Glavni protein mijelina u cerebrospinalnoj tekućini (CSF). Neurokemija - Ashmarin I.P. U bijeloj tvari

6. MIJELINSKI PROTEINI

Proteinski sastav mijelina je jedinstven, ali znatno jednostavniji nego kod neurona i glija stanica.

Mijelin sadrži veliki udio kationskog proteina – CBM. To je relativno mali polipeptid s Mg = 16-18 kDa. CBM sadrži značajan udio diaminokiselina, au isto vrijeme oko polovice njegovih sastavnih aminokiselina su nepolarne. To osigurava, s jedne strane, bliski kontakt s hidrofobnim komponentama mijelinskih lipida, as druge strane, određuje njegovu sposobnost stvaranja ionskih veza s kiselim skupinama lipida.

Takozvani Folch proteolipidni proteini, koji čine većinu preostalih mijelinskih proteina, karakterizirani su neobično visokom hidrofobnošću. Zauzvrat, glavni od ovih proteina je lipofilin, u kojem su 2/3 sastavnih aminokiselina nepolarne. Od interesa je određena selektivnost kontakta lipofilina s lipidima, na primjer, istiskivanje kolesterola iz okoline. Vjeruje se da je to zbog karakteristika sekundarne strukture lipofilina.

Prilično je velik i udio takozvanog Wolfgram proteina - kiselog proteolipida, dosta bogatog dikarboksilnim aminokiselinskim ostacima, a istovremeno sadrži oko polovicu ostataka nepolarnih aminokiselina.

Konačno, među nekoliko desetaka drugih mijelinskih proteina, bilježimo glikoprotein povezan s mijelinom koji se nalazi na izvanstaničnoj površini membrana; također se nalazi u oligodendrocitima prije mijelinizacije i u mijelinu perifernog živčanog sustava. U središnjem živčanom sustavu čovjeka predstavljen je s tri polipeptidna lanca s Mg = 92, 107, 113 kDa, au perifernom živčanom sustavu s jednim proteinom s Mg = 107 kDa. MAG spada u glikoproteine ​​s relativno niskim udjelom ugljikohidratnih ostataka – oko 30% molekulske mase, ali sadrži skup ugljikohidrata svojstven glikoproteinima: N‑acetilglukozamin, N‑acetilneuraminska kiselina, fukoza, manoza i galaktoza. Proteinski dio molekule karakterizira visok sadržaj glutaminske i aslaragične kiseline.

Funkcije Wolfgram proteina i MAG-a su nepoznate, osim općih razmatranja o njihovom sudjelovanju u organiziranju strukture mijelinskih ovojnica.

7. NEUROSPECIFIČNI GLIJNI PROTEINI

Protein S-100 nalazi se iu neuronima iu glija stanicama, a njegov udio u potonjim je velik - oko 85%.

Godine 1967. iz moždanih a 2 -globulina izoliran je neurospecifični a 2 -glikoprotein s molekulskom težinom od 45 kDa. Pojavljuje se u ljudskom mozgu u 16. tjednu embrionalnog razvoja. Njegove ugljikohidratne komponente uključuju glukozamin, manozu, glukozu, galaktozu, galaktozamin i N-acetilneuraminsku kiselinu. a 2-glikoprotein je lokaliziran samo u astrocitima, ali ga nema u neuronima, oligodendrocitima i endotelnim stanicama. Stoga se može smatrati jednim od specifičnih markera astrocita.

Drugi protein je opet karakterističan samo za glija stanice. Izoliran je iz područja ljudskog mozga bogatih fibroznim astrocitima, a potom - u znatno većim količinama - iz mozgova pacijenata s multiplom sklerozom. Ova tvar je nazvana glijalni fibrilarni kiseli protein. Specifičan je samo za CNS i ne nalazi se u PNS-u. Njegov sadržaj u bijeloj tvari mozga premašuje onaj u sivoj tvari. U mišjoj ontogenezi, maksimalni sadržaj GFA opažen je između 10. i 14. dana postnatalnog razvoja, tj. vremenski se podudara s razdobljem mijelinizacije i vrhuncem diferencijacije astrocita. Molekularna težina proteina je 40-54 kDa. Glijalna lokalizacija ovog proteina također mu omogućuje da se koristi kao protein "marker" za ove stanice.

Funkcije α2-glikoproteina i GFA proteina su nepoznate.

Što se tiče mikroglijskih proteina, treba imati na umu sudjelovanje ovih stanica u izgradnji mijelina. Mnogi od mijelinskih proteina nalaze se u mikrogliji.

Glija također sadrži mnoge receptorske i enzimske proteine ​​uključene u sintezu sekundarnih glasnika, prekursora neurotransmitera i drugih regulatornih spojeva koji se mogu klasificirati kao neurospecifični.

8. INTENZITET METABOLIZMA PROTEINA U RAZLIČITIM ODJELIMA ŽIVČANOG SUSTAVA

Suvremeno shvaćanje dinamičkog stanja proteina u živčanom tkivu upotrebom izotopa uspostavio je A.V. Palladin, D. Richter, A. Laita i drugi istraživači. Počevši od kasnih 50-ih i tijekom 60-ih godina, u proučavanju metabolizma proteina korišteni su različiti prekursori njihove biosinteze, označeni s C, H i S. Pokazalo se da su proteini i aminokiseline u mozgu odrasle životinje metaboliziraju, općenito, intenzivnije nego u drugim organima i tkivima.

Na primjer, u in vivo pokusima koji su koristili jednolično označenu C-1-6-glukozu kao prekursor, pokazalo se da se, prema intenzitetu stvaranja aminokiselina uslijed glukoze, niz organa može poredati sljedećim redoslijedom:

mozak > krv > jetra > slezena i pluća > mišići.

Slična je slika uočena kada su korišteni drugi obilježeni prekursori. Pokazalo se da se iz C-acetata u mozgu intenzivno sintetizira ugljični kostur aminokiselina, posebice monoaminodikarboksilnih kiselina i prvenstveno glutamata; Iz monoaminomonokarbinskih kiselina dosta intenzivno nastaju glicin, alanin, serin i dr. Treba napomenuti da posebno mjesto u metabolizmu aminokiselina zauzima glutamat. In vitro pokusi s obilježenim glutamatom pokazali su da ako se samo jedna glutaminska kiselina doda u reakcijski medij homogenata mozga, tada može biti izvor stvaranja 90-95% aminokiselina.

Provedene su brojne studije kako bi se ispitale razlike u metaboličkim stopama ukupnih i pojedinačnih proteina korištenjem označenih prekursora. Pokusi in vivo s C-glutamatom pokazali su da se on 4-7 puta intenzivnije ugrađuje u proteine ​​sive nego bijele tvari. U svim slučajevima pokazalo se da je intenzitet izmjene ukupnih proteina u sivoj tvari moždanih hemisfera i malog mozga znatno veći nego u bijeloj tvari istih dijelova mozga, bez obzira koji je prekursor korišten u istraživanju. Pritom se razlika u intenzitetu metabolizma ukupnih proteina sive tvari u odnosu na proteine ​​bijele tvari javlja ne samo normalno, nego u pravilu i u različitim funkcionalnim stanjima organizma.

Provedene su i studije za proučavanje razlika u intenzitetu ugradnje obilježenih prekursora u ukupne proteine ​​središnjeg i perifernog živčanog sustava. Pokazalo se da se unatoč značajnim razlikama u sastavu, metabolizmu i funkcionalnoj aktivnosti različitih dijelova CNS-a i PNS-a, kao i složenosti i heterogenosti proteina koji ih čine, ukupni proteini CNS-a odraslih životinja obnavljaju. mnogo intenzivnije od ukupnih proteina PNS-a.

