Bakterite vaade mikroskoobist Bacillus subtilis. Heinapulk. Paljundamine. Kuidas kolooniat kasvatada

• Savustjanenko A.V.

Märksõnad

annotatsioon teaduslik artikkel meditsiinist ja tervishoiust, teadusliku töö autor - Savustyanenko A.V.

Bakter B. subtilis on üks paljutõotavamaid probiootikume, mida viimastel aastakümnetel on uuritud. Selle probiootilise toime mehhanismid on seotud antimikroobsete ainete sünteesiga, mittespetsiifilise ja spetsiifilise immuunsuse tugevdamisega, normaalse soole mikrofloora kasvu stimuleerimisega ja seedeensüümide vabanemisega. B. subtilis sekreteerib ribosoomides sünteesitud peptiide, ribosoomita sünteesitud peptiide ja mittepeptiidseid aineid, millel on lai antimikroobse toime spekter, hõlmates grampositiivseid, gramnegatiivseid baktereid, viirusi ja seeni. Resistentsus nende antimikroobsete ainete suhtes on haruldane. Mittespetsiifilise immuunsuse tugevdamine on seotud makrofaagide aktiveerumisega ja nendest põletikueelsete tsütokiinide vabanemisega, soole limaskesta barjäärifunktsiooni suurenemisega, vitamiinide ja aminohapete (sealhulgas asendamatute) vabanemisega. Spetsiifilise immuunsuse tugevnemine väljendub Ti B-lümfotsüütide aktiveerimises ja viimaste immunoglobuliinide - IgG ja IgA - vabanemises. B. subtilis stimuleerib soolestiku normaalse mikrofloora, eelkõige perekondadesse Lactobacillus ja Bifidobacterium kuuluvate bakterite kasvu. Lisaks suurendab probiootikum soolestiku mikrofloora mitmekesisust. Probiootikum vabastab soole luumenisse kõik peamised seedeensüümid: amülaasid, lipaasid, proteaasid, pektinaasid ja tsellulaasid. Lisaks toidu seedimisele lagundavad need ensüümid toitumisvastaseid tegureid ja allergeenseid aineid, mida leidub sissetulevas toidus. Loetletud toimemehhanismid muuta mõistlikuks B. subtilise kasutamine sooleinfektsioonide vastu võitlemise kompleksravi osana; ärahoidmine hingamisteede infektsioonid külmhooajal; antibiootikumidega seotud kõhulahtisuse ennetamine; seedehäirete korrigeerimiseks ja erineva päritoluga toidu propageerimiseks (vead toitumises, muutused toitumises, haigused seedetrakti, autonoomse närvisüsteemi häired jne). B.subtilis ei põhjusta tavaliselt kõrvaltoimeid. Seda probiootikumi iseloomustab tõhususe ja ohutuse kõrge suhe.

Seotud teemad teaduslikud tööd meditsiini ja tervishoiu alal, teadustöö autor - Savustyanenko A.V.,

• Pre- ja probiootikumide efektiivsus soolestiku mikrobiotsenoosi korrigeerimisel patsientidel pärast hemikolektoomiat

  2011 / Li I. A., Silvestrova S. Yu.

• Soolestiku mikrobiota roll rasvumise kujunemisel vanuselises aspektis

  2015 / Shcherbakova M. Yu., Vlasova A. V., Roživanova T. A.

• Uute probiootikum-ensümaatiliste toidulisandite kasutamise efektiivsus vasikate söötmisel

  2012 / Nekrasov R. V., Anisova N. I., Ovchinnikov A. A., Meleshko N. A., Ushakova N. A.

• Soolestiku biotsenoos kolorektaalse vähiga patsientidel

  2012 / Starostina M. A., Afanasjeva Z. A., Gubajeva M. S., Ibragimova N. R., Sakmarova L. I.

• Soole düsbakterioos JA LASTE KÕHUKINNISUS

  2010 / Khavkin A.I.

Bakter B. subtilis on üks paljutõotavamaid probiootikume, mida viimastel aastakümnetel on uuritud. Selle probiootilise toime mehhanismid on seotud antimikroobsete ainete sünteesiga, mittespetsiifilise ja spetsiifilise immuunsuse suurendamisega, soolestiku normaalse mikrofloora kasvu stimuleerimisega ja seedeensüümide vabanemisega. B.subtilis vabastab ribosomaalselt sünteesitud peptiide, ribosomaalselt mittesünteesitud peptiide ja mittepeptiidseid aineid, millel on lai antimikroobse toime spekter, mis hõlmab grampositiivseid, gramnegatiivseid baktereid, viirusi ja seeni. Resistentsus nende antimikroobsete ainete suhtes on haruldane. Mittespetsiifilise immuunsuse tugevnemine on seotud makrofaagide aktiveerumisega ja nendest põletikku soodustavate tsütokiinide vabanemisega, soole limaskesta barjäärifunktsiooni suurenemisega, vitamiinide ja aminohapete (sh asendamatute) vabanemisega. Spetsiifilise immuunsuse tugevnemine väljendub Tand B-lümfotsüütide aktiveerimises ja immunoglobuliinide - IgG ja IgA - vabanemises viimastest. B.subtilis stimuleerib normaalse soolefloora, eelkõige perekonda Lactobacillus ja Bifidobacterium kuuluvate bakterite kasvu. Lisaks suurendab probiootikum soolestiku mikrofloora mitmekesisust. Probiootikum eritab soole luumenisse kõik peamised seedeensüümid: amülaasid, lipaasid, proteaasid, pektinaasid ja tsellulaasid. Lisaks seedimisele hävitavad need ensüümid toidus sisalduvaid toitumisvastaseid tegureid ja allergeenseid aineid. Need toimemehhanismid muudavad B. subtilise kasutamise mõistlikuks kombineeritud ravis sooleinfektsioonide raviks; hingamisteede infektsioonide ennetamine külmal aastaajal; antibiootikumidega seotud kõhulahtisuse ennetamine; toidu seedimise ja erineva päritoluga liikumishäirete (vead toitumises, toitumise muutused, seedetrakti haigused, autonoomse närvisüsteemi häired jne) korrigeerimiseks. B. subtilis ei ole põhjustavad tavaliselt kõrvaltoimeid. Seda probiootikumi iseloomustab kõrge efektiivsuse ja ohutuse suhe.

Teadusliku töö tekst teemal "Probiootikumide toimemehhanismid Bacillus subtilis'e baasil"

Harjutava likari abistamiseks

Praktiku abistamiseks

UDK 615.331:579.852.1

BACILLUS SUBTILISEL PÕHINEvate PROBIOOTIKUTE TOIMEMEHHANISMID

Kokkuvõte. Bakter B. subtilis on üks paljutõotavamaid probiootikume, mida viimastel aastakümnetel on uuritud. Selle probiootilise toime mehhanismid on seotud antimikroobsete ainete sünteesiga, mittespetsiifilise ja spetsiifilise immuunsuse tugevdamisega, normaalse soole mikrofloora kasvu stimuleerimisega ja seedeensüümide vabanemisega. B. subtilis sekreteerib ribosoomides sünteesitud peptiide, ribosoomita sünteesitud peptiide ja mittepeptiidseid aineid, millel on lai antimikroobse toime spekter, hõlmates grampositiivseid, gramnegatiivseid baktereid, viirusi ja seeni. Resistentsus nende antimikroobsete ainete suhtes on haruldane. Mittespetsiifilise immuunsuse tugevdamine on seotud makrofaagide aktiveerumisega ja nendest põletikueelsete tsütokiinide vabanemisega, soole limaskesta barjäärifunktsiooni suurenemisega, vitamiinide ja aminohapete (sealhulgas asendamatute) vabanemisega. Spetsiifilise immuunsuse tugevnemine väljendub T- ja B-lümfotsüütide aktiveerumises ning viimaste immunoglobuliinide – IgG ja IgA – vabanemises. B. subtilis stimuleerib soolestiku normaalse mikrofloora, eelkõige perekondadesse Lactobacillus ja Bifidobacterium kuuluvate bakterite kasvu. Lisaks suurendab probiootikum soolestiku mikrofloora mitmekesisust. Probiootikum vabastab soole luumenisse kõik peamised seedeensüümid: amülaasid, lipaasid, proteaasid, pektinaasid ja tsellulaasid. Lisaks toidu seedimisele lagundavad need ensüümid toitumisvastaseid tegureid ja allergeenseid aineid, mida leidub sissetulevas toidus. Need toimemehhanismid õigustavad B.subtilise kasutamist sooleinfektsioonide vastu võitlemise kompleksravi osana; hingamisteede infektsioonide ennetamine külmal aastaajal; antibiootikumidega seotud kõhulahtisuse ennetamine; seedimishäirete korrigeerimiseks ja erineva päritoluga toidu propageerimiseks (vead toitumises, toitumise muutused, seedetrakti haigused, autonoomse närvisüsteemi häired jne). B.subtilis ei põhjusta tavaliselt kõrvaltoimeid. Seda probiootikumi iseloomustab tõhususe ja ohutuse kõrge suhe.

Märksõnad: Bacillus subtilis, probiootikum, toimemehhanismid.

Probiootikumid on "elus mikroorganismid, mis piisavas koguses manustatuna toovad peremeesorganismile kasu tervisele". Kui osade (Lactobacillus, Bifidobacterium) kasutamine on pälvinud palju tähelepanu, siis teisi on hakatud uurima viimasel ajal ning nende oluline ravitoime selgub alles nüüd. Üks probiootikume on grampositiivne bacillus Bacillus subtilis (B. subtilis).

Enamik Bacillus perekonna baktereid (sh B. subtilis) ei ole inimestele ohtlikud ja on keskkonnas laialt levinud. Neid leidub pinnases, vees, õhus ja toiduainetes (nisu, muud terad, pagaritooted, sojatooted, täisliha, toor- ja pastöriseeritud piim). Selle tulemusena satuvad nad pidevalt seedetrakti ja Hingamisteed nende osakondade külvamisega. Batsillide arv soolestikus võib ulatuda 107 CFU / g-ni, mis on võrreldav Lactobacilluse omaga. Sellega seoses peavad paljud teadlased perekonda Bacillus kuuluvaid baktereid üheks

normaalse soole mikrofloora domineerivatest komponentidest.

Samas võimaldab B. villii terapeutiline manustamine kasutada seda mikroorganismi probiootikumina neljas põhivaldkonnas: 1) kaitseks soolepatogeenide eest; 2) hingamisteede haigustekitajatest; 3) antibiootikumravi ajal düsbakterioosi kõrvaldamiseks; 4) parandada seedimist ja toidu edendamist. B. villii probiootilise aktiivsuse lihtsustatud skeem seedetrakti patoloogias on näidatud joonisel fig. üks.

Seega on viimaste aastakümnete teadustöödes tehtud olulisi edusamme B. villii probiootilise toime spektri väljaselgitamisel, mis teeb sellest bakterist ühe atraktiivsema probiootikumi. meditsiiniliseks kasutamiseks. Käesolevas ülevaates esitame asjakohaste eksperimentaalsete ja kliiniliste uuringute andmed, mis võimaldavad meil luua mulje B.villivi ravipotentsiaalist.

antimikroobsed ained

Mittespetsiifilise ja spetsiifilise immuunsuse tugevdamine

1 seedeensüümi eraldamine

Joonis 1. Lihtsustatud skeem B.subtIII probiootilise aktiivsuse kohta seedetrakti patoloogias (põhineb joonistelt )

Blillbv vegetatiivsete rakkude ellujäämine seedetraktis

RnbNBb-l põhinevaid probiootikume võetakse tavaliselt suukaudselt kas eoste või elusbakterite (vegetatiivsete rakkude) kujul. Eoste ellujäämine seedetraktis on väljaspool kahtlust nende kõrge vastupidavuse tõttu erinevatele füüsikalis-keemilistele teguritele, eriti äärmuslikele pH väärtustele. Samal ajal arutati küsimust, kas elusbakterid on võimelised tungima maost kaugemale ja täitma probiootilist funktsiooni.

Olukorda selgitati randomiseeritud topeltpime platseebokontrollitud uuringu läbiviimisega tervete vabatahtlikega (n = 81, vanus 18-50 aastat). Kõikidele katsealustele manustati suukaudselt elusbakterit Vlybshv annuses 0,1 109; 1,0109 või 10109 cfu/kapsel/päev või platseebo 4 nädala jooksul. Uuringu lõpus arvutati välja elusbakterite sisaldus väljaheites. Saadud arvud olid 1,1 ± 0,1 1 s^10 CFU/g1 platseeborühmas ja 4,6 ± 0,1 CFU/g; 5,6 ± 0,1 k^10 CFU/g; 6,4 ± 0,1 CFU/g VlySHv kolme suureneva annuse korral. Seetõttu kinnitati vegetatiivsete RnLNB rakkude ellujäämine seedetrakti läbimise ajal. Samal ajal oli toime annusest sõltuv ja ületas oluliselt platseebo oma (lk< 0,0001) .

B. uIIbv toime sarnasus, kui seda võetakse eoste ja vegetatiivsete rakkude kujul

Viidatud kirjanduses viidi suurem osa RnLNBb eksperimentaalsetest ja kliinilistest uuringutest läbi nende bakterite eoste või nende vegetatiivsete rakkude sissetoomisega. Sellega seoses tekib küsimus

1 kolooniat moodustav üksus (CFU) on arvuliselt võrdne vegetatiivsete rakkude arvuga.

kas saadud mõjusid ja ravitulemusi tuleks käsitleda eraldi või võib neid kombineerida.

Paljudes töödes on perekonna Bacillus bakterite uurimisel näidatud, et pärast suukaudne tarbimine eosed idanevad seedetraktis vegetatiivseteks rakkudeks. Seejärel täheldatakse eosteks muutumist (resporulatsiooni). Neid tsükleid korratakse mitu korda. Lõppkokkuvõttes satuvad eosed koos väljaheite massiga väliskeskkonda. Samamoodi täheldatakse pärast vegetatiivsete rakkude suukaudset manustamist nende eoste teket seedetraktis. Idanemise ja resporulatsiooni tsükleid korratakse mitu korda enne peremeesorganismist eemaldamist.

Seega olenemata sellest, kas B. subtilis’e baasil põhinevaid probiootikume võetakse eostena või vegetatiivsete rakkudena, esinevad retsipiendi kehas mõlemad bakterivormid ning täheldatud toimed ja ravitoime on ilmselt samad. See asjaolu nõuab täiendavat kinnitust spetsiaalsetes uuringutes.

Probiootilised mehhanismid

B. subtilise aktiivsus

Antimikroobsete ainete süntees

Reeglina põhjustavad soolepõletikke bakterid või viirused, harvemini algloomad. Vastavalt kehtivatele soovitustele ei ole enamikul juhtudel antibiootikume vaja välja kirjutada. Tuleb järgida õiget rehüdratsioonirežiimi ja kõhulahtisus taandub iseenesest. Kuid nii kergete kui ka raskete sooleinfektsioonide korral võib arst otsustada lisada käimasolevasse ravi probiootikume, et suurendada selle efektiivsust.

Üks lootustandvamaid baktereid selles osas on B.subtilis. Bakteri ainulaadsus seisneb selles, et 4-5% tema genoomist kodeerib erinevate antimikroobsete ainete sünteesi. Avaldatud ülevaadete kohaselt eraldati 2005. aastaks B. subtilis'e erinevatest tüvedest umbes 24 sellist ainet ja 2010. aastaks 66 ning loetelu kasvab jätkuvalt. Enamikku antimikroobsetest ainetest esindavad ribosomaalsed ja mitteribosomaalsed sünteesitud peptiidid. Väiksemas koguses leidub mittepeptiidseid aineid, näiteks polüketiide, aminosuhkruid ja fosfolipiide. Mõned antimikroobsed ained B. subtilis on toodud tabelis. 1. On näha, et paljude nende tegevus on suunatud grampositiivsete bakterite vastu. Lisaks hõlmab toimespekter gramnegatiivseid baktereid, viirusi ja seeni. Seetõttu on hõlmatud praktiliselt kõik patogeenid, mis võivad põhjustada sooleinfektsioone.

Näiteks on ühe uue B. subtilis'e tüve VKPM B-16041 (DSM 24613) uuringu tulemused. Kõrge antagonistlik aktiivsus St.aureus'e ja C.albicans'i vastu, keskmine või madal - C.freundii, E.coli,

Tabel 1. Mõned B. subtilise sünteesitud ja sekreteeritud antimikroobsed ained

Ribosoomi sünteesitud peptiidid Bakteriotsiinid: - A-tüüpi lantibiootikumid - B-tüüpi lantibiootikumid Subtiliin Ericin S Mersatsidiin Kahe aine jaoks: pooride moodustumine tsütoplasmaatilises membraanis Rakuseina sünteesi pärssimine Grampositiivsed bakterid Grampositiivsed bakterid, sh metitsilliiniresistentsed Staurephylocccus tüved ja vankomütsiiniresistentsed enterokokkide tüved

Mitteribosomaalsed sünteesitud peptiidid Lipopeptiidid Surfaktiin Batsilisiin Batsitratsiin Lipiidmembraanide lahustumine Nukleotiidide, aminohapete ja koensüümide sünteesis osaleva glükoosamiini süntaasi inhibeerimine, mis viib mikroobsete rakkude lüüsimiseni, stabiliseerivate rakkude lüüsimine, staabid, staabid, rakuseina sünteesi inhibeerimine, mükoposiira Virusünteesi bakterid

Mittepeptiidsed ained Difitsidiin Häiritud valgusüntees Grampositiivsed bakterid, gramnegatiivsed bakterid

K.pneumoniae, P.vulgaris, P.aeruginosa, Salmonella spp., Sh.sonnei, Sh.flexneri IIa.

Erinevad B.subtilise tüved eritavad erinevaid antimikroobseid aineid. Ent igal juhul on enteraalsete patogeenide vastaste antagonismi spekter üsna lai. Näiteks tüvi B. subtilis ATCC6633 sekreteerib subtiliini, mis on grampositiivsete bakterite vastane antibiootikum. Teine B. subtilis A1/3 tüvi ei tooda subtiliini. Selle asemel vabastab see antibiootikumi ericin S, millel on sama toimemehhanism ja toimespekter nagu subtiliinil. Seega, olenemata sellest, kumba neist tüvedest probiootikumi tootmiseks kasutatakse, kaetakse grampositiivsete bakterite spekter.

B. subtilise eritatavatel antimikroobsetel peptiididel on tavapäraste antibiootikumide ees tohutu eelis. Fakt on see, et need on lähedased inimkehas erituvatele antimikroobsetele peptiididele ja on osa tema kaasasündinud immuunsusest. Sarnased ained on tuvastatud paljudes kudedes ja epiteelipindades, sealhulgas nahas, silmades, kõrvades, suuõõnes, sooltes, immuun-, närvi- ja kuseteede süsteemis. Tuntumad neist on defensiin, lüsosüüm, katelitsidiin, dermtsidiin, lektiin, histatiin jt. B. subtilis eritab sarnaseid aineid, mistõttu tekib nende suhtes resistentsus harva ja kõrvaltoimed tavaliselt puuduvad. Resistentsuse puudumine inimese ja B. subtilise antimikroobsete peptiidide suhtes on seotud asjaoluga, et nende toime on sagedamini suunatud membraanipooride moodustumisele, mis viib bakterite surmani. Traditsiooniliste antibiootikumide tegevus on rohkem suunatud bakterite metaboolsetele ensüümidele, mis soodustab resistentsuse teket.

Mittespetsiifilise ja spetsiifilise immuunsuse tugevdamine

V.mishk suurendab kaitset soolestiku ja hingamisteede patogeenide vastu, stimuleerides mittespetsiifilist ja spetsiifilist immuunsust. Mittespetsiifiline immuunsus on defineeritud kui kaitsesüsteem, mis toimib samamoodi paljude mikroorganismide suhtes. Spetsiifiline immuunsus toimib "luku võtme" põhimõttel - konkreetse patogeeni jaoks toodetakse spetsiaalseid rakke või antikehi. Mittespetsiifilist immuunsust peetakse tavaliselt keha kaitsereaktsiooni esimeseks faasiks ja spetsiifilist teiseks faasiks.

