A daganat molekuláris profilozása egy lépés a személyre szabott rákkezelés felé. A CYP2D6 gén molekuláris tesztje. Medulláris pajzsmirigyrák

Elkészül az onkológiai betegségekről szóló cikksorozatunk.
Ma részletesen elmondom, mi az a molekuláris vizsgálat, és hogyan befolyásolja a diagnózist.

A képen: Vladislav Mileiko osztályvezető,
orvosbiológiai gazdaság "Atlas".

Hogy megértsük, hogyan működik molekuláris diagnosztikaés milyen helyet foglal el az onkológiában, először meg kell értenie a daganatban előforduló mechanizmusokat.

Molekuláris folyamatok daganatban

A sejtosztódásért és -halálért felelős proto-onkogén és szuppresszor gének mutációi miatt a sejt abbahagyja az utasítások követését, és helytelenül szintetizálja a fehérjéket és az enzimeket. A molekuláris folyamatok nem szabályozhatók: a sejt folyamatosan osztódik, nem hajlandó meghalni, és genetikai és epigenetikai mutációkat halmoz fel. Ezért a rosszindulatú daganatokat gyakran a genom betegségének nevezik.

A daganatsejtekben több százezer mutáció fordulhat elő, de csak néhány járul hozzá a daganat növekedéséhez, genetikai sokféleségéhez és fejlődéséhez. Ezeket sofőröknek hívják. A fennmaradó mutációk, "passenger" (passenger), önmagukban nem teszik rosszindulatúvá a sejtet.

Az illesztőprogram-mutációk különböző sejtpopulációkat hoznak létre, ami biztosítja a tumorok sokféleségét. Ezek a populációk vagy klónok eltérően reagálnak a kezelésre: némelyik rezisztens és visszaesik. Ráadásul a klónok eltérő terápiás érzékenysége a kezelés során a molekuláris profil gyökeres megváltozásához vezethet: még a populáció kezdetén jelentéktelen sejtek is előnyhöz juthatnak, és a kezelés végén dominánssá válhatnak, ami rezisztencia és daganat kialakulása.

Molekuláris diagnosztika

A meghajtó mutációit, a fehérjék számának vagy szerkezetének változásait biomarkerként használják – célpontként, amelyre a kezelést választják. Minél több célt ismerünk, annál pontosabb a potenciálisan hatékony kezelési rend kiválasztása.

Nem könnyű elkülöníteni a vezetőmutációkat a többitől és meghatározni a daganat molekuláris profilját. Ehhez a szekvenálás, a fluoreszcens in situ hibridizáció (FISH), a mikroszatellit elemzés és az immunhisztokémia technológiáját alkalmazzák.

A következő generációs szekvenálási módszerek azonosíthatják a vezetőmutációkat, beleértve azokat is, amelyek érzékennyé teszik a daganatot a célzott terápiára.

A FISH technológia segítségével a kromoszómák azon részeit színezik, amelyeken egy bizonyos gén található. Két összefüggő többszínű pont kiméra vagy fuzionált gén: amikor a kromoszómák átrendeződése következtében különböző gének szakaszai kapcsolódnak egymáshoz. Ez oda vezethet, hogy az onkogén egy másik aktívabb gén szabályozásának hatása alá kerül. Például az EML4 és az ALK gének fúziója kulcsfontosságú tüdőrák esetén. Az ALK proto-onkogén átrendeződési partnere hatására aktiválódik, ami kontrollálatlan sejtosztódáshoz vezet. Az onkológus, tekintettel az átrendeződésre, olyan gyógyszert adhat be, amely az aktivált ALK génterméket (crizotinib) célozza meg.

Fluoreszcens in situ hibridizáció (FISH).

A mikroszatellit-elemzés megmutatja a DNS-javító rendszer károsodásának mértékét és az immunhisztokémiát - a felszínen, a citoplazmában és a tumorsejtek magjaiban található fehérje biomarkereket.

Mindezek a tanulmányok szerepelnek Új termék orvosbiológiai holding "Atlas" - Szóló teszt. Egy ilyen teszt segítségével az onkológus információt szerez a daganat molekuláris profiljáról és arról, hogy az hogyan befolyásolja a potenciális hatékonyságot. széles választék rákellenes gyógyszerek.

A Solo akár 450 gént és biomarkert is megvizsgál, hogy felmérje, hogyan reagálhat egy daganat a célzottabb kezelésekre onkológiai betegségek. Némelyikük esetében a biomarker elemzést a gyártó diktálja. Mások számára használjon adatokat klinikai kutatás valamint az onkológusok nemzetközi közösségeinek ajánlásai.

A célzott terápia célpontjainak kiválasztásán túl a molekuláris profilalkotás segít kimutatni azokat a mutációkat, amelyek éppen ellenkezőleg, a daganatot rezisztenssé teszik egy adott kezeléssel szemben, vagy olyan genetikai jellemzőket, amelyek fokozott toxicitással járnak, és a gyógyszeradag egyéni kiválasztását igénylik.

A kutatáshoz biopsziás anyagot vagy paraffinozott posztoperatív anyagblokkokat használnak.

Molekuláris profilalkotás ad További információ a betegségről, de ez nem mindig alkalmazható a kezelés megválasztására. Például olyan helyzetekben, amikor a standard terápia kellően hatékony, vagy műtéti kezelés szükséges. Lehetőség van olyan klinikai helyzetek azonosítására, amelyekben egy ilyen vizsgálat a leghasznosabb lehet:

• A daganat ritka típusa;
• Azonosítatlan daganatok elsődleges fókusz(nem ismert, hogy eredetileg hol jelent meg az áttétet adó daganat);
• Azok az esetek, amikor több lehetőség közül kell választani a célzott terápia alkalmazásához;
• A standard terápia lehetőségei kimerültek, és szükség van rá kísérleti kezelés vagy a beteg bevonása klinikai vizsgálatokba.

A Solo projekt szakemberei onkológusokkal vagy betegekkel konzultálnak, és javasolják, hogy ebben az esetben szükség van-e vizsgálatra.

Precíziós orvostudomány és klinikai kutatás

Általában az orvosi gyakorlatban általános stratégiákat alkalmaznak a meghatározott diagnózisú betegek kezelésére. Mert kissejtes rák tüdőben az egyik stratégiát alkalmazzák, a nem kissejtes esetében egy másikat. Onkológiai betegségek esetén ez a módszer nem mindig alkalmas. A molekuláris szintű különbségek miatt akár azonos típusú daganat esetén is előfordulhat, hogy a betegek hatástalan vagy szükségtelen kezelésben részesülnek.

A kutatás növekedésével és a célzott gyógyszerek feltalálásával a rákkezelés megközelítése megváltozott. A beteg relapszusmentes periódusának és várható élettartamának növeléséhez figyelembe kell venni a daganat molekuláris profilját, a szervezet gyógyszerre és kemoterápiára adott válaszát (farmakogenomika), ismerni a főbb biomarkereket.

A precíziós orvoslás jelentősen javíthatja az adott beteg prognózisát, elkerülheti az onkológiai gyógyszerek súlyos mellékhatásait, és jelentősen javíthatja a beteg életminőségét. De ennek a módszernek vannak hátrányai is.

A célzott gyógyszerek száma egyre növekszik, és két fő korlátjuk van: a legtöbb molekulárisan célzott ágens csak részlegesen gátolja a jelátviteli útvonalakat, és sok túlságosan mérgező ahhoz, hogy kombinációban alkalmazzák.

Képzelje el, hogy Ön Moszkva építésze. Ön előtt állva nem könnyű feladat- Egy híd építésével oldja meg a forgalmi dugók problémáját a csúcsforgalomban. A molekuláris mechanizmusok összehasonlíthatók a gépek mozgásával, és a híd - fő drog aminek meg kell oldania a mögöttes problémát. Úgy tűnik, hogy számos gyógyszer (hidak sorozata), amelyek a főbb molekuláris zavarokat célozzák, megoldhatja ezt a problémát. De a gyógyszerek toxicitása nő, és kiszámíthatatlan lehet.

Jobban megértjük a molekuláris folyamatokat rosszindulatú daganatok, de a precíziós onkológia klinikai gyakorlatba történő bevezetésének jelenlegi módszerei messze elmaradnak. A célzott terápia tanulmányozásának felgyorsítása érdekében a tudósok két új megközelítést fejlesztettek ki - a kosár és az esernyő.

A Basket módszer lényege, hogy egy bizonyos biomarkerrel rendelkező betegeket választanak ki a vizsgálatra, függetlenül a daganat helyétől és nevétől. 2017 májusában az FDA jóváhagyta a nagy mikroszatellit-instabilitásnak (MSI-H) vagy a dMMR-nek nevezett biomarker kezelését.

A molekuláris rendellenességek nemcsak a különböző betegekben különböznek egymástól, hanem ugyanazon a daganaton belül is. Heterogenitás - egy nagy probléma az onkológiában, amelyhez az Umbrella tanulmányterv készült. Az Umbrella módszernél először a betegeket a rosszindulatú daganatok típusa szerint választják ki, majd a genetikai mutációkat veszik figyelembe.

Az ilyen tanulmányok nemcsak a célzott gyógyszerek hatásáról gyűjtenek információkat – néha azt is az egyetlen lehetőség olyan betegek számára, akik nem reagálnak standard kezelés regisztrált gyógyszerek.

Klinikai példa

Úgy döntöttünk, hogy szemléltető példát adunk arra, hogyan nézhet ki a fejlett molekuláris profilalkotás alkalmazása.

