Изкуствено осеменяване. Колко често се използва IVF?

Оплождането ин витро (от лат. extra - отвън, извън и лат. corpus - тяло, т.е. оплождане извън тялото, съкр. ЕКО) е асистирана репродуктивна технология, използвана при безплодие. Синоними: „оплождане ин витро“, „оплождане ин витро“, „ изкуствено осеменяване“, в английски езиксъкратено IVF (ин витро оплождане) Тази технология позволява на жените да станат майки в най-безнадеждните случаи. IVF се извършва във всички развити страни по света и всяка година се раждат няколко хиляди „бебета в епруветка“. За вярващите, сред които има и бездетни, съвсем основателно възниква въпросът: приемлив ли е този метод от гледна точка на Православната църква? Нека се опитаме да разберем как се случва IVF и до какви последствия води.

Малко история

По време на IVF яйцеклетката се изважда от тялото на жената и се опложда изкуствено в условия „ин витро“ („ин витро“), полученият ембрион се съхранява в инкубатор, където се развива 2-5 дни, след което ембрионът се пренесени в маточната кухина за по-нататъчно развитие.

За първи път успешно медицинска технологияе приложен в Обединеното кралство през 1977 г., което води до раждането на Луиз Браун през 1978 г., първият човек, „заченат в епруветка“. Първото дете (момиче), заченато чрез IVF в Съветския съюз, е родено през февруари 1986 г. Процедурата е извършена в Москва, в Центъра за майчино и детско здраве, сега т.нар Научен центъракушерство, гинекология и перинатология (СК АГиП). Малко по-късно, в Ленинград, през същата 1986 г., се ражда момчето Кирил. Тези събития бяха предшествани от сериозни изследвания, които започнаха целенасочено да се провеждат в Съветския съюз от 1965 г. По това време е създадена група по ранна ембриогенеза, която през 1973 г. прераства в лаборатория по експериментална ембриология (ръководител на проф. Б. Леонов). По данни от 1994 г. в тази лаборатория са родени повече от 1,5 хиляди деца. През 1990 г. на нашата планета е имало над 20 000 бебета от епруветка. През 2010 г. - около 4 млн. Най-висок интензитет IVF процедурата достига в Израел, където има 3400 IVF процедури на 1 милион жители годишно.

Показания:
Показания за процедурата IVF са различни формимъжко и женско безплодие. Съгласно заповед N67 на Министерството на здравеопазването на Руската федерация, индикация за IVF е „безплодие, което не се поддава на терапия, или вероятността за преодоляването му с IVF е по-висока, отколкото при други методи. При липса на противопоказания IVF може да се извърши по искане на семейна двойка (жена, която не е омъжена) с каквато и да е форма на безплодие.

Противопоказания:Противопоказания за IVF са състоянията на жената, при които бременността и раждането застрашават здравето на майката или детето, а именно:

соматични и психично заболяване, които са противопоказания за носене на бременност и раждане;
вродени малформации или придобити деформации на маточната кухина, при които е невъзможно да се имплантират ембриони или да се забременее;
тумори на яйчниците;
доброкачествени тумори на матката, изискващи хирургично лечение;
остър възпалителни заболяваниявсяка локализация;
злокачествени неоплазми от всякаква локализация, включително история.

Няма противопоказания за IVF от мъж.

технология

IVF технологията се извършва в специализирани лечебни заведенияв условия извънболнично лечение. За извършване на процедурата по ин витро оплождане е необходимо получаване на яйцеклетки, получаване на сперматозоиди, извършване на ин витро оплождане, отглеждане на ембрион и поставяне на ембриона в маточната кухина на жената.

Като правило, за ин витро оплождане, те се опитват да получат няколко яйца, тъй като това повишава ефективността на лечението на безплодие по този метод. Тъй като е нормално за една жена менструален цикълАко една яйцеклетка узрее, тогава, за да се получат няколко яйцеклетки, се извършва така наречената процедура за „стимулиране на суперовулация“. За това на пациента се предписват инжекции с хормонални лекарства.

Узряването на ооцитите не може да се определи директно чрез неинвазивни методи. Следователно за узряването на яйцеклетките се съди косвено по растежа на яйчниковите фоликули. Растежът на фоликулите се наблюдава с помощта на ултразвукови апарати. При достигане доминантен фоликулс определен размер (16-20 mm), се предписва процедура за извличане на яйцеклетки - пункция на яйчниковите фоликули. Пункцията на фоликулите се извършва под обща (по-често) или локална (по-рядко) анестезия, иглата се извършва трансвагинално, ходът на иглата се контролира от ултразвуков апарат. Целта на пункцията е да се аспирира (изсмуче) съдържанието на фоликула (фоликуларната течност). Получената течност се изследва с помощта на микроскоп за откриване на яйца.

Откритите яйца се измиват от фоликулната течност и се прехвърлят в лабораторна чиния с хранителна среда. Петриевите панички или културните плочи се използват като лабораторни стъклени съдове. Съдовете с яйца се поставят в инкубатори, където се съхраняват до оплождането.

Обикновено употребата на хормонални лекарства и пункцията на фоликула не причинява негативни реакциипри пациента, но понякога могат да възникнат усложнения. Усложнение на стимулацията на суперовулацията е синдромът на овариална хиперстимулация (OHSS), който може да се развие няколко дни след края на стимулацията. OHSS възниква, когато голям брой фоликули узреят, които, трансформирайки се в жълто тяло, отделят голям бройестроген. При тежко протичане OHSS може да изисква хоспитализация на пациента. Усложнение на пункцията на фоликула може да бъде хематом на яйчника.