Mittespetsiifiline immuunsus

Kõige olulisemad mittespetsiifilise immuunsusega seotud rakud on makrofaagid. Nad fagotsüteerivad patogeeni seda seedides. Lisaks on patogeeni antigeenid joondatud oma membraanide pinnal - nn esitlus, mis on vajalik keha kaitsereaktsiooni teise faasi käivitamiseks.

Paljudes uuringutes on näidatud, et BHHNII manustamine kutsub esile makrofaagide aktivatsiooni. Aktiveeritud makrofaagides suureneb põletikueelsete tsütokiinide süntees ja vabanemine: kasvaja nekroosifaktor a, interferoon-y (N-7), interleukiin (II 1p, III-6, III-8, III-10, III-12 , makrofaagide põletikuvalk- 2. Selle tulemusena tekib kompleksne põletikuline reaktsioon, mille eesmärk on patogeeni hävitamine.Näiteks 1KK-y aktiveerib makrofaage ja kaitseb rakke viirusnakkuse eest.III-6 stimuleerib vastutavate B-lümfotsüütide proliferatsiooni ja diferentseerumist. antikehade sünteesiks.III-8 on võimas kemotaktiline ja parakriinne neutrofiilide vahendaja.

aktiveeritud neutrofiilid mängivad olulist rolli põletiku ja oksüdatiivse stressi säilitamisel. IL-12 reguleerib T-lümfotsüütide kasvu, aktiveerimist ja diferentseerumist.

Jätkuvalt uuritakse mehhanisme, mille abil B.subtilis makrofaage aktiveerib. Ühes töös näidati, et selle eest vastutavad probiootikumi eksopolüsahhariidid.

Mittespetsiifilise immuunsuse järgmine oluline komponent on epiteeli barjäärifunktsioon. Epiteelkoed puutuvad esimesena vastu patogeenide rünnakule ja haiguse kulg sõltub suuresti nende vastupanuvõimest.

Teadlased on leidnud, et bakterid suhtlevad üksteisega sama liigi sees ja erinevate liikide vahel, kasutades spetsiaalset ainerühma, mida nimetatakse kvoorumit tuvastavateks molekulideks. Ühte sellist B.subtilisest eraldatud molekuli nimetatakse kompetentsi- ja sporulatsioonifaktoriks (CSF). CSF-i ülekandmine sooleepiteelirakkudesse aktiveerib nende rakkude ellujäämiseks vajalikud kriitilised signaalirajad. Esiteks on need p38 MAP kinaasi rada ja proteiinkinaasi B/AI rada. Lisaks indutseerib CSF kuumašoki valkude (Hsps) sünteesi, mis takistavad oksüdatiivse stressi teket epiteelirakkudes. Mõlemad toimed – parandavad epiteelirakkude ellujäämist ja vähendavad neis oksüdatiivset stressi – toovad kaasa soole limaskesta barjäärifunktsiooni suurenemise. See muutub patogeenide suhtes vähem haavatavaks.

Mittespetsiifilise immuunsuse tegurid hõlmavad ka mitmete metaboolsete ainete sisaldust, mis mõjutavad organismi üldist vastupanuvõimet infektsioonidele.

Leiti, et B. subtilis sünteesib mitmeid vitamiine, eelkõige tiamiini (B1), püridoksiini (B6) ja menakinooni (K2). Erinevad B. subtilise tüved eritavad erinevaid aminohappeid, millest mõned on asendamatud, näiteks valiin.

spetsiifiline immuunsus

Spetsiifiline immuunsus on võimsam kaitsesüsteem, kuna see sihib selektiivselt konkreetset patogeeni. See eristab rakulist ja humoraalset immuunsust. Rakuline immuunsus pakkuda T-lümfotsüüte, suunates nende võitlust viiruste vastu. Humoraalne immuunsus on seotud antikehi (immunoglobuliine) sekreteerivate B-lümfotsüütide toimimisega. Sel juhul on võitlus suunatud bakterite vastu.

Paljud uuringud on kinnitanud B.subtilis'e võimet põhjustada T- ja B-lümfotsüütide aktivatsiooni ja proliferatsiooni. Seda esineb nii perifeerses veres (mõlemad rakutüübid) kui ka tüümuses (T-lümfotsüüdid) ja põrnas (B-lümfotsüüdid). Nagu eespool mainitud, on see võimalik tänu tsütokiinide vabanemisele makrofaagidest. Lisaks leiti B. subtilise rakuseinte, peptidoglükaanide ja teikhoehapete otsene võime stimuleerida lümfotsüüte.

Joonis 2. Probiootiline B.subtilis suurendas eakatel patsientidel oluliselt lgA sisaldust süljes

Märkus: probiootikumi võeti 4 visiidiga 10 päeva jooksul, mille vahele tehti 18-päevased pausid. Andmed on esitatud uuringu lõpu seisuga (43) - 4 kuu pärast.

Ш B.subtilis □ Platseebo

ja o GO o Q. L

Joonis 3. Probiootiline B.subtilis suurendas oluliselt 1dA sisaldust eakate patsientide väljaheites

Märkus: probiootikumi võeti 4 visiidiga 10 päeva jooksul, mille vahele tehti 18-päevased pausid. Andmed on esitatud algtasemel (VI), 10 päeva pärast esimest probiootikumide manustamist (VI + 10 päeva) ja uuringujärgselt (43) 4 kuud hiljem.

B-lümfotsüütidele avalduva toime tagajärjeks on immunoglobuliinide (IgG ja 1&L) sisalduse suurenemine vereseerumis ja 1&L - limaskestade pinnal. Näiteks ühes töös leiti 1&L sisalduse suurenemine väljaheites, mis iseloomustab immuunsuse suurenemist sooleinfektsioonide vastu, aga ka süljes, mis on oluline kaitse tugevdamiseks ägedate hingamisteede infektsioonide vastu (joonis 1). 2, 3). Teatavasti 1&L

on üks peamisi molekule, mis kaitsevad epiteeli väljastpoolt sisenevate patogeenide eest.

Normaalse soole mikrofloora kasvu stimuleerimine

Normaalne mikrofloora hõivab sooletoru erinevaid osi, suuõõnest jämesooleni. Inimese kehas on umbes 1014 sellist bakterit, mis on 10 korda suurem kui inimese rakkude arv. Bakterite kogu metaboolne aktiivsus ületab meie rakkude oma.

Normaalse soole mikrofloora moodustavate bakteriliikide arv määrati kahel viisil. Vanem meetod, mis põhineb väljaheiteproovidest bakterite kasvatamisel, on tuvastanud üle 500 liigi. Uuemad DNA analüüsil põhinevad meetodid näitavad, et tegelikult on selliseid liike üle 1000. Arv on kasvanud tänu sellele, et normaalses mikroflooras on neid baktereid, mida tavapärasel viisil kasvatada ei saa.

Normaalse soole mikrofloora põhiülesanneteks on kaitsta koloniseerumise ja kasvu eest. patogeensed mikroobid, mittespetsiifilise ja spetsiifilise immuunsuse stimuleerimine, seedimine toidu komponendid. Nagu näha, langevad need funktsioonid kokku nende funktsioonidega, mida käsitleti käesolevas ülevaates seoses probiootikumiga B. subtilis.

Soolestiku mikrofloora tasakaalustamatus tekib sooleinfektsioonide korral, kuna patogeensed bakterid suruvad konkureerivalt alla normaalsete bakterite elutegevuse. Mainisime ülalpool sooleinfektsioone, kui käsitlesime B.subtilise'st eraldatud antimikroobseid aineid. Lisaks tekib terapeutiliste ja kirurgiliste haiguste antibiootikumravi käigus tasakaalustamatus. Sellisel juhul ei oma tähtsust antibiootikumi manustamisviis – see võib olla kas suukaudne või parenteraalne. Antibiootikumidega seotud kõhulahtisuse esinemissagedus sõltub kasutatava antibiootikumi tüübist ja jääb vahemikku 2–25%, harvem kuni 44%. Antibiootikum pärsib normaalse mikrofloora elutähtsat aktiivsust, mis viib kasvuni patogeensed bakterid.

Paljud uuringud on näidanud B. subtilise positiivset mõju soolestiku normaalse mikrofloora säilitamisele. Probiootikum suurendas Lactobacillus'e hulka ja vähendas Escherichia coli sisaldust soolestikus ja väljaheites, suurendas Bifidobacterium'i taset ja vähendas - Alistipes spp., Clostridium spp., Roseospira spp., Betaproteobacterium väljaheites (joon. 4). Järelikult muutis B. subtilise sissetoomine soolestiku mikrofloora suhet normaalsete bakterite arvu suurenemise ja patogeensete tüvede vähenemise suunas.

Selle nähtuse mehhanismide uurimist jätkatakse. Senised tõendid viitavad kahele võimalusele. Ühelt poolt B.subtilis antimikroobsete ainete vabanemise tõttu

Mõju Lactobacilluse sisaldusele

o w n o (I t S

Joonis 4. Probiootikum B.subtilis suurendas kõrgeima manustatud annuse korral oluliselt Lactobacillus'e sisaldust põrsaste väljaheites

pärsib patogeense mikrofloora arengut, mis loob tingimused vabanenud niši täitmiseks normaalsete bakteritega. Sellele mehhanismile viitavad kaudselt uuringu tulemused, kus põrsastele manustati antibiootikumi neomütsiinsulfaati. Seda tööriista iseloomustab asjaolu, et see pärsib Escherichia coli kasvu, kuid ei mõjuta Lactobacillust. Selle tulemusena põhjustas antibiootikumi võtmine eeldatavalt Escherichia coli sisalduse vähenemise väljaheites, kuid samal ajal Lactobacilluse suurenemise. See nähtus on võimalik ainult siis, kui normaalne soole mikrofloora hakkab arenema patogeensete bakterite allasurumise tõttu. Sama juhtub siis, kui B. subtilis vabastab oma antimikroobsed ained.

Teine võimalus on seotud B.subtilis'e normaalse soole mikrofloora, nagu Lactobacillus ja Bifidobacterium, otsese stimuleerimisega. Sellele viitavad in vitro katsete tulemused B.subtilist ja Lactobacillust sisaldavate segatud probiootikumide loomisel. Leiti, et laktobatsillide elujõulisus sellistes kombinatsioonides suurenes oluliselt. Ühe töö tulemused näitavad, et see võib olla tingitud katalaasi ja subtilisiini vabanemisest B.subtilisest.

Huvi pakub veel üks avastatud asjaolu. Mõned uuringud on näidanud, et B. subtilis suurendab soolestiku normaalse mikrofloora mitmekesisust. Arvatakse, et sellel on positiivne mõju peremeesorganismi tervisele. Eelkõige suurendas B. subtilis soolestiku mikrofloora mitmekesisust selliste bakterite tõttu nagu Eubacterium coprostanoligenes, L. amylovorus, Lachnospiraceae bakter, L. kitasatonis.

Omal ajal oli palju arutluse all küsimus, kas probiootikumid võivad peremehe organismi kahjustada, muutes tema jaoks aastaid väljakujunenud mikrofloora võõraks, kunstlikult väljastpoolt sissetoodud bakteriks. Hiljem aga leiti, et meditsiinilisel eesmärgil võetud probiootikumid ei jää pärast kuuri lõppu seedekulglasse.

ravi on sellest täielikult välja jäetud. Seoses B. subtilisega on oluline arvestada veel ühe asjaoluga. See bakter, kuigi satub pidevalt seedekanalisse pinnasest, veest, õhust ja toiduained aga ei koloniseeri seda (erinevalt Lactobacillusest ja Bifidobacteriumist). B. subtilis on teatud tüüpi transiitbakter, mis tuleb pidevalt seedekanalist sisse ja sealt välja. Seetõttu ei saa B. subtilis soolestikku juurduda ega muuta meie mikrofloora stabiilset koostist.

Seedimise parandamine ja toidu edendamine

Olemas suur hulk haigused ja seisundid, mis põhjustavad seedimise ja toidu liikumise halvenemist. Näitena võiks tuua vead toitumises, toitumise muutused, seedetrakti haigused (koletsüstiit, pankreatiit jne), autonoomse närvisüsteemi häired (viivad funktsionaalsed häired) jne.

B.subtilisel põhinev probiootikum võib seedetrakti ensüümide vabastamise kaudu parandada seedimist ja sekundaarset toidu edendamist. Uuringutes leiti, et need bakterid sünteesivad kõiki toidu edukaks lagunemiseks vajalikke ensüümide rühmi: amülaase, lipaase, proteaase, pektinaase ja tsellulaase. Nende ensüümide kõrget aktiivsust tõendab asjaolu, et B. subtilist kasutatakse toiduainetööstuses valmistatud toodete ensümaatiliseks töötlemiseks.

Toit sisaldab aineid, mida nimetatakse toitumisvastasteks teguriteks. Nad said selle nime, kuna nende olemasolu vähendab ühe või mitme toidukomponendi saadavust tarbitavast toidust. Leiti, et B. subtilise ensüümid hävitavad toitumisvastaseid tegureid, vähendades nende sisaldust toidus. See puudutas eelkõige fenoolide, tanniinide ja kofeiini üldsisaldust. See suurendab peremeesorganismi toidukomponentide kättesaadavust.

Toit sisaldab ka aineid, mis võivad mõnedel tundlikel inimestel põhjustada allergilisi reaktsioone. B. subtilise ensüümid on aga võimelised neid aineid lagundama, vähendades toidu allergeenset potentsiaali. Viidi läbi uuring, mille käigus leiti probiootikumi sarnane toime gliadiiniga (leidub nisus) ja p-laktoglobuliiniga (lehmapiimas).

Näited kliinilistest uuringutest

Meie eesmärk ei ole selles osas anda ammendavat ülevaadet kõigist saadaolevatest kliinilistest uuringutest B. subtilise kohta. Pigem sooviti kliiniliste näidete abil kinnitada kõigi nende probiootiliste mehhanismide tööd, mida eespool kirjeldati.

Sooleinfektsioonid. Gracheva jt uuringus. hõlmasid salmonellaga patsiente

Antibiootikumidega seotud kõhulahtisuse sagedus

o w n o (H t S

30 25 20 15 10 5 0

Joonis 5. Probiootiline B.villbv vähendas oluliselt kõhulahtisuse esinemissagedust ambulatoorsetel patsientidel, keda raviti suukaudsete ja intravenoossete antibiootikumidega

haigused, toidumürgitus ja düsenteeria. Üks valitud patsientide rühmadest sai B. subtilist koos teise probiootikumiga ( kokku- 2109 elusat mikroobirakku) 2 korda päevas 4-10 päeva jooksul. Uuringu tulemuste kohaselt leiti ravimi väljendunud terapeutiline toime, mis seisnes väljaheidete kiirenenud normaliseerumises, kõhuvalu kadumises ja soole düsbioosi vähenemises.

antibiootikumidega seotud kõhulahtisus. Randomiseeritud topeltpimedas platseebokontrollitud kliinilises uuringus tuvastas T.V. Horosheva jt. hõlmas üle 45-aastaseid ambulatoorseid patsiente, kes said vähemalt 5 päeva jooksul ühte või mitut suukaudset või intravenoosset antibiootikumi. Üks patsientide rühmadest (n = 90) sai B. subtilis'e probiootikumi (2109 elusat mikroobirakku) 2 korda päevas, alustades 1 päev enne antibiootikumravi alustamist ja lõpetades 7 päeva pärast antibiootikumide kasutamise lõpetamist. Selle tulemusena leiti, et probiootikumide rühmas tekkis antibiootikumidega seotud kõhulahtisus ainult 7,8% (7/90) patsientidest, platseeborühmas aga 25,6% (23/90) (p< 0,001) (рис. 5). Пробиотик достоверно снижал частоту появления тошноты, рвоты, метеоризма и абдоминальной боли.

Seedimise tugevdamine ja toidu edendamine. Uuringus Y.P. Liu et al. hõlmas eakaid (74 ± 6 aastat) ambulatoorseid patsiente ja funktsionaalse kõhukinnisusega statsionaarseid patsiente. Üks ravirühmadest (n = 31) sai 4 nädala jooksul elusaid B. subtilise mikroobirakke. Uuringu lõpus selgus, et probiootikum oli efektiivne 41,9%-l (13/31) patsientidest.

Hingamisteede infektsioonid. See näidustus võib tunduda mõnevõrra ebatavaline, arvestades, et B. subtilis on probiootikum, mis toimib seedetraktis. Arvestades aga bakteri probiootilise toime mehhanisme, mainisime, et selle võime mõjutada hingamisteede patogeene on seotud immuunsüsteemi stimuleerimisega.

2015. aastal avaldas Cochrane'i kogukond probiootikumide kasutamise süstemaatilise ülevaate tulemused ägedate hingamisteede infektsioonide (ARI) ennetamiseks. Autorid järeldasid, et probiootikumid olid ARI episoodide vähendamisel 47% efektiivsemad kui platseebo. Lisaks vähendasid probiootikumid ARI kestust 1,89 päeva võrra. Probiootikumid võivad veidi vähendada antibiootikumide kasutamise sagedust ja koolist puudutud päevade arvu. Probiootikumide kõrvaltoimed olid minimaalsed, sagedamini esinesid seedetrakti sümptomid.

Ohutus

B. subtilise ohutust on testitud kolmes põhivaldkonnas: patogeensete geenide olemasolu, antibiootikumiresistentsuse ja mikroobide tuvastamise täpsuse osas.

patogeensed geenid. Selliste geenide olemasolu on ohtlik, kuna need põhjustavad toksiinide ja muude kahjulike ainete moodustumist, mis kahjustavad sooleseina ja keha tervikuna. Autorid teatavad, et neid geene B. subtilises ei leitud. Veelgi enam, selle probiootikumi kasvatamine in vitro koos sooleepiteelirakkudega ja selle in vivo manustamine erinevad tüübid loomad ei põhjustanud kahjulike mõjude ja kõrvaltoimete teket.

Antibiootikumiresistentsus. See parameeter on ohtlik selle poolest, et kui probiootikumil on geenid, mis on võimelised tekitama antibiootikumiresistentsust, võivad need lõpuks kanduda üle patogeensetele bakteritele, mis muutuvad resistentseks ka antibiootikumide suhtes. Hea uudis on see, et 3 uuringus testituna osutus B.subtilis'e probiootikum tundlikuks (mitteresistentseks) kõigi peamiste meditsiinis kasutatavate antibiootikumide suhtes. Seetõttu ei saa B. subtilis edastada resistentsust patogeensete bakterite suhtes.

Mikroobide tuvastamise täpsus. 2003. aastal avaldati uuring, mis näitas, et 7 probiootikumi, mida turustati B. subtilis'e sisaldavatena, sisaldasid tegelikult ka teisi lähedalt seotud baktereid. Sellegipoolest teatavad mikrobioloogid, et tänapäeval on kõik tingimused B.subtilise usaldusväärseks tuvastamiseks. Seetõttu sõltub probiootikumi koostise õigsus seda vabastava tootja vastutusest.

Tuleb meeles pidada, et sarnaselt teistele probiootikumidele ei määrata B. subtilis't raske immuunpuudulikkusega patsientidele (keha nõrgenemine pärast raskeid infektsioone, kiiritus- ja keemiaravi, HIV/AIDS-iga patsiendid jne), kuna on võimalik haiguse üldistamine. infektsioon ja sepsise areng.

Ühes väljaandes loetleti "hea" probiootikumi omadused. Neile omistasid autorid muu hulgas bakterite võimet avaldada

positiivne mõju peremeesorganismile, näiteks tõstab vastupanuvõimet haigustele. Probiootikum peab olema mittepatogeenne ja mittetoksiline. See peab suutma ellu jääda ja seedekulglas areneda – see tähendab, et ta peab olema vastu madalad väärtused pH ja orgaanilised happed. Nagu käesolevast ülevaatest järeldub, on kõik need omadused probiootilisele bakterile B. subtilis omased.

Eksperimentaalsete ja kliiniliste uuringute kohaselt on B. subtilis'e baasil probiootikumi määramine otstarbekas mitmeid näidustusi. Esiteks on see probiootikumi lisamine sooleinfektsioonide, sealhulgas reisijate kõhulahtisuse kompleksravisse, samuti selle kasutamine hingamisteede infektsioonide ennetamiseks külmal aastaajal. Probiootikum on kasulik suukaudse või parenteraalse antibiootikumravi käigus antibiootikumidega seotud kõhulahtisuse ennetamiseks. Nende bakterite määramine on oluline erineva päritoluga toidu seedimise ja edendamise häirete korral, mis on seotud toitumisvigade, toitumise muutuste, seedetrakti haiguste, autonoomse närvisüsteemi häiretega jne.

