Suvremene metode analize lijekova. Istraživački rad "analiza lijekova". Ljekovita tvar je čista ako se daljnjim pročišćavanjem ne mijenja njena farmakološka aktivnost, kemijska stabilnost, fizikalna svojstva

Trenutno se za kvantitativno određivanje ljekovitih tvari u regulatornoj dokumentaciji (GF CHYY) prilično široko koriste klasične (titrimetrijske) metode analize, ali u ovom slučaju određivanje se ne provodi na temelju farmakološki aktivnog dijela molekule.

Nitrometrija je titrimetrijska metoda analize u kojoj se kao titracijski reagens koristi otopina natrijeva nitrita.

Koristi se za kvantitativno određivanje spojeva koji sadrže primarnu ili sekundarnu aromatsku amino skupinu, za određivanje hidrazina, kao i aromatskih nitro spojeva nakon prethodne redukcije nitro skupine u amino skupinu. Točan odvagan uzorak lijeka, naveden u privatnoj farmakopejskoj monografiji, otopi se u smjesi od 10 ml vode i 10 ml klorovodične kiseline, razrijeđene 8,3%. Dodati vodu do ukupnog volumena od 80 ml, 1 g kalijevog bromida i uz stalno miješanje titrirati s 0,1 M otopinom natrijevog nitrita. Na početku titracije dodaje se otopina natrijeva nitrita brzinom od 2 ml/min, a na kraju (0,5 ml prije ekvivalentne količine) - 0,05 ml/min.

Titracija se provodi pri temperaturi otopine od 15-20°C, ali u nekim slučajevima potrebno je hlađenje na 0-5°C.

Točka ekvivalencije se određuje elektrometrijskim metodama (potenciometrijska titracija, amperometrijska titracija) ili pomoću internih indikatora.

U potenciometrijskoj titraciji kao indikatorska elektroda koristi se platinska elektroda, dok se kao referentne elektrode koriste srebro-kloridne ili zasićene kalomelne elektrode.

Na elektrode se dovodi potencijalna razlika od 0,3-0,4 V, osim ako nije drugačije navedeno u privatnoj farmakopejskoj monografiji.

Kao unutarnje indikatore koristiti tropeolin 00 (4 kapi otopine), tropeolin 00 pomiješan s metilenskim plavim (4 kapi otopine tropeolina 00 i 2 kapi otopine metilenskog modrila), neutralno crveno (2 kapi na početku i 2 kapi na kraju). titracije).

Titracija s tropeolinom 00 provodi se dok se boja ne promijeni iz crvene u žutu, mješavinom tropeolina 00 s metilen modrilom - od crveno-ljubičaste do plave, s neutralnom crvenom - od crveno-ljubičaste do plave. Vrijeme zadržavanja na kraju titracije s neutralnim crvenilom povećava se na 2 minute. Istodobno se provodi kontrolni pokus.

Nitrometrijom se određuju: kloramfenikol, novokain hidroklorid, paracetamol, sulfadimetoksin. Određivanje se temelji na aromatskoj amino skupini.

Metoda nevodene titracije koristi se za određivanje arbidola, artikain hidroklorida, atenolola, aciklovira, diazolina, difenhidramina, droperidola, drotaverin hidroklorida, izoniazida, ketamin hidroklorida, klotrimazola, klonidin hidroklorida, kodeina, kodein fosfata, kofeina, bezvodnog kofeina, metronida zol. , diklofenak natrij, nikotinamid, nitrazepam, papaverin hidroklorid, piridoksin hidroklorid, piroksikam, fenpiverinijev bromid, kloropiramin hidroklorid, verapamil hidroklorid, haloperidol, gliklazid, diazepam, itrakonazol, klemastin fumarat, meloksikam, meldonij, metformin hidroklorid, natrijev kromoglikat, tiamin klorid, tinidazol , tioridazin, tioridazin hidroklorid, fenazepam. Ova se metoda koristi za kvantificiranje više od polovice ljekovitih tvari uključenih u Globalni fond ChYY. Nedostatak ove metode je što se uz nerazgrađene lijekove perklornom kiselinom mogu titrirati i produkti raspadanja lijekova koji imaju bazična svojstva.

Kvantitativno određivanje analgina prema GF ChYY provodi se jodometrijskom metodom. Oko 0,15 g (točno odvagane) tvari stavi se u suhu tikvicu, doda se 20 ml 96% alkohola, 5 ml 0,01 M otopine klorovodične kiseline i odmah titrira s 0,1 M otopinom joda uz miješanje do pojave žute boje, koji ne nestaje u za 30 s. . Metoda se temelji na oksidaciji sumpora plus 4 u sumpor plus 6. Nedostatak metode je što se određivanje ne provodi na temelju farmakološki aktivnog dijela molekule (1-fenil-2,3-dimetil-4 -metilamino pirazolon-5).

Metodom alkalimetrije određuju se acetilsalicilna kiselina, glutaminska kiselina, doksazosin mezilat, metiluracil, naproksen, nikotinska kiselina, pitofenon hidroklorid, teofilin, furosemid - točka ekvivalencije se utvrđuje pomoću indikatora. Bromheksin hidroklorid, lidokain hidroklorid, lizinopril, ranitidin hidroklorid - s potenciometrijskim završetkom. Standardizacija ovih tvari provodi se uglavnom prema HCl, koja nije farmakološki aktivna tvar.

HPLC metoda GF ChYY preporučuje korištenje za određivanje guaifenesina, karbamazepina, ketorolaka, riboksina, simvastatina, ondansetron hidroklorida. Određivanje se provodi na temelju farmakološki aktivnog dijela molekule lijeka.

Spektrofotometrijskom metodom određuju se hidrokortizon acetat, spironolakton i furazolidon. Metoda nije dovoljno selektivna, budući da proizvodi razgradnje i tvar koja se proučava mogu imati iste maksimume apsorpcije svjetlosti.

Na sadašnjem stupnju razvoja farmaceutske kemije, fizikalno-kemijske metode analize imaju niz prednosti u odnosu na klasične, jer se temelje na korištenju fizikalnih i kemijskih svojstava ljekovitih tvari i u većini slučajeva karakterizira ih brzina, selektivnost, visoka osjetljivost, mogućnost unifikacije i automatizacije.

GLC metoda je univerzalna, visoko osjetljiva i pouzdana. Ovu metodu za kvalitativno i kvantitativno određivanje dimeksidne masti 50% koristio je M.V. Gavrilin, E.V. Kompantseva i drugi.

A.G. Vitenberg je tijekom proučavanja klorirane vode iz slavine otkrio da sadržaj nečistoća hlapljivih halogeniranih ugljikovodika ne ostaje konstantan i raste kako voda ostaje u vodoopskrbnom sustavu. To ukazuje na nepotpunost kemijskih transformacija humusnih tvari nakon kloriranja vode. Postojeće certificirane metode koje se temelje na plinskoj kromatografskoj analizi iznad prostora ne uzimaju u obzir ovu značajku i omogućuju određivanje samo slobodnih halogeniranih ugljikovodika. Provedena je usporedna procjena službenih metoda te su identificirani izvori pogrešaka koje prelaze prihvatljive vrijednosti. Predloženi su načini za optimizaciju svih faza analize kako bi se stvorile metode koje daju minimalne pogreške i pouzdane informacije o sadržaju hlapljivih halogeniranih ugljikovodika u vodama iz slavine i otpadnim vodama.

Plinska kromatografija korištena je za određivanje amfetamina, barbiturata, benzodiazepina i opijata u urinu korištenjem mikroekstrakcije lijekova na visokoj temperaturi u čvrstoj fazi.

Siang De-Wen upotrijebio je ionsku kromatografiju za određivanje anionskih izmjenjivača u vodi za piće. Metoda se pokazala jednostavnom, brzom i točnom (svi anioni se detektiraju istovremeno sa standardnom devijacijom od ?3%, regeneracijom 99,7% i 102%). Analiza je trajala 15 minuta.

Niz autora je izračunao: razlike u retencijskim indeksima plinske kromatografije produkata kloriranja alifatskih ketona i polaznih karbonilnih spojeva su konstantne. Njihove numeričke vrijednosti ovise o broju i položaju atoma klora u molekuli. Razvili smo varijantu aditivnih shema za procjenu retencijskih indeksa za identifikaciju kloriranih karbonilnih spojeva. I.G. Zenkevich je uspostavio redoslijed kromatografske elucije dijastomera b-b"-diklor-K-alkana (K?2).

I.V. Gruzdyev i koautori proučavali su 2- i 4-kloranilin, 2,4- i 2,6-dikloranilin, 2,4,5- i 2,4,6-trikloranilin i nesupstituirani anilin, razvili metode za određivanje njihovih tragova u vode za piće, uključujući pripremu brom derivata, tekuću ekstrakciju toluenom, kao i za određivanje difenhidramin hidroklorida i njegove baze u prisutnosti produkata razgradnje.

V G. Amelin i suradnici koristili su plinsku kromatografiju s detektorom masene spektrometrije s vremenom leta za identifikaciju i određivanje pesticida i policikličkih aromatskih ugljikovodika (46 sastojaka) u vodi i hrani.

Potapova T.V., Shcheglova N.V. Pri proučavanju ravnotežnih reakcija stvaranja kompleksa cikloheksadiamintetraacetata, etilendiamintetraacetata, dietilentriaminpentaacetata nekih metala korištena je metoda kromatografije ionske izmjene.

Koristeći analitičke sustave (tekućinska kromatografija, masena spektrometrija), Sony Weihua i niz autora utvrdili su da su u procesima koji uključuju OH radikale aktivnih elektrolita farmaceutski lijekovi gotovo potpuno uništeni.

Vitaliev A.A. i drugi su proučavali uvjete za izolaciju ketorolaka i diklofenaka iz bioloških tekućina. Predložili su metodu ekstrakcije organskim otapalima pri različitim pH vrijednostima. Za identifikaciju analita korištena je TLC metoda.

Korištenje planarne kromatografije na primjeru aminokiselina i amlodipina demonstrirali su Pakhomov V.P., Checha O.A. za proučavanje i razdvajanje optički aktivnih ljekovitih tvari u pojedinačne stereoizomere s naknadnom identifikacijom.

Metoda kapilarne plinske kromatografije u kombinaciji s masenom spektrofotometrijom pokazala je da je ekstrakcija steroida iz krvi najpotpunija (~100%).

Koristeći recirkulacijsku HPLC, znanstvenici su izolirali osam necitotoksičnih modifikacija otpornosti bakterija na lijekove.

N.N. Dementieva, T.A. Zavrazhskaya je koristila metode plinske kromatografije za analizu različitih lijekova u injekcijskim otopinama i kapima za oči.

Tekućinskom kromatografijom određen je hiperacin i pseudohiperacin u farmaceutskim pripravcima s fluorescentnom detekcijom. Ista je metoda identificirala valproičnu kiselinu u ljudskom serumu, granica detekcije bila je 700 mmol/l. HPLC metodom određen je dinatrijev kromoglikat u lijekovima. Koristeći ovu metodu, bilo je moguće detektirati 98,2-100,8% analita dodanog uzorku.

MI. Evgeniev i njegovi kolege utvrdili su utjecaj prirode i polariteta eluensa, sadržaja vodene faze u smjesi vode i nevode i njezinog pH na pokretljivost 5,7-dinitrobenzofurazin derivata niza aromatskih amina pod Uvjeti UV-HPLC. Kolona ZORBAX SB-C18 razvijena je za odvajanje smjese šest aromatskih amina.

Pri razvoju metoda za procjenu kvalitete novokaina, ciklometazidina, sidnokarba A.S. Kvach i koautori koristili su metode HPLC i adsorpcijske kromatografije na mikrokolonu u kombinaciji s fotometrijskom metodom analize, čime je omogućeno kvantitativno određivanje novokaina u tvarima i tekućim oblicima doziranja po farmakološki aktivnom dijelu molekule.

I.A. Kolychev, Z.A. Temerdašev, N.A. Frolov je razvio HPLC metodu za određivanje dvanaest fenolnih spojeva u biljnim materijalima pomoću HPLC reverzne faze s UV detekcijom i načinom eluiranja eluenta. Proučavali smo utjecaj različitih separacijskih faktora galne, trans-ferulne, protokatehinske, trans-kafeinske kiseline, kvercetina, rutina, dihidrokvercetina i epikatehina.

NA. Epstein je upotrijebio HPLC metodu za istovremeno određivanje ljekovitih tvari u suspenzijama. Niz autora koristio je ovu metodu za određivanje istovremenog sadržaja paroksetina, risperidona i 9-hidroksirepiredona u ljudskoj plazmi (s kulometrijskom detekcijom. Upotrebom HPLC s UV detektorom u modu ponovnog učitavanja kolone, metoda za određivanje klotrimazola i mometazonfurata u širokom rasponu koncentracija je opisano.

prije podne Martynov, E.V. Chuparina je razvio nedestruktivnu tehniku ​​rendgenske fluorescentne analize iona u biljkama pomoću spektrometra. Utvrđeno je da se smanjenjem mase biljke sa 6 na 1 gram povećava osjetljivost određivanja elemenata. Ovom tehnikom određen je elementarni sastav ljubičica koje se koriste u medicini.

KAO. Sauškina, V.A. Belikov je proveo spektrofotometriju za identifikaciju kloramfenikola u oblicima doziranja. Metodom UV spektrofotometrije predložena je metoda kvantitativnog određivanja paracetamola i mefenaminske kiseline u tabletama. Proučavanjem UV spektra utvrđeni su optimalni uvjeti za spektrofotometrijsku analizu metazida, ftivazida, izoniazida, kloramfenikola i sintomicina. U spektrofotometrijskom određivanju ketorolaka relativna pogreška je ±1,67%.

U I. Vershinin i koautori identificirali su odstupanja od aditivnosti smjesa koje apsorbiraju svjetlost i predvidjeli ih korištenjem statističkih modela dobivenih tijekom punog faktorskog eksperimenta. Modeli povezuju varijacije i sastav smjesa, omogućujući optimizaciju tehnika spektrofotometrijske analize.

Zh.A. Kormosh i njegovi suautori odredili su piroksikam na temelju ekstrakcije njegovog ionskog suradnika s polimetinskom bojom koristeći SFM metodu. Maksimalna ekstrakcija toluenom postiže se pri pH=8,0-12,0 vodene faze. Za kontrolu kvalitete lijekova koji sadrže piroksikam razvijena je ekstrakcijsko-spektrofotometrijska metoda određivanja.

Obećavajuća metoda za proučavanje ljekovite tvari je ekstrakcijska fotometrija. Ovu metodu karakterizira visoka osjetljivost zbog stvaranja produkata reakcije s reagensima, što dovodi do pojave dodatnih kromofora, povećane konjugacije, a također i zbog koncentracije produkata reakcije u organskoj fazi. Dovoljna točnost, usporedna jednostavnost primjene i mogućnost određivanja djelatne tvari iz farmakološki aktivnog dijela molekule još su jedna prednost ekstrakcijske fotometrije.

