Njia ya PCR katika uchunguzi wa magonjwa ya uchochezi ya njia ya genitourinary kwa wanaume na wanawake. Mtihani wa damu wa PCR ni nini na kwa nini inahitajika?

Uchunguzi wa PCR ni mbinu inayotokana na matumizi ya mmenyuko wa mnyororo wa polymerase, ambayo inaweza kutumika kumchunguza mtu kwa maambukizi na magonjwa ya urithi. Uchunguzi wa PCR kwa maambukizi 12 unaonyesha matokeo, bila kujali ugonjwa huo ni wa papo hapo au sugu. Wataalam wengine wanazingatia PCR 12 uchambuzi wa lazima na usifanye uchunguzi wa uhakika bila hiyo. Matokeo yanaweza kuwa chanya hata muda mrefu kabla ya kuanza kwa dalili za ugonjwa huo.

Katika karne ya 20, Cary Mullis kutoka Marekani aligundua jambo la mmenyuko wa mnyororo wa polymerase. Hivi sasa, njia ya PCR ndiyo kiwango cha dhahabu katika baadhi ya maeneo ya dawa. Njia hiyo ni ya ufanisi zaidi kwa kugundua ugonjwa katika hatua ya kazi, kwa kuwa kuna matukio wakati mbinu za kawaida hazitoi matokeo hayo katika hatua ya kazi. matokeo halisi.

Faida za uchunguzi wa PCR

Utambuzi wa michakato ya kuambukiza kwa kutumia PCR ni muhimu sana katika ulimwengu wa kisasa. Faida za aina hii ya uchunguzi ni kama ifuatavyo.

Mstari wa habari ✆

Ugunduzi wakala wa kuambukiza katika uchambuzi. Uchambuzi unahusisha utambuzi wa DNA au RNA ya wakala wa kuambukiza.
Majibu ya uwongo na yenye makosa hayajumuishwi.
Njia ya PCR 12 ndiyo nyeti zaidi. Shukrani kwa njia hii, hata seli moja za mawakala wa kuambukiza zinaweza kugunduliwa.
Matokeo ya PCR kwa vimelea vya siri ni tayari ndani ya masaa 4 baada ya utaratibu.
Uwezo wa kugundua mawakala wa kuambukiza bila kukosa dalili za tabia kwa ugonjwa huo. Njia hiyo inafaa kabisa katika tukio la ugonjwa maalum.

Katika ulimwengu wa kisasa, utambuzi wa PCR wa maambukizo unaendelea kwa kasi ya haraka. Mbinu hiyo inaboreshwa kikamilifu. Aina ndogo mpya za mitihani ya PCR zinaibuka. Shukrani kwa maendeleo njia hii uchunguzi, inakuwa rahisi kupatikana kwa watu mbalimbali, wakati gharama inabadilika hatua kwa hatua.

Msingi wa mmenyuko wa mnyororo wa polymerase

Njia ya PCR inafanywa peke katika hali ya maabara. Kwa utekelezaji wake, enzymes maalum hutumiwa, ambayo huongeza mara kadhaa muundo wa DNA na RNA ya mgonjwa. Kiasi kama hicho cha DNA na RNA kinapaswa kuundwa ili uchambuzi wa kuona ufanyike. Wakati wa uchunguzi, kunakili sehemu hiyo ya RNA au DNA ambayo inalingana na hali zinazohitajika hufanyika.

Maabara hudumisha hifadhidata inayoorodhesha muundo halisi wa mawakala mbalimbali wa kuambukiza. Shukrani kwa njia ya PCR, huwezi kuona pathojeni tu, lakini pia uhesabu uwiano wake wa kiasi.

Utambuzi wa PCR pia unahusisha uvumbuzi fulani, kati ya ambayo yafuatayo yanaweza kutofautishwa:

kuanzishwa kwa mabadiliko;
uunganisho wa vipande vya DNA binafsi;
uamuzi wa baba, nk.

Maambukizi yanayotambuliwa na uchambuzi wa PCR

Uchunguzi wa PCR unaweza kufunua michakato ifuatayo ya kuambukiza:

hepatitis ya aina zifuatazo: A, B, C, G;
Virusi vya Epstein-Barr, wakala wa causative mononucleosis ya kuambukiza;
cytomegalovirus;
kifua kikuu cha mycobacterium;
aina ya herpes 1 na 2;
magonjwa mengi ya zinaa: ureaplasmosis, gardnerellosis, chlamydia, mycoplasmosis, trichomoniasis.
HPV na spishi zake ndogo za oncogenic;
encephalitis inayosababishwa na tick na borreliosis;
maambukizi ya candida;
listeriosis;
Maambukizi ya Helicobacter pylori.

Na haya ni baadhi tu ya maambukizi ya kawaida ambayo yanaweza kugunduliwa kwa kutumia PCR. Mtihani wa damu wa PCR hutumiwa kikamilifu katika uwanja wa uzazi wa mazoezi ya matibabu, na pia katika maeneo kama vile:

pulmonological;
phthisiatric;
gastroenterological;
oncological;
matawi mengine mengi ya dawa.

Sheria za kukusanya nyenzo kwa uchambuzi

DNA na RNA za kigeni zinaweza kugunduliwa kwa kuchunguza aina mbalimbali za maji ya mwili wa mtu fulani. Ili kumchunguza mtu kwa uwepo wa magonjwa fulani ya zinaa, ni muhimu kuchukua sampuli ya kutokwa kutoka kwa viungo vya uzazi (smear au scraping) ya mgonjwa na mkojo wake.

Ikiwa inakuwa muhimu kumchunguza mtu aina mbalimbali maambukizi (VVU, herpes, hepatitis na wengine), kisha uchambuzi wa PCR unachukuliwa, ambayo damu ya mgonjwa hutumiwa.

Ili kugundua vidonda vya herpetic, mononucleosis, unahitaji kuchukua smear kutoka kwenye cavity ya mdomo ya mgonjwa. Ili kuthibitisha CMVI, mkojo wa mgonjwa huchukuliwa kwa uchambuzi. Kuna matukio wakati maji ya cerebrospinal yanachunguzwa ili kujua sababu za kutofautiana kwa neurolojia ambayo imetokea.

Wakati huo huo, mtaalamu wa pulmonologist anachunguza sputum na maji kutoka kwa pleura ya mgonjwa fulani kwa kutumia njia ya PCR.

Ikiwa mtoto mchanga ana mashaka ya maambukizi ya intrauterine, madaktari huchukua uchambuzi wa maji ya amniotic kutoka kwa mwanamke mjamzito na kipande cha tishu za placenta.

Utoaji wa uchambuzi: vipengele vya utaratibu na tafsiri ya matokeo

Wagonjwa wote wanaochunguzwa na njia ya PCR hupokea matokeo ya kuaminika zaidi. KATIKA kesi hii tukio la makosa ni kivitendo kutengwa. Matokeo ya uchambuzi huu yanatayarishwa haraka vya kutosha, ambayo inawezesha uchunguzi na kuhakikisha uteuzi wa wakati hatua za matibabu.

Kuegemea kwa matokeo ya PCR moja kwa moja inategemea usahihi wa utoaji wa nyenzo kwa uchunguzi. Nyenzo hazipaswi kuchafuliwa, vinginevyo matokeo ya utafiti hayatakuwa na lengo. Kwa wengi mapendekezo muhimu Kabla ya kuwasilisha uchambuzi wa PCR, mahitaji yafuatayo yanatumika:

Ni marufuku kufanya ngono siku moja kabla ya uchambuzi.
Mtihani wa damu kwa maambukizo lazima uchukuliwe kwenye tumbo tupu asubuhi.
Mkojo hutolewa asubuhi kwenye chombo cha kuzaa.

Matokeo ya uchambuzi yatakuwa tayari katika siku 1.5-2 baada ya utaratibu unaohusika. Kuna hali wakati matokeo yanaweza kutayarishwa siku hiyo hiyo.

Kuchambua matokeo

Matokeo ya aina hii ya uchunguzi inaweza kuwa chanya au hasi. Matokeo mabaya ya mtihani wa damu yanaonyesha kuwa hakuna mambo ya kuambukiza katika nyenzo zilizowasilishwa. Idadi kubwa ya Uchambuzi wa PCR uliofanywa unaonyesha uchanganuzi hasi.

Mchanganuo mzuri wa PCR unathibitisha ukweli kwamba mawakala wa kuambukiza walipatikana katika nyenzo zilizowasilishwa na ubora wa juu, wa juu. matibabu ya ufanisi mgonjwa.

Matokeo yanaweza kuwa mazuri, lakini hakuna maonyesho ya ugonjwa huo. Hii inaonyesha ama mwanzo wa ugonjwa huo, au gari lake. Ikiwa carrier wa ugonjwa huo hugunduliwa, basi hakuna hatua za matibabu zinazohitajika. Unahitaji tu kuona mtaalamu. Mifano ya magonjwa kama haya ni:

maambukizi ya papillomavirus;
herpes, nk.

