Sababu za kuganda kwa plasma. GPM.1.8.2.0003.15 Uamuzi wa shughuli za sababu za kuganda kwa damu

Sababu ya kuganda VIII ( Kipengele cha Kuganda VIII)

Kikundi cha kliniki na kifamasia

Dawa ya sababu VIII kuganda damu

athari ya pharmacological

dawa ya hemostatic. Inakuza mpito wa prothrombin hadi thrombin na uundaji wa kitambaa cha fibrin.

Pharmacokinetics

Kwa wagonjwa wenye hemophilia, A T 1/2 ni masaa 12. Shughuli ya kipengele cha kuchanganya damu VIII hupungua kwa 15% ndani ya masaa 12. Sababu ya kuchanganya damu VIII ni thermolabile na huharibiwa kwa kasi wakati joto linapoongezeka, ambayo inasababisha kupungua kwa T. 1/2.

Kipimo

Octanate inasimamiwa kwa njia ya mishipa baada ya dilution na maji kwa ajili ya sindano, ambayo ni pamoja na katika mfuko. Octanate dozi na muda tiba ya uingizwaji inategemea kiwango cha upungufu wa sababu ya ujazo wa damu VIII, eneo na muda wa kutokwa na damu, hali ya kliniki mgonjwa.

Kiwango cha dawa kinaonyeshwa katika Vitengo vya Kimataifa (IU) kwa mujibu wa viwango vinavyokubalika vya WHO vya sababu ya VIII ya kuganda kwa damu. Shughuli ya sababu ya ujazo wa damu VIII katika plasma inaonyeshwa ama kama asilimia (kuhusiana na yaliyomo kawaida ya sababu katika plasma ya binadamu), au katika IU (inayohusiana na Kiwango cha Kimataifa kwa sababu ya kuganda VIII).

1 IU ya sababu ya kuganda VIII ni sawa na 1 ml ya plasma ya kawaida ya binadamu. Hesabu ya kipimo kinachohitajika ni msingi wa matokeo yaliyopatikana kwa nguvu, kulingana na ambayo 1 IU / kg ya sababu ya ujazo wa damu VIII huongeza kiwango cha sababu ya plasma kwa 1.5-2% ya yaliyomo kawaida. Ili kuhesabu kipimo kinachohitajika kwa mgonjwa, kiwango cha awali cha shughuli ya sababu ya kuganda kwa damu VIII imedhamiriwa na inakadiriwa na ni kiasi gani shughuli hii inahitaji kuongezeka.

Kiwango kinachohitajika = uzito wa mwili (kg) × ongezeko la taka la sababu ya kuganda VIII (%) (IU/dl) × 0.5.

Kiasi na mzunguko wa matumizi ya dawa lazima iwe sawa na ufanisi wa kliniki katika kila kesi ya mtu binafsi.

Katika tukio la kutokwa na damu baadae, kiwango cha shughuli ya sababu ya mgando wa damu VIII haipaswi kupungua chini ya kiwango cha awali cha plasma (% ya maudhui ya kawaida) katika muda unaofaa. Jedwali lifuatalo linaweza kutumika kama mwongozo wa kuchagua kipimo cha sababu ya kuganda VIII kutokwa na damu mbalimbali na uingiliaji wa upasuaji.

Wagonjwa hujibu kwa utawala wa madawa ya kulevya mmoja mmoja, wakati kuna ngazi tofauti ahueni katika vivo, T 1/2 sababu ya kuganda VIII ina sifa ya kutofautiana. Kwa hiyo, wakati wa matibabu, ili kudhibiti kipimo na mzunguko wa utawala, kiwango chake kinapaswa kufuatiliwa. Shughuli ya sababu ya kuganda kwa damu VIII inapaswa kufuatiliwa wakati wa matibabu ya uingizwaji, haswa wakati wa uingiliaji mkubwa wa upasuaji.

Vipimo vilivyoonyeshwa kwenye jedwali ni dalili. Daktari huweka kipimo kinachohitajika na frequency ya matumizi ya dawa kibinafsi.

Kwa lengo la kuzuia muda mrefu kutokwa na damu katika hemophilia kali A Dawa hiyo imewekwa kwa kipimo cha 20-40 IU / kg ya uzito wa mwili kila siku 2-3. Katika hali nyingine, haswa kwa wagonjwa wachanga, inaweza kuwa muhimu kupunguza muda kati ya sindano au kuongeza kipimo.

Wagonjwa wengine wanaweza kuendeleza baada ya matibabu antibodies ya kuzuia kwa sababu ya mgando VIII, ambayo inaweza kuathiri ufanisi matibabu zaidi. Ikiwa, dhidi ya msingi wa tiba inayoendelea, ongezeko linalotarajiwa la shughuli ya sababu VIII haijatambuliwa au athari inayohitajika ya hemostatic haipo, mashauriano na mtaalamu anapendekezwa. kituo cha matibabu kwa kutumia mtihani wa Bethesda. Tiba ya kuingiza kuhimili kinga inaweza kutumika kuondoa kizuizi kwa sababu ya kuganda VIII. Msingi wake ni utawala wa kila siku wa sababu ya kuchanganya damu VIII katika mkusanyiko unaozidi uwezo wa kuzuia wa kizuizi (100-200 IU / kg / siku, kulingana na titer ya inhibitor). Sababu ya ujanibishaji wa damu VIII, inayofanya kama antijeni, husababisha kuongezeka kwa titer ya kizuizi hadi uvumilivu unakua, i.e. mpaka kupungua na kutoweka baadae kwa kizuizi. Tiba ni endelevu na huchukua wastani wa miezi 10 hadi 18. Tiba hiyo inapaswa kufanyika tu na wataalamu katika uwanja wa tiba ya antihemophilic.

Kufutwa kwa lyophilisate

1. Kimumunyisho (maji kwa sindano) na lyophilizate katika viala vilivyofungwa vinapendekezwa kuletwa joto la chumba. Ikiwa kabla ya joto kutengenezea hutumiwa umwagaji wa maji, utunzaji unapaswa kuchukuliwa ili kuhakikisha kwamba maji hayagusani na vizuizi vya mpira au vifuniko vya vial. Joto la umwagaji wa maji haipaswi kuzidi 37 ° C.

2. Ondoa kofia za kinga kutoka kwenye chupa na lyophilisate na maji, disinfect vizuizi vya mpira vya chupa zote mbili na moja ya kufuta disinfectant.

3. Toa ncha fupi ya sindano yenye ncha mbili kutoka kwa ufungaji wa plastiki, piga nayo kizuizi cha chupa ya maji na uifanye chini hadi ikome.

4. Geuza chupa ya maji na sindano, toa ncha ndefu ya sindano yenye ncha mbili, toa kizuizi cha viala na lyophilisate na ubonyeze chini hadi ikome. Utupu katika chupa ya lyophilisate utatoa ndani ya maji.

5. Tofauti chupa na maji pamoja na sindano kutoka chupa na lyophilisate. Dawa hiyo itafutwa haraka; kwa kufanya hivyo, chupa lazima itatikiswa kidogo. Suluhisho tu lisilo na rangi, la uwazi au la opalescent kidogo bila sediment inaruhusiwa kutumika.

Sheria za maandalizi na utawala wa suluhisho

Kama hatua ya tahadhari, kiwango cha moyo kinapaswa kufuatiliwa kabla na wakati wa utawala wa Octanate. Katika kesi ya kuongeza kasi ya kutamka ya mapigo, kupunguza au kuacha utawala wa madawa ya kulevya.

Baada ya kufuta mkusanyiko kulingana na maelekezo, ondoa mipako ya kinga kutoka kwenye sindano ya chujio na uiingiza kwenye chupa kwa kuzingatia. Ondoa kofia kutoka kwenye sindano ya chujio na ushikamishe sindano. Badili bakuli na sindano juu chini na chora suluhisho ndani ya sindano. Sindano zinapaswa kufanywa kwa mujibu wa sheria za asepsis na antisepsis. Tenganisha sindano ya chujio kutoka kwa sindano na uambatishe sindano ya kipepeo badala yake.

Suluhisho linapaswa kusimamiwa polepole kwa ndani kwa kiwango cha 2-3 ml / min.

Ikiwa zaidi ya chupa moja ya Octanate itatumiwa, sindano na sindano ya kipepeo inaweza kutumika tena.

Sindano ya chujio ni ya matumizi moja tu. Daima tumia sindano yenye chujio ili kuteka suluhisho lililoandaliwa kwenye sindano.

Suluhisho lolote lisilotumiwa la madawa ya kulevya linapaswa kutupwa kwa mujibu wa kanuni zilizopo.

Overdose

Licha ya ukweli kwamba dalili za overdose ya sababu VIII hazikuzingatiwa, inashauriwa usizidi kipimo kilichowekwa.

mwingiliano wa madawa ya kulevya

Data juu ya mwingiliano wa Octanate na wengine dawa kukosa.

Mimba na kunyonyesha

Matumizi ya dawa wakati wa uja uzito na kunyonyesha inawezekana katika hali ambapo faida inayotarajiwa ya matibabu kwa mama inazidi hatari inayowezekana kwa kijusi au mtoto mchanga.

Madhara

Athari za mzio: nadra - angioedema, hisia inayowaka katika eneo la sindano, baridi, kuwaka moto, urticaria (pamoja na ya jumla), maumivu ya kichwa, kupungua kwa shinikizo la damu, uchovu, kichefuchefu, kutapika, wasiwasi, tachycardia, hisia ya shinikizo. kifua, upungufu wa kupumua, homa, hisia ya kutetemeka. Mara chache sana (<1/10 000) эти симптомы могут прогрессировать до развития тяжелой анафилактической реакции, включая шок.

Wagonjwa walio na hemophilia A wanaweza kukuza kingamwili (vizuizi) kwa sababu ya kuganda kwa damu VIII (<1/1000). Наличие ингибиторов приводит к неудовлетворительному клиническому ответу на введение препарата. В таких случаях рекомендуется обращаться в специализированные гематологические/гемофильные центры. Неоходимо обследовать пациента на наличие антител с помощью соответствующих методов (тест Бетезда).

Sheria na masharti ya kuhifadhi

Dawa hiyo inapaswa kuhifadhiwa mahali palilindwa kutokana na mwanga na nje ya kufikia watoto kwa joto la 2 ° hadi 25 ° C; usigandishe. Maisha ya rafu - miaka 3.

maelekezo maalum

Wakati wa kutumia madawa ya kulevya, maendeleo ya athari za hypersensitivity inawezekana, kama vile matumizi ya madawa mengine ya sindano ya asili ya protini.

Mbali na sababu ya VIII ya kuganda kwa damu, dawa hiyo pia ina kiasi kidogo cha protini zingine za damu. Ishara za awali za athari za hypersensitivity ni mizinga, kifua kubana, kupumua kwa pumzi, shinikizo la chini la damu, na anaphylaxis (mtikio mkali wa mzio). Ikiwa dalili hizi hutokea, utawala wa madawa ya kulevya unapaswa kusimamishwa mara moja. Katika kesi ya maendeleo ya mshtuko, mbinu za kisasa za tiba ya kupambana na mshtuko zinapaswa kutumika.

Katika kesi ya bidhaa za dawa zinazotokana na damu ya binadamu au plasma, uwezekano wa maambukizi ya mawakala wa kuambukiza hauwezi kutengwa kabisa. Hii inatumika pia kwa magonjwa ya magonjwa yasiyojulikana. Hata hivyo, hatari ya maambukizi ya mawakala wa kuambukiza hupunguzwa kupitia hatua zifuatazo:

- uteuzi wa wafadhili kupitia mahojiano ya matibabu na mitihani, pamoja na uchunguzi wa mabwawa ya plasma kwa uwepo wa antijeni ya virusi vya hepatitis B (HBV), antibodies kwa VVU na virusi vya hepatitis C (HCV);

- uchambuzi wa mabwawa ya plasma kwa uwepo wa nyenzo za maumbile ya HCV;

- Taratibu za uanzishaji/uondoaji zilizojumuishwa katika mchakato wa utengenezaji ambao umethibitishwa kwa mfano wa virusi. Taratibu hizi zinafaa kwa VVU, virusi vya hepatitis A (HAV), HBV, na HCV. Taratibu za kuwezesha/uondoaji zinaweza kuwa na ufanisi mdogo dhidi ya virusi ambavyo havijafunikwa, mojawapo ni parvovirus B19. Parvovirus B19 inaweza kusababisha athari mbaya kwa wanawake wajawazito wa seronegative (maambukizi ya intrauterine) na kwa watu ambao hawana kinga au wana ongezeko la uzalishaji wa seli nyekundu za damu (kwa mfano, na anemia ya hemolytic).

Wakati wa kusimamia plasma-derived coagulation factor VIII concentrate, chanjo dhidi ya hepatitis A na hepatitis B inapendekezwa.

