Съвременни методи за анализ на лекарства. Изследователска работа "анализ на лекарства". Едно лекарствено вещество е чисто, ако по-нататъшното пречистване не променя неговата фармакологична активност, химическа стабилност, физични характеристики

Понастоящем за количествено определяне на лекарствени вещества в регулаторната документация (GF CHYY) се използват доста широко класически (титриметрични) методи за анализ, но в този случай определянето не се извършва въз основа на фармакологично активната част на молекулата.

Нитрометрията е титриметричен метод за анализ, при който разтвор на натриев нитрит се използва като титруващ реагент.

Използва се за количествено определяне на съединения, съдържащи първична или вторична ароматна аминогрупа, за определяне на хидразини, както и ароматни нитросъединения след предварителна редукция на нитрогрупата до аминогрупа. Точна претеглена проба от лекарството, посочена в частната фармакопейна монография, се разтваря в смес от 10 ml вода и 10 ml солна киселина, разредена 8,3%. Добавя се вода до общ обем от 80 ml, 1 g калиев бромид и при непрекъснато разбъркване се титрува с 0,1 М разтвор на натриев нитрит. В началото на титруването се добавя разтвор на натриев нитрит със скорост 2 ml/min, а в края (0,5 ml преди еквивалентното количество) - 0,05 ml/min.

Титруването се извършва при температура на разтвора 15-20°C, но в някои случаи е необходимо охлаждане до 0-5°C.

Точката на еквивалентност се определя чрез електрометрични методи (потенциометрично титруване, амперометрично титруване) или с помощта на вътрешни индикатори.

При потенциометричното титруване платинов електрод се използва като индикаторен електрод, докато електродите от сребърен хлорид или наситен каломел се използват като референтни електроди.

Към електродите се прилага потенциална разлика от 0,3-0,4 V, освен ако не е посочено друго в частна фармакопейна монография.

Като вътрешни индикатори използвайте тропеолин 00 (4 капки разтвор), тропеолин 00, смесен с метиленово синьо (4 капки разтвор на тропеолин 00 и 2 капки разтвор на метиленово синьо), неутрално червено (2 капки в началото и 2 капки в края). на титруване).

Титруването с тропеолин 00 се извършва до промяна на цвета от червено в жълто, със смес от тропеолин 00 с метиленово синьо - от червено-виолетово до синьо, с неутрално червено - от червено-виолетово до синьо. Времето на престой в края на титруването с неутрално червено се увеличава до 2 минути. В същото време се провежда контролен опит.

Чрез нитрометрия се определят: хлорамфеникол, новокаин хидрохлорид, парацетамол, сулфадиметоксин. Определянето се основава на ароматната аминогрупа.

Методът на неводно титруване определя арбидол, артикаин хидрохлорид, атенолол, ацикловир, диазолин, дифенхидрамин, дроперидол, дротаверин хидрохлорид, изониазид, кетамин хидрохлорид, клотримазол, клонидин хидрохлорид, кодеин, кодеин фосфат, кофеин, безводен кофеин, метронидазол, диклофенак натрий, никотинамид, нитразепам, папаверин хидрохлорид, пиридоксин хидрохлорид, пироксикам, фенпивериниум бромид, хлоропирамин хидрохлорид, верапамил хидрохлорид, халоперидол, гликлазид, диазепам, итраконазол, клемастин фумарат, мелоксикам, мелдоний, метформин хидрохлорид, натриев кромоглика те, тиамин хлорид, тинидазол, тиоридазин , тиоридазин хидрохлорид, феназепам . Този метод се използва за количествено определяне на повече от половината от лекарствените вещества, включени в Глобалния фонд ChYY. Недостатъкът на този метод е, че продуктите от разлагането на лекарствата, които имат основни свойства, също могат да бъдат титрувани с перхлорна киселина заедно с неразградените лекарства.

Количественото определяне на аналгин според GF ChYY се извършва с помощта на йодометричен метод. Около 0,15 g (точно претеглено) от веществото се поставя в суха колба, добавят се 20 ml 96% алкохол, 5 ml 0,01 М разтвор на солна киселина и веднага се титрува с 0,1 М разтвор на йод при разбъркване до поява на жълт цвят, който не изчезва в продължение на 30 s. . Методът се основава на окисляването на сяра плюс 4 до сяра плюс 6. Недостатъкът на метода е, че определянето не се извършва на базата на фармакологично активната част на молекулата (1-фенил-2,3-диметил-4 -метиламино пиразолон-5).

Алкалиметричният метод се използва за определяне на ацетилсалицилова киселина, глутаминова киселина, доксазозин мезилат, метилурацил, напроксен, никотинова киселина, питофенон хидрохлорид, теофилин, фуроземид - точката на еквивалентност се установява с помощта на индикатор. Бромхексин хидрохлорид, лидокаин хидрохлорид, лизиноприл, ранитидин хидрохлорид - с потенциометрично завършване. Стандартизацията на тези вещества се извършва главно според HCl, която не е фармакологично активно вещество.

HPLC метод GF ChYY препоръчва използването за определяне на гвайфенезин, карбамазепин, кеторолак, рибоксин, симвастатин, ондансетрон хидрохлорид. Определянето се извършва въз основа на фармакологично активната част на лекарствената молекула.

Спектрофотометричният метод се използва за определяне на хидрокортизон ацетат, спиронолактон и фуразолидон. Методът не е достатъчно селективен, тъй като продуктите на разпадане и изследваното вещество могат да имат едни и същи максимуми на абсорбция на светлина.

На настоящия етап от развитието на фармацевтичната химия физикохимичните методи за анализ имат редица предимства пред класическите, тъй като се основават на използването както на физичните, така и на химичните свойства на лекарствените вещества и в повечето случаи се характеризират с бързина, селективност, висока чувствителност, възможност за унификация и автоматизация.

GLC методът е универсален, високочувствителен и надежден. Този метод за качествено и количествено определяне на димексиден мехлем 50% е използван от M.V. Гаврилин, Е.В. Компанцева и др.

А.Г. Витенберг, в хода на изследване на хлорирана чешмяна вода, установи, че съдържанието на примеси от летливи халогенирани въглеводороди не остава постоянно и се увеличава, докато водата остава във водоснабдителната система. Това показва непълнотата на химичните трансформации на хуминови вещества след хлориране на водата. Съществуващите сертифицирани методи, базирани на газов хроматографски анализ в пространството на главата, не вземат предвид тази характеристика и осигуряват определянето само на свободни халогенирани въглеводороди. Извършена е сравнителна оценка на официалните методи и са идентифицирани източници на грешки, надвишаващи допустимите стойности. Предложени са начини за оптимизиране на всички етапи на анализа, за да се създадат методи, които предоставят минимални грешки и надеждна информация за съдържанието на летливи халогенирани въглеводороди в чешмяната и отпадъчните води.

Използва се газова хроматография за определяне на амфетамини, барбитурати, бензодиазепини и опиати в урината чрез високотемпературна твърдофазова микроекстракция на лекарства.

Йонната хроматография е използвана от Siang De-Wen за определяне на анионобменниците в питейната вода. Методът се оказа прост, бърз и точен (всички аниони се откриват едновременно със стандартно отклонение от ?3%, регенерация 99,7% и 102%). Анализът продължи 15 минути.

Редица автори са изчислили: разликите в газовите хроматографски индекси на задържане на продуктите на хлориране на алифатни кетони и изходните карбонилни съединения са постоянни. Техните числени стойности зависят от броя и позицията на хлорните атоми в молекулата. Разработихме вариант на адитивни схеми за оценка на индексите на задържане за идентифициране на хлорирани карбонилни съединения. И.Г. Zenkevich установи реда на хроматографско елуиране на диастомер b-b"-дихлоро-К-алкани (K?2).

И.В. Gruzdyev и съавтори изследваха 2- и 4-хлороанилин, 2,4- и 2,6-дихлороанилин, 2,4,5- и 2,4,6-трихлороанилин и незаместен анилин, разработиха методи за определяне на техните следи в питейна вода, включително получаването на бромопроизводни, течна екстракция с толуен, както и за определяне на дифенхидрамин хидрохлорид и неговата основа в присъствието на продукти от разлагането.

В.Г. Amelin et al използваха газова хроматография с детектор за масспектрометрия с времето на полета, за да идентифицират и определят пестициди и полициклични ароматни въглеводороди (46 съставки) във вода и храна.

Потапова Т.В., Щеглова Н.В. При изследване на равновесните реакции на образуване на циклохексадиаминтетраацетатни, етилендиаминтетраацетатни, диетилентриаминпентаацетатни комплекси на някои метали се използва методът на йонообменна хроматография.

Използвайки аналитични системи (течна хроматография, масспектрометрия), Sony Weihua и редица автори установиха, че в процеси, включващи ОН радикали на активни електролити, фармацевтичните лекарства са почти напълно унищожени.

Виталиев А.А. и други са изследвали условията за изолиране на кеторолак и диклофенак от биологични течности. Те предложиха метод за екстракция с органични разтворители при различни стойности на pH. Методът TLC се използва за идентифициране на аналитите.

Използването на планарна хроматография на примера на аминокиселини и амлодипин беше демонстрирано от Pakhomov V.P., Checha O.A. за изследване и разделяне на оптично активни лекарствени вещества в отделни стереоизомери с последваща идентификация.

Методът на капилярна газова хроматография в комбинация с масова спектрофотометрия показа, че екстракцията на стероиди от кръвта е най-пълна (~100%).

Използвайки рециркулационна HPLC, учените изолираха осем нецитотоксични модификации на бактериална лекарствена резистентност.

Н.Н. Дементиева, Т.А. Завражская използва газови хроматографски методи за анализ на различни лекарства в инжекционни разтвори и капки за очи.

Използва се течна хроматография за определяне на хиперацин и псевдохиперацин във фармацевтични препарати с флуоресцентно откриване. Същият метод идентифицира валпроева киселина в човешки серум, границата на откриване е 700 mmol/l. Методът HPLC се използва за определяне на динатриев кромогликат във фармацевтични продукти. Използвайки този метод, беше възможно да се открият 98,2-100,8% от аналита, добавен към пробата.

M.E. Евгениев и колегите му установяват влиянието на природата и полярността на елуента, съдържанието на водната фаза във водно-неводна смес и нейното рН върху подвижността на 5,7-динитробензофуразинови производни на редица ароматни амини при UV-HPLC условия. Колоната ZORBAX SB-C18 е разработена за разделяне на смес от шест ароматни амина.

При разработването на методи за оценка на качеството на новокаин, циклометазидин, сиднокарб A.S. Kvach и съавторите са използвали методи на HPLC и микроколонна адсорбционна хроматография в комбинация с фотометричен метод за анализ, позволяващ количествено определяне на новокаин в субстанцията и течните дозирани форми от фармакологично активната част на молекулата.

И.А. Количев, З.А. Темердашев, Н.А. Фролов разработи HPLC метод за определяне на дванадесет фенолни съединения в растителни материали, използвайки обратнофазова HPLC с UV детекция и режим на елуиране на елуента. Изследвахме влиянието на различни фактори на разделяне на галова, транс-ферулова, протокатехинова, транс-кафеена киселини, кверцетин, рутин, дихидрокверцетин и епикатехин.

НА. Epstein използва метода HPLC за едновременно определяне на лекарствени вещества в суспензии. Редица автори са използвали този метод за определяне на едновременното съдържание на пароксетин, рисперидон и 9-хидроксирепидон в човешка плазма (с кулонометрично откриване. Използване на HPLC с UV детектор в режим на презареждане на колона, метод за определяне на клотримазол и мометазонов фурат в широк диапазон от концентрации е описано.

А.М. Мартинов, Е.В. Чупарина разработи недеструктивна техника за рентгеново флуоресцентен анализ на йони в растения с помощта на спектрометър. Установено е, че намаляването на теглото на растението от 6 на 1 грам повишава чувствителността на определянето на елемента. С помощта на тази техника е определен елементният състав на теменужките, използвани в медицината.

КАТО. Саушкина, В.А. Беликов извърши спектрофотометрия за идентифициране на хлорамфеникол в лекарствени форми. Използвайки метода на UV спектрофотометрия, е предложен метод за количествено определяне на парацетамол и мефенамова киселина в таблетки. Оптималните условия за спектрофотометричен анализ на метазид, фтивазид, изониазид, хлорамфеникол и синтомицин са установени въз основа на изследването на UV спектрите. При спектрофотометричното определяне на кеторолак относителната грешка е ±1,67%.

В И. Вершинин и съавторите идентифицираха отклонения от адитивността на светлопоглъщащи смеси и ги прогнозираха, използвайки статистически модели, получени в хода на пълен факторен експеримент. Моделите свързват вариации и състав на смеси, което позволява оптимизиране на техниките за спектрофотометричен анализ.

Ж.А. Кормош и неговите съавтори определят пироксикам въз основа на екстракцията на неговия йонен асоциат с полиметиново багрило, използвайки метода SFM. Максимална екстракция с толуен се постига при pH=8,0-12,0 на водната фаза. За контрол на качеството на лекарствените продукти, съдържащи пироксикам, е разработен метод за екстракционно-спектрофотометрично определяне.

Обещаващ метод за изследване на лекарствено вещество е екстракционната фотометрия. Този метод се характеризира с висока чувствителност поради образуването на реакционни продукти с реагенти, което води до появата на допълнителни хромофори, повишена конюгация, а също и поради концентрацията на реакционните продукти в органичната фаза. Достатъчната точност, сравнителната лекота на прилагане и възможността за определяне на активното вещество от фармакологично активната част на молекулата са друго предимство на екстракционната фотометрия.