Egy bőrmelanómás és májmetasztázisos beteg onkológushoz fordult. Az orvos és a páciens molekuláris profilalkotás mellett döntött, hogy teljesebb információt szerezzen a betegségről. A betegből biopsziát vettek, és szövetmintákat küldtek elemzésre. A daganatos diagnosztika eredményeként több fontos genetikai rendellenességek:

• Mutáció a BRAF génben. A RAS-RAF-MEK onkogén jelátviteli útvonal aktiválását jelzi, amely részt vesz a sejtdifferenciálódásban és a túlélésben.
• Mutáció az NRAS génben. A RAS-RAF-MEK jelzőkaszkád további aktiválását jelzi.
• A TPMT gén öröklött változata. A "ciszplatin" rákellenes gyógyszer metabolizmusának jellemzőit jelzi.

A klinikai vizsgálatok eredményei és az ajánlások alapján a következő következtetésekre juthatunk:

• A BRAF-inhibitorok (Vemurafenib) potenciálisan hatásosak lehetnek, sőt, egy NRAS-mutáció jelenléte további okként szolgálhat a jelátviteli kaszkád kettős blokádjának – MEK-inhibitorokkal (Trametinib) való kombinációjának – felírásához.
• Bár nincs olyan jóváhagyott terápia, amely közvetlenül az NRAS onkogént célozza meg, ismert, hogy a benne lévő mutációk növelik a sikeres kezelés immunterápia (Ipilimumab és Pembrolizumab) felírásakor.
• A TPMT génben lévő örökletes genetikai variáns a ciszplatin fokozott egyéni toxicitását jelzi, ami dózismódosítást tesz szükségessé a platinatartalmú terápia felírásakor.

Így az orvos lehetőséget kap az eligazodásra lehetőségek a kezelés nem csak a beteg klinikai paraméterei alapján történik, hanem a daganat molekuláris jellemzőit is figyelembe véve.

A molekuláris diagnosztika nem csodaszer minden rák esetében. De ez egy fontos eszköz az onkológus számára, amely lehetővé teszi a rosszindulatú daganatok kezelésének új nézőpontból való megközelítését.

Köszönjük, hogy elolvasta onkológiával kapcsolatos anyagainkat, és kommentálta azokat. Íme a cikkek teljes listája.

Az A.I.-ről elnevezett Köztársasági Onkológiai és Orvosi Radiológiai Tudományos és Gyakorlati Központ. N. N. Alexandrova jelenleg 56 tudományos projektet hajt végre, amelyek közül 23 kapcsolódik molekuláris genetikai kutatásokhoz. Ezeket a Köztársasági Karcinogenezis Molekuláris Genetikai Laboratóriumban végzik (genetikai, sejt- és biochip technológiák, virológia, immunológia és proteonika onkológiai osztálya).

A hagyományos diagnosztikai eszközök kimerítik a bennük rejlő lehetőségeket – mondja a Köztársasági Tudományos és Gyakorlati Központ kutatási igazgatóhelyettese, a Fehéroroszországi Nemzeti Tudományos Akadémia levelező tagja, az orvostudomány doktora. tudományok, Szergej Krasznij professzor. - Ideje egy ilyen tartalékot molekuláris genetikai kutatásként használni. Lehetővé teszik a daganatok nagy pontosságú tesztelését a kemoszenzitivitás meghatározására, a betegség örökletes jellegének a beteg genetikai portréjával történő megállapítását, valamint a célzott kezelés előírásával a görbe előtti céltudatos cselekvést.

2016-ban mintegy 10 000 beteg ment át a Köztársasági Tudományos és Gyakorlati Központon, közülük megközelítőleg 7 000-en végeztek molekuláris biológiai vizsgálatokat; a terápia egyénre szabását szolgáló nagyléptékű tumorprofil-alkotást mintegy száz emberen végezték el. Molekuláris biológiai markerek alapján központi idegrendszeri, lágyrész- és csontdaganatokat, limfómát diagnosztizáltak, vizsgálatokat végeztek a rosszindulatú daganatok kialakulásának örökletes kockázatának felmérésére, a testnedvekben lévő gyógyszerek koncentrációjának monitorozására az egyéni dózismódosítás érdekében. a gyógyszeres, sejtterápiás technológiákat fejlesztették ki és vezették be.

A molekuláris biológia vívmányainak hazai klinikán történő megvalósításához már megérkeztek az első nemzetközi tanúsítványok, korszerű berendezéseket vásároltak fluoreszcens in situ hibridizáció, molekuláris szekvenálás, polimeráz láncreakció (PCR), immunhisztokémia, kromato-tömeg-spektrometria elvégzésére, áramlási citometria, enzim immunoassay.

Victoria Mayorova biológus mintákat készít a PCR-reakcióhoz.

Új fejlesztések

A hólyagrák klinikai lefolyásának prognózisának értékelésére szolgáló módszer a daganat klinikai és morfológiai paramétereinek, valamint az FGFR3 gén molekuláris genetikai állapotának átfogó elemzésén keresztül.

Ezen elemzés alapján létrehozták a hólyagrák patogenezisének molekuláris útvonalainak modelljét. Egy adott mutáció jelenlététől függően a patológia kétféleképpen alakulhat ki: az ún felületi rák alacsony malignitás és kedvező prognózis jellemzi (mutációk az FGFR3 és HRAS génekben); egy agresszívabb izom-invazív rák, amely korán metasztázik, és rossz prognózis jellemzi (mutációk a TP53 és RUNX3 génekben).

Ezzel a módszerrel a betegek egy csoportja nagyon nagy kockázat a betegség progressziója, amelyben a TP53 és a RUNX3 gének mutációit azonosították. Ez fontos a betegség lefolyásának előrejelzéséhez és a kezelés agresszivitásának mértékének meghatározásához. Annak tudatában, hogy a páciens daganata felszínes lesz, a kezelést követően a hólyagot főként kontroll alatt tartják.

Ha a betegség progressziója várható, akkor a metasztázissal kapcsolatban az egyéb állapot belső szervek. Ezenkívül azonosíthatók azok a betegek, akiknél azonnal radikálisan el kell távolítani a hólyagot, különben metasztázisok alakulnak ki.

Nem invazív komplex módszer a molekuláris genetikai és radiodiagnózis prosztata rák.

Ilyen vizsgálatot akkor kell elvégezni, ha a vérben magas prosztata-specifikus antigénnel (PSA) rendelkező beteg kezdeti biopsziája negatív volt. Általában hat hónappal később egy újabb biopsziát végeznek, majd egy másikat (és így tovább 10-15 alkalommal), de ez egy agresszív vizsgálat, ezért olyan megoldásra volt szükség, amely lehetővé teszi, hogy csak egy ilyen beavatkozásra korlátozódjunk. A tudósok megtalálták a módját. A PCA3 onkogén és a kiméra TMPRSS2-ERG gén expressziójának kimutatásával a vizeletben lehetőség nyílik olyan betegek izolálására, akiknek valóban szükségük van biopsziára (a többi késleltethető).

A szövetsebészeti transzplantáció módszerének kidolgozása és megvalósítása légutak daganatos vagy cicatriciális etiológiájú elváltozásaikkal.

Ez körülbelül a 2-5 hónapon belül elhunyt betegek kategóriájáról. Módszert javasoltak a holttestű légcső decellularizációjára, tulajdonképpen mátrix készítésével, majd kondrocitákkal, majd hámsejtekkel való betelepítésével. Ezen túlmenően a technológia lehetővé teszi a légcső revaszkularizációját, majd a betegeknek történő átültetést. Mindez azért történik, hogy a daganat vagy a heg eltávolítása után pótolják a légcső hibáját. Jelenleg 3 műtétet végeztek. Minden beteg több mint hat hónapja él – ez biztató eredménynek számít.

Orvos laboratóriumi diagnosztika Stukalova Irina Vladimirovna és Pischik Natalia Zakharovna vezető laboráns készíti elő az analizátort a humán papillomavírus DNS izolálására.

A Fehérorosz Nemzeti Tudományos Akadémia Genetikai és Citológiai Intézetével közösen a „Tumoros őssejtek (SSC) proteomikai és molekuláris genetikai vizsgálatai” témakört tervezik. colorectalis rák a célzott sejtterápia új módszereinek kidolgozására” (program Uniós állam « őssejt- 2").

Egy 5-fluorouracil-rezisztens vastagbélrák sejtvonal modell segítségével a tervek szerint a COC-ok szerepét tanulmányozzák a tumor progressziójának mechanizmusaiban, valamint vakcina alapú sejtterápiás módszerekkel, dendritikus sejteket, ill. /vagy dendritikus sejtek és limfokin-aktivált gyilkosok. Ez egy új szakasz lesz a rosszindulatú daganatok immunterápiájában.

Igor Severin biológus a tumorsejtvonalak kriobankjában.

Egy másik projekt "A rák kockázatának kimutatására szolgáló technológia kifejlesztése molekuláris genetikai és epigenetikai markerek alapján" (az uniós állam "DNS-azonosítás" programja). A tervek szerint innovatív DNS-technológiát dolgoznak ki a betegség kiújulásának vagy progressziójának kockázatának molekuláris genetikai és epigenetikai markereinek azonosítására vastag- és végbélrákos betegeknél. A szakértők szerint új technológia lehetővé teszi az időben történő megelőző kezelést és megakadályozza a metasztázisok megjelenését.