B. subtilisel põhinevaid probiootikume iseloomustab tõhususe ja ohutuse kõrge suhe.

Bibliograafia

1. FAO/WHO (2001) Probiootikumide tervislikud ja toitumisomadused toidus, sealhulgas elusate piimhappebakteritega piimapulber. ÜRO Toidu- ja Põllumajandusorganisatsiooni ja Maailma Terviseorganisatsiooni ekspertide konsultatsiooniaruanne/FAO/WHO. - 2001. - ftp://ftp.fao.org.

2. Sorokulova I. Bacillusbakterite kui probiootikumide kaasaegne staatus ja väljavaated // J. Prob. tervist. - 2013. - Vol. 1, nr 4. - Num. of publ. 1000e106.

3. Olmos J., Paniagua-Michel J. Bacillus subtilis Potentsiaalne probiootiline bakter vesiviljeluse funktsionaalsete söötade valmistamiseks // J. Microb. Biochem. Technol. - 2014. - Vol. 6, nr 7. - Lk 361-365.

4. Bacillus subtilis R0179 hindamine seedetrakti elujõulisuse ja üldise heaolu kohta: randomiseeritud topeltpime platseebokontrollitud uuring tervetel täiskasvanutel / Hanifi A., Culpepper T., Mai V. et. al. // kasu. mikroobid. - 2015. - Vol. 6, nr 1. - Lk 19-27.

5. Leser T.D., Knarreborg A., Worm J. Bacillus subtilis ja Bacillus licheniformis spooride idanemine ja väljakasv sigade seedetraktis // J. Appl. mikrobiol. - 2008. - Vol. 104, nr 4. - Lk 1025-1033.

6. Jadamus A., Vahjen W., Simon O. Growth behaviour of a spore forming probiotic strain in the gastrointestinal tract of broiler channel and porsas, Arch. Tieernahr. - 2001. - Vol. 54, nr 1. - Lk 1-17.

7. Bacillus subtilis eoste saatus ja levik hiiremudelis / Hoa T.T., Duc L.H., Isticato R. et al. // Rakendus- ja keskkonnamikrobioloogia. - 2001. - Vol. 67, nr 9. – lk 38193823.

8. Bacillus subtilis'e ja lähisugulaste soolestiku elutsükkel / Tam N.K.M., Uyen N.Q., Hong H.A. et al. // Bakterioloogia ajakiri. - 2006. - Vol. 188, nr 7. - Lk 2692-2700.

9. Stein T. Bacillus subtilis antibiootikumid: struktuurid, sünteesid ja spetsiifilised funktsioonid // Mol. mikrobiol. - 2005. - Vol. 56, nr 4. - Lk 845-857.

10. Antimikroobsete metaboliitide tootmine Bacillus subtilis'e poolt, immobiliseeritud polüakrüülamiidigeelis/Awais M, Pervez, A., Yaqub Asim, Shah M.M. //Pakistan J. Zool. - 2010. - Vol. 42, nr 3. - Lk 267-275.

11. Lelyak A.A., Shternshis M.V. Siberi Bacillus spp. tüvede antagonistlik potentsiaal. loomade ja taimede patogeenide kohta // Tomski Riikliku Ülikooli bülletään. Bioloogia. - 2014. - nr 1. - S. 42-55.

12. Bacillus spp. toodetud antimikroobsed ühendid. and Applications in Food/ Baruzzi F., Quintieri L., Morea M., Ca-puto L. // Science against Microbial Pathogens: Communicating CurrentResearch and Technological Advances (Vilas A.M., toim.). - Badajoz, Hispaania: Formatex, 2011. - Lk 1102-1111.

13. Kaks erinevat lantibiootilist peptiidi pärinevad Bacillus subtilis A1/3 erütsiini geeniklastrist / Stein T., Borchert S., Conrad B. et al. // J. Bacteriol. - 2002. - Vol. 184, nr 6. - Lk 1703-1711.

14. Wang G. Inimese antimikroobsed peptiidid ja valgud // Farmaatsia. - 2014. - Vol. 7, nr 5. - Lk 545-594.

15. Perekonna Bacillus antimikroobsed peptiidid: uus ajastu antibiootikumidele / Sumi C.D, Yang B.W., Yeo I.C., Hahm Y.T. // Saab. J. Microbiol. - 2015. - Vol. 61, nr 2. - Lk 93-103.

16. Bacillus subtilis B10 spooride mõju hiire makrofaagide elujõulisusele ja bioloogilistele funktsioonidele/Huang Q., Xu X., Mao Y.L. et al. // Anim. sci. J. - 2013. - Kd. 84, nr 3. - Lk 247-252.

17. Bacillus subtilis BS02 moduleeriv toime RAW 264.7 hiire makrofaagide elujõulisusele ja immuunvastustele / Huang Q., Li Y.L., Xu X. et al. // Journal of Animal and Veterinary Advances. - 2012. - Vol. 11, nr 11. - Lk 1934-1938.

18. Bacillus subtilis (natto) B4 spooride immunomoduleeriv toime hiire makrofaagidele/Xu X, Huang Q., Mao Y. et al. // Microbiol. Immunol. - 2012. - Vol. 56, nr 12. - Lk 817-824.

19. Bacillus subtilis'el põhinevad otsetoidulised mikroobid suurendavad broilerikanade makrofaagide funktsiooni / Lee K.W., Li G., Lillehoj H.S. et al. // Res. Vet. sci. - 2011. - Vol. 91, nr 3. - P. e87-e91.

20. Kaitse soolepõletiku eest bakteriaalsete eksopolüsahhariidide poolt / Jones S.E., Paynich M.L., Kearns D.B., KnightK.L. // J. Immunol. - 2014. - Vol. 192, nr 10. – lk 48134820.

21. Bacillus subtilis quorum-sensing molekul CSF aitab kaasa soole homöostaasile peremeesraku membraani transporteri OCTN2 kaudu / Fujiya M., Musch M.W., Nakagawa Y. et al. // Raku peremeesmikroob. - 2007. - Vol. 1, nr 4. - Lk 299-308.

22. Zhang Y., Begley T.P. Bacillus subtilis'e tiamiini biosünteesi geeni tiA kloonimine, sekveneerimine ja reguleerimine // Geen. - 1997. - Vol. 198, nr 1-2. - Lk 73-82.

23. Bacillus subtilis'e tiamiinfosfaadi süntaasi kristallstruktuur eraldusvõimega 1,25 A / Chiu H.J., Reddick J.J., Begley T.P, Ealick S.E. //Biokeemia. - 1999. - Vol. 38, nr 20. - Lk 6460-6470.

24. YaaD ja yaaE osalevad vitamiini B6 biosünteesis Bacillus subtilis / Sakai A., Kita M., Katsuragi T. et al. // J. Biosci. Bioeng. - 2002. - Vol. 93, nr 3. - Lk 309-312.

25. Glycolaldehyde-forming route in Bacillus subtilis in relation to vitamin B6biosynthesis/Sakai A., Katayama K., Katsuragi T., Tani Y // J. Biosci. Bioeng. - 2001. - Vol. 91, nr 2. – lk 147152.

26. Bacillus subtilis'e 1-desoksü-D-ksüluloos-5-fosfaadi süntaasi ja transketolaasi uurimine seoses vitamiini B6 biosünteesiga / Sakai A., Kinoshita N., Kita M. et al. // J. Nutr. sci. vitamiin. (Tokyo). - 2003. - Vol. 49, nr 1. - Lk 73-75.

27. Ikeda H., Doi Y. Bacillus subtilis, Eur. J Biochem. - 1990. - Vol. 192, nr 1. -P. 219-224.

28. Menakinooni biosünteesi esimest sooritatud sammu katalüüsiva Bacillus subtilis MenD struktuur ja reaktsioonivõime / Dawson A., Chen M, Fyfe P.K. et al. // J. Mol. Biol. - 2010. - Vol. 401, nr 2. - Lk 253-264.

29. Bentley R., Meganathan R. K-vitamiini (menakinooni) biosüntees bakterites // Mikrobioloogilised ülevaated. - 1982. - Vol. 46, nr 3. - Lk 241-280.

30. Aeroobsete spoore moodustavate bakterite ekstratsellulaarsed aminohapped / Smirnov V.V., Reznik S.R., Kudriavtsev V.A. et al. // Mikrobioloogia. - 1992. - Vol. 61, nr 5. - Lk 865-872.

31. Chattopadhyay S.P., Banerjee A.K. Valiini tootmine Bacillus sp. // Z. Allg. Microbiol. - 1978. - Vol. 18, nr 4. -P. 243-254.

32. Aktivatsioonimarkerite ekspressioon perifeerse vere lümfotsüütidel pärast Bacillus subtilis spooride suukaudset manustamist / Caruso A., Flamminio G., Folghera S. et al. //Int. J. Immunopharm-macol. - 1993. - Vol. 15, nr 2. - Lk 87-92.

33. Bacilluse eoste immunostimuleeriv aktiivsus / Huang J.M., La Ragione R.M., Nunez A., Cutting S.M. // FEMS Immunol. Med. mikrobiol. - 2008. - Vol. 53, nr 2. - Lk 195-203.

34. Sebastian A.P., Keerthi T.R. Probiootilise tüve Bacillus subtilis MBTU PBBMI eoste immunomoduleeriv toime Balb/C hiirtel // International Journal of Engineering and Technical Research (IJETR). - 2014. - Vol. 2, nr 11. - Lk 258-260.

35. R&s&nen L., Mustikkam&ki U.P., Arvilommi H. Inimese lümfotsüütide polüklonaalne vastus bakteriraku seintele, peptidoglükaanidele ja teikhoiinhapetele // Immunoloogia. - 1982. - Vol. 46, nr 3. - Lk 481-486.

36. Bacillus subtilis natto mõju muskuspartide kasvuvõimele / Sheng-Qiu T., Xiao-Ying D., Chun-Mei J. et al. //Rev. Rinnahoidjad. cienc. Avic. - 2013. - Vol. 15, nr 3. - P. 191197.

37. Bacillus subtilis'el ja selle endospooridel põhineva probiootikumi hindamine sigade tervete kopsude saamiseks / Ayala L., Bocourt R., Milian G. et al. // Cuban Journal of Agricultural Science. - 2012. - Vol. 46, nr 4. - Lk 391-394.

38. Probiootiline tüvi Bacillus subtilis CU1 stimuleerib eakate immuunsüsteemi tavaliste nakkushaiguste perioodil: randomiseeritud topeltpime platseebokontrollitud uuring / Lefevre M., Racedo S.M., Ripert G. et al. // Immuun. Vananemine. - 2015. - Vol. 12. - Tuim. of publ. 24.

39. Eerola E., Ling W.H. Soole mikrofloora // Elu toetavate süsteemide entsüklopeedia (EOLSS); http://www.eolss.net.

40. Horosheva T. V., Vodyanoy V., Sorokulova I. Bacilluse probiootikumide efektiivsus antibiootikumidega seotud kõhulahtisuse ennetamisel: randomiseeritud topeltpime platseebokontrollitud kliiniline uuring // JMM juhtumite aruanded. - 2014. - DOI: 10.1099/jmmcr.0.004036.

41. Jeong J.S., Kim I.H. Bacillus subtilis C-3102 eoste kui probiootilise söödalisandi mõju broilerite kasvuvõimele, kahjulike gaaside emissioonile ja soolestiku mikrofloorale // Poult. sci. - 2014. - Vol. 93, nr 12. - Lk 3097-3103.

42. Bacillus tüvede kui potentsiaalsete probiootikumide sõelumine ja sellele järgnev Bacillus subtilis MA139 in vivo efektiivsuse kinnitamine sigadel / Guo X., Li D., Lu W. et al. // Antonie Van Leeu-wenhoek. - 2006. - Vol. 90, nr 2. - Lk 139-146.

43. Bacillus subtilis KN-42 mõju võõrutatud põrsaste kasvuvõimele, kõhulahtisusele ja fekaalsele bakteriaalsele floorale / Hu Y, Dun Y, Li S. et al. // Aasia-Austraalia J. Anim. sci. - 2014. - Vol. 27, nr 8. - Lk 1131-1140.

44. Bacillus subtilis KD1 mõju broileri soolefloorale / Wu B.Q., Zhang T, Guo L.Q., Lin J.F. // Poult. sci. - 2011. - Vol. 90, nr 11. - Lk 2493-2499.

45. Bacillus subtilis natto söötmise mõju holsteini lüpsilehmade kääritamisele ja mikrobiootale / Song D.J., Kang H.Y., Wang J.Q. et al. // Asian-Australasian Journal of Animal Sciences. - 2014. - Vol. 27, nr 4. - Lk 495-502.

46. ​​Yang J.J., Niu C.C., Guo X.H. Segakultuuri mudelid soolestiku mikroobide interaktsioonide ennustamiseks Escheri-chia coli ja Lactobacilluse vahel probiootilise Bacillus subtilis//Benef juuresolekul. mikroobid. - 2015. - Vol. 6, nr 6. - P. 871877.

47. Zhang Y.R., Xiong H.R., Guo X.H. Lactobacillus reuteri suurenenud elujõulisus probiootikumide tootmiseks segatud tahkes olekus fermentatsioonis Bacillus subtilis'e juuresolekul // Folia Microbiol. (Praha). - 2014. - Vol. 59, nr 1. - Lk 31-36.

48. Laktobatsillide parem kasv ja elujõulisus Bacillus subtilis'e (natto), katalaasi või subtilisiini juuresolekul / Hosoi T., Ametani A., Kiuchi K., Kaminogawa S. // Can. J. Microbiol. - 2000. - Vol. 46, nr 10. - Lk 892-897.

49. Patsientide abistamine probiootikumide kohta teadlike valikute tegemisel: uurimisvajadus / Sharp R.R, Achkar J.-P., Brinich M.A., Farrell R.M. // Ameerika gastroenteroloogia ajakiri. - 2009. - Vol. 104, nr 4. - Lk 809-813.

50. Crislip M. Probiootikumid // 2009; https://www.science-based-medicine.org.

51. Chan K.Y., Au K.S. Bacillus subtilis'e tsellulaasi tootmise uuringud //Antonie Van Leeuwenhoek. - 1987. - Vol. 53, nr 2. - Lk 125-136.

52. Sharma A., Satyanarayana T. Mikroobsed happestabiilsed a-amülaasid: omadused, geenitehnoloogia ja rakendused // Protsessi biokeemia. - 2013. - Vol. 48, nr 2. – Lk 201211.

53. Guncheva M., Zhiryakova D. Bacillus lipaaside katalüütilised omadused ja potentsiaalsed rakendused // Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. - 2011. - Vol. 68, nr 1. - Lk 1-21.

54. Gupta R., Beg Q.K., Lorenz P. Bakteriaalsed aluselised proteaasid: molekulaarsed lähenemisviisid ja tööstuslikud rakendused, Appl. mikrobiol. Biotehnoloogia. - 2002. - Vol. 59, nr 1. - Lk 15-32.

55. Khan M., Nakkeeran E., Umesh-Kumar S. Pektinaasi potentsiaalne kasutamine funktsionaalse toidu väljatöötamisel // Annu. Rev. toidu sci. Technol. - 2013. - Vol. 4. - Lk 21-34.

56. Bioloogilised töötlused mõjutavad kohvimassi keemilist koostist/ Ulloa Rojas J.B., Verreth J.A., Amato S., Huisman E.A. // bioressurss. Technol. - 2003. - Vol. 89, nr 3. - Lk 267-274.

57. Tai traditsiooniliste fermenteeritud toiduainete proteolüütiliste bakterite identifitseerimine ja nende allergeene vähendav potentsiaal / Phrom-raksa P., Nagano H., Boonmars T., Kamboonruang C. // J. Food Sci. - 2008. - Vol. 73, nr 4. - P. M189-M195.

58. Pokhilenko V.D., Perelygin V.V. Spoore moodustavatel bakteritel põhinevad probiootikumid ja nende ohutus // Keemiline ja bioloogiline ohutus. - 2007. - nr 2-3. - S. 32-33.

59. Liu Y.P., Liu X., Dong L. Laktuloos pluss elus binaarne Bacillus subtilis funktsionaalse kõhukinnisusega eakate ravis // Zhonghua Yi Xue Za Zhi. - 2012. - Vol. 92, nr 42. – lk 29612964.

60. Hao Q., Dong B.R., Wu T. Probiootikumid ägedate ülemiste hingamisteede infektsioonide ennetamiseks // Cochrane'i süstemaatiliste ülevaadete andmebaas. - 2015. - Iss. 2. – Art. nr: CD006895.

61. Cartwright P. Bacillus subtilis-Identification & Safety // Probiootilised uudised. - 2009. - nr 2. - www.protexin.com.

62. Teaduskomitee arvamus EFSA taotluse kohta seoses üldise lähenemisviisiga toidus/söödas ja toidus/söödas kasutatavate lisaainete tootmises kasutatavate mikroorganismide ohutuse hindamisel EFSA poolt // EFSA Journal. - 2005. - Vol. 3, nr 6. – DOI: 10.2903/j.efsa.2005.226.

63. Sanders M.E., Morelli L., Tompkins T.A. Sporemoodustajad kui inimese probiootikumid: Bacillus, SporoLactobacillus ja BreviBacillus // Põhjalikud ülevaated toiduteadusest ja toiduohutusest. - 2003. - Vol. 2, nr 3. - Lk 101-110.

64. Chitra N. Probiootikumide kasutamisega seotud baktereemia meditsiinis ja hambaravis // International Journal of Innovative Research in Science, Engineering and Technology. - 2013. - Vol. 2, nr 12. - Lk 7322-7325.

65. Fuller R. Probiootikumid inimestel ja loomadel // J. Appl. Bacte-riol. - 1989. - Vol. 66, nr 5. - Lk 365-378.

Koostanud Ph.D. A.V. Savustjanenko ■

Savustjanenko A.V.

MEKHASHMI DM PROBYUTIEV JAOKS OCHOBi BACILLUS SUBTILIS

Kokkuvõte. Bakter Vybnsh on üks lootustandvamaid sondeerimise väljavaateid, mis on kasvanud ülejäänud kümnes. Mechashzmi 11 on prooviversioon! dc sov "yazash 1s antiorgaaniliste kõnede süntees, mittespetsiifilise 1 spetsiifilise 1 pudru-tetu tugevdamine, mis stimuleerib normaalselt kasvu! Mzhroflori sooled ja nägemused taimsete ensüümide kohta. - timzhrobno!

spetsiifiline immuunsus pov "yazane koos aktiveerivate makrofapsidega ma näen 1 neist põletikueelne tsütoos, pschvischennyam bar" erno! lima funktsioon! karbid soolestikku, vidshennyam vggamshv i amshokislot (ka mitte seemisnahk). Spetsiifilise immuunsüsteemi tugevnemine avaldub aktiveeriva T-i B-lsh-fotsitsh ja immunoglobuliinide - IgG ja IgA - stagnatsiooni ilmingutes. B.subtilis stimuleerib roopa normaalselt! soolestiku mikrofloora, zocrema bakterite perekond Lactobacillus i Bifidobacterium. Lisaks probutik zbshshue riznomanitnist mzhroflori soolestikku. Probutik on nähtav soolestiku luumenis ja peamistes mikroensüümides: amshazi, lshazi, proteaas, pektiin.

zi i tsellulaas. Lisaks seedimisele "hästi qi ensüüm rikub aHraxap40Bi faktori ja allergeenid kõne, magama minna. on aeg rokkida; antibutanesotsshovano ennetamine"! kõhulahtisus; paranduskolvi jaoks

seedimine izhivannya izhi rizhnoy geneesis (vead toitumises, toitumisalane alatoitumine, limaskesta-sooletrakti vaevused, vegetatiivselt kahjustatud! närviliselt "! süsteem, mis sh.). B. subtilis ei kõla kõrvalmõjudena. kõrge turvalisuse efektiivsus.

Märksõnad: Bacillus subtilis, probutik, dp mehhanismid.

Savustjanenko A.V.

