Zvezdaste ćelije jetre se razvijaju iz. Osnovna istraživanja. O liječenju patologije organa

Međućelijska komunikacija se može ostvariti parakrinom sekrecijom i direktnim kontaktom između stanice. Poznato je da perisinusoidne ćelije jetre (HPC) uspostavljaju regionalnu nišu matičnih ćelija i određuju njihovu diferencijaciju. U isto vrijeme HPC ostaju slabo okarakterizirani na molekularnom i ćelijskom nivou.

Cilj projekta bio je proučavanje interakcija između perisinusoidnih ćelija jetre štakora i različitih matičnih ćelija kao što su frakcija mononuklearnih ćelija ljudske krvi iz pupčane vrpce (UCB-MC) i multipotencijalne mezenhimalne stromalne ćelije dobijene iz koštane srži štakora (BM-MMSC).

materijali i metode. Pacovske BM-MSC i HPC, ljudske UCB-MC ćelije su izvedene standardnim tehnikama. Da bismo proučavali HPC parakrinu regulaciju, zajedno smo uzgajali UCB-MC ili BM-MMSC ćelije sa HPC koristeći Boyden komore i kondicionirane HPC ćelije. Diferencijalno obilježene ćelije su zajedno kultivirane i njihove interakcije su promatrane fazno-kontrastnom fluorescentnom mikroskopijom i imunocitohemijom.

rezultate. Tokom prve sedmice uzgoja došlo je do autofluorescencije vitamina A zbog sposobnosti PHC-a da skladišti masti. BM-MMSC je pokazao visoku održivost u svim modelima ko-kulture. Nakon 2 dana inkubacije u kondicioniranoj podlozi ko-kulture BM-MMSC sa HPC, uočili smo promjene u morfologiji MMSC - smanjile su se u veličini, a klice su postale kraće. Ekspresija α-aktina glatkih mišića i desmina bila je slična miofibroblastu - srednjem obliku kulture Ito ćelija in vitro. Ove promjene mogu biti posljedica parakrine stimulacije HPC-om. Najdublji efekat HPC-a na UCB-MC ćelije uočen je u kontaktnoj kokulturi, stoga je važno za UCB-MC ćelije da stvore direktne kontakte između ćelije radi održavanja njihove vitalnosti. Nismo uočili nikakvu ćelijsku fuziju između HPC/UCB i HPC/BM-MMSC ćelija u ko-kulturama. U našim daljim eksperimentima planiramo proučavanje faktora rasta koje proizvodi HPC za hepatičku diferencijaciju matičnih ćelija.

Uvod.

Od posebnog interesa među raznim ćelijama jetre su perisinusoidne ćelije jetre (Ito ćelije). Zbog lučenja faktora rasta i komponenti ekstracelularnog matriksa, stvaraju mikrookruženje hepatocita, a niz naučnih istraživanja je pokazao sposobnost zvezdastih ćelija jetre da formiraju mikrookruženje za progenitorske ćelije (uključujući i hematopoetske) i utiču na njihovu diferencijaciju u hepatociti. Međućelijske interakcije ovih ćelijskih populacija mogu se izvoditi parakrinim izlučivanjem faktora rasta ili direktnim međućelijskim kontaktima, međutim, molekularna i ćelijska osnova ovih procesa ostaju neistražene.

Svrha studije.

Proučavanje mehanizama interakcije Ito ćelije sa hematopoetskim (HSC) i mezenhimskim (MMSC) matičnim ćelijama u in vitro uslovima.

Materijali i metode.

Ito ćelije jetre štakora izolovane su dvema različitim enzimskim metodama. U isto vrijeme, stromalni MMSC su dobijeni iz koštane srži pacova. Mononuklearna frakcija hematopoetskih matičnih ćelija izolovanih iz ljudske krvi iz pupčane vrpce. Parakrini efekti Ito ćelija proučavani su kultivisanjem MMSC i HSC u medijumu u kojem su Ito ćelije rasle, kao i ko-kulturom ćelija odvojenih polupropusnom membranom. Uticaj međućelijskih kontakata proučavan je u ko-kultivaciji ćelija. Za bolju vizualizaciju, svaka populacija je označena individualnom fluorescentnom oznakom. Morfologija ćelija je procenjena fazno-kontrastnom i fluorescentnom mikroskopijom. Fenotipske karakteristike kultiviranih ćelija proučavane su imunocitokemijskom analizom.

Rezultati.

U roku od nedelju dana nakon izolacije perisinusoidnih ćelija, primetili smo njihovu sposobnost autofluorescencije zbog njihove sposobnosti akumulacije masti. Tada su ćelije prešle u međufazu svog rasta i dobile zvjezdasti oblik. U početnim fazama ko-kultivacije Ito ćelija sa MMSC koštane srži pacova, održivost MMSC je održavana u svim varijantama kultivacije. Drugog dana, tokom kultivacije MMSC u medijumu kulture Ito ćelija, došlo je do promene morfologije MMSC-a - smanjili su se u veličini, a procesi su se skraćivali. Ekspresija aktina i desmina alfa glatkih mišića u MMSC se povećala, što ukazuje na njihovu fenotipsku sličnost sa miofibroblastima, međufazom rasta aktiviranih Ito ćelija in vitro. Naši podaci ukazuju na uticaj parakrinih faktora koje luče Ito ćelije na svojstva MMSC u kulturi.

