्रियाओं का निदान काफी प्रासंगिक है आधुनिक दुनियाँ. इस प्रकार की परीक्षा के लाभ इस प्रकार हैं:

न्यूज लाइन

1. खोज संक्रामक एजेंटविश्लेषणों में। विश्लेषण में एक संक्रामक एजेंट के डीएनए या आरएनए की पहचान शामिल है।
2. झूठी और गलत प्रतिक्रियाओं को व्यावहारिक रूप से बाहर रखा गया है।
3. पीसीआर विधि 12 सबसे संवेदनशील है। इस पद्धति के लिए धन्यवाद, संक्रामक एजेंटों की एकल कोशिकाओं का भी पता लगाया जा सकता है।
4. छिपे हुए रोगजनकों के लिए पीसीआर का परिणाम प्रक्रिया के 4 घंटे के भीतर तैयार हो जाता है।
5. लापता हुए बिना संक्रामक एजेंटों का पता लगाने की क्षमता विशिष्ट लक्षणरोग के लिए। किसी विशिष्ट बीमारी की स्थिति में यह विधि काफी प्रभावी है।

आधुनिक दुनिया में, संक्रमणों का पीसीआर निदान त्वरित गति से विकसित हो रहा है। तकनीक में सक्रिय रूप से सुधार किया जा रहा है। पीसीआर परीक्षाओं के नए उपप्रकार उभर रहे हैं। विकास के लिए धन्यवाद यह विधिपरीक्षा, यह लोगों की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए जितना संभव हो उतना सुलभ हो जाता है, जबकि लागत धीरे-धीरे बदल रही है।

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन का आधार

पीसीआर विधि विशेष रूप से की जाती है प्रयोगशाला की स्थिति. इसके कार्यान्वयन के लिए, विशेष एंजाइमों का उपयोग किया जाता है, जो रोगी के डीएनए और आरएनए की संरचना को कई गुना बढ़ा देते हैं। डीएनए और आरएनए की इतनी मात्रा बनाई जानी चाहिए कि दृश्य विश्लेषण किया जा सके। परीक्षा के दौरान, आरएनए या डीएनए अनुभाग की एक प्रति कॉपी की जाती है, जो आदर्श रूप से आवश्यक शर्तों के अनुरूप होती है।

प्रयोगशाला एक डेटाबेस रखता है जो विभिन्न संक्रामक एजेंटों की सटीक संरचना को सूचीबद्ध करता है। पीसीआर पद्धति के लिए धन्यवाद, आप न केवल रोगज़नक़ को देख सकते हैं, बल्कि इसके मात्रात्मक अनुपात की गणना भी कर सकते हैं।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स में कुछ नवाचार भी शामिल हैं, जिनमें से निम्नलिखित को प्रतिष्ठित किया जा सकता है:

• उत्परिवर्तन की शुरूआत;
• व्यक्तिगत डीएनए अंशों का कनेक्शन;
• पितृत्व का निर्धारण, आदि।

पीसीआर विश्लेषण से पता चला संक्रमण

पीसीआर निदान निम्नलिखित संक्रामक प्रक्रियाओं को प्रकट कर सकता है:

• निम्नलिखित किस्मों के हेपेटाइटिस: ए, बी, सी, जी;
• एपस्टीन-बार वायरस, प्रेरक एजेंट संक्रामक मोनोन्यूक्लियोसिस;
• साइटोमेगालो वायरस;
• माइकोबैक्टेरियम ट्यूबरक्यूलोसिस;
• हरपीज 1 और 2 प्रकार;
• कई यौन संचारित संक्रमण: यूरियाप्लाज्मोसिस, गार्डनरेलोसिस, क्लैमाइडिया, माइकोप्लाज्मोसिस, ट्राइकोमोनिएसिस।
• एचपीवी और इसकी ऑन्कोजेनिक उप-प्रजातियां;
• टिक-जनित एन्सेफलाइटिस और बोरेलिओसिस;
• कैंडिडा संक्रमण;
• लिस्टरियोसिस;
• हेलिकोबैक्टर पाइलोरी संक्रमण।

और ये कुछ सबसे आम संक्रमण हैं जिनका पता पीसीआर का उपयोग करके लगाया जा सकता है। पीसीआर रक्त परीक्षण सक्रिय रूप से चिकित्सा पद्धति के स्त्री रोग क्षेत्र में, साथ ही साथ इस तरह के क्षेत्रों में उपयोग किया जाता है:

• पल्मोनोलॉजिकल;
• फीथिसियाट्रिक;
• गैस्ट्रोएंटरोलॉजिकल;
• ऑन्कोलॉजिकल;
• चिकित्सा की कई अन्य शाखाएँ।

विश्लेषण के लिए सामग्री एकत्र करने के नियम

किसी व्यक्ति विशेष के शरीर के विभिन्न तरल पदार्थों की जांच करके विदेशी डीएनए और आरएनए का पता लगाया जा सकता है। कुछ यौन संचारित संक्रमणों की उपस्थिति के लिए किसी व्यक्ति की जांच करने के लिए, रोगी के जननांग अंगों (स्मीयर या स्क्रैपिंग) और उसके मूत्र से निर्वहन का नमूना लेना आवश्यक है।

यदि किसी व्यक्ति की जांच करना आवश्यक हो जाता है विभिन्न प्रकारसंक्रमण (एचआईवी, दाद, हेपेटाइटिस और अन्य), फिर एक पीसीआर विश्लेषण किया जाता है, जिसके लिए रोगी के रक्त का उपयोग किया जाता है।

निदान करने के लिए हर्पेटिक घाव, मोनोन्यूक्लिओसिस, आपको रोगी की मौखिक गुहा से एक स्मीयर लेने की आवश्यकता है। सीएमवीआई की पुष्टि के लिए, रोगी का मूत्र विश्लेषण के लिए लिया जाता है। ऐसे मामले हैं जब मस्तिष्कमेरु द्रव की जांच की जाती है ताकि उत्पन्न होने वाली तंत्रिका संबंधी असामान्यताओं के कारणों को निर्धारित किया जा सके।

उसी समय, एक पल्मोनोलॉजिस्ट पीसीआर पद्धति का उपयोग करके एक विशेष रोगी के फुफ्फुस से बलगम और तरल पदार्थ की जांच करता है।

यदि नवजात शिशु को अंतर्गर्भाशयी संक्रमण का संदेह होता है, तो डॉक्टर गर्भवती महिला और अपरा ऊतक के एक टुकड़े से एमनियोटिक द्रव का विश्लेषण करते हैं।

विश्लेषण का वितरण: प्रक्रिया की विशेषताएं और परिणामों की व्याख्या

पीसीआर पद्धति से जांच किए गए सभी रोगियों को सबसे विश्वसनीय परिणाम प्राप्त होता है। पर ये मामलात्रुटियों की घटना को व्यावहारिक रूप से बाहर रखा गया है। इस विश्लेषण के परिणाम जल्दी से तैयार किए जाते हैं, जो निदान की सुविधा प्रदान करते हैं और समय पर नियुक्ति सुनिश्चित करते हैं चिकित्सा उपाय.

पीसीआर परिणाम की विश्वसनीयता सीधे जांच के लिए सामग्री के वितरण की शुद्धता पर निर्भर करती है। सामग्री दूषित नहीं होनी चाहिए, अन्यथा अध्ययन का परिणाम वस्तुनिष्ठ नहीं होगा। सबसे महत्वपूर्ण सिफारिशेंपीसीआर विश्लेषण प्रस्तुत करने से पहले, निम्नलिखित आवश्यकताएं लागू होती हैं:

1. विश्लेषण से एक दिन पहले यौन क्रिया करना मना है।
2. संक्रमण के लिए एक रक्त परीक्षण सुबह खाली पेट लिया जाना चाहिए।
3. सुबह एक बाँझ कंटेनर में मूत्र दिया जाता है।

विश्लेषण का परिणाम विचाराधीन प्रक्रिया के बाद 1.5-2 दिनों में तैयार हो जाएगा। ऐसी स्थितियां हैं जब परिणाम उसी दिन तैयार किया जा सकता है।

परिणामों को समझना

इस प्रकार की परीक्षा का परिणाम सकारात्मक या नकारात्मक हो सकता है। रक्त परीक्षण का एक नकारात्मक परिणाम इंगित करता है कि प्रस्तुत सामग्री में कोई संक्रामक तत्व नहीं हैं। एक बड़ी संख्या कीकिए गए पीसीआर विश्लेषण एक नकारात्मक विश्लेषण दिखाते हैं।

एक सकारात्मक पीसीआर विश्लेषण इस तथ्य की पुष्टि करता है कि प्रस्तुत सामग्री में संक्रामक एजेंट पाए गए थे और उच्च गुणवत्ता, अधिकतम प्रभावी उपचारबीमार।

परिणाम सकारात्मक हो सकता है, लेकिन रोग की कोई अभिव्यक्ति नहीं है। यह या तो बीमारी की शुरुआत, या उसकी गाड़ी को इंगित करता है। यदि रोग के वाहक का पता लगाया जाता है, तो किसी चिकित्सीय उपायों की आवश्यकता नहीं होती है। आपको बस एक विशेषज्ञ को देखने की जरूरत है। ऐसी बीमारियों के उदाहरण हैं:

• पेपिलोमावायरस संक्रमण;
• हरपीज, आदि

वे आम तौर पर लार, स्क्रैपिंग में पाए जाते हैं ग्रीवा नहर, मूत्रमार्ग। हालांकि, यह याद रखना चाहिए कि एक बीमार व्यक्ति बिल्कुल स्वस्थ लोगों को संक्रमित कर सकता है, इस तथ्य के बावजूद कि उसका यह रोगबिल्कुल चिंता नहीं करता। रोग आगे बढ़ सकता है जीर्ण रूप. यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि उन मामलों में जहां पीसीआर रक्त परीक्षण दिखाया गया है सकारात्मक परिणाम, चिकित्सीय उपायों की नियुक्ति बस आवश्यक है।

पीसीआर विश्लेषण में एक मात्रात्मक विशेषता भी होती है। मात्रात्मक परिणाम का मूल्यांकन केवल एक विशेषज्ञ द्वारा किया जाता है, यह व्यक्तिगत है विभिन्न संक्रमण. पर आधारित मात्रात्मक विशेषता, डॉक्टर यह समझने में सक्षम है कि यह रोग प्रक्रिया कितनी सक्रिय है, किसी विशेष बीमारी के विकास के सटीक चरण को रखने के लिए। प्राप्त परिणामों का विश्लेषण करके, विशेषज्ञ चुन सकते हैं आवश्यक दवाऔर संभवतः दवा की खुराक पर पुनर्विचार करें।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स की शुद्धता