E.Yu. Zharskaya, D.F. Nokhrin, T.P. Churin je ekstrakcijskom fotometrijom odredio verapamil hidroklorid, mezapam po farmakološki aktivnom dijelu molekule na temelju reakcije s bakrenim salicilatnim kompleksom (CI).

N.T. Bubon i dr. koristili su bromkrezol purpur kao reagens za ljekovite tvari. Na temelju te reakcije razvijene su ekstrakcijsko-fotometrijske metode za određivanje fluoracizina i acefena u tabletama.

G.I. Lukyanchikova i kolege koristili su ekstrakcijsku fotometriju u analizi aceklidina, oksilidina za farmakološki aktivni dio molekule na temelju reakcije s bromotimol plavim. Više autora koristilo je ekstrakcijsko-fotometrijsku metodu za kvantitativno određivanje metamizila u 0,25% injekcijskoj otopini.

Proučavajući utjecaj pH i temperature na stabilnost vodenih otopina antispazmotika, G.I. Oleshko je razvio ekstrakcijsko-fotometrijsku metodu za analizu farmakološki aktivnog dijela molekule koja se temelji na reakciji kompleksiranja s bromotalnom kiselinom.

A.A. Litvin i njegovi suautori razvili su ekstrakcijsko-fotometrijsku metodu za analizu novokaina u injekcijskim otopinama i mastima i proučavali mogućnost korištenja u istraživanju lijekova koji sadrže novokain tijekom skladištenja.

T.A. Smolyanyuk je predložio metodu za ekstrakcijsko-fotometrijsko određivanje difenhidramin hidroklorida pomoću tropeolina 000-1, koja omogućuje njegovu analizu u prisutnosti nečistoća.

U praktičnoj farmaciji široko se koriste fotometrija i turbidimetrija. L.V. Kadzhonyan, I.A. Kondratenku je fotometrijskom metodom kvantitativno određen farmakološki aktivan dio molekule difenhidramin hidroklorida i trimekaina. V.A. Popkov i drugi koristili su diferencijalnu skenirajuću kolorimetriju u farmaceutskoj analizi za nikotinsku kiselinu, izoniazid i ftivazid. A.I. Sichko je upotrijebio fototurbidimetriju za kvantificiranje teturama. Nedostatak fotometrijskih metoda je što ne omogućuju uvijek određivanje aktivne tvari u prisutnosti produkata razgradnje.

Za kvantitativno određivanje ljekovitih tvari korištena je i fluorimetrijska metoda. V.M. Ivanov, O.A. Grigoriev, A.A. Khabarov je koristio fluorescentnu analizu u kontroli kvalitete lijekova koji sadrže furokumarine iz skupine psoralena i folnu kiselinu. Kromatografija na stupcu također se široko koristi. D.E. Bodrina, S.K. Eremin, B.N. Izotov je koristio mikrokolonu na Melichrome tekućinskom kromatografu za određivanje benzodiazepina u biološkim objektima.

Nedavno je široko rasprostranjena kromatsko-spektrofotometrijska metoda za kvantitativno određivanje tvari na temelju farmakološki aktivnog dijela molekule. Kombinira visoku osjetljivost ultraljubičaste spektroskopije i moć razdvajanja tankoslojne kromatografije. S.A. Valevko, M.V. Mišustina je razvio metodu za kromatografsko-spektrofotometrijsko određivanje papaverin hidroklorida, a D.S. Lazaryan i E.V. Kompantseva ga je koristila za određivanje klorpropamida u prisutnosti njihovih produkata razgradnje.

Spektrofotometrijska metoda ne omogućuje uvijek objektivnu kontrolu kvantitativnog sadržaja aktivne komponente. To je zbog činjenice da produkti razgradnje ponekad imaju maksimum apsorpcije u istom spektralnom području kao i lijekovi.

Masena spektrometrija, atomska apsorpcijska spektrofotometrija, NMR, IR i PMR spektroskopija pružaju velike mogućnosti u analizi ljekovite tvari i njezine konformacije. Metoda plinske kromatografije-masene spektrometrije korištena je za identifikaciju difenhidramin hidroklorida. Utvrđeno je da ljekovita tvar sadrži četiri nečistoće: benzofenon, 9-metilen fluoren, 9-fluorenil dimetil aminoetil eter i difenil metil eter. Sadržaj difenhidramina bio je 96,80%.

Opisana je metoda za određivanje atropina u ekstraktima beladone primjenom kemijske ionizacijske masene spektrometrije pri atmosferskom tlaku. Terbutamin je korišten kao interni standard. L.V. Adeishvili i koautori proučavali su spektre difenhidramin hidroklorida i mebedrola i predložili njihovu upotrebu za identifikaciju lijekova.

V.S. Kartashov je koristio NMR metodu za identifikaciju lijekova koji su izvedeni iz kinolina i izokinolina. Karakteristični signali u NMR spektrima lijekova omogućuju njihovu pouzdanu identifikaciju pomoću osobnog računala.

NMR spektroskopija visoke jakosti magnetskog polja korištena je za kvantificiranje propranolola.

T.S. Chmilenko, E.A. Galimbievskaya, F.A. Chmilenko je pokazao da interakcija fenol crvenog s poliheksametilen gvanidinijevim kloridom proizvodi ionski asocijat i nekoliko oblika agregata, čiji je sastav određen spektrofotometrijskim, turbidimetrijskim, refraktometrijskim i konduktometrijskim metodama. Dolazi do preraspodjele apsorpcijskih vrpci, uočavaju se ekstremne točke koje odgovaraju područjima najvećeg nakupljanja formiranih agregata. Razvijena je metoda za određivanje PHMG u dezinficijensu Biopag-D pomoću ekstremnih točaka.

Nevodena otapala postala su naširoko korištena u modernoj farmaceutskoj analizi. Ako je ranije glavno otapalo u analizi bila voda, sada se istovremeno koriste različita nevodena otapala (ledena ili bezvodna octena kiselina, octeni anhidrid, dimetilformamid, dioksan itd.) koja omogućuju promjenu jačine bazičnosti i kiselosti analiziranih tvari. Razvijena je mikrometoda, posebice kapljična metoda analize, pogodna za primjenu u ljekarničkoj kontroli kvalitete lijekova.

Posljednjih godina uvelike su razvijene metode istraživanja u kojima se u analizi ljekovitih tvari koristi kombinacija različitih metoda. Na primjer, plinska kromatografija-masena spektrometrija kombinacija je kromatografije i masene spektrometrije. Fizika, kvantna kemija i matematika sve više prodiru u modernu farmaceutsku analizu.

Analiza bilo koje ljekovite tvari ili sirovine mora započeti vanjskim pregledom, obraćajući pozornost na boju, miris, oblik kristala, posude, pakiranja i boju stakla. Nakon vanjskog pregleda predmeta analize uzima se prosječni uzorak za analizu u skladu sa zahtjevima Državnog fonda X (str. 853).

Metode proučavanja ljekovitih tvari dijele se na fizikalne, kemijske, fizikalno-kemijske i biološke.

Fizičke metode analize uključuju proučavanje fizičkih svojstava tvari bez pribjegavanja kemijskim reakcijama. To uključuje: određivanje topljivosti, prozirnosti

• ili stupanj zamućenja, boja; određivanje gustoće (za tekuće tvari), vlažnosti, tališta, skrućivanja, vrenja. Odgovarajuće metode opisane su u Globalnom fondu X. (str. 756-776).

Kemijske metode istraživanja temelje se na kemijskim reakcijama. Tu spadaju: određivanje sadržaja pepela, reakcija medija (pH), karakteristični numerički pokazatelji ulja i masti (kiselinski broj, jodni broj, saponifikacijski broj itd.).

U svrhu identifikacije ljekovitih tvari koriste se samo one reakcije koje su popraćene vidljivim vanjskim učinkom, npr. promjena boje otopine, oslobađanje plinova, taloženje ili otapanje taloga i sl.

Metode kemijskih istraživanja također uključuju gravimetrijske i volumetrijske metode kvantitativne analize usvojene u analitičkoj kemiji (metoda neutralizacije, metoda taloženja, redoks metode itd.). Posljednjih godina farmaceutska analiza uključuje metode kemijskog istraživanja kao što su titracija u nevodenom mediju i kompleksometrija.

Kvalitativna i kvantitativna analiza organskih ljekovitih tvari obično se provodi prema prirodi funkcionalnih skupina u njihovim molekulama.

Fizikalno-kemijskim metodama proučavaju se fizikalni fenomeni koji nastaju kao posljedica kemijskih reakcija. Na primjer, kod kolorimetrijske metode mjeri se intenzitet boje ovisno o koncentraciji tvari, kod konduktometrijske analize mjeri se električna vodljivost otopina itd.

Fizikalno-kemijske metode uključuju: optičke (refraktometrija, polarimetrija, metode analize emisije i fluorescencije, fotometriju, uključujući fotokolorimetriju i spektrofotometriju, nefelometriju, turbodimetriju), elektrokemijske (potenciometrijske i polarografske metode), kromatografske metode.

Uvod

1.2 Moguće pogreške tijekom farmaceutske analize

1.3 Opća načela za ispitivanje autentičnosti ljekovitih tvari

1.4 Izvori i uzroci loše kvalitete ljekovitih tvari

1.5 Opći zahtjevi za ispitivanja čistoće

1.6 Metode farmaceutske analize i njihova klasifikacija

Poglavlje 2. Fizičke metode analize

2.1 Ispitivanje fizikalnih svojstava ili mjerenje fizikalnih konstanti ljekovitih tvari

2.2 Podešavanje pH medija

2.3 Određivanje prozirnosti i zamućenosti otopina

2.4 Procjena kemijskih konstanti

Poglavlje 3. Kemijske metode analize

3.1 Značajke kemijskih metoda analize

3.2 Gravimetrijska (težinska) metoda

3.3 Titrimetrijske (volumetrijske) metode

3.4 Gasometrijska analiza

3.5 Kvantitativna elementarna analiza

Poglavlje 4. Fizikalno-kemijske metode analize

4.1. Značajke fizikalno-kemijskih metoda analize

4.2 Optičke metode

4.3 Metode apsorpcije

4.4 Metode temeljene na emisiji zračenja

4.5 Metode koje se temelje na korištenju magnetskog polja

4.6 Elektrokemijske metode

4.7 Metode odvajanja

4.8 Toplinske metode analize

Poglavlje 5. Biološke metode analize1

5.1 Biološka kontrola kakvoće lijekova

5.2 Mikrobiološka kontrola lijekova

Popis korištene literature

Uvod

Farmaceutska analiza je znanost o kemijskoj karakterizaciji i mjerenju biološki aktivnih tvari u svim fazama proizvodnje: od kontrole sirovina do ocjene kakvoće dobivene ljekovite tvari, proučavanja njezine stabilnosti, utvrđivanja roka valjanosti i standardizacije gotovog oblika lijeka. Farmaceutska analiza ima svoje specifičnosti koje je razlikuju od ostalih vrsta analiza. Ove značajke leže u činjenici da se analizi podvrgavaju tvari različite kemijske prirode: anorganski, organoelementni, radioaktivni, organski spojevi od jednostavnih alifatskih do složenih prirodnih biološki aktivnih tvari. Raspon koncentracija analiziranih tvari iznimno je širok. Predmet farmaceutske analize nisu samo pojedinačne ljekovite tvari, već i smjese koje sadrže različit broj komponenti. Broj lijekova svake godine raste. To zahtijeva razvoj novih metoda analize.

Metode farmaceutske analize zahtijevaju sustavno usavršavanje zbog stalnog porasta zahtjeva za kvalitetom lijekova, a rastu i zahtjevi kako za stupnjem čistoće lijekova tako i za njihovim kvantitativnim sadržajem. Stoga je potrebno široko koristiti ne samo kemijske, već i osjetljivije fizikalno-kemijske metode za ocjenu kvalitete lijekova.

Za farmaceutske analize postoje visoki zahtjevi. Mora biti dosta specifičan i osjetljiv, točan u odnosu na standarde propisane Državnom farmakopejom XI, VFS, FS i ostalom znanstveno-tehničkom dokumentacijom, provoditi u kratkim vremenskim razdobljima uz minimalne količine ispitivanih lijekova i reagensa.

Farmaceutska analiza, ovisno o ciljevima, uključuje različite oblike kontrole kakvoće lijekova: farmakopejska analiza, postupna kontrola proizvodnje lijekova, analiza pojedinačno proizvedenih oblika lijeka, ekspresna analiza u ljekarni i biofarmaceutska analiza.

Sastavni dio farmaceutske analize je farmakopejska analiza. To je skup metoda za proučavanje lijekova i oblika lijekova navedenih u Državnoj farmakopeji ili drugoj regulatornoj i tehničkoj dokumentaciji (VFS, FS). Na temelju rezultata dobivenih tijekom farmakopejske analize donosi se zaključak o sukladnosti lijeka sa zahtjevima Globalnog fonda ili druge regulatorne i tehničke dokumentacije. Ako odstupite od ovih zahtjeva, lijek nije dopušten za upotrebu.

Zaključak o kvaliteti lijeka može se donijeti samo na temelju analize uzorka (uzorka). Postupak za njegov odabir naveden je ili u privatnom članku ili u općem članku Globalnog fonda XI (izdanje 2). Uzorkovanje se provodi samo iz neoštećenih jedinica pakiranja, zapečaćenih i pakiranih u skladu sa zahtjevima normativno-tehničke dokumentacije. U tom slučaju moraju se strogo poštivati ​​zahtjevi za mjere opreza za rad s otrovnim i opojnim drogama, kao i za toksičnost, zapaljivost, opasnost od eksplozije, higroskopnost i druga svojstva lijekova. Za ispitivanje sukladnosti sa zahtjevima normativne i tehničke dokumentacije provodi se višestupanjsko uzorkovanje. Broj stupnjeva određen je vrstom pakiranja. U posljednjoj fazi (nakon kontrole po izgledu) uzima se uzorak u količini potrebnoj za četiri kompletne fizikalno-kemijske analize (ako se uzima uzorak za regulatorne organizacije, onda za šest takvih analiza).

S Angro pakiranja uzimaju se točkasti uzorci, uzeti u jednakim količinama s gornjeg, srednjeg i donjeg sloja svake pakirne jedinice. Nakon utvrđivanja homogenosti, svi ti uzorci se miješaju. Rasuti i viskozni lijekovi uzimaju se uzorkivačem od inertnog materijala. Tekući lijekovi se prije uzorkovanja dobro promiješaju. Ako je to teško učiniti, tada se točkasti uzorci uzimaju iz različitih slojeva. Odabir uzoraka gotovih lijekova provodi se u skladu sa zahtjevima privatnih članaka ili kontrolnih uputa koje je odobrilo Ministarstvo zdravstva Ruske Federacije.

Provođenjem farmakopejske analize moguće je utvrditi autentičnost lijeka, njegovu čistoću i odrediti kvantitativni sadržaj farmakološki djelatne tvari ili sastojaka koji se nalaze u obliku lijeka. Iako svaka od ovih faza ima svoju specifičnu svrhu, ne mogu se promatrati odvojeno. Oni su međusobno povezani i međusobno se nadopunjuju. Na primjer, talište, topljivost, pH vodene otopine itd. su kriteriji i za autentičnost i za čistoću ljekovite tvari.