Mnogo je istraživanja posvećeno metabolizmu proteina u različitim dijelovima mozga. Na primjer, proučavajući raspodjelu radioaktivnosti u mozgu nakon primjene C-glutamata, pokazalo se da na sivu tvar hemisfera velikog mozga otpada 67,5 radioaktivnosti, na mali mozak - 16,4, na produljenu moždinu - 4,4, a na ostale dijelove mozga - oko 11,7. U in vivo pokusima s primjenom različitih prekursora odraslim životinjama, i to C-glutamata, C-1-6-glukoze, C-2-acetata, pokazalo se da, prema intenzitetu ugradnje oznake u ukupne proteine, razni dijelovi živčanog sustava smješteni su sljedećim redoslijedom: siva tvar moždanih hemisfera i malog mozga > talamus > vidni talamus > srednji mozak i diencefalon > Varolijev most > produžena moždina > bijela tvar moždanih hemisfera i malog mozga > leđna moždina > ishijadični živac > mijelin.

Također su provedena istraživanja intenziteta metabolizma proteina u različitim dijelovima središnjeg živčanog sustava pomoću autoradiografske metode. Dobivena je slična slika: najintenzivnija inkorporacija oznake odvijala se u proteinima sive tvari moždanih hemisfera i malog mozga, sporije u leđnoj moždini, a još sporije u proteinima ishijadičnog živca. Što se tiče subkortikalnih tvorevina, intenzitet njihove izmjene proteina bio je prosječan između stope obnavljanja proteina u sivoj i bijeloj tvari hemisfera velikog mozga i malog mozga. Između pojedinih supkortikalnih formacija uočavaju se manje značajne razlike nego između metaboličke aktivnosti bijele i sive tvari.

Proučavani su i ukupni proteini različitih područja kore velikog mozga - frontalnog, temporalnog, parijetalnog i okcipitalnog. Prema Welshu i VAPalladinu, proteini u osjetilnom području korteksa imaju veću stopu izmjene, a proteini u temporalnom režnju cerebralnog korteksa imaju nižu stopu izmjene. Isti su autori pokazali da je veća izmjena proteina karakteristična za filogenetski mlađe i funkcionalno aktivnije strukturne tvorevine mozga.

U pozadini općenito velikog prometa moždanih proteina, nekoliko prilično inertnih proteina zaslužuje poseban spomen. To uključuje histone neurona neokorteksa - kationske proteine ​​kromatina ovih stanica. U tijelu odrasle osobe neokortikalni neuroni se ne umnožavaju. U skladu s tim, brzina obnove histona je vrlo niska. Prosječno statističko vrijeme obnove polovice molekula nekih frakcija histona mjeri se desecima dana.

U mozgu nema apsolutno inertnih proteina, a pojedinačni proteini i proteinski kompleksi neurona prolaze kontinuirano restrukturiranje povezano s njihovim sudjelovanjem u funkcionalnoj aktivnosti neurona i neuroglije. Osim sinteze i razgradnje čitavih proteinskih molekula, dolazi do promjena u njihovoj strukturi, koje se posebno događaju tijekom aminacije i deaminacije moždanih proteina. Treba ih smatrati djelomičnim obnavljanjem pojedinih fragmenata proteinske molekule.

1. U živčanom tkivu pronađeni su samo njemu svojstveni neurospecifični proteini. Njihova kemijska priroda može biti kisela ili bazična, jednostavna ili složena, a često su glikoproteini ili fosfoproteini. Mnogi neuronski specifični proteini imaju strukturu podjedinice. Broj otkrivenih proteina specifičnih za neurone već je premašio 200 i ubrzano raste.

2. Neurospecifični proteini izravno ili neizravno sudjeluju u svim funkcijama živčanog sustava - stvaranju i provođenju živčanih impulsa, obradi i pohranjivanju informacija, sinaptičkom prijenosu, staničnom prepoznavanju, primanju itd.

3. Na temelju lokalizacije u tkivu živčanog sustava razlikuju se isključivo ili pretežno neuronski i glijalni neurospecifični proteini. Prema subcelularnoj lokalizaciji mogu biti citoplazmatski, jezgri ili membranski vezani. Od posebne su važnosti neurospecifični proteini lokalizirani u membranama sinaptičkih tvorevina.

4. Mnogi neurospecifični proteini koji vežu kalijevu kiselinu uključeni su u procese prijenosa iona. Konkretno, smatra se da igraju značajnu ulogu u formiranju pamćenja.

5. Posebnu skupinu neuron-specifičnih proteina predstavljaju kontraktilni proteini živčanog tkiva, koji osiguravaju orijentaciju i pokretljivost citostrukturnih tvorevina, aktivni transport niza neuronskih komponenti i sudjeluju u neurotransmiterskim procesima u sinapsama.

6. Skupina neurospecifičnih proteina povezanih s humoralnom regulacijom koju provodi mozak uključuje neke glikoproteine ​​hipotalamusa, kao i neurofizine i slične proteine ​​koji su nositelji peptidnih regulatora.

7. Različiti neurospecifični glikoproteini sudjeluju u stvaranju mijelina, u procesima stanične adhezije, neurorecepciji i međusobnom prepoznavanju neurona u ontogenezi i tijekom regeneracije.

8. Brojni neurospecifični proteini su moždani izoenzimi poznatih enzima, na primjer enolaze, aldolaze, kreatin kinaze, itd.

9. Mnogi neurospecifični proteini vrlo se aktivno metaboliziraju u mozgu životinja, a intenzitet metabolizma varira u različitim dijelovima mozga i ovisi o funkcionalnom stanju živčanog sustava. Općenito, intenzitet obnove moždanih bjelančevina značajno je veći nego kod drugih tkiva i organa.