Ако е невъзможно да се получат яйцеклетки от пациента (липса на яйчници, менопауза и т.н.), е възможно да се използват донорски яйцеклетки (т.е. яйцеклетки на друга жена). Като донор на яйцеклетки може да действа безкористен донор (роднина, приятел) или платен донор. Условията за работа с донор на яйцеклетки са регламентирани със заповед N67 на Министерството на здравеопазването на Руската федерация

Ако е невъзможно да се използва спермата на съпруга (според медицински показания) или ако пациентът няма сексуален партньор, е възможно да се използва донорска сперма. Използването на донорска сперма е предмет на задължително писмено съгласие на съпруга и се регулира от Заповед N67 на Министерството на здравеопазването на Руската федерация. Съгласно този ред спермата на донора се използва не по-рано от 6 месеца съхранение в замразено състояние, за да се получат данни за липсата през този период инфекциозни заболяванияот донор на сперма.

IVF се извършва директно от ембриолози в условията на ембриологична лаборатория. Самото торене се извършва по един от двата начина:

1) ин витро инсеминация;

2) интрацитоплазмено инжектиране на сперма (ICSI, ICSI).

Отначало повече лесен начинсуспензия от сперматозоиди се добавя към яйцата, които са в хранителна среда. Сперматозоидите се добавят в размер на 100-200 хиляди на яйце. В рамките на 2-3 часа един от сперматозоидите влиза в яйцеклетката и по този начин я опложда. При втория метод (ICSI) сперматозоидът се въвежда в яйцеклетката "ръчно" с помощта на микрохирургически инструменти. ICSI се използва, когато качеството на сперматозоидите е много лошо, когато не може да се постигне оплождане дори в чаша.

След проникването на спермата яйцеклетката се счита за ембрион. Вероятността за успешно оплождане е 60-70%. Ембрионите съдържат изкуствени условия 2 до 6 дни

Трансферът на ембриона в матката се извършва 2-5 дни след оплождането на яйцеклетката. Процедурата не изисква анестезия (обезболяване) и се извършва на гинекологичен стол в рамките на няколко минути. Ембрионът се пренася в матката чрез прекарване на специален еластичен катетър през шийката на матката. Съгласно заповед № 67 на Министерството на здравеопазването на Руската федерация не се препоръчва прехвърлянето на повече от 4 ембриона в маточната кухина, за да се избегне многоплодна бременност. Съвременна практика IVF в Русия е такава, че обикновено се прехвърлят 2 ембриона.

Ефективността на ин витро оплождането (IVF) като цяло е около 30-35%. Стойността може да варира в зависимост от възрастта, причините за безплодието, квалификацията на лекарите и нивото на клиниката (поради факта, че материално-техническото оборудване е от немалко значение). От 20 настъпили бременности средно 18 ще завършат с раждане.След въвеждането на ембриони веднъж на всеки 3 дни е необходимо да се контролира нивото на хормоните в кръвта. След 12 дни се прави тест за бременност.

При многоплодна бременност по желание на жената се извършва редукция - отстраняване на нежелани ембриони.Намаляването се извършва за период от 5 до 13 седмици, като най-добрият период се счита за 8 и 9 седмици. По смисъла си намаляването е същият аборт, само че с него не всички заченати деца се унищожават, а едно или няколко, а едно, две или (рядко три) остават да живеят и да се развиват.

До 6 седмици редукцията се извършва с помощта на вакуумен аспиратор, който се въвежда в маточната кухина до "ненужния" ембрион и се изсмуква. За период от 7-8 седмици специална игла прониква инвагинално в гръдна кухинаембрион и направете инжекция с калциев хлорид, след което бебето умира и тялото му се разтваря. При периоди от 9 до 13 седмици точно същата игла остава инструментът за намаляване, само че се вкарва през стомаха на бременната жена. Този метод се счита за най-удобен и безопасен за останалата част от плода и самата жена.

раждане

Раждането по време на бременност след IVF не се различава от нормалното. В случаите, когато причината за безплодието е заболяване на жената, раждането се извършва, като се вземе предвид конкретно заболяване и това няма нищо общо с метода на оплождане.

Според лекарите децата, заченати в епруветка, не се различават от останалите. Въпреки това, има мнение, че такива деца учат по-добре, но са много по-импулсивни и боледуват по-често. Някои лекари смятат, че това може да се дължи на прекомерна защита на желаното дете.

Църковно мнение

В своята бяла книга "Основи на социалната концепция" (2000), рус православна църквасчита различни проблемибиоетика, които включват проблемите на преодоляването на безплодието. Морално приемливите методи за преодоляване на безплодието включват "изкуствено осеменяване с репродуктивни клетки на съпруга, тъй като не нарушава целостта на брачния съюз, не се различава фундаментално от естественото зачеване и се случва в контекста на брачните отношения".

Църквата дава неодобрителна оценка на тези възможности за ин витро оплождане, които използват донорска сперма, донорски яйцеклетки или сурогатна майка: „Използването на донорски материал подкопава основите на семейните отношения, тъй като предполага, че детето, освен „социални“ , също има така наречените биологични родители. „Сурогатното майчинство“, тоест носенето на оплодена яйцеклетка от жена, която след раждането връща детето на „клиенти“, е неестествено и морално неприемливо ... ". Църквата също се противопоставя на онези варианти за IVF, при които те могат да бъдат получени съзнателно голямо количествоембриони, отколкото е необходимо за трансфер в матката: „Морално неприемливо с православна точкаот гледна точка са и всички разновидности на ин витро (извънтелесно) оплождане, включващи подготовка, консервиране и съзнателно унищожаване на "излишни" ембриони. Именно върху признаването на човешкото достойнство дори за ембрион се основава моралната оценка на аборта, осъден от Църквата. Това е процедурата за намаляване, която ви принуждава да кажете „Не“ на IVF, тъй като унищожаването на живи ембриони се счита за убийство.

Църквата също така обръща внимание на факта, че: „Използването на репродуктивни методи извън контекста на благословено от Бога семейство се превръща във форма на богоборчество, извършвано под прикритието на защита на човешката автономия и погрешно разбрана индивидуална свобода.“

Изкуствено осеменяване

Изкуствено осеменяване

Изкуственото осеменяване е процес на оплождане, който се осъществява чрез въвеждане на сперматозоиди директно в матката (изкуствено осеменяване) или по метода ин витро (извън тялото, "ин витро"), т.е. екстракорпорално (IVF).

