Kako uzeti sputum za analizu. Uzimanje sputuma za bakteriološki pregled Opšta klinička analiza sputuma Svrha studije
Bakteriološki pregled sputuma može otkriti uzročnike plućnih bolesti. Gnojna, krvava gruda sputuma utrlja se između dva staklena stakalca. Osušeni razmazi se fiksiraju na vatri, zatim se jedan boji prema Gramu (vidi metodu bojenja po Gramu), a drugi prema Tsil-Nelsenu. Bojenje po Gramu vam omogućava da otkrijete gram-pozitivne mikrobe - kapsularni pneumokok (slika 17); gram-negativni - Friedlanderov kapsularni diplobacil (slika 18), Pfeifferov bacil (slika 19) itd. Mycobacterium tuberculosis se traži u razmazu obojenom po Tsil - Nelsenu. Na razmaz se stavlja komad filter papira jednake površine razmazu, na njega se sipa Zielov fuksin (1 g bazičnog fuksina se samlje u malter sa nekoliko kapi glicerina, zatim sa 10 ml 96% alkohola i sipa se u 90 ml 5% rastvora fenola) i zagreva na laganoj vatri dok se ne pojave pare. Papir se baci, bris se potapa u 5-10% rastvor (ili 3% rastvor u alkoholu) dok ne promeni boju, dobro opere vodom, boji se 20-30 sekundi. 0,5% rastvor metilen plavog i isprati vodom. Crvene mikobakterije su jasno vidljive (sa imerzionim sistemom) na plavoj pozadini preparata (Sl. 20). Ako se u razmazu ne nađe mycobacterium tuberculosis, pribjegavaju se metodi njihove akumulacije - flotaciji. 10-15 ml sputuma stavi se u bocu od 250 ml sa nagnutim ramenima, doda se dupli volumen 0,5% rastvora i mućka dok se sputum potpuno ne otopi. Dodati 100 ml destilovane vode i 1 ml (ksilola, benzina), mućkati 10-15 minuta, dodati vodu do vrata i ostaviti 1-2 sata. Kremasti sloj koji se formira na vrhu se odsisava pipetom sa sprejom i nanosi kap po kap na zagrijanu čašu, svaki put na prethodnu osušenu kap. Preparat je fiksiran i bojen prema Tsil - Nelsen. Ako je rezultat negativan, pribjegavaju se sjetvi sputuma (bakteriološki pregled) ili inokulaciji životinje (biološki pregled). Kulture sputuma se također koriste za određivanje osjetljivosti njegove flore na antibiotike.
Hemijska istraživanja. Reakcija sputuma na lakmus je u pravilu slabo alkalna, može postati kisela kada se sputum razgradi i kada se pomiješa želudačni sadržaj (kiselo eruktacija, gastrobronhijalna fistula). Protein u sputumu dolazi iz upalnog eksudata i razgradnje leukocita. Malo je (u tragovima) u mukoznom sputumu, puno (1-2%) u sputumu kod upale pluća, još više kod plućnog edema. Da bi se to odredilo, dupla količina 3% otopine octene kiseline se dodaje u sputum, snažno protrese, filtrira, a protein se u filtratu određuje jednom od uobičajenih metoda (vidi Urin). Trostruko razrjeđivanje se uzima u obzir.
Bakterioskopska, bakteriološka i biološka istraživanja. Proučavanje mikrobne flore sputuma neophodno je za pojašnjenje dijagnoze i odabir prave metode liječenja. Ovoj svrsi služe bakterioskopska, bakteriološka i biološka istraživanja. Bakterioskopski pregled postiže svoj cilj sa relativno visokim sadržajem mikroba u sputumu. Za pripremu preparata gnojna kvrga se prenosi na vanjsku trećinu stakalca, prekriva istim dijelom drugog stakalca i trlja između njih. Razmazi se ostave da se osuše, fiksiraju prolaskom kroz plamen plinskog plamenika tri puta i obojene, jedan po Gramu (vidi Gram metoda bojenja), drugi po Ziehl-Nelsenu (vidi Tuberkuloza, laboratorijske pretrage). Bojenje po Gramu otkriva gram-pozitivni kapsularni pneumokok, gram-negativni kapsularni pneumokok Friedlander, Pfeiferov bacil (štampa. Sl. 5, 6 i 8), stafilokok aureus, streptokok, Vincentov bacil, mikroskopski bacil, bacil u mački itd. obratite pažnju na broj pronađenih bakterija u vidnom polju (malo, umjereno, mnogo) i prevlast bilo koje vrste. Ziel-Nelsenova metoda boji mikrobe otporne na kiseline, uglavnom Mycobacterium tuberculosis. Mikobakterije ove boje su crvene i jasno su vidljive na plavoj pozadini (cvetn. sl. 1).
Nešto veći postotak Mycobacterium tuberculosis otkriva se pomoću fluorescentne mikroskopije (vidi). Svjetleće mikobakterije su jasno vidljive kada se bris sa suvim X40 objektivom sa XYu okularom. Razmazi se pripremaju i fiksiraju kao i obično, a zatim se sipaju 5-10 minuta. rastvor boje (auramin 1:1000, akridin narandžasta, mešavina auramina i rodamina), ispran vodom, obezbojen 5 minuta. hlorovodonični alkohol, ponovo ispran vodom i tretiran
rastvor kiselog fuksina (kiseli fuksin 1 g, octena kiselina 1 ml, destilovana voda 500 ml) ili metilen plavo, koji gase pozadinski sjaj. Lijek se promatra u ultraljubičastom svjetlu (cvjetn. sl. 2).