Na osnovu ko-kultivacije hematopoetskih matičnih ćelija sa Ito ćelijama, pokazalo se da hematopoetske matične ćelije ostaju održive samo u kontaktu sa kokultivacijom sa Ito ćelijama. Prema fluorescentnoj analizi mješovitih kultura, nije otkriven fenomen fuzije ćelija iz različitih populacija.

Zaključci. Za održavanje vitalnosti hematopoetskih matičnih ćelija, prisustvo direktnih međućelijskih kontakata sa Ito ćelijama je odlučujući faktor. Parakrina regulacija je uočena samo kada su MMSC kultivisani u hranljivoj podlozi u kojoj su rasle Ito ćelije. Studija uticaja specifičnih faktora koje proizvode Ito ćelije na diferencijaciju HSC i MMSC u ćelijskoj kulturi planira se sprovesti u budućim studijama.

Shafigullina A.K., Trondin A.A., Shaikhutdinova A.R., Kaligin M.S., Gazizov I.M., Rizvanov A.A., Gumerova A.A., Kiyasov A.P.
SEI HPE "Kazanski državni medicinski univerzitet Federalne agencije za zdravstvo i socijalni razvoj"

Urađena je ultrastrukturna, imunohistohemijska i morfometrijska analiza populacije zvezdastih ćelija jetre u dinamici razvoja fibroze i ciroze infektivnog virusnog porekla. Otkrivena je fibrogena aktivacija zvezdastih ćelija jetre, koju karakteriše smanjenje lipidnih kapljica i sinhrono izražavanje karakteristika sličnih fibroblastima – pozitivna imunohistohemijska reakcija na α-aktin glatkih mišića, hiperplazija granularnog citoplazmatskog retikuluma i pericelularno formiranje brojnih kolagenih fibrila. Pokazalo se da, uprkos progresivnom smanjenju gustine broja zvezdastih ćelija koje sadrže lipide tokom razvoja fibroze, i dalje postoji potreba da se održi funkcija taloženja retinoida – kod ciroze jetre zvjezdane ćelije koje sadrže lipide su bile nalaze se u fibroznim septama i unutar lobula. Zaključeno je da su zvijezdaste ćelije jetre polimorfna heterogena populacija sa širokim spektrom funkcionalne aktivnosti.

fibrogeneza

zvezdaste ćelije jetre

ultrastruktura

imunohistohemija

1. Balabaud C., Bioulac-Sage P., Desmouliere A. Uloga zvjezdanih stanica jetre u regeneraciji jetre // J. Hepatol. - 2004. - Vol. 40. – P. 1023–1026.

2. Brandao D.F., Ramalho L.N.Z., Ramalho F.S. Ciroza jetre i zvjezdane stanice jetre // Acta Cirúrgica Brasileira. - 2006. - Vol. 21. – str. 54–57.

3. Desmet V.J., Gerber M., Hoofnagle J.H. Klasifikacija kroničnog hepatitisa: dijagnoza, stupnjevanje i stadiranje // Hepatologija. - 1994. - Vol. 19. - P. 1523-1520.

4. Gabele E., Brenner D.A., Rippe R.A. Fibroza jetre: signali koji dovode do pojačanja fibrogenih zvjezdanih stanica jetre // Front. Biosc. - 2003. - Vol. 8. – P. 69–77.

5. Geerts A. O porijeklu zvezdastih ćelija: mezodermalnih, endodermalnih ili neuro-ektodermalnih? // J. Hepatol. - 2004. - Vol. 40. – P. 331–334.

6. Gutierrez-Ruiz M.C., Gomez-Quiroz L.E. Fibroza jetre: traženje odgovora na stanični model // Liver Intern. - 2007. - Vol. 10. – P. 434–439.

7. Kiseleva T., Brenner D.A. Uloga zvjezdastih stanica jetre u fibrogenezi i preokretu fibroze // J. Gastroenterol. Hepatol. - 2007. - Vol. 22.–str.S73–S78.

8. Ryder S.D. Progresija fibroze jetre kod pacijenata sa hepatitisom C: prospektivna ponovljena studija biopsije jetre // Gut. - 2004. - Vol. 53. – P. 451–455.

9. Schuppan D., Afdhal N.H. Ciroza jetre // Lancet. - 2008. - Vol. 371. - P. 838-851.

10. Senoo H. Struktura i funkcija zvjezdanih stanica jetre // Med. elektron. microsc. - 2004. - Vol. 37. – str. 3–15.

Zvezdaste ćelije jetre (lipociti, Ito ćelije, ćelije jetre koje akumuliraju masnoću) su lokalizovane u diseovim prostorima između hepatocita i endotelne obloge sinusoida i igraju vodeću ulogu u regulaciji retinoidne homeostaze, deponujući do 80% vitamina A. . Disseov prostor je područje najveće funkcionalne odgovornosti, pružajući transsinusoidnu razmjenu. Koristeći eksperimentalne modele iu ćelijskoj kulturi, pokazano je da se zvjezdane stanice jetre diferenciraju u velike citoplazmatske lipidne kapljice koje sadrže vitamin A; ovaj fenotip se tumači kao "mirovanje".

