Osnovni protein mijelina u likvoru (likvoru). Neurohemija - Ashmarin I.P. U bijeloj tvari

6. MIJELINSKI PROTEINI

Proteinski sastav mijelina je neobičan, ali mnogo jednostavniji nego u neuronima i glijalnim stanicama.

Mijelin sadrži veliki udio kationskog proteina - CBM. To je relativno mali polipeptid sa Mg = 16–18 kD. CBM sadrži značajan udio diamino kiselina, a u isto vrijeme, oko polovice njegovih sastavnih aminokiselina su nepolarne. To s jedne strane osigurava bliski kontakt sa hidrofobnim komponentama mijelinskih lipida, as druge strane određuje njegovu sposobnost stvaranja jonskih veza sa kiselim lipidnim grupama.

Takozvani Folch proteolipidni proteini, koji čine većinu ostalih proteina mijelina, odlikuju se neobično visokom hidrofobnošću. Zauzvrat, glavni od ovih proteina je lipofilin, u kojem su 2/3 sastavnih aminokiselina nepolarne. Od interesa je određena selektivnost kontakata između lipofilina i lipida, na primjer, istiskivanje kolesterola iz okoline. Vjeruje se da je to zbog posebnosti sekundarne strukture lipofilina.

Prilično je velik i udio takozvanog Wolfgram proteina - kiselog proteolipida, prilično bogatog dikarboksilnim aminokiselinskim ostacima, a istovremeno sadrži oko polovinu nepolarnih aminokiselinskih ostataka.

Konačno, od nekoliko desetina drugih mijelinskih proteina, primjećujemo glikoprotein povezan s mijelinom koji se nalazi na ekstracelularnoj površini membrana; također se nalazi u oligodendrocitima prije mijelinizacije i u mijelinu perifernog nervnog sistema. U ljudskom CNS-u je predstavljen sa tri polipeptidna lanca sa M g = 92, 107, 113 kD, au perifernom nervnom sistemu sa jednim proteinom sa M g = 107 kD. MAG pripada glikoproteinima sa relativno niskim sadržajem ostataka ugljikohidrata - oko 30% mase molekula, ali sadrži skup ugljikohidrata karakterističnih za glikoproteine: N-acetilglukozamin, N-acetilneuraminsku kiselinu, fukozu, manozu i galaktozu. Proteinski dio molekule karakterizira visok sadržaj glutaminske i aslarinske kiseline.

Funkcije Wolfgram proteina i MAG su nepoznate, osim općih razmatranja o njihovom učešću u organizaciji strukture mijelinskih ovojnica.

7. NEUROSPEFIČNI GLIA PROTEINI

Protein S-100 se nalazi i u neuronima i u glijalnim ćelijama, a njegov udio u potonjima je visok - oko 85%.

Godine 1967. iz a2-globulina mozga izolovan je neurospecifičan a 2-glikoprotein molekulske težine 45 kD. U ljudskom mozgu se pojavljuje u 16. nedelji embrionalnog razvoja. Njegove komponente ugljikohidrata uključuju glukozamin, manozu, glukozu, galaktozu, galaktozamin i N-acetilneuraminsku kiselinu. a 2-glikoprotein je lokaliziran samo u astrocitima, ali ga nema u neuronima, oligodendrocitima i endotelnim stanicama. Stoga se može smatrati jednim od specifičnih markera astrocita.

Drugi protein je opet karakterističan samo za glijalne ćelije. Izoliran je iz područja ljudskog mozga bogatih fibroznim astrocitima, a potom - u mnogo većim količinama - iz mozga pacijenata sa multiplom sklerozom. Ova supstanca je nazvana glija fibrilarni kiseli protein. Specifičan je samo za CNS, a ne nalazi se u PNS-u. Njegov sadržaj u bijeloj tvari mozga premašuje onaj u sivoj tvari. U ontogeniji miševa, maksimalni sadržaj GFA uočen je između 10. i 14. dana postnatalnog razvoja; vremenski se poklapa sa periodom mijelinizacije i vrhuncem diferencijacije astrocita. Molekularna težina proteina je 40-54 kD. Glijalna lokalizacija ovog proteina takođe omogućava da se koristi kao protein "marker" za ove ćelije.