विशेषज्ञों को पीसीआर 3 दिया जाता है सबसे महत्वपूर्ण विशेषताएं, जिनमें से हैं:

1. शुद्धता।
2. विशिष्टता।
3. संवेदनशीलता।

पीसीआर द्वारा संक्रमण का निदान किया गया है अधिक संभावनासंक्रामक एजेंटों का पता लगाना। रक्त और अन्य तरल पदार्थों का पीसीआर विश्लेषण अत्यधिक विशिष्ट है। इसकी मदद से आप किसी खास संक्रामक प्रक्रिया को आसानी से पहचान सकते हैं। पीसीआर डायग्नोस्टिक्स अत्यधिक संवेदनशील है। यदि परीक्षण सामग्री में शामिल हैं न्यूनतम राशिसंक्रामक एजेंट, पीसीआर पद्धति हमेशा सकारात्मक रहेगी।

सबसे दुर्लभ एक गलत सकारात्मक परिणाम है। यदि कोई संक्रमण नहीं है, तो परिणाम नकारात्मक है।

गुप्त संक्रामक प्रक्रिया के लिए पीसीआर

यदि किसी व्यक्ति को एसटीआई होने का संदेह है, तो रक्त परीक्षण का आदेश दिया जाता है छिपे हुए संक्रमण. रोगी की जांच से ही यौन रोगों का पता लगाया जा सकता है। रोग जैसे:

• क्लैमाइडिया;
• यूरियाप्लाज्मोसिस;
• सूजाक;
• दाद;
• गार्डनरेलोसिस;
• माइकोप्लाज्मा

उपरोक्त यौन संक्रमण काफी सामान्य हैं और साथ ही कपटी भी हैं। पर आरंभिक चरणरोग के विकास, वे उज्ज्वल लक्षण नहीं देते हैं, और रोगी मदद नहीं लेते हैं। इन संक्रमणों का संदेह होने पर पीसीआर रक्त परीक्षण, मूत्रमार्ग के श्लेष्म झिल्ली से स्क्रैपिंग और ग्रीवा नहर की आवश्यकता होती है।

एसटीआई का बहुत नकारात्मक प्रभाव पड़ता है प्रजनन प्रणाली. वे भ्रूण में बांझपन या विकृतियों का कारण बन सकते हैं। इस संबंध में, गर्भावस्था की योजना बनाने से पहले, आपको एक पीसीआर परीक्षण करने की आवश्यकता है।

12 संक्रमणों के लिए पीसीआर लोकप्रिय है। पीसीआर 12 द्वारा निदान जननांगों से स्वैब की डिलीवरी के माध्यम से किया जाता है। पेशाब की क्रिया के 2 घंटे बाद सामग्री ली जाती है। अध्ययन से 2 दिन पहले, योनि में सपोसिटरी नहीं डाली जानी चाहिए और डचिंग नहीं की जानी चाहिए। विश्लेषण का परिणाम 2 दिनों में तैयार हो जाएगा।

पीसीआर की लागत अध्ययन किए जा रहे संक्रमण के आधार पर भिन्न होती है।प्रत्येक संक्रमण के लिए कीमत 200 से 500 रूबल तक होती है। आप डॉक्टर के रेफ़रल के बिना, अपने दम पर एक निजी प्रयोगशाला में प्रवेश कर सकते हैं और जांच कर सकते हैं।

पीसीआर (पोलीमरेज़) श्रृंखला अभिक्रिया) - आणविक जीव विज्ञान की उपलब्धि, नैदानिक ​​के मुख्य तरीकों में से एक प्रयोगशाला निदान 20वीं सदी के अंत और 21वीं सदी की शुरुआत में, महान लाभमें विभिन्न क्षेत्रचिकित्सा विज्ञान।

इस प्रकार, भले ही लाखों कोशिकाओं के बीच मानव शरीरयह स्वयं जीवित वायरस नहीं है जो खो गया है, लेकिन इसके डीएनए का केवल एक कण है, तो पीसीआर, अगर कुछ भी इसमें हस्तक्षेप नहीं करता है, तो संभवतः कार्य का सामना करेगा और "विदेशी" के रहने पर सकारात्मक परिणाम की रिपोर्ट करेगा। यह पीसीआर का सार और इसका मुख्य लाभ है।

फायदे और नुकसान

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स करने वाली प्रयोगशाला उपकरण, परीक्षण प्रणाली और चिकित्सा कर्मियों की योग्यता के मामले में उच्चतम आवश्यकताओं के अधीन है। यह एक उच्च तकनीक वाली प्रयोगशाला है जिसमें अत्यधिक संवेदनशील और अत्यधिक विशिष्ट अभिकर्मकों का एक शस्त्रागार है, इसलिए इसमें कोई विशेष कमी नहीं है। जब तक यह अनुपस्थिति में सकारात्मक परिणाम नहीं देता नैदानिक ​​अभिव्यक्तियाँऔर इस प्रकार चिकित्सक को एक दुविधा के सामने रखता है: क्या यह इलाज शुरू करने लायक है या नहीं?

रोगी को देखने वाला डॉक्टर परीक्षण के परिणामों की विश्वसनीयता पर संदेह करना शुरू कर देता है, क्योंकि उसे रोग के कोई लक्षण दिखाई नहीं देते हैं। लेकिन फिर भी, पीसीआर प्रणाली की उच्च संवेदनशीलता को देखते हुए, यह याद रखना चाहिए कि यह प्रीक्लिनिकल चरण में भी रोगज़नक़ का पता लगाता है, और इस मामले में एक सकारात्मक परिणाम नुकसान की तुलना में अधिक लाभ है। इसके आधार पर, उपस्थित चिकित्सक को स्वयं के पक्ष और विपक्ष में अन्य तर्कों को ध्यान में रखते हुए, चिकित्सा की उपयुक्तता पर निर्णय लेना चाहिए।

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन का उपयोग करके निदान के लाभ स्पष्ट हैं:

• उच्च विशिष्टता, एक विशेष जीव में निहित न्यूक्लिक एसिड कणों के चयनित नमूने में उपस्थिति के कारण 100% तक पहुंचना, लेकिन मनुष्यों के लिए विदेशी;
• उच्च प्रदर्शन, क्योंकि पीसीआर एक उच्च तकनीक वाली स्वचालित तकनीक है जो सामग्री के नमूने के दिन परीक्षण करने का अवसर प्रदान करती है और इस प्रकार, रोगी को अनावश्यक चिंताओं से छुटकारा दिलाती है;
• पीसीआर, एक नमूने पर काम कर रहा है, कई अध्ययन करने में सक्षम है और इसके बारे में कई रोगजनकों का पता लगाएंअगर उसके पास ऐसा कोई कार्य है। उदाहरण के लिए, क्लैमाइडियल संक्रमण का निदान करते समय, जहां पीसीआर मुख्य तरीकों में से एक है, क्लैमाइडिया के साथ, निसेरिया (गोनोकोकस) का भी पता लगाया जा सकता है - रोगज़नक़। इसके अलावा, यह परिणामों की विश्वसनीयता को नकारात्मक रूप से प्रभावित नहीं करता है;
• पीसीआर परीक्षण खतरनाक सूक्ष्मजीव है उद्भवन जब उनके पास अभी तक शरीर को ठोस नुकसान पहुंचाने का समय नहीं है, अर्थात, शीघ्र निदानआगामी घटनाक्रम की चेतावनी रोग प्रक्रिया, जिससे इसकी तैयारी करना और इसे पूरी तरह से सशस्त्र लेना संभव हो जाता है।

इसके अलावा, निदान के दौरान कभी-कभी उत्पन्न होने वाली गलतफहमी से बचने के लिए, पीसीआर खुद को इस तथ्य से भी बचाता है कि यदि आवश्यक हो तो विशेषज्ञ उद्देश्यों के लिए उनका उपयोग करने के लिए इसके परिणाम रिकॉर्ड किए जा सकते हैं (फोटो, कंप्यूटर)।

पीसीआर प्रतिक्रियाओं में मानदंड को नकारात्मक परिणाम माना जाता है।, विदेशी न्यूक्लिक एसिड के टुकड़ों की अनुपस्थिति का संकेत, एक सकारात्मक प्रतिक्रिया शरीर में एक संक्रमण की उपस्थिति का संकेत देगी, डिजिटल मूल्य परीक्षण के समय वायरस की स्थिति और इसकी एकाग्रता का संकेत देते हैं। हालांकि, विश्लेषण का एक पूरा प्रतिलेख एक डॉक्टर द्वारा किया जाता है जिसने "पीसीआर" विषय पर विशेष प्रशिक्षण प्राप्त किया है। परिणामों की स्वयं व्याख्या करने का कोई मतलब नहीं है, क्योंकि यह संभव है, जो होने की संभावना है, गलत समझना और पहले से चिंता करना शुरू कर दें।

पीसीआर "डरता है" क्या है, यह क्या कर सकता है और इसकी तैयारी कैसे करें?

किसी भी अन्य अध्ययन की तरह, कभी-कभी परीक्षण के परिणाम झूठे सकारात्मक या झूठे नकारात्मक होते हैंजहां पीसीआर कोई अपवाद नहीं है। यह निम्नलिखित मामलों में हो सकता है:

1. उल्लंघन तकनीकी प्रक्रियाप्रतिक्रिया के चरणों में से एक में;
2. सामग्री के संग्रह, उसके भंडारण या परिवहन के नियमों का पालन करने में विफलता;
3. सामग्री में विदेशी अशुद्धियों की उपस्थिति।

इससे पता चलता है कि पीसीआर - संक्रमण के निदान को सावधानी से, सावधानी से और सटीक रूप से संपर्क किया जाना चाहिए, अन्यथा सामग्री के नमूने उनकी संरचनात्मक संरचना को बदल सकते हैं या ढह भी सकते हैं।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स के चरण। गलत परिणाम अध्ययन के किसी भी स्तर पर उल्लंघन दे सकते हैं

संक्रमणों का पीसीआर निदान दूसरों के बीच "स्वर्ण मानकों" की श्रेणी से संबंधित है प्रयोगशाला के तरीके, इसलिए इसका उपयोग कई बीमारियों के रोगजनकों की खोज के लिए किया जा सकता है, जिनमें पहली नज़र में एक दूसरे के साथ कुछ भी सामान्य नहीं है:

• यक्ष्मा अलग स्थानीयकरण, निमोनिया (एटिपिकल सहित, क्लैमाइडिया के कारण);
• बचपन में संक्रमण ( खसरा रूबेला, कण्ठमाला, खसरा);
• डिप्थीरिया;
• साल्मोनेलोसिस;
• जूनोटिक स्पर्शसंचारी बिमारियों- लिस्टेरियोसिस (रोग लिम्फ नोड्स, केंद्रीय तंत्रिका तंत्र, आंतरिक अंगों को नुकसान के साथ विभिन्न लक्षणों की विशेषता है);
• एपस्टीन-बार वायरस (संक्रामक मोनोन्यूक्लिओसिस, आदि) के प्रवेश के कारण होने वाले रोग;
• पेपिलोमावायरस संक्रमण (एचपीवी और इसके प्रकार) द्वारा उकसाए गए ऑन्कोलॉजिकल पैथोलॉजी;
• Borreliosis (लाइम रोग, टिक-जनित एन्सेफलाइटिस);
• हेलिकोबैक्टर पाइलोरी संक्रमण, जिसका प्रेरक एजेंट मानव पेट में रहने वाला एक सूक्ष्म जीव है हैलीकॉप्टर पायलॉरी. यह साबित हो चुका है कि हेलिकोबैक्टर पेट या ग्रहणी के कैंसर के विकास का कारण बनता है;
• और व्यावहारिक रूप से सब कुछ।

यौन संचारित संक्रमणों के पीसीआर निदान का विशेष महत्व है, क्योंकि इस तरह से होने वाली बीमारियां अक्सर होती हैं लंबे समय तकबिना किसी नैदानिक ​​​​अभिव्यक्ति के होते हैं, लेकिन गर्भावस्था के दौरान वे अधिक सक्रिय होने लगते हैं और इस प्रकार, स्वास्थ्य और यहां तक ​​​​कि बच्चे के जीवन को भी खतरा होता है। और वैसा ही व्यवहार करें। उनमें से कुछ ("मशाल") एक साथ एसटीआई से संबंधित हैं, इसलिए बाद वाले को अधिक विस्तृत विचार की आवश्यकता है। पाठक सबसे लोकप्रिय तरीकों से परिचित हो सकेंगे निम्नलिखित अनुभागलेख।

विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए ठीक से तैयारी कैसे करें?

हम तुरंत ध्यान दें कि पीसीआर की तैयारी काफी सरल है, जिसमें रोगी की ओर से किसी विशेष प्रयास की आवश्यकता नहीं होती है। आपको केवल तीन सरल कार्यों को पूरा करने की आवश्यकता है:

1. परीक्षण लेने से 24 घंटे पहले संभोग न करें;
2. नस से रक्त लेने और उसका विश्लेषण करने के लिए, आपको खाली पेट आना होगा, वैसे, आप पी भी नहीं सकते;
3. मूत्र रात में पारित किया जाना चाहिए (सुबह में - एक फार्मेसी में एक दिन पहले खरीदे गए बाँझ जार में)।

पीसीआर किसी भी जैविक वातावरण में काम कर सकता है

पीसीआर विधि "खून का प्यासा" नहीं है, इसलिए यह किसी भी जैविक वातावरण को स्वीकार करता है जिसमें एक संदिग्ध संक्रामक एजेंट होता है विकल्प - आपको शोध के लिए क्या लेना है, डॉक्टर के पास रहता है।

इस प्रकार, एक रोगज़नक़ की तलाश में, रक्त परीक्षण के अलावा (हालाँकि यह उपयुक्त भी है और ज्यादातर मामलों में अन्य सामग्री के साथ समानांतर में लिया जाता है), आप इसका उपयोग कर सकते हैं:

• (मूत्रजनन पथ का निर्वहन);
• श्लेष्मा खुरचना मुंह, कंजाक्तिवा, नासोफरीनक्स, जननांग पथ (महिलाओं में उन्हें गर्भाशय ग्रीवा और योनि से लिया जाता है, पुरुषों में - मूत्रमार्ग से);
• लार;
• वीर्य;
• प्रोस्टेट रस;
• अपरा ऊतक और एमनियोटिक द्रव (एमनियोटिक द्रव);
• मूत्र तलछट (सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद), उदाहरण के लिए, कुछ एसटीआई और माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस का पता लगाने के लिए;
• एक ही उद्देश्य के लिए थूक और फुफ्फुस द्रव;
• एक्सयूडेट्स;
• संदिग्ध के लिए मस्तिष्कमेरु द्रव संक्रमणसीएनएस;
• यकृत, ग्रहणी, पेट आदि से ली गई बायोप्सी सामग्री (बायोप्सी)।

मैं उपरोक्त में यह जोड़ना चाहूंगा कि सभी मामलों में, स्क्रैपिंग और स्राव में भी, परीक्षण के लिए पर्याप्त सामग्री होगी, क्योंकि पीसीआर परीक्षण के लिए बड़ी मात्रा की आवश्यकता नहीं होती है, विश्लेषण के लिए कुछ माइक्रोलीटर पर्याप्त होते हैं, जिन्हें आमतौर पर एक में लिया जाता है। Eppendorf टाइप माइक्रोट्यूब और अध्ययन के लिए भेजा।

पीसीआर के रोग और उपयोग

एचआईवी और पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन

आमतौर पर, इम्युनोब्लॉटिंग के सकारात्मक परिणामों के मामले में एक अनाम परीक्षा पास करते समय, निदान फिर से दोहराया जाता है। यदि निदान की पुष्टि की जाती है, तो रोगी को अतिरिक्त अध्ययन निर्धारित किया जाता है:

1. प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं का उपयोग करते हुए, सीडी 4 लिम्फोसाइटों (इम्यूनोकोम्पेटेंट कोशिकाओं - टी-हेल्पर्स या हेल्पर्स) की संख्या के पूर्ण मूल्यों का निर्धारण, जो संक्रमण पहली जगह में संक्रमित करता है, जिसके बाद वे अपने मूल गुणों को खो देते हैं और बीच अंतर नहीं कर सकते हैं " अपना" और "विदेशी"। वे शरीर की सामान्य कोशिकाओं के लिए रक्त प्लाज्मा में परिसंचारी विषाणु का आरएनए लेते हैं और उन पर प्रतिक्रिया नहीं करते हैं;
2. पीसीआर द्वारा वायरल आरएनए का पता लगाना और इन आंकड़ों के आधार पर चरण, रोग प्रक्रिया की गंभीरता और रोग का निदान स्थापित करने के लिए वायरल कणों की एकाग्रता की गणना करना. बेशक, इस संबंध में "आदर्श" शब्द मौजूद नहीं है, क्योंकि प्रतिक्रिया हमेशा सकारात्मक होती है, और डिजिटल मूल्यों का डिकोडिंग डॉक्टर की क्षमता के भीतर होता है।

पीसीआर और हेपेटाइटिस

पीसीआर विधि रोगजनकों का पता लगा सकती है, अक्सर परीक्षण का उपयोग हेपेटाइटिस सी के निदान के लिए किया जाता है, जिसे अन्य तरीकों से खराब तरीके से पहचाना जाता है।

हेपेटाइटिस सी वायरस (आरएनए युक्त) मानव शरीर में अपने व्यवहार में एचआईवी जैसा दिखता है। यकृत कोशिकाओं (हेपेटोसाइट्स) के जीनोम में घुसते हुए, वह वहां पंखों में इंतजार कर रहा है, जो कम से कम 2 साल में आ सकता है, कम से कम 20 साल में, इसलिए डॉक्टरों ने उसे "सौम्य हत्यारा" कहा। हेपेटाइटिस सी यकृत पैरेन्काइमा में एक घातक प्रक्रिया के गठन की ओर जाता है, जो स्वयं में प्रकट होता है देर से चरण. ये सभी आयोजन रोग प्रतिरोधक तंत्रध्यान नहीं देता, वायरस को हेपेटोसाइट समझने की भूल करता है। सच है, वायरस के प्रति एंटीबॉडी कुछ मात्रा में निर्मित होते हैं, लेकिन वे एक अच्छी प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्रदान नहीं करते हैं। हेपेटाइटिस सी के निदान के लिए, एलिसा बहुत जानकारीपूर्ण नहीं है, क्योंकि यह इंगित करता है कि वायरस ने निशान छोड़ दिया है, और यह ज्ञात नहीं है कि यह खुद को छोड़ दिया है या नहीं। एचसीवी के साथ, स्व-उपचार के मामलों को जाना जाता है, जबकि वायरस के खिलाफ एंटीबॉडी बने रहते हैं और जीवन के लिए प्रसारित होते रहते हैं (इम्यूनोलॉजिकल मेमोरी)। पीसीआर एंटीबॉडी के निर्माण से काफी आगे है और 1-1.5 सप्ताह में एक वायरल कण का पता लगा सकता है, जबकि एंटीबॉडी 2 महीने से छह महीने तक की सीमा में दिखाई दे सकते हैं।

मानव शरीर में संदिग्ध बड़े पैमाने पर हेपेटाइटिस सी वायरस के मामले में पीसीआर निदान सबसे अधिक है सबसे अच्छी विधिअनुसंधान, क्योंकि केवल वह रोगी के रक्त या यकृत बायोप्सी में "सौम्य दुश्मन" की उपस्थिति को पहचानने में सक्षम है।

हालांकि, कभी-कभी ऐसे मामले होते हैं जब एटी सकारात्मक होता है, और पीसीआर परिणाम नकारात्मक होता है। यह कभी-कभी तब होता है जब वायरस की मात्रा बहुत कम होती है या जब यह लीवर में बिना छोड़े निष्क्रिय हो जाता है खून. सच्चाई का पता लगाने के लिए, रोगी का पुन: विश्लेषण किया जाता है, या एक से अधिक भी।

पैपिलोमावायरस संक्रमण

यदि स्व-उपचार नहीं होता है, तो यह स्वयं को दिखाए बिना भी, मेजबान के शरीर में लंबे समय तक बना रह सकता है, जिसे इसका संदेह भी नहीं होता है, क्योंकि पीसीआर नहीं किया गया है, और रोग के कोई लक्षण नहीं थे। हालांकि, पैपिलोमावायरस संक्रमण की उपस्थिति, अव्यक्त होने के बावजूद, मानव स्वास्थ्य के प्रति उदासीन होने से बहुत दूर है, जहां कुछ प्रकार के वायरस इसका कारण बनते हैं। ऑन्कोलॉजिकल रोग(प्रकार 16, 18)।

अधिक बार, आधी आबादी एचपीवी से पीड़ित होती है, क्योंकि वायरस महिला से अधिक प्यार करता है जननांग क्षेत्र, और विशेष रूप से गर्भाशय ग्रीवा, जहां कुछ प्रकार के वायरस डिसप्लास्टिक प्रक्रियाओं के विकास में योगदान करते हैं, और फिर सर्वाइकल कैंसर, यदि डिसप्लेसिया का इलाज नहीं किया जाता है और वायरस जारी किया जाता है। तो, पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन वायरल डीएनए का पता लगाएगा, और फिर महिला के शरीर में बसे "खराब" या "अच्छा" (ऑन्कोजेनिक या गैर-ऑन्कोजेनिक) प्रकार का संकेत देगा।

अन्य एसटीआई और मशाल संक्रमण

जाहिर है, पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन न्यूक्लिक एसिड से युक्त किसी भी विदेशी संरचना का पता लगा सकता है, इसलिए यह परीक्षण सभी एसटीडी और टॉर्च संक्रमणों का पता लगाने के लिए उपयुक्त है, हालांकि, इसका हमेशा उपयोग नहीं किया जाता है। क्यों, कहते हैं, गोनोकोकस का पता लगाने के लिए इस तरह के महंगे शोध का संचालन करें, अगर अधिक सस्ती और सस्ती हैं?