BACILLUS SUBTILISEL PÕHINEvate PROBIOOTIKUTE TOIMEMEHHANISMID

kokkuvõte. Bakter B. subtilis on üks paljutõotavamaid probiootikume, mida viimastel aastakümnetel on uuritud. Selle probiootilise toime mehhanismid on seotud antimikroobsete ainete sünteesiga, mittespetsiifilise ja spetsiifilise immuunsuse suurendamisega, soolestiku normaalse mikrofloora kasvu stimuleerimisega ja seedeensüümide vabanemisega. B.subtilis vabastab ribosomaalselt sünteesitud peptiide, ribosomaalselt mittesünteesitud peptiide ja mittepeptiidseid aineid, millel on lai antimikroobse toime spekter, mis hõlmab grampositiivseid, gramnegatiivseid baktereid, viirusi ja seeni. Resistentsus nende antimikroobsete ainete suhtes on haruldane. Mittespetsiifilise immuunsuse tugevnemine on seotud makrofaagide aktiveerumisega ja nendest põletikku soodustavate tsütokiinide vabanemisega, soole limaskesta barjäärifunktsiooni suurenemisega, vitamiinide ja aminohapete (sh asendamatute) vabanemisega. Spetsiifilise immuunsuse tugevnemine väljendub T- ja B-lümfotsüütide aktiveerimises ning immunoglobuliinide - IgG ja IgA - vabanemises viimastest. B. subtilis stimu-

aeglustab normaalse soolefloora, eriti Lactobacillus ja Bifidobacterium perekonda kuuluvate bakterite kasvu. Lisaks suurendab probiootikum soolestiku mikrofloora mitmekesisust. Probiootikum eritab soole luumenisse kõik peamised seedeensüümid: amülaasid, lipaasid, proteaasid, pektinaasid ja tsellulaasid. Lisaks seedimisele hävitavad need ensüümid toidus sisalduvaid toitumisvastaseid tegureid ja allergeenseid aineid. Need toimemehhanismid muudavad B. subtilise kasutamise mõistlikuks kombineeritud ravis sooleinfektsioonide raviks; hingamisteede infektsioonide ennetamine külmal aastaajal; antibiootikumidega seotud kõhulahtisuse ennetamine; toidu seedimise ja erineva päritoluga liikumishäirete (vead toitumises, toitumise muutused, seedetrakti haigused, autonoomse närvisüsteemi häired jne) korrigeerimiseks. B. subtilis ei põhjusta tavaliselt kõrvaltoimeid. Seda probiootikumi iseloomustab kõrge efektiivsuse ja ohutuse suhe.

Märksõnad: Bacillus subtilis, probiootikum, toimemehhanismid.

Leiutis käsitleb biotehnoloogiat, veterinaarmeditsiini ja seda saab kasutada probiootikumide rühma kuuluvate ravimite saamiseks. Bakteritüvi Bacillus subtilis BKM B-2287 eraldati mullast. Rakud on grampositiivsed, ei moodusta kapsleid, moodustavad ümaraid eoseid, hingamise tüüp on aeroobne. Hüdrolüüsib glükoosi, mannitooli, laktoosi. Ei käärita sahharoosi, inositooli, sorbitooli, maltoosi. Ei moodusta fermentatsiooni käigus gaasi. Supresseerib stafülokokkide, Escherichia coli, enterobakterite, tsitrobakterite, aeromonaside kasvu. Tüve kasutatakse tootmistüvena probiootilise preparaadi saamiseks, mille autorid on nimetanud "Subtilis+". Ravim normaliseerib põllumajandusloomade, kodulindude, kalade seedetrakti aktiivsust; paljulubav bakteriaalsete infektsioonide ravis ja ennetamises. 1 vahekaart.

Leiutis käsitleb biotehnoloogiat ja seda saab kasutada mikrobioloogiatööstuses probiootilise preparaadi saamiseks, mida kasutatakse veterinaarmeditsiinis loomade, kodulindude ja kalade seedetraktihaiguste raviks ja ennetamiseks.

Tuntud tüvi Bacillus subtilis 534 - probiootikumi "Sporobacterin" tootja, mis on ette nähtud seedetrakti, düsbakterioosi ennetamiseks ja raviks. SU 1708350, klass. A 61 K 35/66.

Puuduseks on lühike säilivusaeg, tk. sisaldab elusaid baktereid, mis ei suuda oma omadusi pikka aega säilitada, preparaadi madala puhtusega, millel on kitsas kasutusala - loomade söödalisandina. Tüvi on tundlik ka antibiootikumide suhtes, välja arvatud polümüksiin, mis piirab ravimi ulatust.

Tuntud on Bacillus subtilis 3H (GISK nr 248) tüvi, millel on antibiootikumiresistentsuse omadus, mida kasutatakse probiootilise preparaadi "Bactisporin" saamiseks, mida kasutatakse koos antibiootikumidega düsbakterioosi, ensüümipuudulikkuse raviks ja ennetamiseks. seedeorganid, mädased infektsioonid, toiduallergiad. RU 2067616 C1, klass. A 61 K 35/74, 10.10.1996.

Tuntud Bacillus subtilis TPAXC-KM-117 tüvi, millel on inhibeeriv toime patogeensete mikroorganismide liikide vastu ja millel on mitme ravimiresistentsus. Tüvi on resistentne tetratsükliini, rifampitsiini, alenitsilliini, klooramfenikooli, aprectomütsiini suhtes. Selle alusel valmistatakse antibiootikumiresistentne probiootikum nakkushaiguste raviks ja ennetamiseks samanimelise antibiootikumraviga (RU 2118364 C1, klass C 12 N 1/20, 27.08.1988).

Teadaolev tüvi Bacillus subtilis VKM B-2250 (RU nr 2184774, klass A 61 K 35/74, 10.07.02), mis on ravimi aluseks veterinaarias ja kalanduses.

Probleem, millele leiutis on suunatud, on veterinaarias ja kalanduses kasutatava probiootilise preparaadi uue tõhusa tüvetootja tuvastamine.

Leiutise realiseerimisel saavutatud tehniline tulemus on tõsta ravi efektiivsust, suurendada sööda seeduvust, loomade, lindude, kalade produktiivsust ja kaalutõusu läbi probiootilise preparaadi kasutamise, mis põhineb kavandatud tootjatüvel, stabiilsust. valmistamine ladustamise ajal laias ümbritseva keskkonna temperatuurivahemikus.

Bacillus subtilis B-9 tüvi isoleeriti pinnasest ja deponeeriti All-Russian Collection of Microorganisms (IBFM, mille nimi on K.G. Skryabin) numbri VKM B-2287 all.

Bacillus subtilis'e tüve VKM B-2287 võib säilitada lüofiliseeritud olekus mitu aastat või parvedena liha-peptoonpuljongil põhineva agarisöötmega koos kohustusliku uuesti külvamisega vähemalt 1 kord 2 kuu jooksul samal söötmel.

Tüve omadused.

Kultuurilised ja morfoloogilised tunnused. Pulgad. Ühepäevase agarkultuuri suurus on 3-5 µm. Rakud värvuvad Grami järgi positiivselt, moodustavad ümaraid eoseid, üksikud, tsentraalsed läbimõõdud on väiksemad kui raku diameeter. MPA-l olevad kolooniad on valged, pigmenti ei eraldata söötmesse.

Füsioloogilised tunnused. Aeroobne, optimaalne kasvutemperatuur 37°C ja pH 3,5-8,0. Kasv on võimalik temperatuurivahemikus 4-50 ° C. Seos NaCl-ga - kasv sisaldusega kuni 3%.

biokeemilised märgid. Lagundab glükoosi, laktoosi, mannitooli. Mittekääritavad süsinikuühendid: sahharoos, inositool, sorbitool, maltoos, laktoos. Kasutab tsitraati ja atsetaati. Ei moodusta fermentatsiooni käigus gaasi. Toodab oksüdaasi, katalaasi.

antagonistlikud märgid. Bacillus subtilis BKM B-2287 tüvi pärsib stafülokokkide, Proteuse, Klebsiella, Escherichia coli, enterobakterite, tsitrobakterite, aeromonaside, pärmseente kasvu.

Bacillus subtilis BKM B-2287 tüvi ei ole taimedele, loomadele, kaladele ega inimestele patogeenne.

Tabeli 1 andmed näitavad mikroorganismide testitavate tüvede antagonistlikku aktiivsust (viivitatud antagonismi meetod).

Tüve Bacillus subtilis BKM B-2287 kultiveerimiseks kasutada vedelat toitekeskkonda, mis sisaldab kaseiini hüdrolüsaati - 5 cm 3 · DM -3 (N aM = 300 mg%); maisi ekstrakt - 80 cm 3 dm -3 (N am \u003d 290 mg%), MnSO 4 5H 2 O - 0,250 g-dm -3; MgS047H20 - 0,300 g-dm-3; FeSO 4 7H 2O - 0,015 g-dm-3; CaCl22H20 - 0,052 g-dm-3; NaCl - 11 000 g-dm -3, destilleeritud vesi.

Mikroorganismide esialgne kuiv biomass külvatakse puljongiga katseklaasi. Kui ilmub nähtav kasv, subkultuuritakse kolooniad katseklaasides liha-peptoonagaril.

Tüüpilised kolooniad valitakse välja ja subkultuuritakse viaalides vedelasse söötmesse. 22 tunni pärast viiakse kogu kasvatatud mass 20-liitrisesse pudelisse 10 liitri toitekeskkonnaga ja kultiveeritakse 26 tundi temperatuuril 37–39 ° C, saades inokulaadi.

Kaseiinhüdrolüsaadil põhinev toitainekeskkond asetatakse bioloogilisse reaktorisse, steriliseeritakse 60 minutit 1 atm juures, jahutatakse temperatuurini 39 °C ja inokuleeritakse pudelist inokulaat vahekorras 1:9.

Aeroobse kultiveerimise käigus hoitakse söötme pH vahemikus (6,8-7,2) ühikut. pH, söötme toitmine (10-15)% glükoosiga lõppkontsentratsioonini (0,1-0,2)%. BC (15-20) bioloogilise kontsentratsiooni saavutamisel 10 9 rakku.cm -3 ja (8-10) 10 9 rakku.cm -3 BKt lõpetage glükoosi lisamine pH 4,0 alandamiseks ja lülitage õhu juurdevool välja. Seejärel lülitatakse reaktori kuumutamine välja, sööde jahutatakse temperatuurini (15-19) ° C. Saadud jahutatud kultuur pumbatakse konteineritesse või pakitakse viaalidesse.

Määratletud kultiveerimismeetodiga saadakse probiootiline preparaat vedelal kujul, mis sisaldab (80–95)% bakterite Bacillus subtilis VKM B-2287 tüve spoore ja elusaid vegetatiivseid rakke.

Kavandatav probiootiline preparaat on kahjutu, ei sisalda kõrvalist mikrofloorat. Kahjutust testiti valgete hiirtega, kes kaalusid (18-20) g, kellele manustati suukaudselt ravimit 1,0 ml mahus.

Ravimil on spetsiifiline toime: rakkude arv ühes ravimiannuses (8-20)10 9 rakku.cm -3 antagonistlik aktiivsus - testitavate mikroorganismide kasvu inhibeerimise tsoon on 10 kuni 38 mm.

Seega saab kavandatud Bacillus subtilis VKM B-2287 tüve kasutada tootmistüvena probiootilise preparaadi saamiseks, mida soovitatakse loomade, kodulindude ja kalade seedetraktihaiguste ennetamiseks ja raviks.

Leiutist illustreeritakse näidetega.

Näide 1. Kavandatava probiootilise preparaadi testid vastsündinud vasikatel ja põrsastel.

Kavandataval Bacillus subtilis'e tüvel VKM B-2287 põhineva ravimi efektiivsust testiti vastsündinud vasikatel ja põrsastel, kellel oli diagnoositud kõhulahtisus, mis tekkis farmis keerulise episootilise olukorra taustal. Vasikate ja põrsaste kontrollrühmi peeti farmis kasutusele võetud tehnoloogia järgi. Katserühmade vasikatele ja põrsastele anti lisaks suukaudselt koos väikese koguse veega 20 minutit enne söötmist kavandatud Bacillus subtilis BKM BKM B-2287 tüvel põhinevat ravimit ühekordse annusena 15 ml vasikatele ja 20 ml looma kohta. põrsad kolm korda päevas kolme päeva jooksul . Vaatlused näitasid, et katserühmades paranes päev pärast ravimi andmist kõigi loomade üldine seisund, kõhulahtisus lakkas ja kaks päeva hiljem olid kõik loomad praktiliselt terved. Kontrollrühmade loomade seisundit iseloomustas kõhulahtisuse jätkumine, vasikate suremus oli 10% ja põrsastel 22%.

Näide 2. Probiootilise preparaadi "Subtilis+" lisamine akvaariumikalade söödale.

Kasvatatud kuldkala (oranda) noorjärke toideti ekstrudeeritud söödaga, millele oli lisatud probiootilist preparaati Subtilis+. Toidu kogus oli 10 kg, lisatud probiootikumi 1 ml. Kalade arv katse- ja kontrollrühmas oli kummaski 250 isendit. Söötmine toimub 4-6 korda päevas. Toitu söödi hea meelega. Katserühma noorloomade kasvumäär võrreldes kontrollrühmaga oli 22%. Kalade toodang katses - 98%, kontrollis - 78%. Vesi akvaariumis ei halvenenud, hägusust ei olnud.

Näide 3. Kanade ohutus esimestel nädalatel.

“Subtilis+” testiti broilerlinnufarmi kanadel (katse- ja kontrollrühmas 5 linnumaja). Probiootikumi mitte saanud kontrollrühma kanade raiskamine oli 4%, eksperimentaalne - 0,2%. Katserühmades võtsid kanad kaalus intensiivsemalt juurde. Pärast esimest kolme päeva oli kana keskmine kaal kontrollrühmas 61 g, katserühmas - 70 g.

Läbiviidud testid on näidanud ravimi "Subtilis+" efektiivsust, mis on saadud Bacillus subtilis BKM B-2287 pakutud tüve alusel.

NÕUE

Bakteritüvi Bacillus subtilis BKM B-2287 kasutati loomade, kodulindude ja kalade seedetraktihaiguste ennetamiseks ja raviks mõeldud probiootilise preparaadi saamiseks.

Valem, keemiline nimetus: andmeid pole.
Farmakoloogiline rühm: organotroopsed ained/ seedetrakti ained/ kõhulahtisusevastased ravimid; immunotroopsed ained / immunomodulaatorid / muud immunomodulaatorid.
Farmakoloogiline toime: laia toimespektriga antibakteriaalne, immunostimuleeriv, kõhulahtisusevastane.

Farmakoloogilised omadused

Toimeaine Bacillus subtilis on Bacillus subtilis 3H antagonistlikult aktiivse elusa tüve lüofiliseeritud mikroobne mass, mis valiti välja kromosomaalse resistentsuse järgi rifampitsiini suhtes Bacillus subtilis 534 tootmistüvest. Üks annus. ravimtoode sisaldab ühte kuni viit miljardit elavat bakterit. Bacillus subtilis on antagonistliku toimega, eritab laia toimespektriga antibakteriaalseid aineid, mis pärsivad oportunistlike ja patogeensete seente ja bakterite kasvu. Samal ajal ei pärsitud saprofüütide, sealhulgas normaalse soole mikrofloora kasv. Tänu Bacillus subtilis'e proteolüütiliste ensüümide (sh lipaasid, lüsosüüm, amülaasid jt) vabanemisele soodustab ravim rasvade, valkude, kiudainete, süsivesikute lagunemist, parandab seedimist ja toidu imendumist ning aitab puhastada haavu ja põletikukoldeid nekrootilisest koed. Bacillus subtilis'el on väljendunud immunostimuleeriv toime, sealhulgas fagotsüütiliste vererakkude seedimisele ja imendumisele. Bacillus subtilis'el on ka mõõdukas allergiavastane toime.

Näidustused

erineva päritoluga soole düsbakterioos (sealhulgas allergilise dermatoosi ja toiduallergiatega komplitseeritud); ägedad bakteriaalsed sooleinfektsioonid (sealhulgas salmonelloos, äge düsenteeria ja teised); bakteriaalne vaginoos; bakteriaalne vaginiit; osteomüeliit (suurte sekvestrite puudumisel); kirurgilised pehmete kudede infektsioonid; tinglikult patogeensetest ja patogeensetest mikroorganismidest põhjustatud mädaste-septiliste tüsistuste ravi ja ennetamine sünnitus-günekoloogiliste ja kirurgiliste operatsioonide ajal operatsioonijärgsel perioodil.

Bacillus subtilis'e manustamisviis ja annused

Bacillus subtilist manustatakse suu kaudu 30-40 minutit enne sööki, intravaginaalselt, loputamise või aplikatsioonina (tampoonile). Suukaudsel manustamisel lahustatakse Bacillus subtilis eelnevalt keedetud ja jahutatud vees. Annustamine, manustamisviis, ravi kestus määratakse individuaalselt, sõltuvalt patsiendi näidustustest ja vanusest.
Ägedate bakteriaalsete sooleinfektsioonide, sealhulgas ägeda düsenteeria, salmonelloosi ravi jätkub 7-10 päeva.
Düsbioosi ravi pärast bakteriaalseid infektsioone või antibiootikumide kasutamist jätkub 20 päeva.
Allergiliste dermatooside ravi kestab 10-20 päeva.
Bakteriaalse vaginoosi, vaginiidi ravi kestab 5 kuni 10 päeva.
Mädaste-septiliste tüsistuste ennetamine operatsioonijärgsel perioodil: 5 päeva jooksul enne operatsiooni ja 5 päeva pärast operatsiooni või vigastust.
Ravi ja ennetamine kirurgiline infektsioon pehmetes kudedes jätkub 7-10 päeva.
Vajadusel võib ravikuuri korrata.
Bacillus subtilis'e kasutamisel vastavalt näidustustele soovitatavates annustes kõrvaltoimeid ei tuvastatud. Arengu korral kõrvaltoimed need kaovad täielikult ühe päeva jooksul, kui annust vähendatakse või ravimi kasutamine lõpetatakse.
Bacillus subtilise toimet naistele raseduse ajal ei ole uuritud.
Bacillus subtilis'e lahjendatud pulbrit ei saa säilitada.
Ettevaatlikult on Bacillus subtilis ette nähtud polüvalentse ravimiallergia korral.
Bacillus subtilist ei kasutata pakendi terviklikkuse rikkumise, füüsikaliste omaduste muutuste, lisandite olemasolu, märgistuse puudumise korral.
Bacillus subtilis'e kasutamine ei mõjuta potentsiaalselt ohtlike tegevuste sooritamist, mis nõuavad suuremat tähelepanu kontsentratsiooni ja psühhomotoorsete reaktsioonide kiirust.

Kasutamise vastunäidustused

Ülitundlikkus (sealhulgas ravimi abikomponentide suhtes).

Rakenduspiirangud

Mitmevalentne ravimite allergia, lapsepõlv.

Kasutamine raseduse ja imetamise ajal

Bacillus subtilise toimet naistele raseduse ajal ei ole uuritud. Bacillus subtilist võib imetamise ajal kasutada vastavalt raviarsti ettekirjutusele.

Bacillus subtilis'e kõrvaltoimed

Seedeelundkond: kõhulahtisus, kõhuvalu.
Muud: palavik, külmavärinad, nahalööve.

Bacillus subtilis'e koostoime teiste ainetega

Bacillus subtilis'e jagamisel antibiootikumidega võib Bacillus subtilis'e terapeutiline efektiivsus väheneda.
Bacillus subtilis'e jagamisel sulfoonamiididega on võimalik Bacillus subtilis'e terapeutilist efektiivsust vähendada.
Bacillus subtilist on lubatud kasutada koos teiste ravimitega, konsulteerides raviarstiga.