Sve veći značaj pridaje se ulozi zvezdastih ćelija u nastanku fibroze i ciroze jetre. Nakon primanja fibrogenih podražaja, "odmarajuće" zvjezdane stanice se "transdiferenciraju", stičući fenotip sličan miofibroblastu i počinju proizvoditi kolagen, proteoglikane i druge komponente ekstracelularnog matriksa. Fibroza na nivou centralnih vena, sinusoida ili portalnih sudova ograničava normalnu hemodinamiku jetre, što dovodi do smanjenja metabolički efikasnog parenhima, dalje - portalne hipertenzije i portosistemskog ranžiranja. Akumulacija vezivnog tkiva u Disseovim prostorima remeti normalan metabolički promet između krvi i hepatocita ometajući klirens cirkulirajućih makromolekula, mijenjajući međustanične interakcije i dovodeći do disfunkcije ćelija jetre.

Postoje oprečna mišljenja o tome da li se aktivirane zvjezdane ćelije mogu vratiti u fenotip mirovanja. Dobiveni su dokazi da fibrogene zvjezdane stanice jetre mogu djelomično izravnati proces aktivacije, na primjer, kada su izložene retinoidima ili kada su u interakciji sa komponentama ekstracelularnog matriksa, uključujući fibrilarni kolagen tipa I ili komponente bazalne membrane. Rješenje ovog pitanja leži u osnovi problema reverzibilnosti fibroze i razvoja terapijskih pristupa liječenju ciroze jetre.

Svrha studije- sprovesti sveobuhvatno istraživanje strukturnih i funkcionalnih karakteristika zvezdastih ćelija jetre u dinamici fibroznih promena u modelu hronične HCV infekcije.

Materijal i metode istraživanja

Provedeno je kompleksno svjetlosno-optičko, elektronsko-mikroskopsko i morfometrijsko ispitivanje uzoraka biopsije jetre kod kronične HCV infekcije u različitim fazama fibroznih promjena (100 uzoraka podijeljenih u 4 jednake grupe prema težini fibroze). Važno je napomenuti da se zvjezdane ćelije koje sadrže lipide najbolje vizualiziraju na polutankim rezovima, fibrogene zvjezdane stanice - samo na ultra tankim rezovima ili pomoću imunohistohemijskog snimanja.

Uzorci jetre su fiksirani u 4% rastvoru paraformaldehida ohlađenom na 4°C, pripremljenom u Millonigovom fosfatnom puferu (pH 7,2-7,4); parafinski rezovi su bojeni hematoksilinom i eozinom u kombinaciji sa Perlsovom reakcijom, prema van Giesonu uz dodatno bojenje elastičnih vlakana Weigertovim resorcinol fuksinom, te je izvedena PAS reakcija. Polutanki rezovi su obojeni Schiffovim reagensom i azurom II. Istraživanje je sprovedeno na univerzalnom mikroskopu Leica DM 4000B (Nemačka). Mikrofotografije su snimljene digitalnom kamerom Leica DFC 320 i softverom Leica QWin. Ultratanki isječci obojeni uranil acetatom i olovnim citratom ispitivani su na JEM 1010 elektronskom mikroskopu pri ubrzavajućem naponu od 80 kW.

Stadij fibroze jetre određivan je na skali od 4 stepena, u rasponu od portalne fibroze (stadijum I) do ciroze sa formiranjem porto-centralnih vaskularizovanih septa i nodularnom transformacijom parenhima. Zvjezdaste ćelije jetre i drugi ćelijski elementi koji proizvode matriks otkriveni su u dinamici fibroze ekspresijom α-aktina glatkih mišića.

Ekspresija α-aktina glatkih mišića u ćelijama jetre koje proizvode matriks testirana je metodom indirektne imunoperoksidaze u dva koraka sa negativnom kontrolom streptavidin-biotin sistema za snimanje za produkte reakcije. Primarna korištena antitijela bila su mišja monoklonska antitijela na α-aktin glatkih mišića (NovoCastra Lab. Ltd, UK) razrijeđena 1:25; kao sekundarna antitijela - univerzalna biotinilirana antitijela. Produkti imunohistohemijske reakcije vizualizirani su diaminobenzidinom, a zatim su rezovi obojeni Mayerovim hematoksilinom. Gustoća zvezdastih ćelija koje sadrže lipide procenjena je na polutankim presecima u jedinici vidnog polja od 38.000 µm2. Za statističku obradu podataka korišten je Studentov t-test; razlike u upoređenim parametrima smatrane su značajnim ako je vjerovatnoća greške P manja od 0,05.

Rezultati istraživanja i diskusija

Uz minimalne fibrozne promjene u jetri bolesnika s kroničnim hepatitisom C, u pravilu se nalazi dovoljno veliki broj zvjezdastih stanica, koje su jasno vidljive samo na polutankim i ultratankim presjecima i diferenciraju se u Disseovim prostorima. prisustvom velikih kapi lipida u citoplazmi. Transformacija zvjezdastih stanica iz "mirujućih", koje sadrže retinoide, u fibrogene je praćena postupnim smanjenjem broja lipidnih kapljica. S tim u vezi, pravi broj zvjezdastih ćelija može se odrediti korištenjem sveobuhvatne elektronske mikroskopske i imunohistokemijske studije.