Poglavlje 1. Osnovni principi farmaceutske analize

1.1 Kriteriji farmaceutske analize

U različitim fazama farmaceutske analize, ovisno o postavljenim zadacima, koriste se kriteriji kao što su selektivnost, osjetljivost, točnost, vrijeme utrošeno na provođenje analize i količina analiziranog lijeka (doznog oblika).

Selektivnost metode vrlo je važna pri analizi smjesa tvari, budući da omogućuje dobivanje pravih vrijednosti svake od komponenti. Samo selektivne analitičke tehnike omogućuju određivanje sadržaja glavne komponente u prisutnosti produkata razgradnje i drugih nečistoća.

Zahtjevi za točnost i osjetljivost farmaceutske analize ovise o predmetu i svrsi istraživanja. Pri ispitivanju stupnja čistoće lijeka koriste se metode koje su vrlo osjetljive, što omogućuje određivanje minimalnog sadržaja nečistoća.

Prilikom izvođenja postupne kontrole proizvodnje, kao i kod provođenja ekspresne analize u ljekarni, važnu ulogu igra vremenski faktor utrošen na izvođenje analize. Da biste to učinili, odaberite metode koje omogućuju provođenje analize u najkraćim mogućim vremenskim intervalima i istovremeno s dovoljnom točnošću.

Pri kvantitativnom određivanju ljekovite tvari koristi se metoda koja se odlikuje selektivnošću i visokom točnošću. Zanemarena je osjetljivost metode s obzirom na mogućnost provođenja analize s velikim uzorkom lijeka.

Mjera osjetljivosti reakcije je granica detekcije. To znači najniži sadržaj pri kojem se ovom metodom može detektirati prisutnost komponente analita s određenom vjerojatnošću pouzdanosti. Pojam "granica detekcije" uveden je umjesto takvog koncepta kao što je "minimum otvaranja", također se koristi umjesto pojma "osjetljivost". Na osjetljivost kvalitativnih reakcija utječu čimbenici kao što su volumeni otopina reagirajućih komponenti, koncentracije reagensa, pH medija, temperatura, trajanje iskustva. To treba uzeti u obzir pri razvoju metoda za kvalitativnu farmaceutsku analizu. Za utvrđivanje osjetljivosti reakcija sve više se koristi indikator apsorpcije (specifični ili molarni) koji se utvrđuje spektrofotometrijskom metodom. U kemijskoj analizi osjetljivost je određena vrijednošću granice detekcije dane reakcije. Fizikalno-kemijske metode odlikuju se analizom visoke osjetljivosti. Najosjetljivije su radiokemijske i masene spektralne metode koje omogućuju određivanje 10 -8 -10 -9% analita, polarografska i fluorimetrijska 10 -6 -10 -9%, osjetljivost spektrofotometrijskih metoda je 10 -3 -10 -6%, potenciometrijskih 10 -2%.

Pojam "analitička točnost" istodobno uključuje dva pojma: ponovljivost i ispravnost dobivenih rezultata. Ponovljivost karakterizira disperziju rezultata ispitivanja u usporedbi s prosječnom vrijednošću. Ispravnost odražava razliku između stvarnog i pronađenog sadržaja tvari. Točnost analize za svaku metodu je različita i ovisi o mnogim čimbenicima: kalibraciji mjernih instrumenata, točnosti vaganja ili mjerenja, iskustvu analitičara itd. Točnost rezultata analize ne može biti veća od točnosti najmanje preciznog mjerenja.

4.2 Optičke metode

Ova skupina uključuje metode koje se temelje na određivanju indeksa loma svjetlosne zrake u otopini ispitivane tvari (refraktometrija), mjerenju interferencije svjetlosti (interferometrija) i sposobnosti otopine tvari da zakrene ravninu polarizirane zrake ( polarimetrija).

Optičke metode se sve više koriste u praksi intraapotekarske kontrole zbog brzine i minimalne potrošnje analiziranih lijekova.

Refraktometrija se koristi za ispitivanje autentičnosti ljekovitih tvari koje su tekućine (dietilamid nikotinske kiseline, metil salicilat, tokoferol acetat), au intraapotekarskoj kontroli - za analizu oblika lijekova, uključujući dvostruke i trostruke smjese. Koriste se i volumetrijska refraktometrijska analiza te refraktometrijska analiza metodom potpune i nepotpune ekstrakcije.

Razvijene su različite varijante metoda za analizu lijekova, titriranih otopina i destilirane vode interferometrijskom metodom.

Polarimetrijom se ispituje autentičnost ljekovitih tvari čije molekule sadrže asimetrični ugljikov atom. Među njima najviše je lijekova iz skupine alkaloida, hormona, vitamina, antibiotika i terpena.

Analitička kemija i farmaceutska analiza koriste rendgensku refraktometriju praha, spektropolarimetrijsku analizu, lasersku interferometriju, rotacijsku disperziju i kružni dikroizam.

Uz navedene optičke metode za identifikaciju pojedinih ljekovitih tvari u farmaceutskim i toksikološkim analizama, kemijska mikroskopija ne gubi na važnosti. Primjena elektronske mikroskopije obećava, posebice u fitokemijskoj analizi. Za razliku od optičke mikroskopije, objekt je izložen snopu elektrona visoke energije. Slika koju formiraju raspršeni elektroni promatra se na fluorescentnom ekranu.

Jedna od obećavajućih brzih fizikalnih metoda je radiografska analiza. Omogućuje vam prepoznavanje lijekova u kristalnom obliku i razlikovanje njihovog polimorfnog stanja. Različite vrste mikroskopije i metode kao što su Auger spektrometrija, fotoakustična spektroskopija, kompjutorizirana tomografija, mjerenja radioaktivnosti itd. također se mogu koristiti za analizu kristalnih ljekovitih tvari.

Učinkovita nedestruktivna metoda je refleksijska infracrvena spektroskopija, koja se koristi za određivanje nečistoća raznih produkata raspada i vode, kao iu analizi višekomponentnih smjesa.

4.3 Metode apsorpcije

Apsorpcijske metode temelje se na svojstvima tvari da apsorbiraju svjetlost u različitim područjima spektra.

Atomska apsorpcijska spektrofotometrija temelji se na korištenju ultraljubičastog ili vidljivog zračenja rezonantne frekvencije. Apsorpcija zračenja uzrokovana je prijelazom elektrona s vanjskih orbitala atoma na orbitale više energije. Objekti koji apsorbiraju zračenje su plinoviti atomi, kao i neke organske tvari. Bit određivanja atomskom apsorpcijskom spektrometrijom je da rezonantno zračenje iz šuplje katodne lampe prolazi kroz plamen u kojem se raspršuje analizirana otopina uzorka. Ovo zračenje pogađa ulazni prorez monokromatora, a iz spektra se razlikuje samo linija rezonancije ispitivanog elementa. Fotoelektričnom metodom mjeri se smanjenje intenziteta rezonantne linije koje nastaje kao rezultat njezine apsorpcije od strane atoma elementa koji se određuje. Koncentracija se izračunava pomoću jednadžbe koja odražava njezinu ovisnost o slabljenju intenziteta zračenja izvora svjetlosti, duljini apsorbirajućeg sloja i koeficijentu apsorpcije svjetlosti u središtu apsorpcijske linije. Metoda je vrlo selektivna i osjetljiva.

Apsorpcija rezonantnih linija mjeri se na atomskim apsorpcijskim spektrofotometrima kao što su "Spectrum-1", "Saturn" itd. Točnost određivanja ne prelazi 4%, granica detekcije doseže 0,001 μg / ml. To ukazuje na visoku osjetljivost metode. Sve se više koristi za procjenu čistoće lijekova, posebice određivanje minimalnih nečistoća teških metala. Obećavajuća je uporaba atomske apsorpcijske spektrofotometrije za analizu multivitaminskih pripravaka, aminokiselina, barbiturata, nekih antibiotika, alkaloida, lijekova koji sadrže halogene i spojeva koji sadrže živu.

U farmaciji je moguće koristiti i rendgensku apsorpcijsku spektroskopiju, koja se temelji na apsorpciji rendgenskog zračenja od strane atoma.

Ultraljubičasta spektrofotometrija najjednostavnija je i najraširenija metoda apsorpcijske analize u farmaciji. Koristi se u svim fazama farmaceutske analize lijekova (ispitivanje autentičnosti, čistoće, kvantitativno određivanje). Razvijen je veliki broj metoda za kvalitativnu i kvantitativnu analizu oblika lijekova ultraljubičastom spektrofotometrijom. Za identifikaciju se mogu koristiti atlasi spektra ljekovitih tvari, sistematizirajući informacije o prirodi spektralnih krivulja i vrijednosti specifičnih indeksa apsorpcije.

Postoje različite mogućnosti korištenja metode UV spektrofotometrije za identifikaciju. Prilikom ispitivanja autentičnosti, ljekovite tvari se identificiraju prema položaj maksimalna apsorpcija svjetlosti. Češće se u farmakopejskim monografijama navode položaji maksimuma (ili minimuma) i odgovarajućih vrijednosti optičke gustoće. Ponekad se koristi metoda koja se temelji na izračunavanju omjera optičkih gustoća na dvije valne duljine (oni obično odgovaraju dvama maksimumima ili maksimumu i minimumu apsorpcije svjetlosti). Brojne ljekovite tvari također se identificiraju prema specifičnoj brzini apsorpcije otopine.

Vrlo je obećavajuće za identifikaciju ljekovitih tvari koristiti takve optičke karakteristike kao što su položaj apsorpcijske vrpce na ljestvici valne duljine, frekvencija na maksimumu apsorpcije, vrijednost vršnog i integralnog intenziteta, poluširina i asimetrija vrpce i snagu oscilatora. Ovi parametri čine identifikaciju tvari pouzdanijom od utvrđivanja valne duljine maksimalne apsorpcije svjetlosti i specifičnog indeksa apsorpcije. Ove konstante, koje omogućuju karakterizaciju prisutnosti odnosa između UV spektra i strukture molekule, utvrđene su i korištene za procjenu kvalitete ljekovitih tvari koje sadrže heteroatom kisika u molekuli (V.P. Buryak).

Objektivan izbor optimalnih uvjeta za kvantitativnu spektrofotometrijsku analizu može se provesti samo preliminarnim proučavanjem ionizacijskih konstanti, utjecaja prirode otapala, pH medija i drugih čimbenika na prirodu apsorpcijskog spektra.

NTD pruža različite metode korištenja UV spektrofotometrije za kvantitativno određivanje ljekovitih tvari, kao što su vitamini (retinol acetat, rutin, cijanokobalamin), steroidni hormoni (kortizon acetat, prednizon, pregnin, testosteron propionat), antibiotici (natrijeve soli oksacilina i meticilin, fenoksimetilpencilin, kloramfenikol stearat, griseofulvin). Otapala koja se obično koriste za spektrofotometrijska mjerenja su voda ili etanol. Izračun koncentracije provodi se na različite načine: prema standardu, specifičnoj stopi apsorpcije ili kalibracijskoj krivulji.

Preporučljivo je kombinirati kvantitativnu spektrofotometrijsku analizu s identifikacijom pomoću UV spektra. U tom slučaju, otopina pripremljena iz jednog uzorka može se koristiti za oba ova ispitivanja. Najčešće se u spektrofotometrijskim određivanjima koristi metoda koja se temelji na usporedbi optičkih gustoća analizirane i standardne otopine. Određeni analitički uvjeti zahtijevaju ljekovite tvari koje mogu stvarati kiselo-bazne oblike ovisno o pH okoliša. U takvim slučajevima potrebno je prvo odabrati uvjete pod kojima će tvar u otopini biti potpuno u jednom od ovih oblika.

Za smanjenje relativne pogreške fotometrijske analize, posebice za smanjenje sustavne pogreške, vrlo je obećavajuća uporaba standardnih uzoraka ljekovitih tvari. S obzirom na teškoću dobivanja i visoku cijenu, mogu se zamijeniti standardima pripremljenim od dostupnih anorganskih spojeva (kalijev dikromat, kalijev kromat).

U SP XI proširen je opseg primjene UV spektrofotometrije. Metoda se preporučuje za analizu višekomponentnih sustava, kao i za analizu ljekovitih tvari koje same ne apsorbiraju svjetlost u ultraljubičastom i vidljivom području spektra, ali se mogu različitim kemijskim reakcijama pretvoriti u spojeve koji apsorbiraju svjetlost.

Diferencijalne metode omogućuju proširenje opsega fotometrije u farmaceutskoj analizi. Omogućuju povećanje objektivnosti i točnosti, kao i analizu visokih koncentracija tvari. Osim toga, ove metode mogu analizirati višekomponentne smjese bez prethodnog odvajanja.

Metoda diferencijalne spektrofotometrije i fotokolorimetrije uvrštena je u Državni fond XI, br. 1 (str. 40). Njegova bit leži u mjerenju apsorpcije svjetlosti analizirane otopine u odnosu na referentnu otopinu koja sadrži određenu količinu ispitivane tvari. To dovodi do promjene radnog područja skale instrumenta i smanjenja relativne pogreške analize na 0,5-1%, tj. isto kao i za titrimetrijske metode. Dobri rezultati dobiveni su kada su umjesto referentnih otopina korišteni neutralni filtri poznate optičke gustoće; uključeni u set spektrofotometara i fotokolorimetara (V.G. Belikov).

Diferencijalna metoda našla je primjenu ne samo u spektrofotometriji i fotokolorimetriji, već iu fototurbidimetriji, fotonefelometriji i interferometriji. Diferencijalne metode mogu se proširiti na druge fizikalno-kemijske metode. Metode kemijske diferencijalne analize temeljene na korištenju takvih kemijskih utjecaja na stanje ljekovite tvari u otopini, kao što su promjena pH okoline, promjena otapala, promjena temperature, utjecaj električnog, magnetskog, ultrazvučnog polja, itd., također imaju velike izglede za analizu lijekova.

Jedna od varijanti diferencijalne spektrofotometrije, ?E-metoda, otvara široke mogućnosti u kvantitativnoj spektrofotometrijskoj analizi. Temelji se na transformaciji analita u tautomerni (ili drugi) oblik koji se razlikuje po prirodi apsorpcije svjetla.

Korištenjem derivativne UV spektrofotometrije otvaraju se nove mogućnosti u području identifikacije i kvantifikacije organskih tvari. Metoda se temelji na izdvajanju pojedinačnih vrpci iz UV spektra, koje su zbroj preklapajućih apsorpcijskih vrpci ili vrpci koje nemaju jasno definiran apsorpcijski maksimum.

Derivatna spektrofotometrija omogućuje identifikaciju ljekovitih tvari ili njihovih smjesa koje su slične kemijske strukture. Za povećanje selektivnosti kvalitativne spektrofotometrijske analize koristi se metoda konstruiranja sekundarnih derivata UV spektra. Drugi izvod se može izračunati pomoću numeričke diferencijacije.