Е.Ю. Жарская, Д.Ф. Нохрин, Т.П. Churin използва екстракционна фотометрия за определяне на верапамил хидрохлорид, мезапам от фармакологично активната част на молекулата въз основа на реакцията с медния салицилатен комплекс (CI).

Н.Т. Бубон и др., използвали бромокрезолово лилаво като реагент за лекарствени вещества. Въз основа на тази реакция са разработени екстракционно-фотометрични методи за определяне на флуороацизин и ацефен в таблетки.

Г.И. Лукянчикова и колеги използваха екстракционна фотометрия при анализа на ацеклидин, оксилидин за фармакологично активната част на молекулата въз основа на реакцията с бромотимолово синьо. Редица автори са използвали екстракционно-фотометричен метод за количествено определяне на метамизил в 0,25% инжекционен разтвор.

Изследвайки влиянието на pH и температурата върху стабилността на водни разтвори на спазмолитик, G.I. Олешко разработи екстракционно-фотометричен метод за анализ на фармакологично активната част на молекулата, базиран на реакцията на комплексообразуване с бромоталова киселина.

А.А. Литвин и неговите съавтори разработиха екстракционно-фотометричен метод за анализ на новокаин в инжекционни разтвори и мехлеми и проучиха възможността за използването му при изследване на лекарства, съдържащи новокаин по време на съхранение.

Т.А. Смолянюк предложи метод за екстракционно-фотометрично определяне на дифенхидрамин хидрохлорид с помощта на тропеолин 000-1, който позволява да се анализира в присъствието на примеси.

В практическата фармация фотометрията и турбидиметрията се използват широко. Л.В. Каджонян, И.А. Кондратенко се определя количествено чрез фотометричен метод от фармакологично активната част на молекулата на дифенхидрамин хидрохлорид и тримекаин. В.А. Попков и други са използвали диференциална сканираща колориметрия във фармацевтичния анализ за никотинова киселина, изониазид и фтивазид. ИИ Сичко използва фототурбидиметрия, за да определи количествено тетурам. Недостатъкът на фотометричните методи е, че те не винаги позволяват определяне на активното вещество при наличие на продукти от разрушаването.

Флуориметричният метод се използва и за количествено определяне на лекарствени вещества. В.М. Иванов, О.А. Григориев, А.А. Хабаров използва флуоресцентен анализ за контрол на качеството на лекарствени продукти, съдържащи фурокумарини от групата на псорален и фолиева киселина. Колонната хроматография също се използва широко. Д.Е. Бодрина, С.К. Еремин, Б.Н. Изотов използва микроколона на течен хроматограф Melichrome за определяне на бензодиазепините в биологични обекти.

Напоследък хромато-спектрофотометричният метод за количествено определяне на вещество въз основа на фармакологично активната част на молекулата стана широко разпространен. Той съчетава високата чувствителност на ултравиолетовата спектроскопия и силата на разделяне на тънкослойната хроматография. S.A. Вълевко, М.В. Мишустина разработи метод за хроматографско-спектрофотометрично определяне на папаверин хидрохлорид, а Д.С. Лазарян и Е.В. Компанцева го използва за определяне на хлорпропамид в присъствието на техните разпадни продукти.

Спектрофотометричният метод не винаги позволява обективен контрол на количественото съдържание на активния компонент. Това се дължи на факта, че продуктите от разпада понякога имат максимум на абсорбция в същата спектрална област като лекарствата.

Масспектрометрията, атомно-абсорбционната спектрофотометрия, NMR, IR и PMR спектроскопията предлагат големи възможности при анализа на лекарствено вещество и неговите конформации. За идентифициране на дифенхидрамин хидрохлорид беше използван газов хроматографско-масспектрометричен метод. Установено е, че лекарственото вещество съдържа четири примеса: бензофенон, 9-метилен флуорен, 9-флуоренил диметил аминоетил етер и дифенил метил етер. Съдържанието на дифенхидрамин е 96,80%.

Описан е метод за определяне на атропин в екстракти от беладона с помощта на химическа йонизационна масова спектрометрия при атмосферно налягане. Като вътрешен стандарт се използва тербутамин. Л.В. Адеишвили и съавтори изследват спектрите на дифенхидрамин хидрохлорид и мебедрол и предлагат използването им за идентифициране на лекарства.

СРЕЩУ. Карташов използва ЯМР метода за идентифициране на лекарства, производни на хинолин и изохинолин. Характерните сигнали в ЯМР спектрите на лекарствата позволяват тяхното надеждно идентифициране с помощта на персонален компютър.

ЯМР спектроскопия с висока напрегнатост на магнитното поле беше използвана за количествено определяне на пропранолола.

Т.С. Чмиленко, Е.А. Галимбиевская, Ф.А. Chmilenko показа, че взаимодействието на фенолово червено с полихексаметилен гуанидиниев хлорид произвежда йонен асоциат и няколко форми на агрегати, чийто състав се определя чрез спектрофотометрични, турбидиметрични, рефрактометрични и кондуктометрични методи. Възниква преразпределение на ивиците на поглъщане, наблюдават се екстремни точки, които съответстват на области на максимално натрупване на образувани агрегати. Разработен е метод за определяне на PHMG в дезинфектанта Biopag-D чрез екстремни точки.

Неводните разтворители са широко използвани в съвременния фармацевтичен анализ. Ако преди това основният разтворител в анализа беше вода, сега едновременно се използват различни неводни разтворители (ледена или безводна оцетна киселина, оцетен анхидрид, диметилформамид, диоксан и др.), Които позволяват да се промени силата на основност и киселинност на анализираните вещества. Разработен е микрометодът, по-специално капковият метод за анализ, удобен за използване при вътрешноаптечен контрол на качеството на лекарствата.

През последните години са широко разработени изследователски методи, при които се използва комбинация от различни методи за анализ на лекарствени вещества. Например, газова хроматография-масспектрометрия е комбинация от хроматография и масспектрометрия. Физиката, квантовата химия и математиката все повече навлизат в съвременния фармацевтичен анализ.

Анализът на всяко лекарствено вещество или суровина трябва да започне с външен преглед, като се обръща внимание на цвета, миризмата, формата на кристалите, контейнерите, опаковката и цвета на стъклото. След външен преглед на обекта на анализ се взема средна проба за анализ съгласно изискванията на ДФ Х (л. 853).

Методите за изследване на лекарствените вещества се делят на физични, химични, физикохимични и биологични.

Физическите методи за анализ включват изучаване на физичните свойства на дадено вещество, без да се прибягва до химични реакции. Те включват: определяне на разтворимост, прозрачност

• или степен на мътност, цвят; определяне на плътност (за течни вещества), влажност, точка на топене, втвърдяване, кипене. Съответните методи са описани в Глобалния фонд X. (стр. 756-776).

Химичните методи за изследване се основават на химични реакции. Те включват: определяне на пепелно съдържание, реакция на средата (рН), характерни числени показатели на масла и мазнини (киселинно число, йодно число, число на осапуняване и др.).

За целите на идентифицирането на лекарствени вещества се използват само онези реакции, които са придружени от видим външен ефект, например промяна в цвета на разтвора, отделяне на газове, утаяване или разтваряне на утаяване и др.

Химическите методи за изследване също включват гравиметрични и обемни методи за количествен анализ, приети в аналитичната химия (метод на неутрализация, метод на утаяване, окислително-редукционни методи и др.). През последните години фармацевтичният анализ включва такива химични изследователски методи като титруване в неводни среди и комплексометрия.

Качественият и количественият анализ на органичните лекарствени вещества обикновено се извършва според естеството на функционалните групи в техните молекули.

Физикохимичните методи се използват за изследване на физични явления, възникващи в резултат на химични реакции. Например при колориметричния метод интензитетът на цвета се измерва в зависимост от концентрацията на веществото, при кондуктометричния анализ се измерва електрическата проводимост на разтворите и др.

Физикохимичните методи включват: оптични (рефрактометрия, поляриметрия, емисионни и флуоресцентни методи за анализ, фотометрия, включително фотоколориметрия и спектрофотометрия, нефелометрия, турбодиметрия), електрохимични (потенциометрични и полярографски методи), хроматографски методи.

Въведение

1.2 Възможни грешки по време на фармацевтичния анализ

1.3 Общи принципи за тестване на автентичността на лекарствените вещества

1.4 Източници и причини за лошо качество на лекарствените вещества

1.5 Общи изисквания за тестове за чистота

1.6 Методи за фармацевтичен анализ и тяхната класификация

Глава 2. Физични методи за анализ

2.1 Тестване на физични свойства или измерване на физични константи на лекарствени вещества

2.2 Настройка на pH на средата

2.3 Определяне на прозрачност и мътност на разтворите

2.4 Оценка на химичните константи

Глава 3. Химични методи за анализ

3.1 Характеристики на химичните методи за анализ

3.2 Гравиметричен (тегловен) метод

3.3 Титриметрични (обемни) методи

3.4 Газометричен анализ

3.5 Количествен елементен анализ

Глава 4. Физико-химични методи за анализ

4.1 Характеристики на физикохимичните методи за анализ

4.2 Оптични методи

4.3 Методи на абсорбция

4.4 Методи, базирани на излъчване на радиация

4.5 Методи, базирани на използването на магнитно поле

4.6 Електрохимични методи

4.7 Методи за разделяне

4.8 Термични методи за анализ

Глава 5. Биологични методи за анализ1

5.1 Биологичен контрол на качеството на лекарствените продукти

5.2 Микробиологичен контрол на лекарствени продукти

Списък на използваната литература

Въведение

Фармацевтичният анализ е наука за химично характеризиране и измерване на биологично активни вещества на всички етапи на производство: от контрола на суровините до оценката на качеството на полученото лекарствено вещество, изследване на неговата стабилност, установяване на срокове на годност и стандартизиране на готовата лекарствена форма. Фармацевтичният анализ има свои специфични особености, които го отличават от другите видове анализи. Тези особености се крият във факта, че на анализ се подлагат вещества от различно химично естество: неорганични, елементоорганични, радиоактивни, органични съединения от прости алифатни до сложни естествени биологично активни вещества. Диапазонът на концентрациите на анализираните вещества е изключително широк. Обект на фармацевтичния анализ са не само отделни лекарствени вещества, но и смеси, съдържащи различен брой компоненти. Броят на лекарствата се увеличава всяка година. Това налага разработването на нови методи за анализ.

Методите за фармацевтичен анализ изискват систематично усъвършенстване поради непрекъснатото нарастване на изискванията към качеството на лекарствата, като изискванията както към степента на чистота на лекарствата, така и към тяхното количествено съдържание нарастват. Ето защо е необходимо широкото използване не само на химични, но и на по-чувствителни физикохимични методи за оценка на качеството на лекарствата.

Има високи изисквания към фармацевтичния анализ. Тя трябва да бъде доста специфична и чувствителна, точна по отношение на стандартите, определени от Държавната фармакопея XI, VFS, FS и друга научна и техническа документация, извършена в кратки периоди от време с минимални количества тестови лекарства и реактиви.

Фармацевтичният анализ, в зависимост от целите, включва различни форми на контрол на качеството на лекарствата: фармакопеен анализ, поетапен контрол на производството на лекарства, анализ на индивидуално произведени лекарствени форми, експресен анализ в аптека и биофармацевтичен анализ.

Неразделна част от фармацевтичния анализ е фармакопейният анализ. Това е набор от методи за изследване на лекарства и лекарствени форми, посочени в Държавната фармакопея или друга нормативна и техническа документация (VFS, FS). Въз основа на резултатите, получени по време на фармакопейния анализ, се прави заключение за съответствието на лекарствения продукт с изискванията на Глобалния фонд или друга нормативна и техническа документация. Ако се отклоните от тези изисквания, лекарството не е разрешено за употреба.

Заключение за качеството на лекарствения продукт може да се направи само въз основа на анализ на проба (проба). Процедурата за избора му е посочена или в частна статия, или в общата статия на Глобалния фонд XI (брой 2). Вземането на проби се извършва само от ненарушени опаковъчни единици, запечатани и опаковани в съответствие с изискванията на нормативно-техническата документация. В този случай трябва стриктно да се спазват изискванията за предпазни мерки при работа с отровни и наркотични вещества, както и за токсичността, запалимостта, опасността от експлозия, хигроскопичността и други свойства на лекарствата. За проверка на съответствието с изискванията на нормативната и техническата документация се извършва многоетапно вземане на проби. Броят на етапите се определя от вида на опаковката. На последния етап (след контрол по външен вид) се взема проба в количество, необходимо за четири пълни физични и химични анализа (ако пробата се взема за регулаторни организации, тогава за шест такива анализа).

От опаковките на Ангро се вземат точкови проби, взети в равни количества от горния, средния и долния слой на всяка опаковъчна единица. След установяване на хомогенност всички тези проби се смесват. Насипните и вискозни лекарства се вземат с пробоотборник от инертен материал. Течните лекарства се смесват старателно преди вземане на проби. Ако това е трудно да се направи, тогава се вземат точкови проби от различни слоеве. Изборът на проби от готови лекарствени продукти се извършва в съответствие с изискванията на частни статии или инструкции за контрол, одобрени от Министерството на здравеопазването на Руската федерация.

Извършването на фармакопейния анализ позволява да се установи автентичността на лекарството, неговата чистота и да се определи количественото съдържание на фармакологично активното вещество или съставките, включени в лекарствената форма. Въпреки че всеки от тези етапи има своя специфична цел, те не могат да се разглеждат изолирано. Те са взаимосвързани и взаимно се допълват. Например точка на топене, разтворимост, pH на воден разтвор и др. са критерии както за автентичността, така и за чистотата на лекарственото вещество.