Kwa kawaida hupatikana katika mate, chakavu kutoka mfereji wa kizazi, mrija wa mkojo. Hata hivyo, ni lazima ikumbukwe kwamba mtu mgonjwa anaweza kuambukiza watu wenye afya kabisa, licha ya ukweli kwamba wake ugonjwa huu haina wasiwasi hata kidogo. Ugonjwa unaweza kuendelea fomu sugu. Ikumbukwe kwamba katika hali ambapo mtihani wa damu wa PCR ulionyesha matokeo chanya, uteuzi wa hatua za matibabu ni muhimu tu.

Uchunguzi wa PCR pia una sifa ya kiasi. Matokeo ya upimaji ni tathmini tu na mtaalamu, ni mtu binafsi kwa maambukizi mbalimbali. Kulingana na tabia ya kiasi, daktari ana uwezo wa kuelewa jinsi mchakato huu wa patholojia unavyofanya kazi, kuweka hatua halisi ya maendeleo ya ugonjwa fulani. Kwa kuchambua matokeo yaliyopatikana, mtaalamu anaweza kuchagua dawa inayohitajika na ikiwezekana kufikiria upya kipimo cha dawa.

Usahihi wa uchunguzi wa PCR

Wataalamu wanapewa PCR 3 sifa muhimu zaidi, kati ya hizo ni:

Usahihi.
Umaalumu.
Unyeti.

Utambuzi wa maambukizo na PCR ina uwezekano zaidi kugundua mawakala wa kuambukiza. Uchunguzi wa PCR wa damu na viowevu vingine ni maalum sana. Kwa msaada wake, unaweza kutambua kwa urahisi mchakato maalum wa kuambukiza. Uchunguzi wa PCR ni nyeti sana. Ikiwa nyenzo ya mtihani ina kiasi kidogo mawakala wa kuambukiza, njia ya PCR daima itakuwa chanya.

Nadra zaidi ni matokeo chanya ya uwongo. Ikiwa hakuna maambukizi, basi matokeo ni hasi.

PCR kwa mchakato uliofichwa wa kuambukiza

Ikiwa mtu anashukiwa kuwa na STI, mtihani wa damu unaagizwa maambukizi ya siri. Magonjwa ya ngono yanaweza kugunduliwa tu kwa kuchunguza mgonjwa. Magonjwa kama vile:

chlamydia;
ureaplasmosis;
kisonono;
malengelenge;
gardnerellosis;
mycoplasma.

Maambukizi ya kijinsia hapo juu ni ya kawaida na wakati huo huo ni ya siri. Juu ya hatua ya awali maendeleo ya ugonjwa huo, haitoi dalili mkali, na wagonjwa hawatafuti msaada. Uchunguzi wa damu wa PCR, chakavu kutoka kwa membrane ya mucous ya urethra na mfereji wa kizazi huhitajika ikiwa maambukizo haya yanashukiwa.

Magonjwa ya zinaa yana athari mbaya sana mfumo wa uzazi. Wanaweza kusababisha utasa au uharibifu katika fetusi. Katika suala hili, kabla ya kupanga ujauzito, unahitaji kuchukua mtihani wa PCR.

PCR kwa maambukizi 12 ni maarufu. Utambuzi na PCR 12 unafanywa kwa njia ya utoaji wa swabs kutoka kwa sehemu za siri. Nyenzo huchukuliwa masaa 2 baada ya tendo la urination. Siku 2 kabla ya utafiti, suppositories haipaswi kuingizwa ndani ya uke na douching haipaswi kufanywa. Matokeo ya uchambuzi yatakuwa tayari katika siku 2.

Gharama ya PCR inatofautiana kulingana na maambukizi yanayochunguzwa. Bei ni kati ya rubles 200 hadi 500 kwa kila maambukizi. Unaweza kuingia na kuchunguzwa katika maabara ya kibinafsi peke yako, bila rufaa ya daktari.

PCR (polymerase mmenyuko wa mnyororo) - mafanikio ya biolojia ya Masi, mojawapo ya mbinu kuu za kliniki uchunguzi wa maabara mwishoni mwa 20 na mapema karne ya 21, kuleta faida kubwa katika nyanja mbalimbali sayansi ya matibabu.

Kwa hivyo, hata ikiwa ni kati ya mamilioni ya seli mwili wa binadamu sio virusi hai yenyewe iliyopotea, lakini ni chembe tu ya DNA yake, basi PCR, ikiwa hakuna kitu kinachoingilia kati yake, labda itakabiliana na kazi hiyo na kutoa ripoti ya matokeo mazuri juu ya kukaa kwa "mgeni". Hii ni kiini cha PCR na faida yake kuu.

Faida na hasara

Maabara inayofanya uchunguzi wa PCR inategemea mahitaji ya juu zaidi katika suala la vifaa, mifumo ya mtihani na sifa za wafanyakazi wa matibabu. Hii ni maabara ya teknolojia ya juu ambayo ina arsenal ya reagents nyeti sana na maalum sana, kwa hiyo haina vikwazo maalum. Isipokuwa inatoa matokeo chanya kwa kutokuwepo maonyesho ya kliniki na hivyo huweka kliniki mbele ya shida: ni thamani ya kuanza matibabu au la?

Daktari akimtazama mgonjwa huanza kutilia shaka kuaminika kwa matokeo ya mtihani, kwani haoni dalili zozote za ugonjwa huo. Lakini bado, kutokana na unyeti mkubwa wa mfumo wa PCR, ni lazima ikumbukwe kwamba hutambua pathogen hata katika hatua ya preclinical, na matokeo mazuri katika kesi hii ni faida zaidi kuliko hasara. Kulingana na hili, daktari anayehudhuria lazima aamua mwenyewe juu ya kufaa kwa tiba, akizingatia hoja nyingine "kwa" na "dhidi".

Faida za utambuzi kwa kutumia mmenyuko wa mnyororo wa polymerase ni dhahiri:

Umaalumu wa hali ya juu, kufikia 100%, kutokana na uwepo katika sampuli iliyochaguliwa ya chembe za asidi ya nucleic asili katika kiumbe fulani, lakini mgeni kwa wanadamu;
Utendaji wa juu, kwa sababu PCR ni mbinu ya juu ya teknolojia ya automatiska ambayo inatoa fursa ya kufanya upimaji siku ya sampuli ya nyenzo na, hivyo, kuondoa mgonjwa wa wasiwasi usiohitajika;
PCR, ikifanya kazi kwenye sampuli moja, ina uwezo wa kufanya tafiti kadhaa na kuhusu kugundua vimelea vingi vya magonjwa ikiwa ana kazi kama hiyo. Kwa mfano, wakati wa kuchunguza maambukizi ya chlamydial, ambapo PCR ni mojawapo ya njia kuu, pamoja na chlamydia, Neisseria (gonococcus) inaweza pia kugunduliwa - pathogen. Aidha, hii haiathiri vibaya uaminifu wa matokeo;
Uchunguzi wa PCR ni microorganism hatari kipindi cha kuatema wakati bado hawajapata wakati wa kusababisha madhara yanayoonekana kwa mwili, ambayo ni, utambuzi wa mapema anaonya juu ya maendeleo yajayo mchakato wa patholojia, ambayo inafanya uwezekano wa kuitayarisha na kuichukua silaha kikamilifu.

Kwa kuongeza, ili kuepuka kutokuelewana ambayo wakati mwingine hutokea wakati wa uchunguzi, PCR pia inajilinda na ukweli kwamba matokeo yake yanaweza kurekodi (picha, kompyuta) ili kuitumia kwa madhumuni ya wataalam, ikiwa ni lazima.

Kawaida katika majibu ya PCR inachukuliwa kuwa matokeo mabaya., ikionyesha kutokuwepo kwa vipande vya asidi ya nucleic ya kigeni, majibu mazuri yataonyesha uwepo wa maambukizi katika mwili, maadili ya digital yanaonyesha hali ya virusi na mkusanyiko wake wakati wa kupima. Hata hivyo, nakala kamili ya uchambuzi unafanywa na daktari ambaye amepata mafunzo maalum juu ya mada "PCR". Kujaribu kutafsiri matokeo mwenyewe haina maana yoyote, kwa kuwa inawezekana, ambayo inawezekana kutokea, kutoelewa na kuanza kuwa na wasiwasi mapema.

PCR "hofu" ni nini, inaweza kufanya nini na jinsi ya kuitayarisha?

Kama ilivyo kwa utafiti mwingine wowote, wakati mwingine matokeo ya mtihani ni chanya ya uwongo au hasi ya uwongo ambapo PCR sio ubaguzi. Hii inaweza kutokea katika kesi zifuatazo:

Ukiukaji mchakato wa kiteknolojia katika moja ya hatua za majibu;
Kushindwa kufuata sheria za ukusanyaji wa nyenzo, uhifadhi wake au usafirishaji;
Uwepo wa uchafu wa kigeni katika nyenzo.