Razvijena je jedinstvena metoda za dobivanje derivata iz apsorpcijskih spektara, koja uzima u obzir osobitosti prirode spektra. Pokazalo se da drugi derivat ima rezoluciju približno 1,3 puta veću u usporedbi s izravnom spektrofotometrijom. To je omogućilo korištenje ove metode za identifikaciju kofeina, teobromina, teofilina, papaverin hidroklorida i dibazola u oblicima doziranja. Drugi i četvrti derivat su učinkovitiji u kvantitativnoj analizi u usporedbi s titrimetrijskim metodama. Trajanje određivanja se smanjuje za 3-4 puta. Pokazalo se da je određivanje ovih lijekova u smjesama moguće bez obzira na prirodu apsorpcije popratnih tvari ili uz značajno smanjenje utjecaja njihove apsorpcije svjetlosti. Ovo eliminira radno intenzivne operacije za odvajanje smjesa.

Korištenje kombiniranog polinoma u spektrofotometrijskoj analizi omogućilo je isključivanje utjecaja nelinearne pozadine i razvoj metoda za kvantitativno određivanje niza lijekova u oblicima doziranja koji ne zahtijevaju složene izračune rezultata analize. Kombinirani polinom uspješno se koristi u proučavanju procesa koji se odvijaju tijekom skladištenja ljekovitih tvari iu kemijskim toksikološkim studijama, jer omogućuje smanjenje utjecaja nečistoća koje apsorbiraju svjetlost (E.N. Vergeichik).

Ramanova spektroskopija (RSS) razlikuje se od ostalih spektroskopskih metoda po osjetljivosti, velikom izboru otapala i temperaturnim rasponima. Prisutnost domaćeg Raman spektrometra marke DSF-24 omogućuje korištenje ove metode ne samo za određivanje kemijske strukture, već iu farmaceutskoj analizi.

Metoda spektrofotometrijske titracije još nije dobila pravi razvoj u praksi farmaceutske analize. Ova metoda omogućuje titraciju višekomponentnih smjesa sličnih vrijednosti bez indikatora rK na temelju sekvencijalne promjene optičke gustoće tijekom procesa titracije ovisno o volumenu dodanog titranta.

Fotokolorimetrijska metoda ima široku primjenu u farmaceutskoj analizi. Kvantitativno određivanje ovom metodom, za razliku od UV fotometrije, provodi se u vidljivom području spektra. Tvar koja se određuje se nekim reagensom pretvara u obojeni spoj, a zatim se fotokolorimetrom mjeri intenzitet boje otopine. Točnost određivanja ovisi o izboru optimalnih uvjeta za odvijanje kemijske reakcije.

Vrlo široku primjenu u fotometrijskoj analizi imaju metode za analizu lijekova izvedenih iz primarnih aromatskih amina, koje se temelje na korištenju reakcija diazotiranja i azo sprezanja. Široko korišten kao azo komponenta N-(1-naftil)-etilendiamin. Reakcija stvaranja azo-bojila je temelj fotometrijskog određivanja mnogih lijekova izvedenih iz fenola.

Fotokolorimetrijska metoda uključena je u tehničku dokumentaciju za kvantitativno određivanje niza nitro derivata (nitroglicerin, furadonin, furazolidon), kao i vitaminskih pripravaka (riboflavin, folna kiselina) i srčanih glikozida (celanid). Razvijene su brojne metode za fotokolorimetrijsko određivanje lijekova u ljekovitim oblicima. Poznate su različite modifikacije fotokolorimetrije i metode za izračunavanje koncentracije u fotokolorimetrijskoj analizi.

Polikarbonilni spojevi kao što su bindon (anhidro-bis-indandion-1,3), aloksan (tetraoksoheksa-hidropirimidin), natrijeva sol 2-karbetoksiindandiona-1,3 i neki od njegovih derivata pokazali su se obećavajućim za upotrebu kao reagensi za bojenje u fotometrijskoj analizi . Uspostavljeni su optimalni uvjeti i razvijene jedinstvene metode za identifikaciju i spektrofotometrijsko određivanje u vidljivom području ljekovitih tvari koje sadrže primarnu aromatsku ili alifatsku amino skupinu, ostatak sulfonil uree ili su organske baze koje sadrže dušik i njihove soli (V.V. Petrenko).

U fotokolorimetriji se široko koriste reakcije bojanja koje se temelje na stvaranju polimetinskih boja, koje se dobivaju lomljenjem piridinskih ili furanskih prstenova ili određenim reakcijama kondenzacije s primarnim aromatskim aminima (A.S. Beisenbekov).

Za identifikaciju i spektrofotometrijsko određivanje u vidljivom području spektra ljekovitih tvari kao reagensi za boje koriste se derivati ​​aromatskih amina, tiola, tioamida i drugih merkapto spojeva. N-klor-, N-benzensulfonil- i N-benzensulfonil-2-kloro-l,4-benzokvinonimm.

Jedna od mogućnosti objedinjavanja metoda fotometrijske analize temelji se na neizravnom određivanju iz ostatka natrijevog nitrita unesenog u reakcijsku smjesu u obliku standardne otopine uzete u višku. Višak nitrita se zatim određuje fotometrijski reakcijom diazotiranja upotrebom etakridin laktata. Ova tehnika se koristi za neizravno fotometrijsko određivanje ljekovitih tvari koje sadrže dušik pomoću nitritnog iona koji nastaje kao rezultat njihovih transformacija (hidroliza, toplinska razgradnja). Jedinstvena metodologija omogućuje kontrolu kvalitete više od 30 takvih ljekovitih tvari u brojnim oblicima doziranja (P.N. Ivakhnenko).

Fototurbidimetrija i fotonefelometrija su metode koje imaju veliki potencijal, ali su još uvijek ograničene primjene u farmaceutskim analizama. Temelji se na mjerenju apsorbiranog (turbidimetrija) ili raspršenog (nefelometrija) svjetla na suspendiranim česticama analita. Svake godine metode se poboljšavaju. Na primjer, kronofototurbidimetrija se preporučuje u analizi ljekovitih tvari. Bit metode je utvrditi promjene u ekstinciji svjetlosti tijekom vremena. Također je opisana primjena termonefelometrije koja se temelji na utvrđivanju ovisnosti koncentracije tvari o temperaturi pri kojoj dolazi do zamućenja otopine lijeka.

Sustavna istraživanja u području fototurbidimetrije, kronofototurbidimetrije i fototurbidimetrijske titracije pokazala su mogućnost korištenja fosfovolframove kiseline za kvantitativno određivanje lijekova koji sadrže dušik. U fototurbidimetrijskoj analizi korištene su izravna i diferencijalna metoda, automatska fototurbidimetrijska titracija i kronofototurbidimetrijsko određivanje dvokomponentnih oblika lijeka (A.I. Sichko).

Infracrvenu (IR) spektroskopiju karakterizira širok informativni sadržaj koji omogućuje objektivnu procjenu autentičnosti i kvantitativno određivanje ljekovitih tvari. IR spektar jednoznačno karakterizira cjelokupnu strukturu molekule. Razlike u kemijskoj strukturi mijenjaju prirodu IR spektra. Važne prednosti IR spektrofotometrije su specifičnost, brzina analize, visoka osjetljivost, objektivnost dobivenih rezultata te mogućnost analize tvari u kristalnom stanju.

IR spektri se mjere obično pomoću suspenzija ljekovitih tvari u tekućem parafinu, čija intrinzična apsorpcija ne ometa identifikaciju analiziranog spoja. Za utvrđivanje autentičnosti u pravilu se koristi takozvano područje "otiska prsta" (650–1500 cm -1), koje se nalazi u frekvencijskom rasponu od 650 do 1800 cm -1, kao i rastezljive vibracije kemijskih veza.

S=0, S=S, S=N

Državni fond XI preporučuje dvije metode utvrđivanja autentičnosti ljekovitih tvari pomoću IR spektra. Jedan od njih temelji se na usporedbi IR spektra ispitivane tvari i njezinog standardnog uzorka. Spektri se moraju uzeti pod identičnim uvjetima, tj. uzorci moraju biti u istom agregatnom stanju, u istoj koncentraciji, stopa registracije mora biti ista itd. Druga metoda je usporedba IR spektra ispitivane tvari s njezinim standardnim spektrom. U tom slučaju potrebno je striktno poštovati uvjete predviđene za uklanjanje standardnog spektra, dane u odgovarajućoj tehničkoj dokumentaciji (GF, VFS, FS). Potpuna podudarnost apsorpcijskih vrpci ukazuje na identitet tvari. Međutim, polimorfne modifikacije mogu dati različite IR spektre. U tom slučaju, za potvrdu identiteta, potrebno je rekristalizirati ispitivane tvari iz istog otapala i ponovno snimiti spektre.

Intenzitet apsorpcije također može poslužiti kao potvrda autentičnosti ljekovite tvari. U tu svrhu koriste se konstante poput indeksa apsorpcije ili vrijednosti integralnog intenziteta apsorpcije, jednake površini koju zaokružuje krivulja u apsorpcijskom spektru.

Utvrđena je mogućnost korištenja IR spektroskopije za identifikaciju velike skupine ljekovitih tvari koje sadrže karbonilne skupine u molekuli. Identitet je određen karakterističnim apsorpcijskim vrpcama u sljedećim područjima: 1720-1760, 1424-1418, 950-00 cm-1 za karboksilne kiseline; 1596-1582, 1430-1400, 1630-1612, 1528-1518 cm-1 za aminokiseline; 1690-1670, 1615-1580 cm-1 za amide; 1770-1670 cm-1 za derivate barbiturne kiseline; 1384-1370, 1742-1740, 1050 cm-1 za terpenoide; 1680-1540, 1380-1278 cm-1 za tetraciklinske antibiotike; 3580-3100, 3050-2870, 1742-1630, 903-390 cm-1 za steroide (A.F. Mynka).

Metoda IR spektroskopije uvrštena je u farmakopeje mnogih stranih zemalja iu MF III, gdje se njome identificira više od 40 ljekovitih tvari. Pomoću IR spektrofotometrije moguće je provesti ne samo kvantitativnu procjenu ljekovitih tvari, već i proučavanje takvih kemijskih transformacija kao što su disocijacija, solvoliza, metabolizam, polimorfizam itd.

4.4 Metode temeljene na emisiji zračenja

Ova skupina metoda uključuje plamenu fotometriju, fluorescentne i radiokemijske metode.

SP XI obuhvaća emisijsku i plamenu spektrometriju u svrhu kvalitativnog i kvantitativnog određivanja kemijskih elemenata i njihovih nečistoća u ljekovitim tvarima. Intenzitet zračenja spektralnih linija ispitivanih elemenata mjeren je kućnim plamenim fotometrima PFL-1, PFM, PAZH-1. Fotoćelije spojene na digitalne i ispisne uređaje služe kao sustavi za snimanje. Točnost određivanja metodama emisijske, kao i atomske apsorpcije, plamene spektrometrije je unutar 1-4%, granica detekcije može doseći 0,001 μg/ml.

Kvantitativno određivanje elemenata plamenom emisijskom spektrometrijom (plamenom fotometrijom) temelji se na utvrđivanju odnosa između intenziteta spektralne linije i koncentracije elementa u otopini. Suština testa je raspršivanje analizirane otopine u obliku aerosola u plamenu plamenika. Pod utjecajem temperature plamena dolazi do isparavanja otapala i krutih čestica iz kapljica aerosola, disocijacije molekula, ekscitacije atoma i pojave njihovog karakterističnog zračenja. Pomoću svjetlosnog filtra ili monokromatora zračenje analiziranog elementa se odvaja od ostalih i kada udari u fotoćeliju uzrokuje fotostruju koja se mjeri galvanometrom ili potenciometrom.

Plamena fotometrija korištena je za kvantitativnu analizu lijekova koji sadrže natrij, kalij i kalcij u oblicima doziranja. Na temelju istraživanja utjecaja na emisiju određenih kationa, organskih aniona, pomoćnih i popratnih komponenti, metode za kvantitativno određivanje natrijevog bikarbonata, natrijevog salicilata, PAS-natrija, bilignosti, heksenala, natrijevog nukleinata, kalcijevog klorida i glukonata, bepaska i dr. Razvijene su metode za istovremeno određivanje dviju soli s različitim kationima u oblicima doziranja, npr. kalijev jodid - natrijev bikarbonat, kalcijev klorid - kalijev bromid, kalijev jodid - natrijev salicilat itd.

Luminescentne metode temelje se na mjerenju sekundarnog zračenja koje nastaje djelovanjem svjetlosti na analit. To uključuje fluorescentne metode, kemiluminiscenciju, rendgensku fluorescenciju itd.

Fluorescentne metode temelje se na sposobnosti tvari da fluoresciraju u UV svjetlu. Ova sposobnost je posljedica strukture ili samih organskih spojeva ili proizvoda njihove disocijacije, solvolize i drugih transformacija izazvanih djelovanjem raznih reagensa.

Organski spojevi sa simetričnom molekularnom strukturom, koji sadrže konjugirane veze, nitro-, nitrozo-, azo-, amido-, karboksilne ili karbonilne skupine, obično imaju fluorescentna svojstva. Intenzitet fluorescencije ovisi o kemijskoj strukturi i koncentraciji tvari, kao i drugim čimbenicima.

Fluorimetrija se može koristiti i za kvalitativnu i za kvantitativnu analizu. Kvantitativna analiza provodi se pomoću spektrofluorimetara. Princip njihovog rada je da svjetlost iz živino-kvarcne lampe kroz primarni svjetlosni filtar i kondenzator pada na kivetu s otopinom ispitivane tvari. Koncentracija se izračunava korištenjem ljestvice standardnih uzoraka fluorescentne tvari poznate koncentracije.

Razvijene su jedinstvene metode za kvantitativno spektrofluorimetrijsko određivanje derivata p-aminobenzensulfamida (streptocid, sulfacil natrij, sulgin, urosulfan itd.) i p-aminobenzojeve kiseline (anestezin, novokain, novokainamid). Vodene alkalne otopine sulfonamida imaju najveću fluorescenciju pri pH 6-8 i 10-12. Osim toga, sulfonamidi koji sadrže nesupstituiranu primarnu aromatsku amino skupinu u molekuli, nakon zagrijavanja s o-ftalaldehidom u prisutnosti sumporne kiseline, poprimaju intenzivnu fluorescenciju u području od 320-540 nm. U istom području derivati ​​barbiturne kiseline (barbital, barbital natrij, fenobarbital, etaminal natrij) fluoresciraju u alkalnoj sredini (pH 12-13) s maksimumom fluorescencije na 400 nm. Predložene su vrlo osjetljive i specifične metode za spektrofluorimetrijsko određivanje antibiotika: tetraciklina, oksitetraciklin hidroklorida, streptomicin sulfata, pasomicina, florimicin sulfata, griseofulvina i srčanog glikozida celanida (F.V. Babilev). Provedena su istraživanja spektra fluorescencije niza lijekova koji sadrže prirodne spojeve: derivate kumarina, antrakinona, flavonoida (V.P. Georgievsky).