U početnim fazama fibroze (0, I) kod kroničnog hepatitisa C, prilikom proučavanja polutankih presjeka, populacija zvjezdastih stanica jetre odlikovala se izraženim polimorfizmom - veličina, oblik, broj lipidnih kapi i njihova tinktorijalna svojstva oštro su varirali : razlike u osmiofilnosti materijala koji sadrži lipide u različitim stanicama. Gustoća zvjezdanih ćelija jetre, vizualizirana u preparatima prisustvom citoplazmatskih lipidnih kapljica, iznosila je 5,01 ± 0,18 po jedinici vidnog polja.

Osobine ultrastrukture zvjezdastih stanica povezane su s heterogenošću elektronske gustoće kapljica lipida ne samo unutar iste ćelije, već i između različitih lipocita: osmiofilniji rubni rub isticao se na pozadini lipidnog supstrata prozirnog elektrona; osim toga, jezgra su oštro polimorfna, a dužina citoplazmatskih procesa varira. Među ultrastrukturnim karakteristikama zvezdastih ćelija koje sadrže lipide, uz prisustvo lipidnih kapljica, može se uočiti vrlo mala količina citoplazmatskog matriksa, siromašna membranskim organelama, uključujući mitohondrije, pa se, očigledno, ovaj fenotip lipocita naziva " mirovanje" ili "pasivno".

U fazama fibroze II i III, ultrastruktura većine zvezdastih ćelija dobija takozvani mešoviti ili prelazni fenotip - istovremeno prisustvo morfoloških karakteristika ćelija koje sadrže lipide i ćelija sličnih fibroblastima. U takvim lipocitima, jezgre su imale duboke invaginacije nukleoleme, veće jezgre i povećan volumen citoplazme koja je zadržavala lipidne kapljice. Istovremeno se naglo povećao broj mitohondrija, slobodnih ribozoma, polisoma i tubula granularnog citoplazmatskog retikuluma. U pravilu je postojao membranski kontakt lipidnih kapljica i mitohondrija, što ukazuje na "iskorišćenje" lipida. U mnogim ćelijama, razgradnja lipidnih kapljica je izvršena formiranjem autofagosoma, koji se zatim eliminišu egzocitozom. U nekim slučajevima zabilježena je proliferacija zvjezdastih stanica mješovitog fenotipa.

Zvjezdane stanice koje proizvode matriks, najbrojnije u fazi ciroze jetre, karakterizirane su potpunim odsustvom lipidnih granula, oblikom nalik na fibroblast, razvijenim odjeljenjem za sintezu proteina i formiranjem kontraktilnih fibrilarnih struktura u citoplazmi; pericelularno u Disseovim prostorima lokalizirani su brojni snopovi kolagenih vlakana sa specifičnom poprečnom prugom.

Općenito, tijekom progresije kroničnog hepatitisa C, praćenog intralobularnom perisinusoidnom fibrogenezom, pojavili su se morfološki znaci aktivacije zvjezdastih stanica jetre, njihova transformacija iz takozvanih „pasivnih“, akumulirajućih vitamin A, u fibrogene i proliferirajuće stanice.

U fazi transformacije u cirozu jetre, došlo je do značajnog smanjenja numeričke gustine zvezdastih ćelija koje sadrže lipide, što ukazuje na njihovu fibrogenu transformaciju. Međutim, u slučaju formirane ciroze jetre, u izolovanim slučajevima, bilo je područja parenhima jetre sa perisinusoidnim zvjezdastim stanicama koje sadrže lipide. Osim toga, u jednom uzorku pronađeni su brojni lipociti u periportalnom fibroznom tkivu, što vjerovatno ukazuje na važnu ulogu zvjezdastih ćelija u metabolizmu retinoida u organizmu, čak iu stadijumu ciroze organa. Osim toga, čini se da zvjezdane stanice imaju i niz drugih funkcija, nalaze se iu ekstrahepatičnim organima kao što su gušterača, pluća, bubrezi i crijeva, a postoji mišljenje da jetrene i ekstrahepatične zvjezdane stanice čine diseminirani zvjezdasti ćelijski sistem. tijelo, slično APUD sistemu. Na primjer, unatoč povezanosti fibrogenih zvjezdanih stanica s cirozom jetre, njihova aktivacija može imati korisnu ulogu u slučajevima akutne ozljede, jer je rezultat odgovarajući stromalni krug za regeneraciju parenhimskih stanica.

Ozbiljnost perihepatocelularne fibroze kod hronične HCV infekcije, prema morfometrijskoj analizi, imala je značajnu inverznu korelaciju sa numeričkom gustinom zvezdastih ćelija koje sadrže lipide - u stadijumu fibroze III i sa cirozom organa iznosila je 0,20 ± 0,03 po vidnom polju. jedinica, što je značajno manje (str< 0,05), чем на стадиях фиброза 0 - I (5,01 ± 0,18) и II (2,02 ± 0,04).

Fibrogenu aktivnost ćelija jetre koje proizvode matriks testirali smo pomoću imunohistohemijske studije o ekspresiji glatkih mišića alfa-aktina. Produkti imunohistohemijskih reakcija različitog intenziteta pronađeni su u citoplazmi aktiviranih zvezdastih ćelija lokalizovanih unutar jetrenih lobula. Posebno značajna ekspresija α-aktina glatkih mišića zabilježena je u citoplazmi fibroblasta i miofibroblasta portalnih zona, ćelijama glatkih mišića krvnih žila i miofibroblastima oko centralnih vena.