Kako bi olakšali potragu za Mycobacterium tuberculosis, pribjegavaju metodama akumulacije, od kojih se češće koristi metoda flotacije. 10-15 ml sputuma stavi se u erlenmajericu ili bocu sa nagnutim ramenima kapaciteta 250 ml, doda se jednaka zapremina 0,5% rastvora natrijum hidroksida i mešavina se mućka dok se ne homogenizuje. Dodati 50 ml destilovane vode i 1 ml toluena (ksilola, benzina), promućkati, ponovo dodati vodu do polovine flaše i mućkati 10-15 minuta, zatim dodati vodu do grla i ostaviti 1-2 sata. Kremasti sloj koji se formira na vrhu usisava se pipetom sa sprejom, nanosi se na zagrijano staklo, osuši, fiksira i boji prema Ziehl-Nelsenu.
Bakteriološko istraživanje se koristi za identifikaciju mikroba, određivanje njihove rezistencije na lijekove, virulencije itd. Sputum se inokulira na odgovarajuće hranljive podloge - guste (krvni agar) ili tečne (šećerna juha, Tarozzijeva podloga), Školjnikova polusintetička podloga; (cvetn. sl. 3 i 4). Mikrobi uzgojeni na odgovarajućim hranljivim podlogama identifikuju, određuju njihovu patogenost (u nekim slučajevima) i rezistenciju na lijekove, te preliminarno određuju otpornost na lijekove cjelokupne flore sputuma u cjelini. To se radi tako što se komadići sputuma, prethodno isprani fiziološkim rastvorom, inokuliraju na površinu krvnog agara u petrijevoj posudi. Za setvu se postavljaju standardni antibakterijski papirni diskovi. O osjetljivosti flore procjenjuje se veličina zone inhibicije rasta flore oko diska. Zatim se posebno vrši konačno određivanje rezistencije svake bakterijske vrste izolirane iz sputuma. Da bi se to postiglo, 18-satna bujonska kultura svake vrste bakterija (stafilokoki, streptokoki, Klebsiella, itd.) se zasijava travnjakom na Petrijevim posudama s krvnim agarom. Standardni papirni diskovi s antibioticima se postavljaju na travnjak, pritiskajući ih pincetom na površinu agara tako da cijelom površinom čvrsto dodiruju agar. Čaše se ostave na sobnoj temperaturi 1,5-2 sata; za to vrijeme postoji dovoljna difuzija lijeka iz diskova u okolne slojeve agara. Zatim se Petrijeve zdjelice stavljaju u termostat na t°37° na 18-24 sata. Stabilnost proučavanog soja se ocenjuje po zoni inhibicije rasta bakterija oko diskova. U nedostatku zone kašnjenja, soj se smatra otpornim. Ako se formira zona promjera 1,5-2 cm, soj se smatra slabo osjetljivim, a ako je zona veća od 2 cm, osjetljiv je na ovaj antibiotik.
Za kulture sputuma na Mycobacterium tuberculosis, vidi Tuberkuloza pluća, Test sputuma za Mycobacterium tuberculosis; za određivanje njihove osjetljivosti na antibiotike, vidi Tuberkuloza pluća, rezistencija mikobakterija na lijekove.
U biološkoj studiji sputuma, životinje su zaražene. Kao dijagnostička metoda, ova metoda je zamijenjena kulturnim metodama.
Cilj:
Diagnostic.
Indikacije:
Bolesti disajnih puteva i kardiovaskularne bolesti.
Oprema:
Prozirna staklena tegla sa širokim grlom od prozirnog stakla, pravac.
Sekvenciranje:
1. Objasnite pravila prikupljanja, dobijete saglasnost.
2. Ujutro operite zube i isperite usta prokuhanom vodom.
3. Iskašljajte i sakupite 3-5 ml sputuma u teglu, zatvorite poklopac.
4. Izdajte uputnicu.
5. Isporučiti u kliničku laboratoriju u roku od 2 sata.
Bilješka:
Da bi se odredila dnevna količina, sputum se sakuplja tokom dana u jednu veliku posudu i čuva na hladnom mestu.
Nije dozvoljeno kontaminirati limenku izvana.
Procijenjeno: konzistencija (viskozna, želatinasta, staklasta), boja (prozirna, gnojna, siva, krvava), ćelijski sastav (prisustvo leukocita, eritrocita, epitela, dodatnih inkluzija.
Sakupljanje sputuma za bakteriološki pregled:
Cilj:
Identifikacija uzročnika bolesti i određivanje njegove osjetljivosti na antibiotike.
Oprema:
Sterilna epruveta ili staklenka sa poklopcem (poručuje se u laboratorijskom rezervoaru), smer.
Sekvenciranje:
1. Objasniti svrhu i suštinu prikupljanja sputuma, dobiti saglasnost.
2. Ujutro na prazan želudac nakon toaleta usne šupljine i prije imenovanja a/b.
3. Prinesite epruvetu ili teglu ustima, otvorite je ne dodirujući ivice posuđa rukama i iskašljajte ispljuvak ustima i odmah zatvorite poklopac, poštujući sterilnost.