Katika tukio la athari za mzio, mgonjwa anapaswa kuchunguzwa kwa uwepo wa inhibitor. Wagonjwa walio na vizuizi vya sababu ya ujazo wa damu VIII wanaweza kuongeza hatari ya athari ya anaphylactic wakati wa matibabu ya baadaye na Octanate. Kwa hivyo, matumizi ya kwanza ya dawa iliyoainishwa kulingana na agizo la daktari anayehudhuria inapaswa kufanywa chini ya usimamizi wa matibabu katika hali ambayo inahakikisha utoaji wa huduma ya matibabu iliyohitimu katika kesi ya athari ya mzio.

Usitumie madawa mengine wakati wa utawala wa Octanate.

Kwa kuanzishwa kwa Octanate, ni vifaa tu vya sindano vilivyojumuishwa kwenye kifurushi vinapaswa kutumika. Juu ya uso wa ndani wa vifaa vingine vya sindano, adsorption ya sababu ya kuchanganya damu VIII inawezekana, ambayo inasababisha kupungua kwa ufanisi wa matibabu.

Maombi katika utoto

Maombi yanawezekana kulingana na regimen ya kipimo.

Taarifa za Utafiti

Maagizo maalum: Usifanye utafiti wakati wa ugonjwa mkali na wakati wa kuchukua dawa za anticoagulant (angalau siku 30 lazima zipite baada ya kufuta). Biomaterial kwa utafiti lazima ichukuliwe kwenye tumbo tupu. Angalau masaa 8 yanapaswa kupita kati ya mlo wa mwisho na sampuli ya damu.

SHERIA ZA UJUMLA ZA MAANDALIZI YA UTAFITI:

1. Kwa tafiti nyingi, inashauriwa kuchangia damu asubuhi, kati ya 8 asubuhi na 11 a.m., kwenye tumbo tupu (angalau masaa 8 yanapaswa kupita kati ya mlo wa mwisho na sampuli ya damu, unaweza kunywa maji kama kawaida), katika usiku wa masomo, chakula cha jioni nyepesi na kizuizi cha kula vyakula vya mafuta. Kwa vipimo vya maambukizi na uchunguzi wa dharura, inakubalika kutoa damu masaa 4-6 baada ya chakula cha mwisho.

2. TAZAMA! Sheria maalum za maandalizi kwa idadi ya vipimo: madhubuti kwenye tumbo tupu, baada ya masaa 12-14 ya kufunga, unapaswa kuchangia damu kwa gastrin-17, wasifu wa lipid (jumla ya cholesterol, cholesterol ya HDL, cholesterol ya LDL, cholesterol ya VLDL, triglycerides, lipoprotein. (a), apolipo-protini A1, apolipoprotein B); mtihani wa uvumilivu wa glucose unafanywa asubuhi juu ya tumbo tupu baada ya masaa 12-16 ya kufunga.

3. Katika usiku wa utafiti (ndani ya masaa 24), usijumuishe pombe, shughuli za kimwili kali, dawa (kama ilivyokubaliwa na daktari).

4. Masaa 1-2 kabla ya kutoa damu, kukataa sigara, usinywe juisi, chai, kahawa, unaweza kunywa maji yasiyo ya kaboni. Kuondoa mkazo wa kimwili (kukimbia, ngazi za kupanda haraka), msisimko wa kihisia. Inashauriwa kupumzika na kutuliza dakika 15 kabla ya kutoa damu.

5. Haupaswi kutoa damu kwa uchunguzi wa maabara mara baada ya taratibu za physiotherapy, uchunguzi wa vyombo, uchunguzi wa X-ray na ultrasound, massage na taratibu nyingine za matibabu.

6. Wakati wa kufuatilia vigezo vya maabara katika mienendo, inashauriwa kufanya masomo ya mara kwa mara chini ya hali sawa - katika maabara sawa, kutoa damu wakati huo huo wa siku, nk.

7. Damu kwa ajili ya utafiti inapaswa kutolewa kabla ya kuanza kwa kuchukua dawa au hakuna mapema zaidi ya siku 10-14 baada ya kukomesha. Ili kutathmini udhibiti wa ufanisi wa matibabu na dawa yoyote, ni muhimu kufanya utafiti siku 7-14 baada ya kipimo cha mwisho cha madawa ya kulevya.

Ikiwa unatumia dawa, hakikisha kumwambia daktari wako kuhusu hilo.

IDHINI YA JUMLA YA DAWA

Imetambulishwa kwa mara ya kwanza

Monograph hii ya pharmacopoeial inatumika kwa njia za kuamua shughuli za mambo ya mfumo wa mgando wa damu ya binadamu I, II, VII, VIII, IX, X, XI, von Willebrand factor, antithrombin III katika plasma na bidhaa za damu.

MASHARTI YA JUMLA

Uamuzi wa shughuli za mambo ya kuganda ni msingi wa mbinu 2:

1. Mbinu ya hatua moja. Marejesho ya mchakato wa kuganda kwa damu katika plasma isiyo na sababu baada ya kuongeza utayarishaji wa jambo hili (njia ya kuganda).
2. njia ya hatua mbili. Katika hatua ya kwanza, kwa kutumia cofactor maalum, shughuli ya proteolytic ya factor II au factor X imeamilishwa ili kuunda, kwa mtiririko huo, sababu iliyoamilishwa IIa au Xa. Katika hatua ya pili, kiasi cha sababu iliyoamilishwa imedhamiriwa na mmenyuko wa kupasuka kwake kwa peptidi maalum ya chromogenic (njia ya chromogenic).

Inawezekana kutekeleza njia ya chromojeni kwa njia 2: kulingana na kinetics ya malezi ya chromojeni chini ya hatua ya sababu iliyoamilishwa au kulingana na hatua ya mwisho ya mkusanyiko wa chromogen kwa muda fulani wa incubation.

Kwa kutekeleza njia zote mbili, inawezekana kutumia mirija ya majaribio ya plastiki, sahani, macho-mitambo, nusu-otomatiki ya mitambo na coagulomita za otomatiki kikamilifu.

Katika mbinu zote, shughuli huhesabiwa kwa kulinganisha shughuli ya sampuli ya jaribio na shughuli ya Kiwango cha Kimataifa cha NIBSC au kiwango cha kipengele cha pili cha kuganda kilichosawazishwa dhidi ya kiwango cha kimataifa katika vitengo vya kimataifa vya shughuli (IU). Usawa wa kiwango cha kimataifa katika IU umewekwa na WHO. Kwa IU 1 (100%) chukua shughuli ya sababu ya mgando katika 1.0 ml ya plasma safi ya kawaida iliyounganishwa kutoka kwa wafadhili 300. Shughuli inaweza kuonyeshwa katika IU/ml, IU/vial, IU/mg ya protini, na kama asilimia ya kiasi kilichotangazwa na mtengenezaji.

MAMBO

SababuI (fibrinogen)

Mbinu ya kuganda

Uamuzi wa shughuli za fibrinogen unafanywa na njia ya Clauss.

Kanuni ya mbinu

Wakati thrombin inapoongezwa kwa sampuli iliyo na fibrinogen, uundaji wa kitambaa cha fibrin huzingatiwa. Wakati wa kutumia thrombin na shughuli za juu (~ 10 IU / ml) na sampuli zilizo na mkusanyiko mdogo wa fibrinogen (chini ya 100 mg / dcl), uhusiano wa mstari unaweza kupatikana.

Kwa uamuzi wa fibrinogen, mifumo ya majaribio ya kibiashara hutumiwa, ambayo ni pamoja na reagent ya thrombin iliyo na kizuizi cha heparini na buffer ya dilution ya sampuli au reagent ya kibiashara ya thrombin.

Mkusanyiko wa Fibrinogen huonyeshwa kwa mg/dcl. Ili kuunda grafu ya calibration, sampuli ya kawaida ya fibrinogen au calibrator ya plasma iliyoidhinishwa kulingana na kiwango cha kimataifa hutumiwa. Sampuli ya kawaida au sampuli ya plasma-calibrator inafutwa katika maji yaliyotengenezwa kulingana na maelekezo. Tayarisha michanganyiko 5 ya mfululizo ya sampuli ya kawaida, kuanzia katika mkusanyiko wa ~100 mg/dcl, kwa kutumia sampuli ya bafa ya dilution pH = 7.3 ± 0.1. Uchambuzi unafanywa kwa joto la 37 ° C kulingana na maagizo ya kit. Kwa kila dilution, muda wa kuunda clot ni kuamua mara tatu. Kulingana na matokeo yaliyopatikana katika kuratibu za logarithmic, grafu ya calibration ya utegemezi wa wakati wa uundaji wa vipande kwenye mkusanyiko wa fibrinogen hujengwa.

Andaa dilutions 2 za sampuli ya mtihani chini ya 100 mg/dl. Kwa kila dilution, muda wa kuunda clot imeamua mara tatu. Kiasi cha fibrinogen katika kila dilution imedhamiriwa na grafu ya calibration.

SababuII(thrombin)

1. Mbinu ya kuganda

Uamuzi wa shughuli ya factor II unafanywa kwa kutumia plasma ya binadamu yenye upungufu wa factor II kama sehemu ndogo. Mchakato wa kuganda huamilishwa kwa kuongeza thromboplastin kwenye mchanganyiko wa kalsiamu.

Ili kupunguza kiwango na maandalizi, tumia NaCl-imidazole bafa pH 7.3 ± 0.1 pamoja na kuongeza 0.1% ya bovin au albin ya binadamu. Ili kujenga grafu ya calibration, mfululizo wa dilutions ya serial ya kiwango cha factor II huandaliwa katika safu ya shughuli kutoka 0.3 hadi 1 IU / ml. Dawa hiyo hupunguzwa kwa mkusanyiko wa chini ya 1 IU / ml. Chambua dilutions 3 za dawa. Kwa kila sampuli, kipimo cha wakati wa kuganda hufanywa angalau mara 2. Kipimo kinafanywa ndani ya saa 1 baada ya dilution ya dawa.

Uchambuzi huo unafanywa kwa joto la (37±0.5)°C. Ongeza 50 µl ya plasma yenye upungufu wa factor II na 50 µl ya dilution ya kawaida au maandalizi kwenye tube ya plastiki. Mchanganyiko huingizwa kwenye (37 ± 0.5) ° C kwa 120-240 s. Muda wa kuganda huamuliwa kutoka wakati wa kuongeza kwenye mchanganyiko wa 200 μl ya thromboplastin ya kalsiamu iliyotiwa moto hadi joto la (37±0.5)°C. Kulingana na mbinu ya kuanzisha uchambuzi, kiasi cha reagents kinaweza kutofautiana kwa uwiano unaofaa.

Grafu ya urekebishaji imejengwa katika viwianishi vya nusu-logarithmic. Kwenye mhimili wa logarithmic abscissa, maadili ya shughuli ya sababu II yamepangwa; kwenye mhimili wa kuratibu, wakati wa kuganda wa dilutions sambamba ya kiwango hupangwa. Shughuli ya Factor II kwa kila dilution ya sampuli ya jaribio hupatikana kutoka kwa curve ya urekebishaji. Shughuli ya FII ( LAKINI

k

1. Njia ya Chromogenic

Njia hiyo inategemea ulinganisho wa shughuli ya enzymatic ya sababu IIa, iliyoundwa baada ya uanzishaji maalum wa sababu II, kuhusiana na substrate maalum ya peptidi ya chromogenic na shughuli sawa ya sampuli ya kawaida (ya kimataifa au sawa).

Factor II imeamilishwa na kianzishaji cha ecarin kilichotengwa na sumu ya nyoka. Sababu iliyoamilishwa II (thrombin) kwa kuchagua hupasua substrate ya chromogenic (H-D-phenylalanine-L-pipecolyl-L-arginine-4-nitroanilide dihydrochloride, 4-toluenesulfonylglycyl-prolyl-L-arginine-4-nitroanilide-αhexylglycalyl-Dydrokloridi, H-nitroanilide-αhexyl-Dydrokloridi). - L-arginine-4-nitroanilide, D-cyclohexylglycyl-L-alanyl-L-arginine-4-nitroanilide diacetate) kuunda P-nitroanilini. Kinetics ya majibu huchunguzwa photometrically katika 405 nm. Thamani ya wiani wa macho ni sawia na shughuli ya kipengele II.

Uamuzi wa kipengele II kwa njia ya chromogenic unafanywa kwa kutumia vifaa maalum vya mtihani. Uchambuzi unafanywa kwa mujibu wa maagizo ya kit. Sampuli ya kawaida na maandalizi hupunguzwa kabla na upungufu wa plasma katika kipengele II hadi mkusanyiko wa ~ 1 IU / ml (dilution ya msingi). Kutoka kwa dilution kuu, dilutions 3 za sampuli ya kawaida na dilutions 3 za maandalizi na ufumbuzi wa Tris-saline buffer pH 8.4 huandaliwa. Kila dilution ya sampuli ya kawaida imedhamiriwa mara mbili, maadili yaliyopatikana hutumiwa kujenga grafu ya calibration. Sampuli za mtihani zimedhamiriwa mara tatu.

Vipimo vinafanywa kwa hali ya mwongozo kwa kutumia microplate na spectrophotometer kudumisha hali ya joto katika aina mbalimbali ya (37 ± 0.5) ° C au katika hali ya moja kwa moja kwa kutumia coagulometer.