Глава 1. Основни принципи на фармацевтичния анализ

1.1 Критерии за фармацевтичен анализ

На различни етапи от фармацевтичния анализ, в зависимост от поставените задачи, се използват критерии като селективност, чувствителност, точност, време, изразходвано за извършване на анализа, количеството на анализираното лекарство (лекарствена форма).

Селективността на метода е много важна при анализиране на смеси от вещества, тъй като позволява да се получат истинските стойности на всеки от компонентите. Само селективни аналитични техники позволяват да се определи съдържанието на основния компонент в присъствието на продукти от разлагането и други примеси.

Изискванията за точност и чувствителност на фармацевтичния анализ зависят от обекта и целта на изследването. При тестване на степента на чистота на лекарството се използват методи с висока чувствителност, позволяващи да се установи минималното съдържание на примеси.

При извършване на поетапен производствен контрол, както и при извършване на експресен анализ в аптека, факторът време, изразходван за извършване на анализа, играе важна роля. За да направите това, изберете методи, които позволяват анализът да се извършва във възможно най-кратки интервали от време и в същото време с достатъчна точност.

При количествено определяне на лекарствено вещество се използва метод, който се отличава със селективност и висока точност. Пренебрегва се чувствителността на метода, предвид възможността за извършване на анализа с голяма проба от лекарството.

Мярка за чувствителността на реакцията е границата на откриване. Това означава най-ниското съдържание, при което, използвайки този метод, присъствието на аналитичния компонент може да бъде открито с определена доверителна вероятност. Терминът "граница на откриване" е въведен вместо такова понятие като "минимум на отваряне", използва се и вместо термина "чувствителност".Чувствителността на качествените реакции се влияе от фактори като обеми на разтвори на реагиращи компоненти, концентрации реактиви, рН на средата, температура, продължителност опит.Това трябва да се има предвид при разработването на методи за качествен фармацевтичен анализ.За установяване на чувствителността на реакциите все повече се използва показателят за абсорбция (специфичен или моларен), установен чрез спектрофотометричния метод В химичния анализ чувствителността се определя от стойността на границата на откриване на дадена реакция.Физикохимичните методи се отличават с висока чувствителност на анализа.Най-високо чувствителни са радиохимичните и масспектралните методи, позволяващи определянето на 10 -8 -10 -9% от аналита, полярографски и флуориметричен 10 -6 -10 -9%; чувствителността на спектрофотометричните методи е 10 -3 -10 -6%, потенциометрични 10 -2%.

Терминът "аналитична точност" включва едновременно две понятия: възпроизводимост и коректност на получените резултати. Възпроизводимостта характеризира дисперсията на резултатите от изпитването спрямо средната стойност. Коректността отразява разликата между действителното и установеното съдържание на дадено вещество. Точността на анализа за всеки метод е различна и зависи от много фактори: калибриране на измервателните уреди, точност на претегляне или измерване, опит на анализатора и др. Точността на резултата от анализа не може да бъде по-висока от точността на най-малко точното измерване.

4.2 Оптични методи

Тази група включва методи, базирани на определяне на индекса на пречупване на светлинен лъч в разтвор на тествано вещество (рефрактометрия), измерване на интерференцията на светлината (интерферометрия) и способността на разтвор на вещество да върти равнината на поляризиран лъч ( поляриметрия).

Оптичните методи намират все по-широко приложение в практиката на вътрешноаптечния контрол поради бързината и минималния разход на анализираните лекарства.

Рефрактометрията се използва за проверка на автентичността на лекарствени вещества, които са течни (диетиламид на никотиновата киселина, метилсалицилат, токоферол ацетат), а при вътрешноаптечен контрол - за анализ на лекарствени форми, включително двойни и тройни смеси. Използват се също обемен рефрактометричен анализ и рефрактометричен анализ по метода на пълната и непълната екстракция.

Разработени са различни варианти на методи за анализ на лекарства, титрувани разтвори и дестилирана вода с помощта на интерферометричен метод.

Поляриметрията се използва за тестване на автентичността на лекарствени вещества, чиито молекули съдържат асиметричен въглероден атом. Сред тях най-много са лекарствата от групата на алкалоидите, хормоните, витамините, антибиотиците и терпените.

Аналитичната химия и фармацевтичният анализ използват рентгенова прахова рефрактометрия, спектрополяриметричен анализ, лазерна интерферометрия, ротационна дисперсия и кръгов дихроизъм.

В допълнение към посочените оптични методи за идентифициране на отделни лекарствени вещества във фармацевтичния и токсикологичен анализ, химичната микроскопия не губи своето значение. Използването на електронна микроскопия е обещаващо, особено във фитохимичния анализ. За разлика от оптичната микроскопия, обектът е изложен на лъч от високоенергийни електрони. Изображението, образувано от разпръснатите електрони, се наблюдава на флуоресцентен екран.

Един от обещаващите бързи физикални методи е рентгенографският анализ. Тя ви позволява да идентифицирате лекарства в кристална форма и да разграничите тяхното полиморфно състояние. Различни видове микроскопия и методи като Оже спектрометрия, фотоакустична спектроскопия, компютърна томография, измервания на радиоактивност и др. също могат да се използват за анализиране на кристални лекарствени вещества.

Ефективен безразрушителен метод е отражателната инфрачервена спектроскопия, която се използва за определяне на примеси от различни продукти на разлагане и вода, както и при анализ на многокомпонентни смеси.

4.3 Методи на абсорбция

Абсорбционните методи се основават на свойствата на веществата да абсорбират светлина в различни области на спектъра.

Атомно-абсорбционната спектрофотометрия се основава на използването на ултравиолетово или видимо лъчение с резонансна честота. Поглъщането на радиация се причинява от прехода на електрони от външните орбитали на атомите към орбитали с по-висока енергия. Обектите, които абсорбират радиация, са газообразни атоми, както и някои органични вещества. Същността на определянията чрез атомно-абсорбционна спектрометрия е, че резонансното излъчване от лампа с кух катод преминава през пламъка, в който се пръска анализираният разтвор на пробата. Това лъчение удря входния процеп на монохроматора и само резонансната линия на изпитвания елемент се отличава от спектъра. Фотоелектричният метод измерва намаляването на интензитета на резонансната линия, което възниква в резултат на нейното поглъщане от атомите на определяния елемент. Концентрацията се изчислява с помощта на уравнение, което отразява нейната зависимост от затихването на интензитета на излъчване на източника на светлина, дължината на абсорбиращия слой и коефициента на абсорбция на светлината в центъра на линията на абсорбция. Методът е силно селективен и чувствителен.

Абсорбцията на резонансните линии се измерва на атомно-абсорбционни спектрофотометри като "Спектр-1", "Сатурн" и др. Точността на определяне не надвишава 4%, границата на откриване достига 0,001 μg/ml. Това показва високата чувствителност на метода. Все повече се използва за оценка на чистотата на лекарствата, по-специално за определяне на минимални примеси от тежки метали. Обещаващо е използването на атомно-абсорбционна спектрофотометрия за анализ на мултивитаминови препарати, аминокиселини, барбитурати, някои антибиотици, алкалоиди, халоген-съдържащи лекарства и живачни съединения.

Също така е възможно да се използва рентгенова абсорбционна спектроскопия във фармацията, базирана на абсорбцията на рентгеново лъчение от атоми.

Ултравиолетовата спектрофотометрия е най-простият и широко използван метод за абсорбционен анализ във фармацията. Използва се на всички етапи от фармацевтичния анализ на лекарствените продукти (тестване за автентичност, чистота, количествено определяне). Разработени са голям брой методи за качествен и количествен анализ на дозирани форми с помощта на ултравиолетова спектрофотометрия. За идентификация могат да се използват атласи на спектрите на лекарствени вещества, систематизиращи информация за естеството на спектралните криви и стойностите на специфичните индекси на абсорбция.

Съществуват различни възможности за използване на UV спектрофотометричния метод за идентификация. При тестване за автентичност лекарствените вещества се идентифицират по позициямаксимално поглъщане на светлина. По-често фармакопейните монографии предоставят позициите на максимума (или минимума) и съответните стойности на оптичните плътности. Понякога се използва метод, който се основава на изчисляване на съотношението на оптичните плътности при две дължини на вълната (те обикновено съответстват на два максимума или максимум и минимум на поглъщане на светлина). Редица лекарствени вещества също се идентифицират по специфичната скорост на абсорбция на разтвора.

Много е обещаващо за идентифицирането на лекарствени вещества да се използват такива оптични характеристики като позицията на абсорбционната лента върху скалата на дължината на вълната, честотата при максимума на абсорбцията, стойността на пика и интегралния интензитет, полуширината и асиметрията на лентите и силата на осцилатора. Тези параметри правят идентифицирането на веществата по-надеждно от установяването на дължината на вълната на максимална абсорбция на светлина и специфичния индекс на абсорбция. Тези константи, които позволяват да се характеризира наличието на връзка между UV спектъра и структурата на молекулата, бяха установени и използвани за оценка на качеството на лекарствени вещества, съдържащи кислороден хетероатом в молекулата (V.P. Buryak).

Обективният избор на оптимални условия за количествен спектрофотометричен анализ може да се извърши само чрез предварително изследване на йонизационните константи, влиянието на природата на разтворителите, рН на средата и други фактори върху естеството на абсорбционния спектър.

NTD предоставя различни методи за използване на UV спектрофотометрия за количествено определяне на лекарствени вещества, като витамини (ретинол ацетат, рутин, цианокобаламин), стероидни хормони (кортизон ацетат, преднизон, прегнин, тестостерон пропионат), антибиотици (натриеви соли на оксацилин и метицилин, феноксиметилпенцилин, хлорамфеникол стеарат, гризеофулвин). Разтворителите, които обикновено се използват за спектрофотометрични измервания, са вода или етанол. Изчисляването на концентрацията се извършва по различни начини: според стандарт, специфична скорост на абсорбция или калибровъчна крива.

Препоръчително е да се комбинира количествен спектрофотометричен анализ с идентификация чрез UV спектър. В този случай разтвор, приготвен от една проба, може да се използва и за двата теста. Най-често при спектрофотометрични определяния се използва метод, който се основава на сравняване на оптичните плътности на анализирания и стандартния разтвор. Някои аналитични условия изискват лекарствени вещества, способни да образуват киселинно-алкални форми в зависимост от pH на околната среда. В такива случаи е необходимо първо да се изберат условия, при които веществото в разтвор ще бъде напълно в една от тези форми.

За намаляване на относителната грешка на фотометричния анализ, по-специално за намаляване на системната грешка, използването на стандартни проби от лекарствени вещества е много обещаващо. Като се има предвид трудността на получаване и високата цена, те могат да бъдат заменени със стандарти, приготвени от налични неорганични съединения (калиев дихромат, калиев хромат).

В SP XI обхватът на приложение на UV спектрофотометрията е разширен. Методът се препоръчва за анализ на многокомпонентни системи, както и за анализ на лекарствени вещества, които сами по себе си не поглъщат светлина в ултравиолетовата и видимата област на спектъра, но могат да бъдат превърнати в светлопоглъщащи съединения чрез различни химични реакции.

Диференциалните методи позволяват разширяване на обхвата на фотометрията във фармацевтичния анализ. Те позволяват да се повиши неговата обективност и точност, както и да се анализират високи концентрации на вещества. В допълнение, тези методи могат да анализират многокомпонентни смеси без предварително разделяне.

Методът на диференциалната спектрофотометрия и фотоколориметрия е включен в ДФ XI, бр. 1 (стр. 40). Същността му се състои в измерване на светлинната абсорбция на анализирания разтвор спрямо референтен разтвор, съдържащ определено количество от тестваното вещество. Това води до промяна в работната зона на скалата на инструмента и намаляване на относителната грешка на анализа до 0,5-1%, т.е. същото като при титриметричните методи. Добри резултати се получават, когато се използват неутрални филтри с известна оптична плътност вместо референтни разтвори; включени в комплекта спектрофотометри и фотоколориметри (В. Г. Беликов).

Диференциалният метод намира приложение не само в спектрофотометрията и фотоколориметрията, но и във фототурбидиметрията, фотонефелометрията и интерферометрията. Диференциалните методи могат да бъдат разширени до други физикохимични методи. Методи за химичен диференциален анализ, базирани на използването на такива химични влияния върху състоянието на лекарственото вещество в разтвор, като промяна на pH на околната среда, промяна на разтворителя, промяна на температурата, влиянието на електрически, магнитни, ултразвукови полета, и др., също имат големи перспективи за анализ на лекарства.

Един от вариантите на диференциалната спектрофотометрия, ?E-методът, отваря широки възможности за количествен спектрофотометричен анализ. Основава се на превръщането на аналита в тавтомерна (или друга) форма, която се различава по естеството на абсорбция на светлина.

Нови възможности в областта на идентификацията и количественото определяне на органични вещества се откриват чрез използването на производна UV спектрофотометрия. Методът се основава на изолирането на отделни ивици от UV спектрите, които са сбор от припокриващи се абсорбционни ленти или ленти, които нямат ясно дефиниран максимум на абсорбция.

Производната спектрофотометрия дава възможност да се идентифицират лекарствени вещества или техни смеси, които са сходни по химична структура. За повишаване на селективността на качествения спектрофотометричен анализ се използва метод за конструиране на вторични производни на UV спектрите. Втората производна може да се изчисли с помощта на числено диференциране.