Većina podataka o ćelijskim mehanizmima fibrogeneze dolazi iz studija provedenih na zvjezdanim stanicama jetre, međutim, jasno je da različite stanice koje proizvode matriks (svaka sa specifičnom lokalizacijom, imunohistohemijskim i ultrastrukturnim fenotipom) doprinose razvoju fibroze jetre. Uključuju fibroblaste i miofibroblaste portalnih trakta, vaskularne glatke mišićne ćelije i miofibroblaste oko centralnih vena, koji se aktiviraju u uslovima hroničnog oštećenja jetre.

Zaključak

Dokazana je uloga zvjezdastih stanica jetre u nastanku fibroze organa kod kroničnog hepatitisa C. Sa progresijom fibroze značajno se smanjuje gustina broja zvijezdastih stanica koje sadrže lipide, dok dio populacije zadržava tzv. "fenotip za metaboličku funkciju. Zvezdane ćelije jetre slične miofibroblastima u stanju fibrogene aktivacije karakterišu sledeće strukturne i funkcionalne karakteristike: smanjenje broja i naknadni nestanak lipidnih kapljica, hiperplazija granularnog citoplazmatskog retikuluma i mitohondrija, fokalna proliferacija, imunohistohemijska ekspresija karakteristika sličnih fibroblastima, uključujući α-aktin glatkih mišića i formiranje pericelularnih kolagenskih fibrila u Disseovim prostorima.

Dakle, zvijezdaste stanice jetre nisu statična, već dinamična populacija koja je direktno uključena u remodeliranje intralobularnog perihepatocelularnog matriksa.

Recenzenti:

Vavilin V.A., doktor medicinskih nauka, profesor, dr. Laboratorija za metabolizam lekova, Istraživački institut za molekularnu biologiju i biofiziku, Sibirski ogranak Ruske akademije medicinskih nauka, Novosibirsk;

Kliver E.E., doktor medicinskih nauka, vodeći istraživač, Laboratorija za patomorfologiju i elektronsku mikroskopiju, Novosibirski istraživački institut za patologiju cirkulacije nazvan po akademiku E.N. Meshalkin iz Ministarstva zdravlja i socijalnog razvoja Ruske Federacije, Novosibirsk.

Rad je primljen u uredništvo 15. avgusta 2011. godine.

Bibliografska veza

Struktura endotelne ćelije, Kupfferove i Ito ćelije, razmotrićemo primjer dvije figure.

Prikazana je slika desno od teksta sinusoidnih kapilara (SC) jetre- intralobularne sinusoidne kapilare, koje se povećavaju od ulaznih venula do centralne vene. Sinusoidne kapilare jetre čine anastomotsku mrežu između jetrenih lamina. Oblogu sinusoidnih kapilara čine endotelne ćelije i Kupfferove ćelije.

Slika lijevo od teksta prikazuje ploču jetre (LP) i dvije sinusoidnih kapilara (SCs) jetre izrezane okomito i vodoravno kako bi se pokazale Ito perisinusoidne ćelije (CI). Na slici su prikazani i presečeni žučni kanali (LC).

Procesi Kupfferovih ćelija prolaze bez ikakvih spojnih uređaja između endotelnih ćelija i često prelaze lumen sinusoida. Kupfferove ćelije sadrže ovalno jezgro, mnogo mitohondrija, dobro razvijen Golgijev kompleks, kratke cisterne granularnog endoplazmatskog retikuluma, mnogo lizozoma (L), rezidualna tijela i rijetke prstenaste ploče. Kupfferove ćelije također sadrže velike fagolizozome (PL), koji često sadrže zastarjele eritrocite i strane tvari. Mogu se otkriti i inkluzije hemosiderina ili gvožđa, posebno pri supravitalnom bojenju.

Na površini Kupferovih ćelija vidljive su nepravilne spljoštene citoplazmatske nabore zvane lamelipodije (LP) - lamelarne stabljike, kao i procesi zvani filopodije (F) i mikroresice (MV) prekrivene glikokaliksom. Plazmalema formira vermiformna tijela (CT) sa centralno smještenom gustom linijom. Ove strukture mogu predstavljati kondenzovani glikokaliks.

Kupfferove ćelije- To su makrofagi, koji vrlo vjerovatno čine nezavisan rod ćelija. Obično potiču iz drugih Kupfferovih ćelija zbog mitotičke diobe potonje, ali također mogu poticati iz koštane srži. Neki autori smatraju da se radi o aktiviranim endotelnim ćelijama.

Povremeno, slučajno autonomno nervno vlakno (NF) prolazi kroz Disseov prostor. U nekim slučajevima, vlakna imaju kontakt sa hepatocitima. Rubovi hepatocita su ograničeni interhepatocitnim udubljenjima (MU) prošaranim mikroresicama.

Poklopac grana sinusoidnih kapilara jetre a u nekim slučajevima prolaze kroz jetrene lamine, dolazeći u kontakt sa susjednim jetrenim sinusoidima. Procesi nisu konstantni, razgranati i tanki; mogu biti i spljoštene. Akumulirajući grupe lipidnih kapi, one se izdužuju i poprimaju izgled kista grožđa.

Smatra se da je perisinusoidna Ito ćelije su slabo diferencirane mezenhimske ćelije koje se mogu smatrati hematopoetskim matičnim ćelijama, jer se pod patološkim uslovima mogu transformisati u masne ćelije, aktivne krvne matične ćelije ili fibroblaste.