TORCH संक्रमण और STI इतने परस्पर जुड़े हुए हैं कि कभी-कभी यह निर्धारित करना मुश्किल होता है कि किसी विशेष रोगज़नक़ को किस समूह को सौंपा जाना चाहिए। सामान्य तौर पर, उन्हें समझना मुश्किल हो सकता है, क्योंकि ये सूक्ष्मजीवों के काफी विविध समूह हैं जिन्हें हमेशा या केवल तभी यौन संचारित किया जा सकता है जब कुछ शर्तें(इम्युनोडेफिशिएंसी), और केवल गर्भावस्था के दौरान, संभव के कारण रुचि का हो सकता है नकारात्मक प्रभावइसके पाठ्यक्रम पर और भ्रूण पर।

अव्यक्त संक्रमणों का पता लगाने के लिए पीसीआर मुख्य विधि है

नैदानिक ​​​​अभिव्यक्तियों का विकास विभिन्न रोगजनकों पर आधारित है, जो केवल पीसीआर द्वारा पाया जा सकता है, जो इसका मुख्य कार्य है, कभी-कभी एलिसा के साथ, और कभी-कभी एकमात्र पुष्टिकरण परीक्षण के रूप में, खासकर अगर बीमारी के कोई लक्षण नहीं हैं।ऐसा कठिन परिस्थितिएक पॉलीमिक्रोबियल संक्रमण पैदा कर सकता है, जिसमें स्पष्ट रोगजनकों के अलावा अवसरवादी रोगजनक भी शामिल हैं।

यूरियाप्लाज्मा अक्सर माइकोप्लाज्मा के साथ मिलकर देखा जाता है।और यह कोई दुर्घटना नहीं है। क्लैमाइडिया की तरह ये प्रजातियां न तो वायरस हैं और न ही बैक्टीरिया, वे कोशिकाओं के अंदर रहते हैं और एसटीआई से संबंधित हैं, हालांकि उनकी उपस्थिति में स्वस्थ शरीरभी असामान्य नहीं है। इसलिए, एक स्वस्थ वाहक को एक बीमार व्यक्ति से अलग करने के लिए, विशेष तरीकों की आवश्यकता होती है, जहां पीसीआर को सबसे विश्वसनीय माना जाता है, क्योंकि इन सूक्ष्मजीवों की संरचना और व्यवहार की ख़ासियत के कारण, अन्य अध्ययन अप्रभावी हैं।

जहाँ तक (टाइप 1, 2) और, जो हर्पीज वायरस (टाइप 5) से भी संबंधित है, यहाँ की स्थिति भी अस्पष्ट है। दुनिया की आबादी की संक्रमण दर 100% के करीब पहुंच रही है, इसलिए इस मामले में, वायरस की पहचान और इसकी खुराक बहुत महत्वपूर्ण है, जो गर्भावस्था के दौरान विशेष रूप से महत्वपूर्ण है, क्योंकि एक वयस्क के लिए, वह वायरस जिसने अपने शरीर में जड़ें जमा ली हैं। शरीर अक्सर कोई परेशानी नहीं करता है और रोग के लक्षण नहीं देता है।

इसलिए, डॉक्टर द्वारा निर्धारित ऐसी परीक्षा को नजरअंदाज नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि कुछ मामलों में पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन अनिवार्य है और आवश्यक विधिप्रयोगशाला निदान जो बचाव कर सकते हैं गंभीर जटिलताएंन केवल एक महिला, बल्कि एक छोटा, अभी पैदा नहीं हुआ, छोटा आदमी।

अंत में, मैं यह नोट करना चाहूंगा कि पीसीआर जैसी अद्भुत विधि 30 से अधिक वर्षों से मानवता की सेवा कर रही है। इसी समय, परीक्षण के कार्य संक्रामक रोगों के रोगजनकों की खोज तक सीमित नहीं हैं। पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन, आणविक जीव विज्ञान की मिट्टी पर पैदा हुआ, आनुवंशिकी के साथ अटूट रूप से जुड़ा हुआ है, यह व्यक्तिगत पहचान के लिए फोरेंसिक में सफलतापूर्वक उपयोग किया गया, फोरेंसिक चिकित्सा में पितृत्व स्थापित करने के लिए, पशु चिकित्सा में, यदि पशु क्लिनिक में महंगे उपकरण खरीदने की क्षमता है, साथ ही साथ अन्य क्षेत्रों (उद्योग, कृषिआदि।)।

वीडियो: पीसीआर - सार और अनुप्रयोग

अत्यधिक जानकारीपूर्ण पीसीआर विधि (पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन) इसे संभव बनाती है जल्दी पता लगाने केविभिन्न आनुवंशिक और संक्रामक रोग, तीव्र या कालानुक्रमिक रूप से होते हैं। इसके अलावा, उन्हें उस चरण में भी पहचाना जा सकता है जब वे कोई लक्षण नहीं दिखाते हैं। सबसे अधिक बार पीसीआर विश्लेषणयौन संचारित संक्रमणों (एसटीडी, एसटीआई) का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है।

पीसीआर विश्लेषण एक आणविक निदान पद्धति को संदर्भित करता है, जो किसी भी जैविक सामग्री (गर्भाशय ग्रीवा, योनि, मूत्रमार्ग, रक्त, लार से धब्बा) में रोगज़नक़ के न्यूक्लिक एसिड (डीएनए) के कुछ अंशों की छोटी सांद्रता में कई वृद्धि पर आधारित है। थूक, आदि) और एक डेटाबेस के साथ इसके डीएनए या आरएनए की तुलना करें ज्ञात प्रजातिसंक्रमण फैलाने वाला।

इस तकनीक को पिछली सदी के 80 के दशक में अमेरिकी कैरी मुलिस द्वारा विकसित किया गया था। 1993 में, वैज्ञानिक एक पुरस्कार विजेता बने नोबेल पुरुस्काररसायन विज्ञान के क्षेत्र में। आज, अधिकांश संक्रमणों के निदान के लिए पीसीआर अध्ययन को एक प्रकार का "स्वर्ण मानक" माना जाता है। पीसीआर विश्लेषण व्यापक रूप से चिकित्सा पद्धति में रोग की प्रकृति और मंचन को स्पष्ट करने के लिए उपयोग किया जाता है सटीक निदान. बहुत बार ऐसे मामले होते हैं जब सभी ज्ञात इम्यूनोलॉजिकल, वायरोलॉजिकल और बैक्टीरियोलॉजिकल तरीके काम नहीं करते हैं। तब पीसीआर बन जाता है एक ही रास्ता, जिसका उपयोग रोग के सक्रिय चरण की पहचान करने के लिए किया जा सकता है।

अन्य तरीकों की तुलना में पीसीआर डायग्नोस्टिक्स के लाभ

पीसीआर तकनीक मिली विस्तृत आवेदनआधुनिक चिकित्सा में कई निर्विवाद लाभों के कारण। आइए उनके बारे में अधिक विस्तार से बात करते हैं।

रोगज़नक़ की उपस्थिति का सीधे पता लगाने की क्षमता

कई पारंपरिक निदान के तरीकेमार्करों के निर्धारण पर आधारित हैं - प्रोटीन जो रोगज़नक़ के अपशिष्ट उत्पाद हैं। ऐसा नैदानिक ​​​​सिद्धांत केवल पैथोलॉजी की अप्रत्यक्ष पुष्टि प्रदान कर सकता है। पीसीआर विधि प्रदान करती है प्रत्यक्ष परिभाषाप्रेरक एजेंट, क्योंकि यह रोगजनक जीवों के डीएनए के विशिष्ट वर्गों की पहचान करता है।

उच्च विशिष्टता

पीसीआर तकनीक इस तथ्य के कारण अत्यधिक विशिष्ट है कि यह डीएनए अंशों का पता लगाने की अनुमति देती है जो केवल एक विशेष संक्रामक एजेंट के लिए विशेषता हैं। प्रतिरक्षाविज्ञानी विधियों का उपयोग करते समय, एक गलत परिणाम प्राप्त करने की संभावना होती है (निदान में त्रुटियां क्रॉस-रिएक्टिंग एंटीजन से जुड़ी होती हैं)। पीसीआर के लिए, यहां त्रुटियों को बाहर रखा गया है, क्योंकि इस मामले में विशिष्टता प्राइमरों के न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम द्वारा निर्धारित की जाती है।

उच्च संवेदनशील

इस पद्धति के माध्यम से, एकल रोगजनकों का भी निर्धारण किया जाता है। मानव शरीर में संक्रामक एजेंटों का पता लगाया जाता है, तब भी जब अन्य नैदानिक ​​​​विधियाँ स्थिति को स्पष्ट नहीं करती हैं (हम विभिन्न प्रतिरक्षाविज्ञानी सूक्ष्म और बैक्टीरियोलॉजिकल अनुसंधान विधियों के बारे में बात कर रहे हैं)।

हम तुलना के लिए डेटा प्रस्तुत करते हैं। माइक्रोस्कोपिक और इम्यूनोलॉजिकल तरीकों की संवेदनशीलता 103-105 कोशिकाएं हैं, और पीसीआर की संवेदनशीलता प्रति नमूना 10-100 कोशिकाएं हैं।

विधि की सार्वभौमिकता

पीसीआर तकनीक रोगजनक जीवों के डीएनए के अध्ययन पर आधारित है। अध्ययन के दौरान, आरएनए या डीएनए के टुकड़े निर्धारित किए जाते हैं जो विशिष्ट संक्रामक एजेंटों के लिए विशिष्ट होते हैं। चूँकि सभी न्यूक्लिक अम्लों में एक समान होता है रासायनिक संरचना, पर प्रयोगशाला विश्लेषणएकीकृत तरीकों को लागू किया जा सकता है। इसका मतलब है कि एक नमूने का अध्ययन एक साथ कई रोगजनकों की पहचान करना संभव बनाता है।