Видове изкуствено осеменяване:

  1. изкуствено осеменяване със сперма на съпруг или донор (IISM/IISD);
  2. ин витро оплождане (IVF).

В зависимост от показанията на жената се избира програма за изкуствено осеменяване.

  1. Вътрематочната инсеминация е въвеждането на специално подготвена сперма с помощта на специален катетър директно в маточната кухина.

    Така че сперматозоидите не преминават бариери кисела средавагината и плътната защитна слуз на шийката на матката и веднага навлиза в неутралната среда на маточната кухина.

    След това сперматозоидите се придвижват независимо до фалопиевите тръби и яйцеклетката се опложда по същия начин, както при естествен сексуален контакт.

    Според литературата, изкуственото осеменяване на жената като лечение на безплодие се използва повече от 100 години. Тази процедураизвършва само в специализирани медицински клиники при условие пълен прегледмъже и жени.

    Задължително е да се изследва състоянието на матката и фалопиевите тръби - хистеросалпингография ( рентгеново изследванеизползвайки контрастно вещество) или лапароскопия (изследване на матката с помощта на оптичен инструмент- лапароскоп) за проверка на проходимостта на репродуктивния тракт.

    За инсеминация може да се използва както нативна („жива“), така и криоконсервирана (предварително размразена) сперма. Спермата преди изкуствено осеменяване се почиства и концентрира.

    Изкуственото осеменяване се препоръчва при жени с повишен вискозитет на цервикалната слуз или киселинност на вагиналната среда. От страна на партньора може да има индикации като еректилна дисфункция, намаляване на броя на подвижните сперматозоиди или повишен вискозитетсперма и др.

    Процедурата се извършва в операционната зала на клиниката, на гинекологичен стол със специална спринцовка с катетър, през който спермата се въвежда в маточната кухина. След тази процедура трябва да легнете за 15-20 минути. Процедурата не изисква анестезия.

  2. IVF - ин витро оплождане - е метод за изкуствено осеменяване, при който мъжки сперматозоиди и женски яйцеклетки (предварително извлечени от яйчниците) се комбинират извън тялото, in vitro (в "стъкло", т.е. в лабораторна епруветка).

    Там се извършва самостоятелно оплождане и получените ембриони (1 или 2) се прехвърлят няколко дни по-късно в женска матка, където едното или и двете се имплантират в ендометриума (лигавицата на маточната кухина) и се развиват в продължение на 9 месеца.

    Стимулирането на овулацията се извършва в продължение на 2-3 седмици за получаване на яйцеклетки хормонални лекарства. След като няколко яйцеклетки узреят наведнъж, репродуктологът ги отстранява от яйчниците (извършва пункция на фоликулите) и ги прехвърля в ембриологичната лаборатория.

    Изкуствено осеменяване чрез ICSI- Това е една от разновидностите на IVF. В този случай ембриологът, използвайки специални инструменти под силно увеличение на микроскопа, инжектира най-фертилния сперматозоид в яйцето.

    Ембрионът, получен след такова оплождане, не се различава от ембрионите, заченати по естествен път, а също така след няколко дни се прехвърля в матката на жената и се развива в продължение на 9 месеца. Този методуспешно се използва при пациенти с мъжки фактор на безплодие, когато има отклонения от нормални показателисперма или след TESA биопсия за азооспермия.

Донорски програми за изкуствено осеменяване

Ако един от съпрузите няма собствени здрави полови клетки, IVF може да се извърши и с донорска сперма, донорска яйцеклетка. Преди да дари своите зародишни клетки, донорът се подлага на задълбочена проверка медицинско генетично изследване. Изкуственото осеменяване с донорска сперма се извършва само след двукратно изследване с интервал от 3 месеца.

За двойки, при които е противопоказано жената да роди дете (например с тежко сърдечно заболяване) или е физически невъзможно (поради липса на матка), IVF се използва със сурогатна майка.

Друго голямо предимство на IVF е, че по време на култивирането на ембриони в ембриологичната лаборатория има възможност за преимплантационна генетична диагностика на ембриона. Този метод ви позволява да идентифицирате (ако има такива) генетични заболявания, хромозомни аномалии, аномалии в развитието (малформации). За разлика от много други клиники, VitroClinic извършва PGD на целия набор от човешки хромозоми (т.е. на всичките 46 хромозоми). След такъв анализ само здрави ембриони ще бъдат прехвърлени в матката.

Преди всяка програма за ин витро оплождане, двойката се подлага на цялостна проверка медицински прегледда идентифицирам възможни противопоказания. Списъкът с такива изследвания е регламентиран със заповед на Министерството на здравеопазването и се спазва стриктно в нашата клиника.

Къде да направите изкуствено осеменяване?

Преди да се консултирате с лекар относно преодоляването на безплодието, всяка семейна двойка си задава въпроса: „Къде може да се направи изкуствено осеменяване на високо професионално ниво?“

Преди да изберете такава клиника, се придържайте към следните препоръки:

  • В клиниката трябва да работят тесни специалисти специално за лечение на безплодие: гинеколози-репродуктолози, уролози-андролози, ембриолози и генетици.
  • Центърът за изкуствено осеменяване трябва да използва в работата си само висококачествени и оригинални лекарства и разходни материализа IVF.
  • Истинските професионални репродуктивни специалисти работят с всяка двойка индивидуално, т.е. избор на метод, схеми за стимулиране и подкрепа ранни датибременността се избира от специалист само след задълбочено проучване на анамнезата на съпрузите, минал IVF опит (ако има такъв), възраст, здравословно състояние на този моменти много други
  • Опитните репродуктолози използват щадящи схеми на хормонална стимулация, като се грижат за здравето на своите пациенти и избягват хиперстимулацията.
  • За да се изключи многоплодна бременност, репродуктологът трябва да прехвърли само един или два ембриона (според показанията). Три или повече не са разрешени.
  • Специалистите на клиниката, която сте избрали, трябва да владеят всички най-съвременни техники в репродуктивна медицина: ICSI, PICSI, асистиран хетчинг, генетична диагностика на ембриона и др.
  • Анализите на спермата трябва да се извършват в лабораторията на самата клиника от специалисти ембриолози, които оценяват не само морфологията на сперматозоидите, но и тяхната фертилност.
  • Изберете клиника, която си сътрудничи с клинично-диагностична лаборатория, сертифицирана по международни стандарти ISO. Качеството на извършените анализи съществена роляв подготовка за IVF.
  • Уверете се предварително, че от първоначалната консултация до края на цялата програма за IVF или изкуствено осеменяванеЩе бъдете ръководени от същия репродуктолог (с изключение на форсмажорни ситуации). Това показва отговорността и фокуса на лекаря и клиниката върху положителен резултат.
  • Дайте предпочитание на тези клиники, където лекарите оставят своите контакти на пациентите за комуникация. Ще можете да се обадите или да пишете електронна пощаВашия лекар, ако се нуждаете от някакво разяснение или имате въпроси.
  • Добре е, ако в същата клиника, където ще направите IVF, има възможност да останете, за да наблюдавате бременността. Лекарите, знаейки всички нюанси на вашата бременност и имайки приемственост помежду си, ще направят всичко, за да я доведат до края - раждането на здраво дете.
  • Цената в Москва за програми за изкуствено осеменяване в различни клиники може да варира значително. Не забравяйте да проверите с мениджъра колко струва изкуственото осеменяване и какво точно е включено във всяка програма, която ви интересува, дали е възможно да добавите някои допълнителни услуги там, например ICSI или излюпване, дали има опции с донорски клетки и ембриони. Широката гама от различни програми е голям плюс за клиниката. Това означава, че в този център за изкуствено осеменяване лекарите владеят всички съвременни АРТ техники и могат да си позволят да изберат всяка програма за всяка двойка.

Изкуственото оплождане не е метод за лечение на безплодие, а метод за преодоляване на безплодието. По този начин преодолява пречките за постигане на бременност. В момента изкуственото осеменяване се използва за преодоляване на почти всяка причина за безплодие и ви позволява да заобиколите много проблеми със зачеването.

  • 6. Оборудване за изкуствено осеменяване на крави
  • 7. Организация на работата на пункта за изкуствено осеменяване. Идентификация на разгонени крави
  • 8. Ползи от осеменяване на животни
  • 9. Развъждане на мъжки за разплод за използване при изкуствено осеменяване. Характеристики на хранене и поддръжка
  • 10. Изкуствена вагина. Характеристики на вагиналното устройство за мъже от различни видове
  • 11. Устройство и подготовка за използване на изкуствена вагина
  • 12. Характеристики на вземане на сперма от мъже от различни видове
  • 13. Вземане на семенна течност от бик
  • 14. Вземане на семенна течност от жребец, глиган
  • 16. Допълнителни полови жлези, тяхното значение
  • 17. Сперма, нейният химичен състав, свойства
  • 18. Сперма. Структурата на спермата
  • 19. Сперма. Свойства на спермата
  • 20. Аглутинация на сперматозоидите, нейните причини и профилактика
  • 21. Дишане и гликолиза на сперматозоидите
  • 24. Разреждане на семенната течност. Разредители. Ползи от разреждането на спермата
  • 25. Видове разширители на семенна течност, техният химичен състав и свойства
  • 26. Криоконсервация на сперма. Кратка история и значение на метода
  • 27. Криоконсервация на сперма. Техника за криоконсервация
  • 28. Влияние на паратипичните фактори върху репродуктивната функция на жените
  • 29. Влияние на генетичните фактори върху репродуктивната функция на женските
  • 30. Стимулиране на половата функция на жените
  • 31. Синхронизация на женската полова функция
  • 32. Оплождане на яйцеклетки извън тялото на животното (ин витро)
  • 34. Оплождане на яйцеклетки извън тялото на животното (ин витро). Капацитет на спермата
  • 36. Маноцервикален метод за осеменяване на крави. Предимства и недостатъци
  • 37. Визоцервикален метод за осеменяване на крави. Предимства и недостатъци
  • 39. Сперматогенеза
  • 40. Изкуствено осеменяване на овце и кози
  • 41. Изкуствено осеменяване на свине
  • 42. Биотехнология на нативна сперма. Оценка на сперматозоидите по морфологични признаци
  • 43. Метод за замразяване на сперма и съхраняването й в течен азот
  • 44. Изкуствено осеменяване на птици
  • 45. Лабораторно оборудване за изкуствено осеменяване на пчели. Вземане на сперма от дрон. Осеменяване на матката
  • 47. Овогенеза.
  • 48. Ректоцервикален метод за осеменяване на крави. Предимства и недостатъци
  • 49. Изкуствено осеменяване на женски елени
  • 50. Размразяване и оценка на качеството на размразената сперма
  • 51. Естествено осеменяване при пчелите
  • 52. Изкуствено осеменяване на пчелни майки
  • 53. Визуална и микроскопска оценка на спермата. Методология на изследването
  • 54. Въздействие върху сперматозоидите на високи и ниски температури, йод Методи на изследване
  • 55. Видове патологични форми на сперматозоидите. Съотношението на нормалните и патологичните форми
  • 56. Изкуствено осеменяване на кобили
  • 57. Оценка на концентрацията и активността (мотилитета) на сперматозоидите
  • 58. Въздействие върху сперматозоидите на осмотичното налягане (хипотонични и хипертонични разтвори). Методология на изследването
  • 59. Организиране на изкуствено осеменяване
  • 32. Оплождане на яйцеклетки извън тялото на животното (ин витро)

    Положителна стойност - въпреки ниския добив на яйцеклетки, при всяка екстракция възможността за многократна употреба на животното.