RAMS, 1996. - 470 str.
ISBN 5-900760-02-2
preuzimanje datoteka(izravna veza) : neyrohimiya1996.djvu Prethodni 1 .. 36 > .. >> Sljedeći
89
3.6 MIJELINSKI PROTEINI
Proteinski sastav mijelina je jedinstven, ali znatno jednostavniji nego kod neurona i glija stanica.
Mijelin sadrži veliki udio kationskog proteina – CBM (oko 30 posto). To je relativno mali polipeptid s Mg = 16-18 kDa. CBM sadrži značajan udio diaminokiselina (oko 20 posto), au isto vrijeme oko polovice njegovih sastavnih aminokiselina su nepolarne. To osigurava, s jedne strane, bliski kontakt s hidrofobnim komponentama mijelinskih lipida, as druge strane, određuje njegovu sposobnost stvaranja ionskih veza s kiselim skupinama lipida. Funkcije CBM-a bit će detaljnije razmotrene u poglavlju o lipidima u vezi s općom analizom strukture mijelinskih membrana.
Takozvani Folch proteolipidni proteini, koji čine većinu preostalih mijelinskih proteina, karakterizirani su neobično visokom hidrofobnošću. Zauzvrat, glavni od ovih proteina je lipofilin (Mg = 28 kD), u kojem su 2/3 sastavnih aminokiselina nepolarne. Od interesa je određena selektivnost kontakta lipofilina s lipidima, na primjer, istiskivanje kolesterola iz okoline. Vjeruje se da je to zbog karakteristika sekundarne strukture lipofilina. Njegova uloga u stvaranju mijelinskih ovojnica detaljnije je obrađena u poglavlju o lipidima.
Prilično je velik i udio tzv. Wolfgram proteina (oko 15% proteina) - kiselog proteolipida, dosta bogatog dikarboksilnim aminokiselinskim ostacima, a istovremeno sadrži oko polovicu ostataka nepolarnih aminokiseline.
Konačno, među nekoliko desetaka drugih mijelinskih proteina, bilježimo glikoprotein povezan s mijelinom (MAG), smješten na izvanstaničnoj površini membrana; također se nalazi u oligodendrocitima prije mijelinizacije i u mijelinu perifernog živčanog sustava. U središnjem živčanom sustavu čovjeka predstavljen je s tri polipeptidna lanca s Mg = 92, 107, 113 kDa, au perifernom živčanom sustavu s jednim proteinom s Mg = 107 kDa. MAG pripada glikoproteinima s relativno niskim udjelom ugljikohidratnih ostataka - oko 30% mase molekule, ali sadrži skup ugljikohidrata karakterističan za glikoproteine: N-acetilglukozamin, N-acetilneuraminska kiselina, fukoza, manoza i galaktoza. Proteinski dio molekule karakterizira visok sadržaj glutamina i
90
asparaginske kiseline.
Funkcije Wolfgram proteina i MAG-a su nepoznate, osim općih razmatranja o njihovom sudjelovanju u organiziranju strukture mijelinskih ovojnica.
3.7 NEUROSPECIFIČNI GLIJSKI PROTEINI
Protein S-100, detaljno opisan u odjeljku 3.1, nalazi se i u neuronima i u glijalnim stanicama, a njegov udio u potonjim je velik - oko 85%.
Godine 1967. iz moždanih a2-globulina izoliran je neurospecifični a2-glikoprotein s molekulskom težinom od 45 kDa. Pojavljuje se u ljudskom mozgu u 16. tjednu embrionalnog razvoja. Njegove ugljikohidratne komponente uključuju glukozamin, manozu, glukozu, galaktozu, galaktozamin i N-acetilneuraminsku kiselinu. a2-glikoprotein je lokaliziran samo u agrocitima, ali ga nema u neuronima, oligodendrocitima i endotelnim stanicama. Stoga se može smatrati jednim od specifičnih markera astrocita.
Drugi protein je opet karakterističan samo za glija stanice. Izoliran je iz područja ljudskog mozga bogatih fibroznim astrocitima, a potom - u mnogo većim količinama - iz mozgova pacijenata s multiplom sklerozom (fibralna glioza). Ova tvar je nazvana glialni fibrilarni kiseli protein (GFA). Specifičan je samo za CNS i ne nalazi se u PNS-u. Njegov sadržaj u bijeloj tvari mozga premašuje onaj u sivoj tvari. U ontogenezi miša, maksimalni sadržaj GFA opažen je između 10. i 14. dana postnatalnog razvoja, tj. vremenski se podudara s razdobljem mijelinizacije i vrhuncem diferencijacije astrocita. Molekularna težina proteina je 40-54 kDa. Glijalna lokalizacija ovog proteina također mu omogućuje da se koristi kao protein "marker" za ove stanice.
Funkcije a2-glikoproteina i GFA proteina su nepoznate.
Što se tiče mikroglijskih proteina, treba imati na umu sudjelovanje ovih stanica u izgradnji mijelina. Mnogi proteini u mijelinu. opisani u prethodnom odjeljku identificiraju se u mikroglijama.
Glija također sadrži mnoge receptorske i enzimske proteine ​​uključene u sintezu sekundarnih glasnika, prekursora neurotransmitera i drugih regulatornih spojeva koji se mogu klasificirati kao neurospecifični. Neki od njih opisani su u sljedećim poglavljima.
91
3.8 INTENZITET METABOLIZMA PROTEINA U RAZLIČITIM ODJELIMA ŽIVČANOG SUSTAVA
Suvremeno shvaćanje dinamičkog stanja proteina u živčanom tkivu korištenjem izotopa uspostavili su A. V. Palladin, D. Richter, A. Laita i drugi istraživači. Počevši od kasnih 50-ih i tijekom 60-ih godina, različiti prekursori njihove biosinteze (aminokiseline, glukoza, acetat i drugi), obilježeni s 14C, 3H, 35S, korišteni su u proučavanju metabolizma proteina. Dokazano je da se proteini i aminokiseline u mozgu odrasle životinje općenito intenzivnije metaboliziraju nego u drugim organima i tkivima.

Svi lipidi koji se nalaze u mozgu štakora također su prisutni u mijelinu, tj. ne postoje lipidi lokalizirani isključivo u nemijelinskim strukturama (s izuzetkom specifičnog mitohondrijskog lipida difosfatidilglicerola). Vrijedi i suprotno – nema mijelinskih lipida koji se ne bi nalazili u drugim substaničnim frakcijama mozga.

Cerebrozid je najtipičnija komponenta mijelina. S izuzetkom vrlo ranog razdoblja razvoja organizma, koncentracija cerebrozida u mozgu izravno je proporcionalna količini mijelina u njemu. Samo 1/5 ukupnog sadržaja galaktolipida u mijelinu nalazi se u sulfatnom obliku. Cerebrozidi i sulfatidi imaju važnu ulogu u osiguravanju stabilnosti mijelina.

Mijelin također karakteriziraju visoke razine njegovih glavnih lipida - kolesterola, ukupnih galaktolipida i plazmalogena koji sadrži etanolamin. Utvrđeno je da se do 70% kolesterola u mozgu nalazi u mijelinu. Budući da se gotovo polovica bijele tvari mozga sastoji od mijelina, jasno je da mozak sadrži najveću količinu kolesterola u usporedbi s drugim organima. Visoka koncentracija kolesterola u mozgu, posebice u mijelinu, određena je glavnom funkcijom neuronskog tkiva - stvaranjem i provođenjem živčanih impulsa. Visok sadržaj kolesterola u mijelinu i jedinstvenost njegove strukture dovode do smanjenja propuštanja iona kroz neuronsku membranu (zbog njezine velike otpornosti).

Fosfatidilkolin je također bitan sastojak mijelina, iako je sfingomijelin prisutan u relativno malim količinama.

Sastav lipida i sive i bijele tvari mozga značajno se razlikuje od sastava mijelina. Sastav mijelina u mozgu svih proučavanih vrsta sisavaca gotovo je isti; javljaju se samo manje razlike (npr. mijelin štakora ima manje sfingomijelina nego goveđi ili ljudski mijelin). Postoje neke varijacije i ovisno o položaju mijelina, na primjer mijelin izoliran iz leđne moždine ima veći omjer lipida i proteina nego mijelin iz mozga.

Mijelin sadrži i polifosfatidilinozitole, od kojih trifosfoinozitid čini 4 do 6% ukupnog mijelinskog fosfora, a difosfoinozitid 1 do 1,5%. Manje komponente mijelina uključuju najmanje tri cerebrozidna estera i dva lipida na bazi glicerola; Mijelin također sadrži neke dugolančane alkane. Mijelin sisavaca sadrži od 0,1 do 0,3% gangliozida. Mijelin sadrži više monosialogangliozida bM1 u usporedbi s onim što se nalazi u moždanim membranama. Mijelin mnogih organizama, uključujući i ljude, sadrži jedinstveni gangliozid sijalozilgalaktozilceramid OM4.