तेज़ परिणाम

यह तकनीकरोगजनकों के संवर्धन की आवश्यकता नहीं होती है, जिसमें काफी समय लगता है। सामग्री को संसाधित करने और प्रतिक्रिया उत्पादों की पहचान करने के लिए एक एकीकृत तकनीक के उपयोग के साथ-साथ एक स्वचालित प्रवर्धन प्रक्रिया के लिए धन्यवाद, पूरी शोध प्रक्रिया में केवल कुछ घंटे लगते हैं।

गुप्त संक्रमणों का पता लगाने की क्षमता

पीसीआर तकनीक प्रीक्लिनिकल डायग्नोस्टिक्स (लक्षणों की शुरुआत से पहले रोगजनकों का पता लगाना) और पूर्वव्यापी निदान (रोगजनकों का पता लगाने के बाद) को प्रभावी ढंग से करना संभव बनाती है। पिछली बीमारी) तो, प्रीक्लिनिकल डायग्नोसिस है बहुत महत्वऊष्मायन अवधि में रोगी की जांच करते समय संभावित रोग- पहले लक्षणों की शुरुआत से पहले कथित संक्रमण के बाद।

पीसीआर के महत्वपूर्ण लाभों में से एक विश्लेषण के लिए जैविक अवशेषों या अभिलेखीय सामग्रियों का उपयोग करने की संभावना है। इससे पितृत्व और पहचान की पहचान करना संभव हो जाता है।

आज तक, पीसीआर डायग्नोस्टिक विधियों का विकास जारी है। विश्लेषण तकनीक में ही सुधार किया जा रहा है, साथ ही साथ नया पीसीआर के प्रकार. पर मेडिकल अभ्यास करनाइस प्रतिक्रिया के लिए नवीन परीक्षण प्रणाली शुरू की जा रही है। इस को धन्यवाद त्वरित विकासविज्ञान, प्रक्रिया की लागत घट रही है, और अब पीसीआर परीक्षारोगियों की कई श्रेणियों पर लागू किया जा सकता है।

यह निदान पद्धति आरएनए या डीएनए के किसी दिए गए खंड के कई दोहरीकरण पर आधारित है। यह प्रक्रिया विशेष एंजाइमों का उपयोग करके प्रयोगशाला में की जाती है। नतीजतन, दृश्य परीक्षा के लिए आवश्यकतानुसार डीएनए (आरएनए) के कई खंड बनते हैं। प्रक्रिया के दौरान, केवल निर्दिष्ट शर्तों के अनुरूप क्षेत्र की नकल की जाती है (यदि यह अध्ययन किए गए नमूने में मौजूद है)।

रोगजनकों के डीएनए या आरएनए की उपस्थिति के लिए जांच की जाने वाली जैविक सामग्री को एक एम्पलीफायर में रखा जाता है। (विशिष्ट स्थिति के आधार पर, जननांगों से निकलने वाले रक्त, मूत्र, लार को विश्लेषण के लिए लिया जाता है)। फिर नमूनों में विशेष एंजाइम जोड़े जाते हैं। वे आरएनए या डीएनए से बंधते हैं रोगजनक रोगाणु, और कॉपी संश्लेषण शुरू होता है। नकल एक बहु-चरणीय प्रक्रिया है जो एक श्रृंखला प्रतिक्रिया की तरह आगे बढ़ती है। नतीजतन, सैकड़ों या हजारों प्रतियां दिखाई दे सकती हैं।

निदान के अगले चरण में, परिणामों का विश्लेषण किया जाता है और संक्रामक एजेंटों के डेटाबेस के साथ तुलना की जाती है।

पीसीआर तकनीक न केवल प्रकार का निर्धारण करना संभव बनाती है रोगजनक जीव, लेकिन हमें मानव शरीर में संक्रामक एजेंटों की संख्या के बारे में निष्कर्ष निकालने की भी अनुमति देता है।
आज, ऐसी तकनीकों का उपयोग खुलता है व्यापक अवसरम्यूटेशन के अध्ययन में, डीएनए वर्गों के विभाजन। आधुनिक चिकित्सा में, पितृत्व को निर्धारित करने, नए जीन की पहचान करने और बहुत कुछ करने के लिए इस पद्धति का उपयोग किया जाने लगा।

इसकी बहुमुखी प्रतिभा के कारण, पीसीआर पद्धति ने मूत्रविज्ञान, स्त्री रोग, पल्मोनोलॉजी, ऑन्कोलॉजी, हेमटोलॉजी, फीथिसियोलॉजी, संक्रामक रोग अभ्यास और चिकित्सा के अन्य क्षेत्रों में व्यापक आवेदन पाया है।

पीसीआर विश्लेषण के लिए सामग्री

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स के लिए, मानव शरीर से लिए गए विभिन्न जैविक मीडिया और तरल पदार्थों का उपयोग किया जाता है: थूक, बलगम, लार, मूत्र, रक्त, उपकला कोशिकाओं का स्क्रैपिंग, अपरा ऊतक, फुफ्फुस द्रव, एमनियोटिक द्रव, प्रोस्टेट रस, आदि।

एसटीडी (एसटीआई) का निदान करते समय, पुरुष और महिला जननांग अंगों से निर्वहन का विश्लेषण किया जाता है। ऐसा करने के लिए, मूत्रमार्ग या गर्भाशय ग्रीवा से एक धब्बा या स्क्रैपिंग करें। मूत्र का उपयोग अनुसंधान के लिए भी किया जाता है।

संक्रमण (दाद, मोनोन्यूक्लिओसिस, सीएमवीआई, टोक्सोप्लाज्मोसिस, एचआईवी, हेपेटाइटिस बी और सी) का पता लगाने के लिए, विश्लेषण के लिए रक्त लिया जाता है। संदिग्ध चोट के मामले में तंत्रिका प्रणालीएक बाड़ बनाओ मस्तिष्कमेरु द्रव.

फुफ्फुसीय अध्ययन के लिए, फुफ्फुस द्रव और थूक का उपयोग किया जाता है।

पहचान करने के लिए अंतर्गर्भाशयी संक्रमणअपरा ऊतकों और एमनियोटिक द्रव का विश्लेषण किया जाता है।

एसटीआई और अन्य संक्रमणों के लिए पीसीआर

पीसीआर विश्लेषण से किन संक्रमणों का पता लगाया जा सकता है

एचआईवी संक्रमण (मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस एचआईवी -1 का पता लगाया जा सकता है)।

वायरल हेपेटाइटिस ए, बी, सी, जी (आरएनए-एचएवी, डीएनए-एचबीवी, आरएनए-एचसीवी, आरएनए-एचजीवी)।

एसटीआई (यौन संचारित संक्रमण) - यूरियाप्लाज्मोसिस, गार्डनरेलोसिस, क्लैमाइडिया, मायकोप्लास्मोसिस, ट्राइकोमोनिएसिस।

संक्रामक मोनोन्यूक्लिओसिस (एपस्टीन-बार वायरस का डीएनए - ईबीवी)।

साइटोमेगालोवायरस संक्रमण (डीएनए-सीएमवी)।

हरपीज संक्रमण (डीएनए वायरस) हर्पीज सिंप्लेक्सएचएसवी प्रकार 1 और 2)।

तपेदिक (माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस)।

ऑन्कोजेनिक वायरस - पैपिलोमावायरस संक्रमण (मानव पेपिलोमावायरस (इसकी ऑन्कोजेनिक प्रजाति 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58 और 59 सहित)।

बोरेलियोसिस, टिक-जनित एन्सेफलाइटिस।

लिस्टरियोसिस।

कैंडिडिआसिस (जीनस कैंडिडा का कवक)।

हेलिकोबैक्टर पाइलोरी संक्रमण
और दूसरे।

पीसीआर विश्लेषण की तैयारी और प्रस्तुत करना

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स के लिए सामग्री जमा करने वाले मरीजों को एक त्वरित और सटीक परिणाम प्राप्त होने की उम्मीद है। ऐसा करने में, किसी को ध्यान में रखना चाहिए महत्वपूर्ण बिंदु- निदान की विश्वसनीयता न केवल विशेषज्ञों की व्यावसायिकता और चिकित्सा प्रयोगशाला की क्षमताओं पर निर्भर करती है। अध्ययन को सूचनात्मक बनाने के लिए, रोगी को स्वयं प्रयास करना चाहिए। इसलिए, डॉक्टर की सभी सिफारिशों का सख्ती से पालन करना और सामग्री के संग्रह की तैयारी के नियमों का सावधानीपूर्वक पालन करना आवश्यक है। जैविक नमूनों को दूषित होने से बचाना बहुत जरूरी है, अन्यथा परीक्षा के परिणाम विकृत हो जाएंगे।

पीसीआर विश्लेषण की तैयारी

प्रक्रिया की तैयारी विशेष कठिनाइयों से जुड़ी नहीं है। बस कुछ नियम याद रखें:

पीसीआर विश्लेषण के लिए रक्त खाली पेट लिया जाता है। रक्त आमतौर पर सुबह एक नस से एक विशेष कंटेनर में एक बाँझ सुई के साथ लिया जाता है।

सामग्री के नमूने के एक दिन पहले, एसटीआई के लिए पीसीआर स्मीयर लेते समय यौन संयम दिखाया गया है।

पीसीआर के लिए मूत्र विश्लेषण के लिए, पहला भाग लिया जाता है, कंटेनर बाँझ होना चाहिए।

पुरुषों और महिलाओं में पीसीआर विश्लेषण कैसे करें

पीसीआर विश्लेषण पुरुषों और महिलाओं से लिया जाता है टीकाकरण कक्ष, यह शिरा से रक्त है, लार, ग्रसनी से स्वाब, टॉन्सिल, नासोफरीनक्स से स्वाब आदि। संग्रह विधि अलग नहीं है।

एसटीआई के लिए पीसीआर को सौंप दिया जाता है प्रसवपूर्व क्लिनिकपर स्त्री रोग परीक्षामहिलाओं में, ये योनि, गर्भाशय ग्रीवा, मूत्रमार्ग से स्मीयर होते हैं। पुरुषों में, एक एंड्रोलॉजिस्ट या वेनेरोलॉजिस्ट की यात्रा के दौरान, यह मूत्रमार्ग से एक धब्बा होता है।

