Как да вземете кръв за pcr ДНК HIV. PCR тестове за ХИВ: надеждност и характеристики на процедурата. Колко теста за ХИВ са направени

Едно от най-сериозните заболявания, което все още не е излекувано, се причинява от вируса на човешката имунна недостатъчност.

Не е лесно да се открие патоген в тялото: в момента се използват само няколко изследователски метода за това.

Един от тези тестове е полимеразна верижна реакция (PCR).

За да разберете съда на метода на полимеразна верижна реакция, трябва да запомните особеностите на структурата на клетките от училищния курс.

Всяка жива клетка съдържа протеин и два вида нуклеинови киселини: ДНК и РНК. Те са най-важните клетъчни структури, защото съдържат генетична информация, кодирана по специален начин.

ДНК кодът е строга последователност от микроструктури, които образуват дълга верига.

Справка!Способността на нуклеиновата киселина да се самовъзпроизвежда се използва като основа за PCR.

Когато вирусът навлезе в здрави клетки, той разрушава ДНК вериги.

В този случай клетката вече няма да съдържа пълни вериги, а само малки фрагменти - нуклеотиди. Освен това дори най-малките частици от вируса ще бъдат видими.

Методът на полимеразна верижна реакция е изграден върху откриването на увредени вериги на ДНК и остатъчни клетки.

Има два вида PCR диагностика:

• качество. Подходящ за тези, чиято диагноза не е потвърдена: просто показва дали вирусът присъства в клетките.
• количествен. Пациентът получава резултата „ДНК на вируса не се открива“, което означава липса на ХИВ или информация за наличието на патогена, което означава, че лицето е заразено с ХИВ.

Ако има потвърдена диагноза, се назначава количествен анализ. С негова помощ се определя броят на копията на РНК (ДНК) на вируса в кръвта (клетките). Количественият анализ дава възможност да се оцени ефективността на лечението при заразени с ХИВ хора, да се определи тежестта на заболяването, неговата прогресия.

Какви диагностични методи могат да открият HIV инфекцията е описано във видеото:

Предимства и недостатъци на този диагностичен метод

Като всяка диагностична мярка, PCR има своите плюсове и минуси.

Предимствата на метода включват:

• Висока надеждност.С PCR е възможно да се открият най-малките остатъци от вируса, вероятността за откриване на патогена достига 80% 4-5 дни след заразяването, 100% - 14 дни след заразяването. По този начин най-голямата точност се постига при изследване на ДНК на вируса в кръвните клетки: вирусът може да бъде открит, когато броят му е 1-5 копия на 1 милион клетки.
• Възможност за използване на различни биоматериали(Слюнка, урина, пот и сълзи не са подходящи за PCR, но могат да се използват кръв, сперма и генитални секрети от жени).
• Възможност за извършване на анализ на различни заболявания на една проба.С помощта на PCR можете да откриете ХИВ, хламидия, херпес, цитомегаловирус, уреаплазма, микоплазма, гонорея, трихомониаза, токсоплазмоза.
• Бърза скорост на получаване на резултати.Има експресен PCR преглед, който ви позволява да разберете диагностичните резултати след няколко часа.
• Висока чувствителност: PCR, за разлика например от ELISA, помага за откриване на вируса още през първите седмици след заразяването.
• Възможност за получаване на резултати в рамките на няколко дни след заразяването.Когато е заразен, вирусът може да се определи след 5-14 дни, докато ELISA е препоръчително да се извърши само след 6 седмици.
• Без възрастови ограничения. PCR може да се извършва както при възрастни, така и при деца от момента на раждането.

Основната характеристика на PCR анализа е, че той не открива антитела срещу вируса, а самия вирус.

Има само няколко недостатъка срещу предимствата:

• Висока цена.
• Вероятността за получаване на фалшиви положителни резултати е около 20%. Обикновено това се случва по вина на персонала (грешки при събирането или транспортирането на биоматериала, при изследването на биоматериала и интерпретацията на резултатите).
• Необходимостта от използване на модерно високотехнологично оборудване, с което са оборудвани само някои клиники.

внимание!Очевидно предимствата на техниката са много повече от недостатъците. Особено важно е, че с помощта на PCR е възможно да се открие заболяването в началния стадий на развитие и да се започне лечение навреме.

Резултатът от PCR анализа може да бъде положителен вече 14-21 дни след евентуална инфекция. Но ако анализът е отрицателен, това не гарантира липсата на инфекция. По-добре е да се проведе потвърдителен тест с ELISA мед след 2 седмици.

Как се провежда PCR тестът за ХИВ е описан във видеото:

Кой е назначен?