U normalnim uslovima, Ito ćelije su uključene u akumulaciju masti i vitamina A, kao iu proizvodnju intralobularnih retikularnih i kolagenih vlakana (KB).

zvezdaste ćelije

Vrh - Šematski prikaz Ito ćelije (HSC) u blizini najbližih hepatocita (PC), ispod sinusoidnih epitelnih ćelija jetre (EC). S - sinusoida jetre; KC - Kupferova ćelija. Dolje lijevo - Ito ćelije u kulturi pod svjetlosnim mikroskopom. Dolje desno - Elektronska mikroskopija otkriva brojne masne vakuole (L) Ito ćelija (HSC) koje pohranjuju retinoide.

Ito ćelije(sinonimi: zvezdasta ćelija jetre, ćelija za skladištenje masti, lipocita, engleski Hepatična zvezdasta ćelija, HSC, Ito ćelija, Ito ćelija ) - periciti sadržani u perisinusoidalnom prostoru jetrenog lobula, sposobni da funkcionišu u dva različita stanja - smiren i aktiviran. Aktivirane Ito ćelije igraju važnu ulogu u fibrogenezi - formiranju ožiljnog tkiva u oštećenju jetre.

U intaktnoj jetri nalaze se zvijezdaste stanice mirno stanje. U tom stanju, ćelije imaju nekoliko izraslina koje okružuju sinusoidnu kapilaru. Još jedna prepoznatljiva karakteristika ćelija je prisustvo u njihovoj citoplazmi rezervi vitamina A (retinoida) u obliku masnih kapljica. Mirne Ito ćelije čine 5-8% svih ćelija jetre.

Izrasline Ito ćelija dijele se u dvije vrste: perisinusoidalni(subendotelni) i interhepatocelularni. Prvi napuštaju tijelo ćelije i protežu se duž površine sinusne kapilare, prekrivajući je tankim granama nalik prstima. Perisinusoidni izrasline prekrivene su kratkim resicama i imaju karakteristične duge mikroizbočine koje se protežu i dalje duž površine kapilarne endotelne cijevi. Interhepatocelularne izrasline, nakon što su savladale ploču hepatocita i dosegnule susjednu sinusoidu, dijele se na nekoliko perisinusoidnih izraslina. Dakle, Ito ćelija u prosjeku pokriva nešto više od dvije susjedne sinusoide.

Kada je jetra oštećena, Ito ćelije postaju aktivirano stanje. Aktivirani fenotip karakterizira proliferacija, kemotaksija, kontraktilnost, gubitak zaliha retinoida i proizvodnja stanica sličnih miofibroblastima. Aktivirane zvezdaste ćelije jetre takođe pokazuju povećane nivoe novih gena kao što su α-SMA, hemokini i citokini. Aktivacija ukazuje na početak rane faze fibrogeneze i prethodi povećanom stvaranju ECM proteina. Završnu fazu zacjeljivanja jetre karakterizira povećana apoptoza aktiviranih Ito stanica, zbog čega je njihov broj naglo smanjen.

Bojenje zlatnim hloridom koristi se za vizualizaciju Ito ćelija pod mikroskopom. Takođe je utvrđeno da je pouzdan marker za diferencijaciju ovih ćelija od drugih miofibroblasta njihova ekspresija proteina reelin.

Priča

Linkovi

• Young-O Queon, Zachary D. Goodman, Jules L. Dienstag, Eugene R. Schiff, Nathaniel A. Brown, Elmar Burkhardt, Robert Skunkhoven, David A. Brenner, Michael W. Fried (2001.) Smanjena fibrogeneza: Imunohistohemijska studija Uparena biopsija ćelija jetre nakon terapije lamivudinom u bolesnika s kroničnim hepatitisom B. Journal of Haepothology 35; 749-755. - prevod članka u časopisu "Infekcije i antimikrobna terapija", sveska 04/N 3/2002, na web stranici Consilium-Medicum.
• Popper H: Raspodjela vitamina A u tkivu otkrivena fluorescentnom mikroskopijom. Physiol Rev 1944, 24:205-224.

Bilješke

Wikimedia fondacija. 2010 .

Pogledajte šta su "zvjezdane ćelije" u drugim rječnicima:

Ćelije - nabavite radni kupon za popust na Akademici za Galeriju kozmetike ili profitabilne ćelije za kupovinu uz besplatnu dostavu na akciji u Galeriji kozmetike

Iznad je šematski prikaz Ito ćelije (HSC) pored obližnjih hepatocita (PC), ispod sinusoidnih epitelnih ćelija jetre (EC). S sinusoidi jetre; KC Kupffer ćelija. Dolje lijevo Ito ćelije u kulturi pod svjetlosnim mikroskopom ... Wikipedia

NERVNE CELIJE- NERVNE ĆELIJE, glavni elementi nervnog tkiva. Otvoren od N. do Ehrenberga i prvi opisao 1833. godine. Detaljniji podaci o N. do. sa naznakom njihovog oblika i postojanjem aksijalnog cilindričnog procesa, kao i ... ... Velika medicinska enciklopedija

Veliki neuroni malog korteksa (vidi mali mozak) (M), čiji se aksoni protežu izvan njegovih granica; opisao Ya. E. Purkin 1837. godine. Preko P. do. ostvaruju se komandni efekti korteksa M na njemu podređene motoričke centre (jezgra M i vestibularna jezgra). U… … Velika sovjetska enciklopedija

Ili Gephyrei, klasa podfila Vermidea ili Vermidea, vrsta crva ili Vermes. Životinje koje pripadaju ovoj klasi isključivo su morski oblici koji žive u mulju i pijesku toplih i hladnih mora. Klasu zvezdastog Ch. je ustanovio Katrfage ... ...