पीसीआर के लिए नमूना सामग्री की योजना

पीसीआर को कितना समय लगता है

पीसीआर जांच के नतीजों के लिए मरीजों को लंबा इंतजार नहीं करना पड़ेगा। पूरी विश्लेषण प्रक्रिया में आमतौर पर कई घंटे (रीयल-टाइम पीसीआर) से लेकर 2-10 दिनों तक का समय लगता है। एक नियम के रूप में, रोगी को विश्लेषण के परिणाम 2-5 दिनों में प्राप्त होते हैं, अधिकतम 10 दिनों तक, यह विश्लेषण के प्रकार पर निर्भर करता है। एचआईवी और हेपेटाइटिस के लिए पीसीआर रक्त निदान सबसे लंबा समय है, और सबसे छोटा स्मीयर और स्क्रैपिंग है - 2-3 दिन।

एक नकारात्मक परिणाम इंगित करता है कि इस पलजैविक सामग्री में संक्रामक एजेंटों के निशान नहीं पाए जाते हैं। यानी जिस संक्रमण की जांच की गई वह नदारद है।

एक सकारात्मक परिणाम जैविक नमूनों में रोगज़नक़ के निशान का पता लगाने का संकेत देता है। इसका मतलब है कि में समय दिया गयामानव शरीर में संक्रमण है।
ऐसे मामले हैं जब पीसीआर सकारात्मक परिणाम देता है, लेकिन सक्रिय संक्रामक प्रक्रियाअदृश्य। इसके बारे मेंउस घटना के बारे में जिसे "स्वस्थ गाड़ी" कहा जाता है। ऐसे रोगी के उपचार की आवश्यकता नहीं होती है, लेकिन उन्हें निरंतर गतिशील पर्यवेक्षण में होना चाहिए। ऐसी स्थितियां विशिष्ट हैं विषाणु संक्रमण: एपस्टीन बार वायरस(ईबीवी), जननांग दाद, साइटोमेगालोवायरस संक्रमण (सीएमवीआई), मानव पेपिलोमावायरस (एचपीवी), जिसमें स्थानीय फॉसी (मूत्रमार्ग, ग्रीवा नहर, लार के स्क्रैपिंग) से अनुसंधान के लिए नमूने लिए जाते हैं। साथ ही, हमें यह नहीं भूलना चाहिए कि एक स्वस्थ वाहक संक्रमण को अन्य लोगों तक पहुंचा सकता है। इसके अलावा, संक्रामक प्रक्रिया की सक्रियता को बाहर नहीं किया जाता है। ऐसे मामलों में जहां पीसीआर रक्त परीक्षण में सकारात्मक परिणाम देता है, इसे अब वाहक नहीं माना जा सकता है। ऐसे मरीजों को चाहिए विशिष्ट उपचाररोग का पता चला रोगज़नक़ के कारण होता है।

मात्रात्मक संकेतकों में सामान्य उन्नयन नहीं होता है। प्रत्येक विशिष्ट संक्रमण के लिए डॉक्टर द्वारा व्यक्तिगत रूप से उनका मूल्यांकन किया जाता है। एक मात्रात्मक परिणाम यह निर्धारित करना संभव बनाता है कि संक्रमण कितना सक्रिय है और प्रक्रिया के चरण की पहचान करना है।

पीसीआर विधि की विश्वसनीयता

कार्यप्रणाली की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए, तीन मानदंड हैं:

- शुद्धता- उच्च स्तर की संभावना के साथ संक्रमण (या इसकी अनुपस्थिति) का पता लगाना।

- विशिष्टता- एक विशिष्ट रोगज़नक़ का निर्धारण करने की सटीकता।

- संवेदनशीलता- जैविक नमूनों में थोड़ी मात्रा में आनुवंशिक सामग्री के साथ भी रोगज़नक़ की पहचान करने की संभावना।

पीसीआर पद्धति का उपयोग करते समय, झूठे सकारात्मक परिणाम प्राप्त करना लगभग असंभव है (अर्थात, यदि रोगज़नक़ अनुपस्थित है, तो सकारात्मक परीक्षणनहीं होगा)।

एक गलत नकारात्मक परिणाम संभव है, लेकिन ऐसा बहुत कम ही होता है। इसी तरह की स्थितियांयदि अध्ययन के समय संक्रमण निष्क्रिय है तो हो सकता है। उदाहरण के लिए, जीर्ण संक्रमणनिष्क्रिय या गुप्त संक्रमण।

पीसीआर विश्लेषण: वीडियो

1983 में पहली बार पीसीआर विश्लेषण पर चर्चा हुई। इस तकनीक को कैरी मुलिस और उनके प्रयोगशाला कर्मचारियों द्वारा विकसित किया गया था। तब से, अध्ययन की लोकप्रियता में लगातार वृद्धि हुई है, क्योंकि। अन्य तरीकों की तुलना में इसके कई फायदे हैं।

आज तक, पीसीआर डायग्नोस्टिक्स संक्रमण और रोगजनकों का पता लगाने में बेंचमार्क या मानक है, विशेष रूप से वे जो स्पर्शोन्मुख हैं। सबसे पहले, यह प्रीक्लिनिकल डायग्नोस्टिक्स है।

पीसीआर मशीन में विश्लेषण करना

पीसीआर विश्लेषण का सार इस तथ्य में निहित है कि एक टेस्ट ट्यूब में न्यूक्लिक एसिड (डीएनए या आरएनए) के क्लोन (गुणा में वृद्धि) अनुक्रम की विशेषता है एक निश्चित प्रकाररोगजनक।

संक्षिप्त नाम पीसीआर पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन के लिए है।

घर विशिष्ठ विशेषताइस विधि का प्रवर्धन है, अर्थात। वांछित जीन या टुकड़े की बड़ी संख्या में प्रतियां बनाना। यह सब शरीर के बाहर उत्पन्न होता है, अर्थात्। कृत्रिम परिवेशीय।

इसलिए, यदि 20 पीसीआर चक्र किए जाते हैं, तो लगभग 1 मिलियन या अधिक प्रतियां प्राप्त होती हैं। यह स्रोत सामग्री में इसकी छोटी मात्रा के साथ भी संक्रमण का पता लगाना संभव बनाता है, जब विश्लेषण के अन्य तरीके शक्तिहीन होते हैं। यह इस पद्धति की उच्च संवेदनशीलता को निर्धारित करता है।

सरल शब्दों में, आप इस तरह की एक सादृश्य बना सकते हैं - आपको फर्श पर रेत का एक छोटा सा दाना नहीं दिखाई देगा, लेकिन रेत के दानों की संख्या एक लाख गुना (पीसीआर) बढ़ाने के बाद, रेत का ढेर पहले से ही स्पष्ट रूप से दिखाई देगा। .

पीसीआर विधि द्वारा संक्रमण के विश्लेषण के मुख्य लाभ हैं:

• उच्चतम संवेदनशीलताऔर संक्रामक एजेंटों का पता लगाने के लिए उपयोग की जाने वाली अन्य विधियों की तुलना में विशिष्टता;
• विभिन्न प्रकार की जैविक सामग्री (रक्त, मूत्र, योनि स्राव, लार, आदि) में सूक्ष्मजीवों का पता लगाने की क्षमता;
• एक साथ कई प्रेरक सूक्ष्मजीवों की पहचान करने की क्षमता, यदि कोई हो। तुलना के लिए, बैक्टीरियोलॉजिकल विधियों का उपयोग ऐसा अवसर प्रदान नहीं करता है, क्योंकि। विभिन्न रोगजनक रोगाणुओं की खेती के लिए विभिन्न माध्यमों का उपयोग करना आवश्यक है;
• जैविक सामग्री के परिवहन की संभावना, क्योंकि रोगज़नक़ की पहचान करने के लिए, उसे जीवित रखना आवश्यक नहीं है;
• विश्लेषण की गति;
• एटियलॉजिकल निदान की सटीकता;
• रोगजनकों के मात्रात्मक निर्धारण की संभावना - विशेष रूप से प्रासंगिक सशर्त रूप से रोगजनक रोगाणुओं, जो एक निश्चित एकाग्रता तक पहुंचने के बाद ही बीमारी का कारण बन सकता है;
• उपचार के दौरान संक्रामक प्रक्रिया के पाठ्यक्रम को नियंत्रित करने की क्षमता।

संक्रमण के लिए पीसीआर विश्लेषण

वर्तमान में, पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन विधि अधिकांश यौन (और अन्य) संक्रामक रोगों को निर्धारित करती है। इसके कारण निदान व्यापक हो गया है उच्च संवेदनशीलऔर विशिष्टता।

क्लैमाइडिया के लिए पीसीआर विश्लेषण विशेष रूप से लोकप्रिय है।

यह इस तथ्य के कारण है कि ये सूक्ष्मजीव इंट्रासेल्युलर रूप से रहते हैं, जो उनके पता लगाने में कुछ कठिनाइयां पैदा करता है।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स क्लैमाइडिया की न्यूनतम मात्रा का भी पता लगाना संभव बनाता है, जो एक नियम के रूप में, अभी तक प्रकट नहीं होता है नैदानिक ​​लक्षण. यहां तक ​​कि परीक्षण सामग्री में केवल 2 न्यूक्लिक एसिड अणुओं की उपस्थिति से संक्रमण के कारक की पहचान करना संभव हो जाता है।

और यह एक प्रतिज्ञा है सफल इलाज, जो प्रीक्लिनिकल स्टेज पर शुरू होता है।

संक्रमण की भी पहचान की जाती है:

• वायरल हेपेटाइटिस;
• तपेदिक;
• टिक - जनित इन्सेफेलाइटिस;
• विभिन्न यौन रोगआदि।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स कई अन्य महत्वपूर्ण कार्यों को हल करने की अनुमति देता है:

• चिकित्सा की निगरानी और इसकी प्रभावशीलता का मूल्यांकन;
• "वायरस के भार" का निर्धारण, जिसके आधार पर दवा की खुराक का एक व्यक्तिगत चयन किया जाता है;
• सूक्ष्मजीवों के उपभेदों की पहचान जो औषधीय रूप से प्रतिरोधी (दवाओं के प्रति असंवेदनशीलता) हैं।

विश्लेषण के वितरण की तैयारी

विश्लेषण के वितरण के लिए जानबूझकर तैयारी, जो पीसीआर द्वारा की जाएगी, की आवश्यकता नहीं है। हालांकि, यह बहुत महत्वपूर्ण है कि विशेषज्ञ सामग्री को सभी के अनुपालन में लें आवश्यक शर्तेंबाँझपन

इसलिए, उदाहरण के लिए, रक्त लेने के लिए विशेष वैक्यूम सिस्टम का उपयोग किया जाना चाहिए, जननांग अंगों के रहस्य को लेने के लिए विशेष टेस्ट ट्यूब का उपयोग किया जाना चाहिए, आदि।

कुछ मामलों में, सामग्री को प्रयोगशाला में ले जाया जाना चाहिए। इसे सही ढंग से करने के लिए, कंटेनर को भली भांति बंद करके बंद करना आवश्यक है जैविक सामग्री. यह बाहरी वातावरण में रहने वाले अन्य सूक्ष्मजीवों के प्रवेश को रोकेगा।

पीसीआर विश्लेषण के परिणाम दो विकल्पों के हो सकते हैं:

• सकारात्मक - रोगज़नक़ का पता चला;
• नकारात्मक - प्रेरक एजेंट का पता नहीं चला।

आपको पता होना चाहिए - अनुपस्थिति में भी नैदानिक ​​लक्षणसकारात्मक परिणाम प्राप्त हो सकता है।

इस मामले में, डेटा पर ध्यान देना आवश्यक है पोलीमरेज़ प्रतिक्रिया, इसलिये यह प्रीक्लिनिकल चरण में रोग की पहचान करने की अनुमति देता है।

कभी-कभी एक संदिग्ध उत्तर प्राप्त किया जा सकता है जब पहचानी गई प्रतियों की संख्या मानदंड की ऊपरी सीमा से मेल खाती है। रोग के कारण को स्पष्ट करने के लिए, आपको विश्लेषण दोहराते हुए देना चाहिए विशेष ध्यानजैविक सामग्री एकत्र करने की शर्तें।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स कितना सटीक है?