4. Analizu poslati u bakteriološku laboratoriju u roku od 2 sata u kontejneru posebnim transportom. Bilješka: sterilnost posuđa se održava 3 dana.
Sakupljanje sputuma za MBT (mycobacterium tuberculosis):
Cilj:
Diagnostic.
Postupak prikupljanja sputuma:
1. Objasniti suštinu i svrhu imenovanja, dobiti saglasnost.
2. Izdajte uputnicu.
3. Ujutro na prazan stomak nakon toaleta usne duplje, nakon nekoliko dubokih udisaja, iskašljajte ispljuvak u čistu, suvu teglu (15-20 ml), zatvorite poklopac. Ako ima malo sputuma, onda se može prikupiti u roku od 1-3 dana, čuvajući na hladnom mjestu.
4. Dostaviti analizu u kliničku laboratoriju.
Bilješka: Ako je za VC propisana kultura sputuma, tada se sputum sakuplja u sterilnu posudu 1 dan, čuva na hladnom mjestu i dostavlja u bakteriološku laboratoriju.
Sakupljanje sputuma za atipične ćelije:
Cilj:
Dijagnostika (dijagnoza, isključivanje onkopatologije).
Redoslijed prikupljanja:
1. Objasnite pacijentu pravila za prikupljanje sputuma.
2. Ujutro nakon upotrebe usne duplje sakupite sputum u čistu, suhu teglu.
3. Izdajte uputnicu.
4. Odmah dostaviti u citološku laboratoriju, jer abnormalne ćelije se brzo uništavaju.
Pravila za korištenje džepne pljuvačke:
Pljuvaonicu koriste pacijenti koji proizvode sputum.
Zabranjeno je:
Pljunuti ispljuvak na ulici, u zatvorenom prostoru, u maramici, ručniku;
Progutati sluz.
Pljuvaonica se dezinfikuje kako se puni, a najmanje jednom dnevno. Sa velikom količinom sputuma - nakon svake upotrebe.
Za dezinfekciju sputuma: sipajte 10% izbjeljivač u omjeru 1:1 60 minuta ili suvi izbjeljivač u količini od 200 g/l sputuma 60 minuta.
Kada se dodijeli ili se sumnja na VK- 10% izbjeljivač u trajanju od 240 minuta ili suho izbjeljivač u trajanju od 240 minuta u istim omjerima; 5% hloramin 240 min.
Nakon dezinfekcije, ispljuvak se odvodi u kanalizaciju, a posuđe u kojem je sputum dezinficirano se pere na uobičajen način, nakon čega slijedi dezinfekcija.
Dezinfekcija džepnih pljuvačica: ključanje u 2% rastvoru sode 15 minuta ili u 3% hloraminu 60 minuta.
Pregled sputuma uključuje određivanje fizičkih svojstava sputuma, njegovo mikroskopsko ispitivanje u nativnom razmazu i bakteriološko ispitivanje obojenih preparata.
Zbirka materijala
Sputum dobijen iskašljavanjem ujutro prije jela sakuplja se u čistu, suhu bocu. Prije pregleda pacijent treba oprati zube i dobro isprati usta vodom.
Fizička svojstva
Sputum se stavlja u Petrijevu posudu, ispituje se na svijetloj i tamnoj pozadini i opisuju se njegova svojstva. Količina sputuma dnevno za različite patološke procese može biti različita: na primjer, s bronhitisom - oskudna (5-10 ml), s apscesom pluća, bronhiektazijama - velika količina (do 200-300 ml).
Podjela na slojeve opaža se u slučajevima pražnjenja velikih šupljina u plućima, na primjer, apsces pluća. U tom slučaju sputum formira 3 sloja: donji sloj se sastoji od detritusa, gnoja, gornji sloj je tekući, ponekad se na njegovoj površini nalazi i treći sloj - pjenasti sloj. Takav sputum se naziva troslojni.
Karakter: priroda sputuma određuje sadržaj sluzi, gnoja, krvi, serozne tekućine, fibrina. Njegov karakter može biti sluzav, mukozno-hioidni, sluzavo-gnojno-krvav itd.
Boja: zavisi od prirode ispljuvka, od izdahnutih čestica koje mogu da obojaju sputum. Na primjer, žućkasta, zelenkasta boja ovisi o prisutnosti gnoja, "zahrđalog" sputuma - od razgradnje crvenih krvnih stanica, javlja se kod krupozne upale pluća. Krvni tragovi u sputumu ili crveni sputum mogu biti pomiješani s krvlju (tuberkuloza, bronhiektazije). Siva i crna boja daje sputum ugljenu.
Konzistencija: zavisi od sastava sputuma, tečnost - uglavnom od prisustva serozne tečnosti, lepljiva - u prisustvu sluzi, viskozna - fibrin.
Miris: Svježi sputum je obično bez mirisa. Neugodan miris svježe izlučenog sputuma obično se javlja kod apscesa pluća, kod gangrene pluća - truljenja.
mikroskopski pregled
Nativni preparati se pripremaju odabirom materijala sa različitih mesta sputuma, a za istraživanje se uzimaju i sve čestice koje se ističu bojom, oblikom i gustinom.
Odabir materijala vrši se metalnim štapićima koji se stavljaju na stakalce i prekrivaju pokrovnim stakalcem. Materijal se ne smije širiti preko pokrovnog stakala.