Разработен е единен метод за получаване на производни от абсорбционни спектри, който отчита особеностите на природата на спектъра. Беше показано, че второто производно има разделителна способност приблизително 1,3 пъти по-голяма в сравнение с директната спектрофотометрия. Това направи възможно използването на този метод за идентифициране на кофеин, теобромин, теофилин, папаверин хидрохлорид и дибазол в лекарствени форми. Второто и четвъртото производни са по-ефективни при количествен анализ в сравнение с титриметричните методи. Продължителността на определяне се намалява 3-4 пъти. Определянето на тези лекарства в смеси се оказа възможно независимо от естеството на абсорбция на придружаващите вещества или със значително намаляване на влиянието на тяхната абсорбция на светлина. Това елиминира трудоемките операции за разделяне на смеси.

Използването на комбиниран полином в спектрофотометричния анализ позволи да се изключи влиянието на нелинейния фон и да се разработят методи за количествено определяне на редица лекарства в лекарствени форми, които не изискват сложни изчисления на резултатите от анализа. Комбинираният полином е успешно използван при изследване на процесите, протичащи по време на съхранението на лекарствени вещества и при химически токсикологични изследвания, тъй като позволява да се намали влиянието на светлопоглъщащите примеси (E.N. Vergeichik).

Рамановата спектроскопия (RSS) се различава от другите спектроскопски методи по чувствителност, голям избор от разтворители и температурни диапазони. Наличието на домашен раманов спектрометър марка DSF-24 прави възможно използването на този метод не само за определяне на химическата структура, но и във фармацевтичния анализ.

Методът на спектрофотометрично титруване все още не е получил правилното развитие в практиката на фармацевтичния анализ. Този метод дава възможност за титруване без индикатор на многокомпонентни смеси с подобни стойности rKвъз основа на последователна промяна в оптичната плътност по време на процеса на титруване в зависимост от обема на добавения титрант.

Фотоколориметричният метод се използва широко във фармацевтичния анализ. Количественото определяне по този метод, за разлика от UV фотометрията, се извършва във видимата област на спектъра. Определяното вещество се превръща в оцветено съединение с помощта на някакъв реагент и след това интензитетът на цвета на разтвора се измерва с фотоколориметър. Точността на определянето зависи от избора на оптимални условия за химичната реакция.

Много широко използвани във фотометричния анализ са методите за анализ на лекарства, получени от първични ароматни амини, базирани на използването на реакции на диазотиране и азосвързване. Широко използван като азо компонент н-(1-нафтил)-етилендиамин. Реакцията на образуване на азобагрила е в основата на фотометричното определяне на много лекарства, получени от феноли.

Фотоколориметричният метод е включен в техническата документация за количествено определяне на редица нитропроизводни (нитроглицерин, фурадонин, фуразолидон), както и витаминни препарати (рибофлавин, фолиева киселина) и сърдечни гликозиди (целанид). Разработени са множество методи за фотоколориметрично определяне на лекарства в лекарствени форми. Известни са различни модификации на фотоколориметрията и методите за изчисляване на концентрацията при фотоколориметричния анализ.

Поликарбонилни съединения като биндон (анхидро-бис-индандион-1,3), алоксан (тетраоксохекса-хидропиримидин), натриева сол на 2-карбетоксииндандион-1,3 и някои от неговите производни се оказаха обещаващи за използване като цветни реагенти във фотометричен анализ . Установени са оптимални условия и са разработени унифицирани методи за идентифициране и спектрофотометрично определяне във видимата област на лекарствени вещества, съдържащи първична ароматна или алифатна аминогрупа, сулфонилкарбамиден остатък или представляващи азотсъдържащи органични основи и техните соли (V.V. Петренко).

Широко използвани във фотоколориметрията са реакциите на оцветяване, базирани на образуването на полиметинови багрила, които се получават чрез разрушаване на пиридинови или фуранови пръстени или чрез някои реакции на кондензация с първични ароматни амини (A.S. Beisenbekov).

За идентификация и спектрофотометрично определяне във видимата област на спектъра на лекарствени вещества като цветни реагенти се използват производни на ароматни амини, тиоли, тиоамиди и други меркапто съединения н-хлор-, н-бензенсулфонил- и н-бензенсулфонил-2-хлоро-1,4-бензохинонимин.

Един от вариантите за обединяване на методите за фотометричен анализ се основава на индиректно определяне от остатъка от натриев нитрит, въведен в реакционната смес под формата на стандартен разтвор, взет в излишък. След това излишъкът от нитрити се определя фотометрично чрез реакция на диазотиране, използвайки етакридинов лактат. Тази техника се използва за индиректно фотометрично определяне на азотсъдържащи лекарствени вещества чрез нитритен йон, образуван в резултат на техните трансформации (хидролиза, термично разлагане). Единната методика позволява контрол на качеството на повече от 30 такива лекарствени вещества в множество лекарствени форми (P.N. Ivakhnenko).

Фототурбидиметрията и фотонефелометрията са методи с голям потенциал, но все още с ограничена употреба във фармацевтичния анализ. Въз основа на измерване на абсорбирана (турбидиметрия) или разсеяна (нефелометрия) светлина от суспендирани частици на аналита. Всяка година методите се подобряват. Например, хронофототурбидиметрията се препоръчва при анализ на лекарствени вещества. Същността на метода е да се установят промени в угасването на светлината във времето. Описано е и използването на термонефелометрия, основаваща се на установяване на зависимостта на концентрацията на веществото от температурата, при която настъпва помътняване на лекарствения разтвор.

Систематичните изследвания в областта на фототурбидиметрията, хронофототурбидиметрията и фототурбидиметричното титруване показаха възможността за използване на фосфоволфрамова киселина за количествено определяне на азотсъдържащи лекарства. При фототурбидиметричния анализ са използвани както директни, така и диференциални методи, както и автоматично фототурбидиметрично титруване и хронофототурбидиметрично определяне на двукомпонентни лекарствени форми (A.I. Sichko).

Инфрачервената (IR) спектроскопия се характеризира с широко информационно съдържание, което дава възможност за обективна оценка на автентичността и количественото определяне на лекарствените вещества. IR спектърът недвусмислено характеризира цялата структура на молекулата. Разликите в химическата структура променят природата на инфрачервения спектър. Важни предимства на IR спектрофотометрията са специфичността, бързината на анализа, високата чувствителност, обективността на получените резултати и възможността за анализ на вещество в кристално състояние.

IR спектрите се измерват, като обикновено се използват суспензии на лекарствени вещества в течен парафин, чиято присъща абсорбция не пречи на идентифицирането на анализираното съединение. За да се установи автентичността, като правило се използва така наречената област на „пръстови отпечатъци“ (650–1500 cm -1), разположена в честотния диапазон от 650 до 1800 cm -1, както и разтягащи вибрации на химически връзки

С=0, С=С, С=N

Държавен фонд XI препоръчва два метода за установяване на автентичността на лекарствени вещества чрез инфрачервени спектри. Един от тях се основава на сравнение на IR спектрите на тестваното вещество и неговата стандартна проба. Спектрите трябва да се вземат при еднакви условия, т.е. пробите трябва да са в едно агрегатно състояние, в еднаква концентрация, скоростта на регистрация трябва да е еднаква и т.н. Вторият метод е да се сравни IR спектърът на тестваното вещество с неговия стандартен спектър. В този случай е необходимо стриктно спазване на предвидените условия за премахване на стандартния спектър, посочени в съответната техническа документация (GF, VFS, FS). Пълното съвпадение на лентите на поглъщане показва идентичността на веществата. Въпреки това, полиморфните модификации могат да дадат различни IR спектри. В този случай, за да се потвърди идентичността, е необходимо да се прекристализират тестваните вещества от същия разтворител и да се вземат спектрите отново.

Интензивността на абсорбция също може да служи като потвърждение за автентичността на лекарственото вещество. За целта се използват константи като индекса на поглъщане или стойността на интегралния интензитет на поглъщане, равна на площта, която кривата в спектъра на поглъщане обгражда.

Установена е възможността за използване на IR спектроскопия за идентифициране на голяма група лекарствени вещества, съдържащи карбонилни групи в молекулата. Идентичността се определя от характерни ивици на поглъщане в следните области: 1720-1760, 1424-1418, 950-00 cm-1 за карбоксилни киселини; 1596-1582, 1430-1400, 1630-1612, 1528-1518 cm-1 за аминокиселини; 1690-1670, 1615-1580 cm'' за амиди; 1770--1670 cm-1 за производни на барбитуровата киселина; 1384-1370, 1742-1740, 1050 cm-1 за терпеноиди; 1680-1540, 1380-1278 cm-1 за тетрациклинови антибиотици; 3580-3100, 3050-2870, 1742-1630, 903-390 cm-1 за стероиди (A.F. Mynka).

Методът на инфрачервената спектроскопия е включен във фармакопеите на много чужди страни и в MF III, където се използва за идентифициране на повече от 40 лекарствени вещества. С помощта на IR спектрофотометрия е възможно да се извърши не само количествена оценка на лекарствени вещества, но и изследване на такива химични трансформации като дисоциация, солволиза, метаболизъм, полиморфизъм и др.

4.4 Методи, базирани на излъчване на радиация

Тази група методи включва пламъчна фотометрия, флуоресцентни и радиохимични методи.

SP XI включва емисионна и пламъчна спектрометрия с цел качествено и количествено определяне на химични елементи и техните примеси в лекарствени вещества. Интензитетът на излъчване на спектралните линии на тестваните елементи се измерва с домашни пламъчни фотометри PFL-1, PFM, PAZH-1. Фотоклетките, свързани с цифрови и печатащи устройства, служат като записващи системи. Точността на определяне с помощта на методите на емисия, както и атомна абсорбция, пламъчна спектрометрия е в рамките на 1-4%, границата на откриване може да достигне 0,001 μg / ml.

Количественото определяне на елементи чрез пламъчно-емисионна спектрометрия (пламъчна фотометрия) се основава на установяване на връзката между интензитета на спектралната линия и концентрацията на елемента в разтвора. Същността на теста е анализираният разтвор да се напръска в аерозол в пламъка на горелката. Под въздействието на температурата на пламъка се извършва изпаряването на разтворителя и твърдите частици от аерозолните капчици, дисоциацията на молекулите, възбуждането на атомите и появата на тяхното характерно излъчване. С помощта на светлинен филтър или монохроматор излъчването на анализирания елемент се отделя от другите и когато попадне върху фотоклетка, предизвиква фототок, който се измерва с помощта на галванометър или потенциометър.

Пламъчната фотометрия е използвана за количествен анализ на натрий-, калий- и калций-съдържащи лекарства в лекарствени форми. Въз основа на изследване на ефекта върху емисията на определени катиони, органични аниони, спомагателни и съпътстващи компоненти, методи за количествено определяне на натриев бикарбонат, натриев салицилат, PAS-натрий, билигност, хексенал, натриев нуклеинат, калциев хлорид и глюконат, bepaska и др.. Разработени са методи за едновременно определяне на две соли с различни катиони в лекарствени форми, например калиев йодид - натриев бикарбонат, калциев хлорид - калиев бромид, калиев йодид - натриев салицилат и др.

Луминесцентните методи се основават на измерването на вторичното лъчение в резултат на въздействието на светлината върху аналита. Те включват флуоресцентни методи, хемилуминесценция, рентгенова флуоресценция и др.

Флуоресцентните методи се основават на способността на веществата да флуоресцират в UV светлина. Тази способност се дължи на структурата или на самите органични съединения, или на продуктите от тяхната дисоциация, солволиза и други трансформации, причинени от действието на различни реагенти.

Органичните съединения със симетрична молекулна структура, които съдържат спрегнати връзки, нитро-, нитрозо-, азо-, амидо-, карбоксилни или карбонилни групи, обикновено имат флуоресцентни свойства. Интензитетът на флуоресценцията зависи от химичната структура и концентрацията на веществото, както и от други фактори.

Флуориметрията може да се използва както за качествен, така и за количествен анализ. Количественият анализ се извършва с помощта на спектрофлуориметри. Принципът на тяхното действие е, че светлината от живачно-кварцова лампа през първичен светлинен филтър и кондензатор пада върху кювета с разтвор на тестваното вещество. Концентрацията се изчислява с помощта на скалата на стандартни проби от флуоресцентно вещество с известна концентрация.

Разработени са унифицирани методи за количествено спектрофлуориметрично определяне на производни на р-аминобензенсулфамид (стрептоцид, сулфацил натрий, сулгин, уросулфан и др.) И р-аминобензоена киселина (анестезин, новокаин, новокаинамид). Водните алкални разтвори на сулфонамидите имат най-голяма флуоресценция при pH 6-8 и 10-12. В допълнение, сулфонамиди, съдържащи незаместена първична ароматна аминогрупа в молекулата, след нагряване с о-фталалдехид в присъствието на сярна киселина, придобиват интензивна флуоресценция в областта от 320-540 nm. В същата област производните на барбитуровата киселина (барбитал, барбитал натрий, фенобарбитал, етаминал натрий) флуоресцират в алкална среда (pH 12-13) с флуоресцентен максимум при 400 nm. Предложени са високочувствителни и специфични методи за спектрофлуориметрично определяне на антибиотици: тетрациклин, окситетрациклин хидрохлорид, стрептомицин сулфат, пасомицин, флоримицин сулфат, гризеофулвин и сърдечен гликозид целанид (F.V. Babilev). Проведени са изследвания върху спектрите на флуоресценция на редица лекарства, съдържащи природни съединения: производни на кумарин, антрахинон, флавоноиди (V.P. Georgievsky).