    33. Характеристики на ин витро оплождане на яйцеклетки при женски различни видовес.-х. животни

    Разработване на система за торене и осигуряване ранни стадииРазвитието на ембриони на бозайници извън тялото на животните (in vitro) е от голямо значение за решаването на редица научни проблеми и практически въпроси, насочени към повишаване на ефективността на животновъдството.

    За тези цели са необходими ембриони в ранен стадий на развитие, които могат само да бъдат извлечени хирургични методиот яйцепроводите, което е трудоемко и не дава достатъчен брой ембриони за извършване на тази работа.

    Оплождането на яйцеклетки на бозайници in vitro включва следните основни етапи: узряване на яйцеклетките, капацитет на сперматозоидите, оплождане и осигуряване на ранни етапи на развитие.

    Съзряване на овоцити in vitro. Голямо числозародишните клетки в яйчниците на бозайници, по-специално при говеда, овце и свине с висок генетичен потенциал, представлява източник на огромен потенциал за репродуктивната способност на тези животни за ускоряване на генетичния прогрес в сравнение с използването на възможностите за нормална овулация. При тези животински видове, както и при други бозайници, броят на овоцитите, които овулират спонтанно по време на разгонване, е само малка част от хилядите овоцити, налични в яйчника при раждането. Останалите овоцити се регенерират вътре в яйчника или обикновено се казва, че претърпяват атрезия. Естествено възникна въпросът дали е възможно чрез подходяща обработка да се изолират овоцити от яйчниците и да се извърши по-нататъшното им оплождане извън тялото на животното. Понастоящем не са разработени методи за използване на целия запас от овоцити в яйчниците на животните, но значителен брой овоцити могат да бъдат получени от кухини на фоликулите за тяхното по-нататъшно узряване и оплождане извън тялото.

    Понастоящем само in vitro узряването на говежди овоцити е намерило приложение в практиката. Ооцитите се получават от яйчниците на кравите след клането на животните и чрез интравитална екстракция, 1-2 пъти седмично. В първия случай яйчниците се вземат от животни след клане, доставят се в лабораторията в термостатиран контейнер за 1,5-2,0 ч. В лабораторията яйчниците се промиват два пъти с пресен фосфатен буфер. Ооцитите се извличат от фоликули с диаметър 2-6 mm чрез засмукване или нарязване на яйчника на пластини. Ооцитите се събират в среда TCM 199 с добавяне на 10% кръвен серум от разгонена крава, след това се промиват два пъти и се избират само овоцити с компактен кумулус и хомогенна цитоплазма за по-нататъшно узряване in vitro.

    AT последно времее разработен метод за прижизнена екстракция на овоцити от яйчниците на крави с помощта на ултразвуков апарат или лапароскоп. В този случай овоцитите се аспирират от фоликули с диаметър най-малко 2 mm, 1-2 пъти седмично от едно и също животно. Еднократно се получават средно 5-6 овоцита от животно. По-малко от 50% от овоцитите са подходящи за съзряване in vitro.

    Положителна стойност - въпреки ниския добив на яйцеклетки, при всяка екстракция възможността за многократна употреба на животното. Капацитет на спермата. Важна стъпка в развитието на метода на оплождане при бозайниците е откриването на феномена на капацитета на сперматозоидите. През 1951 г. М.К. Chang и в същото време G.R. Остин установи, че оплождането при бозайниците се случва само ако спермата е в яйцепровода на животното няколко часа преди овулацията. Остин въвежда термина капацитация въз основа на наблюдения върху проникването на сперматозоиди на плъх в различни моменти след чифтосване. Това означава, че трябва да настъпят някои физиологични промени в сперматозоидите, преди сперматозоидите да придобият способността да бъдат оплодени.

    Разработени са няколко метода за капацитет на еякулирана сперма от домашни животни. Използва се среда с висока йонна сила за отстраняване на протеини от повърхността на сперматозоидите, които изглежда инхибират капацитета на сперматозоидите.

    Най-голямо признание обаче получи методът за капацитация на сперматозоидите с помощта на хепарин (J. Parrish et al., 1985). Сламки със замразена бича семенна течност се размразяват на водна баня при 39°C за 30–40 s. Приблизително 250 µl размразена сперма се наслоява под 1 ml среда за капацитет. Капацитиращата среда се състои от модифицирана тиреоидна среда без калциеви йони. След инкубиране за един час горен слойсреда с обем 0,5-0,8 ml, съдържаща по-голямата част от подвижните сперматозоиди, се отстранява от епруветката и се промива два пъти чрез центрофугиране при 500 g за 7-10 минути. След 15 минути инкубиране с хепарин (200 µg/ml), суспензията се разрежда до концентрация от 50 милиона сперматозоиди на ml.

    Оплождане ин витро и осигуряване на ранни стадии на развитие на ембриона. Оплождането на яйцата при бозайниците става в яйцепроводите. Това затруднява изследователя при изучаването на условията на околната среда, в които протича процесът на оплождане. Следователно системата за ин витро оплождане би била ценен аналитичен инструмент за изучаване на биохимичните и физиологичните фактори, участващи в успешното чифтосване на гамети.

    Приложете следната схема на ин витро оплождане и култивиране на ранни ембриони на говеда. Оплождането in vitro се извършва в капка модифицирана тиреоидна среда. След съзряване in vitro, яйцеклетките се изчистват частично от заобикалящите ги разширени кумулусни клетки и се прехвърлят в микрокапка от по пет ооцита всяка. Към средата с яйцеклетки се добавя сперматозоидна суспензия от 2-5 µl, за да се постигне концентрация на сперматозоиди от 1-1,5 милиона/ml. 44-48 часа след инсеминацията се установява наличието на раздробяване на яйцеклетки. След това ембрионите се поставят върху монослой от епителни клетки за по-нататъшно развитие в рамките на 5 дни.