На първо място, PCR се предписва при съмнение за ХИВ. Техниката може да бъде показателна и за откриване на полово предавани болести, наследствени заболявания.

Справка! PCR диагностиката често се започва от лице, което не е показало симптоми на заболяването, но има спекулации и опасения за възможна инфекция, например след незащитен полов акт, скорошно кръвопреливане, контакт със заразен човек.

На кого друг е показан прегледът?

• Хора, които са дали два положителни теста за ELISA. PCR ще ви позволи да установите окончателната диагноза.
• Донори, които планират да дарят кръв.
• Хора, при които имуноблотингът е потвърдил диагнозата. Имунният блотинг е метод за диагностициране на СПИН и обикновено се извършва заедно с PCR.
• Хора, които са на етап лечение на заболявания, причинени от ХИВ. PCR ви позволява да оцените ефективността на терапията.
• Новородени, чиято майка е HIV-позитивна (предаването на вируса се случва в около 30% от случаите). Още 2-3 седмици след раждането е възможно да се определи дали е настъпила инфекция.

Някои хора се изследват като превантивна мярка, но това е рядко, тъй като цената на PCR теста е висока.

Колко време отнема анализът и къде мога да го направя?

PCR анализът за ХИВ се извършва в лабораторията.

Самото вземане на кръв отнема 5-10 минути, а резултатите са готови на следващия ден.

При избор на експресна диагностика (например в лабораториите "Инвитро" или "Хемотест") интерпретацията на резултатите от специалист отнема само 2 часа.

В частни клиники диагностиката при желание може да се извърши анонимно. За да направите това, трябва да съобщите това по време на лично посещение: на всеки пациент се присвоява сериен номер и се дава достъп до личен акаунт. Тогава човек може да разбере резултатите и без повторно посещение в лабораторията.

Надеждността на резултатите от PCR изследването е описана във видеото:

Разходи за изследване

PCR диагностиката не е евтина, тъй като изисква определено съвременно оборудване, както и специални специализирани познания.

Оборудването се предлага само в някои медицински лаборатории, което ви позволява да зададете висока цена на анализа.

Средната цена на едно изследване е 3000-5000 рубли. В някои региони цената не надвишава 1500-2000 рубли.

Тъй като има възможност за фалшиво положителни и фалшиво отрицателни резултати или лицето е кандидатствало твърде рано (вирусът все още не е нарушил структурата на ДНК, но вече присъства в тялото), може да се наложи втори тест.

Високата цена се дължи и на факта, че за диагностика са необходими редица компоненти:

1. ДНК сегмент (матрица), предназначен за амплификация;
2. два праймера;
3. Полимераза - химически активен компонент, който ускорява експоненциално увеличаването на броя на вирусните частици;
4. Дезоксирибонуклеозид трифосфати;
5. Заредени частици двувалентен магнезий;
6. Специален разтвор, в който се извършва процесът на полимеризация. Този разтвор е предназначен да поддържа подходящо ниво на киселинност, концентрация на сол, количество магнезий в течността.

Също така, изследването изисква малко количество вазелин: той съдържа мазнини и кипи при висока температура, което предпазва изследваната проба от прегряване.

Провеждане на анализ

Подходящи за анализ са кръв, сперма и вагинален секрет. обикновено, често използват венозна кръв.

Вземането на кръв се извършва сутрин на празен стомах.

Освен това трябва да се подготвите за анализа:

• 2-3 дни преди диагнозата трябва да се изключат от диетата мазни храни.
• Алкохолът се изключва 1-2 дни преди анализа.
• 2 седмици преди анализа трябва да спрете приема на имуностимулиращи лекарства.
• Последното хранене трябва да се случи не по-късно от 8 часа преди кръводаряването.

При вземане на кръв от вена вътрешният завой на лакътя се обработва със специален разтвор, след което специалистът пробива кожата, поставя иглата на спринцовката за вена и взема необходимото количество кръв. След това иглата се отстранява, мястото отново се третира със спирт, на пациента се дава памучен тампон.

Пациентът трябва временно да огъне ръката, за да спре кървенето. Ако човек се чувства добре, може веднага да се прибере у дома. При световъртеж, гадене и припадък му се оказва първа помощ.

Лаборантът поставя получения биоматериал в стерилна колба и го изпраща за диагностика. Специалистът смесва разделения биологичен материал в специален реактор с ензими, които синтезират различни инфекции.

Ако в кръвта има много малко вирусни частици, техният брой рязко се увеличава при взаимодействие с ензими: реагентите се комбинират с ДНК на вируса и го дублират.