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स के मुख्य लाभ कई शोधों के रूप में तैयार किए जा सकते हैं:

• रोगजनक सूक्ष्मजीवों की बड़ी संख्या में प्रतियां प्राप्त करने की संभावना;
• बड़ी संख्या में प्रतियां सफल अनुक्रमण (पहचान) की कुंजी हैं।

यह इंट्रासेल्युलर रोगजनकों और धीमी गति से बढ़ने वाले सूक्ष्मजीवों का पता लगाने के लिए उच्च सटीकता पीसीआर विश्लेषण प्रदान करता है।

इसलिए, माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस और अन्य समान संक्रामक एजेंटों का पता लगाने के लिए विधि विशेष रूप से जानकारीपूर्ण है। इसमें उच्चतम सटीकता है और प्राप्त परिणामों (कैसुस्टिक मामलों को छोड़कर) को फिर से जांचने की आवश्यकता नहीं है।

सबसे ज्यादा पाने के लिए विश्वसनीय परिणामदो मुख्य शर्तों को पूरा करना आवश्यक है जो बहिर्जात (बाहरी) संक्रमण को रोकते हैं:

• सही सामग्री का सेवन;
• सही परिवहन।

अति-सटीक आधुनिक में से एक चिकित्सा अनुसंधानरक्त प्लाज्मा में आणविक आनुवंशिक संबंधों के अध्ययन पर आधारित, पीसीआर (पीसीआर) - पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन का विश्लेषण है। पीसीआर विधि आपको संक्रमण और वायरस के कारण या इससे संबंधित रोगी के शरीर में कुछ बीमारियों का पता लगाने की अनुमति देती है आनुवंशिक रोगविरासत में मिला। पीसीआर विश्लेषण उन बीमारियों की पहचान करने में मदद करता है जो तीव्र और पुरानी, ​​स्पर्शोन्मुख अवस्था दोनों में होती हैं। रोगों के विकास को रोकने के लिए इस तरह का अध्ययन बहुत महत्वपूर्ण है: इसके विकास की शुरुआत में ही बीमारी का पता लगाकर, रोगी के शरीर को नष्ट करने या इसके परिणामों को कम करने तक बीमारी का इलाज संभव है।

आज, अधिकांश संक्रामक रोगों का निर्धारण करने में पीसीआर निदान "स्वर्ण मानक" है। प्रत्येक क्लिनिक या प्रयोगशाला में, इस तरह का एक अध्ययन हर दिन किया जाता है, इसके परिणाम कई निदानों का आधार बनते हैं, और कुछ मामलों में यह पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन डेटा का डिकोडिंग है जो एक विशेष बीमारी का निर्धारण करने का आधार है।

पीसीआर पद्धति अक्सर उन मामलों में डॉक्टरों की मदद करती है जहां अन्य अध्ययन और निदान शक्तिहीन होते हैं, या इसके कारण प्राथमिक अवस्थारोग का विकास रोगी के शरीर में रोगजनक माइक्रोफ्लोरा की उपस्थिति को निर्धारित नहीं कर सकता है। पीसीआर विधि द्वारा निदान अधिक है सटीक विश्लेषणमानव शरीर में बैक्टीरिया, वायरस और प्रतिरक्षा असामान्यताओं की उपस्थिति के अध्ययन से संबंधित किसी भी अन्य तरीके की तुलना में।

पीसीआर पद्धति के लाभों में उच्च सटीकता शामिल है - डीएनए या आरएनए के एक खंड का अध्ययन करने के दौरान, यह 100% का पता लगाता है या रोगजनक माइक्रोफ्लोरा का पता नहीं लगाता है जो इसका कारण बन सकता है गंभीर रोग. इस पद्धति के झूठे सकारात्मक परिणाम नहीं हैं - इसकी एक उच्च विशिष्टता है, जो डीएनए और आरएनए की संरचना में श्रृंखला के एक विशिष्ट खंड की पहचान करना संभव बनाती है जिसमें रोग का एक विशिष्ट प्रेरक एजेंट होता है। इसके अलावा, पीसीआर परीक्षण इतना संवेदनशील है कि यह अरबों कोशिकाओं में से एक वायरस से संक्रमित व्यक्ति की पहचान कर सकता है और वायरस और उसके रोगज़नक़ दोनों की सटीक पहचान कर सकता है। अन्य प्रसिद्ध अध्ययनों की तुलना में, जिनमें परीक्षा के दौरान लिए गए नमूने में 100-105 से अधिक कोशिकाओं की संवेदनशीलता नहीं है, पीसीआर डायग्नोस्टिक्स आपको 10 से 1000 कोशिकाओं की जांच करने की अनुमति देता है।

यह स्वयं सीरम या प्लाज्मा नहीं है जो अध्ययन के अधीन है, बल्कि डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक या राइबोन्यूक्लिक एसिड (डीएनए और आरएनए), यानी उन बैक्टीरिया और वायरस की आनुवंशिक सामग्री जो रोगी के शरीर में मौजूद हैं और बीमारियों के विकास को भड़का सकते हैं। प्रत्येक वायरस का अपना होता है अनूठी विधिइसका पता लगाना, यही कारण है कि अध्ययन के परिणाम हमेशा सटीक होते हैं।

एक अध्ययन में, एक से कई हानिकारक सूक्ष्मजीवों का पता लगाया जा सकता है।

पीसीआर का निदान, अन्य बैक्टीरियोलॉजिकल और इम्यूनोलॉजिकल अध्ययनों के विपरीत, बहुत जल्दी किया जाता है। यदि टी से कम का संचालन करने में एक से दस दिन लगते हैं, तो पीसीआर अध्ययन 5-7 घंटों के भीतर किया जाता है।

अक्सर, एक पीसीआर स्मीयर प्रीक्लिनिकल या पूर्वव्यापी अध्ययन के रूप में किया जाता है। पहली विधि संभावित खतरनाक रोगजनक सूक्ष्मजीवों की पहचान है जो पहले ही शरीर में अपनी विनाशकारी गतिविधि शुरू कर चुके हैं, लेकिन रोग अभी भी प्रकट नहीं होते हैं। दूसरा अध्ययन उपचार के बाद वायरस और संक्रमण का पता लगाना है, जब आंकड़ों के अनुसार मानक विश्लेषण, रोगी को स्वस्थ माना जाता है, रोग के कोई लक्षण नहीं होते हैं, लेकिन कुछ कोशिकाओं में अभी भी खतरनाक रोगजनक हो सकते हैं। ये अद्वितीय नैदानिक ​​क्षमताएं निर्धारित करना संभव बनाती हैं संक्रामक रोगऊष्मायन की अवधि के दौरान, जब वह अभी-अभी मानव शरीर में आया था, लेकिन भलाई में कोई गिरावट नहीं थी, साथ ही साथ अदेखाबीमारी, अगर रोगी स्वस्थ महसूस करता है, लेकिन शरीर में वायरस मौजूद है, हालांकि यह खुद को महसूस नहीं करता है।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स का उपयोग न केवल वायरस और बैक्टीरिया की पहचान करने के लिए किया जाता है, बल्कि किसी व्यक्ति को उसके डीएनए के टुकड़ों से पहचानने के लिए भी किया जाता है, साथ ही साथ सहमति (पितृत्व, मातृत्व, आदि) का निर्धारण करने के लिए भी किया जाता है।

पिछले दशकों में, पीसीआर डायग्नोस्टिक्स, चिकित्सा और विज्ञान की अन्य शाखाओं की तरह, बहुत आगे बढ़ गए हैं। आज, बायोमेट्रिक अनुसंधान की प्रक्रिया में उपयोग किए जाने वाले उपकरणों में सुधार किया गया है, नए प्रकार के पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन सामने आए हैं, नई परीक्षण प्रणालियाँ हैं जो विश्लेषण की लागत को कम करती हैं और इसकी सटीकता को बढ़ाती हैं। इसके लिए धन्यवाद, पीसीआर विश्लेषण सामान्य आबादी के लिए अधिक सुलभ हो गया है, और पीसीआर पद्धति द्वारा रोगों के शीघ्र निदान द्वारा जिन लोगों की जान बचाई गई है, उनकी संख्या हजारों गुना बढ़ गई है।

इस अध्ययन का आधार क्या है

क्या अनुमति देता है ये पढाईइतना सटीक हो? यह प्रवर्धन है, अर्थात, डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक या राइबोन्यूक्लिक एसिड की श्रृंखला के एक हिस्से का बार-बार दोहरीकरण, जिसके लिए विशेष एंजाइम और उपकरण का उपयोग किया जाता है। डीएनए या आरएनए के एक हिस्से को कई सौ गुना बढ़ाने से उनका नेत्रहीन अध्ययन करना संभव हो जाता है।

लेकिन श्रृंखला के एक या दूसरे खंड को बढ़ाने और अध्ययन करने से पहले, संरचना संभावित रूप से वायरस प्रभावित क्षेत्रों की उपस्थिति के लिए प्रारंभिक अध्ययन से गुजरती है। जब ऐसे क्षेत्र पाए जाते हैं, तो वे प्रवर्धन के अधीन होते हैं।