Funkcije 2-glikoproteina i GFA proteina su nepoznate.

Što se tiče mikroglijalnih proteina, treba imati na umu učešće ovih ćelija u izgradnji mijelina. Mnogi proteini mijelina nalaze se u mikroglijama.

Glia također sadrži mnoge receptorske i enzimske proteine ​​uključene u sintezu sekundarnih glasnika, prekursora neurotransmitera i drugih regulatornih spojeva koji se mogu klasificirati kao neurospecifični.

8. INTENZITET METABOLIZMA PROTEINA U RAZLIČITIM ODJELJCIMA NERVNOG SISTEMA

Savremeni koncept dinamičkog stanja proteina u nervnom tkivu uspostavljen je zahvaljujući upotrebi izotopa od strane A.V. Palladin, D. Richter, A. Laita i drugi istraživači. Počevši od kasnih 1950-ih i tokom 1960-ih, u proučavanju metabolizma proteina korišćeni su različiti prekursori njihove biosinteze označeni sa C, H, S. Pokazalo se da se proteini i aminokiseline u mozgu odrasle životinje metaboliziraju, općenito , intenzivnije nego u drugim organima i tkivima.

Na primjer, u eksperimentima in vivo uz korištenje jednolično označene C-1-6-glukoze kao prekursora, pokazalo se da se, prema intenzitetu stvaranja aminokiselina zbog glukoze, brojni organi mogu rasporediti sljedećim redoslijedom:

mozak > krv > jetra > slezena i pluća > mišić.

Slična slika je uočena kada se koriste drugi označeni prekursori. Pokazalo se da se ugljični skelet aminokiselina, posebno monoaminodikarboksilnih kiselina i prije svega glutamata, intenzivno sintetizira iz C-acetata u mozgu; iz monoaminomonokarboksilnih kiselina prilično intenzivno nastaju glicin, alanin, serin itd. Treba napomenuti da glutamat zauzima posebno mjesto u metabolizmu aminokiselina. Eksperimenti in vitro sa obilježenim glutamatom pokazali su da ako se samo jedna glutaminska kiselina doda reakcijskom mediju homogenata mozga, onda ona može biti izvor stvaranja 90-95% aminokiselina.

Provedene su brojne studije kako bi se proučavale razlike u intenzitetu metabolizma ukupnih i pojedinačnih proteina korištenjem označenih prekursora. Eksperimenti in vivo sa upotrebom C-glutamata pokazali su da se on 4-7 puta intenzivnije inkorporira u proteine ​​sive tvari od bijele tvari. U svim slučajevima, intenzitet izmjene ukupnih proteina sive tvari moždanih hemisfera i malog mozga bio je značajno veći od intenziteta izmjene bijele tvari istih dijelova mozga, bez obzira koji je prekursor korišten u istraživanju. Istovremeno, razlika u intenzitetu metabolizma ukupnih proteina sive tvari u odnosu na proteine ​​bijele tvari odvija se ne samo u normi, već, u pravilu, iu različitim funkcionalnim stanjima tijela.

Provedene su i studije radi proučavanja razlika u intenzitetu inkorporacije obeleženih prekursora u ukupne proteine ​​centralnog i perifernog nervnog sistema. Pokazalo se da su uprkos značajnim razlikama u sastavu, metabolizmu i funkcionalnoj aktivnosti različitih dijelova CNS-a i PNS-a, kao i složenosti i heterogenosti proteina koji ih čine, ukupni CNS proteini odraslih životinja znatno ažurirani. intenzivnije od ukupnih PNS proteina.

Mnoga istraživanja posvećena su metabolizmu proteina u različitim dijelovima mozga. Na primjer, prilikom proučavanja distribucije radioaktivnosti u mozgu nakon primjene C-glutamata, pokazalo se da siva tvar moždanih hemisfera čini 67,5 radioaktivnosti, mali mozak - 16,4, duguljasta moždina - 4,4, a udio ostalih dijelova mozga - oko 11,7. U eksperimentima in vivo sa uvođenjem različitih prekursora, odnosno C-glutamata, C-1-6-glukoze, C-2-acetata, odraslim životinjama, pokazalo se da, prema intenzitetu ugradnje etikete u ukupne proteine, različiti dijelovi nervnog sistema raspoređeni su u sljedećem redoslijedu: siva tvar hemisfera velikog mozga i malog mozga > talamus > optički tuberkul > srednji i diencephalon > Varolii pons > oblongata medulla > bijela tvar hemisfera velikog mozga i malog mozga > kičmena moždina > išijas živac > mijelin.