PNS mijelinski lipidi

Mijelinski lipidi perifernog i središnjeg živčanog sustava kvalitativno su slični, ali među njima postoje kvantitativne razlike. PNS mijelin sadrži manje cerebrozida i sulfatida i značajno više sfingomijelina nego CNS mijelin. Zanimljivo je primijetiti prisutnost gangliozida OMP, koji je karakterističan za PNS mijelin kod nekih organizama. Razlike u sastavu mijelinskih lipida u središnjem i perifernom živčanom sustavu nisu toliko značajne koliko razlike u sastavu proteina.

CNS mijelinski proteini

Proteinski sastav mijelina CNS-a jednostavniji je od ostalih moždanih membrana, a zastupljen je uglavnom proteolipidima i bazičnim proteinima, koji čine 60-80% ukupnog broja. Glikoproteini su prisutni u znatno manjim količinama. Mijelin središnjeg živčanog sustava sadrži jedinstvene proteine.

Mijelin središnjeg živčanog sustava čovjeka karakterizira kvantitativna prevlast dvaju proteina: pozitivno nabijenog kationskog mijelinskog proteina (myelin basic protein, MBP) i mijelinskog proteolipidnog proteina, PLP. Ovi proteini su glavne komponente mijelina središnjeg živčanog sustava svih sisavaca.

Mijelinski proteolipid PLP (proteolipidni protein), poznat i kao Folchov protein, ima sposobnost otapanja u organskim otapalima. Molekularna težina PLP je približno 30 kDa (Da - Dalton). Njegova aminokiselinska sekvenca je izuzetno očuvana, a molekula tvori nekoliko domena. Molekula PLP sadrži tri masne kiseline, obično palmitinsku, oleinsku i stearinsku, povezane s radikalima aminokiselina esterskom vezom.

Mijelin CNS-a sadrži nešto manje količine drugog proteolipida, DM-20, nazvanog po svojoj molekularnoj težini (20 kDa). I analiza DNK i razjašnjavanje primarne strukture pokazali su da DM-20 nastaje cijepanjem 35 aminokiselinskih ostataka iz proteina PLP. Tijekom razvoja, DM-20 se pojavljuje ranije nego PLP (u nekim slučajevima čak i prije pojave mijelina); sugeriraju da osim svoje strukturne uloge u stvaranju mijelina, može biti uključen u diferencijaciju oligodendrocita.

Suprotno ideji da je PLP neophodan za stvaranje kompaktnog multilamelarnog mijelina, proces stvaranja mijelina u PLP/DM-20 nokaut miševa odvija se samo s manjim abnormalnostima. Međutim, ti miševi imaju skraćeni životni vijek i smanjenu ukupnu mobilnost. Nasuprot tome, prirodne mutacije u PLP-u, uključujući normalnu prekomjernu ekspresiju PLP-a, imaju ozbiljne funkcionalne posljedice. Treba napomenuti da su značajne količine proteina PLP i DM-20 prisutne u CNS-u, glasnička RNA za PLP također je u PNS-u, a mala količina proteina se tamo sintetizira, ali nije ugrađena u mijelin.

Kationski mijelinski protein (MCP) privlači pažnju istraživača zbog svoje antigenske prirode - kada se daje životinjama izaziva autoimunu reakciju, tzv. eksperimentalni alergijski encefalomijelitis, koji je model teške neurodegenerativne bolesti - multiple skleroze.

Aminokiselinska sekvenca MBP-a visoko je očuvana u mnogim organizmima. MBP se nalazi na citoplazmatskoj strani mijelinskih membrana. Ima molekularnu težinu od 18,5 kDa i nema znakove tercijarne strukture. Ovaj temeljni protein pokazuje mikroheterogenost kada se podvrgava elektroforezi u alkalnim uvjetima. Većina proučavanih sisavaca sadržavala je različite količine MBR izoformi koje dijele značajan dio svoje aminokiselinske sekvence. Molekularna težina MBR u miševa i štakora je 14 kDa. MBR niske molekularne težine ima iste aminokiselinske sekvence na N- i C-terminalnim dijelovima molekule kao i ostatak MBR-a, ali se razlikuje u redukciji oko 40 aminokiselinskih ostataka. Omjer ovih glavnih proteina mijenja se tijekom razvoja: zreli štakori i miševi imaju više MBR od 14 kDa nego MBR od 18 kDa. Druge dvije izoforme MBR-a, koje se također nalaze u mnogim organizmima, imaju molekularne mase od 21,5 odnosno 17 kDa. Nastaju pričvršćivanjem polipeptidne sekvence težine oko 3 kDa na glavnu strukturu.

Elektroforetsko odvajanje mijelinskih proteina otkriva proteine ​​veće molekularne težine. Njihov broj ovisi o vrsti organizma. Na primjer, miševi i štakori mogu sadržavati do 30% ukupne količine takvih proteina. Sadržaj ovih proteina također se mijenja ovisno o dobi životinje: što je mlađa, to je manje mijelina u njenom mozgu, ali sadrži više proteina veće molekularne težine.

Enzim 2"3"-ciklički nukleotid 3"-fosfodiesteraza (CNP) čini nekoliko posto ukupnog sadržaja mijelinskog proteina u stanicama CNS-a. To je mnogo više nego u drugim tipovima stanica. CNP protein nije glavna komponenta kompaktni mijelin; koncentriran je samo u određenim područjima mijelinske ovojnice povezane s citoplazmom oligodendrocita. Protein je lokaliziran u citoplazmi, ali dio je povezan s citoskeletom membrane - F-aktin i tubulin. biološka funkcija CNP-a može biti reguliranje strukture citoskeleta kako bi se ubrzali procesi rasta i diferencijacije u oligodendrocitima.

Myelin-associated glycoprotein (MAG) je kvantitativno minorna komponenta pročišćenog mijelina, ima molekularnu težinu od 100 kDa, a nalazi se u CNS-u u malim količinama (manje od 1% ukupnog proteina). MAG ima jednu transmembransku domenu koja odvaja visoko glikozilirani ekstracelularni dio molekule, sastavljen od pet imunoglobulinskih domena, od intracelularne domene. Njegova cjelokupna struktura slična je proteinu adhezije neuronskih stanica (NCAM).

MAG nije prisutan u kompaktnom, multilamelarnom mijelinu, ali se nalazi u periaksonalnim membranama oligodendrocita koji tvore mijelinske slojeve. Podsjetimo, periaksonalna membrana oligodendrocita najbliža je plazma membrani aksona, ali se unatoč tome te dvije membrane ne spajaju, već su odvojene ekstracelularnim rascjepom. Ova značajka lokalizacije MAG-a, kao i činjenica da ovaj protein pripada superobitelji imunoglobulina, potvrđuje njegovo sudjelovanje u procesima adhezije i prijenosa informacija (signalizacije) između aksoleme i oligodendrocita koji stvaraju mijelin tijekom procesa mijelinizacije. Osim toga, MAG je jedna od komponenti bijele tvari središnjeg živčanog sustava koja inhibira rast neurita u kulturi tkiva.

Među ostalim glikoproteinima bijele tvari i mijelina treba istaknuti minor mijelinsko-oligodendrocitni glikoprotein (MOG). MOG je transmembranski protein koji sadrži jednu domenu sličnu imunoglobulinu. Za razliku od MAG-a koji se nalazi u unutarnjim slojevima mijelina, MOG je lokaliziran u njegovim površinskim slojevima, zbog čega može sudjelovati u prijenosu izvanstanične informacije do oligodendrocita.