Skupine koje tvore komplekse identificirane su u 120 ljekovitih tvari, derivata hidroksibenzojeve, hidroksinaftojeve, antranilne kiseline, 8-hidroksikinolina, oksipiridina, 3- i 5-hidroksiflavona, pteridina itd. Ove skupine mogu tvoriti fluorescentne komplekse s kationima magnezija , aluminij, bor, cink, skandij kada se fluorescencija pobuđuje od 330 nm i više i emitira na valnim duljinama većim od 400 nm. Provedeno istraživanje omogućilo je razvoj fluorimetrijskih tehnika za 85 lijekova (A.A. Khabarov).

Uz derivativnu spektrofotometriju u farmaceutskoj analizi, obrazložena je mogućnost primjene derivativne spektrofluorimetrije. Spektri su snimljeni na MPF-4 fluorescentnom spektrofotometru s termostatskom ćelijom, a derivati ​​su pronađeni sličnom diferencijacijom pomoću računala. Metoda je korištena za razvoj jednostavnih, točnih i visokoosjetljivih metoda za kvantitativno određivanje piridoksin i efedrin hidroklorida u oblicima lijekova u prisutnosti produkata razgradnje.

Izgledi za korištenje rendgenska fluorescencija za određivanje malih količina nečistoća u lijekovima je zbog visoke osjetljivosti i mogućnosti izvođenja analize bez prethodnog uništavanja tvari. metoda X-zračna fluorescentna spektrometrija pokazalo se obećavajućim za kvantitativnu analizu tvari koje u molekuli sadrže heteroatome kao što su željezo, kobalt, brom, srebro itd. Princip metode je usporedba sekundarnog rendgenskog zračenja elementa u analiziranom i standardni uzorak. Rentgenska fluorescentna spektrometrija je jedna od metoda koja ne zahtijeva prethodne destruktivne promjene. Analiza se provodi na domaćem spektrometru RS-5700. Trajanje analize 15 min.

Kemiluminiscencija je metoda koja uključuje korištenje energije koja se stvara tijekom kemijskih reakcija.

Ova energija služi kao izvor uzbuđenja. Izlučuju ga tijekom oksidacije neki barbiturati (osobito fenobarbital), hidrazidi aromatskih kiselina i drugi spojevi. To stvara velike mogućnosti korištenja metode za određivanje vrlo niskih koncentracija tvari u biološkom materijalu.

Radiokemijske metode se sve više koriste u farmaceutskim analizama. Radiometrijska analiza, koja se temelji na mjerenju β- ili β-zračenja pomoću spektrometara, koristi se (zajedno s drugim parametrima za procjenu kvalitete farmakopejskih radioaktivnih lijekova. Visoko osjetljive metode analize pomoću radioaktivnih izotopa (obilježenih atoma) naširoko se koriste u raznim područjima tehnike, a posebno u analitičkoj kemiji ) Za otkrivanje tragova nečistoća u tvarima koristi se aktivacijska analiza, za određivanje u smjesama teško razdvojivih komponenti sličnih svojstava - metoda izotopnog razrjeđivanja, također se koriste radiometrijska titracija i radioaktivni indikatori. Originalna inačica kombinacije radioizotopskih i kromatografskih metoda je proučavanje difuzijsko-sedimentnih kromatograma u tankom sloju želatinskog gela pomoću radioaktivnih tragova.

4.5 Metode koje se temelje na korištenju magnetskog polja

Metode NMR i PMR spektroskopije, kao i masene spektrometrije, odlikuju se visokom specifičnošću i osjetljivošću i koriste se za analizu višekomponentnih smjesa, uključujući oblike doziranja, bez njihovog prethodnog odvajanja.

Metoda NMR spektroskopije koristi se za ispitivanje autentičnosti ljekovitih supstanci, što se može potvrditi bilo cijelim skupom spektralnih parametara koji karakteriziraju strukturu danog spoja, bilo najkarakterističnijim signalima spektra. Autentičnost se može utvrditi i pomoću standardnog uzorka dodavanjem određene količine u analiziranu otopinu. Potpuna podudarnost spektara analizirane tvari i njezine smjese sa standardnim uzorkom ukazuje na njihov identitet.

NMR spektri se snimaju na spektrometrima s radnim frekvencijama od 60 MHz ili više, koristeći osnovne karakteristike spektra kao što su kemijski pomak, višestrukost rezonantnog signala, konstanta spin-spin interakcije i područje rezonantnog signala. Najopširnije informacije o molekularnoj strukturi analita daju 13C i 1H NMR spektri.

Pouzdana identifikacija pripravaka gestagenih i estrogenih hormona, kao i njihovih sintetskih analoga: progesterona, pregnina, etinil estradiola, metil estradiola, estradiol dipropionata itd. - može se provesti 1H NMR spektroskopijom u deuteriranom kloroformu na UN-90 spektrometar radne frekvencije 90 MHz (interni standard - tetrametilsilan).

Sustavna istraživanja omogućila su utvrđivanje mogućnosti korištenja 13 C NMR spektroskopije za identifikaciju ljekovitih supstanci 10-acil derivata fenotiazina (kloracizin, fluoroacizin, etmozin, etacizin), 1,4-benzodiazepina (kloro-, bromo- i nitro derivati) i dr. Pomoću 1H NMR spektroskopije i 13 C izvršena je identifikacija i kvantitativna procjena glavnih komponenti i nečistoća u pripravcima i standardnim uzorcima prirodnih i polusintetskih antibiotika aminoglikozida, penicilina, cefalosporina, makrolida i dr. Ova metoda je korištena za identifikaciju niza vitamina u jedinstvenim uvjetima: lipoična i askorbinska kiselina, lipamid, kolin i metilmetionin sulfonijevi kloridi, retinol palmitat, kalcijev pantotenat, ergokalciferol. Metoda 1H NMR spektroskopije omogućila je pouzdanu identifikaciju takvih prirodnih spojeva složene kemijske strukture kao što su srčani glikozidi (digoksin, digitoksin, celanid, deslanozid, neriolin, cimarin itd.). Za ubrzavanje obrade spektralnih informacija korišteno je računalo. Brojne tehnike identifikacije uključene su u FS i VFS (V.S. Kartashov).

Kvantitativno određivanje ljekovite tvari također se može izvesti pomoću NMR spektra. Relativna pogreška kvantitativnih određivanja NMR metodom ovisi o točnosti mjerenja područja rezonantnih signala i iznosi ±2-5%. Pri određivanju relativnog udjela tvari ili njezine nečistoće mjere se površine rezonantnih signala ispitivane tvari i standardnog uzorka. Zatim se izračuna količina ispitivane tvari. Za određivanje apsolutnog sadržaja lijeka ili nečistoće, analizirani uzorci se kvantitativno pripremaju i uzorku se dodaje točno odvagana masa internog standarda. Nakon toga se snima spektar, mjere signalna područja analita (nečistoća) i interni standard, a zatim se izračunava apsolutni sadržaj.

Razvoj tehnologije pulsne Fourierove spektroskopije i uporaba računala omogućili su naglo povećanje osjetljivosti 13 C NMR metode i njezino proširenje na kvantitativnu analizu višekomponentnih smjesa bioorganskih spojeva, uključujući i ljekovite tvari, bez njihovog prethodnog razdvajanja.

Spektroskopski parametri PMR spektara pružaju čitav niz raznolikih i visoko selektivnih informacija koje se mogu koristiti u farmaceutskoj analizi. Treba se strogo pridržavati uvjeta za snimanje spektra, jer na vrijednosti kemijskih pomaka i drugih parametara utječu vrsta otapala, temperatura, pH otopine i koncentracija tvari.

Ako je potpuna interpretacija PMR spektra teška, tada se izoliraju samo karakteristični signali, po kojima se identificira ispitivana tvar. PMR spektroskopija se koristi za testiranje autentičnosti mnogih ljekovitih supstanci, uključujući barbiturate, hormonska sredstva, antibiotike itd.

Budući da metoda daje informacije o prisutnosti ili odsutnosti nečistoća u glavnoj tvari, PMR spektroskopija je od velike praktične važnosti za ispitivanje čistoće ljekovitih tvari. Razlike u vrijednostima određenih konstanti omogućuju izvođenje zaključka o prisutnosti nečistoća produkata raspadanja ljekovite tvari. Osjetljivost metode na nečistoće uvelike varira i ovisi o spektru glavne tvari, prisutnosti određenih skupina koje sadrže protone u molekulama i topljivosti u odgovarajućim otapalima. Minimalni sadržaj nečistoća koji se može odrediti je obično 1-2%. Osobito je vrijedna mogućnost otkrivanja izomernih nečistoća čija se prisutnost ne može potvrditi drugim metodama. Na primjer, primjesa salicilne kiseline pronađena je u acetilsalicilnoj kiselini, morfija u kodeinu itd.

Kvantitativna analiza temeljena na korištenju PMR spektroskopije ima prednosti u odnosu na druge metode u tome što pri analizi višekomponentnih smjesa nije potrebno izolirati pojedinačne komponente za kalibraciju uređaja. Stoga je metoda široko primjenjiva za kvantitativnu analizu kako pojedinačnih ljekovitih tvari, tako i otopina, tableta, kapsula, suspenzija i drugih oblika doziranja koji sadrže jedan ili više sastojaka. Standardna devijacija ne prelazi ±2,76%. Opisane su metode za analizu tableta furosemida, meprobamata, kinidina, prednizolona itd.

Širi se raspon primjene masene spektrometrije u analizi ljekovitih tvari za identifikaciju i kvantitativnu analizu. Metoda se temelji na ionizaciji molekula organskih spojeva. Vrlo je informativan i iznimno osjetljiv. Masenom spektrometrijom određuju se antibiotici, vitamini, purinske baze, steroidi, aminokiseline i drugi lijekovi, kao i njihovi metabolički produkti.

Primjena lasera u analitičkim instrumentima značajno proširuje praktičnu primjenu UV i IR spektrofotometrije, kao i fluorescentne i masene spektroskopije, Ramanove spektroskopije, nefelometrije i drugih metoda. Laserski izvori pobude omogućuju povećanje osjetljivosti mnogih metoda analize i smanjenje trajanja njihove primjene. Laseri se koriste u daljinskoj analizi kao detektori u kromatografiji, bioanalitičkoj kemiji itd.

4.6 Elektrokemijske metode

Ova skupina kvalitativnih i kvantitativnih analitičkih metoda temelji se na elektrokemijskim fenomenima koji se događaju u mediju koji se proučava i koji su povezani s promjenama u kemijskoj strukturi, fizikalnim svojstvima ili koncentracijama tvari.

Potenciometrija je metoda koja se temelji na mjerenju ravnotežnih potencijala koji nastaju na granici između ispitivane otopine i elektrode uronjene u nju. SP XI uključuje metodu potenciometrijske titracije, koja se sastoji u utvrđivanju ekvivalentnog volumena titranta mjerenjem EMF indikatorske elektrode i referentne elektrode uronjene u analiziranu otopinu. Metoda izravne potenciometrije služi za određivanje pH (pH-metrija) i određivanje koncentracije pojedinih iona. Potenciometrijska titracija razlikuje se od indikatorske titracije u mogućnosti analize jako obojenih, koloidnih i zamućenih otopina, kao i otopina koje sadrže oksidante. Osim toga, nekoliko komponenti u smjesi može se titrirati uzastopno u vodenom i nevodenom mediju. Potenciometrijska metoda koristi se za titraciju koja se temelji na reakcijama neutralizacije, taloženja, kompleksiranja, oksidacije – redukcije. Referentna elektroda u svim ovim metodama je kalomel, srebrov klorid ili staklo (potonje se ne koristi u analizi neutralizacijom). Indikatorska elektroda za acidobaznu titraciju je staklena elektroda, za kompleksometrijsku titraciju je živina ili ionsko selektivna, za metodu taloženja srebrna, a za redoks titraciju platinska.

EMF koji se javlja tijekom titracije zbog razlike potencijala između indikatorske elektrode i referentne elektrode mjeri se pH metrima visokog otpora. Titrant se dodaje iz birete u jednakim volumenima uz stalno miješanje titrirane tekućine. Blizu točke ekvivalencije, titrant se dodaje u koracima od 0,1-0,05 ml. Vrijednost EMF-a u ovoj se točki najjače mijenja, budući da će apsolutna vrijednost omjera promjene EMF-a i povećanja volumena dodanog titranta biti maksimalna. Rezultati titracije prikazuju se ili grafički, određivanjem točke ekvivalencije na titracijskoj krivulji, ili izračunom. Zatim se pomoću formula izračunava ekvivalentni volumen titranta (vidi SP XI, broj 1, str. 121).

Amperometrijska titracija s dvije indikatorske elektrode, odnosno titracija do prestanka struje, temelji se na uporabi para identičnih inertnih elektroda (platina, zlato) koje su pod niskim naponom. Metoda se najčešće koristi za nitritnu i jodometrijsku titraciju. Točka ekvivalencije se utvrđuje naglim povećanjem struje koja prolazi kroz ćeliju (unutar 30 s) nakon dodavanja zadnjeg dijela reagensa. Ova se točka može grafički utvrditi ovisnošću struje o volumenu dodanog reagensa, baš kao i kod potenciometrijske titracije (SP XI, br. 1, str. 123). Razvijene su i metode biamperometrijske titracije ljekovitih tvari nitritometrijom, precipitacijske i oksidacijsko-redukcijske metode.

Posebno obećavajuća je ionometrija, koja koristi odnos između EMF-a galvanske mreže s ion-selektivnom elektrodom i koncentracije analiziranog iona u elektrodnoj ćeliji kruga. Određivanje anorganskih i organskih (sa dušikom) ljekovitih tvari pomoću ion-selektivnih elektroda razlikuje se od drugih metoda po visokoj osjetljivosti, brzini, dobroj ponovljivosti rezultata, jednostavnoj opremi, dostupnim reagensima, prikladnosti za automatizirano praćenje i proučavanje mehanizma djelovanja. droga. Kao primjer možemo navesti metode za ionometrijsko određivanje kalija, natrija, halogenida i ljekovitih tvari koje sadrže kalcij u tabletama i fiziološkim nadomjescima za krv. Pomoću domaćih pH metara (pH-121, pH-673), ionometra I-115 i kalij selektivnih elektroda određuju se kalijeve soli različitih kiselina (orotska, asparaginska itd.).