निदान निम्नानुसार किया जाता है। सबसे पहले, शरीर में मौजूद एक जैविक द्रव को विश्लेषण के लिए रोगी से लिया जाता है। यह रक्त, मूत्र, लार, आंसू या जननांग बलगम हो सकता है। एकत्रित बायोमटेरियल को सीधे एम्पलीफायर में रखा जाता है, जहां एंजाइमेटिक अभिकर्मकों को पेश किया जाता है, जिसे डीएनए और आरएनए वर्गों के वायरस और संक्रमण के साथ सीधे संयोजन के लिए डिज़ाइन किया गया है। जैसे ही रिएजेंट और वायरस बंधते हैं, डिवाइस इस क्षेत्र को ठीक कर देता है और इस क्षेत्र की प्रतियां बनाना शुरू कर देता है, इसे कई गुना बढ़ा देता है। इस तरह की नकल "श्रृंखला के साथ" लगातार होती है, जिससे शोध के लिए कई सौ और कभी-कभी हजारों नमूने प्राप्त करना संभव हो जाता है।

अगला कदम डेटाबेस में उपलब्ध वायरस और संक्रमण के डेटा के साथ परिणामी प्लॉट की तुलना करना है। तो वे सीधे मिल जाते हैं रोगजनक सूक्ष्मजीव, उनकी संख्या और शरीर में उपस्थिति का समय (कितने समय पहले उन्होंने शरीर में प्रवेश किया) स्थापित किया जाता है।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स आज न केवल पहले से ज्ञात लोगों के साथ पहचाने गए वायरस की तुलना करने की अनुमति देता है, बल्कि म्यूटेशन की पहचान करने के लिए, और यह भी सुझाव देता है कि ये म्यूटेशन क्या हो सकते हैं।

वैज्ञानिक - आनुवंशिकीविद् डीएनए के अलग-अलग वर्गों को पार करने और नए प्रकार के जीन और उत्परिवर्तन का अध्ययन करने के लिए पीसीआर अनुसंधान की विधि का व्यापक रूप से उपयोग करते हैं।

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन द्वारा निर्धारित वायरस और संक्रमण

पीसीआर का संचालन करते समय, आप कई बैक्टीरिया और संक्रमण पा सकते हैं जो गंभीर होते हैं, और कभी-कभी भी असाध्य रोग. सबसे पहले, यह एक मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस है, और अव्यक्त या ऊष्मायन अवधि में, जब इसके परिणाम अभी तक प्रकट नहीं हुए हैं। यह उन मामलों में बहुत महत्वपूर्ण है जहां अन्य एचआईवी परीक्षणों ने अभी तक परिणाम नहीं दिया है: संभावित संक्रमण के बाद पहले छह महीनों में या एचआईवी पॉजिटिव मां से पैदा हुए नवजात बच्चों में।

इसके अलावा, पीसीआर शोध से सभी रूपों के हेपेटाइटिस का पता चलता है, मोनोन्यूक्लिओसिस संक्रामक प्रकृति, साइटोमेगालोवायरस संक्रमण, दाद, सभी यौन संचारित संक्रमण (यूरियाप्लाज्मा, क्लैमाइडिया, माइकोप्लाज्मा, ट्राइकोमोनास, गार्डनेरेला, आदि)।

तपेदिक के प्रेरक एजेंट भी निर्धारित किए जाते हैं, साथ ही साथ ऑन्कोजेनिक वर्ग से संबंधित संक्रमण, यानी वे जो बाद में विकास का कारण बन सकते हैं घातक ट्यूमर(ह्यूमन पैपिलोमा वायरस)। हल्का करने के लिए, लेकिन कम नहीं खतरनाक संक्रमणपीसीआर अध्ययनों द्वारा निर्धारित बोरेलियोसिस, टिक-जनित एन्सेफलाइटिस, फफूंद संक्रमण(कैंडिडा) और हेलिकोबैक्टर पाइलोरी।

रोगजनक माइक्रोफ्लोरा के ये सभी प्रतिनिधि पैदा कर सकते हैं खतरनाक बीमारियांमें विभिन्न भागरोगी का शरीर, और इसलिए लगभग सभी उद्योगों में पीसीआर तकनीक का उपयोग किया जाता है आधुनिक दवाई. इसकी मदद से स्त्री रोग और मूत्र संबंधी रोग, पीसीआर अध्ययन के लिए एक संक्रामक रोग विशेषज्ञ, पल्मोनोलॉजिस्ट और फ़ेथिसियाट्रिशियन से अपॉइंटमेंट प्राप्त किया जा सकता है। गैस्ट्रोएंटरोलॉजी, हेमेटोलॉजी, ऑन्कोलॉजी आदि के क्षेत्र में पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन का उपयोग करना असामान्य नहीं है।

निदान के लिए जैव सामग्री कैसे एकत्रित करें

निदान के लिए, रोगी को बायोमटेरियल प्रदान करने की आवश्यकता होगी, जिसमें शामिल हो सकते हैं रोगजनक प्रतिनिधिमाइक्रोफ्लोरा। शोध के लिए उपयुक्त सामग्री के रूप में किसी अंग विशेष में उपस्थित द्रवों को लिया जाता है।

तो, वायरस और संक्रमण, डीएनए और आरएनए, जो विश्लेषण से पता लगाया जा सकता है, रोगी के रक्त, उसके मूत्र और लार के साथ-साथ नाक, जननांगों के श्लेष्म स्राव में रहते हैं। अधिक में दुर्लभ मामलेजब अजन्मे बच्चे के गहन निदान की आवश्यकता होती है, तो विश्लेषण के लिए तरल लिया जाता है एमनियोटिक थैलीया अपरा ऊतक। वायरस का निदान करने के लिए तपेदिक का कारण बनता है, थूक की आवश्यकता होगी, और वायरस का पता लगाने के लिए जो पेपिलोमा (मौसा) का कारण बनता है, उपकला से स्क्रैपिंग करता है।

यदि विश्लेषण का उद्देश्य निदान करना है यौन संक्रमणयौन संपर्क के माध्यम से प्रेषित या घरेलू रास्ता, डॉक्टर एक स्वाब या स्क्रैपिंग लेता है योनि स्राव, स्लाइम आउट मूत्रमार्गपुरुषों में और महिलाओं में ग्रीवा नहर। इसके अलावा, कुछ मामलों में, न केवल जननांग अंगों के श्लेष्म स्राव, बल्कि रोगी के मूत्र की भी आवश्यकता हो सकती है।

दाद, संक्रामक मोनोन्यूक्लिओसिस, सभी प्रकार के हेपेटाइटिस और मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस का निदान करते समय, रक्त सीरम की आवश्यकता होगी, क्योंकि एक अतिरिक्त बायोमटेरियल हो सकता है: रोगी का मूत्र (के साथ) साइटोमेगालोवायरस संक्रमण), साथ ही एक गले की सूजन।

यदि पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन का कार्य केंद्रीय और परिधीय तंत्रिका तंत्र के काम को प्रभावित करने वाले संक्रमणों का निदान करना है, तो रीढ़ की हड्डी के तरल पदार्थ को अनुसंधान के लिए लिया जाता है।

पढ़ाई की तैयारी कैसे करें

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन के परिणाम यथासंभव सटीक होने के लिए, और निदान सही होने और रोग की तस्वीर को प्रतिबिंबित करने के लिए, विश्लेषण के लिए बायोमैटेरियल के वितरण के लिए सावधानीपूर्वक तैयारी करना आवश्यक है।

अधिक हद तक, परीक्षा के परिणाम प्रयोगशाला सहायक की व्यावसायिकता, उपकरण और प्राप्त आंकड़ों को समझने वाले डॉक्टर की योग्यता पर निर्भर करते हैं। लेकिन इस निदान के लिए नियुक्ति प्राप्त करने वाले रोगी पर बहुत कुछ निर्भर करता है।

पहला नियम जो सामग्री को सौंपते समय देखा जाना चाहिए वह परिणाम की पूर्ण बाँझपन और शुद्धता है जैविक द्रव. यदि रक्त, मस्तिष्कमेरु द्रव या एमनियोटिक द्रव एकत्र करते समय रोगी पर कुछ भी निर्भर नहीं करता है, तो मूत्र, थूक एकत्र करने और एक धब्बा लेने के लिए सावधानीपूर्वक तैयारी की जानी चाहिए। यदि विदेशी सूक्ष्मजीव परीक्षण सामग्री में प्रवेश करते हैं, तो वे विश्लेषण के अंतिम डेटा को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित करेंगे और चिकित्सा उपचार की गलत रणनीति का चुनाव करेंगे।

और यह न केवल अनावश्यक के स्वागत से भरा है दवाई, बल्कि शरीर के अन्य अंगों और प्रणालियों के काम का बिगड़ना भी।

ऐसे परिणामों से बचने के लिए, रोगी को कई प्रदर्शन करने चाहिए सरल नियमजो आपको सही तरीके से टेस्ट पास करने में मदद करेगा।

1. सभी आंतरिक तरल पदार्थों का नमूना खाली पेट सख्ती से लिया जाता है, इसे केवल स्वच्छ गैर-कार्बोनेटेड पानी पीने की अनुमति है;
2. जननांग अंगों से स्वैब लेते समय, जैव सामग्री लेने से 24 घंटे पहले किसी भी यौन संपर्क को प्रतिबंधित किया जाता है;
3. मूत्र और थूक को प्रयोगशाला में जारी किए गए विशेष बाँझ कंटेनरों को सौंप दिया जाता है या इस उद्देश्य के लिए किसी फार्मेसी में खरीदा जाता है। मूत्र एकत्र करने से पहले, बाहरी जननांग को अच्छी तरह से धोना चाहिए कपड़े धोने का साबुन, मूत्र के पहले भाग को निथार लें और बीच के भाग को एक पात्र में भर लें।

ऐसा सरल नियमप्रशिक्षण आपको सबसे सटीक शोध डेटा प्राप्त करने और तेजी से शुरू करने में मदद करेगा उचित उपचार. आमतौर पर, अध्ययन के परिणाम कुछ घंटों के भीतर तैयार हो जाते हैं, लेकिन अक्सर प्रयोगशालाओं में बायोमटेरियल के नमूने के अगले दिन परिणाम जारी किए जाते हैं। रोगी को अपने हाथों में एक प्रयोगशाला रूप प्राप्त होता है, जिसमें रोगी का व्यक्तिगत डेटा और उसके शरीर में पाए जाने वाले वायरस होते हैं।

प्राप्त परिणामों का एक पूरा प्रतिलेख उस डॉक्टर द्वारा किया जाता है जिसने अध्ययन के लिए रेफरल जारी किया, वह अंतिम निदान भी स्थापित करता है। कभी-कभी, निदान के परिणामों के आधार पर, इसका संचालन करने की सिफारिश की जा सकती है अतिरिक्त परीक्षणऔर संकीर्ण विशेषज्ञों की परीक्षा और परामर्श। लेकिन सबसे अधिक बार, पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन के परिणाम अंतिम निदान का आधार होते हैं।