Male količine karakterističnih membranskih proteina mogu se identificirati elektroforezom u poliakrilamidnom gelu (PAGE) (npr. tubulin). Elektroforeza visoke rezolucije pokazuje prisutnost drugih manjih proteinskih vrpci; mogu biti povezani s prisutnošću brojnih enzima mijelinske ovojnice.

PNS mijelinski proteini

Mijelin PNS-a sadrži i neke jedinstvene proteine ​​i nekoliko uobičajenih proteina s mijelinskim proteinima CNS-a.

P0 je glavni protein mijelina PNS-a, ima molekularnu težinu od 30 kDa, čineći više od polovice mijelinskih proteina PNS-a. Zanimljivo je primijetiti da iako se razlikuje od PLP-a u aminokiselinskoj sekvenci, posttranslacijskim modificiranim putovima i strukturi, oba su ova proteina jednako važna za formiranje strukture CNS-a i PNS-a mijelina.

Sadržaj MBP u mijelinu PNS-a iznosi 5-18% ukupnih proteina, za razliku od CNS-a, gdje njegov udio doseže trećinu ukupnih proteina. Ista četiri oblika MBP proteina s molekulskim masama od 21, 18,5, 17 i 14 kDa, redom, koji se nalaze u mijelinu CNS-a također su prisutni u PNS-u. U odraslih glodavaca MBP molekulske mase 14 kDa (nazvan “Pr” prema klasifikaciji perifernih mijelinskih proteina) najznačajnija je komponenta svih kationskih proteina. PNS mijelin također sadrži MBP s molekularnom težinom od 18 kDa (u ovom slučaju se naziva "P1 protein"). Treba napomenuti da važnost MBP obitelji proteina nije tako velika za mijelinsku strukturu PNS-a kao za CNS.

PNS mijelinski glikoproteini

PNS kompaktni mijelin sadrži glikoprotein od 22 kDa koji se naziva periferni mijelinski protein 22 (PMP-22), koji čini manje od 5% ukupnog sadržaja proteina. PMP-22 ima četiri transmembranske domene i jednu glikozilacijsku domenu. Ovaj protein nema značajnu strukturnu ulogu. Međutim, abnormalnosti gena pmp-22 odgovorne su za neke nasljedne ljudske neuropatologije.

Prije nekoliko desetljeća vjerovalo se da mijelin stvara inertnu ovojnicu koja ne obavlja nikakve biokemijske funkcije. Međutim, kasnije je u mijelinu otkriven veliki broj enzima koji sudjeluju u sintezi i metabolizmu komponenti mijelina. Brojni enzimi prisutni u mijelinu uključeni su u metabolizam fosfoinozitida: fosfatidilinozitol kinaza, difosfatidilinozitol kinaza, odgovarajuće fosfataze i diglicerid kinaze. Ovi enzimi su zanimljivi zbog visoke koncentracije polifosfoinozitida u mijelinu i njihove brze izmjene. Postoje dokazi o prisutnosti muskarinskih kolinergičkih receptora, G-proteina, fosfolipaza C i E i protein kinaze C u mijelinu.

Na/K-ATPaza, koja provodi transport monovalentnih kationa, kao i 6"-nukleotidaza, pronađena je u mijelinu PNS-a. Prisutnost ovih enzima sugerira da mijelin može aktivno sudjelovati u transportu aksona.

Određivanje koncentracije bazičnog proteina mijelina u cerebrospinalnoj tekućini, koristi se za dijagnostiku, procjenu prognoze i praćenje liječenja multiple skleroze.

Sinonimi ruski

MBP u cerebrospinalnoj tekućini, u likvoru.

SinonimiEngleski

Mijelinski bazični protein (MBP), CSF.

Način istraživanja

Imunoenzimski test (ELISA).

Jedinice

ng/ml (nanogrami po mililitru).

Koji se biomaterijal može koristiti za istraživanje?

Kako se pravilno pripremiti za istraživanje?

Nije potrebna priprema.

Opće informacije o studiju

Mijelinski bazični protein, MBP, jedna je od glavnih komponenti unutarnjeg sloja mijelinske ovojnice. Tijekom demijelinizacije MBP i/ili njegovi fragmenti ulaze u cerebrospinalnu tekućinu i stoga se mogu koristiti kao klinički i laboratorijski marker razaranja mijelina za dijagnozu, procjenu prognoze i praćenje liječenja multiple skleroze.

Dokazano je da se povećanje razine MBP u cerebrospinalnoj tekućini opaža u približno 80% slučajeva egzacerbacije multiple skleroze i samo u nekoliko bolesnika u remisiji bolesti. Povećanje razine MBP korelira s progresijom promjena prema MRI i traje 5-6 tjedana nakon početka egzacerbacije. Tijekom terapije glukokortikosteroidima koncentracija MBP se smanjuje.

Ako se multipla skleroza manifestira samo u obliku retrobulbarnog neuritisa, povećanje MBP u cerebrospinalnoj tekućini u pravilu se ne opaža. To je vjerojatno zbog činjenice da se fokus demijelinizacije u ovom slučaju nalazi na relativno velikoj udaljenosti od četvrte moždane klijetke. Još jedna značajka MBP-a je da kada se oslobodi iz mijelina, MBP može biti podvrgnut fragmentaciji da bi se formirale mnoge strukturno različite komponente, od kojih se sve ne mogu identificirati korištenjem standardnih testnih sustava. Rezultat studije u ovom slučaju ne odgovara uvijek stvarnoj koncentraciji MBP u cerebrospinalnoj tekućini.

Povećanje MBP-a opaženo je ne samo kod multiple skleroze, već i kod drugih bolesti središnjeg živčanog sustava, na primjer, moždanog udara, nekih encefalopatija i encefalitisa. Štoviše, budući da se MBP također nalazi u perifernim živcima, njegova koncentracija u cerebrospinalnoj tekućini može biti promijenjena u prisutnosti demijelinizacije živčanih vlakana izvan središnjeg živčanog sustava. Dakle, MBP je nespecifični marker multiple skleroze.

Valja napomenuti da je MBP danas dodatni marker multiple skleroze. Kao i drugi markeri cerebrospinalne tekućine (oligoklonalni imunoglobulini G, IgG indeks), nije uključen u glavni algoritam za dijagnosticiranje multiple skleroze.

Za što se koristi istraživanje?

• Za dijagnostiku, procjenu prognoze i praćenje liječenja multiple skleroze.

Kada je studija zakazana?

• Ako imate simptome multiple skleroze: zamagljen vid (zamagljen vid, dvoslike), slabost, obamrlost, trnci u rukama i nogama, poremećaj ravnoteže, pojačano mokrenje, osobito ako su simptomi povremeni i primjećuju se kod mlade žene;
• nakon primanja dvosmislenih rezultata magnetske rezonancije (MRI) mozga.

Što znače rezultati?

Referentne vrijednosti: manje od 1 ng/ml.

Pozitivan rezultat:

• multipla skleroza i druge demijelinizirajuće bolesti središnjeg živčanog sustava;
• moždani udar;
• encefalopatija;
• encefalitis.

Negativan rezultat:

• norma;
• učinkovito liječenje bolesti.

Što može utjecati na rezultat?

• Fragmentacija bazičnog proteina mijelina dok se oslobađa iz mijelina;
• prisutnost popratnih bolesti.

Važne bilješke

• Bazični protein mijelina je nespecifični marker multiple skleroze i drugih demijelinizirajućih bolesti;
• rezultate testova treba tumačiti uzimajući u obzir dodatne kliničke, laboratorijske i instrumentalne podatke.