Анализът се извършва на няколко етапа, тъй като разделянето на молекулите става експоненциално. От една клетка се оказва 2, от 2 - 4 и т.н.

Анализирайки мненията и прегледите на лекарите, можем да кажем с увереност: в момента PCR диагностиката е най-точният метод за тестване за ХИВ инфекция.

Справка!С помощта на анализа е възможно да се установи наличието на вируса в тялото още няколко дни след инфекцията, дори ако броят на вирусните структури е само 1-5 единици на милион клетки. Не забравяйте обаче за недостатъците на метода, например вероятността от получаване на фалшиви положителни резултати.

Независимо от това, PCR остава един от малкото тестове, които ви позволяват да диагностицирате болестта навреме и да започнете лечението.

Техниката за PCR диагностика първоначално е разработена преди 35 години от американския учен Кари Мълис. Изобретателят на изследването получава международна Нобелова награда през 1993 г. за пионерската си работа. Той стана незаменим за всяка лабораторна дейност.

PCR се използва в молекулярната биология за създаване на много копия (усилване) на малки участъци от ДНК. ДНК полимеразата може да добави нуклеотид само към предварително съществуваща 3-OH група. Така че той се нуждае от праймер, към който може да добави първия нуклеотид. Това изискване ви позволява да дефинирате конкретен раздел от последователността на шаблона, който трябва да бъде диагностициран. В края на PCR реакцията определена последователност ще се натрупа в милиарди копия (ампликони).

PCR включва процес на нагряване и охлаждане, наречен термичен цикъл, който се извършва от специализирани машини. Полимеразната верижна реакция (PCR) е сравнително проста техника. Той амплифицира ДНК шаблона, за да получи специфични ДНК фрагменти in vitro (ин витро анализ). Традиционните методи за клониране на ДНК последователност във вектор и репликирането й в жива клетка често изискват изследвания от няколко дни до няколко седмици работа. Но можете да получите резултатите от амплификация на ДНК последователности с помощта на PCR след няколко часа.

Повечето от биохимичните анализи, използвани при диагностицирането на инфекциозни заболявания, изискват доста голямо количество биологичен материал. За PCR това условие не е задължително. По този начин PCR може да осигури по-чувствително откриване на патогени. И по-високи нива на усилване на определени последователности за по-кратко време с доста ограничено количество биоматериал. Тези характеристики правят техниката изключително полезна. Не само във фундаментални изследвания, но и за лични цели. Включително тестове за генетична идентичност, криминалистика, промишлен контрол на качеството.

Основната стойност на анализа е възможността за откриване на полово предавани патологии преди появата на първите признаци. PCR анализът се използва, ако е необходимо ранно диагностициране на HIV инфекцията. Както и определяне на РНК на вируса в кръвта на донор. Поради високата чувствителност на анализа, отговор може да се получи 7-14 дни след предполагаемата инфекция. Надеждността на диагнозата ще достигне от 85 до 98%. PCR тестът обаче не се възлага на всички. Защото е доста скъпо изследване. Най-важното е, че изисква скъпо оборудване и определени професионални умения от лабораторния персонал. Ако пациентът преди това не е бил в ситуации, свързани с повишен риск от инфекция, полимеразна реакция не е препоръчителна.

Качествен тип полимеразна реакция за HIV

Провеждането на висококачествена PCR за ХИВ ви позволява да определите наличието на вирусно заболяване в тялото. Пациентът може да получи резултата под формата на следните оценки: положителен, фалшиво положителен, отрицателен. Но изследването не дава възможност да се определи броят на копията на ретровируса. Качественият анализ не се извършва при пациенти, които преди това са били диагностицирани с инфекция. Не се предписва като контрол върху ефективността на антивирусната терапия.

PCR количествен тип за ХИВ

Провежда се с цел определяне на копия на вирусната РНК в биологичния материал на пациента. Количественият PCR се предписва само за пациенти с предварително идентифицирана инфекция, като мониторинг на текущото лечение.

PCR в реално време

Използва се в лабораторната диагностика за формиране на копия на ДНК участъци. Също така за едновременно количествено изследване и откриване на ДНК последователността в биоматериала. Всъщност диагнозата е количествена PCR.

За бележка!

В различни лаборатории можете да намерите няколко диагностични формулировки: „PCR количествено определяне“ и „PCR в реално време“.

И двата анализа са идентични.