Hii inaonyesha kwamba PCR - uchunguzi wa maambukizi lazima ufikiwe kwa uangalifu, kwa uangalifu na kwa usahihi, vinginevyo sampuli za nyenzo zinaweza kubadilisha muundo wao wa kimuundo au hata kuanguka.

Hatua za utambuzi wa PCR. Matokeo ya uwongo yanaweza kutoa ukiukaji katika hatua yoyote ya utafiti

Uchunguzi wa PCR wa maambukizi ni wa jamii ya "viwango vya dhahabu" kati ya wengine njia za maabara, kwa hivyo inaweza kutumika kutafuta vimelea vya magonjwa mengi ambayo kwa mtazamo wa kwanza hayana uhusiano wowote na kila mmoja:

Kifua kikuu ujanibishaji tofauti, pneumonia (ikiwa ni pamoja na atypical, inayosababishwa na chlamydia);
Maambukizi ya utotoni ( rubella ya surua, matumbwitumbwi, surua);
Diphtheria;
salmonellosis;
zoonotic ugonjwa wa kuambukiza- listeriosis (ugonjwa una sifa ya dalili mbalimbali na uharibifu wa lymph nodes, mfumo mkuu wa neva, viungo vya ndani);
Magonjwa yanayosababishwa na kupenya kwa virusi vya Epstein-Barr (mononucleosis ya kuambukiza, nk);
Ugonjwa wa oncological unaosababishwa na maambukizi ya papillomavirus (HPV na aina zake);
Borreliosis (ugonjwa wa Lyme, encephalitis inayosababishwa na tick);
Maambukizi ya Helicobacter pylori, wakala wa causative ambayo ni microbe inayoishi kwenye tumbo la mwanadamu. Helicobacter pylori. Imethibitishwa kuwa Helicobacter husababisha maendeleo ya saratani ya tumbo au duodenal;
na kwa vitendo kila kitu.

Uchunguzi wa PCR wa magonjwa ya zinaa ni muhimu sana, kwani magonjwa yanayosababishwa kwa njia hii ni mara nyingi muda mrefu hutokea bila maonyesho yoyote ya kliniki, lakini wakati wa ujauzito wanaanza kuwa hai zaidi na, hivyo, kutishia afya na hata maisha ya mtoto. Na kutenda vivyo hivyo. Baadhi yao ("mwenge") huhusiana wakati huo huo na magonjwa ya zinaa, kwa hivyo haya yanahitaji kuzingatiwa kwa undani zaidi. Msomaji ataweza kufahamiana na njia maarufu zaidi katika sehemu zifuatazo makala.

Jinsi ya kujiandaa vizuri ili kupata matokeo ya kuaminika?

Tunaona mara moja kwamba maandalizi ya PCR ni rahisi sana, hauhitaji jitihada maalum kwa upande wa mgonjwa. Unahitaji tu kukamilisha kazi tatu rahisi:

Usifanye ngono masaa 24 kabla ya kuchukua mtihani;
Kuchukua na kuchambua damu kutoka kwa mshipa, unahitaji kuja kwenye tumbo tupu, kwa njia, huwezi kunywa ama;
Mkojo unapaswa kupitishwa usiku (asubuhi - kwenye jar yenye kuzaa iliyonunuliwa siku moja kabla kwenye maduka ya dawa).

PCR inaweza kufanya kazi katika mazingira yoyote ya kibiolojia

Mbinu ya PCR sio "kiu ya damu", kwa hivyo inakubali mazingira yoyote ya kibaolojia yenye wakala anayeshukiwa kuwa wa kuambukiza. uchaguzi - nini unahitaji kuchukua kwa ajili ya utafiti, bado na daktari.

Kwa hivyo, katika kutafuta pathojeni, pamoja na mtihani wa damu (ingawa pia inafaa na katika hali nyingi kuchukuliwa sambamba na nyenzo zingine), unaweza kutumia:

(kutokwa kwa njia ya urogenital);
Kusugua kamasi cavity ya mdomo, conjunctiva, nasopharynx, njia ya uzazi (kwa wanawake huchukuliwa kutoka kwa kizazi na uke, kwa wanaume - kutoka kwa urethra);
mate;
shahawa;
juisi ya prostate;
Tishu za placenta na maji ya amniotic (maji ya amniotic);
Mkojo wa mchanga (baada ya centrifugation), kwa mfano, kuchunguza magonjwa fulani ya zinaa na kifua kikuu cha Mycobacterium;
Sputum na maji ya pleural kwa madhumuni sawa;
exudates;
ugiligili wa ubongo kwa watuhumiwa maambukizi Mfumo mkuu wa neva;
Biopsy nyenzo (biopsy) kuchukuliwa kutoka ini, duodenum, tumbo, nk.

Ningependa kuongeza hapo juu kwamba katika hali zote, hata katika chakavu na usiri, kutakuwa na nyenzo za kutosha za upimaji, kwani upimaji wa PCR hauitaji idadi kubwa, mikrolita chache ni ya kutosha kwa uchambuzi, ambayo kawaida huchukuliwa kwenye kifaa. Microtube ya aina ya Eppendorf na kutumwa kusoma.

Magonjwa na matumizi ya PCR

VVU na mmenyuko wa mnyororo wa polymerase

Kawaida, wakati wa kupitisha uchunguzi usiojulikana katika kesi ya matokeo mazuri ya immunoblotting, uchunguzi unarudiwa tena. Ikiwa utambuzi umethibitishwa, mgonjwa ameagizwa masomo ya ziada:

Kuamua, kwa kutumia athari za kinga, maadili kamili ya idadi ya CD 4 lymphocytes (seli zisizo na uwezo - T-wasaidizi au wasaidizi), ambayo maambukizi huambukiza mahali pa kwanza, baada ya hapo hupoteza mali zao za msingi na hawawezi kutofautisha kati ya " mwenyewe" na "kigeni". Wanachukua RNA ya virusi inayozunguka katika plasma ya damu kwa seli za kawaida za mwili na hazifanyiki kwao;
Utambuzi wa RNA ya virusi na PCR na hesabu ya mkusanyiko wa chembe za virusi ili kuanzisha hatua, ukali wa mchakato wa patholojia na ubashiri kulingana na data hizi.. Kwa kweli, neno "kawaida" katika suala hili halipo, kwani majibu ni chanya kila wakati, na uainishaji wa maadili ya dijiti uko ndani ya uwezo wa daktari.

PCR na hepatitis

Njia ya PCR inaweza kugundua vimelea vya magonjwa, mara nyingi mtihani hutumiwa kutambua hepatitis C, ambayo haipatikani vizuri na njia nyingine.

Virusi vya hepatitis C (iliyo na RNA) katika tabia yake katika mwili wa binadamu inafanana na VVU. Akiingia kwenye genome ya seli za ini (hepatocytes), anakaa pale akisubiri katika mbawa, ambayo inaweza kuja angalau katika miaka 2, angalau katika miaka 20, hivyo madaktari walimwita "muuaji mpole." Hepatitis C inaongoza kwa malezi ya mchakato mbaya katika parenchyma ya ini, ambayo inajidhihirisha katika hatua za marehemu. Matukio haya yote mfumo wa kinga haioni, kupotosha virusi kwa hepatocyte. Kweli, antibodies kwa virusi huzalishwa kwa kiasi fulani, lakini haitoi majibu ya kinga ya heshima. Kwa kugundua hepatitis C, ELISA sio habari sana, kwani inaonyesha kuwa virusi vimeacha athari, na haijulikani ikiwa ilijiacha yenyewe. Kwa HCV, kesi za kujiponya zinajulikana, wakati antibodies dhidi ya virusi hubakia na kuendelea kuzunguka kwa maisha (kumbukumbu ya immunological). PCR iko mbele ya uundaji wa kingamwili na inaweza kugundua chembe ya virusi mapema kama wiki 1-1.5, wakati kingamwili zinaweza kutokea katika kipindi cha miezi 2 hadi miezi sita.

Uchunguzi wa PCR katika kesi ya kushukiwa kuwa virusi vya hepatitis C katika mwili wa binadamu ndio wengi zaidi njia bora utafiti, kwa sababu ni yeye tu anayeweza kutambua uwepo wa "adui mpole" katika damu ya mgonjwa au biopsy ya ini.

Hata hivyo, wakati mwingine kuna matukio wakati AT ni chanya, na matokeo ya PCR ni hasi. Hii wakati mwingine hutokea wakati kiasi cha virusi ni kidogo sana au wakati ni dormant katika ini bila kutolewa ndani mtiririko wa damu. Ili bado kupata ukweli, mgonjwa anachambuliwa upya, au hata zaidi ya moja.

Maambukizi ya Papillomavirus

Ikiwa kujiponya haitokei, inaweza pia, bila kujionyesha yenyewe, kuendelea kwa muda mrefu katika mwili wa mwenyeji, ambayo haina hata mtuhumiwa, kwani PCR haijafanyika, na hapakuwa na dalili za ugonjwa huo. Hata hivyo, uwepo wa maambukizi ya papillomavirus, ingawa latent, ni mbali na kutojali kwa afya ya binadamu, ambapo aina fulani za virusi vinavyosababisha. magonjwa ya oncological(aina 16, 18).