Lõputöö

Gataullin, Airat Gafuanovitš

Akadeemiline kraad:

PhD bioloogias

Lõputöö kaitsmise koht:

VAK erialakood:

Eriala:

Mikrobioloogia

Lehtede arv:

KIRJANDUSE ARVUSTUS

Peatükk 1. Mikroobide antagonism – düsbiootiliste seisundite korrigeerimiseks mõeldud bioterapeutiliste ravimite loomise alus

Peatükk 2. Spooriprobiootikumid ja nende mõju makroorganismile

2.1. Preparaadid perekonna Bacillus bakteritest

2.2. Kaasaegsed ideed perekonna Bacillus bakterite probiootikumide terapeutilise ja profülaktilise toime mehhanismide kohta

2.3. Aeroobselt toodetud bioloogiliselt aktiivsed ained eoseid moodustav bakterid

2.4. Perekonna Bacillus bakterite patogeensustegurid 34 OMA UURINGUD

3. peatükk. Uurimisobjektid ja -meetodid

3.1. Uurimisobjektid

3.2. Uurimismeetodid 43 3.2.1. Varustus ja meetodid

Peatükk 4. Isoleeritud tüvede omadused

4.1. Morfoloogilise ja füsioloogilise uurimine biokeemilised omadused tüved

4.2. B. subtilis'e tüvede antagonistlik ja adhesiivne toime in vitro katsetes

4.3. Definitsioon antibiootikumiresistentsus ja B. subtilis'e tüvede plasmiidiprofiil

5. peatükk

5.1. B.subtilis 1719 tüve toksilisuse, toksigeensuse, virulentsuse ja probiootilise aktiivsuse uuring in vivo katsetes

5.2. B. subtilis 1719 tüve mõju uurimine immuunsuse parameetritele eksperimentaalse düsbioosiga in vivo katsetes

Peatükk 6

6.1. Kasvuomaduste hindamine erinevatel vedelatel toitainetel

6.2. B. subtilis 1719 tüve elujõulisuse ja antagonistliku aktiivsuse uuring säilitamise ajal

7. peatükk Võrdlevad omadused B.subtilis\l\9 tüve ja mõnede kaubanduslike probiootiliste preparaatide aluseks olevate tüvede omadused. KOKKUVÕTE

Sissejuhatus lõputöösse (osa referaadist) Teemal "Uute probiootikumide loomiseks paljutõotavad Bacillus subtilis'e tüvede bioloogilised omadused"

Probleemi asjakohasus

Meditsiinilise mikrobioloogia praeguses etapis on ilmnenud uusi andmeid, mis õigustavad saprofüütse mikrofloora kasutamist, mis on võimeline oma elutegevuse käigus tootma bioloogiliselt aktiivseid aineid (BAS), mis pärsivad patogeensete mikroorganismide, pahaloomuliste kasvajate kasvu ja normaliseerivad. mitmesugused patoloogilised ja biokeemilised protsessid inimkehas.

Viimasel kümnendil on mikroobide eluskultuuridel põhinevaid bioloogilisi preparaate laialdaselt kasutatud seedetrakti haiguste ennetamiseks ja raviks. eoseid moodustav

Bakterid perekonnast Bacillus, mis on üks mitmekesisemaid ja laiemalt levinud mikroorganismide rühmi, on inimeste ja loomade eksogeense floora olulised komponendid.

Perekond Bacillus on iidsetest aegadest teadlaste tähelepanu köitnud. Kogutud teadmised mikrobioloogia, füsioloogia, biokeemia, bakterigeneetika vallas annavad tunnistust Bacilluse eelistest bioloogiliselt aktiivsete ainete tootjana: ensüümid, antibiootikumid, insektitsiidid. Suur kohanemisvõime erinevate eksistentsitingimustega (hapniku olemasolu või puudumine, kasv ja areng laias temperatuurivahemikus, erinevate orgaaniliste või anorgaaniliste ühendite kasutamine toiduallikana jne) soodustab batsillide levikut pinnases, vees, õhus. , toidul ja muudel keskkonnaobjektidel, aga ka inimestel ja loomadel.

Ainevahetusprotsesside mitmekesisus, geneetiline ja biokeemiline varieeruvus, resistentsus lüütiliste ja seedeensüümide suhtes olid aluseks batsillide kasutamisele erinevaid valdkondi ravim. USA Toidu- ja Ravimiamet on andnud Bacillus subtilisele GRAS-i staatuse (mida peetakse üldiselt ohutuks) – täiesti ohutud organismid, mis on eelduseks nende bakterite kasutamiseks ravimite valmistamisel.

Batsillide aktiivsus avaldub seoses paljude patogeensete ja tinglikult patogeensete mikroorganismidega. Tänu erinevate ensüümide ja muude ainete sünteesile reguleerivad ja ergutavad seedimist, omavad allergia- ja mürgivastast toimet. Batsillide kasutamisel suureneb oluliselt makroorganismi mittespetsiifiline resistentsus. Need mikroorganismid on tootmises tehnoloogiliselt arenenud, säilitamisel stabiilsed ja, mis kõige tähtsam, keskkonnasõbralikud.

Elusatel mittepatogeensetel mikroobidel põhinevad ravi- ja profülaktilised preparaadid, mis on võimelised loomulik viis Peremeesorganismi füsioloogilistele ja biokeemilistele funktsioonidele avaldatavat kasulikku mõju selle mikrobioloogilise seisundi optimeerimise kaudu nimetatakse praegu probiootilisteks preparaatideks.

Batsillidest pakuvad suurimat huvi B. subtilis'e tüved. Geneetiliste ja füsioloogiliste omaduste uuringu kohaselt on nad E. coli järel teisel kohal. B. subtilise suurest potentsiaalist biotehnoloogias annab tunnistust selle tüve molekulaargeneetika andmepanga – SubtiList – loomine, kuhu kantakse kogu teave bakteri genoomi kohta.

Meie riigis ja välismaal läbi viidud teadusuuringute tulemuste analüüs näitab, kui palju on Bacillus perekonda kuuluvaid baktereid kasutatud bakterite või nende metaboliitide biomassist saaduste saamiseks. Tuntud viisid kasvatamine

Bacillus perekonna elusbakterite põhjal on loodud makroorganismile kahjutud, laiaulatusliku ravi- ja profülaktilise toimega ning keskkonnaohutusega probiootilised preparaadid. Suure teadusliku ja praktilise tähtsusega on tulemused perekonda Bacillus kuuluvate mikroobide eluskultuuride kasutamise kohta inimeste ja põllumajandusloomade seedetraktihaiguste ravis.

Praegu kasutatakse praktilises tervishoius laialdaselt tuntud probiootilisi preparaate: baktisubtiil, sporobakteriin, biosporiin, baktisporiin, subaliin, tsereobiogeen, enterogermiin jt.

Nende ravimite terapeutilise kasutamise näidustused ja terapeutiline efektiivsus on piiratud nende tootmiseks kasutatavate tüvede omadustega. Sel juhul on määrava tähtsusega antagonistliku toime spekter patogeensete ja oportunistlike mikroorganismide suhtes, mis on inimese või looma organismi erinevates biotoopides mikroökoloogiliste häirete põhjuseks. Lisaks ei saa ignoreerida batsillide võimet toota bioloogiliselt aktiivseid aineid (polüpeptiidantibiootikume, ensüüme jne) ja nende antibiootikumiresistentsust.

Mitmekesisus ja esilekerkimine antibiootikumiresistentsusühelt poolt düsbiootiliste häirete tekkega seotud mikroorganismid, aga ka varieeruvus biosünteetiline võimalused B. subtilise erinevates tüvedes aga määravad probiootilist aktiivsust suunanud ja/või erinevate bioloogiliselt aktiivsete ainete tootjateks olevate tüvede pideva monitooringu otstarbekuse.

Eesmärk:

Uurida isoleeritud B. subtilis'e tüvede bioloogilisi omadusi ja hinnata nende kasutamise võimalust algse spooriprobiootikumi väljatöötamiseks.

Uuringu eesmärgid:

1. Uurida isoleeritud B. subtilis kultuuride morfoloogilisi, füsioloogilisi, biokeemilisi, antagonistlikke, adhesiivseid ja muid omadusi in vitro katsetes ning valida edasiseks uurimiseks kõige perspektiivikam tüvi.

2. Hinnake valitud B. subtilis'e tüve probiootilist aktiivsust katsetes in vivo.

3. Valige uuritava B.subtilis'e tüve biomassi akumuleerimiseks optimaalne toitekeskkond.

4. Määrake valitud B. subtilis'e tüve elujõulisus ja antagonistlik aktiivsus säilitamise ajal.

5. Võrrelge B. subtilise algse tüve omadusi ja kaubanduslike probiootiliste preparaatide valmistamiseks kasutatud kultuure.

Teaduslik uudsus.

Eraldatud tüvede morfoloogiliste, füsioloogiliste, biokeemiliste, geneetiliste ja muude bioloogiliste omaduste uurimise põhjal valiti välja plasmiidivaba tüvi B.subtilis 1719, millel on antagonism erinevate oportunistlike ja patogeensete mikroorganismide suhtes. taksonoomiline madala adhesiivsusega rühmad, resistentsed gentamütsiini, polümüksiini ja erütromütsiini suhtes.

Tootmistehnoloogia loomise lähenemisviise põhjendati eksperimentaalselt, sealhulgas uuriti B. subtilis 1719 tüve kasvuomadusi algsetel toitainetel, elujõulisuse stabiliseerimise tingimusi ja antagonistlikku aktiivsust kui etappe uue probiootilise preparaadi saamisel.

Leiutise taotlus on esitatud (nr 2005111301, 19. aprill 2005): "Bakteritüvi Bacillus subtilis 1719 on patogeenide suhtes antagonistlikult aktiivse biomassi, samuti proteolüütiliste, amülolüütiliste ja lipolüütiliste ensüümide tootja."

Praktiline tähtsus.

Eraldatud ja identifitseeritud tüvi B. subtilis 1719 deponeeriti GISK-i riiklikus kultuuride kollektsioonis. JI.A. Tarasevitš nr 277 all ja seda võib soovitada originaalse bioterapeutilise probiootilise preparaadi tootmise tööstusliku tehnoloogia väljatöötamiseks.

Peamised kaitsesätted:

1. Eraldatud kolm bakterikultuuri tüve morfoloogiliste, füsioloogiliste, biokeemiliste ja muude omaduste järgi vastavad liigile B. subtilis. Need ei sisalda plasmiide, on antagonistlikult aktiivsed erinevate taksonoomiliste rühmade oportunistlike ja patogeensete bakterite suhtes, neil on madal või keskmine adhesioonitase.

2. B.subtilis 1719 tüvel on probiootilised omadused, mis väljenduvad tinglikult patogeensete ja patogeensete mikroorganismide elimineerimises koos normaalse mikrofloora kvantitatiivse ja kvalitatiivse koostise taastamisega eksperimentaalse düsbioosi korral, samuti on sellel makroorganismile immunomoduleeriv toime.

3. Vastavalt tehnoloogilistele omadustele võib B.subtilis 1719 tüve soovitada kandidaadiks originaalse probiootilise preparaadi loomiseks.

KIRJANDUSE ARVUSTUS

Doktoritöö järeldus teemal "Mikrobioloogia", Gataullin, Airat Gafuanovitš

1. Morfoloogiliste ja füsioloogiliste-biokeemiliste omaduste põhjal identifitseeriti isoleeritud tüved B.subtilisega. B. subtilis'e tüvede DNA preparaatides plasmiide ​​ei leitud, mis ilmselt viitab antibiootikumiresistentsuse kromosomaalsele kontrollile.

2. Valgete hiirte düsbioosi mudel näitab B. subtilis 1719 tüve probiootilist aktiivsust, mis väljendub oportunistlike ja patogeensete mikroorganismide elimineerimises koos normaalse mikrofloora kvalitatiivse ja kvantitatiivse koostise taastamisega.

3. Biomassi kogumise optimaalne sööde B. subtilis 1719 tüve kasvatamisel on VK-2 sööde, millele on lisatud süsivesikute allikana glükoosi või sahharoosi.

4. On kindlaks tehtud, et B.subtilis 1719 tüvi säilitab elujõulisuse ja antagonistliku aktiivsuse lüofiliseeritud olekus suhkru-želatiin stabilisaatoriga vähemalt 4 aastat (vaatlusperiood), vedelal kujul stabiliseeritud 7% NaCl lahusega - 2 aastat ja 1 aasta destilleeritud vee või 10% glütseriini lahuse juuresolekul.

5. Antagonistlikult aktiivne, madal liim, plasmiidivaba, mittetoksiline B. subtilis 1719 tüvi, millel on probiootiline ja immunomoduleeriv toime, on deponeeritud riiklikus kultuurikollektsioonis GISK, mille järgi on nimetatud nime. J1.A. Tarasevitš.

6. B.subtilis 1719 (277) tüvi on bioloogiliste omaduste ja peamiste tehnoloogiliste omaduste poolest paljulubav kasutamiseks uute probiootiliste preparaatide väljatöötamisel.

KOKKUVÕTE

Avastused ja saavutused kaasaegsete bioloogiliste ja arstiteadus võimaldas välja töötada ja praktikas kasutusele võtta uusi bioloogilisi tooteid – probiootikume. Need ravimid põhinevad mikroobide eluskultuuridel. Nende ravimite terapeutiline toime põhineb väljendunud mikroobse antagonismil patogeensete ja tinglikult patogeensete tüvede - patogeenide vastu. Ravi käigus ei ole vähem oluline probiootikumide immunomoduleeriv toime. Elusbakteritest valmistatud preparaatide vaieldamatud eelised keemiliste vahenditega sünteesitud ravimite ees on kahjutus, nende füsioloogiline olemus inimkehale ja allergiliste reaktsioonide puudumine. Juba praegu on probiootikumid võtnud juhtiva positsiooni seedetrakti mikrofloora korrigeerimisel, ainevahetushäiretel, antibakteriaalse, keemiaravi, hormonaal- ja kiiritusravi tagajärgede ravis. Bakterite translokatsiooni fenomeni uurimise tulemusena on selgunud, et probiootikumid võivad edukalt asendada antibiootikume ja proteolüütilisi ensüüme erinevate kirurgiliste infektsioonide ennetamisel ja ravis.

Viimasel kümnendil on mikroobide eluskultuuridel põhinevaid bioloogilisi preparaate laialdaselt kasutatud seedetrakti haiguste ennetamiseks ja raviks. eoseid moodustav bakterid.

Mitmesugused metaboolsed protsessid, geneetiline ja biokeemiline varieeruvus, resistentsus lüütiliste ja seedeensüümide suhtes olid aluseks batsillide kasutamisele erinevates meditsiinivaldkondades. Need mikroorganismid on tootmises tehnoloogiliselt arenenud, säilivad ladustamise ajal ja mis on oluline, on keskkonnale ohutud.

Tüvede kõrge aktiivsus ühe katsekultuuride komplekti suhtes ei taga selle aktiivsust teiste vastu. Sellega seoses on spooriprobiootikumide kasutamine piiratud spetsiifilistega meditsiinilistel eesmärkidel. Nõuded kasutatavale bioloogilisele tootele määravad mäda-septiliste haiguste nosoloogiliste vormide varieeruvus ja düsbiootiliste häirete tekkeks etioloogiliselt oluliste mikroorganismide mitmekesisus. See julgustab teadlasi pidevalt otsima soovitud omadustega antagonisti tüvesid.

Meie poolt uuritud tüved omasid B. subtilise esindajatele omaseid morfoloogilisi ja füsioloogilis-biokeemilisi omadusi ning neid iseloomustas ensüümide komplekt, mis lagundab erinevaid substraate.

Kirjanduse andmetel on B.subtilisel väljendunud antagonistlikud omadused paljude patogeensete mikroorganismide suhtes ja kõrge ensümaatiline aktiivsus, mille tõttu nad normaliseerivad seedimisprotsesse ning omavad ka antitoksilist ja allergiavastast toimet.

Uuritud B. subtilise tüvedel oli lai valik antagonistlik aktiivsus, madal (B. subtilis nr 1719) või keskmine (B. subtilis nr 1594, B. subtilis nr 1318) adhesioonitase.

Seega oli meie poolt uuritud tüvedele iseloomulik kõrge probiootiline aktiivsus. Biokeemiliste omaduste uurimine näitas aga, et B.subtilis 1719 tüvel oli suurem ensümaatiline aktiivsus (proteaas, amülaas, lipaas), mis väljendus uuritud substraatide suurimas hüdrolüüsi tsoonis. Lisaks on B. subtilis 1719 tüve madal adhesiivsus ja ilmselt ka selle loomulik antibiootikumiresistentsus, mida kontrollib kromosoom, võimaldas järeldada, et selle kultuuri edasine uurimine on paljulubav.

Meie arvates on Bacillus perekonnal põhinevate ravimite tööstusliku tootmise laiendamise väljavaated väga suured.

Batsillid on võimelised kultuurivedelikku eritama palju ensüüme. Need on oluline tööstuslik rajatis proteolüütiliste ja amülolüütiliste ensüümide tootmiseks, mida kasutatakse toiduainete, pesuvahendite ja biomeditsiiniliste ainete tootmisel. Viimasel kümnendil on nende osalusel saadud mitmeid uusi antibiootikume, bakteriaalseid insektitsiide ja muid bioloogiliselt aktiivseid aineid.

Hoolimata asjaolust, et B. subtilis'el on GRAS-staatus, leidub kirjanduses üksikuid teateid patogeensusfaktorite esinemise kohta mõnes B. subtilis'e tüves. On märgitud, et see ei ole püsiv tunnus, kuna see kaob uuesti külvamise ajal. On oletatud, et bakterite patogeensed omadused on seotud plasmiidide olemasoluga neis. Näiteks Le H. ja Anagnostopoulos C. eraldasid 83 patsiendil plasmiidid 8 B. subtilise tüvest. Plasmiidne DNA tuvastati ainult B. subtilis'e toksikogeensete tüvede rakkudes ja seda ei leitud teiste sama liigi tüvede rakkudes, millel ei ole toksigeensust. Plasmiidide elimineerimine toksikogeensetest tüvedest elimineerivate ainete mõjul viis kultuurifiltraatide toksikogeensete omaduste kõrvaldamiseni. Plasmiidide geneetiline roll pole aga hästi mõistetav.

Meie uuringutes ei leitud kolme uuritud B. subtilise tüve eraldatud DNA preparaatides plasmiide.

Autorid, kes uurisid batsillide mõju soojavereliste loomade organismile, jõudsid järeldusele, et B. subtilise tüved on inimestele ja loomadele täiesti kahjutud. Makroorganismi kahjutuse tõestuseks on katseandmed, mis saadi juba mõne päeva pärast parenteraalne manustamine, B.subtilis eritub organismist. Nende kultuuride terapeutilise toime mehhanisme uuriti loomadel. Praegu arvatakse, et spooriprobiootikumide terapeutilise toime määrab tegurite kompleks, sealhulgas: bakteriotsiinide tootmine B. subtilis'e kultuuride poolt, mis pärsivad patogeensete ja tinglikult patogeensete mikroorganismide kasvu; väga aktiivsete ensüümide süntees: proteaasid, ribonukleaasid, transaminaasid jne; bakterite toksiine neutraliseerivate ainete tootmine.

Valitud tüve omaduste uurimine hiirtel näitas, et see on avirulentne, ei oma toksilisust ja toksilisust.

tegurid positiivne mõju Probiootikumid makroorganismil on mitmesugused mikroobse sünteesi produktid: aminohapped, polüpeptiidantibiootikumid, hüdrolüütilised ensüümid ja mitmed teised väiksema tähtsusega bioloogiliselt aktiivsed ained. Seetõttu on hädasti vaja uurida ja eraldada Bacillus perekonna mikroorganismide poolt toodetud kaitseaineid ning luua nende baasil biomeditsiinilised preparaadid.

Seedetraktis avaldub batsillide otsene antagonistlik toime, mis on valdavalt selektiivne patogeensete ja tinglikult patogeensete mikroorganismide suhtes. Samal ajal iseloomustab neid antagonismi puudumine normaalse mikrofloora esindajate suhtes.

Meie uuringutes aitas B. subtilis 1719 kultuur antibiootikumi doksütsükliini manustamisest põhjustatud eksperimentaalse düsbioosi korrigeerimisel kaasa soolestiku mikrofloora koostise ja arvukuse normaliseerumisele, samuti tinglikult patogeensete mikroorganismide elimineerimisele parietaalses piirkonnas. ja luminaalne mikrofloora.

Kirjanduse andmetest järeldub, et perekonna Bacillus tööstuslikel tüvedel on madal adhesiivsuse indeks erütrotsüütidega ja nõrk või mõõdukas kleepuvus sooleepiteelirakkudele. B. subtilis 534 ja 3N tüvedel on rohkem adhesiine enterotsüütide retseptoritele, B. licheniformise tüvel - kolonotsüütidele, s.o. erinevatel tüvedel näib olevat adhesiinid erinevate soolerakkude retseptoritega.