Postojale su i studije posvećene proučavanju intenziteta metabolizma proteina u različitim dijelovima CNS-a autoradiografskom metodom. Dobivena je slična slika: najintenzivnije uključivanje oznake odvijalo se u proteinima sive tvari moždanih hemisfera i malog mozga, najsporije u kičmenoj moždini, a još sporije u proteinima išijadičnog živca. Što se tiče subkortikalnih formacija, intenzitet njihovog proteinskog metabolizma bio je prosječan između brzine obnavljanja proteina sive i bijele tvari hemisfere mozga i malog mozga. Manje značajne razlike uočene su između pojedinačnih subkortikalnih formacija nego između metaboličke aktivnosti bijele i sive tvari.

Proučavani su i ukupni proteini različitih područja kore velikog mozga, frontalnog, temporalnog, parijetalnog i okcipitalnog. Prema Welshu i VAPalladinu, proteini senzornog područja korteksa imaju veću stopu obnavljanja, a proteini temporalnog režnja moždane kore imaju nižu. Isti autori su pokazali da je veća obnova proteina karakteristična za filogenetski mlađe i funkcionalno aktivnije strukturne formacije mozga.

Na pozadini općenito visoko obnovljivih proteina mozga, nekoliko prilično inertnih proteina zaslužuje poseban spomen. To uključuje histone neurona neokorteksa, kationske proteine ​​kromatina ovih stanica. U odraslom organizmu neokortikalni neuroni se ne razmnožavaju. Shodno tome, stopa obnavljanja histona je vrlo niska. Prosječno vrijeme za obnavljanje polovine molekula nekih frakcija histona mjeri se u desetinama dana.

U mozgu nema apsolutno inertnih proteina, a pojedinačni proteini i proteinski kompleksi neurona prolaze kroz kontinuirano restrukturiranje povezano s njihovim sudjelovanjem u funkcionalnoj aktivnosti neurona i neuroglije. Osim sinteze i razgradnje cijelih proteinskih molekula, dolazi do promjena u njihovoj strukturi, do kojih dolazi, posebno, prilikom aminacije i deaminacije moždanih proteina. Treba ih posmatrati kao djelomičnu obnovu pojedinačnih fragmenata proteinske molekule.

1. U nervnom tkivu pronađeni su samo za njega karakteristični neurospecifični proteini. Hemijski, oni mogu biti kiseli ili bazični, jednostavni ili složeni, a često su glikoproteini ili fosfoproteini. Mnogi neurospecifični proteini imaju strukturu podjedinica. Broj otkrivenih neurospecifičnih proteina već je premašio 200 i ubrzano raste.

2. Neurospecifični proteini direktno ili indirektno učestvuju u realizaciji svih funkcija nervnog sistema – generisanju i provođenju nervnog impulsa, procesima obrade i skladištenja informacija, sinaptičkom prenosu, ćelijskom prepoznavanju, recepciji itd.

3. Prema lokalizaciji u tkivu nervnog sistema razlikuju se isključivo ili pretežno neuronski i glijalni neurospecifični proteini. Prema subcelularnoj lokalizaciji, mogu biti citopizmatične, nuklearne ili vezane za membranu. Od posebnog značaja su neurospecifični proteini lokalizovani u membranama sinaptičkih formacija.

4. Mnogi kiseli neurospecifični proteini koji vezuju kalij su uključeni u procese transporta jona. Pretpostavlja se da oni posebno igraju značajnu ulogu u formiranju pamćenja.

5. Posebnu grupu neurospecifičnih proteina čine kontraktilni proteini nervnog tkiva, koji obezbeđuju orijentaciju i pokretljivost citostrukturnih formacija, aktivan transport niza neuronskih komponenti i učestvuju u neurotransmiterskim procesima u sinapsama.