Mara nyingi, nusu ya wanawake wa idadi ya watu wanaugua HPV, kwani virusi hupenda mwanamke zaidi eneo la uzazi, na hasa kizazi cha uzazi, ambapo baadhi ya aina za virusi huchangia katika maendeleo ya michakato ya dysplastic, na kisha saratani ya kizazi, ikiwa dysplasia haijatibiwa na virusi hutolewa. Kwa hivyo, mmenyuko wa mnyororo wa polymerase utagundua DNA ya virusi, na kisha kuonyesha aina ya "mbaya" au "nzuri" (oncogenic au isiyo ya oncogenic) iliyowekwa katika mwili wa mwanamke.

Magonjwa mengine ya zinaa na maambukizi ya TOCH

Kwa wazi, mmenyuko wa mnyororo wa polymerase unaweza kupata muundo wowote wa kigeni unaojumuisha asidi ya nucleic, hivyo mtihani huu unafaa kwa kuchunguza magonjwa yote ya STD na maambukizi ya TORCH, hata hivyo, haitumiwi kila wakati. Kwa nini, sema, kufanya utafiti wa gharama kubwa ili kugundua au gonococcus, ikiwa kuna nafuu zaidi na ya bei nafuu?

Maambukizi ya TORCH na magonjwa ya zinaa yanahusiana sana kwamba wakati mwingine ni vigumu kuamua ni kundi gani la pathojeni fulani inapaswa kupewa. Kwa ujumla, inaweza kuwa ngumu kuwaelewa, kwani haya ni vikundi tofauti vya vijidudu ambavyo vinaweza kuambukizwa kingono kila wakati au wakati tu. masharti fulani(immunodeficiency), na inaweza kuwa na riba tu wakati wa ujauzito, kutokana na iwezekanavyo athari mbaya kwenye mwendo wake na kwenye kijusi.

PCR ndio njia kuu ya kugundua maambukizo ya siri

Ukuaji wa udhihirisho wa kliniki ni msingi wa vimelea mbalimbali, ambavyo vinaweza kupatikana tu na PCR, ambayo ni kazi yake kuu, wakati mwingine pamoja na ELISA, na wakati mwingine. kama mtihani pekee wa kuthibitisha, hasa ikiwa hakuna dalili za ugonjwa huo. Vile hali ngumu inaweza kuunda maambukizi ya polymicrobial, ambayo, pamoja na pathogens dhahiri, pia inajumuisha magonjwa nyemelezi.

Ureaplasma mara nyingi huonekana sanjari na mycoplasma. Na hii sio bahati mbaya. Spishi hizi, kama vile chlamydia, sio virusi wala bakteria, huishi ndani ya seli na ni wa magonjwa ya zinaa, ingawa uwepo wao ndani ya seli. mwili wenye afya pia sio kawaida. Kwa hiyo, ili kutofautisha carrier mwenye afya kutoka kwa mtu mgonjwa, mbinu maalum zinahitajika, ambapo PCR inachukuliwa kuwa ya kuaminika zaidi, kwa sababu, kutokana na upekee wa muundo na tabia ya microorganisms hizi, tafiti nyingine hazifanyi kazi.

Kuhusu (aina ya 1, 2) na, ambayo pia ni ya virusi vya herpes (aina ya 5), hali hapa pia ni ya utata. Kiwango cha maambukizi ya idadi ya watu duniani kinakaribia 100%, kwa hiyo, katika kesi hii, kitambulisho cha virusi na kipimo chake ni muhimu sana, ambayo ni muhimu sana wakati wa ujauzito, kwa sababu kwa mtu mzima, virusi ambavyo vimechukua mizizi ndani yake. mwili mara nyingi hausababishi shida yoyote na haitoi ishara za ugonjwa huo.

Kwa hivyo, uchunguzi kama huo uliowekwa na daktari haupaswi kupuuzwa, kwa sababu katika hali nyingine mmenyuko wa mnyororo wa polymerase ni wa lazima na. mbinu muhimu uchunguzi wa maabara ambayo inaweza kulinda dhidi ya matatizo makubwa sio mwanamke tu, bali pia mtu mdogo, bado hajazaliwa, mtu mdogo.

Kwa kumalizia, ningependa kutambua kwamba njia nzuri kama PCR imekuwa ikihudumia ubinadamu kwa zaidi ya miaka 30. Wakati huo huo, kazi za mtihani sio tu kwa utafutaji wa magonjwa ya magonjwa ya kuambukiza. Mmenyuko wa mnyororo wa polimerasi, uliozaliwa kwenye udongo wa baiolojia ya molekuli, unahusishwa kwa kiasi kikubwa na jeni. kutumika kwa mafanikio katika uchunguzi wa uchunguzi wa kitambulisho cha kibinafsi, katika dawa ya mahakama kuanzisha uzazi, katika dawa ya mifugo, ikiwa kliniki ya wanyama ina uwezo wa kununua vifaa vya gharama kubwa, na pia katika maeneo mengine (sekta, Kilimo na kadhalika.).

Video: PCR - kiini na matumizi

Yaliyomo katika kifungu:

Mbinu ya PCR yenye taarifa sana (polymerase chain reaction) inafanya iwezekanavyo utambuzi wa mapema magonjwa mbalimbali ya maumbile na ya kuambukiza, yanayotokea kwa papo hapo au kwa muda mrefu. Aidha, wanaweza kutambuliwa hata katika hatua wakati hawaonyeshi dalili yoyote. Mara nyingi kwa Uchambuzi wa PCR hutumika kugundua magonjwa ya zinaa (STDs, STIs).

Mchanganuo wa PCR unarejelea njia ya uchunguzi wa Masi, ambayo inategemea ongezeko nyingi la viwango vidogo vya vipande fulani vya asidi ya nucleic (DNA) ya pathojeni katika nyenzo yoyote ya kibaolojia (smear kutoka kwa seviksi, uke, urethra, damu, mate; sputum, n.k.) na kulinganisha DNA au RNA yake na hifadhidata aina zinazojulikana mawakala wa kuambukiza.

Mbinu hiyo ilitengenezwa na Marekani Carrie Mullis katika miaka ya 80 ya karne iliyopita. Mnamo 1993, mwanasayansi huyo alikua mshindi Tuzo la Nobel katika uwanja wa kemia. Leo, utafiti wa PCR unachukuliwa kuwa aina ya "kiwango cha dhahabu" cha kugundua idadi kubwa ya maambukizo. Uchunguzi wa PCR hutumiwa sana katika mazoezi ya matibabu ili kufafanua hali ya ugonjwa huo na hatua utambuzi sahihi. Mara nyingi sana kuna matukio wakati njia zote zinazojulikana za immunological, virological na bacteriological hazifanyi kazi. Kisha PCR inakuwa njia pekee, ambayo inaweza kutumika kutambua hatua ya kazi ya ugonjwa huo.

Faida za utambuzi wa PCR juu ya njia zingine

Mbinu ya PCR imepatikana maombi pana katika dawa za kisasa kutokana na idadi ya faida zisizoweza kuepukika. Hebu tuzungumze juu yao kwa undani zaidi.

Uwezo wa kugundua moja kwa moja uwepo wa pathojeni

Wengi wa jadi njia za uchunguzi zinatokana na uamuzi wa alama - protini ambazo ni bidhaa za taka za pathojeni. Kanuni hiyo ya uchunguzi inaweza tu kutoa uthibitisho wa moja kwa moja wa patholojia. Njia ya PCR hutoa ufafanuzi wa moja kwa moja wakala wa causative, kwa vile inabainisha sehemu maalum za DNA ya viumbe vya pathogenic.

Umaalumu wa hali ya juu

Mbinu ya PCR ni maalum sana kutokana na ukweli kwamba inaruhusu kuchunguza vipande vya DNA ambavyo ni tabia tu kwa wakala fulani wa kuambukiza. Wakati wa kutumia mbinu za immunological, kuna uwezekano wa kupata matokeo ya uongo (makosa katika uchunguzi yanahusishwa na antigens ya kukabiliana na msalaba). Kuhusu PCR, makosa hayajajumuishwa hapa, kwa kuwa maalum katika kesi hii imedhamiriwa na mlolongo wa nucleotide wa primers.

Unyeti wa juu

Kupitia njia hii, hata pathogens moja huamua. Wakala wa kuambukiza hugunduliwa katika mwili wa mwanadamu hata wakati njia zingine za utambuzi hazifafanui hali hiyo (tunazungumza juu ya njia mbalimbali za utafiti wa microscopic ya immunological na bacteriological).

Tunawasilisha data kwa kulinganisha. Uelewa wa mbinu za microscopic na immunological ni seli 103-105, na unyeti wa PCR ni seli 10-100 kwa sampuli.