Leukociti: uvek se nalaze u sputumu, njihov broj zavisi od prirode sputuma.
Eozinofili: prepoznaju se u nativnom preparatu po tamnijoj boji i prisustvu jasne, ujednačene granularnosti u citoplazmi koja prelama svjetlost. Često se nalaze u velikim klasterima. Eozinofili se nalaze kod bronhijalne astme, drugih alergijskih stanja, helmintoze, ehinokoka pluća, neoplazmi, eozinofilnog infiltrata.
Eritrociti: imaju izgled žutih diskova. Pojedinačni eritrociti se mogu naći u bilo kojem sputumu, u velikom broju - u sputumu koji sadrži primjesu krvi: neoplazme pluća, tuberkuloza, infarkt pluća.
Ćelije skvamoznog epitela: ulaze u ispljuvak iz usne šupljine, nazofarinksa, ne tinjaju od velike dijagnostičke vrijednosti.
Cilindrični trepljasti epitel: oblaže mukoznu membranu larinksa, dušnika, bronhija. Nalazi se u velikim količinama kod akutnih katara gornjih disajnih puteva, bronhitisa, bronhijalne astme, neoplazmi pluća, pneumoskleroze itd.
Alveolarni makrofagi: velike ćelije različitih veličina, često okrugle, sa crno-smeđim inkluzijama u citoplazmi. Češći su u mukoznom sputumu sa malom količinom gnoja. Nalaze se u raznim patološkim procesima: upala pluća, bronhitis, profesionalna oboljenja pluća itd. Alveolarni makrofagi koji sadrže hemosiderin, stari naziv je "ćelije srčanih mana", imaju zlatnožute inkluzije u citoplazmi. Za njihovu identifikaciju koristi se reakcija na prusko plavo. Reakcioni tok: komadić sputuma se stavlja na staklo, dodaju se 2 kapi 5% hlorovodonične otopine KIOLOTE i 1-2 kapi 5% rastvor žute krvne soli. Promiješajte staklenom šipkom i prekrijte pokrovnim stakalcem. Hemosiderin koji leži intracelularno boji plavo ili plavo. Ove ćelije se nalaze u sputumu tokom kongestije u plućima, infarkta pluća.
Masna degeneracija ćelija (lipofagi, masne kuglice): češće zaobljene, njihova citoplazma je ispunjena masnoćom. Kada se preparatu doda Sudan III, kapi postaju narandžaste. Grupe takvih ćelija nalaze se u neoplazmama pluća, aktinomikozi, tuberkulozi itd.
Elastična vlakna: u sputumu izgledaju kao zgužvana sjajna vlakna. U pravilu se nalaze na pozadini leukocita i detritusa. Njihovo prisustvo ukazuje na propadanje plućnog tkiva. Nalaze se kod apscesa, tuberkuloze, neoplazmi pluća.
Koraljna vlakna: grube granaste formacije sa gomoljastim zadebljanjima zbog taloženja masnih kiselina i sapuna na vlaknima. Nalaze se u sputumu kod kavernozne tuberkuloze.
Kalcificirana elastična vlakna su grube formacije u obliku šipke impregnirane vapnenim solima. Nalaze se prilikom kolapsa petrificiranog žarišta, plućnog apscesa, neoplazme, element propadanja petrificiranog žarišta naziva se Ehrlichova tetrada: I) kalcificirana elastična vlakna; 2) soli amorfnog kreča; 3) kristali holesterola; 4) Mycobacterium tuberculosis.
Spirale Kurshma na_- tvorbe sluzi su zbijene, uvijene u spiralu. Središnji dio oštro lomi svjetlost i izgleda kao spirala, po periferiji slobodno ležeća sluz formira plašt. Formiraju se Curshmanove spirale sa bronhijalnim as tme.
Kristalne formacije: Charcot-Leiden kristali, izduženi sjajni dijamanti, mogu se naći u žućkastim komadićima sputuma koji sadrže veliki broj eozinofila. Njihovo stvaranje je povezano s razgradnjom eozinofila,
Kristali hematoidina: imaju oblik rombova i zlatnih iglica. Nastaju prilikom razgradnje hemoglobina tokom krvarenja, propadanja neoplazmi. U pripremi sputuma obično su vidljiva na pozadini detirita, elastična vlakna.
Kristali holesterola: bezbojni četvorouglovi sa odlomljenim stepenastim uglom, nalaze se prilikom raspadanja masnih degenerisanih ćelija, u šupljinama. Upoznajte se sa tuberkulozom, apscesom pluća, neoplazmama.
Dietrichovi čepovi: mala žućkasto-siva zrna s neugodnim mirisom, nalaze se u gnojnom sputumu. Mikroskopski to su detritus, bakterije, kristali masnih kiselina u obliku iglica i kapljica masti. Nastaje tokom stagnacije sputuma u šupljinama sa plućnim apscesom, bronhiektazijama.
Bakteriološka istraživanja
Test na mikobakterije tuberkuloze: Lijek se priprema od gnojnih čestica sputuma, osušenih
u vazduhu i fiksiran iznad plamena gorionika. Dyed by
Tsil-Nilson.
Metoda bojenja: Reagensi:
I) karbolični fuksin,
2) 2% alkoholni rastvor hlorovodonične kiseline,
3) vodeni rastvor 0,5% metilen plavog.