Nende tegevus toimub soole luumenis ja on suunatud patogeensete mikroorganismide vastu, avaldamata antagonistlikku toimet normaalse mikrofloora esindajatele. Spooriprobiootikumide võtmisel realiseerub autofloora taastamise võimalus soolestiku erinevates lookustes ning 3-5 päeva pärast suureneb laktobatsillide, bifidobakterite, Escherichia coli jt arv ning taastub seejärel normaalsele tasemele.

Meie uuringute tulemused mikroorganismide adhesiooni kohta enterotsüütidele muudavad tõenäolisemaks, et soolerakkude kleepuvusvõime sõltub normaalse mikrofloora kvantitatiivsest ja kvalitatiivsest koostisest. Düsbiootilistes tingimustes avanevad enterotsüütide pinnal retseptorid, millel tinglikult patogeensed ja patogeensed mikroorganismid ja düsbioosi korrigeerimisel toimub soolestiku koloniseerimine normaalse mikrofloora poolt ja väheneb enterotsüütide retseptorite arv, mis on võimelised kleepima nende pinnale mittepõlismaiseid mikroorganisme.

On teada, et normaalsel mikroflooral on oluline lähteroll immuunsuse ja spetsiifiliste kaitsereaktsioonide tekke mehhanismis makroorganismi sünnijärgses arengus.

Mikrofloora roll immuunvastuse kujunemisel tuleneb selle universaalsetest immunomoduleerivatest omadustest, mis hõlmavad immunostimulatsiooni ja immunosupressiooni. On kindlaks tehtud, et bakteriaalsetel lipopolüsahhariididel (LPS) on immunoreguleeriv toime Ig A immuunvastusele ja nad mängivad adjuvantide rolli. Mikrofloora tagab mittespetsiifiliste ja spetsiifiliste immunoloogiliste reaktsioonide kompleksi arengu, moodustades adaptiiv-kaitsemehhanisme.

Ükskõik kui kõrge antimikroobne toime ravimil on, on otsustav roll nakkusliku patoloogilise seisundi kõrvaldamisel. Oluline ülesanne on selliste ravimite loomine, mis on tõhusad antimikroobsete näitajate poolest ja stimuleerivad immuunvastuseid. Seetõttu on suur hulk uuringuid suunatud ravimite – probiootikumide – mõju uurimisele inimeste ja loomade immuunsüsteemi erinevatele osadele.

Aeroobsete batsillide eluskultuuride manustamine stimuleerib märkimisväärselt seerumi interferooni ja Newcastle'i haiguse viiruse poolt in vitro indutseeritud interferooni tootmist in vivo.

Mitmed tööd näitavad, et probiootilistel preparaatidel on immunomoduleeriv toime, taastades patoloogiast häiritud immuunstaatuse, suurendades endogeense interferooni tootmist, suurendades makrofaagirakkude funktsionaalset aktiivsust, suurendades vere leukotsüütide – monotsüütide ja neutrofiilide – fagotsüütilist aktiivsust.

Meie uuringud on näidanud, et B. subtilis 1719 kultuur muutis düsbioosi korrigeerimise käigus oluliselt neutrofiilide metaboolset aktiivsust ega põhjustanud muutusi neutrofiilide funktsionaalses aktiivsuses pärismaise mikrofloora normaalses seisundis. Lisaks leiti, et düsbioosiga kaasnes TNF-a taseme tõus, mis viitas makrofaagide, lümfotsüütide, aga ka peensoole endoteeli- ja epiteelirakkude väljendunud fagotsüütilisele, tsütotoksilisele, adhesiivsele aktiivsusele.

Põletikueelse tsütokiini suurenenud sekretsioon düsbioosiga hiirtel peegeldab tõenäoliselt immunokompetentsete rakkude (T-lümfotsüüdid, monotsüüdid/makrofaagid) aktiveerumist. Kultuuri B.subtilis 1719 * mõjul täheldati TNF-a tootmise vähenemist. Kultuuri viimine tervetele loomadele ei põhjustanud muutusi TNF-a tootmise tasemes.

Arvestades, et TNF-a on põletikuliste reaktsioonide marker, jõuti järeldusele, et probiootikum mängib olulist rolli immunokompetentsete rakkude põletikuvastase toime suurendamisel loomadel.

Tsütokiinide tootmise dünaamika uuringud B. subtilis 1719 tüve mõjul näitasid, et kultuur ei avaldanud esimestel tundidel pärast manustamist mingit mõju tsütokiinide tootmisele, välja arvatud IL-lp, mille kogus kogunes järk-järgult. Teiste uuritud tsütokiinide (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IFN-y) tase tõusis oluliselt vahemikus 12 kuni 24 tundi.

Seega võivad immuunsüsteemi rakkude moduleerimine ja tsütokiinide potentsiaali muutused olla üheks mehhanismiks, mille abil B. subtilis 1719 kultuur aitab kaasa düsbioosi korrigeerimisele.

Meie riigis ja välismaal läbi viidud teadusuuringute tulemuste analüüs näitab, kui palju on Bacillus perekonda kuuluvaid baktereid kasutatud bakterite või nende metaboliitide biomassist saaduste saamiseks. Tuntud viisid kasvatamine perekonna Bacillus bakterid on aluseks mitmete bakteri- ja ensüümpreparaatide saamise tehnoloogiale. .

Uurides B. subtilis 1719 kultuuri kasvuomadusi erinevatel vedelatel toitainetel, selgus, et biomassi maksimaalseks akumuleerimiseks võib VK-2 söödet, millele on lisatud glükoosi või sahharoosi, pidada kõige adekvaatsemaks substraadiks kultiveerimiseks. tüvi.

Praegu arvestatakse mikroorganismide tootmiskultuuride valikul ja iseloomustamisel peamiselt järgmisi bioloogiliste tunnuste näitajaid: antagonistliku toime spekter ja tase, valmistatavus, s.o. võime kiiresti koguda bio*massi, vastupidavus külmkuivatamisele, elujõulisus ladustamisel. Erilist tähelepanu pööratakse kasutatavate mikroorganismide inimeste tervisele ohutusastme kriteeriumidele.

Uuringutes, mis viidi läbi B. subtilis 1719 mikroobirakkude elujõulisuse hindamiseks säilitamisel vedelate stabilisaatorite juuresolekul, leiti, et optimaalne stabilisaator on 7% NaCl lahus, mis võimaldas säilitada tüve elujõulisust ja antagonistlikke omadusi 2 aastat. Kultuuri omaduste säilitamiseks 1,5 aastat on võimalik kasutada 10% glütserooli lahust, 1 aasta - destilleeritud vett, samas kui leiti, et need täiteained ei avaldanud statistiliselt olulist mõju B antagonistlikele omadustele. subtilis 1719 tüvi. Tuleb märkida, et oluline fakt on B. subtilis 1719 tüve võime säilitada antagonistlik toime S.sonnei ja S.aureus'e vastu vedelates stabilisaatorites pikka aega -36 kuud. (vaatlusperiood).

Külmkuivatamine sahharoosi-želatiini stabilisaatoriga säilitas B. subtilis 1719 tüve elujõulisuse ja antagonistliku aktiivsuse 4 aastat (vaatlusperiood).

Praegu kasutatakse praktilises tervishoius laialdaselt tuntud probiootilisi preparaate: baktisubtiil, sporobakteriin, biosporiin, baktisporiin, subaliin, tsereobiogeen, enterogermiin jt.

Tüve B.subtilis 1719 võrdlev uuring antagonistliku ja adhesiivse toime osas järgmiste probiootiliste preparaatide kaubanduslike kultuuridega: Sporobacterin, Venemaa (B. subtilis 534), Cereobiogen, Hiina (B. cereus DM423), Subtil, Vietnam (B. cereus var. vietnami), Baktisubtil, Prantsusmaa (B. cereus IP5832), Nutrolin, India (B.coagulans), näitasid, et isoleeritud tüvi on originaalne ja seda võib uue probiootilise preparaadi hankimisel soovitada tootmistüvena.

Seega on B.subtilis 1719 tüvel vastavalt füsioloogilistele ja biokeemilistele omadustele selgelt eristatavad individuaalsed omadused, mis kantakse kultuuripassi, kui see deponeeritakse nimelise GISK kultuuride kogusse. JI.A. Tarasevitš. Lisaks näitab isoleeritud B. subtilis 1719 tüve domineeriv positsioon antagonistliku aktiivsuse osas selle kultuuri kasutamise väljavaateid sellel põhineva probiootilise preparaadi väljatöötamiseks.

Doktoritöö uurimistöö viidete loetelu bioloogiateaduste kandidaat Gataullin, Airat Gafuanovitš, 2005

1. Ashmarin I.P., Vorobjov A.A. Statistilised meetodid mikrobioloogilistes uuringutes. Medizd, 1962, 180 s

2. Baibakov V.I., Karikh T.L., Borukaeva L.A. jt JCR-hiirte soolestiku mikrofloora ja üldise seisundi normaliseerumine bifidobakterikontsentraadi mõjul.//Antibiootikumid ja keemiaravi. 1997. - V. 42, nr 3. - S. 20-24.

3. Bayda G.E., Budarina Zh.I. Bacillus cereuse hemolüsiin II geeni esmane struktuur ja analüüs // 2 Rev. mäed teaduslik konf. nad ütlesid Puštšino teadlased, 23.–25. aprill. 1997: Abstraktne. aruanne Pushchino. - 1997 - S. 45-46.

4. Bayda G.E., Kuzmin N.P. Escherichia colisse kloonitud Bacillus cereuse HLY-III geen kodeerib uut poore moodustavat hemolüsiini. konf. pühendatud mälu akad. A. A. Baeva: Aruannete kokkuvõtted, Moskva, 20.–22. mai 1996. M. - 1996. - S. 108, 291.

5. Baranovsky A.Yu., Kondrashina E.A. Düsbakterioos ja soole düsbioos//SPb. "Peeter". -2000. -209 lk.

6. E. M. Bakhanova, S. M. Nikolajev, I. G. Nikolajeva jt, Rast. ressursse. 2001 . T. 37, nr. 1. S. 70-76. Pentaphylloides fruticosa võrsete ekstrakti mõju sulfadimetoksiini ja isoniasiidi poolt põhjustatud eksperimentaalsele soole düsbakterioosile

7. Beljavskaja V.A., Sorokulova I.B., Iljitšev A.A. Rekombinantsetel batsillidel põhinevate immunopreparaatide kavandamise väljavaated // Biotehnoloogia uued suunad: kokkuvõtted. dok. YI Conf. RF, 24.-26. mai 1994. Pushchino. -1994.-S. 68.

8. Beljavskaja V.A., Sorokulova I.B., Masõtševa V.A. Rekombinantsed probiootikumid: meditsiinis ja veterinaarias kasutamise probleemid ja väljavaated // Düsbakterioosid ja eubiootikumid: Ülevenemaalise teadusliku ja praktilise konverentsi kokkuvõtted. M. - 1996. - S. 7.

9. Beljavskaja V.A., Tšerdyntseva N.V., Bondarenko V.M. jt poolt toodetud interferooni bioloogilised mõjud rekombinantne probiootilise preparaadi Subalini bakterid. Ajakiri. mikrobiol., 2003, nr 2, lk. 102-109.

10. Beljajev E.I. Soole mikrofloorat normaliseerivate ravimite parandamise viisid / Resp. koostamine teaduslikud tööd: “Inimese autofloora normaalsetes ja patoloogilistes tingimustes. Kibe. - 1988. - S. 74-78.

11. A. F. Bilibin, Ter. arch. -1967. Nr 11. - S. 21-28.

12. Bilibin A. F. // Klin. Ravim. 1970. - nr 2. - S. 7-12.

13. Birger M.O. Mikrobioloogiliste ja viroloogiliste uurimismeetodite käsiraamat. Mikroorganismide tundlikkuse määramine antibiootikumide suhtes. M.: Meditsiin, 1982. - S. 180.

14. Blinkova L.P., Semenov S.A., Butova L.G. jne Antagonistlik tegevus värskelt eraldatud perekonna Bacillus bakteritüved // JMEI. 1994. -N5.-S. 71-72.

15. Boiko N.V., Turjanitsa A.I., Popovitš E.P., Vjunitskaja V.A. Bacillus subtilis'e kultuuride antagonistlik toime perekonna Klebsiella / Microbiol bakteritele. ja. 1989. - T. 51, N 1. - S. 87-91.

16. Boyko N.V., Lisetska M.V. Sondeerimisvibraatorite väljatöötamine: B. subtilis'e deyakyh tüvede antiskleroomne efektiivsus // Nauk. wyn. Uzhgor. un-tu. Ser. Bull. 1997. - N 4. - S. 194-198.

17. Bondarenko V.M., Petrovskaja V.G. Nakkusprotsessi arengu varased etapid ja normaalse mikrofloora kahekordne roll // Venemaa Meditsiiniteaduste Akadeemia bülletään. -M.- 1997.-N3.-C. 7-10.

18. Bondarenko V.M., Chuprinina R.P., Aladysheva Zh.I., Matsulevitš T.V. Probiootikumid ja nende terapeutilise toime mehhanismid // Eksperiment. ja kiil, gastroenterool. 2004. nr 3. S. 83-87.

19. Bochkareva N.G., Belogortsev Yu.A., Udalova E.V. jt Bakteritüvi Bacillus subtilis on b-glükanaasiga rikastatud hüdrolüütiliste ensüümide kompleksi tootja // Pat. N 2046141 Venemaa, C12 N 9/42, Publ. 20.10.95. - Bull. N 29.

20. Brilis V.I. Laktobatsillide kleepuvad omadused //Avtoref. dis. cand. kallis. Teadused. Tartu. -1990. - 25 s.

21. Brilis V.I., Briline T.A., Lenzner Kh.P., Lenzner A.A. Laktobatsillide kleepuvad ja hemaglutineerivad omadused. Ajakiri. mikrobiol., 1982, 9: 7578.

22. Vasiljeva V.L., Tatskaja V.N., Reznik S.R. Taimsete ja mikroobsete adjuvantide kasutamise kogemus laboriloomade immuun-astsiitvedelike saamiseks // Mzhrobyul. ajakiri 1974. T. 36, N 3. - S. 358-360.

23. Vershigora A.E. Immunoloogia alused // Kiiev: Vishcha kool. 1975. - 319 lk.

24. Vinnik Yu.S., Peryanova O.P., Yakimov S.V. et al., Meetod mädaste haavade raviks antagonistidega / International Journal on immunorehabilitation. 1998. - N 4, S. 143.

25. Vinogradov E.Ya., Shichkina V.P. Bakteritüvi B. mucilaginosus kui vasikate mittespetsiifilise immuunsuse biostimulaatori tootja // A.S. 1210452, NSVL -1/00. Avaldatud 27.04.96. - Bull. N 12.

26. Vladimirov Yu.A., Sherstnev M.P. Teaduse ja tehnoloogia tulemused: Biophysics 1989; 24:172.

27. Vorobjov A.A., Abramov N.A., Bondarenko V.M., Šenderov B.A. Düsbakterioos on meditsiinis aktuaalne probleem // Meditsiiniteaduste Akadeemia bülletään. -1997. - nr 3. -S.3-9.

28. Vorobjov A.A., Nesvižski Yu.V., Zudenkova A.E., Budanova E.V. Jämesoole parietaalse ja luminaalse mikrofloora võrdlev uuring hiirtel tehtud katsetes. Ajakiri. mikrobiol., 2001, 1: 62-67.

29. Vorobjov A.A., Nesvižski Yu.V., Lipnitski E.M. Inimese soolestiku parietaalse mikrofloora uurimine. Ajakiri. mikrobiol., 2003, 1: 6063.

30. Vyunitskaya V.A., Boyko N.V., Spivak N.Ya., Ganova L.A. / Mõned uute mikrobiootikumide toimemehhanismid // Taimekasvatuse ja söödatootmise intensiivistamise mikrobioloogilised ja biotehnoloogilised alused: Alma-Ata abstraktide kogu, 1990. - S 17.

31. Galaev Yu.V. Bakterite patogeensed ensüümid // M.: Meditsiin. 1968. - 115 lk.

32. Goncharova G.I., Semenova A.P., Lyannaya A.M. jt. Bifidofloora kvantitatiivne tase soolestikus ja selle korrelatsioon inimeste terviseseisundiga // Inimeste ja loomade antibiootikumid ja mikroökoloogia. -1988.-S.118-123

33. Gorskaja E.M. Soolestiku mikroökoloogiliste häirete tekkemehhanismid ja uued lähenemisviisid nende korrigeerimiseks.//Dissertatsioon teadusliku vormis

34. Gracheva N.M., Gontšarova G.I. Bakteriaalsete bioloogiliste preparaatide kasutamine sooleinfektsioonidega patsientide ravis. Soole düsbakterioosi diagnoosimine ja ravi. Juhised. 1986, lk 23

35. Gracheva N.M., Gavrilov A.F., Avakov A.A. jne – uued ravimid. 1994, nr 1, S. 3-12

36. Gracheva N.M., Gavrilov A.F., Solovieva A.I. Uue bakteriaalse preparaadi biosporiini efektiivsus ägedate sooleinfektsioonide ravis // Zhurn. mikrobiol. 1996. - N 1. - S. 75-77.

37. Grebneva A.J1., Mjagkova L.P. Soole düsbakterioos / / Gastroenteroloogia juhend 3 köites. M., 1996. -T.Z. -lk 324-334

38. Grigorjeva T.M., Kuznetsova N.I., Šagov E.M. Bacillus thuringiensis tüvi 4KH sünteesib eksotoksiini, millel on spetsiifiline toime Colorado kartulimardika vastu// Biotehnoloogia. 1994. - N 9-10. - S. 7-10.

39. Gulko M.A., Kazarinova JI.A., Pozdnyakova T.M. Inosiini saamise meetod // Pat. N 175583, C12P 19/32. Avaldatud 30.08.94. - Bull. N 16.

40. Demyanov A.V., Kotov A.Yu., Simbirtsev A.S., Tsütokiinitasemete uuringu diagnostiline väärtus kliinilises praktikas. Journal of Cytokines and Inflammation, 2003, 2. kd, nr 3, lk. 20-35

41. Egorov N.S., Zarubina A.P., Vybornykh S.N., Landau N.S. Sünteetiline * sööde perekonna Bacillus bakterite kasvatamiseks // Moskva Riikliku Ülikooli bülletään. 1989. nr 4.1. S. 52.

42. Ermakova L.M., Smirnova T.A., Alikhanyan S.I. et al., Crystalline Inclusions in a mutandi Bacillus subtilis, millel on muutunud proteinaaside spekter, Dokl. NSVL Teaduste Akadeemia. 1977. - T. 236, N 4. - S. 1001-1003.

43. Žirkov I.N., Bratukhin I.I. RAS probiootikumi kasutamine vasikate düsbakterioosi korrigeerimiseks// Veterinaarmeditsiin. 1999. N 4. - S. 40-42.

44. Zgonnik V.V., Furtat I.M., Vasilevskaja I.A. jne Antagonistlikud omadused eoseid moodustav lüsiini tootmisprotsessi saastavad bakterid//Microbiol. ja. 1993. -T.55, N4. - S. 53-58.

45. Zinkin V.Yu. Fotomeetriline NST-test inimese vere neutrofiilidega ning selle kliiniline ja immunoloogiline tähtsus luu- ja lihaskonna vigastustega patsientidel. Abstraktne dis. cand. kallis. Teadused - Moskva, 2004.

46. ​​Zudenkov A.E. Jämesoole parietaalmutsiini immunokompetentsete rakkude mikrofloora ja koostis normaalsetes tingimustes ja mõnel patoloogilised seisundid. Abstraktne dis. cand. kallis. Teadused, - Moskva, 2001.

47. Ivanovsky A.A., Uus probiootiline baktotsellolaktiin loomade erinevate patoloogiate korral // Veterinaar. 1996 - N11. - S. 34-35.

48. Ivanovski A.A., Vepreva N.S., Zimireva V.V., Lagunova O.P. Meetod probiootikumi saamiseks veterinaaria jaoks / RU patent N 2084233, publ. 20.07.97. Bull. N 20.