6. Grupa neurospecifičnih proteina povezanih sa humoralnom regulacijom koju vrši mozak uključuje neke glikoproteine ​​hipotalamusa, kao i neurofizine i slične proteine ​​koji su nosioci peptidnih regulatora.

7. Različiti neurospecifični glikoproteini su uključeni u formiranje mijelina, u procese ćelijske adhezije, neurorecepcije i međusobnog prepoznavanja neurona u ontogenezi i regeneraciji.

8. Brojni neurospecifični proteini su moždani izoenzimi poznatih enzima, kao što su enolaza, aldolaza, kreatin kinaza itd.

9. Mnogi neurospecifični proteini se veoma aktivno metabolišu u mozgu životinja, a intenzitet metabolizma je različit u različitim delovima mozga i zavisi od funkcionalnog stanja nervnog sistema. U cjelini, proteini mozga značajno nadmašuju proteine ​​drugih tkiva i organa po intenzitetu obnavljanja.

RAMN, 1996. - 470 str.
ISBN 5-900760-02-2
Skinuti(direktan link) : neyrohimiya1996.djvu Prethodni 1 .. 36 > .. >> Sljedeći
89
3.6 MIJELINSKI PROTEINI
Proteinski sastav mijelina je neobičan, ali mnogo jednostavniji nego u neuronima i glijalnim stanicama.
Mijelin ima visok udio kationskog proteina - CBM (oko 30 posto). To je relativno mali polipeptid sa Mg = 16-18 kD. CBM sadrži značajan udio diaminokiselina (oko 20 posto), a u isto vrijeme oko polovice njegovih sastavnih aminokiselina su nepolarne. To s jedne strane osigurava bliski kontakt sa hidrofobnim komponentama mijelinskih lipida, as druge strane određuje njegovu sposobnost stvaranja jonskih veza sa kiselim lipidnim grupama. Funkcije CBM će biti detaljnije razmotrene u poglavlju o lipidima u vezi sa opštom analizom strukture mijelinskih membrana.
Takozvani Folch proteolipidni proteini, koji čine većinu ostalih proteina mijelina, odlikuju se neobično visokom hidrofobnošću. Zauzvrat, glavni od ovih proteina je lipofilin (Mg = 28 kDa), u kojem su 2/3 sastavnih aminokiselina nepolarne. Od interesa je određena selektivnost kontakata između lipofilina i lipida, na primjer, istiskivanje kolesterola iz okoline. Vjeruje se da je to zbog posebnosti sekundarne strukture lipofilina. Njegova uloga u formiranju mijelinskih ovojnica detaljnije je razmotrena u poglavlju o lipidima.
Prilično je velik i udio tzv. Wolf-gram proteina (oko 15% proteina) - kiselog proteolipida, prilično bogatog dikarboksilnim aminokiselinski ostacima, a istovremeno sadrži oko polovicu nepolarnih aminokiselina. kiseli ostaci.
Konačno, od nekoliko desetina drugih mijelinskih proteina, primjećujemo glikoprotein povezan s mijelinom (MAG) koji se nalazi na ekstracelularnoj površini membrana; također se nalazi u oligodendrocitima prije mijelinizacije i u mijelinu perifernog nervnog sistema. U ljudskom CNS-u predstavljen je sa tri polipeptidna lanca sa Mg = 92, 107, 113 kD, au perifernom nervnom sistemu sa jednim proteinom sa Mg = 107 kD. MAG pripada glikoproteinima sa relativno niskim sadržajem ostataka ugljikohidrata - oko 30% mase molekula, ali sadrži skup ugljikohidrata karakterističnih za glikoproteine: N-acetilglukozamin, N-acetilneuraminsku kiselinu, fukozu, manozu i galaktozu. Proteinski dio molekule karakterizira visok sadržaj glutamina i
90
asparaginske kiseline.
Funkcije Wolfgram proteina i MAG su nepoznate, osim općih razmatranja o njihovom učešću u organizaciji strukture mijelinskih ovojnica.
3.7 NEUROSPEFIČNI GLIA PROTEINI