Ígéretes kutatási terület a szabályozás epigenetikai mechanizmusainak vizsgálata, vagyis olyan folyamatok, amelyek nem befolyásolják a gének szerkezetét, de megváltoztatják azok aktivitási szintjét. Az egyik az RNS interferencia - egy mechanizmus a génexpresszió elnyomására a transzláció szakaszában, amikor az RNS szintetizálódik, de nem jelenik meg fehérjében. És ha megtalálják magas szint valamilyen mikroRNS expresszióját, feltételezhető, hogy probléma van ebben a szervben.

A miRNS géncsalád a teljes emberi genom valamivel több mint 1%-át teszi ki, de az összes gén csaknem egyharmadának expresszióját szabályozza. Számos folyamatban lévő tudományos projekt foglalkozik a miRNS-ek tanulmányozásával különféle daganatok. Az osztály non-invazív diagnosztikai módszert fejleszt csírasejtes daganatok here, a vérben lévő mikroRNS-panel expressziójának meghatározása alapján. Ugyanezt a molekulacsaládot a betegségek diagnosztizálása mellett az onkológiai betegségek lefolyásának előrejelzésére és az egyed kiválasztására használják. drog terápia.

A vizsgálat feladata a markerek azonosítása gyenge előrejelzés(kiválaszthatja az ilyen betegek csoportját, és kiválaszthatja kiegészítő kezelés). Fontos a miRNS-spektrum meghatározása is. Bizonyos kemoterápiás sémákkal szembeni érzékenységet jelez (emlőrákról beszélünk, amelyre egy marker panelt találtak).

A kezelés során a molekuláris jellemzők tanulmányozásával lehetőség nyílik a kezelési rend módosítására, ha további mutációk jelennek meg. A módszert „folyékony” biopsziának nevezik: a vérvizsgálat nyomon követheti a genetikai változásokat, és sokkal korábban utalhat a betegség progressziójára.

A terápiás gyógyszerek drágák és erősen mérgezőek, ezért fontos a gyógyszerrezisztencia korai stádiumban történő meghatározása és pótlása.

A molekuláris profilalkotás magában foglalja az egyes daganatokra jellemző genetikai rendellenességek meghatározását, mivel ismert, hogy ugyanazok a nozológiai formák molekuláris jellemzőikben különböznek egymástól. Tudni molekuláris portré Az onkológiai folyamat lefolyásának előrejelzéséhez és a kezelés egyénre szabásához is szükséges. A daganatos betegek citotoxikus gyógyszerek felírásának és célzott terápiájának személyre szabott megközelítése, figyelembe véve az érzékenység és a toxicitás molekuláris biomarkereit, biztosítja a gyógyszer legpontosabb kiválasztását.

A daganatok molekuláris profilalkotása keretében, a világ publikációiból származó adatok nagyszabású elemzése alapján, az emlőrák, a petefészekrák, a vastagbélrák, a nem-kissejtes tüdőrák és a melanoma biomarkereinek multiplatform paneljeit fejlesztették ki, tervezték. szisztémás daganatellenes terápia kiválasztásához.

Olga Konstantin Kolos vegyész elindítja az oligonukleotidok szintézisét.

Szükséges-e bővíteni a kutatás földrajzát?

Anna Portyanko,

a republikánusok vezetője

molekuláris genetikai

karcinogenezis laboratórium,

orvos med. Tudományok:

A jelenlegi szakaszban a glioblasztómák csoportjából olyan változatokat azonosítottak, amelyekre jellemző eltérő előrejelzés. Morfológiai szempontból könnyű összetéveszteni a glioblasztómát és az anaplasztikus oligodendrogliomát: hematoxilin-eozinnal festve szinte egyformának tűnnek. De köszönöm genetikai tesztek különbségeket találunk. Sőt, patológiai osztályunkon rutinszerűen végzik.

Hasonló módon a limfómák is „szaporodtak”. Például számos limfómát izoláltak a Hodgkin-limfómából molekuláris genetikai vizsgálattal. Korábban a hematoxilin-eozin szövettan alapján Hodgkin limfómának minősítették őket, és amikor megjelent a T-sejt receptor molekuláris genetikai elemzése, kiderült, hogy ez follikuláris T-sejtes limfóma.

Hogyan befolyásolja ez a kezelést? Mindenekelőtt pontosabb előrejelzést lehet adni. Ha valakinek glioblasztómája van, akkor a medián túlélés 1 év, ha pedig anaplasztikus oligodendrogliomáról beszélünk, akkor 10 év.

Kapcsolatokat alakítunk ki a legjobb európai tudományos központok külföldi szakértőivel. A német kollégákkal együtt a proteomika fontos területeit igyekszünk fejleszteni – nem csak egy fehérje elemzését, hanem a proteom egészét. A teljes ciklus létrejött, citológiai preparátumból kiindulva, van egy mikroszkópon alapuló lézeres mikrodisszekciós rendszer, amely lehetővé teszi a tumorsejtek izolálását egy nagy daganatból, majd tömegspektrometriát és meghatározza a tumorban lévő összes fehérje spektrumát. .

Szükséges-e bővíteni a kutatás földrajzát? Úgy gondolom, hogy az országnak elegendő egy ilyen központ - a Köztársasági Karcinogenezis Molekuláris Genetikai Laboratórium -, ahol gyorsan elvégezheti az összes szükséges molekuláris biológiai vizsgálatot (beleértve a szövettani anyag régiókból szerezték be).

Lehetőségünk van nemcsak szövettani diagnosztikára, hanem előzetes diagnosztikára is áramlási citométer segítségével. Szó szerint egy órán belül a személy eltávolítása után A nyirokcsomók, előzetesen meg tudjuk mondani, hogy van-e limfóma (és ha igen, melyik). Ez nagy segítség a klinikusok számára.

Anastasia Pashkevich biológus mintákat tölt be egy genetikai elemzőbe.

Mitől félt Angelina Jolie?

Tanulmányozzuk a daganat kialakulása során fellépő genetikai károsodást – mondja Elena Suboch, a Rákkeltő köztársasági Molekuláris Genetikai Laboratórium onkológiai osztályának vezetője. - A jelenlegi irány az onkológiai betegségek kialakulásának örökletes kockázatainak felmérése. Az örökletes daganatformák az összes onkopatológiák 1-2%-át teszik ki, és itt speciális kezelési rendek ill. műtéti beavatkozás. A familiáris tumorszindrómák azonosításának fontos célja a beteg még egészséges hozzátartozóinak azonosítása, akiknek patogén mutációi vannak. Ennek eredményeként lehetőség van olyan intézkedések kidolgozására, amelyek célja az onkopatológia kedvezőtlen kimenetelének megakadályozása.

Példa hallatszik: Angelina Jolie amerikai színésznő, akinek a BRCA1 génben olyan mutációja van, amely növeli a mellrák kialakulásának kockázatát, radikális műtétre ment, hogy megelőzze egy rosszindulatú daganat kialakulását.

A köztársasági karcinogenezis molekuláris genetikai laboratórium tudósai ezen a patológián dolgoznak.

A Fehérorosz Köztársasági Alaptól kapott támogatásból alapkutatás 2015-2017 között „A BRCA1 és BRCA2 gének mutációs státuszának allélikus megkülönböztetésének rendszere az emberi emlő rosszindulatú daganataiban” című munkát végezték el. Populációs vizsgálatot végeztek, és kiderült, hogy a BRCA1 és BRCA2 gének mutációinak gyakorisága körülbelül 2,5% a nők körében (a mutációk gyakorisági spektruma eltér a szomszédos országok lakosainál megfigyelttől).

Minden populációnak megvan a maga genetikai rendellenességeinek spektruma. A jellegzetes mutációk ismeretében először tesztelheti őket, majd kereshet más lehetőségeket. A tudományos projekt eredménye a BRCA1/BRCA2 gének mutációs státuszának allélikus megkülönböztetésére alkalmas rendszer kifejlesztése volt, valós idejű polimeráz láncreakció segítségével. A fehérorosz nőknél 5 fő mutációt azonosítottak.

Az onkológiai genetikai szakemberek egy nagy számú markert tesztelnek, hogy felmérjék a petefészek, méhnyálkahártya, pajzsmirigy, vese, vastagbélrák, melanoma, polipózis szindrómák.

Napjainkban az agydaganatok és limfómák új nemzetközi osztályozásai léteznek, amelyek kötelező molekuláris genetikai vizsgálatokat igényelnek. Ezért a genetikai és sejttechnológiai osztályokon algoritmust dolgoznak ki az ilyen betegségek biomarkerek segítségével történő diagnosztizálására.

„Ritkán tudunk lemondani a kedvesünkről
klinikai hipotézist, és továbbra is úgy kezelje a betegeket, hogy
hogyan kezelték őket sok évtizeden át...
Mindeközben ideje megváltoztatni a meglévő paradigmákat.”

Richard Schilsky, az ASCO elnöke

„A legsúlyosabb betegségekre a legtöbbet erős gyógyszerek, pontosan alkalmazva..."
Hippokratész

A rákkezelés prognózisa a betegség klinikai stádiumától (TNM), a daganat biológiájától és az elvégzett kezeléstől függ. Modern vívmányok klinikai onkológia tagadhatatlan. Mégis, az új rákellenes gyógyszerek kifejlesztésében elért nyilvánvaló előrelépés ellenére rákos betegek ezrei szednek naponta olyan gyógyszereket, amelyek nem segítenek rajtuk. Egyes betegek számára az empirikus kezelés előnyös és biztonságos. Sok más beteg számára azonban a terápia haszontalan és mérgező is lehet.