• Dijagnoza multiple skleroze (izoelektrično fokusiranje oligoklonalnog IgG u cerebrospinalnoj tekućini i serumu)

Tko naručuje studiju?

Neurolog, liječnik opće prakse.

Književnost

• Giovannoni G. Biomarkeri cerebrospinalne tekućine multiple skleroze. Dis markeri. 2006;22(4):187-96. Pregled.
• Greene DN, Schmidt RL, Wilson AR, Freedman MS, Grenache DG Bazični protein mijelina cerebrospinalne tekućine se često naručuje, ali ima malu vrijednost: studija korištenja testa. Am J Clin Pathol. 2012. kolovoz;138(2):262-72.

U krvnom serumu ispitana je koncentracija mijelinskog bazičnog proteina (MBP) i neuron-specifične enolaze (NSE) u 84 bolesnika s kroničnim hepatitisom (CH) (virusne etiologije HBV, HCV - 38; alkoholne etiologije - 17; autoimunog hepatitisa - 11). hepatitis mješovite etiologije - 18) i 77 ciroza jetre (LC) (virusne etiologije HBV, HCV, HBV+HCV - 27; primarna bilijarna ciroza - 10, alkoholna etiologija - 18; mješovita etiologija - 22). Kontrolna skupina - 30 praktički zdravih osoba (donatora). Koncentracije MBP i NSE u krvnom serumu određene su imunoenzimskim testom pomoću komercijalnih test sustava 449-5830 DSL MBP i 420-10 Fujirebio NSE. Prema rezultatima studije, značajno povećanje koncentracije MBP u krvi uočeno je kod alkoholnih lezija jetre iu fazi kroničnog hepatitisa i formirane ciroze u usporedbi s virusnim lezijama. Koncentracija NSE u bolesnika s cirozom ispitivanih etioloških skupina, za razliku od hCG, nije se značajno razlikovala.

mijelinski bazični protein

neuron-specifična enolaza

kronični hepatitis

ciroza jetre

hepatička encefalopatija.

1. Žukova I.A. Neuron-specifična enolaza kao nespecifični biljeg neurodegenerativnog procesa / I.A. Žukova, V.M. Alifirova, N.G. Zhukova // Bilten sibirske medicine. – 2011. – T. 10. – Broj 2. – S. 15-21.

2. Belopasov V.V. Klinička diferencijacija jetrene encefalopatije u bolesnika s cirozom jetre / V.V. Belopasov, R.I. Mukhamedzyanova, M.K. Andreev, B.N. Levitan // Vyatka Medical Bulletin. - 2002. - br. 1. - str. 46-47.

3. Ivaškin V.T. Bolesti jetre i jetrena encefalopatija / V.T. Ivaškin, F.I. Komarov, I.O. Ivanikov // Ruski medicinski časopis. – 2001. - T. 3. - Broj 12. - Str. 150-155.

4. Levitan B.N. Kronična patologija jetre i crijevna mikrobiocenoza (klinički i patogenetski aspekti) / B.N. Levitan, A.R. Umerova, N.N. Larina. – Astrakhan: AGMA, 2010. - 135 str.

5. Levitan B.N. Promjene u koncentraciji bazičnog proteina mijelina u krvnom serumu kod bolesti jetre / B.N. Levitan, A.V. Astahin, O.O. Evlasheva // Eksperimentalna i klinička gastroenterologija. – 2015. - br. 2. – 93. str.

6. Pavlov Ch.S. Jetrena encefalopatija: patogeneza, klinička slika, dijagnoza, terapija / Ch.S. Pavlov, I.V. Damulin, V.T. Ivaškin // Ruski časopis za gastroenterologiju, hepatologiju, koloproktologiju. – 2016. - br. 1. – str. 44-53.

7. Toropova N.E. Procjena informacijskog sadržaja neuron-specifične enolaze određene metodom enzimskog imunološkog testa / N.E. Toropova, E.A. Dorofeeva, S.P. Dvoryaninova, Zh.P. Vasieva // Klinička laboratorijska dijagnostika. - 1995. – br. 1. - str. 15–17.

8. Čehonjin V.P. Mijelinski bazični protein. Struktura, svojstva, funkcije, uloga u dijagnostici demijelinizirajućih bolesti / V.P. Čehonjin, O.I. Gurina, T.B. Dmitrieva i sur. // Biomedicinska kemija. – 2000. – T. 46. – Br. 6. – P. 549–563.

9. Arguedas M.R. Utjecaj jetrene encefalopatije na zdravu kvalitetu života bolesnika s cirozom / M.G. Arguedas, T.G. Delawrence, B.M. McGuire // Probavne bolesti i znanosti. – 2003. – V. 48. – P. 1622-1626.

10. Butterworth R.F. Patofiziologija jetrene encefalopatije: Koncept sinergizma // Hepatol. Res. - 2008. - V. 38. - P. 116-121.

11. Isgro M. Neuron – specifična enolaza kao biomarker: biokemijski i klinički aspekti / M. Isgro, P. Bottoni, R. Scatena // AdvExp Mad Biol. – 2015. – God. 867. – Str. 125-143.

12. Persson L. 100 protein i neuron-specifična enolaza u cerebrospinalnoj tekućini i serumu: markeri oštećenja stanica u ljudskom središnjem živčanom sustavu / L. Persson, H.G. Hardemark, J. Gustaffson i sur. // Moždani udar. - 1987. - Vol. 18. - Str. 911-918.

13. Rabinowicz A. NSE kao koristan prognostički faktor za pacijente nakon cerebralne hipoksije / A. Rabinowicz, H. Reiber // Epilepsija. - 1996. - Vol. 37. - Str. 122-125.

14. Tzakos A. Struktura i funkcija mijelinskih proteina: trenutno stanje i perspektive u vezi s multiplom sklerozom / A. Tzakos, A. Troganis, V. Theodorou // Curr. Med. Chem. – 2005. – God. 12. – Str. 1569-1587.

Kronični hepatitis (CH) i ciroza jetre (LC) polietiološke su bolesti. Poznato je da je infekcija hepatotropnim virusima glavni etiološki čimbenik koji dovodi do razvoja hCG, a zlouporaba alkohola je drugi glavni uzrok ove patologije.

Tijek i prognoza bolesti jetre uvelike je određena prisutnošću i težinom oštećenja središnjeg živčanog sustava (SŽS). Jetrena encefalopatija (HE) je kompleks potencijalno reverzibilnih neuropsihijatrijskih poremećaja uzrokovanih oštećenjem središnjeg živčanog sustava toksičnim tvarima koje patološki promijenjena jetra ne neutralizira, a nastaju prvenstveno kao posljedica akutnog ili kroničnog zatajenja jetre. S obzirom na izrazitu agresivnost ovih tvari, može se pretpostaviti da pod njihovim utjecajem dolazi do razaranja živčanog tkiva uz otpuštanje produkata njegovog raspada u tjelesne tekućine.

Prilično velik broj studija posvećen je proučavanju dijagnostičkog i prognostičkog značaja takvih markera neurodestrukcije kao što su mijelinski osnovni protein (MBP) i neuron-specifična enolaza (NSE) u različitim patološkim stanjima središnjeg živčanog sustava. Istodobno, pitanje njihove dijagnostičke vrijednosti u kroničnim difuznim bolestima jetre (CDLD) različite etiologije ostaje slabo proučeno. S tim u vezi, proučavanje MBP i NSE ovisno o etiologiji CDPD je relevantno i obećavajuće.