Комплексообразуващи групи са идентифицирани в 120 лекарствени вещества, производни на хидроксибензоена, хидроксинафтоева, антранилова киселина, 8-хидроксихинолин, оксипиридин, 3- и 5-хидроксифлавон, птеридин и др. Тези групи са способни да образуват флуоресцентни комплекси с катиони на магнезия , алуминий, бор, цинк, скандий, когато флуоресценцията се възбужда от 330 nm и повече и се излъчва при дължини на вълните над 400 nm. Проведените изследвания позволиха да се разработят флуориметрични техники за 85 лекарства (A.A. Khabarov).

Наред с производната спектрофотометрия във фармацевтичния анализ е обоснована възможността за използване на производна спектрофлуориметрия. Спектрите се записват на MPF-4 флуоресцентен спектрофотометър с термостатна клетка и производните се намират чрез подобна диференциация с помощта на компютър. Методът е използван за разработване на прости, точни и високочувствителни методи за количествено определяне на пиридоксин и ефедрин хидрохлориди в лекарствени форми в присъствието на продукти от разлагането.

Перспективи за използване Рентгенова флуоресценцияза определяне на малки количества примеси в лекарства се дължи на висока чувствителност и възможност за извършване на анализ без предварително разрушаване на веществото. Метод Рентгенова флуоресцентна спектрометриясе оказа обещаващ за количествен анализ на вещества, съдържащи в молекулата си хетероатоми като желязо, кобалт, бром, сребро и др.. Принципът на метода е да се сравни вторичното рентгеново излъчване на елемента в анализирания и стандартна проба. Рентгеновата флуоресцентна спектрометрия е един от методите, които не изискват предварителни деструктивни промени. Анализът се извършва на домашен спектрометър RS-5700. Продължителност на анализа 15 мин.

Хемилуминесценцията е метод, който включва използването на енергията, генерирана по време на химични реакции.

Тази енергия служи като източник на вълнение. Отделя се при окисление от някои барбитурати (особено фенобарбитал), хидразиди на ароматни киселини и други съединения. Това създава големи възможности за използване на метода за определяне на много ниски концентрации на вещества в биологичен материал.

Радиохимичните методи се използват все повече във фармацевтичния анализ. Използва се радиометричен анализ, базиран на измерване на α- или β-лъчение с помощта на спектрометри (заедно с други параметри за оценка на качеството на фармакопейните радиоактивни лекарства. Високочувствителните методи за анализ с използване на радиоактивни изотопи (белязани атоми) се използват широко в различни области на технологията и особено в аналитичната химия ) За откриване на следи от примеси във веществата се използва активационен анализ; за определяне в смеси от трудно разделими компоненти с подобни свойства - методът на изотопно разреждане Използват се също радиометрично титруване и радиоактивни индикатори , Оригинална версия на комбинацията от радиоизотопни и хроматографски методи е изследването на дифузионно-седиментни хроматограми в тънък слой желатинов гел с помощта на радиоактивни маркери.

4.5 Методи, базирани на използването на магнитно поле

Методите на NMR и PMR спектроскопията, както и масспектрометрията, се отличават с висока специфичност и чувствителност и се използват за анализ на многокомпонентни смеси, включително лекарствени форми, без тяхното предварително разделяне.

Методът NMR спектроскопия се използва за тестване на автентичността на лекарствени вещества, което може да бъде потвърдено или чрез пълен набор от спектрални параметри, характеризиращи структурата на дадено съединение, или чрез най-характерните сигнали от спектъра. Автентичността може да се установи и с помощта на стандартна проба, като се добави определено количество от нея към анализирания разтвор. Пълното съвпадение на спектрите на анализираното вещество и неговата смес със стандартната проба показва тяхната идентичност.

ЯМР спектрите се записват на спектрометри с работни честоти от 60 MHz или повече, като се използват такива основни характеристики на спектрите като химично отместване, множественост на резонансния сигнал, константа на спин-спин взаимодействие и площ на резонансния сигнал. Най-обширната информация за молекулярната структура на анализираното вещество се предоставя от 13C и 1H NMR спектрите.

Надеждна идентификация на препарати от гестагенни и естрогенни хормони, както и техните синтетични аналози: прогестерон, прегнин, етинил естрадиол, метил естрадиол, естрадиол дипропионат и др. - може да се извърши чрез 1Н NMR спектроскопия в деутериран хлороформ на UN-90 спектрометър с работна честота 90 MHz (вътрешен стандарт - тетраметилсилан).

Систематичните изследвания позволиха да се установи възможността за използване на 13 C NMR спектроскопия за идентифициране на лекарствени вещества на 10-ацилни производни на фенотиазин (хлорацизин, флуороацизин, етмозин, етацизин), 1,4-бензодиазепин (хлоро-, бромо- и нитропроизводни) и др. С помощта на 1Н ЯМР спектроскопия и 13С е извършена идентификация и количествена оценка на основните компоненти и примеси в препарати и стандартни проби от естествени и полусинтетични антибиотици аминогликозиди, пеницилини, цефалоспорини, макролиди и др. Този метод е използван за идентифициране на редица витамини при унифицирани условия: липоева и аскорбинова киселина, липамид, холин и метилметионин сулфониев хлорид, ретинол палмитат, калциев пантотенат, ергокалциферол. Методът на 1H NMR спектроскопия направи възможно надеждното идентифициране на такива природни съединения със сложна химическа структура като сърдечни гликозиди (дигоксин, дигитоксин, целанид, десланозид, нериолин, цимарин и др.). Използван е компютър за ускоряване на обработката на спектралната информация. В FS и VFS са включени редица техники за идентификация (V.S. Kartashov).

Количественото определяне на лекарствено вещество може също да се извърши с помощта на NMR спектри. Относителната грешка на количествените определяния по метода на ЯМР зависи от точността на измерванията на площите на резонансните сигнали и е ±2-5%. При определяне на относителното съдържание на дадено вещество или неговия примес се измерват площите на резонансните сигнали на тестваното вещество и стандартната проба. След това се изчислява количеството на изпитваното вещество. За да се определи абсолютното съдържание на лекарство или примес, анализираните проби се приготвят количествено и към пробата се добавя точно претеглена маса от вътрешния стандарт. След това се записва спектърът, измерват се сигналните площи на аналита (примеса) и вътрешния стандарт, след което се изчислява абсолютното съдържание.

Развитието на технологията за импулсна спектроскопия на Фурие и използването на компютри позволиха рязко да се увеличи чувствителността на 13 C NMR метода и да се разшири до количествен анализ на многокомпонентни смеси от биоорганични съединения, включително лекарствени вещества, без тяхното предварително разделяне.

Спектроскопичните параметри на PMR спектрите предоставят цял ​​набор от разнообразна и силно селективна информация, която може да се използва във фармацевтичния анализ. Условията за запис на спектрите трябва да се спазват стриктно, тъй като стойностите на химичните отмествания и други параметри се влияят от вида на разтворителя, температурата, рН на разтвора и концентрацията на веществото.

Ако пълната интерпретация на PMR спектрите е трудна, тогава се изолират само характерните сигнали, чрез които се идентифицира тестваното вещество. PMR спектроскопията се използва за тестване на автентичността на много лекарствени вещества, включително барбитурати, хормонални агенти, антибиотици и др.

Тъй като методът предоставя информация за наличието или отсъствието на примеси в основното вещество, PMR спектроскопията е от голямо практическо значение за изследване на лекарствени вещества за чистота. Разликите в стойностите на определени константи позволяват да се направи заключение за наличието на примеси от продукти на разпадане на лекарственото вещество. Чувствителността на метода към примеси варира в широки граници и зависи от спектъра на основното вещество, наличието на определени групи, съдържащи протони в молекулите, и разтворимостта в съответните разтворители. Минималното съдържание на примеси, което може да се определи, обикновено е 1-2%. Особено ценна е възможността за откриване на изомерни примеси, чието присъствие не може да бъде потвърдено с други методи. Например, примес на салицилова киселина е открита в ацетилсалицилова киселина, морфин в кодеин и др.

Количественият анализ, базиран на използването на PMR спектроскопия, има предимства пред другите методи, тъй като при анализиране на многокомпонентни смеси не е необходимо да се изолират отделни компоненти за калибриране на устройството. Поради това методът е широко приложим за количествен анализ както на отделни лекарствени вещества, така и на разтвори, таблетки, капсули, суспензии и други лекарствени форми, съдържащи една или повече съставки. Стандартното отклонение не надвишава ±2,76%. Описани са методи за анализ на таблетки фуроземид, мепробамат, хинидин, преднизолон и др.

Обхватът на приложения на масспектрометрията в анализа на лекарствени вещества за идентификация и количествен анализ се разширява. Методът се основава на йонизацията на молекулите на органичните съединения. Той е силно информативен и изключително чувствителен. Масспектрометрията се използва за определяне на антибиотици, витамини, пуринови основи, стероиди, аминокиселини и други лекарства, както и техните метаболитни продукти.

Използването на лазери в аналитични инструменти значително разширява практическото приложение на UV и IR спектрофотометрията, както и флуоресцентната и масспектроскопия, рамановата спектроскопия, нефелометрията и други методи. Източниците на лазерно възбуждане позволяват да се увеличи чувствителността на много методи за анализ и да се намали продължителността на тяхното прилагане. Лазерите се използват в дистанционния анализ като детектори в хроматографията, биоаналитичната химия и др.

4.6 Електрохимични методи

Тази група качествени и количествени методи за анализ се основава на електрохимични явления, възникващи в изследваната среда и свързани с промени в химичната структура, физичните свойства или концентрацията на веществата.

Потенциометрията е метод, основан на измерване на равновесните потенциали, които възникват на границата между тестовия разтвор и електрода, потопен в него. SP XI включва метод за потенциометрично титруване, който се състои в установяване на еквивалентния обем на титранта чрез измерване на ЕМП на индикаторния електрод и референтния електрод, потопени в анализирания разтвор. Методът на директната потенциометрия се използва за определяне на pH (рН-метрия) и определяне на концентрацията на отделните йони. Потенциометричното титруване се различава от индикаторното титруване по способността да се анализират силно оцветени, колоидни и мътни разтвори, както и разтвори, съдържащи окислители. В допълнение, няколко компонента в смес могат да бъдат титрувани последователно във водна и неводна среда. Потенциометричният метод се използва за титруване на базата на реакции на неутрализация, утаяване, комплексообразуване, окисление - редукция. Референтният електрод във всички тези методи е каломел, сребърен хлорид или стъкло (последното не се използва при анализа чрез неутрализация). Индикаторният електрод за киселинно-алкално титруване е стъклен електрод, за комплексометрично титруване е живачен или йонселективен, за метода на утаяване е сребърен, а за редокс титруване е платинен.

ЕМП, която възниква по време на титруване поради потенциалната разлика между индикаторния електрод и референтния електрод, се измерва с помощта на рН метри с високо съпротивление. Титрантът се добавя от бюрета в равни обеми, като непрекъснато се разбърква титруваната течност. Близо до точката на еквивалентност титрантът се добавя на стъпки от 0,1-0,05 ml. Стойността на ЕМП в този момент се променя най-силно, тъй като абсолютната стойност на съотношението на промяната на ЕМП към увеличението на обема на добавения титрант ще бъде максимална. Резултатите от титруването се представят или графично, чрез установяване на точка на еквивалентност върху кривата на титруване, или чрез изчисление. След това се изчислява еквивалентният обем на титранта по формулите (виж SP XI, брой 1, стр. 121).

Амперометричното титруване с два индикаторни електрода или титруване до спиране на тока се основава на използването на двойка еднакви инертни електроди (платина, злато), които са под ниско напрежение. Методът се използва най-често за нитритно и йодометрично титруване. Точката на еквивалентност се намира чрез рязко увеличаване на тока, преминаващ през клетката (в рамките на 30 s) след добавяне на последната порция от реагента. Тази точка може да се установи графично чрез зависимостта на силата на тока от обема на добавения реагент, точно както при потенциометричното титруване (СП XI, бр. 1, стр. 123). Разработени са и методи за биамперометрично титруване на лекарствени вещества чрез нитритометрия, утаяване и окислително-редукционни методи.

Особено обещаваща е йонометрията, която използва връзката между ЕМП на галванична мрежа с йон-селективен електрод и концентрацията на анализирания йон в електродната клетка на веригата. Определянето на неорганични и органични (азотсъдържащи) лекарствени вещества с помощта на йон-селективни електроди се различава от другите методи с висока чувствителност, бързина, добра възпроизводимост на резултатите, просто оборудване, налични реактиви, пригодност за автоматизирано наблюдение и изследване на механизма на действие на наркотици. Като пример можем да цитираме методи за йонометрично определяне на калий, натрий, халогениди и калций-съдържащи лекарствени вещества в таблетки и във физиологични кръвозаместващи течности. Използвайки домашни pH метри (pH-121, pH-673), йонометър I-115 и калиеви селективни електроди, се определят калиеви соли на различни киселини (оротова, аспарагинова и др.).