A 90-es évek végére. XX. cikk a citotoxikus kemoterápia elérte a határát. A molekuláris biológia fejlődése és a személyre szabott orvoslásra való összpontosítás alapvetően új megközelítést eredményezett a betegek új generációs, molekuláris célzott gyógyszerekkel történő kezelésében. A burjánzás blokádja rákos sejt fő jelátviteli útvonalainak - ligandumok, membránreceptorok, intracelluláris fehérjék - szelektív gátlásával érte el.
Az új megközelítés nyilvánvaló sikerei ellenére azonban a posztgenomikus korszak első évtizedének végén sürgősen szükség volt ennek az új terápiás paradigmának a felülvizsgálatára. nagy mennyiség klinikai kudarcok a szerzett tumorrezisztencia kialakulása miatt.

A célzott terápia céljai és a rezisztencia mechanizmusai
A rák kialakulásának és evolúciójának legholisztikusabb nézetét D. Hanaan és R. Weinberg két tankönyvcikkében mutatta be (Cell, 2000, 2011). A jellemzők alapján a terápia célpontjai nem csak az instabil genomjukkal rendelkező rákos sejtek lehetnek, speciális típus anyagcserét, aktív neoangiogenezist, valamint a növekedési jelek elkerülésére, a keringésben való keringésre és a metasztázisra megszerzett képességet. A terápiás célpontok a tumor mikrokörnyezete, a rákos őssejtek és a metasztatikus kaszkád összes összetevője is kell, hogy legyen.
Nyilvánvalóan egyszerűen lehetetlen egy ilyen programot végrehajtani egy adott beteg kezelési protokollja keretében, még akkor sem, ha több célzott gyógyszer kombinációját alkalmazzák. Egyetlen gyógyszer, még egyedi molekuláris hatásmechanizmussal sem lehet hatékony egy genetikailag heterogén progresszív daganat kezelésében, amelyben többféle rezisztencia-mechanizmus alakul ki és jön létre.
A különböző célzott gyógyszerekkel szembeni rezisztencia sajátos mechanizmusait alaposan tanulmányozták. Ezek közé tartozik az alternatív EGFR útvonalak aktiválása, amelyek elősegítik a sejtek túlélését a gyógyszerkárosodás hatására, az onkogén bypass és az autokrin hurok kialakulása, a membránreceptor extracelluláris doménjének elvesztése (csonkított receptor kialakulása – csonka), kinom átprogramozás, autofágia, epiteliális-mezenchimális átmenet, epigenetikai mechanizmusok stb.
A progresszió során és a terápia hatására további onkogén mutációk jelennek meg a daganatban, megváltozik molekuláris tájképe, genom-instabilitás alakul ki, amit ma már genomi káosznak neveznek (W. George, Jr. Sledge, 2011).
Nemcsak a rákos sejteket jellemzi az egyéniség és a változékonyság. Az epiteliális sejteken kívül a daganathoz kapcsolódó stromában is változások következnek be. A stromasejtek is ki vannak téve a molekuláris evolúciónak, bár genetikailag stabilabb összetevők. szilárd daganat.
jóindulatú stromasejtek mikrokörnyezete immunrendszerés gyulladásos sejtek, szintén befolyásolja a rosszindulatú klón evolúcióját és a terápiával szembeni másodlagos rezisztencia kialakulását.

A heterogenitás, mint a rákellenes terápia hatástalanságának oka

Az alacsony hatásfok fő oka empirikus terápia a tumor heterogenitása.
A hisztológusok évtizedek óta osztályozzák a rákot aszerint morfológiai jellemzők leírva különböző típusok rákos sejtek és kapcsolatuk a tumor stromával.
A molekuláris analízis módszerei, amelyek különösen gyorsan fejlődtek a posztgenomikus korszakban, megmutatták a tumor heterogenitásának valódi mértékét.

Egyéni (intertumorális) heterogenitás
A több ezer gén expressziós szintjének elemzésére szolgáló mikrochip technológia már az elején (2000) lehetővé tette a rák osztályozását emlőmirigy(BCG) luminális A, luminális B, HER/2 és bazális. Valamivel később a molekuláris taxonómia finomítása, hangsúlyozva bazális rák további altípusokat tárt fel. Ezek között vannak Claudin-low (amelyet a mell őssejtekhez hasonló génexpresszió jellemez), a mezenchimális daganatok altípusai (az epiteliális-mezenchimális átmenetet szabályozó gének), az apokrin tumorok altípusai androgén receptor expresszióval és a megfelelő aktiválódással. jelátviteli útvonal, altípusok aktivitási génekkel, amelyek szabályozzák az immunválaszt.
A mellrák további molekuláris vizsgálatai a METABRIC (Molecular Taxonomy of Breast Cancer International Consortium) projekt megvalósításához kapcsolódnak. Azt találták, hogy olyan molekuláris események, mint a pontmutációk, inszerciók, deléciók, amplifikációk, duplikációk, transzlokációk és inverziók befolyásolhatják a tumor genomiális tájképét. Kiderült, hogy mind a karcinogenezissel nem összefüggő gének, mind azok a gének, amelyek mutációi gyakran előfordulnak a rák kialakulása során (GATA3, TP53 és PIK3CA), szomatikus mutációkon eshetnek át. Az emlőrákban a genomkárosodás mellett különböző epigenomikus rendellenességeket (DNS-metiláció), transzkripció és mikroRNS szintű károsodást találtak. Ezen vizsgálatok eredményeként csak a luminális A altípusban további 10 különböző molekuláris integratív klaszter került besorolásra, amelyek befolyásolják a betegség kimenetelét. Azt is megállapították, hogy a BC mind a négy „fő” alosztálya és új „további” molekuláris altípusai eltérő érzékenységi profillal rendelkeznek a rákellenes gyógyszerekkel szemben.
A kezelés jellemzőit befolyásoló molekuláris genetikai osztályozásokat készítenek a gyomorrák, a vastagbélrák, a petefészekrák és más lokalizációk esetében.

Intratumorális (intratumorális) heterogenitás
Az onkológia sokkal nagyobb alapvető problémája az intratumorális heterogenitás. Több szubklón együttélése egy tumorban, különböző molekuláris aberrációkkal és eltérő gyógyszerérzékenységgel, hatástalanná teszi egy sejtfrakció elnyomását a teljes tumorral szemben. További kedvezőtlen tényező a daganat biológiájában bekövetkezett változás a fejlődése során.
Az intratumorális heterogenitást általában térbeli (földrajzi) és időbeli (evolúciós) részekre osztják.
A térbeli heterogenitás magában foglalja a molekuláris genetikai különbségek jelenlétét a daganat egyes régióiban, genetikai különbségeket az elsődleges daganat és metasztázisai között, valamint a különböző anatómiai elhelyezkedésű metasztázisok közötti különbségeket.
A genetikai heterogenitás szintjétől függően monogenomikus (azonos genetikai profilok a különböző földrajzi területeken) és poligenomikus daganatok (különböző osztályokon különböző szubklonális sejtpopulációk) figyelhetők meg.
A tumorfejlődés során a genomban alapvető változások három időpontban következnek be: az in situ rák invazív rákká való átmenetének pillanatában, a primer rák lassú fejlődése során. invazív rákés a metasztatikus progresszió során.
Sok okunk van azt hinni, hogy a rák nyitott, instabil ökoszisztémaként viselkedik, amely a környezeti tényezők – például az immunrendszer működése és a hipoxia – nyomásától függ. Az elsődleges daganat evolúciós (időbeli) heterogenitásának kialakulását a folyamatban lévő daganatellenes kezelés is aktívan befolyásolja.
Egy szolid daganatban mindig van egy ritka, kritikus jelentőségű sejtek szubklónja, amely meghatározza a betegség végső kimenetelét. A páciens halálát leggyakrabban annak a sejtklónnak a szervezetével való érintkezés következtében figyelik meg, amely jelenleg elsődleges diagnózis nem volt domináns, és az összes tumorsejt legfeljebb 1%-át képviselte. Az ilyen sejtek jelenlétét rosszindulatú mielómában, prosztatarákban és más lokalizációjú daganatokban bizonyították. A betegség története során többször elvégzett sorozatos biopsziák elemzése (a pillanattól kezdve elsődleges diagnózis a beteg haláláig) kimutatta, hogy a terápia eredményeként életben maradt sejtek klónja kezdetben nem volt domináns, és más, „alap”, gyorsan burjánzó klónok gyógyszeres eliminációja után alakult ki.
A betegek halálához vezető halálos sejtklón azonosítása és felszámolása szükséges terápiás stratégia.

A tumor heterogenitása sejtszinten
Többség kortárs kutatás molekuláris aberrációkat végeztek a fő tumorpopulációt képviselő sejteken. Ugyanakkor a DNS szerkezeti változásai, amelyek a korai szakaszaiban tumorfejlődés, és a genomi evolúció kitöréseihez vezet (az úgynevezett „nagy mutációs óra”). Ezeknek a módszereknek a hátránya az volt, hogy a kutatási folyamat nem vette figyelembe a ritka szubklónok jelenlétét, amelyek egyedi genetikai mutációkkal rendelkeznek a fő sejtek teljes tömegében. Ezekben a sejtekben történik a pontmutációk fokozatos felhalmozódása, ami hozzájárul a kiterjedt szubklonális genetikai eltéréshez ("kis mutációs órák").
Jelenleg kísérletek folynak ennek a hiányosságnak a kiküszöbölésére (a daganat vizsgálata az egyik vezető rosszindulatú klón szintjén). A molekuláris profilalkotás modern módszerei lehetővé teszik ezt. Kiderült, hogy a daganat az ún. vezetőmutációk és utasmutációk. A meghajtó mutációk szelektív növekedési előnyt biztosítanak az ilyen mutációkat hordozó sejteknek. Az utasok mutációinak nincs ilyen hatása.
Általában csak a meghajtó mutációkat vizsgálták terápiás célpontként. Az utóbbi időben azonban az utasmutációk is felkeltették a kutatók figyelmét, hiszen olyan hatások múlnak rajtuk, mint az immunválasz kiváltása és a proteotoxikus stressz. Az utasok mutációi a rákellenes stratégiák célpontjai is lehetnek.
A genomiális és kromoszómális instabilitású daganatokra jellemző számos mutáció felhalmozódása mutációs krízist eredményezhet. A genomi instabilitás optimális küszöbének túllépése esetén az életképesség megsértése és az egész rendszer elemeinek száma csökken.