Kwa majaribio ya mikono, 25 µl ya kila dilution ya maandalizi ya mtihani au sampuli ya kawaida huongezwa kwenye visima vya microplate. 125 µl dilution bafa, 25 µl ecarin huongezwa kwa kila kisima na kuangaziwa kwa (37±0.5)°C kwa dakika 2. Mwishoni mwa muda wa incubation, 25 µl ya kipengele IIa substrate chromogenic huongezwa kwa kila kisima.

LAKINI/min).

Ikiwa kipimo endelevu cha kunyonya hakiwezekani, tambua kunyonya kwa nm 405 kwa vipindi vya wakati vinavyofuatana (k.m. 40) na ufyonzaji wa njama dhidi ya wakati na ukokotoe ∆ LAKINILAKINI

1. Mtihani wa kutokuwepo kwa thrombin

Kwa kupima, suluhisho la maandalizi yaliyorejeshwa kwa mujibu wa maagizo yanatayarishwa. Ikiwa kuna heparini katika maandalizi, ni neutralized kwa kuongeza protamine sulfate kwa kiwango cha 10 μg ya protamine sulfate kwa 1 IU ya heparini.

Maandalizi ya suluhisho la fibrinogen

0.3 g ya fibrinogen hupasuka katika 100 ml, imechanganywa na kuingizwa kwa dakika 15-20 kwa joto la kawaida.

Maisha ya rafu ya suluhisho ni mwezi 1 kwa joto la 2 hadi 8 ° C.

Maandalizi ya suluhisho la thrombin

lyophilisate hupasuka kwa mujibu wa maelekezo ya mtengenezaji, huwekwa kwa dakika 15-20 kwa joto la kawaida na diluted na 0.9% ya ufumbuzi wa kloridi ya sodiamu kwa maudhui ya thrombin ya 1 IU / ml.

Maisha ya rafu ya suluhisho ni miezi 6 kwa joto la minus 20 ° C. Suluhisho baada ya kufuta sio chini ya kufungia tena.

Maendeleo ya ufafanuzi

Kiasi sawa cha madawa ya kulevya na ufumbuzi wa fibrinogen huongezwa kwenye zilizopo 2 za mtihani. Kiasi sawa cha suluhisho la thrombin na suluhisho la fibrinogen huongezwa kwenye bomba la tatu (sampuli ya kudhibiti), yaliyomo kwenye zilizopo huchanganywa na harakati za mzunguko. Bomba moja yenye madawa ya kulevya yaliyotengenezwa huingizwa katika umwagaji wa maji kwa joto la 37 ° C kwa saa 6, tube nyingine yenye madawa ya kulevya iliyorekebishwa iko kwenye joto la kawaida kwa saa 24. Uwepo au kutokuwepo kwa kuchanganya (clot) hujulikana.

Sampuli ya udhibiti inaingizwa katika umwagaji wa maji saa 37 ° C na kumbuka wakati wa kuunda damu.

Kigezo cha kukubalika kwa matokeo ni kuganda katika sampuli ya udhibiti baada ya 30 s.

SababuVII

1. Mbinu ya kuganda

Uamuzi wa shughuli ya factor VII unafanywa kwa kutumia plasma ya binadamu yenye upungufu wa factor VII. Mchakato wa kuganda huamilishwa kwa kuongeza thromboplastin kwenye mchanganyiko wa kalsiamu.

Ili kupunguza kiwango na maandalizi, NaCl-imidazole bafa pH 7.3 hutumiwa pamoja na kuongeza 0.1% ya albin ya binadamu au bovin. Ili kuunda curve ya calibration, mfululizo wa dilutions ya serial ya kiwango cha sampuli ya factor VII imeandaliwa katika safu kutoka 0.3 hadi 1 IU / ml. Dawa hiyo hupunguzwa kwa mkusanyiko wa chini ya 1 IU / ml. Chambua dilutions 3 za dawa. Kwa kila sampuli, kipimo cha wakati wa kuganda hufanywa angalau mara 2. Kipimo kinafanywa mara baada ya dilution ya madawa ya kulevya.

Uchambuzi huo unafanywa kwa joto la (37±0.5)°C. 50 µl ya plazima yenye upungufu wa factor VII na 50 µl ya dilution ya kiwango au dawa huongezwa kwenye bomba la plastiki. Mchanganyiko huingizwa kwenye (37±0.5) ° C kwa 120-240 s. Muda wa kuganda huamuliwa kutoka wakati wa kuongeza kwenye mchanganyiko wa 200 μl ya thromboplastin ya kalsiamu iliyotiwa moto hadi joto la (37±0.5)°C. Kulingana na mbinu ya kuanzisha uchambuzi, kiasi cha reagents kinaweza kutofautiana kwa uwiano unaofaa.

Grafu ya urekebishaji imejengwa katika viwianishi vya nusu-logarithmic. Kwenye mhimili wa logarithmic abscissa, maadili ya shughuli ya sababu VII yamepangwa, kando ya mhimili wa kuratibu, wakati wa kuganda kwa dilutions zinazolingana za kiwango. Shughuli ya kipengele VII kwa kila dilution ya sampuli ya mtihani hupatikana kutoka kwa curve ya urekebishaji. Shughuli ya FVII ( LAKINI) katika sampuli ya jaribio huhesabiwa na formula:

- shughuli ya dilution sambamba ya sampuli ya mtihani, kupatikana kutoka grafu calibration;

k- dilution ya sampuli ya mtihani.

1. Njia ya Chromogenic

Katika uwepo wa sababu ya tishu (TF) na Ca 2+ ions, sababu VII imeamilishwa (malezi ya FVIIa). Mchanganyiko wa FVIIa, TF, Ca 2+ na phospholipid huwasha kipengele cha X. Kipengele kilichoamilishwa X (FXa) kwa kuchagua hupasua substrate ya chromogenic FXa-1 methoxycarbonyl-D-cyclohexylalanyl-glycyl-L-arginine- n-nitroanilide acetate kuunda P-nitroanilini. Utafiti wa sampuli unafanywa na njia ya photometric katika 405 nm. Thamani ya kunyonya (au kuongezeka kwa kunyonya) inalingana na kiasi cha kipengele VII.

Uamuzi wa kipengele VII kwa njia ya chromogenic unafanywa kwa kutumia vifaa maalum vya mtihani. Uchambuzi unafanywa kwa mujibu wa maagizo ya kit. Sampuli ya kawaida na maandalizi hupunguzwa kabla na upungufu wa plasma katika kipengele VII hadi mkusanyiko wa ~ 1 IU / ml (dilution ya msingi). Kutoka kwa dilution kuu, dilutions 3 za sampuli ya kawaida na dilutions 3 za maandalizi na tris-saline buffer pH 7.3 - 8.0 hutayarishwa kwa kutumia ufumbuzi wa buffer pamoja na 0.1% ya albin ya binadamu au bovin. Kila dilution ya sampuli ya kawaida imedhamiriwa mara mbili, maadili yaliyopatikana hutumiwa kujenga grafu ya calibration. Sampuli za mtihani zimedhamiriwa mara tatu.

Dilutions ya dawa ya majaribio au sampuli ya kawaida huongezwa kwenye visima vya microplate, mchanganyiko wa kalsiamu-thromboplastin, suluhisho la sababu X huongezwa na kuingizwa kwa joto la (37 ± 0.5) ° C kwa dakika 2 hadi 5, baada ya hapo sababu hiyo. Suluhisho la substrate ya Xa chromogenic huongezwa.

Pima badiliko la msongamano wa macho kwa urefu wa mawimbi ya 405 nm, ama katika hali ya kinetiki, au ukatishe mwitikio wa hidrolisisi baada ya dakika 3-15 kwa kuongeza mmumunyo wa 20% (v/v) wa asidi ya barafu na kupima msongamano wa macho.

SababuVIII

1. Mbinu ya kuganda

Uamuzi wa shughuli ya kipengele VIII unafanywa kwa kutumia plasma ya binadamu upungufu katika sababu VIII. Chanzo cha phospholipids muhimu kwa kuganda ni kitendanishi cha APTT.

Ili kuondokana na kiwango na maandalizi, suluhisho la bafa la NaCl-imidazole pH (7.3 ± 0.1) hutumiwa, pamoja na kuongeza ufumbuzi wa 0.1% wa albamu ya binadamu au bovin. Ili kujenga grafu ya calibration, mfululizo wa dilutions ya serial ya kiwango huandaliwa, kuanzia mkusanyiko wa 2 IU / ml. Dawa hiyo hupunguzwa kwa mkusanyiko wa ~ 0.5 - 2 IU / ml. Chambua dilutions 3 za dawa. Kwa kila sampuli, kipimo cha wakati wa kuganda hufanywa angalau mara 2. Kipimo kinafanywa ndani ya saa 1 baada ya dilution ya dawa.

Uchambuzi huo unafanywa kwa joto la (37±0.5)°C. 100 µl ya plazima yenye upungufu wa kipengele VIII, 100 µl ya dilution ya kiwango au dawa, na 100 µl ya kitendanishi cha APTT huongezwa kwenye mirija ya plastiki na kuangaziwa kwa joto la (37±0.5)°C kwa dakika 2. Muda wa kuganda huwekwa tangu wakati wa kuongeza mchanganyiko wa 100 µl ya 0.025 M ya kloridi ya kalsiamu iliyotiwa moto hadi joto la (37 ± 0.5) ° C. Kulingana na mbinu ya kuanzisha uchambuzi, kiasi cha reagents kinaweza kutofautiana kwa uwiano unaofaa.

Grafu ya urekebishaji imejengwa katika viwianishi vya nusu-logarithmic. Maadili ya shughuli ya sababu ya VIII yamepangwa kando ya mhimili wa logarithmic abscissa, na wakati wa kufungwa kwa dilutions sambamba ya kiwango hupangwa pamoja na mhimili wa kuratibu. Shughuli ya kipengele VIII kwa kila dilution ya sampuli ya jaribio hupatikana kutoka kwa curve ya urekebishaji. Shughuli ya FVIII ( LAKINI) katika sampuli ya jaribio huhesabiwa na formula:

- shughuli ya dilution sambamba ya dawa ya utafiti, kupatikana kutoka grafu calibration;

k- dilution ya sampuli ya mtihani.

1. Njia ya Chromogenic

Uamuzi wa kiasi cha kipengele VIII unafanywa kwa kutumia seti ya vitendanishi, ambayo kipengele VIII ni cofactor kwa factor IXa wakati kipengele X kinapoamilishwa ili kuunda Xa, ambayo hupasua substrate ya chromogenic.

Kanuni ya mbinu

Katika uwepo wa Ca 2+ ioni na phospholipids, sababu X imeamilishwa kuwa Xa kwa sababu IXa. Kwa ziada ya kipengele X na kiasi bora cha Ca 2+ , phospholipids, na factor IXa, kiwango cha kuwezesha kipengele cha X kinategemea mstari na kiasi cha factor VIII. Factor Xa hidrolisisi substrate ya chromogenic S-2765 (N-a-Z-DArg-Gly-Arg-pNA) ili kutoa kikundi cha chromojeni cha pNA, rangi ambayo imerekodiwa spectrophotometrically katika 405 nm. Kiasi cha kipengele cha Xa kilichoundwa, na hivyo basi ukubwa wa upakaji madoa, ni sawia na shughuli ya kipengele VIII katika sampuli.

Seti ya kitendanishi cha shughuli ya factor VIII ni thabiti kwa muda uliowekwa na mtengenezaji kwa joto la uhifadhi la 2 hadi 8 ° C.

Seti ya reagent ina:

1. 7.7 mg ya chromojeni S-2765 iliyoongezewa na kizuizi cha synthetic thrombin I-2581. Reagent inafanywa upya katika 6.0 ml ya maji ya kuzaa kwa sindano. Suluhisho lililorekebishwa ni thabiti kwa mwezi 1 kwa 2 hadi 8 ° C. Kabla ya matumizi, joto hadi 37 ° C.
2. Reagent ya sababu za ng'ombe: 0.3 U factor IX, 2.7 IU factor X na 1 NIH U thrombin lyophilized mbele ya 40 mmol CaCl 2 na 0.2 mmol phospholipids. Reagent inafanywa upya katika 2.0 ml ya maji ya kuzaa kwa sindano. Suluhisho lililofanywa upya ni imara kwa saa 12 kwa 2 hadi 8 ° C, wiki 2 kwa minus 30 ° C na mwezi 1 kwa minus 80 ° C. Usihifadhi kwa minus 20 ° C. Kabla ya matumizi, joto hadi 37 kuhusu S.
3. Zingatia ×10 Tris bafa. Imetulia kwa mwezi 1 kwa 2 hadi 8°C. Kabla ya matumizi, punguza na maji yenye kuzaa kwa sindano kwa uwiano wa 1:10.