Полярографията е метод за анализ, базиран на измерване на тока, генериран от микроелектрод по време на електроредукция или електроокисление на аналита в разтвор. Електролизата се извършва в полярографска клетка, която се състои от електролизатор (съд) и два електрода. Единият от тях е живачен капещ микроелектрод, а другият е макроелектрод, който представлява или слой живак върху електролизера, или външен наситен каломелов електрод. Полярографският анализ може да се извършва във водна среда, в смесени разтворители (вода - етанол, вода - ацетон), в неводни среди (етанол, ацетон, диметилформамид и др.). При еднакви условия на измерване потенциалът на полувълната се използва за идентифициране на вещество. Количественото определяне се основава на измерване на ограничаващия дифузен ток на тестваното лекарствено вещество (височина на вълната). За определяне на съдържанието се използват методът на калибровъчните криви, методът на стандартните разтвори и методът на добавките (СП XI, бр. 1, стр. 154). Полярографията се използва широко в анализа на неорганични вещества, както и на алкалоиди, витамини, хормони, антибиотици и сърдечни гликозиди. Поради високата си чувствителност съвременните методи са много перспективни: диференциална импулсна полярография, осцилографска полярография и др.

Възможностите на електрохимичните методи във фармацевтичния анализ далеч не са изчерпани. Разработват се нови варианти на потенциометрия: инверсионна безтокова хронопотенциометрия, директна потенциометрия с използване на газов амониево-селективен електрод и др. Изследванията се разширяват в областта на приложение във фармацевтичния анализ на методи като кондуктометрия, базирани на изследване на електрическата проводимост на разтвори на аналити; кулометрия, която се състои в измерване на количеството електричество, изразходвано за електрохимичната редукция или окисление на определяните йони.

Кулонометрията има редица предимства пред другите физикохимични и химични методи. Тъй като този метод се основава на измерване на количеството електричество, той позволява директно да се определи масата на веществото, а не всяко свойство, пропорционално на концентрацията. Ето защо кулонометрията премахва необходимостта от използване не само на стандартни, но и на титрувани разтвори. Що се отнася до кулонометричното титруване, то разширява обхвата на титриметрията чрез използването на различни нестабилни електрогенерирани титранти. Една и съща електрохимична клетка може да се използва за извършване на титруване с помощта на различни видове химични реакции. По този начин методът на неутрализация може да определи киселини и основи дори в милимоларни разтвори с грешка не повече от 0,5%.

Кулонометричният метод се използва за определяне на малки количества анаболни стероиди, локални анестетици и други лекарствени вещества. Пълнителите за таблетки не пречат на определянето. Методите се отличават със своята простота, изразителност, бързина и чувствителност.

Методът за диелектрични измервания в диапазона на електромагнитните вълни се използва широко за експресни анализи в химическата технология, хранително-вкусовата промишленост и други области. Една от перспективните области е диелкометричният мониторинг на ензими и други биологични продукти. Позволява бърза, точна и безреактивна оценка на параметри като влажност, степен на хомогенност и чистота на лекарството. Диелкометричният контрол е многопараметърен, тестваните разтвори могат да бъдат непрозрачни и измерванията могат да се извършват безконтактно, като резултатите се записват на компютър.

4.7 Методи за разделяне

От физикохимичните методи за разделяне във фармацевтичния анализ се използват главно хроматография, електрофореза и екстракция.

Хроматографските методи за разделяне на веществата се основават на разпределението им между две фази: подвижна и неподвижна. Подвижната фаза може да бъде течност или газ, неподвижната фаза може да бъде твърдо вещество или течност, адсорбирана върху твърд носител. Относителната скорост на движение на частиците по пътя на разделяне зависи от тяхното взаимодействие със стационарната фаза. Това води до това, че всяко вещество пътува определена дължина върху носителя. Отношението на скоростта на движение на веществото към скоростта на движение на разтворителя се обозначава с тази стойност.Тази стойност е константа на веществото при дадени условия на разделяне и се използва за идентификация.

Хроматографията дава възможност за най-ефективно извършване на селективно разпределение на компонентите на анализираната проба. Това е от съществено значение за фармацевтичния анализ, при който обектите на изследване обикновено са смеси от няколко вещества.

Според механизма на процеса на разделяне хроматографските методи се класифицират като йонообменна, адсорбционна, седиментационна, разделителна и редокс хроматография. Според формата на процеса се разграничават колонна, капилярна и плоска хроматография. Последното може да се направи на хартия и в тънък (фиксиран или нефиксиран) слой сорбент. Хроматографските методи също се класифицират според състоянието на агрегация на анализираното вещество. Те включват различни методи на газова и течна хроматография.

Адсорбционна хроматографиясе основава на селективна адсорбция на отделни компоненти от разтвор на смес от вещества. Като неподвижна фаза служат адсорбенти като алуминиев оксид, активен въглен и др.

Йонообменна хроматографияизползва йонообменни процеси, протичащи между адсорбента и електролитните йони в анализирания разтвор. Стационарната фаза е катионобменна или анионобменна смола; йоните, които съдържат, могат да се обменят с противойони с подобен заряд.

Седиментна хроматографиясе основава на разликата в разтворимостта на веществата, образувани по време на взаимодействието на компонентите на сместа, които се разделят с утаителя.

Разпределителна хроматографиясе състои в разпределението на компонентите на сместа между две несмесващи се течни фази (подвижна и неподвижна). Стационарната фаза е носител, импрегниран с разтворител, а подвижната фаза е органичен разтворител, който практически не се смесва с първия разтворител. При извършване на процеса в колона, сместа се разделя на зони, съдържащи по един компонент. Разделителната хроматография може да се извърши и в тънък слой сорбент (тънкослойна хроматография) и върху хроматографска хартия (хартиена хроматография).

Преди други методи за разделяне във фармацевтичния анализ, йонообменната хроматография започва да се използва за количествено определяне на лекарства: соли на сярна, лимонена и други киселини. В този случай йонообменната хроматография се комбинира с киселинно-алкално титруване. Подобренията в метода направиха възможно разделянето на някои хидрофилни органични съединения с помощта на хроматография с йонни двойки с обратна фаза. Възможно е комплексометрията да се комбинира с използването на катионобменници в Zn 2+ форма за анализ на аминопроизводни в смеси и алкалоиди в екстракти и тинктури. По този начин комбинацията от йонообменна хроматография с други методи разширява нейния обхват на приложение.

През 1975 г. е предложена нова версия на хроматографията, използвана за определяне на йони и наречена йонна хроматография. За извършване на анализа се използват колони с размери 25 X 0,4 см. Разработени са двуколонна и едноколонна йонна хроматография. Първият се основава на йонообменно разделяне на йони в една колона, последвано от намаляване на фоновия сигнал на елуента във втората колона и кондуктометрично откриване, а вторият (без потискане на фоновия сигнал на елуента) е комбиниран с фотометрични, атомно-абсорбционни и други методи за откриване на определяните йони.

Въпреки ограничения брой работи по използването на йонна хроматография във фармацевтичния анализ, обещанието на този метод е очевидно за едновременното определяне на анионния състав на многокомпонентни лекарствени форми и физиологични разтвори за инжекции (съдържащи сулфат, хлорид, карбонат и фосфат йони), за количествено определяне на хетероелементи в органични лекарствени вещества (съдържащи халогени, сяра, фосфор, арсен), за определяне на нивото на замърсяване на водата, използвана във фармацевтичната промишленост, с различни аниони, за определяне на определени органични йони в дозирани форми.

Предимствата на йонната хроматография са високата селективност на определяне на йони, възможността за едновременно определяне на органични и неорганични йони, ниска граница на откриване (до 10 -3 и дори 10 -6 μg/ml), малък обем на пробата и лекота подготовка, скорост на анализ (за 20 минути, възможно е разделяне на до 10 йона), простота на оборудването, възможност за комбиниране с други аналитични методи и разширяване на обхвата на хроматографията по отношение на обекти, които са сходни по химична структура и трудни за разделяне чрез TLC, GLC, HPLC.

Най-широко използваните методи във фармацевтичния анализ са хартиената хроматография и тънкослойната хроматография.

В хартиената хроматография неподвижната фаза е повърхността на специална хроматографска хартия. Разпределението на веществата става между водата, разположена на повърхността на хартията, и подвижната фаза. Последният е система, която включва няколко разтворителя.

Във фармацевтичния анализ, когато извършват тестове с помощта на хартиена хроматография, те се ръководят от инструкциите на Държавния фонд XI, бр. 1 (стр. 98) и частни фармакопейни монографии за съответните лекарствени вещества (лекарствени форми). При тестване на автентичността тестваното вещество и съответната стандартна проба се хроматографират върху един и същи лист хроматографска хартия. Ако и двете вещества са идентични, тогава съответните петна на хроматограмите имат еднакъв вид и еднакви стойности на Rf. Ако се хроматографира смес от тестваното вещество и стандартната проба, тогава, ако те са идентични, на хроматограмата трябва да се появи само едно петно. За да изключите влиянието на условията на хроматография върху получените стойности на R f, можете да използвате по-обективна стойност на R S, която е съотношението на стойностите на R f на тестовите и стандартните проби.

При тестване за чистота наличието на примеси се оценява по размера и интензитета на цвета на петната върху хроматограмата. Примесът и основното вещество трябва да имат различни стойности на R f , За полуколичествено определяне на съдържанието на примеси се получават едновременно хроматограма на тестваното вещество, взето в определено количество, и няколко хроматограми на стандартна проба, взета в точно измерени количества на един лист хартия при същите условия. След това хроматограмите на тестовите и стандартните проби се сравняват една с друга. Заключение за количеството на примесите се прави от размера на петната и техния интензитет.

Подобни документи

Особености на фармацевтичния анализ. Тестване на автентичността на лекарствени продукти. Източници и причини за лошото качество на лекарствените вещества. Класификация и характеристика на методите за контрол на качеството на лекарствените вещества.

резюме, добавено на 19.09.2010 г


Критерии за фармацевтичен анализ, общи принципи за проверка на автентичността на лекарствените вещества, критерии за добро качество. Характеристики на експресен анализ на лекарствени форми в аптека. Провеждане на експериментален анализ на таблетки аналгин.

курсова работа, добавена на 21.08.2011 г


Държавно регулиране в областта на обращението на лекарствата. Фалшифицирането на лекарства е важен проблем на днешния фармацевтичен пазар. Анализ на състоянието на контрола на качеството на лекарствените продукти на съвременния етап.

курсова работа, добавена на 04/07/2016


Състоянието на маркетинговите изследвания на фармацевтичния пазар на лекарства. Методи за анализ на набор от лекарства. Стокови характеристики на винпоцетин. Анализ на лекарства за подобряване на мозъчното кръвообращение, одобрени за употреба в страната.

курсова работа, добавена на 02/03/2016


Използването на антибиотици в медицината. Оценка на качеството, съхранение и отпускане на лекарствените форми. Химическа структура и физикохимични свойства на пеницилин, тетрациклин и стрептомицин. Основи на фармацевтичния анализ. Методи за количествено определяне.

курсова работа, добавена на 24.05.2014 г


Класификация на лекарствените форми и характеристики на техния анализ. Количествени методи за анализ на еднокомпонентни и многокомпонентни лекарствени форми. Физикохимични методи за анализ без разделяне на компонентите на сместа и след предварителното им разделяне.

резюме, добавено на 16.11.2010 г


История на развитието на технологията на лекарствените форми и фармацията в Русия. Ролята на лекарствата при лечението на заболявания. Правилно приемане на лекарства. Начин на приложение и доза. Профилактика на заболявания с помощта на лекарства, препоръки на лекар.

презентация, добавена на 28.11.2015 г


Система за анализ на маркетингова информация. Избор на източници на информация. Анализ на асортимента на аптечна организация. Характеристики на пазара на лекарства. Принципи на сегментиране на пазара. Основни механизми на действие на антивирусните лекарства.

курсова работа, добавена на 09.06.2013 г


Концепцията за ексципиентите като фармацевтичен фактор; тяхната класификация в зависимост от произхода и предназначението. Свойства на стабилизатори, пролонгатори и коректори на миризми. Номенклатура на помощните вещества в течните лекарствени форми.

резюме, добавено на 31.05.2014 г


Комбинирано действие на лекарствени вещества. Синергия и нейните основни видове. Концепцията за антагонизъм и антидотизъм. Фармацевтични и физикохимични взаимодействия на лекарства. Основни принципи на лекарствените взаимодействия.

Фармацевтичен анализ (ФА).Той е в основата на фармацевтичната химия и има свои собствени характеристики, които го отличават от другите видове анализи. Те се състоят в това, че се анализират вещества от различно химично естество: неорганични, елементоорганични, радиоактивни, органични съединения от прости алифатни до сложни естествени биологично активни вещества. Диапазонът на концентрациите на анализираните вещества е изключително широк. Обект на фармацевтичния анализ са не само отделни лекарствени вещества, но и смеси, съдържащи различен брой компоненти.

Ежегодното попълване на арсенала от лекарства налага разработването на нови методи за техния анализ. Методите за фармацевтичен анализ изискват системно усъвършенстване поради непрекъснатото повишаване на изискванията както към качеството на лекарствата, така и към количественото съдържание на биологично активни вещества в тях. Ето защо към фармацевтичния анализ се поставят високи изисквания. Тя трябва да бъде доста специфична и чувствителна, точна по отношение на регулаторните изисквания на Държавната фармакопея X и XI и друга научна и техническа документация (FS, GOST), извършена в кратки периоди от време, като се използват минимални количества тестови лекарства и реактиви.

В зависимост от задачите фармацевтичният анализ включва различни форми на контрол на качеството на лекарствата: фармакопеен анализ; поетапен контрол на производството на лекарства; анализ на индивидуално произведени лекарствени форми; бърз анализ в аптека и биофармацевтичен анализ. Неговата неразделна част е фармакопейният анализ, който е набор от методи за изследване на лекарства и лекарствени форми, посочени в Държавната фармакопея или друга научна и техническа документация (FS, FSP, GOST). Въз основа на резултатите, получени по време на фармакопейния анализ, се прави заключение за съответствието на лекарствения продукт с изискванията на държавната фармакопея или друга техническа документация. Ако се отклоните от тези изисквания, лекарството не е разрешено за употреба.