Cilj: ispitati dijagnostički značaj određivanja koncentracije bazičnog proteina mijelina i neuron-specifične enolaze u krvnom serumu ovisno o etiologiji CDPD-a.

Materijali i metode. Za rješavanje ovih problema, od 2012. do 2014. godine, 84 bolesnika s kroničnim hepatitisom (virusne etiologije HBV, HCV - 38; alkoholne etiologije - 17; autoimunog hepatitisa - 11; mješovite etiologije - 18) i 77 bolesnika s cirozom (virusne etiologije HBV, HCV) ), HBV+HCV - 27; primarna bilijarna ciroza - 10, alkoholna etiologija - 18; mješovita etiologija - 22), koji su bili na stacionarnom liječenju u gastroenterološkom odjelu Državne proračunske zdravstvene ustanove JSC "AMOKB". Među pregledanim bolesnicima s patologijom jetre identificirana je skupina od 17 bolesnika koja nije bila uključena u CG bolesnike. Ovu skupinu činili su bolesnici s akutnim alkoholnim hepatitisom (AAH), koji se javljao sa simptomima ozbiljnog zatajenja stanica jetre. Kontrolnu skupinu činilo je 30 praktički zdravih osoba (donora).

Istraživanja su provedena na temelju vlastitih zapažanja i podataka iz medicinske dokumentacije (povijest bolesti, ambulantni karton, mišljenja specijalista o metodama parakliničkog pregleda).

Bolesnici su primljeni u kliniku u fazi egzacerbacije osnovne bolesti. Prilikom postavljanja dijagnoze korištene su trenutno općeprihvaćene klasifikacije. Klinička dijagnoza postavljena je na temelju pritužbi pacijenata, povijesti bolesti, fizičkih podataka, laboratorijskih i instrumentalnih metoda istraživanja. Anamneza je posebnu pozornost posvetila kirurškim zahvatima, transfuzijama krvi, konzumaciji alkohola i intravenoznih droga, dugotrajnoj uporabi hepatotoksičnih lijekova te prisutnosti nasljednih bolesti.

Kriteriji isključenja: popratna patologija CNS-a, liječenje lijekovima koji imaju neurotoksične nuspojave.

Koncentracije MBP i NSE u krvnom serumu određivane su imunoenzimskim testom korištenjem kompleta reagensa komercijalnih test sustava 449-5830 DSL MBP i 420-10 Fujirebio NSE.

Statistička obrada podataka provedena je pomoću aplikacijskog paketa Statistica 6.0. Parametarski Studentov t test (t) korišten je za kvantitativnu usporedbu svojstava između dvije nepovezane skupine. Korelacijska analiza s izračunom koeficijenta korelacije (r) provedena je pomoću Spearmanova testa. Razlike su smatrane statistički značajnim na postignutoj razini značajnosti str<0,05.

Rezultati i rasprava. Koncentracija MBP u bolesnika s kroničnim hepatitisom virusne etiologije iznosila je u prosjeku 1,9±0,27 ng/ml, mješovite - 2,3±0,3 ng/ml, autoimune 2,17±0,19 ng/ml, što se nije značajno razlikovalo od rezultata dobivenih u skupini donora - 1,9±0,3 ng/ml (p>0,05) (slika 1). Značajniji porast razine MBP-a utvrđen je u bolesnika s kroničnim hepatitisom alkoholne etiologije i iznosio je 2,9±0,39 ng/ml, što je značajno nadmašilo vrijednosti dobivene u kontrolnoj skupini, kao i u bolesnika s virusna etiologija bolesti (str<0,05). Максимальная концентрация ОБМ в сыворотке крови была выявлена в группе больных ОАГ, составив в среднем 5,4±0,17 нг/мл, что достоверно превышало показатели, характерные как для здоровых лиц, так и для больных хроническим гепатитом вирусной, смешанной, аутоиммунной и алкогольной этиологии (р<0,05). В исследуемой группе пациентов ОАГ максимальная концентрация ОБМ в периферической крови наблюдалась в 75% случаев.

Rezultati dobiveni proučavanjem koncentracije NSE u bolesnika s CH i OAG bili su nešto drugačiji (slika 2).

Koncentracija NSE u bolesnika s kroničnim hepatitisom virusne etiologije bila je 6,9±0,41 ng/ml, mješoviti - 7,4±0,37 ng/ml, autoimuni - 6,4±0,52 ng/ml. Dobiveni rezultati su približni i nisu se značajno razlikovali od vrijednosti dobivenih u kontrolnoj skupini - 6,49±0,41 ng/ml (p>0,05).

Razina NSE u bolesnika s kroničnim hepatitisom alkoholne etiologije prosječno je iznosila 8,1±0,51 ng/ml, što je značajno više nego u kontrolnoj skupini, kao i u bolesnika s autoimunim i kroničnim hepatitisom virusne etiologije (p<0,05).

Najznačajnije povećanje koncentracije NSE, kao i MBP, otkriveno je u bolesnika s OAG-om, u prosjeku za 14,3 ± 0,47 ng/ml, au 81% pregledanih bolesnika dobiveni rezultati značajno premašuju pokazatelje karakteristične za donora, kao i bolesnika s kroničnim hepatitisom virusne, mješovite, autoimune i alkoholne etiologije (str.<0,05), достигая 25 нг/мл.

Riža. 1. Koncentracija MBP u bolesnika s kroničnim hepatitisom ovisno o etiologiji:

Riža. 2. Koncentracija NSE u bolesnika s kroničnim hepatitisom ovisno o etiologiji:

1 - virusni hepatitis (HBV, HCV); 2 - autoimuni hepatitis; 3 - alkoholni hepatitis;

4 - hepatitis mješovite etiologije; 5 - kontrola

Visoka koncentracija u perifernoj krvi proučavanih markera oštećenja živčanog tkiva, kao što su MBP i NSE, koje smo identificirali kod alkoholnog oštećenja jetre, vjerojatno je manifestacija demijelinizirajućih procesa, koji se često opažaju u ovoj patologiji. Otkriveni obrasci upućuju na to da uzroci razvoja atrofičnih promjena u mozgu i oštećenja živčanih vlakana (čiji su markeri MBP i NSE), koji se često nalaze u ovisnika o alkoholu, nisu samo neurotoksični učinak etanola i njegovih metabolita, već također čimbenici kao što su disfunkcija jetre, poremećaji prehrane, kao i nedostatak vitamina B i nikotinske kiseline.

Kao što je već spomenuto, glavni etiološki čimbenik koji dovodi do pojave kroničnog hepatitisa je hepatotropna virusna infekcija.

Koncentracije MBP i NSE u krvnom serumu bolesnika s hCG, ovisno o tipu hepatotropnog virusa (B i C), bile su bliske i nisu se značajno razlikovale jedna od druge, kao ni od pokazatelja dobivenih u kontroli ( p>0,05). Također, nije bilo značajnih razlika u koncentracijama proučavanih biljega destrukcije živčanog tkiva u bolesnika s CHC s genotipom 1 i genotipom „non-1“ (2 i 3a). Posljedično, razina u perifernoj krvi pokazatelja koje smo proučavali ne ovisi o vrsti virusa.