Elemzési módszerek daganatszövet
A daganatszövet molekuláris analízisének módszerei rendkívül sokrétűek, és messze túlmutatnak a klasszikus szövettan határain. Ma ezek a módszerek a következők: microarray analízis, Southern blot, Northern blot, Western blot, in situ hibridizáció, polimeráz láncreakció (PCR), valós idejű reverz transzkriptáz PCR, immunhisztokémia, immunfluoreszcens mikroszkópia, maldi-tömegspektrometria.
A tumorsejt-analízis elvégezhető genom szinten (fluoreszcens in situ hibridizáció, spektrális kariotipizálás, összehasonlító genomi hibridizáció), transzkripció (microarray technológia: gén- és RNS expressziós profilozás), proteom (2D gélelektroforézis, tömegspektrometria, felületnövelt lézeres deszorpció) ionizáció TOF módban: mátrix technológia + tömegspektrometria).
A tumorszövetek molekuláris tomográfiája lehetővé teszi a fehérjék, peptidek, gyógyszervegyületek, metabolitok, valamint prediktív molekuláris biomarkerek térbeli eloszlásának megjelenítését.
A molekuláris elemzésnek magában kell foglalnia az elsődleges szilárd tumorszöveteket, a megvalósult hematogén áttétek szöveteit (gyorsan növekvő és klinikailag jelentős), valamint a keringő daganatsejteket és a keringő tumor DNS-t (a „alvó” metasztázisok jelenlétét jelzi). A tumor- és metasztázisbiopsziát ugyanannak a szilárd daganatnak különböző földrajzi helyeiről kell venni. Úgy gondolják, hogy a folyékony biopszia informatívabb (és biztonságosabb).

Az empirikustól a személyre szabott terápiáig
A daganat nyitott instabil biológiai rendszer, nemcsak az egyéni heterogenitást mutatja, hanem megváltoztatja molekuláris jellemzőit is az evolúció során, és különösen a metasztatikus progresszió során. Mind a szolid tumorsejtek fő és nem domináns klónjai, mind a tumor mikrokörnyezet sejtjei változásokon mennek keresztül.
Az összes tumorsejt proliferációjának elnyomására stratégiát alkalmaznak kombinált terápia. A kombinált (egyidejű vagy szekvenciális) kezelés koncepcióját először Goldie és Coldman javasolta több mint 30 évvel ezelőtt. A koncepció egyesítette az olyan fogalmakat, mint a tumor növekedése, a mutációk gyakoriságának növekedése, rezisztens sejtklónok megjelenése és a rezisztencia kialakulása.
A mai stratégia modern terápia a rák magában foglalja a citosztatikumok, citosztatikumok és célzott gyógyszerek kombinációinak használatát, sőt két célzott gyógyszer (tirozin-kináz inhibitorok és monoklonális antitestek) kombinációját is. Ez a stratégia a tumorszuppresszión alapul olyan gyógyszerekkel, amelyek alapvető, gyorsan burjánzó sejtek halmazára hatnak. Életciklus ezen sejtek közül a vezetőmutációk aktivitása határozza meg. Általánosságban elmondható, hogy a rendszer stabilitását számos tényező magyarázza, köztük az utasmutációk aktivitása, amelyek szerepét a terápiás protokollok nem veszik figyelembe.
A személyre szabott terápia stratégiája, amely ma a rákellenes kezelés fő paradigmája, figyelembe veszi a teljes "tumormező" folyamatosan változó tájképét: az elsődleges szolid tumor klónjainak heterogenitását, a keringő daganatsejtek heterogenitását, valamint mint a „alvó” rákos sejtek fenotípusos és metabolikus heterogenitása számos metasztatikus résben. csontvelőés zsigeri szervek.

Caris Molecular Intelligence Services
Az egyéni prediktív tumormarkerek azonosításának ötlete, amelyek előre jelezhetik a daganatellenes terápia eredményeit, 2008-ban merült fel, amikor Daniel D. Von Hoff professzor megalkotta az egyedülálló Caris Molecular Intelligence Services (USA) laboratóriumot. Ma a tumorszövetek laboratóriumi molekuláris profilálásához a módszerek kombinációját alkalmazzák - IHC, CISH, FISH, következő generációs szekvenálás, Sanger szekvenálás, piroszekvencia, PCR (cobas ®), fragmenselemzés.
Ebben a laboratóriumban évek óta 65 000 betegen végeznek molekuláris tomográfiát, akiknél több mint 150 rosszindulatú daganat hisztopatológiai altípusa van. Komplex megközelítés nem egy módszer (például csak immunhisztokémiai), hanem molekuláris módszerek kombinációja alapján lehetővé teszi egy adott beteg egyéni prediktív tumormarkereinek azonosítását, és ezen elemzés alapján a személyre szabott terápiával kapcsolatos döntések meghozatalát.
Egyes fehérjék kifejeződése (vagy génamplifikáció) megfelelő gyógyszerek felírását igényli, más fehérjék expressziója kizárja egy adott gyógyszer felírását. Így a TOPO1 expresszió előnyösebb irinotekán, RRM1 expresszió a gemcitabin felírásakor, MGMT expresszió az alapja a temozolomid vagy dacarbazin felírásának, a TOPO2A expresszió a HER2 egyidejű amplifikációjával lehetővé teszi a doxorubicin, illetve liposubicinx, illetve liposubicinx terápiát.
A trastuzumab felírásához a HER/2 expresszió/amplifikáció kimutatása mellett a gyógyszerrezisztencia előrejelzése érdekében a PTEN (IHC) és a PIK3CA (NGS) vizsgálata is szükséges.
Másrészt a TS expressziójához a fluorouracil, capecitabin, pemetrexed kerülése szükséges; SPARC (IHC), TLE3 (IHC), Pgp (IHC) expressziójához a docetaxel, paclitaxel, nab-paclitaxel kerülése szükséges.
A tumormarkerek olyan kombinációjával, mint az ER (IHC), HER2 (IHC), HER2 (CISH), PIK3CA (NGS), everolimusz és temszirolimusz nem írható fel.
A biológiai képalkotás modern módszereinek kombinációja lehetővé teszi a molekuláris prediktív tumormarkerek azonosítását a klinikai onkológiában ma használt minden ismert citozatikus vagy célzott gyógyszer esetében. Egy ilyen megközelítés, amely először a tumorszövetek molekuláris profilalkotásán, a benne lévő egyéni prediktív tumormarkerek azonosításán, majd csak azután a kezelési stratégiai terv kidolgozásán alapul, számos klinikai vizsgálatban bizonyítékot nyert. Az egyik a Bisgrove-tanulmány, amelybe a TGen, a Scottsdale Healthcare és a Caris Dx is beletartozott.
Ennek a tanulmánynak a terve forradalmi volt. Tekintettel arra, hogy minden daganat egyedi, a vizsgálati terv szerzői megtagadták a betegek véletlenszerű besorolását több csoportba a daganat anatómiai elhelyezkedése vagy csak egy immunhisztokémiai jellemző alapján. NÁL NÉL ez a tanulmány nem voltak összehasonlító csoportok – minden beteg saját kontrolljaként működött.
A vizsgálatban összesen 66 beteg vett részt 9 amerikai rákos központból: 27% - emlőrák, 17% - CRC, 8% - OC, 48% - egyéb lokalizáció. A vizsgálatba való bevonás előtt minden beteg kapott áttétes rák kezelést az általánosan elfogadott szabványok szerint – összesen 2-6 vonalat. Az utolsó progresszió után a terápia molekuláris profilozáson alapuló folytatása.
A vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy a progresszióig eltelt idő a BC-ben szenvedő betegeknél 44%-kal, CRC-ben - 36%-kal, OC-ban - 20%-kal, más lokalizációjú betegeknél 16%-kal nőtt. Meg kell jegyezni, hogy a vizsgálatba való felvétel időpontjában minden betegnél másodlagos rezisztencia alakult ki a gyógyszeres terápiával szemben, és általánosan elfogadott ajánlásokat fogalmaztak meg további kezelés nem volt. Így arra a következtetésre jutottak, hogy az agresszív, ritka daganatok, valamint a kialakult rezisztenciával rendelkező progresszív daganatok esetében nincs alternatíva a molekuláris profilalkotásnak és a kezelés személyre szabásának.