Вземане на материал за диагностика на ХИВ

Вземането на проби от биологичен материал за диагностика на ХИВ чрез PCR се извършва съгласно определени стандарти. Манипулацията се извършва в лечебната зала. Използват се еднократни стерилни инструменти. Отварянето на опаковката с инструменти се извършва директно в близост до пациента. Събраният материал се поставя в стерилни епруветки, предварително обработени с CrO3 (хромна смес). Биологичният материал е венозна кръв, която се дарява сутрин и на гладно. Няколко дни преди теста трябва да изключите употребата на алкохол, мазни и пикантни храни, да спрете приема на лекарства.

Ако не е възможно изтеглянето на лекарствените продукти, това трябва да се съобщи преди анализа.

Освен това може да се вземе тампон от уретрата и влагалището за идентифициране на съпътстващи полово предавани болести. Изследването се провежда анонимно, пациентът получава резултатите лично. Препоръчително е да носите документ за самоличност със себе си.

Колко дълго мога да приемам PCR за ХИВ

Възможно е по-късно да се установи наличието на ХИВ вирус 4-6 дни след заразяването. В този случай информационното съдържание на анализа ще достигне 85%. След 10-13 дни анализът може да определи заболяването с точност от 98%. Отрицателният резултат ще бъде валиден само ако е подаден не по-рано от 2 седмици след предполагаемата инфекция.

Причини за фалшив положителен резултат

Трудно е да се получи фалшив положителен резултат.

Това е възможно в случай на неспазване на правилата за вземане на проби от биологичен материал, неправилно етикетиране на епруветката, използване на нискокачествена тестова система и други подобни фактори. В други случаи шансът за получаване на такъв резултат е не повече от 2%.

Колко време отнема получаването на резултатите от теста?

От техническа гледна точка резултатите от PCR могат да бъдат получени в рамките на 4 часа. На практика обаче пациентът получава лабораторно заключение от един до няколко дни. Като цяло времето зависи от натовареността на лабораторията и от това доколко е организирана нейната работа.

Провеждане на полимеразна реакция при новородено

PCR се предписва, когато дете се роди от HIV-позитивна майка. Провеждането на ELISA в този случай не е информативно. Тъй като детето има антитела срещу ретровируса до около 2-годишна възраст. Поради тази причина ензимният имуноанализ няма да даде точен отговор. При провеждане на PCR при дете на възраст 4-6 седмици и получаване на положителен резултат, ще говорим за инфекция.

Ако PCR, извършен на възраст от 8 седмици до шест месеца, показва отрицателни резултати (при условие, че детето не се храни с майчиното мляко), инфекцията е изключена.

Защо ELISA е по-добър за определяне на HIV?

Полимеразната реакция ви позволява да идентифицирате РНК на вируса, неговото присъствие в тялото, включително количествено. Задачата на ELISA е да определи антитела срещу HIV инфекция. Ензимният имуноанализ за определяне на възможна инфекция не е по-нисък от PCR, неговата точност достига 99%. Въпреки това, за разлика от PCR, той не е в състояние да определи заболяването в ранните етапи на неговото развитие.

Ползи от PCR за ХИВ

• Полимеразната реакция директно определя наличието на инфекциозен агент. Например, ELISA може да открие само антитела и отпадъчни продукти на даден микроорганизъм.
• Анализът ясно идентифицира определен патоген, дори ако има няколко кръстосано реагиращи.
• Техниката позволява да се изследва всякакъв вид биологичен материал, включително изсъхнали капки кръв.

Сред недостатъците на PCR може да се отбележи повишената чувствителност на анализа. Това понякога води до фалшиво положителен резултат. Това се случва, когато дори малко количество чужда ДНК присъства в епруветката или върху инструментите.

Диагностика на ХИВ чрез PCR и ELISA: интерпретация, надеждност на резултатите

ELISA, при който резултатите от теста показват липсата на антитела срещу HIV и антигена p24 в тялото, е отрицателен. Ако тези молекули присъстват, се издава положително диагностично заключение. В някои случаи пациентът може да получи фалшиво положителен или фалшиво отрицателен резултат. Това е следствие от ранна бременност, наличие на херпесна инфекция, неправилно вземане на материал и нарушения на транспортирането на епруветки. Освен това подобни резултати се откриват при пациенти с протичащи автоимунни заболявания и различни видове хепатит. Може да се извърши Western Blot (имунно блотиране), което комбинира ELISA и разделяне на вирусни протеини.

Тогава положителен резултат ще бъде в присъствието на гликопротеина на вирусната инфекция gp160. Той е предшественик на обвивните гликопротеини на HIV gp41 и gp120. Ако тези молекули отсъстват, заключението на лабораторното изследване се счита за отрицателно. Провеждането на Western Blot в комбинация с ELISA ви позволява да получите резултати, чиято надеждност надвишава 98%. В случай, че ELISA е положителен, а Western Blot е отрицателен, тестът се счита за съмнителен и изисква PCR.