Химичен анализ на растителни суровини.Според техниката на изпълнение и характера на получените резултати химичните реакции се разделят на няколко групи: качествени, микрохимични и хистохимични, микросублимационни.

За установяване на автентичността на лекарствените растителни суровини се използват най-простите качествени реакции и хроматографски тестове за активни и сродни вещества. Методологията е изложена в съответната нормативна документация за вида на изследваната суровина в раздел „Качествени реакции“.

Качествените реакции се извършват върху сухи суровини със следните видове суровини: дъбова кора, калина, зърнастец, коренища от бадан, коренища и корени от оман, глухарче, бяла ружа, женшен, корени от берберис, липов цвят, ленени семена, склероции на мораво рогче (за общо 12 вида суровини) .

Основно качествените реакции се извършват с екстракция (екстракт) от лечебни растителни суровини.

Въз основа на свойствата на биологично активните вещества те се извличат от суровини с вода, алкохол с различна концентрация или органичен разтворител, по-рядко с добавяне на основа или киселина.

Водният екстракт се приготвя от суровини, съдържащи гликозиди, полизахариди, сапонини, фенологликозиди, антрагликозиди и танини. Алкалоидите се извличат от суровините под формата на соли с помощта на подкиселена вода.

Голяма група биологично активни вещества (сърдечни гликозиди, кумарини, лигнани, флавоноиди) се екстрахират с различни концентрации на етилов и метилов алкохол.

Ако реакцията е достатъчно специфична и чувствителна, тогава тя се провежда със суров екстракт от суровината.

Такива реакции включват:

общи алкалоидни седиментни реакции;

реакции с разтвор на алуминиев хлорид върху флавоноиди (жълт кантарион, възел, мента и др.);

Синод тест за флавоноиди в цветовете на безсмъртниче;

реакция с алкален разтвор на антраценови производни (кора от зърнастец, корени от ревен и др.);

реакция с разтвор на фероамониева стипца върху танини (дъбова кора, змийски коренища, бергения и др.).

Често реакцията се намесва от съпътстващи вещества (протеини, амини, стероли, хлорофил). В този случай се използва пречистен екстракт (например от суровини, съдържащи сърдечни гликозиди, кумарини, алкалоиди, фенол гликозиди, лигнани).

Екстракцията се пречиства чрез утаяване на придружаващите вещества с разтвор на оловен ацетат и натриев сулфат или чрез използване на метода на смяна на разтворителите или метода на разделителната хроматография.

Микрохимичните реакции обикновено се извършват едновременно с микроскопския анализ, като резултатите се наблюдават под микроскоп:

за етерични и мазни масла с разтвор Судан III;

върху лигнифицирани лигнифицирани елементи с разтвор на флороглюцин и 25% разтвор на сярна киселина или концентрирана солна киселина.

Дъбовата кора (на прах) взаимодейства с фероамониева стипца и резултатът от реакцията се изследва под микроскоп.

Хистохимичните реакции са реакции, които могат да се използват за откриване на определени съединения директно в клетките или структурите, където са локализирани.

Според Държавна фармакопея XI хистохимичните реакции се извършват върху слуз с разтвор на мастило в корени от бяла ружа и ленени семена.

Микросублимация- директно изолиране от сух растителен материал на вещества, които лесно сублимират при нагряване. Полученият сублимат се изследва под микроскоп, след което се провежда микрохимична реакция със съответния реактив.

Методи за определяне автентичността на лечебни растителни суровини.Автентичността на суровините се определя чрез макроскопски, микроскопски, химични и луминесцентни анализи.

Макроскопски анализ. За да го извършите, трябва да знаете морфологията на растенията. Те изследват външния вид на суровината с просто око или с помощта на лупа и измерват размера на частиците с помощта на милиметрова линийка. На дневна светлина цветът на суровината се определя от повърхността, на счупването и в среза. Миризмата се установява чрез триене или чупене на растенията, а вкусът се установява само при неотровните растения. Когато изучавате външния вид, обърнете внимание на морфологичните характеристики на части от суровината.

Микроскопски анализ. Използва се за определяне на автентичността на натрошени лечебни растителни суровини. За да направите това, трябва да знаете анатомичната структура на растенията като цяло и характеристиките, характерни за дадено растение, които го отличават от другите растения.

Химичен анализ. Осигурява провеждане на качествени, микрохимични, хистохимични реакции и сублимация за определяне на активни или свързани вещества в суровините. Препоръчително е да се провеждат микрохимични реакции паралелно с микроскопския анализ. Хистохимичните реакции се провеждат за идентифициране на специфични съединения на техните места в растението. Под сублимация се разбира производството от растителни суровини на вещества, които лесно се сублимират при нагряване, последвано от качествена реакция със сублимата.

Луминесцентен анализ. Това е метод за изследване на различни обекти (включително биологични), основан на наблюдение на тяхната луминесценция. Луминесценцията е светене на газ, течност или твърдо вещество, причинено не от нагряването на тялото, а от нетермичното възбуждане на неговите атоми и молекули. Луминесцентният анализ се извършва за определяне на вещества с луминесценция в лекарствени суровини.

Контрол на качеството на органотерапевтичните лекарства.За да се провери дали качеството на ютията отговаря на изискванията на стандарта, от всяка партида се избират 5% от кутиите или опаковките, но не по-малко от пет такива опаковки. Ако в една от отворените кутии или опаковки салниците не отговарят на изискванията на съответния стандарт поне по един от показателите, тогава се проверява цялата партида.

За отделните видове суровини има обективни (лабораторни) методи за оценка на тяхното качество.

Обективно качеството на панкреаса, предназначен за производство на инсулин, съгласно GOST, се определя от масовата част на мазнините и масовата част на инсулина, като се използват подходящи лабораторни методи.

Масовата част на мазнините се определя с бутирометър. Масовата част на инсулина се проверява по желание на потребителя с помощта на имунореактивен метод с помощта на антисерум и имуноглобулини в хомогенизирана жлеза.

Качеството на лигавицата (епител) на езика на едрия рогат добитък се проверява чрез определяне на pH на консервиращата среда с епитела и неговото бактериално замърсяване. Същността на метода е да се определи общият брой микроби в 1 ml консервираща среда с епител.

Качеството на стъкловидното тяло на замразени очи на говеда, свине, овце и кози се определя от количественото съдържание на хиалуронова киселина (глюкозамин) в стъкловидното тяло. Принципът на метода се основава на определянето на глюкозамин в продуктите на хидролизата на хиалуроновата киселина, който е неразделна част от молекулата на хиалуроновата киселина и е в пряка зависимост от нейното съдържание в стъкловидното тяло.

Биологичната активност на хипофизните жлези се определя в единици на действие на ACTH, съдържащи се в 1 mg кисел ацетониран прах (AAP), получен от хипофизните жлези.

Определянето на активността на ACTH се основава на способността му да предизвиква намаляване на лимфоидната тъкан, по-специално на тимусната жлеза на плъхове. За единица действие на лекарството се приема дневната доза от лекарството, която при прием в продължение на пет дни води до намаляване на теглото на жлезата с 50±5%.

Качеството на паращитовидните жлези се определя хистологично. На участъците на паращитовидните жлези се виждат натрупвания на епителни клетки с изразена базофилна грануларност. В участъците на лимфните жлези се вижда ретикуларна тъкан (под формата на хомогенна маса), заобиколена от плътна съединителна мембрана (капсула), от която навътре се простират ясно видими съединителни връзки. Държавният стандарт предвижда проба от 40 жлези да съдържа не повече от един лимфен възел.

Методи за определяне качеството на сухите биологични препарати.Сухите биологични препарати имат редица предимства пред традиционните течни биологични препарати поради по-добро качество, по-малко тегло, увеличен срок на годност и лекота на транспортиране.

Физически методи. 1.Метод за определяне на вакуум. Същността на метода се състои в способността на високочестотния електрически ток при високо напрежение да предизвиква светене в газовете, чийто характер варира в зависимост от степента на разреждане на въздуха в ампулата (бутилката).

Избор на проба. Вземането на проби се извършва в съответствие с правилата, установени в държавните стандарти за сухи биологични препарати.

Хардуер и оборудване. При провеждане на теста се използва следната апаратура: апарат тип „Д’Арсенал” или „Тесла”, стойка за ампули и метална маса.

Провеждане на теста. Подготовка за теста:

Преди тестване проверете външния вид, плътността на запечатването на флаконите, наличието на пукнатини и запечатването на ампулите.

Устройството се държи 10 минути след включване. Тестовите ампули се монтират в статив, след което към тях се довежда електрод на разстояние 1 см. При определяне на вакуум с помощта на апарат Tesla, един метален електрод на устройството се заземява през метална маса, върху която са разположени ампулите , а другата се носи при изследваните ампули. Експозицията е не повече от 1 s.

Обработка на резултатите. Появата на блясък вътре в ампулите с характерен пукащ звук показва наличието на вакуум в тях.

Степента на разреждане на въздуха в тестваните ампули се определя от естеството на блясъка на газовете в тестваните ампули в съответствие със следните данни.

Определяне на степента на разреждане на въздуха в изследваните ампули

2. Метод за определяне на влажността. Същността на метода е да се определи намаляването на масата на проба от лекарството след изсушаване в продължение на 1 час при температура 105 ° C.

Избор на проба. За изследване се избира необходимия брой ампули (флакони) от различни места в опаковката, като се вземат предвид изискванията за тегло на пробата (съгласно стандарта).

При вземане на проби проверете плътността на ампулите. За бутилки с лиофилизирано лекарство стената и дъното се проверяват за целостта, както и пълното прилягане на навитата капачка и гумената запушалка. Ако има дефекти, бутилката се заменя с друга. Всяка ампула, запечатана под вакуум, се проверява за течове, преди да се извади лекарството от нея.

Оборудване, материали и реактиви. При извършване на теста използвайте: лабораторни везни, лабораторен сушилен шкаф, живачни термометри, ексикатор, стъклени бутилки, технически вазелин, безводен калциев хлорид или дехидратиран гипс, или калциниран силикагел.

Подготовка за теста. Сушилният шкаф се проверява с максимални термометри за равномерно нагряване.

При сушене на проби в бутилки долната част на контролния термометър трябва да е на нивото на бутилките. Показанията на контролния термометър са определящи за настройка на температурата в шкафа.

Везната трябва да бъде монтирана на стабилна маса без вибрации. Резултатите от всички претегляния се записват в грамове с точност до четвъртия знак след десетичната запетая.

Дъното на ексикатора трябва да се напълни с дехидратиран калциев хлорид или гипс или силикагел. Полираните ръбове на съда се намазват леко с технически вазелин.

За всеки анализ трябва да се приготвят три бутилки с еднакъв диаметър и височина.

Провеждане на теста. За определяне на влажността се използват три ампули, ако всяка от тях съдържа маса на пробата от най-малко 0,1 g. Ако ампулата съдържа по-малко от 0,1 g биологичен препарат, тогава могат да се използват две или повече ампули.

Избраната проба, натрошена до прахообразно състояние, се поставя на равен слой в предварително претеглена бутилка.

Бутилките се поставят в сушилен шкаф на рафт. За начало на сушене трябва да се счита времето, когато температурата достигне 105 °C според контролния термометър. Време за съхнене 60 мин.

След приключване на сушенето бутилките бързо се затварят с капаци и се прехвърлят в ексикатор за охлаждане до стайна температура, след което бутилките се претеглят до четвърта цифра и се записва според формата им.

3. Метод за определяне на количеството кислород. Избор на проба. Вземането на проби се извършва в съответствие с правилата, установени в държавните стандарти за сухи биологични препарати.

Оборудване, материали и реактиви. При извършване на теста използвайте: газов хроматограф марка LXM-8MD или други подобни марки с детектор за топлопроводимост и газова хроматографска колона с диаметър 3 mm и дължина 1000 mm, муфелна пещ с температура на нагряване до до 1000 °C, газов разходомер с бюрета, хронометър, медицинска спринцовка с вместимост 1 cm 3, плетена телена мрежа, мерителна лупа, ексикатор, порцеланово хаванче, метална линийка с дължина 30 cm, молекулни сита - синтетични зеолит клас CaA, медицинска игла, медицинска гумена тръба с вътрешен диаметър 4,2 mm, дължина 10 m, бутилка с вместимост 3000 cm 3, гумена запушалка, силиконово масло, хелий, азотен газ, дестилирана вода.

Подготовка за теста. Подготовка на колона. Синтетичният зеолит се натрошава в порцеланов хаван, пресява се на сита, промива се с дестилирана вода, суши се и се калцинира в муфелна пещ при температура 450...500 °C в продължение на 2 часа, след което се охлажда в ексикатор върху мрежи до стайна температура. температура.

Хроматографската колона е монтирана вертикално и напълнена със синтетичен зеолит. Колоната не се допълва с 1 см и се уплътнява с мрежа. Напълнената колона се монтира в термостата на хроматографа и без да се свързва с детектора, през нея се пропуска поток от хелий или азот в продължение на 3 часа при температура 160...180 °C. След това колоната се свързва към детектора и хелият или азотът продължават да текат през нея, докато дрейфът на нулевата линия спре при максимална чувствителност на детектора.

Хроматографът се подготвя за работа и се включва съгласно заводските инструкции.