49. Kandybin N.V., Ermolova V.P., Smirnov O.V. Baktokulitsiidi kasutamise tulemused ja väljavaated // Kaasaegne. saavutatav biotehnoloogia.: Mater. 1 Konf. Põhja-Kavk. september, Stavropol. 1995. Stavropol. - 1995. - S. 14-15.

50. Kashirskaya N.Yu. Probiootikumide ja prebiootikumide väärtus soolestiku mikrofloora reguleerimisel.//Vene meditsiiniajakiri. 2000. - V. 8, nr 13-14. - S. 572-575.

51. Kovaltšuk L.V., Gankovskaja L.V., Rubakova E.I. Tsütokiinide süsteem. M., 2000.

52. Kozachko I.A., Vyunitskaya V.A., Berezhnizskaya T.G. jt Perekonna 4 Bacillus bakterid on paljulubavad kultuurid taimede haiguste eest kaitsmise bioloogiliste vahendite loomiseks.// Mshrobyul. ja. - 1995.- T.57, N 5. - S. 69-78.

53. Krasnogolovets V.N. Soole düsbakterioos. M., 1979. -198 lk.

54. Kudrjavtsev V.A., Safronova JI.A., Osadchaya A.I. jt Bacillus subtilis'e eluskultuuride mõju organismi mittespetsiifilisele resistentsusele // Mikrobiol. ja. 1996 - T.58, N 2. - S. 46-53.

55. Kuznetsova N.I., Smirnova T.A., Shamshina T.N. Bacillus thuringiensis tüvi on toakärbeste jaoks mürgine // Biotehnoloogia. 1995. -N3-4.-S. 11-14.

56. Lapchinskaya A.V., Shenderov B.A. Tsefaleksiini, mõnede immunomodulaatorite põhjustatud düsbioosi korrigeerimine.//Mikroobse ökoloogia meditsiinilised aspektid. M., 1991. -S.70-79

57. Lenzner A.A., Lenzner H.T., Mikelsaar M.E. et al. Laktofloora ja kolonisatsiooniresistentsus.//Antibiootikumid ja mesi. biotehnoloogia. -1987. -32. - Number 3. - KÄTTE. 173-180.

58. Leštšenko V.M. Vistseraalse kandidoosi kliinik, diagnoosimine ja ravi. Juhised. M., 19871.

59. Lisetska M.V. Bacillus subtilis'e antagonistliku aktiivse tüve nagu Klebsiella rhinoscleromatis eksperimentaalne määramine // Nauk. wyn. Uzhgor. un-tu. Ser. Bull. 1997. - N 4. - S. 207-212

60. Lopatina T.K. et al. Ravimite immunomoduleeriv toime * eubiootikumid // Venemaa Meditsiiniteaduste Akadeemia bülletään. M., "Meditsiin". -1997. Number 3. -lk 30-34

61. Lukin A.A. Antibiootikumide moodustumine ja sporulatsioon plasmiidide ja plasmiidivabades mikroorganismides // Pushchino. 1978. - S. 25-28.

62. Mazankova JI.H., Mihhailova N.A., Kurokhtina I.S. Baktisporiin on uus probiootikum laste ägedate sooleinfektsioonide raviks// Man and Medicine: Proceedings. aruanne V Vene Rahvuskongress, Moskva, 8.-12.aprill 1997 - M. - S. 199.

63. Mazankova L.N., Vaulina O.V. Uus ravimid düsbiootiliste häirete korrigeerimiseks.//Lastearst. 2000. nr 3. - S. 51-53.

64. Maniatis T., French E., Sambrook J. Geenitehnoloogia meetodid. Molecular Cloning, 1984.

65. Markov I.I., Ždanov I.P., Markov A.I. Mycobacterium tuberculosis'e antagonisti Bacillus subtilis MF-6 tüvi // Pat. N 2120992, C 12N 1/20. - Avaldatud. 27.10.98 - Bull N30.

68. Mikshis N.I., Shevchenko O.V., Eremin S.A. et al., Bacillus anthracis tüvede II populatsiooni heterogeensus Dep. VINITIS 04.06.98. Saratov. -1998.-7 lk.

69. Mitrokhin S.D. // Antibiootikumid ja keemiaravi. 1991. - nr 8. - lk 46 - 50.

70. Mitrokhin S.D. Inimese normaalse mikrofloora metaboliidid käärsoole düsbioosi ravi ekspressdiagnostikas ja kontrollis: Lõputöö kokkuvõte. Dr med. Nauk, M., 1998. 37 lk.

71. Mitrohhin S.D., Ardatskaja M.D., Nikuškin E.V., Ivanikov I.O. ja teised - M., 1997. 45 lk. Soole düsbakterioosi (düsbioosi) kompleksne diagnostika, ravi ja ennetamine sisehaiguste kliinikus (Juhend).

72. Mitrokhin S.D., Shenderov B.A. Mikrobioloogilised ja biokeemilised näitajad muutused rottide jämesoole mikroobses ökoloogias rifampitsiini mõjul. Antibiootikumid ja keemiaravi - 1999, 34. kd, nr 6 (482-4).

73. Molchanov O.JL, Poznyak A.JI. Biosporiini kasutamine bakteriaalse vaginoosi kompleksravis // Tez. loeng: Kaasaegsed tehnoloogiad nakkushaiguste diagnoosimiseks ja raviks. Püha P. - 1999, lk 187.

74. Muzychenko JI.A., Senatorova V.N., Alkhovskaya JI.JI. Mikroorganismide arengu morfomeetriline analüüs / Biotehnoloogia. 1990. - N 3. - S. 3-6.

75. Müller G., Litz P., Münch G. Taimse päritoluga toiduainete mikrobioloogia // M.: B.i.. - 1977.- Lk.343 347

76. Nikitenko V.I. Bakteriaalne preparaat ennetamiseks ja raviks põlemisprotsessid ja allergilised haigused// Rahvusvaheline rakendus. 89/09607, WO, publ. 19.10.1989.

77. Nikitenko V.I. Bakterid ravimite asemel // Teadus NSV Liidus. - 1991. - N 4. -S. 116-121.

78. Nikitenko V.I. Bakteritüvi Bacillus subtilis, mida kasutatakse diateesi, düsbakterioosi ja bakteriaalsete infektsioonide raviks mõeldud piimatoote saamiseks // A.S. nr 1648975, S.U. avaldatakse 15.05. 91.

79. Nikitenko V.I., Nikitenko I.K. Bakteritüvi Bacillus pulvifaciens, mida kasutatakse terapeutilise ja profülaktilise ravimi valmistamiseks bakteriaalsete infektsioonide vastu loomadel // A.S. nr 1723117, S.U. publ. 12. 1992.

80. Nikitenko V.I., Nikitenko I.K. Bakteritüvi Bacillus subtilis, mida kasutatakse põletikuvastaste protsesside ja allergiliste haiguste ennetamiseks ja raviks kasutatava ravimi saamiseks // А.с. nr 1723116, S.U. publ. 12. 1992.

81. Nikitenko L.I., Nikitenko V.I. Bakteritüvi Bacillus sp. düsbakterioosi ja allergiate terapeutilise ja profülaktilise ravimi komponent // A.S. nr 1710575, S.U. - publ. 5. 1992.

82. Nikitenko V.I., Gorbunova N.N., Žigailov A.V. Sporobacterin on uus ravim düsbakterioosi ja mädaste-põletikuliste protsesside raviks // Düsbakterioos ja eubiootikumid: Vserose kokkuvõtted. teaduslik ja praktiline. konf. -M.- 1996.-S. 26.

83. Nikolicheva T.A., Tarakanov B.V., Golinkevitš E.K., Komkova E.E. Muutused põrsaste seedetrakti biotsenoosis, kui Bacillus micilaginosis lisatakse dieeti // Bul. Ülevenemaaline põllumajandusloomade biokeemia ja toitumise füsioloogia uurimisinstituut. 1989.-N 2. - S. 31-35.

84. Obukhova O.V., Soboleva N.N. Jaotusteguri olemasolust saprofüütsete spooribakterite kultuurides // Zh. mikrobiol. 1950. - N 12. S. 482-485.

85. Mikroorganismide tundlikkuse määramine antibakteriaalsete ravimite suhtes. Juhised MUK 4.2.1980-04, 2004.

86. Osadchaya A.I., Kudrjavtsev V.A., Safronova JI.A. Keskmise happesuse ja temperatuuri mõju Bacillus subtilis'e polüsahhariidide kasvule ja eritumisele sügaval kasvatamine// Misrobul. ajakiri 1998. - T. 60., N 4. - S. 25-32.

87. Osipova I.G. Mõned kolibakteriiini ja spoorieubiootikumide kaitsva toime mehhanismi aspektid ja uued meetodid nende tõrjeks.// Lõputöö kokkuvõte. biol.teaduste dis.kandidaat.- M., 1997.- 25 lk.

88. Osipova I.G., Sorokulova I.B., Tereškina N.V., Grigorjeva JI.B. Perekonna Bacillus bakterite ohutuse uurimine, mis on mõne probiootikumi aluseks // Zh. mikrobiol. 1998. - N 6. - S. 68-70.

89. Osipova I.G., Mihhailova N.A., Sorokulova I.G., Vasiljeva E.A., Gaiderov A.A. Spooriprobiootikumid. Ajakiri. mikrobiol. - 2003. nr 3. Koos. 113-119.

90. Osterman L.D. Meetodid Valkude ja nukleiinhapete uuringud. 1981. aastal.

91. Panin A.N., Serykh N.I., Malik E.V. ja teised.Probiootilise ravi efektiivsuse parandamine põrsastel / Veterinary Medicine, 1996. - N 3. - Lk 17.

92. Panchishina M.V., Oleinik S.F. Soole düsbakterioos. Kiiev, 1983

93. Paršina S.N., Imšenetski A.A., Nesterova N.G. jt. Bakteritüvi Bacillus segesh "trombolüütilise toimega proteolüütiliste ensüümide tootja // A. S. N 1615177, C 12N 1/20. Avaldatud 23.12.90. - Bull. N 4. 1988.

94. Perth S. D. Põhitõed kasvatamine mikroorganismid ja rakud. M. Mir, 1978, 332 s

95. Petrov L.N., Verbitskaja N.B., Vakhitov T.Ya. Ravimite väljatöötamine düsbakterioosi raviks ja ennetamiseks inimese endoökoloogia ideede põhjal // Rus. ja. HIV/AIDS ja sellega seotud prob. 1997.- 1. kd, N 1. S. 161-162.

96. Petrovskaja V.G., Marko O.P. Inimese mikrofloora normaalsetes ja patoloogilistes tingimustes. M.: Meditsiin. -1976. -217 C.

97. Poberii I.A., Kharechko A.T., Sadovoi N.V., Litusov N.V. Uus kompleksne eubiootiline "biosporiin" lastele ja täiskasvanutele / Baškortostani tervis. 1998. -N 1. - S. 97-99.

98. Pogosjan G.P., Nadirova A.B., Kaliev A.B., Karabaev M.K. Plasmiid pCLl ja Bacillus sp. 62 II Molekulaargeneetika, mikrobiool. ja viroloogia. 1999. - N 1. - S. 37-38.

99. Podbereznõi V.V., Parikov V.A. Sümbiontbakteri Bacillus pulvifaciens või Bacillus subtilis kasvatamise keskkond – probiootikumide tootja// RU patent nr 2100029, publ. 27.12.97. Bull nr 36.

100. Podbereznõi V.V., Poljantsev N.I., Ropaeva L.V. kasvatamine Bacillus subtilis'e tootmistüved juustu vadakus // Veterinaar.- 1996.-N 1.-C. 21-29.

101. Podoprigora G.I. Kolonisatsiooniresistentsuse immuun- ja mittespetsiifilised mehhanismid.//Antibiootikumid ja kolonisatsiooniresistentsus/Ülevenemaalise antibiootikumide uurimisinstituudi vaiad.- M. -1990. - Väljaanne Х1Х. - KÄTTE. 15-25.

102. Polkhovsky V.A., Bulanov P.A. O dekarboksülaasid aminohapped Bacillus cereuses //Mikrobioloogia. 1968. - T. 37, N 4. - S. 600-604.

103. Pospelova V. V., Gracheva N. M., Antonova L. V. jt Bioloogilised mikroobipreparaadid, nende ravimvormid ja rakendused // Uued ravimid: Väljendage teavet. -1990. -Probleem. 5. - S. 1-8.

104. Pospelova V.V., Rakhimova N.G., Khaleneva M.P. ja muud Mikroobsete bioloogiliste toodete uued kasutusvaldkonnad inimkeha bakteriotsenoosi korrigeerimiseks.//Immunobiol. ravimid. M. -1989. - KÄTTE. 142-152.

105. Reznik S.R. Meetod viirus- ja bakteriaalsete haiguste raviks ja ennetamiseks loomadel // SU, A.S. N 1311243, publ. 1982. aastal.

106. Reznik S.R., Sorokulova I.B., Vjunitskaja V.A. Profülaktiline bioloogiline toode sporolact // Patent N 2035186. RU. - A 61 K 35/66, publ. 20.05.95, bul. N 14.

107. Reznik S.R., Shust I.I. Vasikate hematoloogilised ja tsütokeemilised parameetrid ravimi Bacteria-SL andmisel // Põllumajandusloomade biokeemia ja toiduprogramm: Proceedings. aruanne Üleliiduline. sümposid. - Kiiev, 1989. S. 25.

108. Reshedko G.K., Stetsyuk O.U. Mikroorganismide tundlikkuse määramise tunnused ketta difusioonimeetodil. Kliinilise mikrobioloogia kaasaegsed meetodid, number 1. Smolensk, 2003.

109. Ryapis JI.A., Lipnitsky A.V. Bakteriaalse patogeensuse mikrobioloogilised ja populatsiooni-geneetilised aspektid // Zhurn. mikrobiol. 1998. - N 6. S. 109-112.

110. Savitskaja K.I. Seedetrakti mikroökoloogia rikkumised ja kroonilised soolehaigused // Terra medica. - 1998. N 2. - S. 13-15.

111. Svechnikova E.B., Maksyutova L.F., Khunafin S.N. et al., Baktisporiini kasutamise kogemused kompleksne ravi termilise vigastusega lapsed // Tez. loeng: Kaasaegsed tehnoloogiad nakkushaiguste diagnoosimiseks ja raviks. Püha P. - 1999 - S. 268.

112. Sinev M.A., Budarina Zh.I., Gavrilenko I.V. et al., Tõendid hemolüsiin II Bacillus cereus'e olemasolu kohta: hemolüsiin II geneetilise determinandi kloonimine // Molek. Biol. 1993. - T. 27, N 6. - S. 1218-1229.

113. Slabospitskaja A.T., Krõmovskaja S.S., Reznik S.R. Batsillide ensümaatiline aktiivsus, mis lubab kaasata bioloogiliste toodete koostisesse // Microbiol. ja. 1990. - N2. - S. 9-14.

114. Smirnov V.V., Reznik S.R., Vasilevskaja I.A. eoseid moodustav Aeroobsed bakterid on bioloogiliselt aktiivsete ainete tootjad. - Kiiev, 1982 - 280 lk.

115. Smirnov V.V. Juhised perekonna Bacillus bakterite isoleerimiseks ja identifitseerimiseks inimeste ja loomade kehast // Kiiev, 1983. -49 lk.

116. Smirnov V.V., Reznik S.R., Vasilevskaja I.A. Spoore moodustavad aeroobsed bakterid - bioloogiliselt aktiivsete ainete tootjad // Kiiev. Nau-kova Dumka.- 1983.- 278 lk.

117. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B. jt Mõnedest asümptomaatilise baktereemia esinemismehhanismidest // Microbiol. ajakiri 1988 -T. 50,N6.-S. 56-59.

118. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B. jne Ravimeetod mädane-septiline sünnitusjärgsed haigused eluskultuuride peatamine // A. s. nr 1398868 S.U. - A 61 K 35/74. - publ. 30.05.88, bul. N 20.

119. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B. Biosporiin inimese seedetrakti haiguste ennetamiseks ja raviks // А. nr 1722502. S.U. - A 61 K. 39/02, publ. 30.03.92.

120. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B., Vyunitskaya V.A. Soojavereliste loomade mikrofloora korrigeerimiseks mõeldud bakteripreparaatide loomise ja kasutamise vastuolulised küsimused // Microbiol. ajakiri 1992. - T.54, N 6.- S. 82-92.

121. Smirnov V.V., Reznik S.R., Vyunitskaya V.A. jt Kaasaegsed ideed perekonna Bacillus II Microbiol bakterite probiootikumide terapeutilise ja profülaktilise toime mehhanismide kohta. ajakiri - 1993. - 55, - nr 4.S.92-112

122. Smirnov V.V., Osadchaya A.I., Kudrjavtsev V.A., Safronova JI.A. Kasv ja eoste moodustumine Bacillus subtilis erinevates õhutustingimustes // Microbiol. ajakiri 1993. - T. 55, N 3. - S. 38-44.

123. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B. Profülaktiline bioloogiline toode subaliin // Patent N 2035185, RU. A 61 K 35/66, publ. 20.05.95, bul. N 14.

124. Smirnov V.V., Sorokulova I.B., Osipova I.G. Bioloogilise toote subtikool nakkushaiguste ennetamiseks ja raviks // Patent N 2129432. -A. 61 K 35/74. - Bull. N 12, publ. 27.04.99.

125. Smirnov V.V., Reva O.N., Vjunitskaja V.A. Batsillide antagonistliku toime matemaatilise mudeli loomine ja praktiline rakendamine probiootikumide kujundamisel. 1995. -T. 64, N 5. -S. 661-667.

126. Smirnov V.V., Kosjuk I.V. Perekonna Bacillus bakterite kleepuvad omadused - drobiootikumi komponendid // Mshrobulopchniy zhurn. 1997. - T. 69, N 6. - S. 36-43.

127. Sorokulova I.B. Perekonna Bacillus bakterite kasutamise väljavaated uute bioloogiliste toodete väljatöötamiseks // Antibiootikumid ja keemiaravi. -1996. T.41, N 10. - S. 13-15.

128. Sorokulova I.B. Biosporiini ja teiste batsillidel põhinevate kaubanduslike preparaatide bioloogiliste omaduste võrdlev uuring // Mshrobyulopchniy zhurnal. 1997. - T. 69, N 6. - S. 43-49.

129. Sorokulova I.B. Batsillidest pärit probiootikumide mõju makrofaagide funktsionaalsele aktiivsusele / Antibiootikumid ja keemiaravi. 1998. - T. 43, N 2. - S. 20-23.

130. Storozhuk P.G., Bykov I.M., Storozhuk A.P. Valgu toitumise ja ensüümasendusravi patogeneetiline orientatsioon keha immuunpuudulikkuse seisundites // Rahvusvaheline immunorehabilitatsiooni ajakiri. 1998. - N 10., S. 110-115.

131. Tabolin V.A., Belmer S.V., Gasilina T.V. Laste soole düsbakterioosi ratsionaalne ravi. Juhised. M., 1998. -11s.

132. Topchy M.P. Heinabatsilli eluskultuuridest saadud preparaatide kasutamine vasikate düsbakterioosi korral: Lõputöö kokkuvõte. dis. cand. biol. Teadused. Minsk, 1997. -21 lk.

133. Trishina N.V. Seos soole düsbakterioosi tekke ja antiendotoksiini immuunsuse seisundi vahel. Abstraktne dis. cand. kallis. Teadused. - Moskva, 2003., 24 lk.

134. Õpetaja I.Ya. Makrofaagid immuunsüsteemis. M 1978; 175.).

135. Fazylova A.A. Sporobakteriiini ja baktisporiini kasutamise kliiniline ja immunoloogiline põhjendus väikelaste soole düsbioosi korral // Toim. saab. dis. Ufa. - 1998. - 24 lk.

136. Harwood K. Bacilli. Geneetika ja biotehnoloogia. M., 1992. - S. 52.

137. Kharchenko S.N., Reznik S.R., Litvin V.P. Sööda hallituse vastu võitlemise meetod // A.S. N 751382, NSVL, publ. aastal B.I., 1980, nr 28.

138. Khmel I.A., Chernin L.S., Levanova N.B. jt Bacillus pumilus bakteritüvi fütopatogeensete mikroorganismide vastase ravimi saamiseks // Patendid 1817875 Venemaa F01N 63/00, C12N 1/20. publ. 20.05.95. - Bull. N 14.