Napredak bojenja:
1. Na preparat se stavlja komad filter papira i sipa se rastvor karboličnog fuksina.
2. Lek se zagreva na plamenu gorionika dok se ne pojave pare, hladi i ponovo zagreva (tako 3 puta).
3. Uklonite filter papir iz ohlađenog stakla. Uklonite boju razmaza u hlorovodoničnom alkoholu dok boja potpuno ne nestane.
4. Opran vodom.
5. Završite pripremu sa metilen plavim 20-30 sekundi.
6. Isperite vodom i osušite na zraku. Mikroskopski sa sistemom za uranjanje. Mycobacterium tuberculosis ima crvene mrlje
svi ostali elementi sputuma i bakterija - u plavoj boji. Tuberkulozne mikobakterije imaju izgled tankih, blago zakrivljenih štapića sa zadebljanjima na krajevima ili u sredini.
Saprofiti otporni na kiseline također su obojeni u crveno kada su obojeni prema Ziehl-Nielsonu. Diferencijalna dijagnoza tuberkuloznih mikrobakterija i saprofita otpornih na kiseline provodi se metodama sjetve i infekcije životinja.
Ispitivanje sputuma može se obaviti i metodom flotacije. Potengerova metoda: napredak istraživanja:
1. Svježe izolovani sputum (ne više od 10-15 ml) stavlja se u bocu uskog grla, doda se dvostruka količina kaustične lužine, smjesa se snažno protrese (10-15 minuta).
2. Ulijte 1 ml ksilena (možete koristiti benzin, toluol) i oko 100 ml destilovane vode da razrijedite sputum. Ponovo mućkajte 10-15 minuta.
3. Dodajte destilovanu vodu do grla boce i ostavite da odstoji 10-50 minuta.
4. Dobijeni gornji sloj (bjelkasti) uklanja se kap po kap pipetom i nanosi na staklena stakla zagrijana na 60°. Svaka sljedeća kap se nanosi na osušenu prethodnu.
5. Preparat se fiksira i boji prema Ziehl-Nilsonu.
Test na druge bakterije:
Ostale bakterije koje se nalaze u sputumu, kao što su streptokoki, stafilokoki, diplobacili, itd., mogu se prepoznati samo kulturom. Bakteriološko ispitivanje preparata u ovim slučajevima ima samo približnu vrednost. Preparati se boje metilen plavim, fuksinom ili g okvir. Boja po Gramu: Reagensi: I) karbonski rastvor gentian violet-a,
2) Lugolovo rešenje,
3) alkohol 96°,
4) 40% rastvor karboličnog fuksina.
Napredak istraživanja:
1. Na fiksirani preparat se stavlja traka filter papira, sipa se rastvor gentian violet-a, boji se 1-2 minuta.
2. Papir se ukloni i lijek se sipa sa Lugolovim rastvorom 2 minute.
3. Lugolova otopina se ocijedi i lijek ispere u alkoholu dok ne posijedi.
4. Opran vodom i bojen 10-15 sekundi rastvorom magenta.
Bakteriološki pregled sputuma omogućava otkrivanje patogena različitih bolesti. Za dijagnozu je važno prisustvo mikobakterija tuberkuloze u sputumu. Sputum za rezervoar - istraživanje za setvu sakuplja se u sterilnu posudu (širokih grla). Posude izdaje rezervoar - laboratorija.
PAŽNJA!!!
Ako nema dovoljno sputuma, može se sakupljati do 3 dana, čuvajući ga na hladnom mestu.
Sputum na rezervoaru - sjetva kod pacijenata sa tuberkulozom radi pouzdanosti rezultata prikuplja se u roku od 3 dana, u različite sterilne posude (3 tegle).
Ako je potrebno propisati antibiotike, ispituje se sputum na osjetljivost na njih. Da bi to učinio, pacijent ujutro, nakon ispiranja usta, nekoliko puta (2-3 puta) kašlje i ispljune ispljuvak u sterilnu Petrijevu posudu, koja se odmah šalje u laboratorij.
PAŽNJA!!!
Dajte jasne upute pacijentu o korištenju sterilnog pribora za prikupljanje sputuma za analizu:
a) ne dirajte rukama rubove posuđa
b) ne dirajte ivice ustima
c) nakon iskašljavanja sputuma, posudu odmah zatvoriti poklopcem.
ONDA tačka 7
Do rezervoara - laboratorija
Sputum za mikrofloru i
osetljivost na
antibiotici (a/b)
Sidorov S.S. 70 godina star
3/IV–00 potpisan m/s
Analiza sputuma za bakteriološki pregled.
Target: osigurati kvalitetnu pripremu za studiju i pravovremeni prijem rezultata.
Trening: informisanje i edukacija pacijenata.
Oprema: sterilna tegla (pljuvačka), usmjer.
Redoslijed izvođenja:
Objasnite pacijentu (članu porodice) značenje i neophodnost predstojeće studije i pribavite njegovu saglasnost za studiju.
A) u stacionarnim uslovima:
brifing i obezbjeđivanje laboratorijskog staklenog posuđa koje će se obaviti noć prije;
B) u ambulantnim i bolničkim uslovima objasniti pacijentu karakteristike pripreme:
temeljito operite zube prethodne noći;
ujutro nakon spavanja temeljno isperite usta prokuhanom vodom
Uputite pacijenta kako da rukuje sterilnim laboratorijskim staklenim posuđem i kako sakuplja sputum:
Nakašljajte, otvorite poklopac tegle (pljuvačnicu) i ispljunite ispljuvak ne dodirujući rubove tegle;
Odmah zatvorite poklopac.