Ne brkati sa neutronom. Piramidalne neuronske ćelije u moždanoj kori miša Neuron (nervna ćelija) je strukturna i funkcionalna jedinica nervnog sistema. Ova ćelija ima složenu strukturu i visoko je specijalizovana za strukturu ... ... Wikipedia

Ovaj naziv se primjenjuje i na određene pigmentne ćelije i na dijelove stanica (i životinjskih i biljnih) koji sadrže pigment. Češće se X. nalaze u biljkama (vidi prethodni članak N. Gaidukova), ali su opisani i u protozoama ... Enciklopedijski rječnik F.A. Brockhaus i I.A. Efron

- (cellulae flammeae), ćelije sa snopom cilija i dugim nastavkom, zatvarajući proksimalni dio tubula protonefridija. Centar, dio „P. do., koji ima brojne zvjezdasti procesi, prelazi u šupljinu, gomila dugih cilija spušta se u rutu ... ...

Endoteliociti u obliku zvijezde (reticuloendoteliocyti stellatum), ćelije retikulo endotelnog sistema, smještene sa unutrašnje strane. površine kapilarnih sudova (sinusoida) jetre kod vodozemaca, gmizavaca, ptica i sisara. Studirao K. ... ... Biološki enciklopedijski rječnik

Plamene ćelije (cellulae flammeae), ćelije sa snopom cilija i dugim nastavkom, zatvarajući proksimalni deo tubula protonefridija. Centar. dio P. do., koji ima brojne. zvezdasti procesi, prelazi u šupljinu, snop se spušta u rutu ... ... Biološki enciklopedijski rječnik

- (S. Golgi) zvezdasti neuroni granularnog sloja kore malog mozga... Veliki medicinski rječnik

Glavni izvor endotoksina u tijeluje gram-negativna crijevna flora. Trenutno nema sumnje da je jetra glavni organ čišćenje endotoksina. Endotoksin prvo preuzima ćelija Kami Kupffer (KK), u interakciji sa membranskim receptorom CD 14. Može se vezati za receptor kao sebe lipopolisaharida(LPS), i njegov kompleks sa proteinom koji vezuje lipid A plazma grudvica. Interakcija LPS-a s makrofagima jetre izaziva niz reakcija koje se zasnivaju na proizvodnji i oslobađanju jona citokina i drugih biološki aktivnih posrednici.

Postoje mnoge publikacije o ulozi makroajetre (LK) u preuzimanju i uklanjanju bakterijskog LPS-a, međutim, interakcija endotela s drugim mezenhimalnićelije, posebno perisinusoidalni Ito ćelijama, praktično nije proučavan.

METODA ISTRAŽIVANJA

Bijeli mužjaci pacova težine 200 g ubrizgani su intraperitonealno u 1 ml sterilne fiziološke otopine visoko prečišćen liofilizirani LPS E. coli soj 0111 u dozi od 0,5,2,5, 10, 25 i 50 mg/kg. U periodima od 0,5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 h i 1 sedmicu, unutrašnji organi su uklonjeni pod anestezijom i stavljeni u puferirani 10% formalin. Materijal je ugrađen u parafinske blokove. Presjeci debljine 5 µm su obojeni imunohistohemijskistreptavidin-biotin metodom antitela na desmin, α - glatko - mišićni aktin (A-GMA) i nuklearni antigenćelije koje se dobro razmnožavaju ( PCNA, " Dako"). Desmin je korišten kao marker perisinusoidalniIto ćelije, A-GMA - as marker ve miofibroblasti, PCNA - proliferirajuće ćelije. Za otkrivanje endotoksina u ćelijama jetre, pročišćeni anti-Re-glikolipidantitela (Institut za opštu i kliničku patologiju KDO, Moskva).

REZULTATI ISTRAŽIVANJA

Pri dozama od 25 mg/kg i više, uočen je smrtni šok 6 sati nakon primjene LPS-a. Akutna izloženost LPS-u na tkivu jetre izazvala je aktivaciju Ito ćelija, što se manifestovalo povećanjem njihovog broja. Broj desminpozitivanćelije su se povećale od 6 h nakon injekcije LPS-a i dostigle maksimum ma do 48-72 h (sl. 1, a, b).

Rice. 1. Sekcije jetre pacova sy, obrađeno LSAB -ja- chennymiantitela na des moj(grupa α - glatko cervikalni aktin (c), x400 (a, b) x200 (c).

a - prije uvođenja endotoksinana, samac desminpozitivanIto ćelije u periportalnoj zoni; b- 72 hnakon primjene endotoksina na: brojni desminpozitivan Ito ćelije; in- 120 sati nakon uvođenja en dotoksin: α - glatke mišiće ny aktin je prisutan samoco u glatkim mišićnim ćelijama kah posuda.

U 1 broj sedmice desminpozitivanćelije su se smanjile, alibio veći od referentnih vrednosti. At U ovom slučaju nismo uočili pojavu A-GMA-pozitivanćelije u sinusu dah jetra. interno pozitivno kontrolu kada se boje antitelima na A-GMA služi za identifikaciju ćelija glatkih mišićavenske žile portalnih trakta koje sadrže A-GMA (Sl. 1, in). Stoga, uprkos povećanju broja Ito ćelija, jednom Uticaj LPS-a ne dovodi do transformacije ( transdiferencijacija) ih u miofibroblaste.