A klinikai vizsgálatok tervének megváltoztatása
Külön meg kell jegyezni, hogy a személyre szabott terápia paradigmája az onkológiában aktívan megváltoztatja a klinikai vizsgálatok általánosan elfogadott felépítését. Egyre több hang szólal meg arról, hogy a randomizáción és a betegek több populációba és kohorszba történő rétegződésén alapuló klinikai vizsgálatok eredményeit felül kell vizsgálni, hogy figyelembe vegyék az egyéni intra- és intertumorális heterogenitást. Ennek eredményeként a modern klinikai vizsgálatok tervezése egyre inkább személyre szabott.
Ilyen legújabb modern tervek például a Master protokollok, a Basket trials, az adaptív próbatervezés és végül az N-of-1 vizsgálatok. Az új tervek mögött meghúzódó fő gondolat a következő. A tanulmány szponzorai több gyógyszergyártó cég, amelyek különböző célpontú és eltérő molekuláris hatásmechanizmusú gyógyszerekkel rendelkeznek az ilyen lokalizációjú rák kezelésére. A betegeket a tumor esetlegesen teljes molekuláris profilalkotása után vonják be a vizsgálatba. Egy vizsgálatban részt vevő páciens, a megfelelő célfehérjék elérhetőségétől függően, váltakozva kaphatja a legtöbbet hatékony gyógyszerek. A terápia során elvégezhető a gyógyszer dózis szerinti egyéni adaptálása, vagy kombinációból koktélkeverék alkalmazható. különféle gyógyszerek, amelynek szükségessége a kezelés során felmerült. A daganat progressziója és toxicitása nem indokolja a kezelés leállítását, csak a terápia típusának megváltoztatását. A klinikai döntést befolyásolják a tumor molekuláris profilalkotásának eredményei, amelyet közvetlenül a tumor progressziója vagy a következő terápia után végeznek el. Így a vizsgálat során a páciens egészen más gyógyszert kaphat, amit eredetileg felírtak neki.
Végezetül, már csak egy beteggel végzett kísérletek – az 1-ből N-vizsgálat. Ez a kialakítás illik leginkább a személyre szabott terápiás paradigmához. Egy ilyen megközelítés lehetővé teszi a közeljövőben létrehozását egyéni előkészületek rákterápiára.
Azonban még ma is széles körben alkalmazzák a daganat molekuláris profilalkotásán alapuló, személyre szabott terápiás protokollokat klinikai gyakorlat vezető rákkutató központok az USA-ban, Európában és Japánban, lehetővé téve, hogy megkapja klinikai eredményekúj szint. Ilyen globális központok közé tartozik a Memorial Sloan-Kettering Cancer Center, a Harvard Személyre szabott Genetikai Orvostudományi Központja, MD Anderson Személyre szabott Orvostudományi Intézete, az Ohio Állami Egyetem Személyre szabott Egészségügyi Központja.
2014 januárja óta elérhető Ukrajnában a tumorszövetek molekuláris profilalkotása a Caris Molecular Intelligence Services platformon. Ez az Amaxa Pharma (AmaxaPharma) cégnek köszönhetően vált lehetségessé, amely a Caris Life Sciences hivatalos partnere a daganatszövetek molekuláris profilozásának területén Kelet-Európában. 2014 januárja óta ennek az együttműködésnek köszönhetően több tucat olyan ritka daganatban szenvedő beteg, akikre nem léteznek szabványos terápia, valamint primer és szerzett kemorezisztenciával rendelkező rákos betegek már átestek Molekuláris Intelligencia molekuláris profilalkotáson Ukrajnában. Megszületnek az első eredmények, amelyek jelentősen eltérnek az empirikus megközelítés eredményeitől.
A molekuláris profilalkotás hazánkban való megvalósításának lehetősége lehetővé tette, hogy közel kerüljünk a személyre szabott rákkezelés problémájának megoldásához.

Következtetés
A tumor heterogenitása mélyreható klinikai következményekkel jár a rákos betegek számára. A helyes klinikai döntések meghozatalához a legteljesebb képre van szükség a rákos sejt biológiájáról és mikrokörnyezetéről. A primer tumorszövetek, a hematogén áttétek, a keringő daganatsejtek és a metasztatikus rés sejtjeinek molekuláris profilalkotása nagy lépést tehet egy személyre szabott rákkezelési program megvalósítása felé.

STATISZTIKÁK TÉMÁNKÉNT Onkológia és hematológia

06.01.2019 Onkológia és hematológia A petefészekrák Promeneva diagnózisa: A jelenlegi diagnosztikai képek lehetősége A micafungin alkalmazása hematológiában

Invazív gombás fertőzések(IGI) növelik a morbiditást, a mortalitást, a kórházi kezelés időtartamát és a kapcsolódó költségeket súlyos immunhiányos hematológiai betegeknél. Ezek a betegek nagyszámú az IHI egymással összefüggő kockázati tényezői, mint például károsodott anatómiai gátak, az immunválasz elnyomása, kemoterápia által kiváltott neutropenia, vese- vagy májelégtelenség, hiperglikémia és graft versus-host betegség, valamint széles spektrumú antibiotikumokkal vagy kortikoszteroidokkal végzett kezelés, elhelyezés központi vénás katéterek....

06.01.2019 Onkológia és hematológiaÜléshatározat a thrombocytopenia problémájával az onkológusok és hematológusok gyakorlatában foglalkozó szakértők érdekében

A thrombocytopenia betegségek és szindrómák csoportja, amelyet egy közös jel egyesít: a vérzéses szindróma megnyilvánulása, amely a perifériás vérben a vérlemezkék számának csökkenése következtében alakul ki.<150×109/л....

Forrás: A harmadik éves orosz rákellenes konferencia anyaga
1999. november 29. - december 1., Szentpétervár

A MOLEKULÁRIS DIAGNÓZIS KIVÁLÁSAI AZ ONKOLÓGIÁBAN. K.P. Hanson
Onkológiai Kutatóintézet. prof. N.N. Petrova

Az elmúlt évtizedekben a genetika és a molekuláris biológia terén elért eredmények óriási hatással voltak a rosszindulatú daganatok kezdeti állapotának és progressziójának megértésére. Végre megállapítást nyert, hogy a rák heterogén betegségek csoportja, amelyek mindegyikét genetikai rendellenességek komplexe okozza, amelyek meghatározzák az ellenőrizetlen növekedés tulajdonságát és a metasztázis képességét. Ez a modern tudás alapvetően új lehetőségeket nyitott a rosszindulatú daganatok diagnosztizálásában és kezelésében.

A tumornövekedés hátterében álló specifikus genetikai rendellenességek hatása lehetővé tette specifikus molekuláris markerek kimutatását, és ezek alapján korai daganatdiagnosztikai tesztek kidolgozását.

Ismeretes, hogy a sejtek neoplasztikus transzformációja a proto-onkogén vagy szupresszor gének öröklött (csíra) és szerzett (szomatikus) mutációinak felhalmozódása következtében következik be. Ezek a genetikai rendellenességek elsősorban a rosszindulatú sejtek kimutatására használhatók a klinikai anyagokban.

A molekuláris diagnosztika legalkalmasabb szubsztrátja a DNS, mert szövetmintákban hosszú ideig tárolódik és könnyen szaporítható az ún. polimeráz láncreakció (PCR). Ez lehetővé teszi a diagnosztika elvégzését még minimális mennyiségű vizsgálati anyag jelenlétében is.

Az onkogének és a szupresszor gének mutációinak meghatározása mellett diagnosztikai célokra olyan változásokat alkalmaznak, amelyeket ismétlődő DNS-szekvenciákban mutatnak ki, az ún. mikro műholdak.

A tumor és a normál szövetek páros mintáinak összehasonlításakor a daganat egyik allélja elveszhet (a heterozigótaság (LH) elvesztése), ami a szupresszor gének inaktivációja mögött meghúzódó kromoszómális deléciók jelenlétét tükrözi.

A mellrák (BC) az egyik leggyakoribb onkológiai betegség Ukrajnában. Az Ukrajna Nemzeti Rákregisztere szerint a mellrák standardizált előfordulása 2009-ben 60,5 eset/100 000 nő. Bár az emlőmirigy rosszindulatú daganatos megbetegedésének előfordulása folyamatosan növekszik, az ezekből eredő halálozás csökkenő tendenciát mutat.

A BC a daganatok heterogén csoportja, amelyek morfológiájában, klinikai lefolyásában és kezelési érzékenységében különböznek. Mindazonáltal még a szövettanilag hasonló daganatok is eltérő természeti anamnézissel rendelkeznek, ami az emlőrák morfológiai besorolásának bizonyos korlátozottságából adódik. Az emlőráksejtek génexpressziójának és fenotípusos megnyilvánulásokkal való összefüggésének vizsgálata lehetővé tette az emlőrák számos biológiai altípusának azonosítását, amelyek meghatározzák a daganat természeti anamnézisét, klinikai, patológiai és molekuláris tulajdonságait, valamint kulcsfontosságú tényezők. amelyek előre meghatározzák a lefolyás prognózisát és a szisztémás gyógyszeres terápia hatékonyságát. Az időigényes és költséges genetikai elemzési módszerek alkalmazása a mindennapi klinikai gyakorlatban lehetetlen. A génexpresszió és az immunhisztokémiai markerek közötti összefüggés vizsgálata a daganatban lehetővé tette az emlőrák számos úgynevezett molekuláris altípusának azonosítását, amelyek meghatározása a rutin klinikai gyakorlatban lehetséges. Az ösztrogén és progeszteron receptorok (ER és PR), valamint az epidermális növekedési faktor 2 receptor (Her2/neu, ErbB2) emlőkarcinóma sejtek általi expressziójának immunhisztokémiai vizsgálata alapján az emlőrák 4 egymástól eltérő molekuláris altípusba sorolható. a lefolyás prognózisa és a gyógyszeres terápiára adott válasz szerint. Az emlőrák molekuláris altípusait, amelyek alapvető klinikai jelentőséggel bírnak, a táblázat mutatja be. egy.