Zamolite pacijenta da ponovi sve informacije, postavite pitanja o tehnici pripreme i prikupljanja sputuma.
Navedite posljedice kršenja preporuka medicinske sestre.
A) ambulantno:
Dajte smjer za studiju popunjavanjem obrasca;
Objasnite pacijentu gde i u koje vreme on (porodica) treba da donese banku i uputnicu.
B) u bolničkom okruženju:
Navesti mjesto i vrijeme gdje treba donijeti teglu (pljuvačnicu);
Prikupljeni materijal dostaviti u bakteriološku laboratoriju najkasnije 1,5 - 2,0 sata nakon uzimanja materijala.
Čuvanje materijala čak i u hladnim uslovima je neprihvatljivo!
Uzimanje fecesa na analizu.
Velika pomoć u prepoznavanju niza bolesti, uključujući i gastrointestinalne, je proučavanje fecesa. Određivanje osnovnih svojstava fecesa pregledom omogućava izvođenje niza dijagnostičkih zaključaka i dostupno je sestri.
Dnevna količina fecesa kod zdrave osobe zavisi od kvaliteta i količine hrane, a u prosjeku iznosi 100 - 120 g. Ako je poremećena apsorpcija i povećana brzina kretanja kroz crijeva (enteritis), količina fecesa može dostižu 2500 g, sa zatvorom, izmet je vrlo mali.
U redu- pražnjenje crijeva se obavlja jednom dnevno, obično u isto vrijeme.
PAŽNJA!!!
Za istraživanje je bolje uzeti izmet nakon samostalnog čina defekacije u obliku u kojem se izlučuje.
bakteriološki
makroskopski
Kal explore mikroskopski
hemijski
Makroskopski utvrđeno:
A) boja, gustina (konzistencija)
B) oblik, miris, nečistoće
Boja–u redu
sa miješanom hranom - žućkasto-smeđa, smeđa;
sa mesom - tamno braon;
sa mlijekom - žuta ili svijetložuta;
novorođenče je zelenkasto-žuto.
ZAPAMTITE!!! Boja izmeta se može promijeniti:
Voće, bobičasto voće (borovnice, ribizle, trešnje, mak itd.) - u tamnoj boji.
Povrće (cikla, šargarepa, itd.) - u tamnoj boji.
Ljekovite tvari (soli bizmuta, željeza, joda) - u crnoj boji.
Prisustvo krvi daje fecesu crnu boju.
Dosljednost(gustina) izmet je mekan.
U različitim patološkim stanjima izmet može biti:
polutečno
Kit (glina), često sive boje i zavisi od značajne primese neprobavljene masti.
kašasto
umjereno gusto
Oblik izmeta- Normalno cilindrični ili u obliku kobasice.
Uz grčeve crijeva, izmet može biti u obliku trake ili u obliku gustih kuglica (ovčiji izmet).
Miris izmeta zavisi od sastava hrane i intenziteta procesa fermentacije i propadanja. Mesna hrana daje oštar miris. Mliječni proizvodi - kiseli.
Zovu se patološki sekreti dišnih organa koji se izbacuju pri kašljanju. Prilikom provođenja laboratorijskih studija sputuma, postaje moguće okarakterizirati patološki proces u respiratornom sistemu, u nekim slučajevima postaje moguće utvrditi njegovu etiologiju. Da biste to učinili, izvršite sljedeće radnje:
- prikuplja se sputum za opću kliničku analizu;
- prikuplja se sputum za otkrivanje tuberkuloze u respiratornim organima;
- prikuplja se sputum kako bi se pronašle abnormalne ćelije;
- prikuplja se sputum kako bi se utvrdila osjetljivost na antibiotike.
Područje pleure zdrave osobe sadrži određenu količinu tekućine, koja olakšava klizanje pleure tokom disanja i po sastavu je vrlo bliska limfi. U slučajevima kršenja cirkulacije krvi i limfe u plućnoj šupljini, moguće je povećanje volumena pleuralne tekućine. To se može dogoditi kako tijekom upalnih promjena u pleuri (eksudat), tako i tijekom procesa koji se javljaju u odsustvu upale. Primarna klinička infekcija pleure može doprinijeti ispoljavanju eksudata, ili može pratiti neke opšte infekcije iu slučaju određenih bolesti pluća i medijastinuma, kao što su reumatizam, srčani udar, tuberkuloza i karcinom pluća, limfogranulomatoza. Pleuralna tečnost se ispituje u sledeće svrhe: utvrđivanje njene prirode; proučavanje staničnog sastava tekućine, koje sadrži informacije o svojstvima patološkog procesa, au nekim slučajevima (s tumorima) i o dijagnozi; s lezijama zarazne prirode, identifikacijom patogena i određivanjem njegove osjetljivosti na antibiotike. Analiza pleuralne tekućine uključuje provođenje fizičko-hemijskih, mikroskopskih, au nekim slučajevima i mikrobioloških i bioloških studija.
Metode za proučavanje sputuma
Za proučavanje sputuma u respiratornim organima koriste se radiografija, fluoroskopija, bronhografija i tomografija pluća.