Vitendanishi vya ziada:

1. Kiwango cha Kimataifa - suluhu ya umakini wa sababu ya VIII ya kuganda kwa binadamu (NIBSC, Eur.Pharm.Ref.Std. BRP H 0920000) au plazima iliyosawazishwa kwa kiwango cha kimataifa cha kipengele VIII.
2. Dhibiti plasma ya kawaida au ya patholojia iliyosawazishwa kwa kiwango cha kimataifa cha sababu VIII.
3. Suluhisho la kloridi ya sodiamu 0.9%.
4. Asilimia 20 ya asidi asetiki au 2% ya asidi ya citric (inatumika katika Mbinu ya Mwisho ya Hifadhi ya Chromogen).
5. Maabara ya maji imefanywa deionized

Vifaa:

1. zilizopo za mtihani wa plastiki;
2. microplates;
3. Thermostat 37 o C;
4. Spectrophotometer 405 nm au msomaji wa microplate 405 nm;
5. Pipettes za calibrated;
6. Vortex;
7. Stopwatch.

Sampuli ya mtihani hupunguzwa kwa shughuli inayotarajiwa ya 1 IU / ml kabla ya uamuzi.

Uamuzi unaweza kufanywa katika hali ya kinetic na mwisho, katika zilizopo za mtihani (macromethod) na katika microplates (micromethod).

Urekebishaji

Wakati wa kila uamuzi, curve ya calibration inajengwa. Dilution ya sampuli ya kawaida imeandaliwa katika hatua 2: dilution ya awali kwa shughuli ya 1-2 IU / ml na dilutions ya mwisho ili kujenga utegemezi wa calibration katika aina mbalimbali za 0-2 IU / ml. Baada ya dilution, uamuzi unapaswa kufanywa ndani ya dakika 30.

Maendeleo ya ufafanuzi

Uamuzi katika zilizopo za mtihani

200 µl ya kiwango kilichopunguzwa, udhibiti au sampuli ya mtihani huongezwa kwenye mirija ya majaribio, iliyoingizwa kwa dakika 3-4 kwa joto la 37 ° C, 50 μl ya reajenti ya kabla ya joto huongezwa, incubated kwa dakika 2-4. joto la 37 ° C na 50 µl huongezwa suluhisho la chromojeni.

Uamuzi katika microplates

Ongeza 50 µl ya kiwango kilichochanganywa, udhibiti au sampuli ya majaribio kwenye visima vya microplate, incute kwa dakika 3-4 kwa 37 ° C, ongeza 50 µl ya reagent ya awali ya joto, incute kwa dakika 2-4 kwa joto la 37 ° C na kuongeza 50 µl ya ufumbuzi wa kromojeni.

Njia ya kinetic ya uamuzi

Baada ya kuongeza ufumbuzi wa chromogen kwa dakika 2-10, mabadiliko katika wiani wa macho ya suluhisho hupimwa kwa 405 nm.

Ufafanuzi kwa ncha

Baada ya kuongeza suluhisho la chromojeni, mchanganyiko unaendelea kuingizwa kwa joto la 37 ° C kwa dakika 2-10, baada ya hapo 50 μl ya 20% ya asetiki au 2% ya asidi ya citric huongezwa ili kuacha majibu. Pima msongamano wa macho wa suluhisho dhidi ya bafa kwa 405 nm.

Mahesabu

Panga mabadiliko katika wiani wa macho kwa dakika (kwa njia ya kinetic) au wiani wa macho (kuamua hatua ya mwisho) ya dilutions ya ufumbuzi wa kawaida juu ya mkusanyiko wa sababu VIII ndani yao. Shughuli katika sampuli ya jaribio imedhamiriwa kutoka kwa curve ya urekebishaji, kwa kuzingatia dilution ya awali ya sampuli.

SababuIX

1. Mbinu ya kuganda

Uamuzi wa shughuli ya kipengele IX unafanywa kwa kutumia plasma ya binadamu upungufu katika kipengele IX. Chanzo cha phospholipids muhimu kwa kuganda ni kitendanishi cha APTT.

Ili kupunguza kiwango na maandalizi, NaCl-imidazole buffer pH 7.3 hutumiwa pamoja na kuongeza ufumbuzi wa 0.1% wa bovin au albumin ya binadamu. Ili kujenga grafu ya calibration, mfululizo wa dilutions ya serial ya kiwango huandaliwa katika safu kutoka 0.3 hadi 1 IU / ml. Dawa hiyo hupunguzwa kwa mkusanyiko wa chini ya 1 IU / ml. Chambua dilutions 3 za dawa. Kwa kila sampuli, kipimo cha wakati wa kuganda hufanywa angalau mara 2. Kipimo kinafanywa ndani ya saa 1 baada ya dilution ya dawa.

Uchambuzi huo unafanywa kwa joto la (37±0.5)°C. 100 µl ya plasma yenye upungufu wa factor IX, 100 µl ya dilution ya kawaida au ya dawa, na 100 µl ya kitendanishi cha APTT huongezwa kwenye mirija ya plastiki na kuamilishwa kwa (37 ± 0.5) °C kwa dakika 2. Muda wa kuganda huwekwa kuanzia wakati wa kuongeza 100 µl ya 0.025 M mmumunyo wa kloridi ya kalsiamu iliyotiwa moto hadi joto la (37 ± 0.5) °C kwenye mchanganyiko. Kulingana na mbinu ya kuanzisha uchambuzi, kiasi cha reagents kinaweza kutofautiana kwa uwiano unaofaa.

Grafu ya urekebishaji imejengwa katika viwianishi vya nusu-logarithmic. Kwenye mhimili wa abscissa wa logarithmic, maadili ya shughuli ya sababu IX yamepangwa; kwenye mhimili wa kuratibu, wakati wa kuganda wa dilutions sambamba ya kiwango hupangwa. Kipengele IX cha shughuli kwa kila dilution ya sampuli ya jaribio hupatikana kutoka kwa curve ya urekebishaji. REKEBISHA shughuli ( LAKINI) katika sampuli ya jaribio huhesabiwa na formula:

- shughuli ya dilution sambamba ya sampuli ya mtihani, kupatikana kutoka grafu calibration;

k- dilution ya sampuli ya mtihani.

SababuX

1. Mbinu ya kuganda

Uamuzi wa shughuli ya kipengele X unafanywa kwa kutumia plasma ya binadamu yenye upungufu wa sababu X. Mchakato wa kuganda umeanzishwa kwa kuongeza thromboplastin kwenye mchanganyiko wa kalsiamu.

Ili kupunguza kiwango na maandalizi, tumia suluhisho la bafa la NaCl-imidazole pH 7.3 pamoja na kuongeza 0.1% ya albin ya binadamu au bovin. Ili kujenga grafu ya urekebishaji, tayarisha mfululizo wa dilutions za serial za kiwango cha factor X katika masafa kutoka 0.3 hadi 1 IU/ml. Dawa hiyo hupunguzwa kwa mkusanyiko wa chini ya 1 IU / ml. Chambua dilutions 3 za dawa. Kwa kila sampuli, kipimo cha wakati wa kuganda hufanywa angalau mara 2. Kipimo kinafanywa mara baada ya dilution ya madawa ya kulevya.

Uchambuzi huo unafanywa kwa joto la (37±0.5)°C. Ongeza 50 µl ya plasma isiyo na Factor X na 50 µl ya dilution ya kawaida au maandalizi kwenye bomba la plastiki. Mchanganyiko huingizwa kwenye (37±0.5) ° C kwa 120-240 s. Muda wa kuganda huamuliwa kutoka wakati wa kuongeza kwenye mchanganyiko wa 200 μl ya thromboplastin ya kalsiamu iliyotiwa moto hadi joto la (37±0.5)°C. Kulingana na mbinu ya kuanzisha uchambuzi, kiasi cha reagents kinaweza kutofautiana kwa uwiano unaofaa.

Grafu ya urekebishaji imejengwa katika viwianishi vya nusu-logarithmic. Mhimili wa logarithmic abscissa hupanga maadili ya shughuli ya sababu X , kando ya mhimili wa y, wakati wa kuganda kwa dilutions sambamba za kiwango. Shughuli ya Factor X kwa kila dilution ya sampuli ya jaribio hupatikana kutoka kwa curve ya urekebishaji. Shughuli ya Factor X ( LAKINI) katika sampuli ya jaribio huhesabiwa na formula:

- shughuli ya dilution sambamba ya sampuli ya mtihani, kupatikana kutoka grafu calibration;

k- dilution ya sampuli ya mtihani.

1. Njia ya Chromogenic

Factor X imewashwa na kiwezesha FX kinachotokana na sumu ya nyoka. Kipengele kilichoamilishwa X (FXa) kwa kuchagua hupasua substrate ya chromogenic FXa-1 N-α-benzyloxycarbonyl-D-arginyl-L-glycyl-L-arginine-4-nitroanilide dihydrochloride, N-benzoyl-L-isoleucyl-L-glutamyl-glycyl - L-arginine-4-nitroanilide hidrokloridi, methanesulfonyl-D-leucyl-glycyl-L-arginine-4-nitroanilide, methoxycarbonyl-D-cyclohexylalanyl-glycyl-L-arginine-4-nitroanilide acetate kuunda P-nitroanilini. Sampuli zinachunguzwa kwa picha kwa 405 nm. Kiasi cha sababu X ni sawa na ongezeko la wiani wa macho ya suluhisho.

Uamuzi wa sababu X kwa njia ya chromogenic unafanywa kwa kutumia vifaa maalum vya mtihani. Uchambuzi unafanywa kwa mujibu wa maagizo ya kit. Sampuli ya kawaida na utayarishaji hupunguzwa mapema na plasma yenye upungufu wa sababu X hadi mkusanyiko wa ~ 1 IU/ml (dilution ya msingi). Kutoka kwa dilution kuu, dilutions 3 za sampuli ya kawaida (kulingana na maelekezo) na dilutions 3 za madawa ya kulevya huandaliwa kwa kutumia suluhisho la buffer. Kila dilution ya sampuli ya kawaida imedhamiriwa mara mbili, maadili yaliyopatikana hutumiwa kujenga grafu ya calibration. Sampuli za mtihani zimedhamiriwa mara tatu.

Vipimo vinafanywa kwa mikono kwa kutumia zilizopo za plastiki au microplates kwenye joto la (37 ± 0.5) ° C au moja kwa moja kwa kutumia coagulometer.

Kwa ajili ya majaribio katika hali ya mwongozo, 12.5 µl ya kila dilution ya dawa ya majaribio au sampuli ya kawaida huongezwa kwenye visima vya microplate, 25 µl ya activator ya factor X kutoka kwa sumu ya nyoka wa Russell huongezwa kwa kila kisima na kuingizwa kwenye joto. ya (37 ± 0.5) ° C kwa 90 s, baada ya hapo 150 µl ya dilution ya kazi ya kipengele X substrate chromogenic huongezwa kwa kila kisima.

Amua kiwango cha mabadiliko katika kunyonya kwa urefu wa wimbi la 405 nm mfululizo kwa dakika 3 na ukokote kiwango cha wastani cha mabadiliko katika kunyonya (∆ LAKINI/min) au pima ufyonzaji kwa urefu wa wimbi la nm 405 kwa vipindi vya wakati vinavyofuatana (kwa mfano, baada ya sekunde 30) na panga ufyonzaji dhidi ya wakati na ukokotoe ∆ LAKINI/min kama pembe ya mwelekeo wa mstari ulionyooka. Kutoka kwa maadili∆ LAKINI/ min ya kila dilution ya mtu binafsi ya sampuli ya kawaida na dawa ya mtihani, shughuli ya dawa ya mtihani huhesabiwa.

Sababu ya Willebrand

Uamuzi wa shughuli ya sababu ya von Willebrand unafanywa na njia ya agglutination au immunoassay ya enzyme.

Shughuli ya kipengele cha von Willebrand imedhamiriwa kwa kulinganisha shughuli zake na shughuli ya sampuli ya kawaida.

Njia ya Agglutination

Njia hiyo inategemea uamuzi wa shughuli ya coenzyme ya sababu ya von Willebrand wakati wa kuunganishwa kwa kusimamishwa kwa platelet mbele ya ristocetin A.

Jaribio linaweza kufanywa kwa kiasi kwa kutumia vifaa vya kiotomatiki au nusu-quantitative kwa tathmini ya kuona ya agglutination katika mfululizo wa dilutions.

Njia ya nusu-idadi

Dilutions za serial katika suluji ya kloridi ya sodiamu 0.9% na 1-5% ya ufumbuzi wa albin ya binadamu hutayarishwa kutoka kwa sampuli ya kawaida na ufumbuzi wa upya wa madawa ya kulevya kwa maudhui yaliyotarajiwa ya von Willebrand factor ya 0.5, 1.0 na 2.0 IU/ml. 0.05 ml ya kila dilution ya sampuli ya kawaida na maandalizi ya mtihani hutumiwa kwenye slaidi ya kioo, 0.1 ml ya kusimamishwa kwa sahani na ristocetin huongezwa na kuchanganywa kwa dakika 1. Suluhisho la dilution hutumiwa kama udhibiti hasi. Baada ya dakika 1 incubation kwenye joto la kawaida, agglutination ya platelet hupimwa kwa macho. Upeo wa dilution ambayo platelet agglutination hutokea ni titer ya shughuli ya ristocetin coenzyme ya sampuli.

njia ya kiasi

Tayarisha angalau mfululizo 2 wa miyeyusho ya mfululizo ya sampuli za marejeleo na majaribio yenye bafa ya dilution hadi maudhui yanayotarajiwa ya kipengele cha von Willebrand cha 0.5, 1.0 na 2.0 IU/ml.