Značajno je da se koncentracijski pokazatelji MBP i NSE u bolesnika s KG virusne i KG miješane etiologije (virusna + alkoholna) međusobno značajno ne razlikuju, kao ni od rezultata dobivenih u kontrolnoj skupini (p>0,05). ). Istodobno je utvrđeno da kombinacija virusnih i alkoholnih čimbenika ima značajniji učinak na stanje proučavanih markera neurodestrukcije nego sama virusna etiologija. Dakle, ako je u bolesnika mješovite etiologije razina MBP-a u 42% slučajeva premašila pokazatelje karakteristične za zdrave osobe, tada je kod kroničnog virusnog hepatitisa samo 30%. Koncentracija NSE, odnosno, u 39% slučajeva premašila je pokazatelje karakteristične za zdrave osobe s mješovitom etiologijom bolesti, a s virusnom etiologijom samo u 31%. Po našem mišljenju, to neizravno ukazuje na to da je visoka koncentracija proučavanih markera oštećenja živčanog tkiva, otkrivena u nekih bolesnika s kroničnim hepatitisom, tipičnija u prisutnosti takvog etiološkog čimbenika kao što je zlouporaba alkohola.

Korelacijska analiza vrijednosti MBP i NSE, provedena u općoj skupini bolesnika s kroničnim hepatitisom, pokazala je nepostojanje pouzdane povezanosti između ovih pokazatelja. Istodobno, u skupini bolesnika s alkoholnim oštećenjem jetre utvrđena je pozitivna slaba korelacija između koncentracija MBP i NSE (r = 0,45), što, po našem mišljenju, neizravno ukazuje na slične mehanizme koji dovode do porasta razina ovih markera oštećenja živčanog tkiva u ovoj patologiji.

Identificirani uzorci omogućuju korištenje određivanja razine MBP i NSE u krvnom serumu bolesnika s kroničnim hepatitisom kao dodatnog markera u dijagnostici različitih etioloških oblika kroničnog hepatitisa, prvenstveno alkoholne etiologije, kao i za identifikaciju prisutnost demijelinizirajućih procesa u ovoj patologiji.

S obzirom da postoje etiološke značajke prirode tijeka ciroze, brzine progresije i razvoja komplikacija, proučavana je koncentracija MBP i NSE ovisno o etiologiji bolesti. 27 bolesnika (35%) imalo je dijagnozu ciroze virusne etiologije, 18 (23%) - alkoholičara, 22 (29%) imalo je povijest zlouporabe alkohola i virusnog hepatitisa u isto vrijeme (mješovita etiologija), 10 bolesnika (13% ) dijagnosticirana mu je primarna bilijarna ciroza. Koncentracije MBP i NSE u bolesnika s cirozom virusne etiologije iznosile su 2,3±0,42 i 8,2±0,56 ng/ml, mješovite - 2,7±0,34 i 7,8±0,43 ng/ml, bilijarne 3,2±0,39 i 8,3±0,39 ng/ml, alkoholni 3,4±0,3 odnosno 8,9±044 ng/ml.

Prosječne vrijednosti koncentracije NSE u skupinama bolesnika s cirozom virusne, bilijarne i alkoholne etiologije su značajne (p<0,05) превышали показатели в контрольной группе. В то же время отсутствовали достоверные различия концентраций НСЕ в периферической крови в зависимости от этиологии ЦП. Результаты проведённого исследования свидетельствуют, что на стадии ЦП, в отличие от ХГ, концентрация данного маркера нейродеструкции в периферической крови не связана с этиологией заболевания.

Posljedično, u fazi formirane ciroze, razlozi koji uzrokuju povećanje razine NSE u perifernoj krvi nešto su drugačiji od onih kod hepatitisa (OAS, CG). Vjerojatno vodeću ulogu ima neurotoksični učinak proizvoda endogene intoksikacije koji cirkuliraju u krvi tijekom teške disfunkcije jetre, a ne izravni učinak etanola i njegovih metabolita.

Osim što se NSE prvenstveno odnosi na intracelularne enzime središnjeg živčanog sustava i smatra se jednim od najspecifičnijih pokazatelja njegovog oštećenja, ujedno postoji pet molekularnih oblika NSE izoenzima koji se nalaze ne samo u neuronima, već također u neuroendokrinim stanicama, skeletnim mišićima i jetri, eritrocitima i trombocitima, a fluktuacije u njegovoj ukupnoj razini mogu biti izravno povezane s teškom disfunkcijom jetre i razvojem raznih komplikacija karakterističnih za cirozu.

Rezultati dobiveni proučavanjem razine MBP u perifernoj krvi bolesnika s cirozom različite etiologije bili su nešto drugačiji.

Dakle, rezultati studije pokazuju da su u slučaju ciroze bilijarne (3,2±0,39 ng/ml) i alkoholne (3,4±0,3 ng/ml) etiologije, vrijednosti MBP značajno povećane u usporedbi s kontrolnom skupinom - 1,9 ± 0,3 ng/ml i bolesnika s cirozom jetre virusne etiologije - 2,3±0,42 ng/ml (p<0,05). При ЦП вирусной этиологии уровень ОБМ был наиболее низким, сопоставимым с показателями, полученными в контроле (р>0,05). Kod ciroze mješovite etiologije (2,7±0,34 ng/ml) njegova je razina bila nešto viša nego kod virusne ciroze, a time i viša nego u kontrolnoj skupini, ali usporedbom dobivenih rezultata nisu utvrđene značajne razlike (p>0,05). Unatoč značajnoj razlici u vrijednostima MBP u krvi u bolesnika s cirozom alkoholne etiologije i PBC u usporedbi s kontrolom, nismo otkrili značajnu razliku u razini proučavanog proteina između ovih ispitivanih skupina bolesnika (p>0,05). Prosječne vrijednosti koncentracije MBP u perifernoj krvi u bolesnika s cirozom jetre mješovite i alkoholne etiologije neznatno su se razlikovale jedna od druge: 2,7±0,34 odnosno 3,4±0,3 ng/ml, nije otkrivena značajna razlika (p>0). .05). Dobiveni rezultati prikazani su na sl. 3 i 4.

Riža. 3. Koncentracija NSE u bolesnika s cirozom ovisno o etiologiji: 1 - ciroza virusne etiologije (HBV, HCV); 2 - primarna bilijarna ciroza; 3 - CP alkoholne etiologije; 4 - CP mješovite etiologije; 5 - kontrola

Riža. 4. Koncentracija MBP u bolesnika s cirozom ovisno o etiologiji: 1 - ciroza virusne etiologije (HBV, HCV); 2 - primarna bilijarna ciroza; 3 - CP alkoholne etiologije; 4 - CP mješovite etiologije; 5 - kontrola

Dakle, otkriveni obrasci slični su rezultatima dobivenim u bolesnika s kroničnim hepatitisom, u čijoj je skupini također zabilježena maksimalna koncentracija MBP u plazmi u alkoholnoj etiologiji bolesti.

Zaključak. U alkoholnim lezijama jetre, kako u stadiju kroničnog hepatitisa tako iu fazi formirane ciroze, dolazi do značajnog porasta koncentracije MBP u krvi u odnosu na virusne lezije, što potvrđuje našu pretpostavku da, osim neurotoksičnog učinka produkata endogene intoksikacije, dolazi do značajnog porasta koncentracije MBP u krvi. cirkulira u krvi tijekom teških lezija jetre , značajnu ulogu u procesima neurodestrukcije i demijelinizacije živčanih vlakana igra izravni štetni učinak etanola i njegovih metabolita.

Bibliografska poveznica

Predstavljamo vam časopise izdavačke kuće "Akademija prirodnih znanosti"