За повечето жени и мъже тази полово предавана болест е най-страшната. Поради тази причина, след случайна интимна връзка без бариерна контрацепция, както и при честа смяна на сексуални партньори и след хирургични операции, разумният човек изпитва известна тревога. Най-надеждният начин за изясняване е да отидете в клиниката и да направите PCR тест за ХИВ.

Кръвният тест може да се използва за определяне на следните показатели:

• Отричане / потвърждаване на наличието на ХИВ в латентния период (през първите седмици след инфекцията антителата не се откриват в тестове ELISA поради тяхното отсъствие или твърде ниска концентрация).
• Определяне на генотипа на HIV-1, HIV-2.
• Идентифициране на състоянието при деца, родени от майки-носители (антитела срещу ХИВ се откриват дълго време при всички деца, родени от жени, заразени с ХИВ. Желателно е да се определи ДНК на вируса при деца под 48 години часове живот, 1-2 месеца, 3-6 месеца).
• Фалшиво-отрицателни, фалшиво-положителни и съмнителни резултати от ELISA тестове.
• Диагностика на количеството на ХИВ и проследяване на промените във вирусния товар във времето (при вече установена диагноза СПИН се използва PCR анализ за прогноза, динамично наблюдение и проследяване на провежданата терапия).

Цена на PCR тест за ХИВ

PCR АНАЛИЗ ЗА ХИВ - КОГА СЕ ПРАВИ, ЗАЩО И В КАКВО ВРЕМЕ

1. ХИВ ДНК.ДНК диагностиката на вируса на човешката имунна недостатъчност (HIV) може да се използва за откриване на ранна възможна инфекция след високорисково събитие (кръвни тестове се вземат най-рано 10 дни след потенциална инфекция). Въпреки това, за да се изключи напълно инфекцията, е необходимо впоследствие да се проведе второ проучване и ELISA диагностика на 4 и 12 седмици.
   Резултати от анализа: HIV ДНК (качествен анализ)- "не е намерено" или "намерено". В последния случай са необходими повторни допълнителни изследвания за потвърждаване на HIV инфекцията. Ако резултатът е отрицателен, но има висок риск от инфекция, е необходимо повторно изследване - кръводаряване чрез PCR или ELISA след известно време.
2. HIV РНК.Количественото определяне на HIV РНК чрез PCR (така нареченото "вирусно натоварване") е един от показателите за оценка на прогнозата на хода на HIV инфекцията и най-ранният показател за ефективността на антивирусната терапия. Тестът е показан за проследяване на хода на заболяването, вземане на решение дали да започне терапия и оценка на нейната ефективност.
   Изследването на ХИВ РНК чрез PCR може да се използва при възрастни с ранна надеждна диагноза на възможна инфекция след високорисков епизод (приблизително 7-10 дни след вероятна инфекция). Наличието на висок титър на HIV РНК при липса на антитела позволява диагностицирането на остра HIV инфекция. Въпреки това, за да се изясни диагнозата, е необходимо да се проведе повторно изследване и ELISA диагностика в рамките на 1 и 3 месеца.
   Доставянето на PCR HIV РНК при бременни жени с тази инфекция 3-4 седмици преди очакваната дата на раждане е показано за решаване на въпроса за метода на раждане (през естествения родов канал или чрез цезарово сечение).
   Резултати от анализа: HIV тип 1 HIV РНК (количествен анализ)- "не е открито" (това е нормално).
3. ХИВ резистентност.Анализът за определяне на резистентността на HIV към инхибитори на протеаза и обратна транскриптаза е показан при пациенти с HIV инфекция с неефективна терапия, както и по време на остра инфекция преди започване на антивирусно лечение. Проучването ви позволява да определите устойчивостта на ХИВ към лекарства. Въз основа на резултатите от анализа специалистът по инфекциозни заболявания научава за наличието на резистентни мутации към протеазни инхибитори, нуклеозидни и ненуклеозидни инхибитори на обратната транскриптаза, както и информация за всяка аминокиселинна позиция, свързана с мутация на лекарствена резистентност.
4. Multiprime комплексна диагностика:качествено определяне на РНК на вируса на хепатит С / ДНК на вируса на хепатит В / РНК на човешкия имунодефицитен вирус (HIV) тип 1 и 2 (ултрачувствителен метод). Анализът позволява диагностициране на ХИВ инфекция, вирусен хепатит С и В на ранен етап. Изследването е показано за ранно откриване на вирусен хепатит B и C, HIV тип 1/2 при лица в риск. Откриването на ДНК или РНК вируси показва инфекция.