Uamuzi unafanywa kwa mujibu wa maagizo ya mtengenezaji wa vifaa vya automatiska. Pokea maadili ya utegemezi wa mabadiliko katika ngozi ya macho (kiwango cha uchafu wa suluhisho) kutoka kwa shughuli ya sababu ya von Willebrand.

Uamuzi wa maudhui ya kipengele cha von Willebrand katika maandalizi ya mtihani unafanywa kwa kutumia coefficients ya equation ya mstari wa utegemezi wa wiani wa macho wa suluhisho kwenye maudhui ya kipengele cha von Willebrand katika sampuli ya kawaida.

Mbinu ya ELISA

Njia hiyo inategemea uamuzi wa shughuli ya kuunganisha collagen ya kipengele cha von Willebrand. Baada ya kuunganishwa mahususi kwa kipengele cha von Willebrand kwa nyuzinyuzi za kolajeni na kuunganishwa kwa kingamwili za polyclonal zilizounganishwa na enzyme kwa kipengele cha von Willebrand, kromophore huundwa baada ya kuongezwa kwa substrate ya kromojeni, ambayo inaweza kuhesabiwa kwa njia ya spectrophotometric. Kuna uhusiano wa mstari kati ya kuunganisha kolajeni kwa kipengele cha von Willebrand na msongamano wa macho.

Uamuzi huo unafanywa kwa kutumia mifumo ya majaribio iliyoidhinishwa kutumika katika mazoezi ya afya nchini Urusi kulingana na maagizo ya matumizi.

Kwa majaribio, tayarisha angalau mfululizo 3 mfululizo wa miyeyusho ya sampuli za kawaida na za majaribio kwa kutumia bafa ya dilution hadi maudhui yanayotarajiwa ya kipengele cha von Willebrand cha 1.0 IU/ml. Ifuatayo, vipimo vinafanywa kwa mujibu wa maagizo ya mtengenezaji kwa mfumo wa mtihani unaotumiwa.

Vipengele vilivyoamilishwa vya kuganda damu

Uamuzi unafanywa na njia ya coagulometric.

Kwa kupima, ufumbuzi wa upya wa madawa ya kulevya umeandaliwa. Ikiwa kuna heparini katika maandalizi, ni neutralized kwa kuongeza protamine sulfate kwa kiwango cha 10 μg ya protamine sulfate kwa 1 IU ya heparini. Tayarisha dilutions ya dawa 1:10 na 1:100 kwa kutumia Tris buffer ufumbuzi pH 7.5.

0.1 ml ya plasma ya kawaida ya binadamu na 0.1 ml ya suluhisho la phospholipid huongezwa kwa zilizopo 3 za mtihani, zimewekwa kwenye umwagaji wa maji na joto la (37 ± 0.5) ° C kwa 60 s, baada ya hapo 0.1 ml huongezwa kwenye tube ya kwanza ya mtihani. Suluhisho la Tris buffer (sampuli ya kudhibiti), katika pili - 0.1 ml ya dawa ya mtihani kwa dilution ya 1:10, katika tube ya tatu ya mtihani - 0.1 ml ya dawa ya mtihani kwa dilution ya 1:100. Zaidi ya hayo, 0.1 ml ya suluhisho la kloridi ya kalsiamu ya 3.7 g / l yenye joto hadi joto la 37 ° C huongezwa mara moja kwa yaliyomo ya kila tube ya mtihani. Wakati wa kuunda damu kutoka wakati wa kuongeza suluhisho la kloridi ya kalsiamu hujulikana.

Kigezo cha kukubalika kwa matokeo ni wakati wa kuganda katika sampuli ya udhibiti katika safu kutoka 200 hadi 350 s.

Shughuli maalum maalum

Shughuli maalum ya mambo ya kuganda huhesabiwa na formula:

Uamuzi wa shughuli za antithrombinIII

Njia ya Chromogenic

Njia ya kuamua shughuli ya ATIII inategemea uwezo wake wa kugeuza thrombin mbele ya heparini. Kiasi cha ziada cha heparini na thrombin huongezwa kwenye sampuli iliyo na ATIII. Mchanganyiko unaosababishwa wa ATIII-heparin hupunguza kiasi cha thrombin sawia na kiasi cha ATIII. Thrombin iliyobaki kwa kuchagua hupasua substrate ya kromogenic kuunda P-nitroaniline, ngozi ambayo imedhamiriwa saa 405 nm. Kwa hivyo, kiasi cha ATIII ni kinyume chake kwa unyonyaji wa bure P-nitroanilini katika sampuli.

Uamuzi wa shughuli za ATIII unafanywa kwa kutumia mifumo ya majaribio ya kibiashara. Ili kuunda grafu ya urekebishaji, tumia sampuli ya kawaida ya ATIII au kirekebisha plasma kilichoidhinishwa kulingana na kiwango cha kimataifa. Sampuli ya kawaida au calibrator ya plasma hupasuka katika maji yaliyotengenezwa kulingana na maelekezo katika maelekezo. Utegemezi wa wiani wa macho kwenye shughuli ya ATIII ni mstari katika aina mbalimbali za shughuli za ATIII kutoka 0.1 hadi 1.0 IU / ml. Kwa kutumia bafa ya heparini, tayarisha dilutions 4 za plasma ya kawaida au calibrator yenye shughuli ya ATIII ya 0.1 hadi 1.0 IU/mL. Uchambuzi unafanywa kwa joto la 37 ° C kulingana na mpango uliotolewa katika maagizo ya kit. Kwa kila dilution, thamani ya wiani wa macho katika 405 nm imedhamiriwa mara tatu na njama ya calibration ya kunyonya dhidi ya shughuli ya ATIII imepangwa katika kuratibu za mstari.

Tayarisha dilutions 2 za sampuli ya jaribio na shughuli inayokadiriwa ya ATIII ya chini ya 1.0 IU/ml. Uamuzi wa shughuli za ATIII katika sampuli za mtihani hufanyika kwa joto la 37 ° C kulingana na maagizo katika maagizo ya kit. Shughuli ya ATIII katika dilutions iliyojaribiwa hupatikana kutoka kwa curve ya calibration. Shughuli ya ATIII katika sampuli ya mtihani inafafanuliwa kama:

A x- Shughuli ya ATIII katika dilution inayofaa;

k- dilution ya sampuli.

Kiasi cha heparini

1. Mbinu ya kuganda

Njia hiyo inategemea uwezo wa heparini kuongeza muda wa kufungwa kwa plasma ya kawaida kutokana na kuzuia mambo kadhaa.

Kwa uchambuzi, plasma ya kawaida ya binadamu, sampuli ya kawaida ya heparini, reagent ya APTT na ufumbuzi wa kloridi ya kalsiamu 0.025 M hutumiwa. Suluhisho la kloridi ya sodiamu 0.9% hutumika kama kiyeyusho kwa sampuli za kawaida na za majaribio. Sampuli ya kawaida ya heparini hupasuka katika maji yaliyotengenezwa kulingana na maelekezo katika maelekezo. Andaa dilutions 3 za sampuli ya kawaida na shughuli ya heparini ya 0.3, 0.4 na 0.5 IU / ml. Sampuli za kawaida zilizo na shughuli hizi zinapaswa kuongeza muda wa kuganda kwa plasma ya kawaida kwa angalau mara 1.5, vinginevyo dilutions na shughuli ya juu ya heparini inapaswa kutumika. Sambamba, dilutions 3 za sampuli ya mtihani huandaliwa ili takriban shughuli ya heparini katika dilutions hizi iwe ndani ya aina mbalimbali za shughuli za heparini katika dilutions ya sampuli ya kawaida.

Uchambuzi huo unafanywa kwa kutumia coagulometer otomatiki au nusu otomatiki katika mirija ya majaribio ya plastiki kwa joto la 37°C. 100 µl ya plasma ya kawaida ya binadamu, 100 µl ya dilution ya sampuli ya kawaida au ya majaribio, au 100 µl ya 0.9% ya suluhisho la kloridi ya sodiamu (jaribio tupu) huongezwa kwenye bomba, 100 µl ya kitendanishi cha APTT huongezwa na mchanganyiko huongezwa. incubated kwa 120-240 s kwa joto ( 37±0.1) ° С. Kisha, 100 μl ya 0.025 M ufumbuzi wa kloridi ya kalsiamu iliyotangulia joto la 37 ° C huongezwa kwenye tube ya mtihani na wakati wa kuganda kwa sampuli hurekodiwa. Kulingana na mbinu ya kuanzisha uchambuzi, kiasi cha reagents kinaweza kubadilishwa kwa uwiano. Wakati wa kuganda kwa plasma ya kawaida (tupu) inapaswa kuwa 25-40 s. Kwa kila dilution ya sampuli za kawaida na za mtihani, wakati wa kuganda huamua mara tatu.

1. Njia ya Chromogenic

Mbinu hiyo inategemea mpasuko wa substrate ya kromogenic maalum kwa kipengele kilichoamilishwa cha X (FXa). Wakati kiasi kikubwa cha ATIII na FXa kinaletwa kwenye sampuli iliyo na heparini, kiasi cha FXa sawia na kiasi cha heparini huzuiwa. FXa iliyobaki imepasuliwa kutoka kwa substrate maalum ya chromogenic P-nitroaniline, ngozi ambayo imedhamiriwa saa 405 nm. Kwa hivyo, kiasi cha kunyonya ni kinyume chake na kiasi cha heparini. Njia hii huamua maudhui ya heparini isiyogawanywa na ya chini ya uzito wa Masi katika vitengo vya anti-Xa.

Kiasi cha heparini imedhamiriwa na njia ya chromogenic kwa kutumia mifumo ya majaribio ya kibiashara. Ili kuunda grafu ya calibration, sampuli ya kawaida ya heparini au calibrator ya plasma iliyoidhinishwa kulingana na kiwango cha kimataifa hutumiwa. Sampuli ya kawaida au calibrator ya plasma hupunguzwa katika maji yaliyotengenezwa kulingana na maelekezo. Tayarisha miyeyusho 4 ya kiwango na ukolezi wa heparini wa chini ya 1 anti-Xa U/mL kwa kutumia bafa ya dilution pH 8.4. Uchambuzi unafanywa kwa joto la 37 ° C kwa mujibu wa maagizo ya kit. Kwa kila dilution, kunyonya kwa 405 nm imedhamiriwa mara tatu, baada ya hapo grafu ya calibration ya utegemezi wa kunyonya kwenye mkusanyiko wa heparini imepangwa katika kuratibu za mstari. Utegemezi ni wa mstari katika safu ya viwango vya heparini 0 - 1.0 vitengo vya anti-Xa / ml.

Andaa dilutions 2 kwa sampuli ya mtihani na mkusanyiko wa heparini chini ya 1 anti-Xa U/mL. Uchambuzi unafanywa kulingana na maagizo ya kuweka kwa joto la 37 ° C. Kwa kila dilution, thamani ya kunyonya imedhamiriwa mara tatu.

Uamuzi unafanywa kwa mikono kwa kutumia zilizopo za mtihani wa plastiki, microplates au moja kwa moja kwa kutumia coagulometer.

Kwa majaribio katika hali ya mwongozo, 20 µl ya plasma ya kawaida ya binadamu na 20 µl ya suluhisho la antithrombin III huongezwa kwenye visima vya microplate. Kisha, 20, 60, 100 na 140 μl ya mtihani au maandalizi ya kawaida huongezwa kwa visima hivi, kwa mtiririko huo, na kiasi cha suluhisho katika kila kisima hurekebishwa hadi 200 μl na buffer (shughuli ya heparini katika mchanganyiko wa majibu ya mwisho ni 0.02 - 0.08 IU / ml).

40 µl kutoka kwa kila kisima cha sahani huhamishiwa kwenye safu ya pili ya visima, ambayo 20 µl ya suluhisho la sababu ya bovin huongezwa na kuingizwa kwa joto la (37 ± 0.5) ° C kwa 30 s, baada ya hapo 40 µl. ya suluhisho huongezwa kwenye kipengele cha visima vya Xa chromogenic substrate na kuingizwa tena kwa (37 ± 0.5) ° C kwa dakika 3-15, kupima kiwango cha uharibifu wa substrate kwa kipimo cha kuendelea cha wiani wa macho kwa urefu wa 405 nm ( hali ya kinetic) au baada ya kuacha majibu kwa kuongeza 20% (v/v) suluhisho la asidi ya glacial ya asetiki (hatua ya mwisho ya uamuzi).

Wakati wa kufanya masomo katika hali ya kiotomatiki kwa kutumia coagulometer, maadili ya utegemezi wa mabadiliko ya wiani wa macho kwenye mkusanyiko wa heparini hupatikana.