Universality ya mbinu

Mbinu ya PCR inategemea utafiti wa DNA ya viumbe vya pathogenic. Wakati wa utafiti, vipande vya RNA au DNA vinatambuliwa ambavyo ni maalum kwa mawakala maalum wa kuambukiza. Kwa kuwa asidi zote za nucleic zina sawa muundo wa kemikali, katika uchambuzi wa maabara njia za umoja zinaweza kutumika. Hii ina maana kwamba utafiti wa sampuli moja hufanya iwezekanavyo kutambua pathogens kadhaa mara moja.

Matokeo ya haraka

Mbinu hii hauitaji ukuzaji wa tamaduni za vimelea, ambayo inachukua muda mwingi. Shukrani kwa matumizi ya teknolojia iliyounganishwa kwa usindikaji nyenzo na kutambua bidhaa za athari, pamoja na mchakato wa ukuzaji wa kiotomatiki, utaratibu mzima wa utafiti huchukua saa chache tu.

Uwezo wa kugundua maambukizo ya siri

Mbinu ya PCR inafanya uwezekano wa kufanya uchunguzi wa mapema (ugunduzi wa vimelea kabla ya kuanza kwa dalili) na uchunguzi wa nyuma (ugunduzi wa vimelea baada ya dalili). ugonjwa uliopita) Kwa hivyo, utambuzi wa mapema una umuhimu mkubwa wakati wa kuchunguza mgonjwa katika kipindi cha incubation ugonjwa unaowezekana- baada ya maambukizi ya madai kabla ya kuanza kwa ishara za kwanza.

Moja ya faida muhimu za PCR ni uwezekano wa kutumia mabaki ya kibiolojia au nyenzo za kumbukumbu kwa uchambuzi. Hii inafanya uwezekano wa kutambua ubaba na utu.

Hadi sasa, mbinu za uchunguzi wa PCR zinaendelea kuendeleza. Teknolojia ya uchambuzi yenyewe inaboreshwa, na vile vile mpya aina za PCR. KATIKA mazoezi ya matibabu mifumo bunifu ya majaribio ya majibu haya inaletwa. Shukrani kwa hili maendeleo ya haraka sayansi, gharama ya utaratibu inapungua, na sasa Uchunguzi wa PCR inaweza kutumika kwa makundi mengi ya wagonjwa.

Mbinu hii ya uchunguzi inategemea uongezaji maradufu wa sehemu fulani ya RNA au DNA. Utaratibu huu unafanywa katika maabara kwa kutumia enzymes maalum. Kama matokeo, sehemu nyingi za DNA (RNA) huundwa kama inahitajika kwa uchunguzi wa kuona. Wakati wa utaratibu, eneo pekee linalofanana na hali maalum linakiliwa (ikiwa iko katika sampuli iliyojifunza).

Nyenzo za kibiolojia ambazo zinahitaji kuchunguzwa kwa uwepo wa DNA au RNA ya pathogens huwekwa kwenye amplifier. (Kulingana na hali maalum, damu, mkojo, mate, hutolewa kutoka kwa sehemu za siri huchukuliwa kwa uchambuzi). Enzymes maalum huongezwa kwa sampuli. Wanafunga kwa RNA au DNA vijidudu vya pathogenic, na usanisi wa nakala huanza. Kunakili ni mchakato wa hatua nyingi ambao huendelea kama majibu ya mnyororo. Kwa hiyo, mamia au hata maelfu ya nakala zinaweza kuonekana.

Katika hatua inayofuata ya uchunguzi, matokeo yanachambuliwa na ikilinganishwa na hifadhidata ya mawakala wa kuambukiza.

Mbinu ya PCR sio tu inafanya uwezekano wa kuamua aina viumbe vya pathogenic, lakini pia inatuwezesha kuteka hitimisho kuhusu idadi ya mawakala wa kuambukiza katika mwili wa binadamu.
Leo, matumizi ya teknolojia hizo hufungua fursa pana katika utafiti wa mabadiliko, kuunganisha sehemu za DNA. Katika dawa ya kisasa, njia ilianza kutumiwa kuamua uzazi, kutambua jeni mpya, na mengi zaidi.

Kwa sababu ya ustadi wake mwingi, njia ya PCR imepata matumizi mengi katika urology, gynecology, pulmonology, oncology, hematology, phthisiology, mazoezi ya magonjwa ya kuambukiza na maeneo mengine ya dawa.

Nyenzo za uchambuzi wa PCR

Kwa uchunguzi wa PCR, vyombo vya habari mbalimbali vya kibaiolojia na maji yaliyochukuliwa kutoka kwa mwili wa binadamu hutumiwa: sputum, kamasi, mate, mkojo, damu, kufuta seli za epithelial, tishu za placenta, maji ya pleural, maji ya amniotic, juisi ya kibofu, nk.

Wakati wa kuchunguza magonjwa ya zinaa (STIs), uvujaji kutoka kwa viungo vya uzazi wa kiume na wa kike huchambuliwa. Ili kufanya hivyo, fanya smear au kufuta kutoka kwenye urethra au kizazi. Mkojo pia hutumiwa kwa utafiti.

Ili kugundua maambukizi (herpes, mononucleosis, CMVI, toxoplasmosis, VVU, hepatitis B na C), damu inachukuliwa kwa uchambuzi. Katika kesi ya majeruhi ya tuhuma mfumo wa neva tengeneza uzio maji ya cerebrospinal.

Kwa masomo ya pulmonological, maji ya pleural na sputum hutumiwa.

Kutambua maambukizi ya intrauterine Tishu za placenta na maji ya amniotic huchambuliwa.

PCR kwa magonjwa ya zinaa na maambukizo mengine

Ni maambukizi gani yanaweza kugunduliwa na uchambuzi wa PCR

Maambukizi ya VVU (virusi vya ukimwi wa binadamu VVU-1 vinaweza kugunduliwa).

Hepatitis ya virusi A, B, C, G (RNA-HAV, DNA-HBV, RNA-HCV, RNA-HGV).

Magonjwa ya zinaa (maambukizi ya zinaa) - ureaplasmosis, gardnerellosis, chlamydia, mycoplasmosis, trichomoniasis.

Mononucleosis ya kuambukiza (DNA ya virusi vya Epstein-Barr - EBV).

Maambukizi ya Cytomegalovirus (DNA-CMV).

Maambukizi ya Herpes (virusi vya DNA) herpes simplex HSV aina 1 na 2).

Kifua kikuu (kifua kikuu cha mycobacterium).

Virusi vya oncogenic - maambukizi ya papillomavirus (papillomavirus ya binadamu (ikiwa ni pamoja na aina zake za oncogenic 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, na 59).

Borreliosis, encephalitis inayosababishwa na tick.

Listeriosis.

Candidiasis (fungi ya jenasi Candida).

Maambukizi ya Helicobacter pylori
na wengine.

Maandalizi na uwasilishaji wa uchambuzi wa PCR

Wagonjwa waliowasilisha nyenzo kwa ajili ya uchunguzi wa PCR wanatarajia kupokea matokeo ya haraka na sahihi. Kwa kufanya hivyo, mtu lazima azingatie hatua muhimu- kuegemea kwa utambuzi inategemea sio tu juu ya taaluma ya wataalam na uwezo wa maabara ya matibabu. Ili utafiti uwe na taarifa, mgonjwa mwenyewe lazima afanye jitihada. Kwa hivyo, inahitajika kufuata madhubuti mapendekezo yote ya daktari na kufuata kwa uangalifu sheria za kuandaa mkusanyiko wa nyenzo. Ni muhimu sana kuzuia uchafuzi wa sampuli za kibiolojia, vinginevyo matokeo ya uchunguzi yatapotoshwa.

Maandalizi ya uchambuzi wa PCR

Maandalizi ya utaratibu hayahusishwa na matatizo maalum. Kumbuka tu sheria chache:

Damu kwa uchambuzi wa PCR inachukuliwa kwenye tumbo tupu. Damu kawaida huchukuliwa kutoka kwa mshipa asubuhi na sindano isiyo na maji kwenye chombo maalum.

Wakati wa mchana kabla ya kuchukua sampuli ya nyenzo, kutofanya ngono huonyeshwa wakati wa kuchukua smear ya PCR kwa magonjwa ya zinaa.

Kwa uchambuzi wa mkojo kwa PCR, sehemu ya kwanza inachukuliwa, chombo lazima kiwe tasa.

Jinsi ya kuchukua uchambuzi wa PCR kwa wanaume na wanawake

Uchunguzi wa PCR unachukuliwa kutoka kwa wanaume na wanawake katika chumba cha chanjo, hii ni damu kutoka kwa mshipa, mate, swabs kutoka pharynx, tonsils, swabs kutoka nasopharynx, nk. Njia ya ukusanyaji sio tofauti.

PCR ya magonjwa ya zinaa inakabidhiwa kwa kliniki ya wajawazito katika uchunguzi wa uzazi kwa wanawake, hizi ni smears kutoka kwa uke, kizazi, urethra. Kwa wanaume, wakati wa ziara ya andrologist au venereologist, hii ni smear kutoka kwa urethra.