Asztal 1. Az emlőrák molekuláris altípusainak immunhisztokémiai fenotípusa

Az emlőráknak luminális, HER2+ és tripla negatív (TN) molekuláris altípusai vannak. A luminális daganatok azok, amelyek ER és PR receptorokat expresszálnak, és a Her2/neu expressziójától függően A-ba (nem expresszálnak Her2/neu-t) és B-be (Her2/neu-t expresszálnak). A HER2+-t Her2/neu-túlexpresszióval és ER és PR hiányával járó daganatoknak nevezik. Azokat a daganatokat, amelyek a fenti 3 jelre negatívak, TN-nek (bazális-szerű) BC-nek nevezzük. Megállapítást nyert, hogy a luminális típusok kevésbé agresszív lefolyással és jó prognózissal járnak, mint a HER2+ és a TN BC. A TH altípus magas mutációs rátával társul BRCA1, agresszív lefolyás, a hormonterápiára és a trastuzumabra adott válasz hiánya, alacsony általános és betegségmentes túlélés.

Az immunhisztokémiai markerek és a daganat gyógyszeres kezelésre való érzékenysége közötti összefüggés jól ismert, és az emlőrák adjuváns kezelésének klinikai irányelveinek alapja. A molekuláris altípusok és az emlőrák klinikai és biológiai jellemzői közötti kapcsolatot értékelő tanulmányok száma azonban korlátozott.

Ennek a populációs vizsgálatnak a célja az emlőrákos betegek prevalenciájának, klinikai és morfológiai jellemzőinek, általános és relapszusmentes túlélésének tanulmányozása a molekuláris portrétól függően.

Anyagok és metódusok

Beteg kiválasztása

A vizsgálatban 350, 23 és 76 év közötti (átlagéletkor 53 ± 1,7 év) mellrákos beteg vett részt, akiket az Országos Orvostudományi Egyetem Onkológiai Tanszékének A.A.-ról elnevezett klinikáján kezeltek. Bogomolets a Kijevi Városi Klinikai Rákkutató Központ sebészeti osztályán 2005. január 1-től 2006. december 31-ig.

Minden betegnél feljegyezték a diagnózis idején fennálló életkorát, a menstruációs funkciót, meghatározták a daganat méretét, szövettani típusát és differenciálódási fokát, valamint a regionális nyirokcsomókban (RLN) lévő metasztázisok jelenlétét.

A tumor méretét a maximális átmérő mérése után határoztuk meg, és a Nemzetközi TNM osztályozás (5. kiadás, 1997) szerint T1-be (<2 см), Т2 (2–5 см), Т3 (≥5 см). Отсутствие менструаций у больных в течение 1 года до момента установления диагноза расценивалось как менопауза. Гистологический тип и степень дифференциации опухоли определяли в соответствии с национальными стандартами диагностики и лечения злокачественных новообразований, основанных на рекомендациях ведущих международных организаций. Для оценки метастатического поражения РЛУ из послеоперационного материала макроскопически отбирали 10 подозреваемых на наличие метастазов лимфатических узлов, из которых готовили гистологические препараты для микроскопического изучения.

A BC molekuláris altípusait az ER, PR és Her2/neu expressziójára vonatkozó immunhisztokémiai vizsgálatok eredményei alapján határoztuk meg. Az összes daganatot 4 altípusra osztották: luminalis A (Luminal A) - ER+ és/vagy PR+, Her2/neu-, luminalis B (Luminal B) - ER+ és/vagy PR+, Her2/neu+, HER2+ (ER- és PR-). , Her2/neu+), TH (Triple negatív) - ER- és PR-, Her2/neu-.

Minden beteg adjuváns szisztémás és sugárterápiában részesült az emlőrák kezelésére vonatkozó nemzeti szabványoknak megfelelően. Azonban a Her2/neu túlzott expressziója miatt a vizsgálatba bevont betegek egyike sem kapott adjuváns trastuzumabot.

Immunhisztokémiai vizsgálat

Paraffin blokkokból 4-5 mikron vastag metszeteket készítettünk, amelyeket poli-L-lizinnel előkezelt tárgylemezekre helyeztünk. Ezután az anyagot az általánosan elfogadott standard módszer szerint vizsgáltuk a következő antitestek felhasználásával: ER - klón 1D5, PgR - klón 636, Her2/neu - klón CB11.

Az immunhisztokémiai reakció eredményeinek értelmezése a nukleáris reakció kvalitatív értékelésével történt: negatív "-", gyengén pozitív "+", közepesen pozitív "++", kimondottan pozitív "+++" - és kvantitatív rendszer. a reakció értékelésére a festett tumorsejtek százalékában.

A Her2/neu expressziójának meghatározásakor a citoplazmatikus membrán színének súlyosságát vették figyelembe: a reakció "-", "+" - a túlzott expresszió hiánya, a "+++" reakció - a Her2/neu túlzott expressziója. . A Her2/neu túlzott expresszió jelenlétét „++” reakció esetén hibridizációs módszerrel határoztuk meg. in situ fluoreszcens FISH (fluoreszcencia in situ hibridizáció - fluoreszcens in situ hibridizáció). A vizsgálatokat a Kijevi Városi Klinikai Rákkutató Központ kórszövettani laboratóriumában végezték (a laboratórium vezetője - az orvostudományok doktora L. M. Zakhartseva).

Statisztikai analízis

A BC molekuláris típusainak klinikai és biológiai jellemzői közötti különbségek statisztikai szignifikanciáját egyutas varianciaanalízissel (ANOVA) értékeltük. A különbségeket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük a szignifikancia szinten (p)<0,05.

A teljes és betegségmentes túlélést Kaplan-Meier módszerrel határoztuk meg.

Minden statisztikai számítást az MS Excel programmal végeztem.

eredmények

A vizsgálat eredményeként az ER, PR és Her2/neu expresszió immunhisztokémiai vizsgálatainak adatai alapján minden beteget 4 csoportba osztottak: luminalis A - 152 (57,5%) beteg, TN - 49 (26,5%), luminális B - 28 (9%) és HER2+ - 15 (7%) nő.

Az emlőrák különböző molekuláris típusainak klinikai és biológiai jellemzőit a táblázat mutatja be. 2.

2. táblázat. Az emlőrák molekuláris altípusainak klinikai és biológiai jellemzői

Megjegyzések: *lebenyes ductalis karcinóma; **nyálkahártya, medulláris, papilláris karcinóma.

Nem volt statisztikailag szignifikáns különbség a betegség stádiumában a vizsgált csoportok között, ami a betegek e kritérium szerinti csoportok szerinti homogén megoszlását jelzi.

Az emlőrák különböző molekuláris altípusainak kimutatási gyakorisága statisztikailag szignifikánsan függ a következő klinikai és morfológiai jellemzőktől: életkor és menstruációs funkció a diagnózis idején, szövettani típusa és a tumor differenciálódás mértéke. A 40-49 éves betegeknél szignifikánsan gyakrabban diagnosztizálják az emlőrák HER2+ és TN altípusait (az esetek 34,5, illetve 34%-a). A molekuláris típusú TN-ben szenvedő betegek csaknem felénél (48%) premenopauzában diagnosztizáltak. Azoknál a betegeknél, akik a diagnózis idején menopauzában voltak, a luminális A (63%) és a luminális B (68%) típusú BC gyakoribb, mint mások.

Ezenkívül statisztikailag szignifikáns különbségeket figyeltek meg az immunhisztokémiai altípusok között a különböző szövettani típusok és a tumor differenciálódás mértéke tekintetében. A luminalis A (19%) és a TN (16%) típusban gyakrabban diagnosztizáltak lebenyes carcinomát. Ductális emlőrákot az esetek 84, illetve 92%-ában regisztráltak a HER2+ és a luminalis B molekuláris altípusok esetében. A lebenyes ductális, nyálkahártya, medulláris és papilláris karcinómák egyformán gyakoriak a luminalis és a TN típusú emlőrákban, de ez a vizsgálat egyetlen esetet sem rögzített a fenti szövettani variánsokból HER2+ típusban. A vizsgált csoportokban azonos gyakorisággal határoznak meg erősen differenciált (G1) daganatokat. A közepesen differenciált (G2) emlőkarcinómák a luminalis A (82%) és B (86%), valamint a HER2+ (80%) típusokra jellemzőek. A TN BC csoportba tartozó betegek 28%-ánál gyengén differenciált (G3) daganatot találtak.

Az emlőrák immunhisztokémiai fenotípusa és az elsődleges daganat mérete, valamint az RDR státusza között statisztikailag szignifikáns kölcsönhatást nem állapítottak meg, ami a betegség stádiumával együtt a betegek egyenletes eloszlását jelzi a vizsgálatban. csoportok e mutatók szerint.

A különböző molekuláris típusú emlőrákban szenvedő betegek 5 éves teljes és relapszusmentes túlélési elemzésének eredményeit az 1. ábra mutatja. 1. és 2., valamint a táblázatban. 3, illetve 4.

Rizs. egy.

Rizs. 2.

3. táblázat A betegek teljes túlélése az emlőrák molekuláris típusától függően

4. táblázat A betegek relapszusmentes túlélése az emlőrák molekuláris típusától függően

A teljes túlélés a luminalis A típusú (74%) típusú emlőrákban szenvedő betegeknél a legmagasabb, a HER2+-ban és a luminalis B-ben szenvedő betegeknél a legalacsonyabb (58, illetve 57%).

Az 5 éves betegségmentes túlélés rosszabb a luminalis B és TN emlőrákos betegeknél (42, illetve 45%), mint a luminális A immunhisztokémiai altípusú betegeknél.