Kiwango cha sababu ya kuganda VIII kutoka 0 hadi 1% husababisha aina kali ya ugonjwa huo, kutoka 1 hadi 2% - kali, kutoka 2 hadi 5% - wastani, zaidi ya 5% - fomu kali, lakini kwa hatari ya kali. na hata kutokwa na damu mbaya wakati wa majeraha na uingiliaji wa upasuaji.

Miongoni mwa udhihirisho wote unaowezekana wa hemophilia, kutokwa na damu kwenye viungo vikubwa vya miisho (nyonga, goti, kifundo cha mguu, bega na kiwiko), kutokwa na damu kwa ndani, kati ya misuli na intramuscular, kutokwa na damu nyingi na kwa muda mrefu katika majeraha, kuonekana kwa damu kwenye mkojo. . Kuvuja damu kwingine kwa kiasi fulani ni kidogo, ikiwa ni pamoja na kali na hatari kama vile hemorrhages ya retroperitoneal, hemorrhages katika viungo vya tumbo, kutokwa na damu ya utumbo, kutokwa na damu ndani ya kichwa (viboko).

Kwa hemophilia, mtu anaweza kufuatilia kwa uwazi maendeleo ya maonyesho yote ya ugonjwa mtoto anapokua, na baadaye akiwa mtu mzima. Wakati wa kuzaliwa, hemorrhages zaidi au chini ya chini ya periosteum ya mifupa ya fuvu, subcutaneous na intradermal hemorrhages, damu ya marehemu kutoka kwenye kitovu inaweza kuzingatiwa. Wakati mwingine ugonjwa huo hugunduliwa kwa sindano ya kwanza ya intramuscular, ambayo inaweza kusababisha hematoma kubwa, ya kutishia maisha ya intramuscular. Meno mara nyingi hufuatana na kutokwa na damu nyingi sana. Katika miaka ya kwanza ya maisha, mara nyingi kuna damu kutoka kwa mucosa ya mdomo inayohusishwa na majeraha kwa vitu mbalimbali vikali. Wakati mtoto anajifunza kutembea, kuanguka na michubuko mara nyingi hufuatana na pua nyingi na hematomas juu ya kichwa. Hemorrhages katika obiti, pamoja na hematomas ya postorbital, inaweza kusababisha kupoteza maono. Katika mtoto ambaye ameanza kutambaa, hemorrhages katika matako ni ya kawaida. Kisha, damu katika viungo vikubwa vya viungo huja mbele. Wanaonekana mapema, hemophilia ni kali zaidi. Hemorrhages ya kwanza hutabiri kumwagika mara kwa mara kwa damu kwenye viungo sawa. Katika kila mtu anayesumbuliwa na hemophilia, viungo 1-3 vinaathiriwa na kuendelea na mzunguko wa hemorrhages. Viungo vya goti huathirika zaidi, ikifuatiwa na viungo vya kifundo cha mguu, kiwiko, na nyonga. Hemorrhages katika viungo vidogo vya mikono na miguu (chini ya 1% ya vidonda vyote) na viungo kati ya vertebrae ni nadra. Katika kila mtu, kulingana na umri na ukali wa ugonjwa huo, kutoka kwa viungo 1-2 hadi 8-12 huathiriwa.

Inahitajika kutofautisha kati ya hemarthrosis ya papo hapo (ya msingi na ya kawaida), osteoarthritis ya uharibifu wa hemorrhagic (arthropathy), ugonjwa wa rheumatoid wa kinga ya sekondari kama shida ya mchakato wa msingi.

Hemarthrosis ya papo hapo inajidhihirisha kama mwanzo wa ghafla (mara nyingi baada ya kuumia kidogo) au ongezeko kubwa la maumivu ya pamoja. Pamoja mara nyingi hupanuliwa, ngozi juu yake ni nyekundu, moto kwa kugusa. Baada ya uhamisho wa kwanza wa vipengele vya damu, maumivu haraka (ndani ya masaa machache) hupungua, na kwa kuondolewa kwa wakati huo huo wa damu kutoka kwa pamoja, hupotea karibu mara moja.

Hatua za IV za uharibifu wa viungo zinajulikana. Katika mimi, au mapema, hatua, kiasi cha pamoja kinaweza kuongezeka kwa sababu ya kutokwa na damu. Katika kipindi cha "baridi", kazi ya pamoja haijaharibika, lakini uchunguzi wa X-ray huamua ishara za tabia za lesion. Katika hatua ya II, maendeleo ya mchakato yanajulikana, ambayo yanafunuliwa kulingana na data ya x-ray. Katika hatua ya III, kiungo huongezeka kwa kasi kwa ukubwa, ulemavu, mara nyingi kutofautiana na bumpy kwa kugusa, hypotrophy iliyotamkwa ya misuli ya mguu ulioathirika imedhamiriwa. Uhamaji wa viungo vilivyoathiriwa ni zaidi au chini ya mdogo, ambayo inahusishwa wote na uharibifu wa pamoja yenyewe na kwa mabadiliko katika misuli na tendons. Katika hatua hii, osteoporosis iliyotamkwa huundwa, fractures ndani ya viungo hutokea kwa urahisi. Katika fupa la paja, kuna uharibifu wa kreta au handaki ya dutu ya mfupa ya kawaida ya hemofilia. Patella imeharibiwa kwa sehemu. Cartilages ya ndani ya articular huharibiwa, vipande vya simu vya cartilages hizi hupatikana kwenye cavity ya pamoja. Aina mbalimbali za subluxations na uhamisho wa mifupa inawezekana. Katika hatua ya IV, kazi ya pamoja inakaribia kupotea kabisa. Fractures ya pamoja yanawezekana. Kwa umri, ukali na kuenea kwa uharibifu wa vifaa vya articular huendelea na inakuwa kali zaidi wakati hematomas hutokea karibu na viungo vilivyobadilishwa pathologically.

Ugonjwa wa rheumatoid wa sekondari (Barkagan-Egorova syndrome) ni aina ya kawaida ya uharibifu wa pamoja kwa wagonjwa wenye hemophilia. Kwa mara ya kwanza, ugonjwa huu ulielezwa mwaka wa 1969. Mara nyingi, hutazamwa na madaktari, kwa kuwa hutokea dhidi ya historia ya hemarthrosis iliyopo tayari na michakato ya uharibifu tabia ya hemophilia kwenye viungo. Ugonjwa wa sekondari wa rheumatoid unaambatana na mchakato wa uchochezi wa muda mrefu (mara nyingi ulinganifu) katika viungo vidogo vya mikono na miguu, ambavyo havikuathiriwa hapo awali na damu. Baadaye, mchakato unapoendelea, viungo hivi hupitia deformation ya kawaida. Maumivu makali yanaonekana mara kwa mara kwenye viungo vikubwa, ugumu wa asubuhi kwenye viungo unaweza kuzingatiwa. Bila kujali kuonekana kwa damu mpya, mchakato wa articular unaendelea kwa kasi. Kwa wakati huu, mtihani wa damu unaonyesha kuonekana au kuongezeka kwa kasi kwa ishara zilizopo za maabara ya mchakato wa uchochezi, ikiwa ni pamoja na wale wa immunological.

Katika watu wengi wenye hemophilia, ugonjwa huonekana zaidi ya umri wa miaka 10-14. Kwa umri wa miaka 20, mzunguko wake hufikia 5.9%, na kwa 30 - hadi 13% ya matukio yote ya ugonjwa huo. Kwa umri, kuenea na ukali wa vidonda vyote vya pamoja vinaendelea kwa kasi, ambayo husababisha ulemavu, kulazimisha matumizi ya magongo, viti vya magurudumu na vifaa vingine. Uendelezaji wa uharibifu wa pamoja unategemea mzunguko wa kutokwa damu kwa papo hapo, wakati na manufaa ya matibabu yao (ni muhimu sana kufanya uhamisho wa damu mapema na vipengele vyake), ubora wa huduma ya mifupa, matumizi sahihi ya mazoezi ya physiotherapy, physiotherapy na balneological madhara, uchaguzi wa taaluma na idadi ya hali nyingine. Masuala haya yote kwa sasa yanafaa sana, kwani umri wa kuishi katika hemofilia umeongezeka kwa kasi kutokana na mafanikio ya matibabu ya kurekebisha.

Kina na makali ya subcutaneous, intermuscular, subfascial na retroperitoneal hematomas ni ngumu sana na hatari. Kuongezeka kwa hatua kwa hatua, wanaweza kufikia ukubwa mkubwa, vyenye kutoka lita 0.5 hadi 3 za damu au zaidi, kusababisha maendeleo ya upungufu wa damu, kusababisha ukandamizaji na uharibifu wa tishu zinazozunguka na vyombo vinavyowalisha, necrosis. Kwa hiyo, kwa mfano, hematomas ya retroperitoneal mara nyingi huharibu kabisa maeneo makubwa ya mifupa ya pelvic (kipenyo cha eneo la uharibifu kinaweza kufikia 15 cm au zaidi), hematomas kwenye miguu na mikono huharibu mifupa ya tubular na calcaneus. Kifo cha tishu za mfupa husababisha kuundwa kwa hemorrhages chini ya periosteum. Mchakato wa uharibifu huo wa mfupa kwenye radiographs mara nyingi hukosewa kwa mchakato wa tumor. Mara nyingi, chumvi za kalsiamu huwekwa kwenye hematomas, ambayo wakati mwingine husababisha kuundwa kwa mifupa mpya, ambayo inaweza kufunga viungo na kuwazuia kabisa.

Hematoma nyingi, kuweka shinikizo kwenye vigogo au misuli ya ujasiri, husababisha kupooza, usumbufu wa hisia, na atrophy ya misuli inayoendelea kwa kasi. Hasa hatari ni kutokwa na damu nyingi katika tishu laini za mkoa wa submandibular, shingo, pharynx na pharynx. Hemorrhages hizi husababisha kupungua kwa njia ya juu ya kupumua na kukosa hewa.

Tatizo kubwa katika hemophilia ni damu nyingi na zinazoendelea za figo, zinazozingatiwa katika 14-30% ya watu wenye ugonjwa huu wa damu. Kutokwa na damu huku kunaweza kutokea kwa hiari na kuhusiana na majeraha ya eneo la lumbar yanayohusiana na pyelonephritis. Aidha, damu ya figo inaweza kutokea kutokana na kuongezeka kwa kalsiamu katika mkojo kutokana na uharibifu wa tishu mfupa katika hemophilia. Kuonekana au kuongezeka kwa damu hiyo inaweza kuwezeshwa na matumizi ya analgesics (asidi acetylsalicylic, nk), damu kubwa na uhamisho wa plasma, ambayo husababisha uharibifu wa ziada kwa figo. Kutokwa na damu kwa figo mara nyingi hutanguliwa na utoaji wa muda mrefu wa chembe za damu ambazo zinaweza kugunduliwa tu kwa uchunguzi wa maabara.

Kuonekana kwa damu kwenye mkojo mara nyingi hufuatana na shida kali ya mkojo, pamoja na mabadiliko ya kiasi cha mkojo uliotolewa (kunaweza kuwa na ongezeko la kiasi cha kila siku na kupungua), mashambulizi ya colic ya figo kutokana na malezi. kuganda kwa damu kwenye njia ya mkojo. Matukio haya ni makali sana na hutamkwa wakati wa matibabu, wakati hali ya kawaida ya damu inarejeshwa kwa muda. Kukomesha kwa damu katika mkojo mara nyingi hutanguliwa na colic ya figo, na mara nyingi kwa kutokuwepo kwa muda kwa mkojo wa mkojo na kuonekana kwa ishara za ulevi wa mwili na bidhaa za sumu za kimetaboliki.

Kutokwa na damu kwa figo mara kwa mara hujirudia, ambayo kwa miaka inaweza kusababisha mabadiliko makubwa ya uharibifu wa dystrophic katika chombo hiki, maambukizi ya sekondari na kifo kutokana na maendeleo ya kushindwa kwa figo.

Kutokwa na damu kwa njia ya utumbo katika hemophilia kunaweza kutokea kwa hiari, lakini mara nyingi zaidi husababishwa na kuchukua asidi ya acetylsalicylic (aspirin), butadione na dawa zingine. Chanzo cha pili cha kutokwa na damu ni vidonda vya wazi au vilivyofichwa vya tumbo au duodenum, pamoja na gastritis ya erosive ya asili mbalimbali. Hata hivyo, wakati mwingine kuna kuenea kwa damu ya capillary bila mabadiliko yoyote ya uharibifu katika membrane ya mucous. Damu hizi huitwa diapedetic. Zinapoonekana, ukuta wa matumbo umejaa damu kwa muda mrefu, ambayo husababisha coma haraka kama matokeo ya anemia kali, kukata tamaa kwa sababu ya kupungua kwa kasi kwa shinikizo la damu na kifo. Utaratibu wa maendeleo ya kutokwa damu kama hiyo bado haujulikani hadi sasa.

Hemorrhages katika viungo vya tumbo huiga magonjwa mbalimbali ya upasuaji wa papo hapo - appendicitis ya papo hapo, kizuizi cha matumbo, nk.