Mipango ya nyenzo za sampuli za PCR

PCR inachukua muda gani

Wagonjwa hawapaswi kusubiri kwa muda mrefu kwa matokeo ya uchunguzi wa PCR. Utaratibu mzima wa uchambuzi kwa kawaida huchukua kutoka saa kadhaa (PCR ya wakati halisi) hadi siku 2-10. Kama sheria, mgonjwa hupokea matokeo ya uchambuzi katika siku 2-5, hadi siku 10, inategemea aina ya uchambuzi. Muda mrefu zaidi ni uchunguzi wa damu wa PCR kwa VVU na hepatitis, na mfupi zaidi ni smears na scrapings - siku 2-3.

Matokeo hasi yanaonyesha hivyo wakati huu athari za mawakala wa kuambukiza hazipatikani katika nyenzo za kibiolojia. Hiyo ni, maambukizi ambayo uchunguzi ulifanyika haipo.

Matokeo chanya yanaonyesha ugunduzi wa athari za pathojeni katika sampuli za kibiolojia. Hii ina maana kwamba katika kupewa muda kuna maambukizi katika mwili wa binadamu.
Kuna matukio wakati PCR inatoa matokeo mazuri, lakini inafanya kazi mchakato wa kuambukiza haionekani. Ni kuhusu kuhusu jambo linaloitwa "gari la afya". Matibabu ya mgonjwa kama huyo haihitajiki, lakini lazima iwe chini ya usimamizi wa nguvu wa kila wakati. Hali kama hizo ni za kawaida maambukizi ya virusi: Virusi vya Epstein-Barr(EBV), malengelenge ya sehemu za siri, maambukizi ya cytomegalovirus (CMVI), papillomavirus ya binadamu (HPV), ambayo sampuli huchukuliwa kwa ajili ya utafiti kutoka kwa foci ya ndani (kukwangua kwa urethra, mfereji wa kizazi, mate). Wakati huo huo, hatupaswi kusahau kwamba carrier mwenye afya anaweza kusambaza maambukizi kwa watu wengine. Kwa kuongeza, uanzishaji wa mchakato wa kuambukiza haujatengwa. Katika hali ambapo PCR inatoa matokeo chanya katika mtihani wa damu, hii haiwezi tena kuchukuliwa kuwa carrier. Wagonjwa kama hao wanahitaji matibabu maalum ugonjwa unaosababishwa na pathojeni iliyogunduliwa.

Viashiria vya kiasi havina viwango vya jumla. Wanatathminiwa na daktari mmoja mmoja kwa kila maambukizi maalum. Matokeo ya kiasi hufanya iwezekanavyo kuamua jinsi maambukizi yanavyofanya kazi na kutambua hatua ya mchakato.

Kuegemea kwa njia ya PCR

Ili kutathmini ufanisi wa mbinu, kuna vigezo vitatu:

- Usahihi- kugundua maambukizi (au kutokuwepo kwake) na kiwango cha juu cha uwezekano.

- Umaalumu- usahihi wa kuamua pathojeni maalum.

- Unyeti– uwezekano wa kutambua pathojeni hata kwa kiasi kidogo cha nyenzo za kijeni katika sampuli za kibiolojia.

Wakati wa kutumia njia ya PCR, kupata matokeo chanya ya uwongo karibu haiwezekani (ambayo ni, ikiwa pathojeni haipo, basi. mtihani chanya haitafanya).

Matokeo mabaya ya uwongo yanawezekana, lakini hii hutokea mara chache sana. Hali zinazofanana kutokea ikiwa maambukizi hayafanyiki wakati wa utafiti. Kwa mfano, maambukizi ya muda mrefu maambukizi yasiyo ya kazi au ya siri.

Uchambuzi wa PCR: video

Kwa mara ya kwanza, uchambuzi wa PCR ulijadiliwa mnamo 1983. Mbinu hii ilitengenezwa na Cary Mullis na wafanyakazi wake wa maabara. Tangu wakati huo, umaarufu wa utafiti umeongezeka kwa kasi, kwa sababu. Ina idadi kubwa ya faida juu ya njia nyingine.

Leo, uchunguzi wa PCR ndio kipimo au kiwango cha kugundua maambukizo na vimelea, haswa vile ambavyo havina dalili. Kwanza kabisa, ni uchunguzi wa mapema.

Kufanya uchambuzi katika mashine ya PCR

Kiini cha uchambuzi wa PCR kiko katika ukweli kwamba katika bomba la majaribio lililoundwa (kuzidisha kuongezeka) mlolongo wa asidi ya nucleic (DNA au RNA) tabia ya aina fulani vimelea vya magonjwa.

Kifupi cha PCR kinawakilisha mmenyuko wa mnyororo wa polimerasi.

nyumbani kipengele cha kutofautisha ya njia hii ni amplification, i.e. kuunda idadi kubwa ya nakala za jeni au kipande unachotaka. Yote hii huzalishwa nje ya mwili, i.e. katika vitro.

Kwa hivyo, ikiwa mizunguko 20 ya PCR inafanywa, basi takriban nakala milioni 1 au zaidi hupatikana. Hii inafanya uwezekano wa kuchunguza maambukizi hata kwa kiasi kidogo katika nyenzo za chanzo, wakati mbinu nyingine za uchambuzi hazina nguvu. Hii huamua unyeti mkubwa wa njia hii.

Kwa maneno rahisi, unaweza kuchora mlinganisho kama huo - hautaona punje moja ndogo ya mchanga kwenye sakafu, lakini baada ya kuongeza idadi ya mchanga kwa mara milioni (PCR), rundo la mchanga tayari litaonekana wazi. .

Faida kuu za uchambuzi wa maambukizo kwa njia ya PCR ni:

unyeti wa juu zaidi na umaalumu ikilinganishwa na njia zingine zinazotumiwa kugundua mawakala wa kuambukiza;
uwezo wa kuchunguza microorganisms katika aina mbalimbali za vifaa vya kibiolojia (damu, mkojo, usiri wa uke, mate, nk);
uwezo wa kutambua wakati huo huo microorganisms kadhaa za causative, ikiwa zipo. Kwa kulinganisha, matumizi ya njia za bacteriological haitoi fursa hiyo, kwa sababu. ni muhimu kutumia vyombo vya habari tofauti kwa ajili ya kilimo cha microbes mbalimbali za pathogenic;
uwezekano wa kusafirisha nyenzo za kibiolojia, kwa sababu ili kutambua pathogen, si lazima kuiweka hai;
kasi ya uchambuzi;
usahihi wa utambuzi wa etiolojia;
uwezekano wa uamuzi wa kiasi cha pathogens - hasa muhimu kwa vijidudu vya pathogenic kwa masharti, ambayo tu baada ya kufikia mkusanyiko fulani inaweza kusababisha ugonjwa;
uwezo wa kudhibiti mwendo wa mchakato wa kuambukiza wakati wa matibabu.

Uchunguzi wa PCR kwa maambukizi

Hivi sasa, njia ya mmenyuko wa mnyororo wa polymerase huamua idadi kubwa ya magonjwa ya ngono (na mengine) ya kuambukiza. Utambuzi umeenea kwa sababu yake unyeti mkubwa na maalum.

Uchunguzi wa PCR kwa chlamydia ni maarufu sana.

Hii ni kutokana na ukweli kwamba microorganisms hizi huishi intracellularly, ambayo inajenga matatizo fulani katika kutambua kwao.

Utambuzi wa PCR hufanya iwezekanavyo kugundua hata kiwango kidogo cha chlamydia, ambayo, kama sheria, bado haileti kuonekana. dalili za kliniki. Hata uwepo wa molekuli 2 tu za asidi ya nucleic katika nyenzo za mtihani hufanya iwezekanavyo kutambua maambukizi ya causative.

Na hii ni ahadi matibabu ya mafanikio, ambayo huanza katika hatua ya awali.

Maambukizi pia yanajulikana:

hepatitis ya virusi;
kifua kikuu;
encephalitis inayosababishwa na tick;
mbalimbali magonjwa ya venereal na kadhalika.

Uchunguzi wa PCR huruhusu kutatua idadi ya kazi nyingine muhimu:

ufuatiliaji wa tiba na kutathmini ufanisi wake;
uamuzi wa "mzigo wa virusi", kwa misingi ambayo uteuzi wa mtu binafsi wa kipimo cha madawa ya kulevya hufanywa;
utambulisho wa aina ya vijidudu ambavyo ni sugu kwa dawa (kutokuwa na hisia kwa dawa).

Maandalizi ya utoaji wa uchambuzi

Kujitayarisha kwa makusudi kwa utoaji wa uchambuzi, ambao utafanywa na PCR, hauhitajiki. Hata hivyo, ni muhimu sana kwamba mtaalamu achukue nyenzo kwa kufuata yote masharti muhimu utasa.

Kwa hiyo, kwa mfano, mifumo maalum ya utupu inapaswa kutumika kuchukua damu, zilizopo maalum za mtihani zinapaswa kutumika kuchukua siri ya viungo vya uzazi, nk.