Vita

A vizsgálat eredményei megerősítik az emlőrák variabilitását, amely e nozológiai forma különböző molekuláris típusainak jelenlétéből áll. A mindennapi klinikai gyakorlatban egyre gyakrabban alkalmazzák az emlőrák biológiai altípusokra való felosztását, amelyeknek saját természetük van, mivel ez lehetővé teszi a betegség lefolyásának prognózisának meghatározását, és kulcsfontosságú tényező a szisztémás gyógyszeres kezelés taktikájának megválasztásában. terápia. A molekuláris típusokba való besorolás azonban nem helyettesíti, hanem kiegészíti a fontos hagyományos prognosztikai kritériumokat, mint például az életkor és a menstruációs funkció a diagnóziskor, a tumor mérete és differenciálódása, az RLN metasztázisok jelenléte és a társbetegségek azonosítása.

Az ER, PR és Her2/neu expressziójának immunhisztokémiai értékelése alapján végzett emlőrák molekuláris típusainak meghatározása olcsó és meglehetősen informatív, ugyanakkor leegyszerűsített diagnosztikai módszer. Az új markerek bevezetése miatt a molekuláris osztályozás változáson megy keresztül, ami lehetővé teszi a prediktív megbízhatóság növelését. Így például a sejtek magas mitotikus aktivitása esetén (Ki-67 >14%) a luminális A fenotípusú daganatokat a St. Gallen Kongresszus emlőrák kezeléséről szóló ajánlásai (2011) szerint a luminális B Her2/neu-negatív molekuláris altípus. A luminalis B Her2/neu-negatív típusú emlőrák izolálásának szükségességét ezeknek a daganatoknak a természetes anamnézise diktálja, amely jobban hasonlít a luminalis B, mint a luminalis A daganatok természetes történetéhez. Ezért az ER+ és/vagy PR+, Her2/neu- mellrákos betegeknél, akiknél a daganat magas mitotikus aktivitása van, ami a betegség lefolyásának rossz prognózisát meghatározza, adjuváns polikemoterápián esik át az antihormonális terápia előtt.

Az ebben a populációs vizsgálatban kapott eredmények azt mutatják, hogy az ER, PR és Her2/neu expressziójának immunhisztokémiai értékelése alapján meghatározott különböző molekuláris típusú emlőrák kimutatási gyakorisága nem azonos. A BC leggyakoribb molekuláris altípusa a luminális A (57,5%), ezt követi a TN (26,5%), ezt követi a luminális B (9%) és a HER2+ (7%) típus.

Luminalis Az immunhisztokémiai típusú emlőrákot a legtöbb esetben 50 év feletti, menopauzában lévő betegeknél diagnosztizálják. Az emlőrák ezen változatát a többinél gyakrabban jellemzi lebenyes szövettani típus és mérsékelt fokú tumordifferenciálódás. Az e molekuláris típusú emlőrákban szenvedő betegek 5 éves teljes és relapszusmentes túlélése a legmagasabb, 74, illetve 62%-ot tesz ki.

A TN BC gyakrabban észlelhető 40-60 éves betegeknél, függetlenül a menstruációs funkció állapotától, az esetek 16%-ában lebenyes szövettani típus jellemzi, 28%-ban ezek a daganatok rosszul differenciáltak. A luminális A típusúhoz képest a TN BC-ben szenvedő betegeknél az 5 éves teljes és recidívamentes túlélés alacsonyabb, és 60, illetve 45%-ot tesz ki.

A luminális B molekuláris típust, akárcsak a luminális A-t, gyakrabban diagnosztizálják 50 év feletti posztmenopauzás nőknél. Az esetek több mint 80%-a mérsékelten differenciált ductalis karcinóma. A luminális B BC-ben szenvedő betegeknél a legalacsonyabb az 5 éves teljes és recidívamentes túlélés, 58, illetve 42%.

A HER2+ típus a TH-hoz hasonlóan gyakrabban fordul elő 40-60 éves betegeknél, függetlenül a menstruációs funkció állapotától, és szinte mindig közepesen differenciált karcinóma. Az 5 éves általános és a kiújulásmentes túlélési arány azonos, 57%.

Tehát az emlőrák prognózisát tekintve legkedvezőbb molekuláris altípusa a luminalis A. A luminális B és HER2+ típusok kedvezőtlen klinikai lefolyása a trastuzumab terápia hiányára vezethető vissza.

Felhasznált irodalom jegyzéke

1. Bulletin of the National Cancer Registry No. 12. Rák Ukrajnában, 2009–2010, Kijev: 2011.

2. Perou C.M., Sorlie T., Eisen M.B. et al. (2000) Emberi emlődaganatok molekuláris portréi. Nature, 406(6797): 747–752.

3. Sorlie T., Perou C.M., Tibshirani R. et al. (2001) Az emlőkarcinómák génexpressziós mintázata klinikai vonatkozású daganat-alosztályokat különböztet meg. Proc. Natl. Acad. sci. USA, 19(98): 10869–10874.

4. Sorlie T., Tibshirani R., Parker J. et al. (2003) Emlőtumor altípusok ismételt megfigyelése független génexpressziós adatkészletekben. Proc. Natl. Acad. sci. USA, 14(100): 8418–8423.

5. Sotiriou C., Neo S.Y., McShane L.M. et al. (2003) Az emlőrák osztályozása és prognózisa egy populációalapú vizsgálat génexpressziós profilja alapján. Proc. Natl. Acad. sci. USA, 18(100): 10393–10398.

6. Carey L.A., Perou C.M., Livasy C.A. et al. (2006) Race, mellrák altípusok és túlélés a Carolina Breast Cancer Study-ban. JAMA, 21(295): 2492–2502.

7. Foulkes W.D., Stefansson I.M., Chappuis P.O. et al. (2003) Germline BRCA1 mutációk és bazális epiteliális fenotípus emlőrákban. J. Natl. Cancer Inst., 19 (95): 1482–1485.

8. Liu H., Fan Q., Zhang Z. et al. (2008) A Basal-HER2 fenotípus rosszabb túlélést mutat, mint a bazális fenotípus a hormonreceptor-negatív invazív emlőrákokban. Zümmögés. Pathol., 2 (39): 167–174.

9. Goldhirsch A., Wood W.C., Coates A.S. et al. (2011) Stratégiák az emlőrák sokféleségével foglalkozó altípusokhoz: a St Gallen-i Nemzetközi Szakértői Konszenzus a korai emlőrák elsődleges terápiájáról 2011 kiemelt témái. Ann. Oncol., 8(22): 1736-1747.

Az emlőrák molekuláris típusai, immunhisztokémiai markerek alapján: klinikai és biológiai jellemzők és prognózis

I.B. Shchepotin¹, O.S. Zotov¹, R.V. Lubota¹, M.F. Anikusko², I.I. Lubota²

¹ Országos Orvostudományi Egyetem, amelyet O.O. Bogomoltsya, Kijev

2 Kijevi Városi Klinikai Onkológiai Központ

Összegzés. A mellüreg rákja a puffadások heterogén csoportja, amelyet az etiológia, a morfológiai kép, a klinikai túlkapás és az elvégzett kezelésre való érzékenység figyelembe vesz. Ennek a populációs vizsgálatnak a módszere az emlőrákos betegségek kiterjedésének, klinikai és morfológiai jellemzőinek, általános és betegségmentes túlélésének kialakításához vezetett ugar molekuláris típusban. 350 emlőrákos beteget kezeltek 23 és 76 év között (középkor - 53 ± 1,7 év), őket az Országos Orvostudományi Egyetem Onkológiai Klinikájának O.O.-ról elnevezett klinikáján kezelték. Imádság a Kijevi Moszkvai Klinikai Rákkutató Központ sebészeti osztálya alapján 2005–2006-ban. Statisztikailag szignifikáns különbségek az emlőrák molekuláris típusa és a klinikai és morfológiai jellemzők között, valamint: a menstruációs funkció kora és állapota a diagnózis idején, a duzzanat szövettani típusa és differenciálódási stádiuma, valamint a teljes és betegségmentes túlélés kiderültek.

Kulcsszavak: mellkasrák, molekuláris típusok, a leküzdés prognózisa, klinikai és morfológiai jellemzők.

Az emlőrák immunhisztokémiai markerek alapján megállapított molekuláris típusai: klinikai és biológiai jellemzők és prognózis

I.B. Schepotin¹, A.S. Zotov¹, R.V. Liubota¹, N.F. Anikusko², I.I. Liubota²

¹A.A. Bogomolets Nemzeti Orvostudományi Egyetem, Kijev

2 Kijev önkormányzati klinikai onkológiai központ

összefoglaló. A mellrák (BC) a daganatok heterogén csoportja, amelynek etiológiája, morfológiai mintázata, klinikai lefolyása és a kezelésre való érzékenysége eltérő. A tanulmány célja a BC betegek populációs prevalenciájának, klinikai és morfológiai jellemzőinek, általános és betegségmentes túlélésének vizsgálata volt molekuláris típustól függően. A vizsgálatban 350, 23 és 76 év közötti BC-s beteg vett részt (átlagéletkor 53±1,7 év). Őket az Onkológiai Klinika A.A. klinikáján kezelték. Bogomolets Nemzeti Orvostudományi Egyetem, amely a Kijevi Városi Klinikai Rákkutató Központ sebészeti osztályán alapult 2005-2006 között. Statisztikailag szignifikáns különbség a BC típusú molekuláris és morfológiai jellemzők között, nevezetesen a betegek kora és a menstruációs funkció állapota a diagnózis idején, a szövettani típus és a tumor differenciálódás mértéke, valamint a betegek általános és betegségmentes túlélése.

kulcsszavak: emlőrák, molekuláris típusok, prognózis, klinikai és morfológiai jellemzők.