Срокове на готовност на тези кръвни изследвания - от 3 до 7 календарни дни. Можете да преминете качествен и количествен PCR анализ за диагностика на ХИВ инфекция в Москва в нашия медицински център. Вземане на кръв всеки ден, от 10-00, включително

PCR за HIV е един от най-информативните методи за молекулярно-генетична диагностика. Този метод помага да се идентифицират различни инфекциозни заболявания на пациента и заболявания, които са наследени. Същият диагностичен метод е приложим в случай на проверка на биоматериала за наличие на ХИВ, сериозно заболяване, което се развива през целия живот на пациента. С медицинска помощ PCR се превърна в един от препоръчителните тестове, извършвани срещу заплащане при съмнение за човешки имунодефицитен вирус. Въпреки това, надеждността на изследването се оправдава само в 80 от 100 случая.

PCR диагностиката за ХИВ означава полимеразна верижна реакция. За изследване на този вид се използват различни видове биологични материали. Сред тях може да се използва кръв, в допълнение, секрет от влагалището на пациента или семенна течност при мъжете.

внимание! Слюнката за PCR не се използва при диагностицирането на ХИВ. Такъв подход се признава за неефективен, тъй като антителата срещу HIV са в минимална концентрация в този материал. Същото важи и за урината, потта и сълзите.

Индикацията за описаното изследване е двойно положителен ELISA (ензимен имуноанализ). За алтернативните дестинации ще стане дума по-късно.

Повече за същността на анализа

В основата на анализа за HIV чрез PCR е способността на нуклеиновата киселина да се възпроизвежда. Живите клетки се състоят от протеин и същите тези киселини, с други думи, от РНК и ДНК. Молекулите действат като пазители на генетичния код.
При ниска концентрация на вирусни частици (HIV) в биоматериала пробата не включва цели вериги на ДНК (дезоксирибонуклеинова киселина), а само техните компоненти, наречени нуклеотиди. Анализът позволява да се открият дори незначителни остатъци от вирусни клетки. Именно този факт обяснява способността на PCR да демонстрира резултати в ранните етапи - няколко седмици след HIV инфекцията.

Най-качествените резултати от полимеразната верижна реакция трябва да се очакват при изследване на венозна кръв. Пробата се смила с оборудването. След това фракциите се подлагат на ензимна обработка. Реактивните вещества, комбинирани с частици от вирусна ДНК, го дублират. Броят на такива елементи се увеличава според принципа на веригата, докато тяхното присъствие (а не антитела) в кръвта на пациента стане забележимо за лабораторните асистенти. Нито един от съществуващите диагностични методи не работи на абсолютно същия принцип.

Реакционни компоненти

Използвайки PCR метода, можете предварително да разберете за развитието на вируса в тялото. Защо не може да се нарече популярно в сферата на безплатната медицина и да се прави навсякъде? Факт е, че такъв тест за ХИВ е много скъп и изисква следните компоненти:

• матрица от дезоксирибонуклеинова киселина, включително сегмент от ДНК, предназначен за амплификация;
• два праймера (за всеки сегмент на веригата);
• химически активен компонент полимераза за ускоряване на полимеризацията на вирусни частици;
• дезоксирибонуклеозид трифосфати;
• частици двувалентен магнезий (заредени);
• специално решение за създаване на благоприятни условия, осигуряващи правилното ниво на киселинност, концентрация на сол, брой магнезиеви частици в течността.

внимание! За да се предпази пробата от прегряване, към материала се добавя малко количество вазелин, който съдържа мазнини и съответно висока точка на кипене.

Относително високата степен на точност на анализа се дължи на неговата повишена чувствителност, която стимулира реакцията към антитела към други вируси.

Предимства и недостатъци на PCR техниката за HIV

За обективна оценка на метода в таблицата по-долу представяме редица предимства и недостатъци на изследването:

Очевидно предимствата на техниката са по-големи. Ако оценим вида на диагнозата по отношение на продуктивността на по-нататъшното лечение и възможността за удължаване на живота на пациента, PCR е най-сигурният начин за успех.

Функции за анализ

Основната характеристика на описания анализ е способността му да диагностицира ХИВ ранно, на което други методи на изследване не са способни. Колко дни след предполагаемата инфекция мога да даря кръв за PCR? Обикновено този период от време е 10-14 дни. В рамките на следващите 24 часа пациентът получава резултата. Възможните отклонения в сроковете се обясняват с индивидуалните условия на работа на диагностичните центрове и клиники.