Katika baadhi ya matukio, nyenzo lazima zisafirishwe kwenye maabara. Ili kufanya hivyo kwa usahihi, ni muhimu kufunga chombo kwa hermetically nyenzo za kibiolojia. Hii itazuia kupenya kwa microorganisms nyingine wanaoishi katika mazingira ya nje.

Matokeo ya uchambuzi wa PCR yanaweza kuwa ya chaguzi mbili:

chanya - pathojeni iliyogunduliwa;
hasi - wakala wa causative haukugunduliwa.

Unapaswa kujua - hata kwa kutokuwepo dalili za kliniki matokeo chanya yanaweza kupatikana.

Katika kesi hii, ni muhimu kuzingatia data mmenyuko wa polymerase, kwa sababu inaruhusu kutambua ugonjwa huo katika hatua ya awali.

Wakati mwingine jibu la shaka linaweza kupatikana wakati idadi ya nakala zilizotambuliwa inalingana na kikomo cha juu cha kawaida. Ili kufafanua sababu ya ugonjwa huo, unapaswa kurudia uchambuzi, kutoa Tahadhari maalum masharti ya kukusanya nyenzo za kibiolojia.

Je, uchunguzi wa PCR ni sahihi kiasi gani?

Faida kuu za utambuzi wa PCR zinaweza kutengenezwa kwa njia ya nadharia kadhaa:

uwezekano wa kupata idadi kubwa ya nakala za vijidudu vya pathogenic;
idadi kubwa ya nakala ni ufunguo wa kufanikiwa kwa mpangilio (kugundua).

Hii hutoa uchanganuzi wa PCR wa usahihi wa juu kwa kugundua vimelea vya magonjwa ndani ya seli na vijidudu vinavyokua polepole.

Kwa hiyo, njia hiyo ni ya habari hasa kwa kugundua kifua kikuu cha mycobacterium na mawakala wengine wa kuambukiza sawa. Ina usahihi wa juu zaidi na hauhitaji kuangalia tena matokeo yaliyopatikana (isipokuwa kwa kesi za casuistic).

Ili kupata zaidi matokeo ya kuaminika inahitajika kutimiza hali mbili kuu zinazozuia maambukizo ya nje (ya nje):

ulaji sahihi wa nyenzo;
usafiri sahihi.

Moja ya kisasa zaidi-sahihi utafiti wa matibabu kulingana na utafiti wa mahusiano ya maumbile ya Masi katika plasma ya damu, ni uchambuzi wa PCR (PCR) - mmenyuko wa mnyororo wa polymerase. Njia ya PCR inakuwezesha kuchunguza magonjwa fulani katika mwili wa mgonjwa unaosababishwa na maambukizi na virusi, au kuhusiana na magonjwa ya kijeni kurithiwa. Uchunguzi wa PCR husaidia kutambua magonjwa yanayotokea katika papo hapo na katika hatua ya muda mrefu, isiyo na dalili. Utafiti kama huo ni muhimu sana kwa kuzuia ukuaji wa magonjwa: kwa kugundua ugonjwa mwanzoni mwa ukuaji wake, inawezekana kuponya ugonjwa hadi kuanza kuharibu mwili wa mgonjwa au kupunguza matokeo yake.

Leo, uchunguzi wa PCR ni "kiwango cha dhahabu" katika kuamua magonjwa mengi ya kuambukiza. Katika kila kliniki au maabara, uchunguzi kama huo unafanywa kila siku, matokeo yake ni msingi wa utambuzi mwingi, na katika hali zingine ni uainishaji wa data ya mmenyuko wa mnyororo wa polymerase ambayo ndio msingi wa kuamua ugonjwa fulani.

Njia ya PCR mara nyingi husaidia madaktari katika hali ambapo masomo mengine na uchunguzi hauna nguvu, au kutokana na hatua ya awali maendeleo ya ugonjwa huo hawezi kuamua kuwepo kwa microflora ya pathogenic katika mwili wa mgonjwa. Utambuzi kwa njia ya PCR ni zaidi uchambuzi sahihi kuliko njia nyingine zozote zinazohusiana na utafiti wa uwepo wa bakteria, virusi na upungufu wa kinga katika mwili wa binadamu.

Faida za njia ya PCR ni pamoja na usahihi wa juu - wakati wa kusoma sehemu ya DNA au RNA, hugundua 100% au haioni microflora ya pathogenic ambayo inaweza kusababisha. ugonjwa mbaya. Njia hii haina matokeo mazuri ya uongo - ina maalum ya juu, ambayo inafanya uwezekano wa kutambua sehemu maalum ya mlolongo katika muundo wa DNA na RNA iliyo na wakala maalum wa causative wa ugonjwa huo. Zaidi ya hayo, kipimo cha PCR ni nyeti sana hivi kwamba kati ya mabilioni ya seli kinaweza kutambua mtu aliyeambukizwa na virusi na kutambua kwa usahihi virusi na pathojeni yake. Ikilinganishwa na tafiti zingine zinazojulikana ambazo zina unyeti wa si zaidi ya seli 100-105 katika sampuli iliyochukuliwa wakati wa uchunguzi, uchunguzi wa PCR unakuwezesha kuchunguza kutoka kwa seli 10 hadi 1000.

Sio seramu au plasma yenyewe ambayo inakabiliwa na utafiti, lakini asidi ya deoxyribonucleic au ribonucleic (DNA na RNA), yaani, nyenzo za maumbile za bakteria hizo na virusi ambazo ziko kwenye mwili wa mgonjwa na zinaweza kusababisha maendeleo ya magonjwa. Kila virusi ina yake mwenyewe mbinu ya kipekee utambuzi wake, ndiyo sababu matokeo ya utafiti huwa sahihi kila wakati.

Katika utafiti mmoja, microorganisms moja hadi kadhaa hatari zinaweza kugunduliwa.

Utambuzi wa PCR, tofauti na masomo mengine ya bacteriological na immunological, hufanyika haraka sana. Ikiwa inachukua kutoka siku moja hadi kumi kufanya chini ya t, basi utafiti wa PCR unafanywa ndani ya masaa 5-7.

Mara nyingi, smear ya PCR hufanywa kama uchunguzi wa awali au wa kurudi nyuma. Njia ya kwanza ni kutambua microorganisms hatari za pathogenic ambazo tayari zimeanza shughuli zao za uharibifu katika mwili, lakini magonjwa bado hayajidhihirisha wenyewe. Utafiti wa pili ni kugundua virusi na maambukizo baada ya matibabu, wakati, kulingana na data uchambuzi wa kawaida, mgonjwa anachukuliwa kuwa na afya, hakuna dalili za ugonjwa huo, lakini baadhi ya seli zinaweza kuwa na vimelea vya hatari. Uwezo huu wa kipekee wa utambuzi hufanya iwezekanavyo kuamua magonjwa ya kuambukiza wakati wa incubation, wakati aliingia tu ndani ya mwili wa mwanadamu, lakini hakukuwa na kuzorota kwa ustawi, na vile vile wakati. mkondo wa chini ugonjwa, ikiwa mgonjwa anahisi afya, lakini virusi vipo katika mwili, ingawa haijisikii.

Uchunguzi wa PCR hautumiwi tu kutambua virusi na bakteria, lakini pia kutambua mtu kwa vipande vya DNA yake, na pia kuamua umoja (baba, uzazi, nk).

Katika miongo kadhaa iliyopita, uchunguzi wa PCR, kama matawi mengine ya dawa na sayansi, umepiga hatua mbele. Leo, vifaa vinavyotumiwa katika mchakato wa utafiti wa biomaterial vimeboreshwa, aina mpya za mmenyuko wa mnyororo wa polymerase zimeonekana, kuna mifumo mpya ya mtihani ambayo hupunguza gharama ya uchambuzi na kuongeza usahihi wake. Shukrani kwa hili, uchambuzi wa PCR umepatikana zaidi kwa idadi ya watu, na idadi ya watu ambao maisha yao yameokolewa na utambuzi wa mapema wa magonjwa kwa njia ya PCR imeongezeka maelfu ya mara.

Nini msingi wa utafiti huu

Nini kinaruhusu utafiti huu kuwa sahihi sana? Hii ni amplification, yaani, kurudia mara mbili ya sehemu ya mlolongo wa deoxyribonucleic au ribonucleic asidi, ambayo enzymes maalum na vifaa hutumiwa. Kwa kukuza sehemu ya DNA au RNA kwa mara mia kadhaa, inakuwa rahisi kuzisoma kwa macho.

Lakini kabla ya kuongezeka na kusoma sehemu moja au nyingine ya mnyororo, muundo huo unafanywa uchunguzi wa awali kwa uwepo wa maeneo ambayo yanaweza kuathiriwa na virusi. Wakati mikoa hiyo inapatikana, inakabiliwa na amplification.