    Сред всички двойкив Русия 15-20% страдат от безплодие. Смята се, че ако бременността не настъпи в рамките на една година от редовна сексуална активност без контрацепция, тогава можем да говорим за безплодие. Изключително важно е да се установи правилно причината за безплодието 1 . Като правило има няколко от тях наведнъж. При вземане на решение за възможен методлечение на безплодие лекарите вземат предвид възрастта и индивидуални характеристикипациенти.
    Безплодието, свързано с хормонални причини, често се лекува успешно с хормонални заместители. Въпреки това, при безплодие, свързано с нарушена проходимост на фалопиевите тръби и сраствания в тазовите органи на жената, както и с мъжки фактор на безплодие, традиционни методилечението обикновено е неефективно. В този случай на помощ идва сравнително нов метод за лечение на безплодие - асистирани репродуктивни технологии, които се основават на метода на ин витро оплождане - ЕКО. По-„разговорно“ обозначение за този метод е „изкуствено осеменяване“, или ин витро зачеване, т.е. "инвитро". За да бъдем напълно точни, ин витро („екстра“ – „външно“, „корпорално“ – „телесно“; т.е. „извънтелесно“) оплождане не е задължително да се извършва в епруветка. Но същността на това не се променя: оплождането на яйцеклетката от спермата се случва извън женското тяло! И едва след два-три дни ембрионите се прехвърлят в матката (повече за технологията ЕКОвиж отдолу).

    Така че, ако концепцията за дете традиционен начин(когато оплождането настъпва във фалопиевите тръби на жена със спермата на мъж, попаднала там в резултат на полов акт) е невъзможно поради:
    запушване или отсъствие на фалопиевите тръби;
    ендометриоза;
    мъжки фактор на безплодие (намаляване на подвижността на сперматозоидите и броя на сперматозоидите до пълно отсъствиесперматозоиди в еякулата);
    имунологичен фактор на безплодие -
    и като се има предвид, че предишни опити за преодоляване на безплодието в рамките на 12-18 месеца са били неефективни, може би си струва да се прибегне до възможностите, които ЕКО.

    Необходимите условияза ЕКО:
    съгласие на двамата партньори;
    липсата по време на началото на лечението на признаци на остри и хронични възпалителни процеси в гениталните органи на жените и мъжете;
    отсъствие патологични променив маточната кухина;
    отсъствие патологични образуванияв яйчниците.

    Преди процедурата е необходим обстоен преглед на съпрузите - за увеличаване на шансовете за бременност и намаляване на риска възможни усложнения.

    За жена Проучвателно проучваневключва:
    консултация и преглед от гинеколог-ендокринолог;
    ултразвукова процедура; консултация с терапевт и други специалисти - по предписание на лекуващия лекар;
    колпоскопия (изследване на шийката на матката);
    изследване за инфекции: токсоплазмоза, цитомегалия, херпес, хламидия, сифилис, гонорея, хепатит А и В, вагинална цитонамазка за чистота, бактериологичен анализ на секрета цервикален канал;
    хормонален преглед.

    За мъж предварителният преглед включва:
    консултация и преглед от андролог;
    ултразвуково изследване (ако е необходимо);
    разширена спермограма с определяне на морфологията на сперматозоидите, бактериологичен анализ на сперма, хормонално изследване, биохимични изследваниясперма (фруктоза, лимонена киселина, цинк).

    Как се прави?

    1. Стимулиране на суперовулацията.На първия или третия ден от цикъла жената започва да приема лекарствен продукт(например меногон), стимулиращ дейността на яйчниците. Факт е, че обикновено една яйцеклетка узрява за един цикъл. Под въздействието на стимулиращи лекарства няколко яйца узряват и това увеличава шансовете за успех ЕКО. Развиващите се фоликули („везикули“, в които узрява яйцеклетката) са под постоянен контрол: въз основа на ултразвукови данни се оценява техният размер, определя се нивото на естрогени, прогестерон и лутеинизиращ хормон в кръвта 2 , се оценява състоянието на цервикалната слуз (т.е. слузта в шийката на матката). Обикновено фоликулите достигат необходимия размер за 8-10 дни, след което жената се инжектира с хормон. хорионгонадотропин, което осигурява окончателното узряване на яйцеклетките.
    2. Извличане на яйца.Във влагалището се вкарва ултразвукова сонда със специална пункционна игла, прикрепена към нея. Лекарят внимателно пробива най-големите фоликули и събира зрели яйцеклетки. Цялата процедура се извършва амбулаторно. По време на вземане на яйцеклетки жената е в състояние на леко лекарствосън (интравенозните лекарства се използват за анестезия, успокояване и релаксация нервна система).
    3. Получаване на сперматозоиди.Сперматозоидите се извличат или от еякулата, или при липса или недостатъчен брой сперматозоиди в еякулата, те се „извличат“ директно от тестиса или от епидидима. Сперматозоидите не трябва да се използват веднага след отстраняването им от тялото: те могат да бъдат замразени и съхранявани в специални резервоари - докато след размразяване всичките им свойства се възстановяват.
    4. Сортиране на яйцеклетки и сперма.Под микроскоп се избират най-зрелите и качествени яйцеклетки. Сперматозоидите се поставят във водна среда, а най-жизнеспособните и подвижни незабавно се „втурват в плуването“ (след това се хващат), докато неактивните остават на мястото си.
    5. Оплождане на яйцеклетки и култивиране на ембриони.След като яйцата живеят в продължение на 4-6 часа в инкубатор, в специални културни чинии с хранителна среда, върху тях се засаждат подготвени сперматозоиди (освен това от 50 000 до 100 000 сперматозоиди падат върху едно яйце). Сперматозоидите се залепват около яйцето и отделят ензим, който им помага да влязат вътре. Всеки се стреми, но само един успява. Веднага щом един от сперматозоидите е вътре, бариерата се активира, блокирайки достъпа до останалите „отвън“. Инфилтрираният сперматозоид (мъжка гамета) и ядрото на яйцето се обединяват. Настъпило е оплождане - две клетки са се слели в една. Клетката започва да се дели. След 48-72 часа ембрионите се състоят от 4-8 клетки и са готови за пренасяне в тялото на жената.
    6. Трансфер на ембриони в маточната кухинаизвършва се с помощта на специален катетър. За да се увеличат шансовете за успех, обикновено се въвеждат 2-3 ембриона. Тази процедура е безболезнена. След успешен трансфер лекарят предписва лекарства, които подпомагат развитието на ембрионите (прогестерон, човешки хорионгонадотропин - hCG). Две седмици по-късно се определя нивото на hCG в кръвта. След три седмици оплодена яйцеклеткаможе да се види с ултразвук.