Цел на изследването

PCR се извършва най-вече за откриване на HIV (синдром на човешка имунна недостатъчност). Въпреки това, анализът може да се вземе и ако подозирате развитието на болести, предавани по полов път. Същият метод е приложим и при диагностика на наследствени заболявания.

PDR диагностика: причини за провеждане

Кога трябва да даря кръв за PCR? В повечето случаи биологичният материал се дарява, когато вирусът на човешката имунна недостатъчност се е адаптирал към условията на организма, стимулирал е производството на антитела и е причинил първите симптоми на ХИВ. Това обаче е оправдано само ако е изминало достатъчно време след заразяването и включва ELISA.

Необходимостта от PCR възниква по инициатива на пациента, който иска своевременно да диагностицира заболяването (ако има такова). Причината за това може да бъде: незащитен полов акт, контакт с биологичен материал на заразен човек, скорошно кръвопреливане и др.

Кой е назначен за PCR?

Определянето на HIV инфекция чрез PCR по препоръка на специалист се извършва в следните случаи:

• предварителна диагноза. PCR точно потвърждава или опровергава резултата от ELISA;
• Western blotting потвърди диагнозата. Имуноблотингът е допълнителен начин за изследване на СПИН . И двата метода се използват заедно, което елиминира възможността за поставяне на грешна диагноза;
• с потвърден ХИВ статусчрез PCR се проследява ефектът от избраното лечение;
• за изследване на донорска кръвза наличие на HIV антитела;
• за определяне на HIV статуса на новородено, когато майката е положителна. PCR в първите дни от живота ви позволява да определите вътрематочна инфекция или инфекция на бебето по време на преминаване през родовия канал. Изследването се провежда 2-3 седмици след раждането.

Колко време отнема PCR анализ и къде може да се направи?

PCR анализът за ХИВ се извършва в специална лаборатория. Самият тест и тълкуването на резултата не изисква много време: месец или дори седмица. Вземането на кръв отнема до 6 минути. В обичайния случай специалистът ще се нуждае от не повече от ден, за да постави диагноза и да издаде заключение. Първите 8 часа са изследване на кръвта, останалото време се изразходва за регистрация. Резултатът може да бъде взет още на следващия ден след вземане на пробата. Продължителността на експресното тестване е 2 часа.

внимание! Полицата за задължителна медицинска застраховка дава възможност за безплатно преминаване на теста в обществена здравна институция.

Почти всяка комерсиална лаборатория може да провежда изследвания, при това на анонимна основа. На човек се присвоява специален номер, към който след това се обвързват резултатите. Тази информация се качва на уебсайта на институцията в личния акаунт на потребителя.

Колко струва да си направите PCR тест?

Този метод за провеждане на изследване е доста скъп. Това се дължи на факта, че е необходимо да се извърши PCR на най-новото медицинско изделие, манипулацията изисква достатъчно познания от специалисти.

Спешен въпрос: колко струва човек да направи PCR тест за ХИВ? Това ще изисква около 56-60 долара.

Провеждане на анализ

Провеждането на PCR тест за ХИВ включва:

• вземане на кръв за изследване;
• допълнително вземане на проби от сперма от мъж и генитален секрет от жена.

внимание! В резултат на това тестът позволява на лекарите да определят висок вирусен товар, за да наблюдават състоянието на пациента.

Други характеристики на този тест за ХИВ, които трябва да имате предвид:

• няколко дни преди изследването пациентът трябва да намали количеството мазни храни в диетата;
• вземането на кръв се извършва на празен стомах;
• към разделените биологични материали в специален реактор се добавят ензими, синтезиращи различни инфекции;
• анализът се извършва на няколко етапа, тъй като разделянето на молекулите се извършва в аритметична прогресия. Специална програма сравнява голям брой клетъчни структури за откриване на ХИВ.

Точните диагностични методи, които включват PCR, са скъпи, но могат да открият ХИВ рано. При лечението на такива патологии най-важното е правилната и навременна диагноза, която може да подобри качеството на човешкия живот и неговата продължителност.

Един от най-точните и надеждни методи за молекулярно-генетична диагностика се счита за PCR, тоест полимеразна верижна реакция. Този метод позволява да се диагностицират различни видове заболявания от наследствен и инфекциозен характер при пациент.

PCR - изследване ви позволява да диагностицирате едно от толкова сложни заболявания като, което е трудно за лечение. Надеждността на PCR за ХИВ се оправдава само в 80 от 100 случая.