Fluoroskopija je najčešća metoda istraživanja koja vam omogućava da vizualno odredite kako se mijenja prozirnost plućnog tkiva, otkrijete mjesta zbijanja ili šupljina u njegovoj strukturi, utvrdite prisutnost zraka u pleuralnoj šupljini i druge patologije.
Radiografija se radi kako bi se snimile i dokumentovale promjene u respiratornom sistemu otkrivene tokom fluoroskopije, a koje se pojavljuju na rendgenskom filmu. Patološki procesi koji se javljaju u plućima mogu dovesti do gubitka prozračnosti, praćenog zbijanjem plućnog tkiva (infarkt pluća, upala pluća, tuberkuloza). U tom slučaju, zdravo plućno tkivo na negativnom filmu bit će tamnije od odgovarajućih područja pluća. Šupljina pluća, koja sadrži zrak, okružena upalnim grebenom, izgledat će kao ovalna tamna mrlja u blijedoj sjeni plućnog tkiva. Tečnost koja se nalazi u pleuralnoj ravni prenosi manju količinu rendgenskih zraka u odnosu na plućno tkivo, ostavlja senku na rendgenskom negativnom filmu koja ima tamniju nijansu u odnosu na senku plućnog tkiva. Provođenje radiografije omogućava određivanje količine tekućine u pleuralnoj šupljini i njene prirode. U slučaju da se u pleuralnoj šupljini nalazi upalna tekućina ili eksudat, njen nivo kontakta s plućima ima oblik kose linije usmjerene prema gore od linije srednje ključne kosti. Ako postoji nakupljanje neupalne tekućine ili transudata u pleuralnoj šupljini, njen nivo se nalazi horizontalnije.
Bronhografija se izvodi radi proučavanja bronha. Nakon izvršene preliminarne anestezije respiratornog trakta, kontrastno sredstvo se ubrizgava u lumen bronha, što odlaže rendgenske zrake. Nakon toga se radi rendgenski snimak pluća kako bi se na rendgenskom snimku dobila jasna slika bronhijalnog stabla. Ova metoda omogućava dijagnosticiranje širenja bronha, kao i njihovog sužavanja kao posljedica ulaska tumora ili stranog tijela u lumen bronha.
Tomografija pluća je posebna vrsta radiografije koja omogućava slojeviti rendgenski pregled pluća. Provodi se kako bi se utvrdilo prisustvo tumora u bronhima i plućima, šupljine i šupljine koje se nalaze u plućima na različitim dubinama.
Sakupljanje sputuma za istraživanje
Najbolje je sakupljati sputum za istraživanje ujutro, jer se nakuplja noću i prije jela. Prethodno pranje zuba i ispiranje usta prokuhanom vodom osiguravaju pouzdanost analize sputuma. Sve to omogućava značajno smanjenje kontaminacije bakterijama u usnoj šupljini.
Za sakupljanje sputuma koristi se posebna jednokratna zatvorena boca, napravljena od materijala dovoljno otpornog na udarce i dobro zatvorenog poklopca ili čepa koji se čvrsto zašrafi. Potrebno je da boca ima kapacitet od 25-50 ml i širok otvor. To je potrebno kako bi pacijent mogao ispljunuti sputum u bočicu. Kako bi se mogao procijeniti kvalitet i kvantitet uzorka koji je uzet, materijal od kojeg je napravljena bočica mora biti potpuno providan.
U slučaju da je prikupljeni sputum potrebno prenijeti u drugu ustanovu, bočice sa prikupljenim materijalom treba čuvati u frižideru ne duže od tri dana do slanja. Ako je potrebno duže čuvanje, treba koristiti konzervans. Tokom transporta, sputum mora biti zaštićen od izlaganja vjetru i direktnoj sunčevoj svjetlosti.
Pregled sputuma za opštu analizu
Pregled sputuma za opću analizu obično počinje pregledom njegovog izgleda. Istovremeno se poštuju neka opća pravila: prozirna sluz znači standardni vanjski sputum, upalni proces karakterizira prisustvo zamućenog sputuma. Serozni sputum nema boju, odlikuje se tekućom konzistencijom i prisustvom pjene. Njegovo oslobađanje se događa s plućnim edemom.
Gnojni sputum karakterizira prisustvo gnoja. Boja mu je zelena i žuta. Najčešće se truli sputum opaža kada se apsces pluća probije u bronh, u većini slučajeva je u obliku mješavine gnoja i sluzi.
Zeleni sputum prisutan je u patologiji povezanoj s usporavanjem odljeva. To može biti sinusitis, bronhiektazije, poremećaji nakon tuberkuloze. U slučaju da se kod adolescentne djece pojavi zeleni sputum, ne treba pretpostavljati kronični bronhitis, a može se isključiti i patologija ORL.
Alergijska reakcija i eozinofilija prepoznaju se pojavom jantarno-narandžastog sputuma.
Plućno krvarenje karakterizira pojava krvavog sputuma, ili miješanog, posebno mukopurulentnog s mrljama krvi. Kada se krv zadrži u respiratornom traktu, hemoglobin se pretvara u hemosiderin, nakon čega ispljuvak dobija hrđavu boju. Prisustvo krvi u sputumu je alarmantan faktor koji zahtijeva posebnu istragu.