Hemorrhages katika ubongo na uti wa mgongo na utando wao katika hemophilia ni karibu kila mara kuhusishwa ama na majeraha au kwa matumizi ya madawa ya kulevya ambayo huharibu kazi ya platelets, ambayo ni moja kwa moja kushiriki katika clotting damu. Kati ya wakati wa kuumia na ukuaji wa kutokwa na damu kunaweza kuwa na muda wa mwanga kutoka masaa 1-2 hadi siku.

Kipengele cha tabia ya hemophilia ni kutokwa na damu kwa muda mrefu wakati wa majeraha na operesheni. Majeraha ya kupasuka ni hatari zaidi kuliko kupasuka kwa mstari. Kutokwa na damu mara nyingi haitoke mara baada ya kuumia, lakini baada ya masaa 1-5.

Kuondolewa kwa tonsils katika hemophilia ni hatari zaidi kuliko upasuaji wa tumbo.

Uchimbaji wa meno, hasa molars, mara nyingi hufuatana na siku nyingi za kutokwa na damu sio tu kutoka kwa soketi za meno, lakini pia kutoka kwa hematomas zilizoundwa kwenye tovuti ya kupenya kwa tishu na novocaine, ambayo inaongoza kwa maendeleo ya upungufu wa damu. Hematoma hizi husababisha uharibifu wa taya. Na hemophilia, meno huondolewa dhidi ya msingi wa hatua ya dawa za antihemophilic chini ya anesthesia ya jumla. Uchimbaji wa meno kadhaa ni bora kufanywa mara moja.

Sehemu ya matatizo katika hemophilia ni kutokana na kupoteza damu, compression na uharibifu wa tishu na hematomas, maambukizi ya hematomas. Kundi kubwa la matatizo pia linahusishwa na matatizo ya kinga. Hatari zaidi kati yao ni kuonekana katika damu kwa idadi kubwa ya vizuizi vya kinga ("blockers") ya sababu ya ujazo wa damu VIII (au IX), kubadilisha hemophilia kuwa fomu inayoitwa inhibitory, ambayo njia kuu ya matibabu. ni tiba ya kuongezewa (kuongezewa damu au vipengele vyake) - karibu kupoteza kabisa ufanisi wake. Zaidi ya hayo, utawala wa mara kwa mara wa dawa za antihemophilic mara nyingi husababisha ongezeko la haraka la kiasi cha kizuizi katika damu, kama matokeo ya uhamisho wa damu na vipengele vyake, ambavyo hapo awali vilikuwa na athari fulani, hivi karibuni huwa bure. Mzunguko wa fomu ya kuzuia hemophilia, kulingana na waandishi tofauti, huanzia 1 hadi 20%, mara nyingi zaidi kutoka 5 hadi 15%. Kwa fomu za kuzuia, kazi ya platelet imeharibika sana, hemorrhages kwenye viungo na excretion ya damu kwenye mkojo huwa mara kwa mara, uharibifu wa viungo ni mkubwa zaidi.

Njia kuu ya matibabu na kuzuia kutokwa na damu na kutokwa na damu kwa ujanibishaji wowote na asili yoyote ya hemophilia ni utawala wa intravenous wa vipimo vya kutosha vya bidhaa za damu zilizo na sababu VIII. Sababu ya VIII inabadilika na kwa kweli haijahifadhiwa katika damu ya makopo, plasma ya asili na kavu. Kwa matibabu ya uingizwaji, uhamishaji wa damu moja kwa moja tu kutoka kwa wafadhili na bidhaa za damu zilizo na sababu ya VIII iliyohifadhiwa yanafaa. Uhamisho wa damu moja kwa moja kutoka kwa wafadhili hutumiwa tu wakati daktari hana dawa zingine za antihemophilic. Ni kosa kubwa kumwaga damu kutoka kwa mama, kwa kuwa yeye ni carrier wa ugonjwa huo, na kiwango cha kipengele VIII katika damu yake kinapungua kwa kasi. Kutokana na muda mfupi wa maisha ya kipengele VIII katika damu ya mpokeaji (karibu masaa 6-8), uhamisho wa damu, pamoja na uhamisho wa plasma ya antihemophilic, inapaswa kurudiwa angalau mara 3 kwa siku. Uhamisho huo wa damu na plasma haufai kwa kuacha damu kubwa na kifuniko cha kuaminika kwa hatua mbalimbali za upasuaji.

Kiasi sawa cha plasma ya antihemophilic ni takriban mara 3-4 zaidi kuliko damu safi ya benki. Kiwango cha kila siku cha 30-50 ml / kg ya uzito wa mwili wa plasma ya antihemophilic inaruhusu kwa muda kudumisha kiwango cha 10-15% cha sababu VIII. Hatari kuu ya matibabu hayo ni overload ya mzunguko wa damu kwa kiasi, ambayo inaweza kusababisha maendeleo ya edema ya mapafu. Matumizi ya plasma ya antihemophilic katika fomu iliyojilimbikizia haibadilishi hali hiyo, kwani mkusanyiko mkubwa wa protini iliyoingizwa husababisha harakati kubwa ya maji kutoka kwa tishu kwenda kwenye damu, kwa sababu ya ambayo kiasi cha damu inayozunguka huongezeka sawa. kama wakati plasma inapoingizwa katika dilution ya kawaida. Plasma ya antihemophilic iliyojilimbikizia ina faida tu kwamba ina sababu ya VIII iliyojilimbikizia zaidi ya mgando wa damu, na kwa kiasi kidogo huletwa haraka zaidi ndani ya damu. Plasma ya antihemophilic kavu hupunguzwa na maji yaliyotengenezwa kabla ya matumizi. Matibabu na plasma ya antihemophilic inatosha kuacha damu nyingi za papo hapo kwenye viungo (isipokuwa kali zaidi), pamoja na kuzuia na kutibu damu ndogo.

Ya kuaminika zaidi na yenye ufanisi katika hemophilia huzingatia sababu ya VIII ya kuganda kwa damu. Kupatikana zaidi kati yao ni cryoprecipitate. Ni mkusanyiko wa protini uliotengwa na plasma kwa kupozwa (cryoprecipitation), ambayo ina kiasi cha kutosha cha mambo ya kuganda kwa damu, lakini protini chache. Maudhui ya chini ya protini hufanya iwezekanavyo kuingiza madawa ya kulevya ndani ya damu kwa kiasi kikubwa sana na kuongeza mkusanyiko wa sababu VIII hadi 100% au zaidi bila hofu ya kupakia mzunguko wa damu na edema ya pulmona. Cryoprecipitate lazima ihifadhiwe kwa -20 ° C, ambayo inafanya kuwa vigumu kusafirisha. Wakati thawed, madawa ya kulevya hupoteza haraka shughuli zake. Cryoprecipitate kavu na mkusanyiko wa kisasa wa sababu VIII ya kuganda kwa damu hunyimwa mapungufu haya. Wanaweza kuhifadhiwa kwenye friji ya kawaida. Utawala mwingi wa cryoprecipitate haufai, kwani huunda mkusanyiko mkubwa wa mambo ya kuganda katika damu, kama matokeo ya ambayo microcirculation katika viungo inasumbuliwa na kuna hatari ya kufungwa kwa damu na maendeleo ya DIC.

Dawa zote za antihemophilic zinasimamiwa kwa njia ya ndani tu kwenye mkondo, kwa fomu iliyojilimbikizia zaidi na haraka iwezekanavyo baada ya kufunguliwa tena bila kuchanganya na ufumbuzi mwingine kwa utawala wa intravenous. Moja ya sababu kuu za kushindwa kwa tiba ya uingizwaji ni matone ya bidhaa za damu, ambayo haina kusababisha ongezeko la kiwango cha VIII katika plasma. Hadi kuacha kutokwa na damu imara, huwezi kutumia mbadala yoyote ya damu na bidhaa za damu ambazo hazina vipengele vya antihemophilic, kwa sababu hii inasababisha dilution ya kipengele VIII na kupungua kwa mkusanyiko wake katika seramu.

Katika kesi ya kutokwa na damu kwa papo hapo kwenye viungo, kwa muda (sio zaidi ya siku 3-5) immobilization (immobilization) ya kiungo kilichoathiriwa katika nafasi ya kisaikolojia, inapokanzwa kwa kiungo kilichoathiriwa (compresses), lakini sio baridi ni muhimu. Kuondolewa mapema kwa damu ambayo imeingia ndani ya pamoja sio tu kuondoa maumivu mara moja, huzuia damu zaidi kuganda katika pamoja, lakini pia hupunguza hatari ya maendeleo na maendeleo ya haraka ya osteoarthritis. Ili kuzuia na kutibu mabadiliko ya uchochezi ya sekondari baada ya kuondolewa kwa damu, 40-60 mg ya hydrocortisone inaingizwa kwenye cavity ya pamoja. Tiba ya kuongezewa ya usaidizi, ambayo hufanyika wakati wa siku 3-6 za kwanza, huzuia damu zaidi na inakuwezesha kuanza mazoezi ya physiotherapy mapema, ambayo inachangia kurejesha kwa kasi na kamili zaidi ya kazi ya kiungo kilichoathiriwa, na kuzuia atrophy ya misuli. Ni bora kukuza harakati kwenye pamoja iliyoathiriwa kwa hatua. Katika siku 5-7 za kwanza baada ya kuondoa bandeji, harakati za kazi hufanywa kwa pamoja walioathirika na katika viungo vingine vya kiungo, hatua kwa hatua kuongeza mzunguko na muda wa mazoezi. Kuanzia siku ya 6-9, wanabadilisha mazoezi ya "mzigo", kwa kutumia ergometers ya baiskeli, milango ya pedal kwa mikono, traction ya elastic. Kuanzia siku ya 11-13, ili kuondokana na ugumu wa mabaki na kupunguza upeo wa upeo au ugani, mazoezi ya mzigo wa passiv hufanywa kwa tahadhari. Wakati huo huo na siku ya 5-7, physiotherapy imeagizwa - electrophoresis ya hydrocortisone, galvanization ya anodic.

Kwa kutokwa na damu katika tishu laini, matibabu ya kina zaidi na dawa za antihemophilic hufanywa kuliko kutokwa na damu kwenye viungo. Pamoja na maendeleo ya upungufu wa damu, infusions ya intravenous ya molekuli ya erythrocyte imewekwa zaidi. Ikiwa kuna ishara za maambukizi ya hematoma, basi antibiotics ya wigo mpana huwekwa mara moja. Sindano yoyote ya intramuscular kwa hemophilia ni kinyume chake, kwani inaweza kusababisha hematomas nyingi na pseudotumors. Penicillin na analogi zake za nusu-synthetic pia hazifai, kwani kwa kipimo kikubwa huongeza damu.

Matibabu ya mapema na ya kina na dawa za antihemophilic huchangia urejesho wa haraka wa hematomas. Hematomas iliyoingizwa huondolewa, ikiwa inawezekana, upasuaji pamoja na capsule.

Kutokwa na damu kwa nje kutoka kwa ngozi iliyoharibiwa, kutokwa na damu na kutokwa na damu kutoka kwa majeraha kwenye cavity ya mdomo husimamishwa na tiba ya kuongezewa damu na kwa ushawishi wa ndani - kwa kutibu eneo la kutokwa na damu na dawa zinazochangia kuganda kwa damu. Kwa kuongeza, dawa hizi zinaweza kuchukuliwa kwa mdomo. Majambazi ya shinikizo au sutures hutumiwa kwa majeraha. Vile vile, kuacha damu baada ya uchimbaji wa jino. Wakati wa kuondoa meno ya kutafuna, tiba ya kuongezewa damu kidogo zaidi hufanywa, na kuondolewa kwa wakati mmoja wa meno kadhaa (3-5 au zaidi) kunahitaji kuanzishwa kwa dawa za antihemophilic katika siku 3 za kwanza.

Katika kesi ya kutokwa na damu ya pua, kufunga tight kunapaswa kuepukwa, kwani baada ya kuondolewa kwa tampons, kutokwa na damu mara nyingi huanza tena kwa nguvu kubwa zaidi. Kuacha haraka kwa damu ya pua kwa kawaida hutolewa na plasma ya antihemophilic na dawa za antihemophilic na umwagiliaji wa wakati huo huo wa mucosa ya pua na ufumbuzi unaokuza ugandishaji wa damu.

Hatari kubwa inawakilishwa na kutokwa na damu kwa figo, ambayo infusions ya intravenous ya plasma ya antihemophilic na cryoprecipitate haifanyi kazi.

Kutokwa na damu kwa njia ya utumbo hudhibitiwa na viwango vikubwa vya mkusanyiko wa sababu ya kuganda. Ikumbukwe kwamba damu ya tumbo mara nyingi hukasirika kwa kuchukua aspirini, brufen, indomethacin kuhusiana na maumivu kwenye viungo, maumivu ya meno au maumivu ya kichwa. Kwa wagonjwa wenye hemophilia, hata dozi moja ya aspirini inaweza kusababisha kutokwa na damu kwa tumbo.