    След прехвърляне на няколко ембриона в маточната кухина е възможно останалите да се замразят и да се съхраняват дълго време за по-късна употреба, ако не е възможно да се запазят тази бременност. Използването на замразени ембриони позволява на жената да избегне повтаряща се хормонална стимулация на яйчниците, както и процедури за пункция на яйчниците.

    Ефективността на процедурата ЕКОзависи от лабораторията, в която се извършва. Средно в света е от 20 до 40%. Бременност обаче ЕКОима свои собствени характеристики. Първо, често когато женско безплодиехормоналните механизми на женската репродуктивна система не са в състояние да поддържат правилно бременността и е необходимо да се предпише подходящ заместител по време на повечето, ако не и през цялата бременност хормонална терапия. Въпреки това остава повишена вероятностспонтанен аборт. Второ, след ЕКОпо-често от обикновено се появяват многоплодни бременности. Това се дължи на факта, че няколко ембриона се прехвърлят в маточната кухина, за да се увеличи вероятността от имплантиране. Многоплодна бременностдоста често (до 50% от случаите) е сложно спонтанни абортии преждевременни раждания. За да се намали вероятността от спонтанен аборт, след период от 10 седмици от бременността може да се извърши намаляване на "допълнителните" плодове (спиране на развитието на плода чрез пункция на феталната торбичка под ултразвуков контрол).

    Както виждаш ЕКОе сложен многоетапен процес, чийто успех зависи от много фактори.

    История на Луиз Браун

    Съпрузите Браун (Великобритания) винаги са искали да имат деца. Момче и момиче. Но въпреки всичките им усилия г-жа Браун не можа да забременее. Точно по това време британски лекари обявиха създаването на революционен метод за преодоляване на безплодието. Г-жа Браун реши, че това е последната й надежда. Лекарите взеха яйцеклетка от нейния яйчник и я оплодиха в епруветка със сперма, получена от г-н Браун. След като се увериха, че всичко с оплодената яйцеклетка е наред и тя започна да се дели, лекарите я преместиха в матката на г-жа Браун. Девет месеца по-късно г-жа Браун ражда дъщеря, която е кръстена Луиз.
    Преди раждането на Луиз Браун (през 1978 г.) жените със запушени фалопиеви тръби и мъжете с недостатъчен брой сперматозоиди са били обречени на безплодие. Методът "зачеване в епруветка" е дал шанс на много двойки, които преди това не са имали надежда да имат бебе.
    Развитието на метода за ин витро оплождане започва с изкуствено осеменяване, чийто първи успешен случай датира от 1799 г., когато спермата на съпруга е инжектирана в жена му с топла спринцовка. За мнозина раждането на Луиз Браун е знак, че учените са отишли ​​твърде далеч, че са решили да се изравнят с Бог, да се намесят в самия процес на сътворението.

    "Тесни места" на торене
    За да бъде успешно зачеването и последващото развитие на бременността, е необходимо „пасиансът“, съставен от много „карти“, да се сближи. Например:
    в мозъка трябва да се образуват и освобождават навреме хормони, които стимулират развитието на яйцето;
    полученото яйце трябва да бъде „висококачествено“ и да няма хромозомни дефекти;
    яйцето трябва да узрее;
    трябва да се образува в мозъка достатъчнолутеинизиращ хормон, който стимулира окончателното узряване на яйцето;
    яйцето трябва успешно да излезе от фоликула (момента на овулация);
    фалопиевата тръба трябва да "улови" яйцето;
    сперматозоидите трябва да влязат живи във влагалището, бързо да преминат през него, да преодолеят лигавичната бариера на шийката на матката, да достигнат фалопиевата тръба и да намерят там яйцеклетката;
    сперматозоидите трябва да могат да преминат през мембраните на яйцето;
    сперматозоидът трябва да претърпи редица биохимични трансформации и да "въведе" своята ДНК (23 хромозоми) в яйцето;
    оплодената яйцеклетка трябва да има способността да се дели;
    новообразуван ембрион трябва да се раздели и да се развива нормално;
    след три дни след оплождането ембрионът трябва да достигне матката;
    ембрионът трябва да се превърне в двуслоен ембрион;
    този ембрион трябва да се "излюпи" от черупките си;
    ендометриумът - лигавицата на стената на матката - трябва да е готов да приеме ембриона;
    ембрионът трябва да се "залепи" за стената на матката и да "въведе" в нея ...
    След това следва поредица от мистериозни и важни събитиясвързани с последващото развитие на детето.

    Даряване на яйцеклетки
    Използването на донорска яйцеклетка е ефективен метод за лечение на безплодие при всички жени, с изключение на тези, чието безплодие е причинено сериозно заболяванематка. ЕКОс донор на яйцеклетки може да се препоръча на жени, чиито собствени яйцеклетки са с лошо качество или не могат да бъдат получени чрез овариална стимулация.
    Процедура:
    1. Женски донор на яйцеклетки, избран от безплодна двойка, се подлага на задълбочен цялостен преглед за идентифициране на инфекциозни и генетични заболявания.
    2. Подписва се споразумение между всички участващи страни.
    3. Безплодната жена реципиент приема лекарства, които подготвят ендометриума да приеме плода.
    4. Зрелите донорски яйцеклетки се извличат от яйчника и лабораторни условияоплодени със сперма, получена от партньор на безплодна жена.
    5. В рамките на три дни ембрионите се развиват "ин витро" и след това се прехвърлят в матката.