Biserni sputum odlikuje se zaobljenim opalescentnim inkluzijama, koji se sastoje od detritusa i atipičnih stanica. Vidi se kod skvamoznog karcinoma pluća.
Bakteriološko ispitivanje sputuma
Provođenje bakteriološkog pregleda sputuma omogućava vam da utvrdite prisutnost patogena plućnih bolesti. Između dvije čaše utrlja se gnojna grudvica sputuma s krvlju. Stvrdnuti razmazi podliježu fiksaciji vatre, nakon čega se jedan boji po Gramu, a drugi po Ziehl-Neelsen metodi. Prva metoda bojenja omogućuje otkrivanje gram-pozitivnih mikroba, druga - bakterija tuberkuloze. Na razmaz treba nanijeti komad filter papira, površine jednake samom razmazu, sipati Tsilya fuchsin i zagrijati ga na laganoj vatri dok se ne pojave pare. Nakon što se papir odbaci, bris treba umočiti u rastvor sumporne kiseline koncentracije 5-10% ili rastvor hlorovodonične kiseline koncentracije 3% da bi se promenila boja, nakon čega se dobro isprati vodom. . Zatim, pola minute, treba ga prefarbati otopinom plavog metilena, koncentracije 0,5%, nakon čega se ponovo ispere vodom. Na plavoj pozadini lijeka, crvene mikobakterije su dobro prikazane. U slučaju da mikobakterija tuberkuloze nije pronađena u razmazu, koristi se metoda njihove akumulacije - flotacija. 15-25 ml sputuma stavlja se u posudu zapremine od četvrtine litre, dodaje se dupla zapremina rastvora kaustičnog natrijuma u koncentraciji od 0,5%, nakon čega se dobijena smeša mućka do efekta. postiže se potpuno otapanje sputuma. U 100 ml destilovane vode doda se 2 ml toluena, mešavina se mućka petnaest minuta, nakon čega se dolije voda iz grla boce i drži dva sata. Na vrhu se formira sloj, koji svojom konzistencijom nalikuje kremi, usisava se pipetom sa sprejom i kapi se nanose na zagrijano staklo, svaki put na prethodnu osušenu kap. Zatim se lijek fiksira i primjenjuje prema Ziehl-Neelsen principu. Ako je rezultat negativan, treba pribjeći bakteriološkoj kulturi sputuma ili inokulaciji na životinji (biološka studija). Kako bi utvrdili koliko je flora sputuma osjetljiva na antibiotike, pribjegavaju njenim usjevima.
Mikroskopski pregled sputuma
Mikroskopsko ispitivanje sputuma sastoji se od proučavanja obojenih i nativnih (sirovih, prirodnih) preparata. Za potonje se odabiru gnojne, mrvičaste, krvave grudice, koje se stavljaju na staklo u takvom volumenu da se, kada se pokrije pokrovnim staklom, formira tanak proziran pripravak. Ako je povećanje mikroskopa malo, mogu se otkriti Kirschmanove spirale koje izgledaju kao strije od sluzi različite debljine. Oni uključuju centralnu aksijalnu liniju koja je omotana spiralnim omotačem prošaranim leukocitima. Takve spirale se pojavljuju u sputumu s bronhospazmom. Uz veliko povećanje mogu se otkriti leukociti, alveolarni makrofagi, eritrociti, stanične formacije karakteristične za srčane mane, ravni i cilindrični epitel, sve vrste gljivica, ćelije raka, eozinofili u nativnom preparatu. Leukociti su okrugle zrnaste ćelije. Eritrociti se nazivaju žućkasti homogeni diskovi male veličine, čiji je izgled karakterističan za sputum s upalom pluća, infarktom pluća i destrukcijom plućnog tkiva. Alveolarni makrofagi su ćelije tri puta veće od eritrocita, sa velikom, obilnom granularnošću u citoplazmi. Cilindrični epitel respiratornog trakta određen je peharastim ili klinastim ćelijama. U velikim količinama javlja se kod katara respiratornog trakta i akutnog bronhitisa. Skvamozni epitel je velika ćelijska formacija sa više uglova, nema dijagnostičku vrijednost i potiče iz usne šupljine. Ćelije raka određuju velika jezgra, za prepoznavanje prirode kojih je potrebno značajno iskustvo istraživača. Ove ćelije su velike veličine i nepravilnog oblika.
Makroskopski pregled sputuma
Prilikom makroskopskog pregleda sputuma, pozornost se skreće na njegovu količinu i prirodu, miris, boju, konzistenciju, prisutnost različitih inkluzija i sluzi.
Sastav sputuma određuje njegov karakter.
Sluzni sputum uključuje sluz - proizvod aktivnosti sluznih žlijezda respiratornog sistema. Do njegovog oslobađanja dolazi kod akutnog bronhitisa, povlačenja napada bronhijalne astme, katara respiratornog trakta.
Mucopurulentni sputum je mješavina gnoja i sluzi, sa prevlastom sluzi i uključivanjem gnoja u obliku malih kvržica i vena. Pojava se javlja kod gnojne upale, bronhopneumonije, akutnog bronhitisa.
Gnojno-sluzni sputum se sastoji od gnoja i sluzi sa prevlastom gnoja, dok je sluz predstavljen u obliku niti. Njegov izgled karakterističan je za kronični bronhitis, apscesnu upalu pluća, bronhiektazije.