Polarografija je metoda analize koja se temelji na mjerenju struje koja se stvara na mikroelektrodi tijekom elektroredukcije ili elektrooksidacije analita u otopini. Elektroliza se provodi u polarografskoj ćeliji koja se sastoji od elektrolizatora (posude) i dvije elektrode. Jedna od njih je živina kapajuća mikroelektroda, a druga je makroelektroda, koja je ili sloj žive na elektrolizeru ili vanjska zasićena kalomel elektroda. Polarografska analiza može se provoditi u vodenoj sredini, u miješanim otapalima (voda - etanol, voda - aceton), u nevodenim medijima (etanol, aceton, dimetilformamid itd.). Pod identičnim uvjetima mjerenja, za identifikaciju tvari koristi se poluvalni potencijal. Kvantifikacija se temelji na mjerenju granične difuzne struje ispitivane ljekovite tvari (visina vala). Za određivanje sadržaja koristi se metoda kalibracijskih krivulja, metoda standardnih otopina i metoda aditiva (SP XI, br. 1, str. 154). Polarografija ima široku primjenu u analizi anorganskih tvari, kao i alkaloida, vitamina, hormona, antibiotika i srčanih glikozida. Zbog visoke osjetljivosti vrlo su perspektivne moderne metode: diferencijalna pulsna polarografija, oscilografska polarografija itd.

Mogućnosti elektrokemijskih metoda u farmaceutskoj analizi nisu ni izdaleka iscrpljene. Razvijaju se nove varijante potenciometrije: inverzijska bezstrujna kronopotenciometrija, izravna potenciometrija s plinskom amonijevo-selektivnom elektrodom itd. Proširuju se istraživanja u području primjene u farmaceutskoj analizi metoda poput konduktometrije, temeljene na proučavanju električne vodljivosti otopine analita; kulometrija, koja se sastoji u mjerenju količine električne energije utrošene na elektrokemijsku redukciju ili oksidaciju iona koji se određuju.

Kulometrija ima niz prednosti u odnosu na druge fizikalno-kemijske i kemijske metode. Budući da se ova metoda temelji na mjerenju količine elektriciteta, omogućuje izravno određivanje mase tvari, a ne bilo kojeg svojstva proporcionalnog koncentraciji. Zbog toga kulometrija eliminira potrebu za korištenjem ne samo standardnih već i titriranih otopina. Što se tiče kulometrijske titracije, ona proširuje opseg titrimetrije upotrebom raznih nestabilnih elektrogeneriranih titranata. Ista elektrokemijska ćelija može se koristiti za izvođenje titracija pomoću različitih vrsta kemijskih reakcija. Dakle, metoda neutralizacije može odrediti kiseline i baze čak iu milimolarnim otopinama s pogreškom ne većom od 0,5%.

Kulometrijska metoda koristi se za određivanje malih količina anaboličkih steroida, lokalnih anestetika i drugih ljekovitih tvari. Punila za tablete ne ometaju određivanje. Metode se odlikuju jednostavnošću, ekspresivnošću, brzinom i osjetljivošću.

Metoda dielektričnih mjerenja u području elektromagnetskih valova široko se koristi za ekspresnu analizu u kemijskoj tehnologiji, prehrambenoj industriji i drugim područjima. Jedno od perspektivnih područja je dielkometrijsko praćenje enzima i drugih bioloških proizvoda. Omogućuje brzu, točnu procjenu parametara kao što su vlažnost, stupanj homogenosti i čistoća lijeka bez upotrebe reagensa. Dielkometrijska kontrola je višeparametarska, ispitivane otopine mogu biti neprozirne, a mjerenja se mogu izvoditi beskontaktno uz snimanje rezultata na računalu.

4.7 Metode odvajanja

Od fizikalno-kemijskih metoda razdvajanja u farmaceutskoj analizi uglavnom se koriste kromatografija, elektroforeza i ekstrakcija.

Kromatografske metode za razdvajanje tvari temelje se na njihovoj raspodjeli između dvije faze: pokretne i nepokretne. Mobilna faza može biti tekućina ili plin, a nepokretna faza može biti krutina ili tekućina adsorbirana na krutom nosaču. Relativna brzina gibanja čestica na putu odvajanja ovisi o njihovoj interakciji sa stacionarnom fazom. To rezultira time da svaka tvar putuje određenom duljinom na nosaču. Omjer brzine gibanja tvari i brzine gibanja otapala označen je ovom vrijednošću.Ova vrijednost je konstanta tvari za dane uvjete razdvajanja i služi za identifikaciju.

Kromatografija omogućuje najučinkovitije provođenje selektivne distribucije komponenti analiziranog uzorka. To je od velike važnosti za farmaceutsku analizu, u kojoj su objekti proučavanja obično smjese nekoliko tvari.

Prema mehanizmu procesa odvajanja kromatografske metode se dijele na ionsku izmjenu, adsorpcijsku, sedimentacijsku, particionu i redoks kromatografiju. Prema obliku procesa razlikujemo kolonsku, kapilarnu i ravninsku kromatografiju. Potonje se može izvesti na papiru iu tankom (fiksiranom ili nefiksiranom) sloju sorbenta. Kromatografske metode također se klasificiraju prema agregacijskom stanju analizirane tvari. To uključuje različite metode plinske i tekućinske kromatografije.

Adsorpcijska kromatografija temelji se na selektivnoj adsorpciji pojedinih komponenti iz otopine smjese tvari. Adsorbenti kao što su aluminijev oksid, aktivni ugljen itd. služe kao stacionarna faza.

Kromatografija ionske izmjene koristi procese ionske izmjene koji se odvijaju između adsorbensa i iona elektrolita u analiziranoj otopini. Stacionarna faza su smole za kationsku ili anionsku izmjenu; ioni koje sadrže mogu se zamijeniti za protuione sličnog naboja.

Kromatografija sedimenta temelji se na razlici u topljivosti tvari nastalih tijekom međudjelovanja komponenti smjese koje se odvajaju s talogom.

Razdjelna kromatografija sastoji se u raspodjeli komponenata smjese između dvije tekuće faze koje se ne miješaju (pokretne i nepokretne). Stacionarna faza je nosač impregniran otapalom, a mobilna faza je organsko otapalo koje se praktički ne miješa s prvim otapalom. Kod izvođenja postupka u koloni smjesa se dijeli na zone od kojih svaka sadrži po jednu komponentu. Razdjelna kromatografija može se provoditi i u tankom sloju sorbenta (tankoslojna kromatografija) i na kromatografskom papiru (papirna kromatografija).

Prije drugih separacijskih metoda u farmaceutskoj analizi, kromatografija ionske izmjene počela se koristiti za kvantitativno određivanje lijekova: soli sumporne, limunske i drugih kiselina. U tom se slučaju kromatografija ionske izmjene kombinira s kiselinsko-baznom titracijom. Poboljšanja u metodi omogućila su odvajanje nekih hidrofilnih organskih spojeva pomoću kromatografije ionskih parova reverzne faze. Kompleksometriju je moguće kombinirati s uporabom kationskih izmjenjivača u Zn 2+ obliku za analizu amino derivata u smjesama i alkaloida u ekstraktima i tinkturama. Dakle, kombinacija kromatografije ionske izmjene s drugim metodama proširuje njezin opseg primjene.

Godine 1975. predložena je nova verzija kromatografije koja se koristila za određivanje iona i nazvana ionska kromatografija. Za izvođenje analize koriste se kolone dimenzija 25 X 0,4 cm.Razvijena je ionska kromatografija na dva stupca i na jednom stupcu. Prvi se temelji na odvajanju iona ionskom izmjenom na jednoj koloni, nakon čega slijedi smanjenje pozadinskog signala eluensa na drugoj koloni i konduktometrijska detekcija, a drugi (bez potiskivanja pozadinskog signala eluensa) je kombiniran s fotometrijskim, atomskim apsorpcijskim i drugim metodama detekcije iona koji se određuju.

Unatoč ograničenom broju radova o korištenju ionske kromatografije u farmaceutskoj analizi, obećanje ove metode je očito za istovremeno određivanje anionskog sastava višekomponentnih oblika doziranja i fizioloških otopina za injekcije (koje sadrže sulfate, kloride, karbonate i fosfate). iona), za kvantitativno određivanje heteroelemenata u organskim ljekovitim tvarima (sadrže halogene, sumpor, fosfor, arsen), za određivanje stupnja onečišćenja vode koja se koristi u farmaceutskoj industriji raznim anionima, za određivanje pojedinih organskih iona u oblicima doziranja.

Prednosti ionske kromatografije su visoka selektivnost određivanja iona, mogućnost istovremenog određivanja organskih i anorganskih iona, niska granica detekcije (do 10 -3 pa čak i 10 -6 μg/ml), mali volumen uzorka i jednostavnost način pripreme, brzina analize (u 20 min, moguće je izdvajanje do 10 iona), jednostavnost opreme, mogućnost kombiniranja s drugim analitičkim metodama i proširenje opsega kromatografije u odnosu na objekte slične kemijske strukture i teško ih je odvojiti pomoću TLC, GLC, HPLC.

Najraširenije metode u farmaceutskoj analizi su papirna kromatografija i tankoslojna kromatografija.

U papirnoj kromatografiji stacionarna faza je površina posebnog kromatografskog papira. Raspodjela tvari događa se između vode koja se nalazi na površini papira i mobilne faze. Potonji je sustav koji uključuje nekoliko otapala.

U farmaceutskoj analizi, pri obavljanju ispitivanja pomoću papirne kromatografije, vode se uputama Državnog fonda XI, br. 1 (str. 98) i privatne farmakopejske monografije za pripadajuće ljekovite tvari (oblike). Pri ispitivanju autentičnosti, ispitivana tvar i odgovarajući standardni uzorak kromatografiraju se na istom listu kromatografskog papira. Ako su obje tvari identične, tada odgovarajuće točke na kromatogramima imaju isti izgled i jednake Rf vrijednosti. Ako se kromatografira mješavina ispitivane tvari i standardnog uzorka, tada se, ako su identični, na kromatogramu treba pojaviti samo jedna točka. Da biste isključili utjecaj kromatografskih uvjeta na dobivene R f vrijednosti, možete koristiti objektivniju vrijednost R S, koja je omjer R f vrijednosti testnog i standardnog uzorka.

Pri ispitivanju čistoće prisutnost nečistoća prosuđuje se prema veličini i intenzitetu boje mrlja na kromatogramu. Nečistoća i glavna tvar moraju imati različite vrijednosti R f. Za polukvantitativno određivanje udjela nečistoća istodobno se dobiva kromatogram ispitivane tvari uzet u određenoj količini i nekoliko kromatograma standardnog uzorka uzetog u točno izmjerenim količinama. na jednom listu papira pod istim uvjetima. Zatim se međusobno uspoređuju kromatogrami ispitivanog i standardnog uzorka. Na temelju veličine mrlja i njihovog intenziteta zaključuje se o količini nečistoća.

Slični dokumenti

Posebnosti farmaceutske analize. Ispitivanje autentičnosti lijekova. Izvori i uzroci loše kvalitete ljekovitih tvari. Podjela i značajke metoda za kontrolu kvalitete ljekovitih tvari.

sažetak, dodan 19.09.2010


Kriteriji farmaceutske analize, opći principi ispitivanja autentičnosti ljekovitih tvari, kriteriji dobre kakvoće. Značajke ekspresne analize oblika doziranja u ljekarni. Provođenje eksperimentalne analize tableta analgina.

kolegij, dodan 21.08.2011


Državna regulativa u području prometa lijekova. Krivotvorenje lijekova važan je problem današnjeg farmaceutskog tržišta. Analiza stanja kontrole kvalitete lijekova u sadašnjoj fazi.

kolegij, dodan 07.04.2016


Stanje marketinških istraživanja farmaceutskog tržišta lijekova. Metode analize niza lijekova. Robne karakteristike vinpocetina. Analiza lijekova za poboljšanje moždane cirkulacije odobrenih za uporabu u zemlji.

kolegij, dodan 03.02.2016


Primjena antibiotika u medicini. Procjena kvalitete, čuvanje i izdavanje oblika lijekova. Kemijska struktura i fizikalno-kemijska svojstva penicilina, tetraciklina i streptomicina. Osnove farmaceutske analize. Metode kvantitativnog određivanja.

kolegij, dodan 24.05.2014


Klasifikacija oblika doziranja i značajke njihove analize. Kvantitativne metode za analizu jednokomponentnih i višekomponentnih oblika lijekova. Fizikalno-kemijske metode analize bez odvajanja komponenti smjese i nakon njihovog prethodnog odvajanja.

sažetak, dodan 16.11.2010


Povijest razvoja tehnologije oblika doziranja i farmacije u Rusiji. Uloga lijekova u liječenju bolesti. Pravilno uzimanje lijekova. Način primjene i doza. Prevencija bolesti lijekovima, preporuke liječnika.

prezentacija, dodano 28.11.2015


Sustav za analizu marketinških informacija. Odabir izvora informacija. Analiza asortimana ljekarničke organizacije. Karakteristične značajke tržišta lijekova. Načela segmentacije tržišta. Osnovni mehanizmi djelovanja antivirusnih lijekova.

kolegij, dodan 09.06.2013


Pojam pomoćnih tvari kao farmaceutskog čimbenika; njihova klasifikacija ovisno o podrijetlu i namjeni. Svojstva stabilizatora, prolongatora i korektora mirisa. Nomenklatura pomoćnih tvari u tekućim oblicima lijekova.

sažetak, dodan 31.05.2014


Kombinirano djelovanje ljekovitih tvari. Sinergija i njene glavne vrste. Pojam antagonizma i antidotizma. Farmaceutske i fizikalno-kemijske interakcije lijekova. Osnovni principi interakcija lijekova.

Farmaceutska analiza (PA). Osnova je farmaceutske kemije i ima svoje osobine koje ga razlikuju od drugih vrsta analiza. Sastoje se u tome da se analiziraju tvari različite kemijske prirode: anorganski, organoelementni, radioaktivni, organski spojevi od jednostavnih alifatskih do složenih prirodnih biološki aktivnih tvari. Raspon koncentracija analiziranih tvari iznimno je širok. Predmet farmaceutske analize nisu samo pojedinačne ljekovite tvari, već i smjese koje sadrže različit broj komponenti.

Godišnje nadopunjavanje arsenala lijekova zahtijeva razvoj novih metoda za njihovu analizu. Metode farmaceutske analize zahtijevaju sustavno usavršavanje zbog stalnog povećanja zahtjeva kako za kvalitetom lijekova tako i za kvantitativnim sadržajem biološki aktivnih tvari u njima. Zbog toga se pred farmaceutsku analizu postavljaju visoki zahtjevi. Mora biti vrlo specifičan i osjetljiv, točan u odnosu na regulatorne zahtjeve Državne farmakopeje X i XI i druge znanstvene i tehničke dokumentacije (FS, GOST), proveden u kratkim vremenskim razdobljima uz korištenje minimalnih količina ispitivanih lijekova i reagensa.

Ovisno o zadaćama, farmaceutska analiza uključuje različite oblike kontrole kvalitete lijekova: farmakopejska analiza; postupna kontrola proizvodnje lijekova; analiza pojedinačno proizvedenih oblika lijeka; brze analize u ljekarni i biofarmaceutske analize. Njegov sastavni dio je farmakopejska analiza, koja je skup metoda za proučavanje lijekova i oblika doziranja navedenih u Državnoj farmakopeji ili drugoj znanstveno-tehničkoj dokumentaciji (FS, FSP, GOST). Na temelju rezultata dobivenih farmakopejskom analizom donosi se zaključak o sukladnosti lijeka sa zahtjevima Državne farmakopeje ili druge tehničke dokumentacije. Ako odstupite od ovih zahtjeva, lijek nije dopušten za upotrebu.