Utambuzi unafanywa kama ifuatavyo. Kwanza, maji ya kibaiolojia yaliyopo kwenye mwili huchukuliwa kutoka kwa mgonjwa kwa uchambuzi. Inaweza kuwa damu, mkojo, mate, machozi au kamasi ya uzazi. Biomaterial iliyokusanywa imewekwa moja kwa moja kwenye amplifier, ambapo reagents enzymatic huletwa, iliyoundwa kuchanganya na sehemu za DNA na RNA za virusi na maambukizi moja kwa moja. Mara tu reagent na virusi hufunga, kifaa hutengeneza eneo hili na kuanza kufanya nakala za eneo hili, na kuongeza mara kadhaa. Kuiga vile hufanyika kwa kuendelea, "kando ya mlolongo", ambayo inafanya uwezekano wa kupata mamia kadhaa, na wakati mwingine maelfu ya sampuli za utafiti.

Hatua inayofuata ni kulinganisha viwanja vinavyotokana na data juu ya virusi na maambukizo yanayopatikana kwenye hifadhidata. Kwa hivyo zinapatikana moja kwa moja microorganisms pathogenic, idadi yao na wakati wa uwepo katika mwili (muda gani waliingia kwenye mwili) huanzishwa.

Uchunguzi wa PCR leo hauruhusu tu kulinganisha virusi vilivyogunduliwa na wale ambao tayari wanajulikana, lakini pia kutambua mabadiliko, na pia kupendekeza nini mabadiliko haya yanaweza kusababisha.

Wanasayansi - wanajeni hutumia sana mbinu ya utafiti wa PCR kuvuka sehemu binafsi za DNA na kusoma aina mpya za jeni na mabadiliko.

Virusi na maambukizo huamuliwa na mmenyuko wa mnyororo wa polymerase

Wakati wa kufanya PCR, unaweza kupata bakteria nyingi na maambukizi ambayo husababisha kali, na wakati mwingine hata magonjwa yasiyotibika. Kwanza kabisa, ni virusi vya ukimwi wa binadamu, na katika kipindi cha latent au incubation, wakati matokeo yake bado hayajaonekana. Hii ni muhimu sana katika hali ambapo vipimo vingine vya VVU bado havijatoa matokeo: katika miezi sita ya kwanza baada ya uwezekano wa maambukizi au kwa watoto wachanga waliozaliwa na mama aliye na VVU.

Pia, utafiti wa PCR unaonyesha hepatitis ya aina zote, mononucleosis asili ya kuambukiza, maambukizi ya cytomegalovirus, herpes, magonjwa yote ya zinaa (ureaplasma, chlamydia, mycoplasma, trichomonas, gardnerella, nk).

Wakala wa causative wa kifua kikuu pia wamedhamiriwa, pamoja na maambukizo ya darasa la oncogenic, i.e. yale ambayo yanaweza kusababisha ukuaji baadaye. tumors mbaya(papillomavirus ya binadamu). Kwa nyepesi, lakini sio chini maambukizo hatari iliyoamuliwa na tafiti za PCR ni pamoja na borreliosis, encephalitis inayosababishwa na kupe, maambukizi ya fangasi(Candida) na Helicobacter pylori.

Wawakilishi hawa wote wa microflora ya pathogenic wanaweza kusababisha magonjwa hatari katika sehemu mbalimbali mwili wa mgonjwa, na kwa hiyo mbinu ya PCR hutumiwa karibu na viwanda vyote dawa za kisasa. Kwa msaada wake, gynecological na magonjwa ya urolojia, miadi ya utafiti wa PCR inaweza kupatikana kutoka kwa mtaalamu wa magonjwa ya kuambukiza, pulmonologist na phthisiatrician. Sio kawaida kutumia mmenyuko wa mnyororo wa polymerase katika uwanja wa gastroenterology, hematology, oncology, nk.

Jinsi ya kukusanya biomaterial kwa utambuzi

Kwa uchunguzi, mgonjwa atahitajika kutoa biomaterial, ambayo inaweza kuwa na wawakilishi wa pathogenic microflora. Kama nyenzo inayofaa kwa utafiti, majimaji yaliyopo kwenye chombo fulani huchukuliwa.

Kwa hiyo, virusi na maambukizi, DNA na RNA, ambayo inaweza kugunduliwa na uchambuzi, huishi katika damu ya mgonjwa, mkojo wake na mate, pamoja na usiri wa mucous wa pua, sehemu za siri. Katika zaidi kesi adimu wakati uchunguzi wa kina wa mtoto ujao unahitajika, kioevu kinachukuliwa kwa uchambuzi mfuko wa amniotic au tishu za placenta. Ili kugundua virusi kusababisha kifua kikuu, sputum itahitajika, na kuchunguza virusi vilivyosababisha papillomas (warts), kufuta kutoka kwa epitheliamu.

Ikiwa uchambuzi unalenga kutambua maambukizi ya venereal kuambukizwa kupitia ngono au njia ya kaya, daktari huchukua usufi au kugema kutokwa kwa uke, toka nje mrija wa mkojo kwa wanaume na mfereji wa kizazi kwa wanawake. Pia, katika baadhi ya matukio, si tu usiri wa mucous wa viungo vya uzazi, lakini pia mkojo wa mgonjwa unaweza kuhitajika.

Wakati wa kugundua herpes, mononucleosis ya kuambukiza, aina zote za hepatitis na virusi vya ukimwi wa binadamu, seramu ya damu itahitajika, kama biomaterial ya ziada inaweza kuwa: mkojo wa mgonjwa (na maambukizi ya cytomegalovirus), pamoja na swab ya koo.

Ikiwa kazi ya mmenyuko wa mnyororo wa polymerase ni kutambua maambukizi ambayo yanaathiri kazi ya mfumo mkuu wa neva na wa pembeni, maji ya uti wa mgongo huchukuliwa kwa ajili ya utafiti.

Jinsi ya kujiandaa kwa utafiti

Ili matokeo ya mmenyuko wa mnyororo wa polymerase kuwa sahihi iwezekanavyo, na utambuzi kuwa sahihi na kutafakari picha ya ugonjwa huo, ni muhimu kujiandaa kwa makini kwa utoaji wa biomaterial kwa uchambuzi.

Kwa kiasi kikubwa, matokeo ya uchunguzi hutegemea taaluma ya msaidizi wa maabara, vifaa na sifa za daktari ambaye anafafanua data zilizopatikana. Lakini mengi inategemea mgonjwa ambaye alipokea miadi ya utambuzi huu.

Sheria ya kwanza ambayo lazima izingatiwe wakati wa kukabidhi nyenzo ni utasa kamili na usafi wa matokeo maji ya kibaiolojia. Ikiwa hakuna kitu kinategemea mgonjwa wakati wa kukusanya damu, maji ya cerebrospinal au maji ya amniotic, basi mkusanyiko wa mkojo, sputum na smear unapaswa kutayarishwa kwa makini. Ikiwa microorganisms za kigeni huingia kwenye nyenzo za mtihani, zitaathiri sana data ya mwisho ya uchambuzi na kusababisha uchaguzi wa mbinu zisizo sahihi za matibabu.

Na hii imejaa sio tu na mapokezi ya lazima dawa, lakini pia kuzorota kwa kazi ya viungo vingine na mifumo ya mwili.

Ili kuepuka matokeo hayo, mgonjwa anapaswa kufanya kadhaa sheria rahisi ambayo itasaidia kupitisha vipimo kwa usahihi.

Sampuli ya maji yote ya ndani hufanyika madhubuti kwenye tumbo tupu, inaruhusiwa tu kunywa maji safi yasiyo ya kaboni;
Wakati wa kuchukua swabs kutoka kwa viungo vya uzazi, mawasiliano yoyote ya ngono ni marufuku saa 24 kabla ya biomaterial kuchukuliwa;
Mkojo na sputum hutolewa kwa vyombo maalum vya kuzaa vilivyotolewa kwenye maabara au kununuliwa kwa kusudi hili katika maduka ya dawa. Kabla ya kukusanya mkojo, sehemu ya siri ya nje inapaswa kuosha kabisa na sabuni ya kufulia, futa sehemu ya kwanza ya mkojo, na kukusanya sehemu ya kati kwenye chombo.

Vile sheria rahisi mafunzo yatakusaidia kupata data sahihi zaidi ya utafiti na kuanza haraka matibabu sahihi. Kawaida, matokeo ya utafiti ni tayari ndani ya masaa machache, lakini mara nyingi katika maabara, matokeo hutolewa siku inayofuata baada ya sampuli ya biomaterial. Mgonjwa hupokea fomu ya maabara mikononi mwake, ambayo ina data ya kibinafsi ya mgonjwa na virusi vilivyopatikana katika mwili wake.

Nakala kamili ya matokeo yaliyopatikana hufanywa na daktari ambaye alitoa rufaa kwa utafiti huo, pia huanzisha utambuzi wa mwisho. Wakati mwingine, kulingana na matokeo ya uchunguzi, inaweza kupendekezwa kufanya vipimo vya ziada na mitihani na mashauriano ya wataalamu finyu. Lakini mara nyingi, matokeo ya mmenyuko wa mnyororo wa polymerase ni msingi wa uchunguzi wa mwisho.