Основният начин за диагностициране на ХИВ инфекцията в човешкото тяло се счита за неговата кръв, т.е. се извършва изследване за това заболяване. Най-простият и често срещан начин за диагностициране е вземането на венозна кръв и провеждането й в специална лаборатория. Разбира се, полученият положителен резултат може да е фалшив, поради което се проверява повторно по по-точен изследователски начин в референтната лаборатория.

Полимеразната верижна реакция се счита за доста скъпа процедура и нейното прилагане изисква специално оборудване и висококвалифицирани специалисти. Поради тази причина той не е получил широко разпространение сред населението.

Използването на PCR анализ за диагностика на ХИВ ви позволява да получите точен и надежден резултат за наличието на заболяването, но това често зависи от подготовката на самия пациент.

PCR анализът се извършва в следните случаи:

1. Диагностика на ХИВ инфекция при новородени, родени от майка, заразена със СПИН.
2. За контрол на концентрацията на ХИВ в кръвта на пациента
3. Изследване на донорска кръв.

Дори PCR тестът да покаже положителен резултат, тогава диагнозата не се поставя само с такъв тест. Най-често се използва като допълнителен метод за разрешаване на спорове.

PCR анализът, за съжаление, не може да се нарече универсален метод, който дава точни резултати за наличието или отсъствието на инфекция в човешкото тяло. Това се дължи на факта, че този тип изследване по-често от другите методи дава фалшиво положителни резултати. Този диагностичен метод се използва при диагностициране на заболяване или при провеждане на ХИВ инфекция. Използва се предимно като спомагателен метод за диагностика на вируса на СПИН.

Но въпреки възможността за фалшив положителен резултат, такъв тест за ХИВ има редица предимства пред други диагностични методи. PCR анализът може да се извърши още 11-15 дни след датата на предполагаемата инфекция, а всички други методи позволяват да се оцени наличието на вируса на СПИН в човешкото тяло само след дълъг период от време. Това несъответствие се обяснява с факта, че повечето скринингови тестове за ХИВ се основават на определянето на вируса, чието образуване се случва в рамките на три месеца.

Основната разлика между PCR изследването и другите диагностични методи е фактът, че той не открива вирус, а наличието на самия вирус в тялото на пациента.

Поради тази причина методът на полимерната верижна реакция може да се нарече идеален, ако има нужда от ранно откриване. Освен това е възможно да се прибегне до провеждането на такъв метод в случай, че наличието на антитела не може да бъде надежден индикатор.

Научете повече за изследванията за ХИВ във видеото.

Ако е необходимо да се установи степента или тежестта на патологията в човешкото тяло, те прибягват до провеждане на PCR изследване по количествен начин. Именно той ви позволява да получите информация за нивото на концентрация на инфекция в тялото на пациента. Прогресията на заболяването е придружена от постепенно увеличаване на концентрацията на вируса и количествената PCR диагностика ви позволява да определите стадия на инфекцията и ефективността на протичащата. Диагностицирането на "вирусния товар" преди диагностицирането на заболяването и след лечението ви позволява да направите заключение колко ефективно е лечението.

Други диагностични методи за ХИВ

Към днешна дата диагнозата ХИВ инфекция е стандартна процедура, която включва използването на различни видове диагностика:

ELISA тест системи

Такъв скринингов тест може да открие вируса в рамките на няколко седмици след влизането му в човешкото тяло. Такова изследване не е насочено към определяне на наличието на вирус при пациент, а към диагностициране на производството на антитела към него. Има няколко поколения ELISA тестове, всяко от които има различна чувствителност. Такова изследване понякога дава резултати, което се обяснява с неправилна обработка и наличието на различни видове патологии в тялото на пациента.

имунно блотиране

В случай, че имунният блот покаже положителен резултат, тогава можем да говорим за поставяне на окончателна диагноза ХИВ. Основният метод за неговото прилагане е използването на нироцелулозна лента, върху която се нанасят протеини от вирусен произход.

Експресни методи

Това се счита за новост в областта на диагностиката на HIV инфекцията и резултатът може да бъде оценен в рамките на няколко минути след извършването им. Най-точни и надеждни резултати дават имунохроматографските тестове, чието използване се основава на принципа на капилярния ток.

Възможно е да се говори за наличието на HIV инфекция в тялото само след потвърждаване на ELISA тестовете с IB анализ.

Диагнозата на ХИВ инфекцията в човешкото тяло прави значителни промени в обичайния му начин на живот и отношенията с другите. Задължение на медицинския персонал е да пази резултатите от изследванията, а само пациентът решава на кого да съобщи за заболяването си. PCR е един от диагностичните методи, който може да открие наличието на вирус в човешкото тяло само за няколко седмици.