Kemijska analiza biljnog materijala. Prema tehnici izvođenja i prirodi dobivenih rezultata kemijske reakcije dijelimo u nekoliko skupina: kvalitativne, mikrokemijske i histokemijske, mikrosublimacijske.

Za utvrđivanje autentičnosti ljekovitog biljnog materijala koriste se najjednostavnije kvalitativne reakcije i kromatografski testovi na djelatne i srodne tvari. Metodologija je navedena u relevantnoj regulatornoj dokumentaciji za vrstu sirovine koja se proučava u odjeljku "Kvalitativne reakcije".

Kvalitativne reakcije provode se na suhim sirovinama sa sljedećim vrstama sirovina: hrastova kora, kalina, krkavina, rizomi bergenije, rizomi i korijeni divljaka, maslačak, sljez, ginseng, korijen žutike, cvijet lipe, sjeme lana, sklerocija ergota (za ukupno 12 vrsta sirovina) .

Uglavnom se kvalitativne reakcije provode ekstrakcijom (ekstraktima) iz ljekovitog biljnog materijala.

Na temelju svojstava biološki aktivnih tvari ekstrahiraju se iz sirovina vodom, alkoholom različitih koncentracija ili organskim otapalom, rjeđe dodatkom lužine ili kiseline.

Vodeni ekstrakt priprema se od sirovina koje sadrže glikozide, polisaharide, saponine, fenologlikozide, antraglikozide i tanine. Alkaloidi se ekstrahiraju iz sirovina u obliku soli pomoću zakiseljene vode.

Velika skupina biološki aktivnih tvari (srčani glikozidi, kumarini, lignani, flavonoidi) ekstrahiraju se etilnim i metilnim alkoholom različitih koncentracija.

Ako je reakcija dovoljno specifična i osjetljiva, tada se provodi sa sirovim ekstraktom iz sirovine.

Takve reakcije uključuju:

opće alkaloidne sedimentne reakcije;

reakcije s otopinom aluminijevog klorida na flavonoide (gospina trava, knotweed, paprena metvica, itd.);

Sinod test na flavonoide u cvjetovima smilja;

reakcija s otopinom lužine na derivate antracena (kora krkavine, korijenje rabarbare itd.);

reakcija s otopinom ferroammonium alum na tanine (hrastova kora, serpentinski rizomi, bergenia, itd.).

Često reakciju ometaju popratne tvari (proteini, amini, steroli, klorofil). U ovom slučaju koristi se pročišćeni ekstrakt (na primjer, iz sirovina koje sadrže srčane glikozide, kumarine, alkaloide, fenol glikozide, lignane).

Ekstrakcija se pročišćava taloženjem popratnih tvari otopinom olovo acetata i natrijevog sulfata ili metodom izmjene otapala ili metodom razdjelne kromatografije.

Mikrokemijske reakcije obično se provode istovremeno s mikroskopskom analizom, promatrajući rezultate pod mikroskopom:

za eterična i masna ulja s otopinom Sudan III;

na lignificirane lignificirane elemente otopinom floroglucinola i 25% otopinom sumporne kiseline ili koncentrirane klorovodične kiseline.

Hrastova kora (prah) reagira s ferroamonium alumom i rezultat reakcije se proučava pod mikroskopom.

Histokemijske reakcije su reakcije koje se mogu koristiti za otkrivanje određenih spojeva izravno u stanicama ili strukturama gdje su lokalizirani.

Prema Državnoj farmakopeji XI histokemijske reakcije provode se na sluzi s otopinom tinte u korijenu bijelog sljeza i sjemenkama lana.

Mikrosublimacija- izravno izdvajanje iz suhog biljnog materijala tvari koje zagrijavanjem lako sublimiraju. Nastali sublimat se ispituje pod mikroskopom, zatim se provodi mikrokemijska reakcija s odgovarajućim reagensom.

Metode utvrđivanja autentičnosti ljekovitog biljnog materijala. Autentičnost sirovina utvrđuje se makroskopskim, mikroskopskim, kemijskim i luminiscentnim analizama.

Makroskopska analiza. Da biste to proveli, morate poznavati morfologiju biljaka. Proučavaju izgled sirovine golim okom ili pomoću povećala, a milimetarskim ravnalom mjere veličinu čestica. Pri dnevnom svjetlu određuje se boja sirovine s površine, na prijelomu i u rezu. Miris se uspostavlja trljanjem ili lomljenjem biljaka, a okus samo kod neotrovnih biljaka. Pri proučavanju izgleda obratite pozornost na morfološke karakteristike dijelova sirovine.

Mikroskopska analiza. Koristi se za utvrđivanje autentičnosti usitnjenih ljekovitih biljnih materijala. Za to je potrebno poznavati anatomsku građu biljaka općenito i osobine karakteristične za pojedinu biljku po kojima se ona razlikuje od drugih biljaka.

Kemijska analiza. Omogućuje provođenje kvalitativnih, mikrokemijskih, histokemijskih reakcija i sublimacije za određivanje aktivnih ili srodnih tvari u sirovinama. Preporučljivo je mikrokemijske reakcije provoditi paralelno s mikroskopskom analizom. Histokemijske reakcije provode se kako bi se identificirali specifični spojevi na njihovim lokacijama u biljci. Pod sublimacijom se podrazumijeva dobivanje iz biljnih sirovina tvari koje zagrijavanjem lako sublimiraju, nakon čega slijedi kvalitativna reakcija sa sublimatom.

Luminescentna analiza. Ovo je metoda za proučavanje različitih objekata (uključujući i biološke), koja se temelji na promatranju njihove luminescencije. Luminescencija je sjaj plina, tekućine ili krutine, uzrokovan ne zagrijavanjem tijela, već netoplinskim pobuđivanjem njegovih atoma i molekula. Luminescentna analiza provodi se za određivanje tvari s luminescencijom u ljekovitim sirovinama.

Kontrola kvalitete organoterapijskih lijekova. Da bi se provjerilo zadovoljava li kvaliteta željeza zahtjeve standarda, iz svake serije odabire se 5% kutija ili pakiranja, ali ne manje od pet takvih pakiranja. Ako u jednoj od otvorenih kutija ili pakiranja žlijezde ne zadovoljavaju zahtjeve odgovarajuće norme za barem jedan od pokazatelja, tada se provjerava cijela serija.

Za pojedine vrste sirovina postoje objektivne (laboratorijske) metode ocjene njihove kakvoće.

Objektivno, kvaliteta gušterače namijenjena za proizvodnju inzulina, prema GOST-u, određena je masenim udjelom masti i masenim udjelom inzulina odgovarajućim laboratorijskim metodama.

Maseni udio masti određuje se butirometrom. Maseni udio inzulina provjerava se na zahtjev potrošača imunoreaktivnom metodom pomoću antiseruma i imunoglobulina u homogeniziranoj žlijezdi.

Kvaliteta sluznice (epitela) jezika goveda provjerava se određivanjem pH vrijednosti podloge za konzerviranje s epitelom i njegovom bakterijskom kontaminacijom. Bit metode je određivanje ukupnog broja mikroba u 1 ml konzervansnog medija s epitelom.

Kvaliteta staklastog tijela zamrznutih očiju goveda, svinja, ovaca i koza određena je kvantitativnim sadržajem hijaluronske kiseline (glukozamina) u staklastom tijelu. Princip metode temelji se na određivanju glukozamina u produktima hidrolize hijaluronske kiseline, koji je sastavni dio molekule hijaluronske kiseline i izravno ovisi o njegovom sadržaju u staklastom tijelu.

Biološka aktivnost hipofize određena je jedinicama djelovanja ACTH sadržanog u 1 mg kiselog acetoniziranog praha (AAP) dobivenog iz hipofize.

Određivanje aktivnosti ACTH temelji se na njegovoj sposobnosti da izazove smanjenje limfoidnog tkiva, posebice timusa štakora. Za jedinicu djelovanja lijeka uzima se dnevna doza lijeka koja pri primjeni tijekom pet dana uzrokuje smanjenje težine žlijezde za 50±5%.

Histološki se utvrđuje kvaliteta paratireoidnih žlijezda. Na presjecima paratireoidnih žlijezda vidljive su nakupine epitelnih stanica s izraženom bazofilnom granularnošću. Na presjecima limfnih žlijezda vidljivo je retikularno tkivo (u obliku homogene mase), okruženo gustom vezivnom membranom (kapsulom), iz koje se prema unutra pružaju jasno vidljive vezivne vrpce. Državni standard propisuje da uzorak od 40 žlijezda ne smije sadržavati više od jednog limfnog čvora.

Metode određivanja kakvoće suhih bioloških pripravaka. Suhi biološki pripravci imaju niz prednosti u odnosu na tradicionalne tekuće biološke pripravke zbog bolje kvalitete, manje mase, produženog roka trajanja i lakoće transporta.

Fizikalne metode. 1. Metoda određivanja vakuuma. Bit metode leži u sposobnosti visokofrekventne električne struje visokog napona da izazove sjaj u plinovima, čija priroda varira ovisno o stupnju razrijeđenosti zraka u ampuli (boci).

Izbor uzorka. Uzorkovanje se provodi u skladu s pravilima utvrđenim u državnim standardima za suhe biološke pripravke.

Hardver i oprema. Pri izvođenju testa koristi se sljedeća oprema: aparat tipa “D’Arsenal” ili “Tesla”, stalak za ampule i metalni stol.

Izvođenje testa. Priprema za test:

Prije testiranja provjerite izgled, nepropusnost brtvljenja bočica, prisutnost pukotina i brtvljenje ampula.

Uređaj se drži 10 minuta nakon uključivanja. Ispitne ampule postavljaju se u stativ, a zatim im se prinosi elektroda na udaljenosti od 1 cm. Prilikom određivanja vakuuma pomoću Tesla aparata, jedna metalna elektroda uređaja uzemljuje se preko metalnog stola na kojem su položene ampule , a drugi se donosi ampulama koje se ispituju. Ekspozicija nije duža od 1 s.

Obrada rezultata. Pojava sjaja unutar ampula s karakterističnim zvukom pucketanja ukazuje na prisutnost vakuuma u njima.

Stupanj razrijeđenosti zraka u ispitivanim ampulama određen je prirodom sjaja plinova u ispitivanim ampulama u skladu sa sljedećim podacima.

Određivanje stupnja razrijeđenosti zraka u ispitivanim ampulama

2. Metoda određivanja vlažnosti. Bit metode je određivanje smanjenja mase uzorka lijeka nakon 1 sata sušenja na temperaturi od 105 °C.

Izbor uzorka. Za ispitivanje se odabire potreban broj ampula (bočica) s različitih mjesta u pakiranju, uzimajući u obzir zahtjeve za masu uzorka (u skladu sa standardom).

Prilikom uzimanja uzoraka provjeriti nepropusnost ampula. Za boce s liofiliziranim lijekom provjerava se cjelovitost stjenke i dna, kao i potpuno pristajanje zarolanog poklopca i gumenog čepa. Ako postoje nedostaci, boca se zamjenjuje drugom. Svaka ampula, zatvorena pod vakuumom, provjerava se na curenje prije nego se iz nje ukloni lijek.

Oprema, materijali i reagensi. Pri provođenju testa koristiti: laboratorijske vage, laboratorijski ormar za sušenje, živine termometre, eksikator, staklene boce, tehnički vazelin, bezvodni kalcijev klorid ili dehidrirani gips ili kalcinirani silikagel.

Priprema za test. Sušionica se provjerava maksimalnim termometrima za ravnomjerno zagrijavanje.

Kod sušenja uzoraka u bocama donji dio kontrolnog termometra treba biti u razini boca. Očitanja kontrolnog termometra odlučujuća su za podešavanje temperature u ormaru.

Vaga mora biti postavljena na stabilan stol bez vibracija. Rezultati svih vaganja bilježe se u gramima točno na četvrto decimalo.

Dno eksikatora treba napuniti dehidriranim kalcijevim kloridom ili gipsom ili silika gelom. Polirani rubovi posude lagano su podmazani tehničkim vazelinom.

Za svaku analizu potrebno je pripremiti tri boce istih promjera i visine.

Izvođenje testa. Za određivanje vlažnosti koriste se tri ampule ako svaka sadrži uzorak mase najmanje 0,1 g. Ako ampula sadrži manje od 0,1 g biološkog pripravka, mogu se koristiti dvije ili više ampula.

Odabrani uzorak, usitnjen do praškastog stanja, stavlja se u ravnomjernom sloju u prethodno izvaganu bocu.

Boce se stavljaju u ormar za sušenje na policu. Početkom sušenja treba smatrati vrijeme kada temperatura dosegne 105 °C prema kontrolnom termometru. Vrijeme sušenja 60 min.

Nakon završenog sušenja boce se brzo zatvaraju poklopcima i prenose u eksikator da se ohlade na sobnu temperaturu, nakon čega se boce važu do četvrte znamenke i bilježe prema obliku.

3. Metoda određivanja količine kisika. Izbor uzorka. Uzorkovanje se provodi u skladu s pravilima utvrđenim u državnim standardima za suhe biološke pripravke.

Oprema, materijali i reagensi. Prilikom provođenja testa koristite: plinski kromatograf marke LXM-8MD ili druge slične marke s detektorom toplinske vodljivosti i kolonom za plinsku kromatografiju promjera 3 mm i duljine 1000 mm, mufelnu peć s temperaturom zagrijavanja do do 1000 °C, mjerač protoka plina s biretom, štoperica, medicinska štrcaljka kapaciteta 1 cm 3, pletena žičana mreža, mjerno povećalo, eksikator, porculanski tarionik, metalno ravnalo dužine 30 cm, molekularna sita - sintetička zeolit ​​grade CaA, medicinska igla, medicinska gumena cijev unutarnjeg promjera 4,2 mm, dužine 10 m, boca kapaciteta 3000 cm 3, gumeni čep, silikonsko ulje, helij, dušik, destilirana voda.

Priprema za test. Priprema stupca. Sintetski zeolit ​​se usitnjava u porculanskom tarioniku, prosijava na sitima, ispire destiliranom vodom, suši i kalcinira u mufelnoj peći na temperaturi od 450...500 °C 2 sata, zatim se ohladi u eksikatoru na mrežicama do sobne temperature. temperatura.

Kromatografska kolona postavljena je vertikalno i ispunjena sintetskim zeolitom. Kolona nije dopunjena za 1 cm i zapečaćena je mrežicom. Napunjena kolona postavlja se u termostat kromatografa i kroz nju se, bez spajanja na detektor, propušta struja helija ili dušika 3 sata na temperaturi od 160...180 °C. Kolona se zatim spaja na detektor i helij ili dušik nastavlja teći kroz nju sve dok se pomak nulte linije ne zaustavi pri maksimalnoj osjetljivosti detektora.