    ICSI - ICSI - Introcytoplasmic sperm injection - инжектиране на сперма в цитоплазмата на яйцеклетката
    ICSI включва въвеждането на един сперматозоид директно в яйцеклетката (вместо поставяне на яйцеклетките и сперматозоидите в една и съща чиния с култура с хранителна среда). Като начало, както винаги ЕКО, яйчниците на жената се подлагат на медикаментозна стимулация, след което яйцеклетките се отстраняват от тях. За въвеждане на сперматозоиди се използват специални микроскопи, игли и оборудване за микроманипулация. Сперматозоидите се извличат от еякулата. При липса на сперматозоиди в еякулата се прибягва до разновидност на метода ICSI, „извличане“ на сперматозоиди директно от тестиса (TESA) или от епидидима (MESA).
    Кой е показан ЕКОс ИКСИ?
    Всички двойки с тежко мъжко безплодие, които отказват инсеминация с донорска сперма.
    ICSI процедура:
    1. Зряла яйцеклетка се държи със специална пипета.
    2. Единичен сперматозоид се държи и обездвижва с тънка и остра куха игла.
    3. Със същата игла внимателно се пробива яйцеклетката и се инжектира в цитоплазмата на яйцеклетката.
    4. Сперматозоидът се инжектира в цитоплазмата и иглата се отстранява внимателно.
    ICSI предоставя по-вероятнооплождането и, според някои доклади, началото на бременността, отколкото като цяло с ЕКО. Това се дължи по-специално на факта, че двойки с мъжко безплодие обикновено прибягват до ICSI, докато яйцеклетките са с добро качество и тялото на жената е готово за бременност. Все пак трябва да се има предвид, че мъжкото безплодие често се свързва с генетични дефекти на Y хромозомата, които, разбира се, се предават на потомството. мъжки. Това трябва да се има предвид при избора на ICSI като метод за асистирана репродукция, ако е възможно, провеждане на подходящи генетични изследвания.
    Честотата на раждане на деца с груби малформации, заченати по метода ЕКОи ICSI, не по-висока от тази при конвенционалното зачеване.

    Даряване на сперма
    Инсеминацията с донорска сперма е ефективен метод за лечение мъжко безплодие(трябва да се отбележи обаче, че наскоро разработеният метод ICSI позволява дори при много нисък брой сперматозоиди, т.е. в случаите, когато преди това е била необходима донорска сперма, да се постигне оплождане със сперматозоидите на съпруга) или решение на проблема за самотна жена, която планира бременност.
    Процедура:
    1. Всички донори са внимателно проверени от банката за сперма за инфекциозни заболявания като СПИН, хепатит и други инфекции. Спермата се замразява и съхранява 6 месеца, след което се изследва повторно.
    2. Донорът се избира според желаните външни характеристики: етнос, цвят на очите, цвят на косата, ръст, тегло, кръвна група и др.
    3. Замразената донорска сперма се изважда от банката за сперма и се доставя в специален контейнер на медицинска клиникакъдето се планира да се използва.
    4. Жената определя момента на овулация (има много методи за определяне на овулацията - голямо разнообразие).
    5. В деня на овулацията обработената сперма, съдържаща пречистената фракция от подвижни сперматозоиди, се въвежда в маточната кухина с помощта на тънък и мек катетър. Тази операция е напълно безболезнена.
    6. Успехът на донорската инсеминация зависи от възрастта на жената и нея репродуктивно здраве.

    Как да оценим "качеството" на ембрионите
    За съжаление, в света няма единна приета система за оценка на "качеството" на ембриона. Като правило се вземат предвид следните показатели: броят на клетките, подредеността на тяхното разположение, степента на фрагментация, дебелината на мембраните около ембриона и др.
    Обикновено качеството на ембриона се оценява не по-рано от 48 часа след извличането на яйцеклетката. До този момент (до края на втория ден) трябва да има поне две клетки, по-добре е ембрионът да се състои от 3-4 клетки. След 72 часа (до края на третия ден) ембрионът трябва да се състои от понеот 6 клетки и за предпочитане от 7 или повече. Като цяло, ембрионите с повече клетки, в подредено разположение и без фрагментация са по-склонни да оцелеят. Качеството на ембриона се оценява под микроскоп ЕКО-лаборатория, която позволява прогнозиране на вероятността от бременност след ембриотрансфер. Въпреки това, в този процессе намесват още много фактори, които при сегашното ниво на развитие на науката не могат да бъдат отчетени, поради което получените прогнози не винаги се сбъдват.

    Сурогатно майчинство
    Сурогатното майчинство е начин за преодоляване на безплодието на жена, която сама не може да носи и да роди дете (поради липса на матка, обичаен спонтанен аборт).
    В този случай яйцеклетката на безплодна жена, оплодена от сперматозоидите на нейния съпруг, се въвежда в матката на жена, която е в състояние да износи и роди дете. Биологичните родители на дете се считат за двойка, която е дала яйцеклетка и сперма за образуването на ембрион, а жената, която носи детето им, се нарича сурогатна („помощна“, „заместваща“ майка).
    Първоначално сурогатните майки най-често са роднини на бездетна двойка, но напоследък сурогатното майчинство се превърна в професия - биологичните родители плащат пари здрава жена, съзвучно с имплантирането и носенето на чужд ембрион.
    Сурогатното майчинство е най-сложната (и съответно скъпа) програма в ЕКО. Привличането на трето лице към раждането на дете, станало възможно в резултат на почти фантастичен напредък медицинска наука, направи възможно усещането на радостта от майчинството на жени, чието безплодие преди беше непреодолимо, но в същото време постави редица нови етични и правни проблеми пред лекари и пациенти.

    Подобни публикации