Katika kuzuia na matibabu ya osteoarthritis ya muda mrefu na vidonda vingine vya mfumo wa musculoskeletal, ni muhimu kutoa njia mbalimbali za kulinda viungo na kuzuia majeraha kwa viungo. Ili kufanya hivyo, pedi za povu zimeshonwa ndani ya nguo karibu na goti, kifundo cha mguu na kiwiko, na michezo hiyo ambayo inahusishwa na kuruka, kuanguka na michubuko (pamoja na baiskeli na pikipiki) huepukwa. Umuhimu unatolewa kwa matibabu ya mapema iwezekanavyo na kamili ya kutokwa na damu kwa papo hapo kwenye viungo na misuli, mazoezi ya kina ya mwaka mzima ya physiotherapy. Kwa hili, kuna magumu maalum ya mazoezi ya atraumatic katika maji, kwenye mikeka laini na vifaa vya mzigo - ergometers ya baiskeli, milango ya mwongozo. Madarasa yanapaswa kuanza katika umri wa shule ya mapema au shule ya msingi, ambayo ni, kabla ya shida kali za mfumo wa musculoskeletal. Tiba tata huongezewa na physiotherapy (mikondo ya juu ya mzunguko, electrophoresis ya glucocorticosteroids) na mbinu za matibabu ya balneological, hasa tiba ya matope, bafu ya brine na radon. Kwa kutokwa na damu mara kwa mara na kwa ukaidi katika viungo sawa, tiba ya X-ray na matibabu ya upasuaji hufanyika.

Kupunguza hatari ya kuumia na kupunguzwa kutoka utoto wa mapema ni muhimu katika kuzuia kutokwa na damu. Vinyago vya kuvunja kwa urahisi (ikiwa ni pamoja na chuma na plastiki), pamoja na vitu visivyo na imara na nzito, vinatengwa na maisha ya kila siku. Samani inapaswa kuwa na kingo za mviringo, kando zinazojitokeza zimefungwa na pamba ya pamba au mpira wa povu, sakafu inafunikwa na carpet ya rundo. Mawasiliano na michezo ya wagonjwa na wasichana ni vyema, lakini si kwa wavulana. Kwa mgonjwa, uchaguzi sahihi wa taaluma na mahali pa kazi ni muhimu.

Kinga ya hemophilia bado haijatengenezwa. Kuamua jinsia ya mtoto ambaye hajazaliwa kwa kupima maumbile ya seli zilizopatikana kutoka kwa maji ya amniotic inakuwezesha kumaliza mimba kwa wakati unaofaa, lakini haionyeshi ikiwa fetusi ni carrier wa jeni la hemophilia. Mimba huhifadhiwa ikiwa fetusi ni kiume, kwa kuwa wana wote wa wagonjwa wanazaliwa na afya. Kuondoa mimba ikiwa fetusi ni ya kike, kwa kuwa binti zote za wagonjwa wa hemophilia ni flygbolag ya ugonjwa huo.

Katika kondakta wa kike wa hemophilia ambao wana nafasi ya 50% ya kuzaa mtoto aliyeathiriwa (ikiwa fetusi ni ya kiume), au ambao ni wasambazaji wa hemophilia (ikiwa fetusi ni ya kike), kuzaliwa kwa wasichana pekee kunahatarisha hatari ya kupata. wagonjwa wa hemophilia katika familia kutoka kizazi cha kwanza hadi cha pili, wakati huo huo kuongeza idadi ya wabebaji wa ugonjwa huo.

Sehemu ya plasma ya binadamu iliyosafishwa kwa njia ya kromatografia iliyo na sababu ya kuganda VIII. Globulini ya antihemofili, hufidia upungufu wa kipengele cha kuganda VIII, kwa muda hufidia kasoro ya kuganda kwa wagonjwa wenye hemofilia A. Inapatikana katika mchanganyiko wa asili na protini C ya kipengele VIII, von Willebrand factor. Inashiriki katika mchakato wa kuchanganya damu, inakuza mpito wa prothrombin hadi thrombin na kuundwa kwa kitambaa cha fibrin. Mara baada ya utawala, huongeza uwezekano wa kuganda kwa damu. Kupungua kwa shughuli ya sababu ya antihemophilic ina tabia ya awamu mbili: awamu ya mapema ni kupungua kwa kasi kwa shughuli, inaashiria wakati wa kusawazisha na nafasi ya ziada ya mishipa, awamu ya pili ni polepole, inaonyesha nusu ya maisha ya kibaolojia. inasimamiwa antihemophilic factor na ni masaa 9-14. Shughuli maalum (baada ya kuongeza kwa albumin ya binadamu) - 9-22 IU ya protini. 1 IU (kama inavyofafanuliwa na kiwango cha WHO cha kuganda kwa damu VIII) ni takriban sawa na kiwango cha kipengele cha antihemofili kilichopo katika 1 ml ya plasma mpya ya wafadhili.
Wakati wa kufikia mkusanyiko wa juu katika plasma ya damu baada ya utawala wa intravenous ni kutoka dakika 10 hadi saa 2. Nusu ya maisha ni masaa 8.4-19.3. Shughuli ya sababu ya kuganda VIII hupungua hatua kwa hatua - kwa 15% ndani ya masaa 12. Kwa hyperthermia, kipindi cha nusu ya maisha ya sababu ya mgando VIII inaweza kupungua.

Dalili za matumizi ya dawa ya Coagulation Factor VIII

Hemophilia A, ugonjwa wa von Willebrand (matibabu na kuzuia kutokwa na damu, ikiwa ni pamoja na wakati wa uingiliaji wa upasuaji); alipata upungufu wa sababu VIII, magonjwa yanayoambatana na malezi ya antibodies kwa sababu VIII.

Jinsi ya kutumia Coagulation Factor VIII

Katika / ndani. Kwa kuzuia kutokwa na damu kwa hiari au kwa kutokwa na damu kidogo - 10 IU / kg (yaliyomo katika sababu ya VIII, muhimu ili kuzuia kutokwa na damu kwa hiari - 5% ya kiwango cha kawaida); na kutokwa na damu wastani na uingiliaji mdogo wa upasuaji (kwa mfano, uchimbaji wa jino) - 15-25 IU / kg (sababu VIII yaliyomo - 30-80% ya kawaida) ikifuatiwa na kipimo cha matengenezo ya 10-15 IU / kg kila 12- Masaa 24 kwa siku 3 au hadi athari ya kliniki ya kutosha itapatikana; katika damu ya papo hapo inayohatarisha maisha - 40-50 IU / kg (sababu VIII maudhui - 60-100% ya kawaida) ikifuatiwa na kipimo cha matengenezo ya 20-25 IU / kg kila masaa 8-24; na uingiliaji wa kina wa upasuaji - 40-50 IU / kg saa 1 kabla ya utaratibu na 20-25 IU / kg - masaa 5 baada ya kipimo cha kwanza (hiyo ni, 80-100% ya kawaida kabla na baada ya upasuaji), kisha kurudia kila 8-24 h mpaka athari ya kutosha ya kliniki inapatikana. Kwa kuzuia muda mrefu wa kutokwa na damu katika hemophilia kali A - 12-25 IU / kg kila siku 2-3.
Cryoprecipitate hutumiwa kwa kuzingatia utangamano wa vikundi vya damu vya AB0. Chombo kilicho na cryoprecipitate waliohifadhiwa huwekwa kwa kuyeyushwa na kufutwa kabisa katika umwagaji wa maji kwa joto lisilozidi 35-37 ° C na kuingizwa kwa si zaidi ya dakika 7. Suluhisho la njano la uwazi linalotokana, ambalo haipaswi kuwa na flakes, hutumiwa mara baada ya maandalizi. Inasimamiwa kwa njia ya mshipa kwa sirinji au mfumo wa utiaji mishipani na kichujio cha kutupwa. Kipimo kinategemea yaliyomo ya awali ya sababu ya VIII katika damu ya mgonjwa aliye na hemophilia, asili na ujanibishaji wa kutokwa na damu, kiwango cha hatari ya uingiliaji wa upasuaji, uwepo wa kizuizi fulani katika damu ya mgonjwa ambacho kinaweza kudhoofisha shughuli za mwili. kipengele VIII (kilichoonyeshwa katika vitengo vya shughuli za kipengele VIII). Ili kuhakikisha hemostasis yenye ufanisi katika matatizo ya kawaida ya hemophilia (hemarthrosis, figo, gingival na pua ya pua), pamoja na uchimbaji wa jino, maudhui ya kipengele VIII katika plasma inapaswa kuwa angalau 20%; na hematomas ya intermuscular, kutokwa na damu ya utumbo, fractures na majeraha mengine - si chini ya 40%; katika hatua nyingi za upasuaji - angalau 70%. Kwa kuanzishwa kwa kipengele VIII kwa kiwango cha kitengo 1 kwa kilo 1 ya uzito wa mwili, maudhui yake katika damu huongezeka kwa wastani wa 1%. Kulingana na hili, idadi ya dozi zinazohitajika ili kuongeza mkusanyiko wa sababu VIII katika damu kwa kiwango fulani huhesabiwa na formula: uzito wa mwili wa mgonjwa (kwa kilo) huzidishwa na maudhui yanayotakiwa ya kipengele VIII katika damu ya mgonjwa. kugawanywa na 200 (maudhui ya chini ya sababu VIII katika vitengo vya shughuli katika kipimo 1 cha cryoprecipitate). Baada ya kuacha kabisa damu, kuanzishwa kwa sababu ya VIII kwa wagonjwa wenye hemophilia hufanyika kwa muda wa masaa 12-24 kwa kipimo ambacho hutoa ongezeko la maudhui ya kipengele VIII kwa angalau 20%. Matibabu inaendelea kwa siku kadhaa - mpaka kupungua kwa kuonekana kwa ukubwa wa hematoma. Katika uingiliaji wa upasuaji, kipimo cha hemostatic kinasimamiwa dakika 30 kabla ya upasuaji. Katika kesi ya kutokwa na damu nyingi, upotezaji wa damu hujazwa tena, mwisho wa operesheni, cryoprecipitate inaletwa tena (kipimo cha 1/2 kutoka kwa asili). Siku 3-5 baada ya operesheni, ni muhimu kudumisha mkusanyiko wa sababu VIII katika damu ya mgonjwa ndani ya mipaka sawa na wakati wa operesheni. Katika kipindi cha baada ya kazi katika siku zijazo, ili kudumisha hemostasis, inatosha kuongeza maudhui ya sababu VIII hadi 20%. Muda wa tiba ya hemostatic ni siku 7-14 na inategemea asili, eneo la kutokwa damu, sifa za tishu za kurejesha. Matibabu ya mgonjwa aliye na hemophilia na cryoprecipitate inapaswa kuunganishwa na utawala wa wakati huo huo wa mawakala wa antifibrinolytic na corticosteroids katika kipimo cha matibabu cha kuzuia na cha kati.

Masharti ya matumizi ya dawa ya Coagulation Factor VIII

Kuongezeka kwa unyeti.

Madhara ya sababu ya kuganda VIII

Athari za mzio na uhamishaji (urticaria, upele, kupumua kwa stridor, kupungua kwa shinikizo la damu, baridi, hyperthermia, anaphylaxis), paresthesia ya muda mfupi ya mucosa ya mdomo, kichefuchefu, kutapika, maumivu ya kichwa.

Maagizo maalum ya matumizi ya dawa ya Coagulation Factor VIII

Tumia kwa tahadhari wakati wa ujauzito na lactation.
Ni muhimu kudhibiti kiwango cha moyo kabla na wakati wa tiba: kwa ongezeko kubwa la kiwango cha moyo, kiwango cha infusion kinapungua au utawala umesimamishwa. Wakati na baada ya mwisho wa kozi ya matibabu, ni muhimu kudhibiti maudhui ya sababu VIII katika damu. Ili kutambua dalili za anemia ya hemolytic inayoendelea, ni muhimu kufuatilia hematokriti na majibu ya moja kwa moja ya Coombs. Mabadiliko katika hali ya kinga kwa wagonjwa walio na hemophilia isiyo na dalili ni kwa sababu ya kufichuliwa mara kwa mara kwa vimelea vya virusi na / au uwezekano wa uwepo wa uchafu katika maandalizi ya sababu ya VIII (kwa mfano, IgG). Ili kufikia matokeo ya kliniki ya kuridhisha, kipimo cha ziada kinaweza kutolewa kwa kuongeza kipimo kilichohesabiwa hapo awali. Kwa kukosekana kwa athari ya kliniki, ni muhimu kufanya mtihani ili kutambua kizuizi na kuamua kiasi chake katika vitengo vya antihemophilic visivyo na maana kwa 1 ml au jumla ya kiasi cha plasma. Ili kupunguza hatari ya athari mbaya, inashauriwa kutumia kabla ya saa 1 baada ya dilution, simamia tu kwa njia ya ndani, kwa angalau masaa 3 (kwa kiwango cha 10 ml / min), usifungie suluhisho na usitumie tena. . Inawezekana kukuza antibodies kwa sababu ya mgando VIII, katika hali kama hizi, ufanisi wa tiba kawaida hupunguzwa, ambayo inaweza kuhitaji kuongezeka kwa kipimo cha sababu ya kuganda VIII. Inawezekana kuongeza kiwango cha kupungua kwa hesabu za seli za CD4 kwa wagonjwa walio na VVU na hemophilia.