Rice. 2. Sekcije jetrepacovi, tretirani LSAB -obeležena antitela na PCNA. a - prije uvođenja en dotoksin: pojedinačniproliferirajućih gena patociti, x200; b - 72 sata nakon uvođenja endotoksina: brojni proliferirajući hepatociti, x400.

Povećanje količine desminpozitivanćelije su započele unutar zone portala. Od 6 h do 24 h nakon primjene LPS-a perisinusoidalnićelije su nađene samo oko portalnih trakta, tj. u 1. aci zoni noosa. U vremenu od 48-72 sata, kada je uočen makmaksimalna količina desminpozitivan ljepilo struje, pojavile su se i u drugim zonama acinusa; ipak, većina Ito ćelija je još uvijek bila periportalno.

Možda je to zbog činjenice da periportalnolocirani CC su prvi koji snimaju endotoksin koji dolazi iz crijeva kroz portalnu venu ili iz sistemske cirkulacije. Ak tivirani QC proizvodi širok raspon citokini, za koje se smatra da pokreću aktivaciju Ito ćelija i transdiferencijacija ih u miofibroblaste. Očigledno, zbog toga Ito ćelije koje se nalaze u blizini aktiviranih makrofaga jetre (u 1. zoni acinusa) prve reaguju na oslobađanje citokina. Međutim, nismo ih uočili u našoj studiji. transdiferencijacija in miofibroblasti, a to sugerira da citokini koje luče CK i hepatociti mogu poslužiti kao faktor koji podržava proces koji je već započeo transdiferencijacija, ali vjerovatno nisu u stanju da ga pokrenu jednom izloženošću jetre LPS-u.

Uočeno je i povećanje proliferativne aktivnosti ćelija uglavnom u 1. zoni acinusa. To vjerovatno znači da su svi (ili skoro svi) procesi usmjereni na van o- i parakrina regulacija međućelijskih interakcija, odvijaju se u periportalnim zonama. Uočeno je povećanje broja proliferirajućih ćelija od 24 sata nakon primjene LPS; broj pozitivnih ćelija se povećavao do 72 h (maksimalna proliferativna aktivnost, sl. 2, a, b). Proliferirali su i hepatociti i sinusoidne ćelije. Međutim, bojanje PCNA ne daje sposobnost da se identifikuje tip prolifera pokretanja sinusoidnih ćelija. Prema literaturi, djelovanje endotoksina dovodi do povećanja broj QC. Misle da se radi o nastaje kako zbog proliferacije jetrenih makrofaga, tako i zbog migracije monocita iz drugih organa. Citokini koje oslobađa CK mogu povećati proliferativni kapacitet Ito ćelija. Stoga je logično pretpostaviti da proliferirajuće ćelije predstavljaju perisinusoidalni Ito ćelije. Povećanje njihovog broja registrovano kod nas je očigledno neophodno za povećanje sinteze faktora rasta i obnavljanje ekstracelularnog matriksa u uslovima oštećenja. Ovo može biti jedna od karika u kompenzatorno-regenerativnim reakcijama jetre, budući da su Ito ćelije glavni izvor komponenti ekstracelularnog matriksa, faktora matičnih ćelija i faktora rasta hepatocita, koji su uključeni u popravku i diferencijaciju. rovka epitelnih ćelija jetre. Odsutan ista transformacija Ito ćelija u miofibroblasti ukazuje da jedna epizoda endotoksinske agresije nije dovoljna za razvoj fibroze jetre.

Dakle, akutna izloženost endotoku sina uzrokuje povećanje broja desminpozitivan Ito ćelije, što je indirektan znak oštećenja jetre. Količina perisinusoidalnićelija se povećava, očigledno kao rezultat njihove proliferacije. Jedna epizoda endotoksinske agresije uzrokuje preokret moja aktivacija perisinusoidalni Ito ćelije i ne dovodi do transdiferencijacija u miofibroblaste. S tim u vezi, može se pretpostaviti da u mehanizmima aktivacije i transdiferencijacija U Ito ćelijama nisu uključeni samo endotoksin i citokini, već i neki drugi faktori međustaničnih interakcija.

LITERATURA

1. Mayansky D.N., Wisse E., Decker K. // Nove granice hepatologija. Novosibirsk, 1992.

2. Salakhov I.M., Ipatov A.I., Konev Yu.V., Yakovlev M.Yu. // Uspjesi moderni, biol. 1998. Tom 118, br. 1. S. 33-49.

3. Yakovlev M.Yu. // Kazan . m jedinica časopis 1988. br. 5. S. 353-358.

4. Freudenberg N., Piotraschke J., Galanos C. et al. // Virchows Arch. [b]. 1992. Vol. 61.P. 343-349.

5. Gressner A. M. // Hepatogastronerologija. 1996 Vol. 43. P. 92-103.

6. Schmidt C, Bladt F., Goedecke S. et al. // Priroda. 1995 Vol. 373, br. 6516. P. 699-702.

7. wisse E., Braet F., Luo D. et al. // Toxicol. Pathol. 1996. Vol. 24, br. 1. str. 100-111.