139. Tšernjakova V.I., Bereza N.M., Selezneva S.I. Biosporiini bakterioloogiline ja immunoloogiline efektiivsus mittespetsiifilise haavandilise koliidi korral // Microbiol.zh. 1993. - T. 55, N 3. - S. 63-67.

140. Chkhaidze I.G., V.G. Likhoded et al. Antikehade korrigeeriv toime eksperimentaalse düsbakterioosi korral // Zhurn. Microbiol. 1998, nr 4: 12-14.

141. Sharp R., Skaven M., Atkinson T. Bacilli: Geneetika ja biotehnoloogia. -M. 1992. - 398 lk.

142. Sheveleva S.A. Probiootikumid, prebiootikumid ja probiootilised tooted. Probleemi praegune seis//Vopr.nutrition. -1999. -T.68. -#2. -S.32

143. Shenderov B. A. Meditsiiniline mikroobide ökoloogia ja funktsionaalne toitumine. - M., 1998, T. I, S. 287.

144. Shenderov B.A. Kolonisatsiooniresistentsus ning kemoterapeutilised ja antibakteriaalsed ravimid.// Antibiootikumid ja kolonisatsiooniresistentsus: Ülevenemaalise antibiootikumide uurimisinstituudi toimetised. M. -1990. - Väljaanne Х1Х. -lk 5-16.

145. Shenderov B.A., Manvelova M.A., Stepanchuk Yu.B., Skiba N.E. Probiootikumid ja funktsionaalne toitumine // Antibiootikumid ja keemiaravi. 1997. - T. 42, N 7. - S.30-34.

146. Shenderov B.A. Meditsiiniline mikroobide ökoloogia ja funktsionaalne toitumine. - M., 1998, T. II, S. 413

147. Yampolskaya T.A., Velikzhanina G.A., Zhdanova N.I. et al., Bacillus subtilis'e bakteritüvi, mis toodab L-fenüülalaniini: А.с. N 1693056, C 12 R 13/22, publ. 23.11.91. Bull. N 43.

148. Adami A., Sandrucci A., Cavazzoni V. Põrsad, keda toideti sünnist saadik lisandina probiootilise Bacillus coagulansiga: Zootehnilised ja mikrobioloogilised aspektid, Ann. mikrobiol. ed ensüümool. 1997. - V. 47, N 1. - Lk 139-149.

149. Azuma I., Sugimura C., Iton S. Bakteriaalsete glükolipiidide adjuvantne aktiivsus // Jap. J. Microbiol. 1977. - V. 20, N 5. - Lk 465-468.

150. Benedettini J. et al. Immunomodulatsioon Bacillus subtilis eoste poolt // Boll. 1., SieroteMilano. 1983.-V. 62.,N6.-P. 509-516.

151. Berkel H., Hadlok R. Lecithinase-und Toxinbildung durch Stamme der Gat-tung Bacillus // Lebensmittelhygiene. 1976. - V. 27, N 2. - lk. 63-65.

152. Bernheimer A., ​​Avigad L. Bacillus subtilis'e toodetud tsütolüütilise aine olemus ja omadused // J. Gen. Microb.- 1970. V. 61, N 2. - P. 361-369.

153 Blaznic J, Kumel I.M., Salamum B. et al. Sdravljenje kronicne granulomotozne bolezni z acidofilnem mlecom // Zdrav.Vesth. 1976. N 45. - Lk 77-79.

154. Boer A.S., Priest F., Diderichsen B. Bacillus licheniformis'e tööstuslikust kasutamisest: ülevaade // Appl. Microbiol ja Biotechnol. 1994. - V. 40, N 5. - P. 595-598.

155. Buchell M.E., Smith J., Lynch H.C. Erütromütsiini tootmise kontrollimise füsioloogiline mudel partii- ja tsükliliselt söödetud partiiküttel // Mikrobioloogia. -1997. V. 143, nr 2. - Lk 475-480.

156 Cipradi G. et al. Bacillus subtilis'ega täiendava ravi mõju toiduallergiatele // Chemioterapia. -1986. 5, N6. -P.408-410

157. Cromwick A.M., Birrer G.A., Gross R.A. PH ja aeratsiooni mõju y-polü (glutamiinhappe) moodustumisele Bacillus licheniformis'e poolt kontrollitud partii fermentorkultuurides // Biotechnol. ja Bioeng. 1996. - V. 50, N 2. - Lk 222-227.

158. Danchin A., Glasser P., Kunst F. jt. Bacillus subtilis devoile ses geenid // Biofutur. 1998. - N 174. - Lk 14-17.

159. Devin K.M. Bacillus subtilise genoomiprojekt: eesmärgid ja edusammud // Trends Biotechnol. 1995. - V. 13, N 6. - Lk 210-216.

160. Donovan W.P., Rupar M.J., Slanei A.C. Bacillus thuringiensis crytic, valk toksiline coleoptera isektidele // Patent N 5378625 USA A61K 31/00. Avaldatud 01/03/95.

161. Dubos R. Pesutoodetes kasutatavate ensüümide toksilised tegurid // Teadus. 1971. - N 3993. - Lk 259-260.

162. Edlund C., Nord C.E. Qinoloonide mõju soolestiku ökoloogiale. Drugs, 1998, 58(2): 65-70.

163. Flindt M. Pulmonare'i haigus, mis on põhjustatud proteolüütilist ensüümi sisaldavate Bacillus subtilis'e derivaatide sissehingamisest // Lancet. - 1969. V. 1, N 7607. - P. 1177-1181.

164. Fox M. Prokarüootide fülogenees // Teadus. -1980. V. 209, nr 4455. Lk 457-463.

165. Fuller R. J. Appl Bacteriol 1989; 66:5:365-378.

166. Gastro G.R., Ferrero M.A., Abate C.M. et al. Alfa- ja beeta-amülaaside samaaegne tootmine Bacillus subtilis Mir-5 poolt partii- ja pidevkultuuris // Biotechnol. Lett. 1992. - V. 14, N 1. - P. 49-54.

167. Glatz B.A., Spira W.M., Goepfert J.M. Veresoonte läbilaskvuse muutmine küülikutel Bacillus cereuse ja sellega seotud liikide kultuurifiltraatide abil // Infect, and Immunol. 1974. V. 10, N 2. - Lk 299-303.

168. Guida V., Guida R. Importansia dos Bacillos esporulados aerobios em gastroenterologia e nutricao // Rev. Brasiilia. med. 1978. - V. 35, N 12. - P. 702707.

169. Haenel H., Bending J. Soolefloora tervises ja haigustes // Progr. toit ja nutr. sci.- 1975.-V. 21, Nl.-P. 64.

170 Himanen J.-P., Pyhala L., Olander R.-M. et al. Bacillus subtilis 168 lipo-teihoehappe ja peptidoglükaanteihoehappe bioloogilised aktiivsused // J. Gen. mikrobiol. - 1993.-V. 139,N 11.-P. 2659-2665.

171. Hirano Y., Matsudo M., Kameyama T. Bacillus subtilis 168 varase idanemise ajal sünteesitud valkude kahemõõtmeline polüakrüülamiidgeelelektroforees aktinomütsiin D juuresolekul // J. Basic Microbiol. 1991. - V. 31, N 6.- Lk 429-436.

172. Humbert Florence Les probiotigues: un sujet d "actualite // Bull. inf. Stat. exp. auicult. Ploufragan. 1988. - V. 28, N 3. - P. 128-130.

173. Inouye S., Kondo S. Amikumatsiin ja SF-2370, mikrobiooli päritolu farmakoloogiliselt aktiivsed ained // Novel Microbial Prod. Med. ja Agr. Amsterdam. -1989.-P. 179-193.

174. Johnson C. E. Bacillus cereuse surmav toksiin 1. Toksiini, hemolüsiini ja fosfolipaasi seosed ja olemus // J. Bacterid. 1967. V. 94, N 2. - P. 306316.

175. Kakinuma A., Hori M., Isono M. Rasvhapete määramine surfaktiinis ja surfaktiini üldstruktuuri selgitamine // Agric. ja Biol. Chem. 1969. - V. 33. - P. 973-976.

176. Kaneko J., Matsushima H. ​​Kristallitaoline struktuur Bacillus subtilis 168 sporulatsioonirakkudes // J. Electron. Mikroskoopia - 1973. V. 22, N 2. - P. 217-219.

177. Kaneko J., Matsushima H. ​​Kristallilised kandmised sporuleerivates Bacillus subtilis rakkudes // In: Spores YI. vali. Pap. 6. Int. Spore Conf. Washington. - 1975. -P. 580-585.

178. Kitazawa H., Nomura M., Itoh T. J Dairy Sci 1991; 74:7:2082 2088.

179. Kubo Kazuhiro. Bacillus subtilis FERM BP-3418 puhaskultuur // Pat. nr 5364738. USA. MKI A01N 25//00. - publ. 15.11.94.

180. Kudrja V.A., Simonenko L.A. Aluseline seriini proteinaas ja lektiini eraldamine Bacillus subtilis'e kultuurivedelikust // Appl. Microbiol ja Biotechnol. -1994.-V. 41,N5.-P. 505-509.

181. Le H., Anagnostopoulos C. Looduslikult esinevate plasmiidide tuvastamine ja iseloomustamine, Molec. Gen. Genet. 1977. - V. 157. - Lk 167-174.

182. Legakis N.J., Papavassilion J. Õhukese kihi kromatograafia meetod bakteriaalsete fosfolipaaside kiireks tuvastamiseks // J. Clin. Microbiol., 1975. V.2, N 5. - P. 373-376.

183 Leviveld H.L.M., Bachmayer H., Boon B. et al. ohutu biotehnoloogia. Osa 6. Ohutuse hindamine biotehnoloogias kasutatavate mikroorganismide inimeste tervise seisukohast // Appl. Microbiol ja Biotechnol. 1995. V. 43, N 3. - Lk 389-393.

184. Lin S.-C., Carswell K.S., Sharma M.M., Georgiou G. Bacillus licheniformis JF-2 lipopeptiidse biosurfaktanti pidev tootmine, Appl. Microbiol ja Biotechnol. 1994. - V. 41, N 3. - Lk 281-285.

185. Lovett P., Bramucci M. Plasmiidne DNA batsillides // In: Microbiology-Washington. 1976. - Lk 388-393.

186. Markham R., Wilkie B. Pesuaine mõju aerosoolide allergilisele sensibiliseerimisele teie ensüümidega. subtilis // Int. Arch. Allergia ja Appl. Immunol. 1976.-V. 51, nr 5. - Lk 529-543.

187. Maruta Kiyoshi Soole patogeenide välistamine pideva söötmise teel Bacillus subtilis C-3102-ga ja selle mõju soolestiku mikrofloorale broilerites // Anim. sci. ja Technol. 1996. - V. 67, N 3. - Lk 273-280.

188. Moszer I., Glaser P., Danchin A. SubtiList: Bacillus subtilise genoomi relatsiooniandmebaas // Mikrobioloogia. 1995. - V. 141, N 2. - Lk 261-268.

189. Murray P.R., Baron E.J., Pfaller M.A., Tenover F.C., Jolken R.H., Manual of Clinical Microbiology, 7. väljaanne, Washington D.C., ASM Press, 1999

190. Nozari-Renard J. Induction d 5, OInterferon par Bacillus subtilis, Ann. mikrobiol. 1978.-V.129a. - N 4. - Lk 525-542.

191 Oh M.K., Kim B.G., Park S.H. Spoorimutantide tähtsus Bacillus subtilis'e partiide ja pideva fermentatsiooni jaoks // Biotechnol. ja Bioeng. 1995.-V. 47, nr 6. - Lk 696-702.

192. Payne Jewel M. Bacillus thuringiensis Hist isolaadid on aktiivsed ayanist nematoodid / Patent N 5151363, C12 N 1/20, A 01 N 63/00, Appl. 27.07.90., publ. 29.09.92.

193. Pepys J., Hargreave F., Longbotton Y. Kopsude allergilised reaktsioonid Bacillus subtilis'e ensüümidele // Lancet. 1969. - V. 1, N 44 - 7607. - Lk 1181-1184.

194. Peterson W.L., Mackrowiak Ph.A., Barnett C.C. et al. Inimese mao bakteritsiidne barjäär: toimemehhanismid, suhteline antibakteriaalne toime ja toitumismõjud.//J. Nakata. haigused. -1989. -159 nr 5. -lk 978-985.

195 Prasad S.S.V., Shethna G.J. Bacillus thuringiensis'e valguliste kristallide biokeemiline bioloogiline aktiivsus // J. Sci. ja Ind. Res. 1976. - V. 35, N 10. - P. 626-632.

196. Rocchietta I. Bacillus subtilis'e kasutamine haiguste ravis / Minerva Med. -1969. -60. N3/4. -P. 117-123.

197. Rosental G. J., Corsini E. // Methods Immunotoxicol. 1995. V 1, lk 327-343

198. Rychen G., Simoes Nunes C. Effets des flores lactigues des produits laitiers fermentes: Une base scientifigue pour l "etude des probiotiques microbiens dans l" espece porcine // Prod. anim. 1995. - V. 8, N 2. - C. 97-104.

199. Salminen Seppo Probiootikumide kliinilised aspektid //Ecol. tervis ja haigused.-1999.-11.-N4.-P. 251-252

200. Shore N., Greene R., Kezeni H. Bacillus subtilisega kokkupuutunud worcerside kopsude disfusioon // Environm. Res. 1971. - V. 4, N 6. - Lk 512-519.

201. Slein M., Logan G., Teie fosfolipaaside iseloomustus. cereus ja nende mõju erütrotsüütidele, luudele ja neerurakkudele // J. Bacteriol. 1965. - V. 90, Nl.-P. 69-81.

202. Somerville H.J. Bacillus thuringiensis'e insektitsiidne endotoksiin // In: Sem. etüüdi teema Prod, loodus. et prot. taim. 1977. - Lk 253-268.

203. Spira W., Goepfert J. Bacillus cereuse poolt toodetud enterotoksiini bioloogilised omadused, Can. J. Microbiol. 1975. - V. 21, N 8. - Lk 1236-1246.

204. Stgard Henri Microbielle v kstfremmer til svin. Teori og prasksis/ Dan veterinaertidsskr. 1989. - V. 72, N 15. - P. 855-864.

205. Su Li, Zhang Zhihong, Xiao Xianzhi, Wang Xiaomin Wuhan daxue xuebao. Ziran kexue keeld // J. Wuhan Univ. Natur. sci. Ed. 1996. - V. 42, N 4. - C. 516518.

206. Sumi H. Natto füsioloogiline funktsioon // J. Brew. soc. jaap. 1990. - V. 85, N 8.-P. 518-524.

207. Tihole F. Fizioloski pomer backteriemije z geiunalo mikrofloora // Zdravstv vestn 1982. - V. 51, N 1. P. 3-5.

208. Towalski Z., Rothman H. Ensüümitehnoloogia //in: The Biotechnological Challenge. Cambridge University Press. Cambridge, 1986 - lk 37-76.

209. Tsuge Kenji, Ano Takashi, Shoda Macoto. Lipopeptiidide surfaktiini ja plipastatiini B1 kaastootja Bacillus subtilis YB8 iseloomustus //J. Gen. ja Appl. mikrobiol. 1995.- 41, N 6. Lk 541-545.

210. Van der Waaij D. Seedetrakti kolonisatsiooniresistentsus: mehhanism ja kliinilised tagajärjed.//Nahrung. -1987. -31 nr 5. -lk.507-524.

211 Vollaard E.J., Clasener H.A.L., Janssen J.H.M. Escherichia coli panus mikroobide kolonisatsiooniresistentsusesse.//.!, Antimikroobne kemoteraapia. -1990.-26.-lk.411-418

Pange tähele, et ülaltoodud teadustekstid postitatakse ülevaatamiseks ja saadakse väitekirjade originaaltekstide (OCR) tunnustamise teel. Sellega seoses võivad need sisaldada tuvastusalgoritmide ebatäiuslikkusega seotud vigu.
Meie poolt edastatavate lõputööde ja kokkuvõtete PDF-failides selliseid vigu pole.

Bacillus subtilis või heinapulk(lat. Bacillus subtilis) on grampositiivsete eoseid moodustavate aeroobsete bakterite liik, perekonna Bacillus esindajad ( batsill). Bacillus subtilis- üks enim uuritud mikroorganisme.

Nimi heinapulk on tingitud asjaolust, et varem Bacillus subtilis isoleeritud eranditult heina keetmisest. Bacillus subtilis See on värvitu sirge varda välimusega, paksusega umbes 0,7 mikronit ja pikkusega 2–8 mikronit. Bacillus subtilis võib paljuneda jagunemise ja eoste teel. Mõnikord individuaalne Bacillus subtilis, pärast põiki jagamist jäävad keermes ühendatuks.

Bacillus subtilis(heinapulk), tänu toodetavatele antibiootikumidele ja keskkonda hapestavale võimele, on patogeensete ja oportunistlike mikroorganismide antagonist, nagu salmonella, proteus, stafülokokid, streptokokid, pärmseened; toota ensüüme, mis eemaldavad kudede mädanemisproduktid; sünteesida aminohappeid, vitamiine ja immunoaktiivseid tegureid. Mõned tüved Bacillus subtilis on hüaluroonhappe tootjad.

Bacillus subtilis võib põhjustada inimestel toidumürgitust (ICD-10 kood A05.4).

Bacillus subtilis - ravimite toimeaine

• ägedad sooleinfektsioonid lastel
• erineva iseloomuga soole düsbakterioos
• bakteriaalne vaginoos
• mädaste-septiliste tüsistuste ennetamine operatsioonijärgsel perioodil.

Venemaal registreeriti (registreeriti) ka ravimeid, milles põhiline toimeaine oli Bacillus subtilis:(tüvi 534), baktisporiin (tüvi N 3H).

Heinapulkadel põhinevad preparaadid Bacillus subtilis(Sporobacterin, Biosporin, Bactisporin) ja sarnane mikroorganism Bacillus cereus(Bactisubtil) on antimikroobse toimega ja seda saab kasutada bakteriaalsete infektsioonide korral, kui antibiootikumid pole saadaval, või peensoole selektiivseks saastest puhastamiseks bakteriaalse ülekasvu sündroomi korral. Nende bakterite eosed, muutudes jämesooles aktiivseteks vormideks, toodavad elu jooksul happelisi metaboliite – orgaanilisi happeid. Samal ajal nihkub käärsoole pH happelisele poolele ning patogeensete ja oportunistlike mikroorganismide kasv surutakse alla (Belousova E.A., Zlatkina A.R.).

Ravimi Enzymtal, millel on kasutusluba Ukraina territooriumil (hiljem tühistatud), koostis sisaldab seente amülaasi, seentest saadud amülolüütilist ensüümi. Aspergillus oryzae ja mittepatogeensed bakterikultuurid Bacillus subtilis(Kirik D.L., Poljakova I.F.).

Bacillus subtilis – probiootikum

BAA Bactistatin sisaldab rakuvaba kultuurivedeliku metaboliite Bacillus subtilis tüvi 3 (sh E-vitamiin), kandja tseoliit, fermenteeritud sojajahu hüdrolüsaat, paakumisvastane aine kaltsiumstearaat (või aerosiil), kapsli koostisosad (meditsiiniline želatiin, titaandioksiid, indigotiin). Baktistatiini soovitavad erinevad autorid, eelkõige kerge bakteriaalse ülekasvu sündroomi (Loginov V.A.) korrigeerimiseks, kuna täiendavaid vahendeid: soolepuudulikkuse sündroomiga (Levchenko S.A.), H. pylori- seotud gastriit (Gritšenko E.B.) ja teised.

Tüved Bacillus subtilis kasutatakse paljudes ravimites ja toodetes veterinaarmeditsiinis ja põllumajanduses. Eelkõige probiootikum "Subtilis" (vedel vorm "Subtilis-J" ja pulber "Subtilis-S"), mis sisaldab elusate bakterite eoste mikroobset massi. Bacillus subtilis ja Bacillus licheniformis kasutatakse loomakasvatuses, linnukasvatuses, kalakasvatuses bakteriaalse etioloogiaga seedetrakti haiguste, düsbakterioosi, kopsuinfektsioonide ennetamiseks ja raviks, tootlikkuse tõstmiseks, tervete järglaste saamiseks, patogeensete ja tinglikult patogeensete mikroorganismide kasvu pärssimiseks (