Kromatograf je pripremljen za rad i uključen prema tvorničkim uputama.

Priprema bočice s lijekom za ispitivanje. Za uzimanje uzorka iz bočice s lijekom tlak plina u bočici se izjednačava s atmosferskim tlakom.

Priprema medicinske štrcaljke. Najprije postavite metalnu cijev na šipku štrcaljke i provjerite ima li štrcaljke curi. Medicinska štrcaljka s iglom, ispitanom i pripremljenom za uzorkovanje plina, probija gumenu cijev kroz koju helij izlazi iz referentne kolone kromatografa, te se helij špricom dva puta polako uvlači i ispušta. Po treći put, uvlačenjem helija u štrcaljku i stavljanjem s iglom prema dolje, uzimaju se uzorci plina iz bočice s lijekom.

Izvođenje testa. Dva uzorka plina uzimaju se iz svake boce i uzastopno uvode jedan za drugim u intervalu od 3...4 minute u isparivač kromatografa. Uzorak se unosi u isparivač laganim pritiskom na šipku prstom. 110... 120 s nakon unošenja uzorka, rekorder iscrtava pik kisika na kromatogramu, a zatim vrh dušika.

Obrada rezultata. Izračunava se površina vrhova kisika i dušika. Da biste to učinili, izmjerite visinu i širinu vrhova kisika i dušika na kromatografu koristeći metalno ravnalo dugo 30 cm, povećalo i zašiljenu olovku. Visina vrhova mjeri se od osnovne linije do vrha vrha, širina vrha mjeri se na polovici njegove visine. Prilikom mjerenja, uzmite udaljenost od unutarnje debljine vršne linije do vanjske.

Površina vrha kisika (SO 2, mm 2) i dušika (5N 2, mm 2) izračunava se pomoću formula

SO2 = h 1 * b 1; SN = h 2 * b 2 ,

gdje je h 1 h 2 ~ visina vrhova kisika i dušika, mm; b 1, b 2 - širina vrhova kisika i dušika, mm.

Volumni udio kisika (X, %) u svakom uzorku plina izračunava se pomoću formule

X=SO 2 /(SO 2 +SN 2)

gdje su SO 2, SN 2 vršne površine kisika i dušika, mm 2.

Kao konačni rezultat ispitivanja uzima se aritmetička sredina rezultata određivanja u tri bočice lijeka.

Relativna smanjena pogreška metode s vjerojatnošću pouzdanosti od P-0,95 ne bi trebala prelaziti 10%.

Bakteriološka metoda. Kontrola sterilnosti. Bit metode je mikrobiološka procjena odsutnosti rasta bakterija i gljivica u pripravcima za sjetvu na hranjivim podlogama.

Izbor uzorka. Iz svake serije lijekova uzimaju se uzorci u količini od 0,15% bočica, ali ne manje od pet za tekuće i 10 ampula za suhe lijekove.

Priprema za test. Laboratorijsko stakleno posuđe kuha se 15 minuta u destiliranoj vodi, zakiseli otopinom klorovodične kiseline, zatim ispere vodom iz slavine i opere četkom u otopini koja sadrži 30 g praška za pranje i 50 cm 3 vodene otopine amonijaka na 1000 cm 3 destilirane vode. Nakon toga posuđe se temeljito opere najprije vodom iz slavine, a zatim tri puta destiliranom vodom, osuši i sterilizira.

Prije sterilizacije posude se stavljaju u metalne kutije. Sterilizirajte posude u autoklavu na 0,15 MPa 60 minuta.

Gotovi hranjivi mediji, ispitani na svojstva rasta, ulijevaju se u epruvete od 6 ... 8 cm 3 (za određivanje anaeroba, 10 ... 12 cm 3), a 50 ... 60 cm 3 u boce s kapacitet 100 cm 3.

Uzorci suhih bioloških pripravaka prethodno se otope sterilnim otapalom (izotonična otopina natrijeva klorida, destilirana voda i dr.).

Izvođenje testa. 1. Provođenje testa sterilnosti pomoću tioglikolatnog medija.

Iz svake bočice lijeka inokulira se 1 cm 3 u tri epruvete s tioglikolatnom podlogom.

Dvije inokulirane epruvete drže se u termostatu 14 dana: jedna na temperaturi od 21 °C, druga na temperaturi od 37 °C.

Treća epruveta se drži 7 dana na temperaturi od 37 °C, a zatim se potkulturira s 0,5 cm 3 jedne epruvete na kosom kazeinskom agaru, kazeinskom hranjivom juhi, Sabouraudovom mediju i 1 cm 3 po kazeinskoj hranjivoj juhi pod vazelinskim uljem s komadićima meso ili jetra.

Potkulture na kazeinskom agaru i bujonu s mesnim ekstraktom održavaju se još 7 dana na temperaturi od 37 °C, a potkulture na Sabouraudovom mediju održavaju se na temperaturi od 21 °C.

Pri ispitivanju uzoraka lijeka prati se sterilnost medija: tri epruvete sa svakim medijem drže se u termostatu 14 dana na 37 °C, sa Sabouraudovim medijem - na temperaturi od 21 °C.

2. Provođenje testa sterilnosti bez tioglikolatnog medija.

Svaki uzorak lijeka inokulira se na Sabouraudov tekući medij, agar s mesnim ekstraktom i bujon s mesnim ekstraktom - po tri epruvete; u srijedu Tarozzi - dvije epruvete i dvije boce.

Za identifikaciju aeroba sije se 0,5 cm 3 sjemenskog materijala u jednu epruvetu i 1...2 cm 3 u jednu bocu, a za identifikaciju anaeroba - 1 odnosno 5 cm 3. Usjevi se stavljaju u termostat (na temperaturu od 37 °C; za Sabouraud - na temperaturu od 21 °C) na 7 dana (15 dana za anaerobe). Zatim se vrši presađivanje (osim sjetve na mesnopeptonski agar). Subkultura na istim medijima. Ostaviti 7 dana (15 dana za anaerobe). Provesti kontrolu sterilnosti.

Evaluacija rezultata. Rezultati primarne i ponovljene inokulacije uzimaju se u obzir makroskopskim, au slučaju rasta mikroba i mikroskopskim pregledom svih inokulacija, uzetih u obzir 14 dana nakon inicijalne inokulacije na tioglikolatnu podlogu i 7 dana nakon inicijalne inokulacije bez tioglikolatni medij. Podloga se smatra sterilnom ako se rast ne primijeti ni u jednoj od inokuliranih epruveta.

U slučaju rasta barem u jednoj od inokuliranih epruveta, ponavlja se kontrola sterilnosti na istom broju uzoraka i mikroskopiranje uzgojenih mikroba. Brisevi se boje po Gramu da bi se zabilježila morfologija.

Ako u ponovljenoj kontroli nema rasta, lijek se smatra sterilnim. Ako postoji rast u barem jednoj epruveti, a mikroflora je identična tijekom inicijalne i ponovljene kulture, lijek se smatra nesterilnim.

Ako se tijekom početne i ponovljene kulture identificira različita mikroflora, a rast se otkrije samo u odvojenim epruvetama, uzorci se inokuliraju treći put.

Ako nema rasta, lijek se smatra sterilnim. Ako se otkrije rast u barem jednoj epruveti, bez obzira na prirodu mikroflore, lijek se smatra nesterilnim.

Regulatorni zahtjevi za kvalitetu gotovih oblika lijeka. Lijekovi se proizvode u tvornicama, tvornicama lijekova (službeni lijekovi) i ljekarnama (mainstream lijekovi). Kontrola gotovih oblika doziranja u farmaceutskim poduzećima provodi se u skladu sa zahtjevima NTD (Državna farmakopeja, FS, FSP, GOST). U skladu sa zahtjevima ovih dokumenata, oblici doziranja moraju biti ispitani (V.D. Sokolov, 2003).

Tablete se testiraju na raspadljivost. Ako nema drugih uputa u privatnom članku, tada se tablete trebaju raspasti unutar 15 minuta, a obložene tablete ne smiju se raspasti duže od 30 minuta. Enteričke tablete ne bi se trebale raspasti unutar 1 sata u otopini klorovodične kiseline, ali bi se trebale raspasti unutar 1 sata u otopini natrijevog bikarbonata. Čvrstoća abrazije tableta mora biti najmanje 75%. Lijek koji se nalazi u tableti mora se otopiti u vodi najmanje 75% unutar 45 minuta. Prosječna težina određena je vaganjem 20 tableta s točnošću od 0,001 g. Dopuštena su odstupanja od prosječne težine: ±7,5% za tablete težine 0,1...0,3 g i ±5% za tablete težine 0,5 g i više. Tablete također kontroliraju sadržaj talka.

Granule - određuju se prema veličini analizom sita. Promjer stanica treba biti 0,2...3 mm, a broj manjih i većih granula ne smije biti veći od 5%. Ispitivanje raspadljivosti granula iz uzorka od 0,5 g je isto kao i za tablete. Vrijeme raspadanja ne smije biti duže od 15 minuta. Odredite vlagu. Za određivanje sadržaja ljekovite tvari potrebno je uzeti uzorak od najmanje 10 mljevenih granula.

Kapsule - kontrolna prosječna težina. Odstupanje svake kapsule od njega ne smije biti veće od ±10%. Na isti način kao i kod tableta, prati se raspadljivost i topljivost, te utvrđuje ujednačenost doziranja kapsula koje sadrže 0,05 g ili manje ljekovite tvari. Kvantitativno određivanje ljekovitih tvari provodi se posebnim metodama, pri čemu se u te svrhe koristi sadržaj 20 do 60 kapsula.

Praškovi - ustanoviti odstupanja u masi doziranih prahova. Mogu biti ±15% s težinom praha do 0,1 g; ±10% - od 0,1 do 0,3 g; ±5% - od 0,3 do 1; ±3% - preko 1 g.

Čepići - vizualno određuju ujednačenost u uzdužnom presjeku. Prosječna težina određena je vaganjem s točnošću od 0,01 g, odstupanja ne smiju biti veća od ± 5%. Supozitoriji izrađeni na lipofilnoj bazi kontroliraju se temperaturom taljenja. Ne smije prelaziti

37 °C. Ako se ova temperatura ne može uspostaviti, tada se određuje vrijeme potpune deformacije, koje ne smije biti duže od 15 minuta. Čepićima izrađenim na hidrofilnoj osnovi ispituje se topljivost (indikator otapanja). Vrijeme otapanja određuje se pri temperaturi od (37±1) °C, a ne smije biti dulje od 1 sata Kvantitativno određivanje ljekovitih tvari provodi se posebnim metodama.

Tinkture – odrediti sadržaj alkohola odnosno gustoću. Sadržaj djelatnih tvari određuje se posebnim tehnikama. Dodatno se određuje suhi ostatak nakon isparavanja 5 ml tinkture do suhog u bočici i sušenja tijekom 2 sata na temperaturi od (102,5 ± 2,5) °C. U istom volumenu tinkture, nakon spaljivanja i kalciniranja njezine smjese s 1 ml koncentrirane sumporne kiseline, određuje se sadržaj teških metala.

Ekstrakti – kao i kod tinktura, određuju gustoću ili sadržaj alkohola, djelatnih tvari, teških metala. Određuje se i suha težina ostatka, au gustim i suhim ekstraktima određuje se sadržaj vlage [sušenjem u sušioniku na temperaturi (102,5 ± 2,5) °C].

Aerosoli - izmjerite tlak unutar cilindra pomoću manometra na sobnoj temperaturi (ako je pogonsko gorivo stlačeni plin). Provjerite curi li pakiranje. U doziranim pakiranjima određuje se prosječna težina lijeka u jednoj dozi, čije je odstupanje dopušteno ne više od +20%. Postotak oslobođenog sadržaja određuje se tako da se sadržaj izvadi iz spremnika i zatim izvaga. Kvantitativno određivanje tvari provodi se u skladu sa zahtjevima privatnih članaka Državne farmakopeje. Odstupanja od navedenih količina ne smiju biti veća od ±15%.

Masti - Uobičajeni test je metoda određivanja veličine čestica ljekovitih tvari u mastima. Koristi se mikroskop s okularnim mikrometrom MOV-1.

Flasteri. Sastav, pokazatelji kvalitete i metode ispitivanja su različiti i navedeni su u regulatornoj dokumentaciji za određene proizvode.

Kapi za oči testiraju se na sterilnost i prisutnost mehaničkih inkluzija.

Injekcijski oblici doziranja. Injekcijske medicinske otopine koje se daju intravenozno u velikim količinama zahtijevaju posebnu pozornost. Koriste karakteristike kao što su izgled, uključujući boju i prozirnost otopina, odsutnost mehaničkih nečistoća, apirogenost, sterilnost, volumen otopine, količinu aktivne tvari u njoj, pH i izotoničnost krvne plazme, pakiranje, označavanje, volumen punjenja od ampula. Norme dopuštenih odstupanja navedene su u Državnoj farmakopeji XI. Uz to se određuje sadržaj pomoćnih tvari; za neke od njih (fenol, krezol, sulfiti, klorobutanol) predviđene su dopuštene količine (od 0,2 do 0,5%). Zahtjevi za pH ovise o lijeku, obično njegova vrijednost može biti u rasponu od 3,0 do 8,0. Svaka ampula (bočica) označava naziv lijeka, njegov sadržaj (u postocima) ili aktivnost (u akcijskim jedinicama, ED), volumen ili težinu, broj serije, rok valjanosti. Sva ispitivanja injektibilnih oblika doziranja regulirana su normativno-tehničkom dokumentacijom.

Analiza homeopatskih lijekova je vrlo otežana zbog velikih razrjeđenja ljekovitih tvari. Ako se biološki aktivne tvari nalaze u tinkturama, esencijama, mastima i drugim oblicima u razrjeđenjima do 2 C (C je stotinka) ili 0,0001, tada se njihova analiza i standardizacija praktički ne razlikuje od kontrole kvalitete ljekovitih oblika koji se koriste u alopatskoj medicini. Lijekovi u razrjeđenju od 2...3 C (10 -4 ...10 -6) analiziraju se posebnim tehnikama koncentracije isparavanjem, spaljivanjem tvari, nakon čega slijedi određivanje jednom od fizikalno-kemijskih metoda, na temelju njegove rezolucije. Uz razrjeđenje veće od 3 C (10 -6), dovoljno je utvrditi autentičnost lijeka sadržanog u jednoj pojedinačnoj ili dnevnoj dozi. Pri vrlo visokim razrjeđenjima (do 50 C ili 10 -10 ... 10 -100) nemoguće je kontrolirati kvalitetu homeopatskih lijekova postojećim metodama. Za takve lijekove kontrola kvalitete provodi se u fazi proizvodnje, strogo kontrolirajući tehnološki proces. Kvaliteta se kontrolira prilikom utovara sastojaka i bilježi u izvješću o utovaru. Svaki sastojak je podvrgnut preliminarnoj analizi. U svim tim slučajevima koriste se kromatografske, fotometrijske, fluorescentne i druge metode za analizu i standardizaciju homeopatskih lijekova.