Подготовка на бутилка с лекарството за тестване. За да се вземе проба от бутилка с лекарството, налягането на газа в бутилката се изравнява с атмосферното налягане.

Подготовка на медицинска спринцовка. Първо монтирайте метална тръба върху пръта на спринцовката и проверете спринцовката за течове. Медицинска спринцовка с игла, тествана и подготвена за газова проба, пробива гумената тръба, през която хелият излиза от референтната колона на хроматографа, и хелият се изтегля и освобождава два пъти бавно със спринцовката. Третият път, като се изтегли хелий в спринцовката и се постави с иглата надолу, се вземат газови проби от бутилката с лекарството.

Провеждане на теста. От всяка бутилка се вземат две газови проби и се въвеждат последователно една след друга с интервал от 3...4 минути в изпарителя на хроматографа. Пробата се въвежда в изпарителя чрез леко натискане на пръта с пръст. 110... 120 s след въвеждане на пробата, записващото устройство начертава пик на кислород върху хроматограмата, а след това пик на азот.

Обработка на резултатите. Изчислява се площта на пиковете на кислорода и азота. За да направите това, измерете височината и ширината на пиковете на кислорода и азота на хроматограф, като използвате метална линийка с дължина 30 cm, лупа и подострен молив. Височината на пиковете се измерва от основната линия до върха на пика, ширината на пика се измерва на половината от височината му. Когато измервате, вземете разстоянието от вътрешната дебелина на пиковата линия до външната.

Площта на пика на кислород (SO 2, mm 2) и азот (5N 2, mm 2) се изчислява по формулите

SO 2 = h 1 * b 1; SN = h 2 *b 2,

където h 1 h 2 ~ височина на пиковете на кислород и азот, mm; b 1, b 2 - ширина на пиковете на кислород и азот, mm.

Обемната част на кислорода (X, %) във всяка газова проба се изчислява по формулата

X=SO 2 /(SO 2 +SN 2)

където SO 2, SN 2 са пиковите площи на кислорода и азота, mm 2.

Като краен резултат от теста се приема средноаритметичната стойност на резултатите от определянията в три бутилки от лекарството.

Относителната намалена грешка на метода с доверителна вероятност P-0,95 не трябва да надвишава 10%.

Бактериологичен метод. Контрол на стерилността. Същността на метода е микробиологичната оценка на отсъствието на растеж на бактерии и гъбички в препаратите за засяване върху хранителни среди.

Избор на проба. От всяка серия лекарства се вземат проби в количество от 0,15% флакони, но не по-малко от пет за течни и 10 ампули за сухи лекарства.

Подготовка за теста. Лабораторната стъклена посуда се вари в продължение на 15 минути в дестилирана вода, подкислява се с разтвор на солна киселина и след това се измива с чешмяна вода и се измива с четка в разтвор, съдържащ 30 g прах за пране и 50 cm 3 воден разтвор на амоняк на 1000 cm 3 от дестилирана вода. След това съдовете се измиват старателно първо с чешмяна вода, а след това три пъти с дестилирана вода, изсушават се и се стерилизират.

Преди стерилизация съдовете се поставят в метални кутии. Стерилизирайте съдовете в автоклав при 0,15 MPa за 60 минути.

Готови хранителни среди, тествани за растежни свойства, се изсипват в епруветки от 6...8 cm 3 (за определяне на анаероби, 10...12 cm 3) и 50...60 cm 3 в бутилки с капацитет от 100 см 3.

Пробите от сухи биологични препарати се разтварят предварително със стерилен разтворител (изотоничен разтвор на натриев хлорид, дестилирана вода и др.).

Провеждане на теста. 1. Провеждане на тест за стерилност с тиогликолатна среда.

От всяка бутилка от лекарството 1 cm 3 се инокулира в три епруветки, съдържащи тиогликолатна среда.

Две инокулирани епруветки се държат в термостат за 14 дни: едната при температура 21 °C, другата при температура 37 °C.

Третата епруветка се държи 7 дни при температура 37 °C и след това се субкултивира с 0,5 cm 3 от една епруветка върху наклонен казеинов агар, казеинов хранителен бульон, среда на Сабуро и 1 cm 3 на казеинов хранителен бульон под вазелиново масло с парчета от месо или черен дроб.

Субкултурите върху казеинов агар и бульон с месен екстракт се поддържат още 7 дни при температура 37 °C, а субкултурите върху средата на Sabouraud се поддържат при температура 21 °C.

При тестване на лекарствени проби се следи стерилността на средата: три епруветки с всяка среда се държат в термостат за 14 дни при 37 ° C, със средата на Sabouraud - при температура 21 ° C.

2. Провеждане на тест за стерилност без тиогликолова среда.

Всяка проба от лекарството се инокулира върху течна среда на Sabouraud, агар с месен екстракт и бульон с месен екстракт - по три епруветки; в сряда Tarozzi - две епруветки и две бутилки.

За идентифициране на аероби се засяват 0,5 cm 3 посевен материал в една епруветка и 1...2 cm 3 в една бутилка, а за идентифициране на анаероби - съответно 1 и 5 cm 3. Посевите се поставят в термостат (при температура 37 °C; за Sabouraud - при температура 21 °C) за 7 дни (15 дни за анаероби). След това се извършва повторно засяване (с изключение на сеитба върху месопептонен агар). Субкултура на същата медия. Оставете за 7 дни (15 дни за анаероби). Извършете контрол на стерилитета.

Оценка на резултатите. Резултатите от първичните и повторните инокулации се вземат под внимание чрез макроскопско, а в случай на микробен растеж, микроскопско изследване на всички инокулации, взети под внимание 14 дни след първоначалното инокулиране върху тиогликолатна среда и 7 дни след първоначалното инокулиране без тиогликолатна среда. Средата се счита за стерилна, ако не се наблюдава растеж в нито една от инокулираните епруветки.

При наличие на растеж в поне една от инокулираните епруветки, контролът за стерилност се повтаря на същия брой проби и се извършва микроскопия на порасналите микроби. Натривките се оцветяват по Грам, за да се отбележи морфологията.

Ако няма растеж при повторен контрол, лекарството се счита за стерилно. Ако има растеж в поне една от епруветките и микрофлората е идентична по време на първоначалната и повторната култура, лекарството се счита за нестерилно.

Ако по време на първоначалната и повторната култура се идентифицира различна микрофлора и растежът се открива само в отделни епруветки, пробите се инокулират трети път.

Ако няма растеж, лекарството се счита за стерилно. Ако се открие растеж в поне една епруветка, независимо от естеството на микрофлората, лекарството се счита за нестерилно.

Нормативни изисквания към качеството на готовите лекарствени форми.Лекарствените форми се произвеждат във фабрики, фармацевтични фабрики (официални лекарства) и аптеки (масови лекарства). Контролът на готовите лекарствени форми във фармацевтичните предприятия се извършва в съответствие с изискванията на NTD (Държавна фармакопея, FS, FSP, GOST). В съответствие с изискванията на тези документи лекарствените форми трябва да бъдат тествани (V.D. Sokolov, 2003).

Таблетките се тестват за разпадане. Ако няма други инструкции в частна статия, тогава таблетките трябва да се разпаднат в рамките на 15 минути, а обвитите таблетки трябва да се разпаднат не повече от 30 минути. Ентералните таблетки не трябва да се разпадат в рамките на 1 час в разтвор на солна киселина, но трябва да се разпадат в рамките на 1 час в разтвор на натриев бикарбонат. Якостта на абразия на таблетките трябва да бъде най-малко 75%. Лекарството, съдържащо се в таблетката, трябва да се разтвори във вода най-малко 75% в рамките на 45 минути. Средното тегло се определя чрез претегляне на 20 таблетки с точност до 0,001 г. Допускат се отклонения от средното тегло: ±7,5% за таблетки с тегло 0,1...0,3 g и ±5% за таблетки с тегло 0,5 g и повече. Таблетките контролират и съдържанието на талк.

Гранули - определени по размер чрез ситов анализ. Диаметърът на клетката трябва да бъде 0,2...3 mm, а броят на по-малките и по-големите гранули не трябва да надвишава 5%. Тестването на разпадането на гранули от проба от 0,5 g е същото като при таблетките. Времето за разпадане не трябва да надвишава 15 минути. Определете влагата. За определяне на съдържанието на лекарственото вещество се вземат проба от най-малко 10 смлени гранули.

Капсули - контролно средно тегло. Отклонението на всяка капсула от него не трябва да надвишава ±10%. По същия начин, както при таблетките, се следи разпадането и разтворимостта и се определя еднородността на дозировката за капсули, съдържащи 0,05 g или по-малко от лекарственото вещество. Количественото определяне на лекарствените вещества се извършва по специални методи, като за тези цели се използва съдържанието на 20 до 60 капсули.

Прахове - установяват се отклонения в масата на дозираните прахове. Те могат да бъдат ±15% с тегло на праха до 0,1 g; ±10% - от 0,1 до 0,3 g; ±5% - от 0,3 до 1; ±3% - над 1 g.

Супозитории - визуално определят равномерността в надлъжен разрез. Средното тегло се определя чрез претегляне с точност до 0,01 g, отклоненията не трябва да надвишават ± 5%. Супозиториите, направени на липофилни основи, се контролират от температурата на топене. Не трябва да превишава

37 °C. Ако тази температура не може да се установи, тогава се определя времето за пълна деформация, което не трябва да бъде повече от 15 минути. Супозиториите, направени на хидрофилна основа, се тестват за разтворимост (индикатор за разтваряне). Времето за разтваряне се определя при температура (37±1) ° С, която не трябва да надвишава 1 ч. Количественото определяне на лекарствените вещества се извършва по специални методи.

Тинктури - определят алкохолното съдържание или плътността. Съдържанието на активните вещества се определя чрез специални техники. Освен това сухият остатък се определя след изпаряване на 5 ml тинктура до сухо в бутилка и изсушаване в продължение на 2 часа при температура (102,5 ± 2,5) °C. В същия обем тинктура, след изгаряне и калциниране на сместа й с 1 ml концентрирана сярна киселина, се определя съдържанието на тежки метали.

Екстракти - както при тинктурите, определят плътността или съдържанието на алкохол, активни съставки, тежки метали. Сухото тегло на остатъка също се определя, а в гъстите и сухи екстракти се определя съдържанието на влага [чрез сушене в пещ при температура (102,5 ± 2,5) °C].

Аерозоли - измерете налягането вътре в цилиндъра с помощта на манометър при стайна температура (ако пропелантът е сгъстен газ). Проверете опаковката за течове. В дозирани опаковки се определя средното тегло на лекарството в една доза, отклонението в което се допуска не повече от +20%. Процентът на освободеното съдържание се определя чрез изваждането му от контейнера и след това претеглянето му. Количественото определяне на веществото се извършва в съответствие с изискванията на частните членове на Държавната фармакопея. Отклоненията от посочените количества не трябва да надвишават ±15%.

Мехлеми - общ тест е метод за определяне на размера на частиците на лекарствените вещества в мехлеми. Използва се микроскоп с окулярен микрометър MOV-1.

Мазилки. Съставът, показателите за качество и методите за изпитване са различни и са посочени в нормативната документация за конкретни продукти.

Капките за очи се тестват за стерилност и наличие на механични включвания.

Инжекционни лекарствени форми. Инжекционните лекарствени разтвори, прилагани интравенозно в големи количества, изискват специално внимание. Те използват такива характеристики като външен вид, включително цвят и прозрачност на разтворите, липса на механични примеси, апирогенност, стерилност, обем на разтвора, количество на активното вещество в него, рН и изотоничност на кръвната плазма, опаковка, етикетиране, обем на пълнене на ампули. Нормите на допустимите отклонения са посочени в Държавната фармакопея XI. Освен това се определя съдържанието на помощни вещества; за някои от тях (фенол, крезол, сулфити, хлоробутанол) са предвидени допустими количества (от 0,2 до 0,5%). Изискванията за pH зависят от лекарството, обикновено стойността му може да варира от 3,0 до 8,0. Всяка ампула (бутилка) посочва името на лекарството, неговото съдържание (в проценти) или активност (в единици за действие, ED), обем или тегло, партиден номер, срок на годност. Всички изпитвания на инжекционни лекарствени форми се регулират от нормативна и техническа документация.

Анализът на хомеопатичните лекарства е много труден поради високите разреждания на лекарствените вещества. Ако биологично активните вещества се съдържат в тинктури, есенции, мехлеми и други форми в разреждания до 2 С (С е стотна) или 0,0001, тогава техният анализ и стандартизация практически не се различават от контрола на качеството на лекарствените форми, използвани в алопатичната медицина. Лекарствата при разреждане от 2...3 С (10 -4 ...10 -6) се анализират след специални техники за концентриране, използващи изпаряване, изгаряне на вещества, последвано от определяне чрез един от физикохимичните методи, въз основа на неговата разделителна способност. При разреждане над 3 С (10 -6) е достатъчно да се установи автентичността на лекарството, съдържащо се в една единична или дневна доза. При много високи разреждания (до 50 C или 10 -10 ... 10 -100) е невъзможно да се контролира качеството на хомеопатичните лекарства, като се използват съществуващите методи. За такива лекарства се извършва контрол на качеството на етапа на производство, като се контролира стриктно технологичният процес. Качеството се контролира, когато съставките се зареждат и се записват в протокола за зареждане. Всяка съставка се подлага на предварителен анализ. Във всички тези случаи се използват хроматографски, фотометрични, флуоресцентни и други методи за анализ и стандартизиране на хомеопатичните лекарства.