Protein S-100 koji je detaljno opisan u Odjeljku 3.1 nalazi se i u neuronima i u glijalnim stanicama, a njegov udio u potonjima je visok, oko 85%.
Godine 1967. iz moždanih a2-globulina izolovan je neurospecifični a2-glikoprotein molekulske težine 45 kD. U ljudskom mozgu se pojavljuje u 16. nedelji embrionalnog razvoja. Njegove komponente ugljikohidrata uključuju glukozamin, manozu, glukozu, galaktozu, galaktozamin i N-acetilneuraminsku kiselinu. α2-glikoprotein je lokaliziran samo u asgrocitima, ali ga nema u neuronima, oligodendrocitima i endotelnim stanicama. Stoga se može smatrati jednim od specifičnih markera astrocita.
Drugi protein je opet karakterističan samo za glijalne ćelije. Izoliran je iz područja ljudskog mozga bogatih fibroznim astrocitima, a kasnije - u mnogo većim količinama - iz mozga pacijenata sa multiplom sklerozom (fibralna glioza). Ova supstanca je nazvana glija fibrilarni kiseli protein (GFA). Specifičan je samo za CNS, a ne nalazi se u PNS-u. Njegov sadržaj u bijeloj tvari mozga premašuje onaj u sivoj tvari. U ontogenezi miševa, maksimalni sadržaj GFA se uočava između 10. i 14. dana postnatalnog razvoja, odnosno vremenski se poklapa sa periodom mijelinizacije i vrhuncem diferencijacije astrocita. Molekularna težina proteina je 40-54 kD. Glijalna lokalizacija ovog proteina takođe omogućava da se koristi kao „marker“ protein za ove ćelije.
Funkcije a2-glikoproteina i GFA proteina su nepoznate.
Što se tiče mikroglijalnih proteina, treba imati na umu učešće ovih ćelija u izgradnji mijelina. Mnogi proteini mijelina. opisane u prethodnom odeljku nalaze se u mikroglijama.
Glia također sadrži mnoge receptorske i enzimske proteine ​​uključene u sintezu sekundarnih glasnika, prekursora neurotransmitera i drugih regulatornih spojeva koji se mogu klasificirati kao neurospecifični. Neki od njih su opisani u narednim poglavljima.
91
3.8 INTENZITET METABOLIZMA PROTEINA U RAZLIČITIM ODJELJCIMA NERVNOG SISTEMA
Moderna ideja o dinamičkom stanju proteina u nervnom tkivu uspostavljena je zahvaljujući upotrebi izotopa od strane A.V. Palladina, D. Richtera, A. Laite i drugih istraživača. Počevši od kraja 1950-ih i tokom 1960-ih, u proučavanju metabolizma proteina korišćeni su različiti prekursori njihove biosinteze (aminokiseline, glukoza, acetat i drugi) označeni sa 14C, 3H, 35S. Pokazalo se da se proteini i aminokiseline u mozgu odrasle životinje, općenito, metaboliziraju intenzivnije nego u drugim organima i tkivima.

Svi lipidi koji se nalaze u mozgu štakora također su prisutni u mijelinu, tj. nema lipida lokaliziranih isključivo u nemijelinskim strukturama (s izuzetkom specifičnog mitohondrijalnog lipida difosfatidilglicerola). Vrijedi i obrnuto - ne postoje mijelinski lipidi koji se ne nalaze u drugim subcelularnim frakcijama mozga.

Cerebrozid je najtipičnija komponenta mijelina. Sa izuzetkom vrlo ranog perioda razvoja organizma, koncentracija cerebrozida u mozgu je direktno proporcionalna količini mijelina u njemu. Samo 1/5 ukupnog sadržaja galaktolipida u mijelinu se javlja u sulfatiranom obliku. Cerebrozidi i sulfatidi igraju važnu ulogu u održavanju stabilnosti mijelina.

Mijelin takođe karakteriše visok nivo njegovih glavnih lipida, holesterola, ukupnih galaktolipida i plazmalogena koji sadrži etanolamin. Utvrđeno je da se do 70% holesterola u mozgu nalazi u mijelinu. Budući da se do polovine bijele tvari mozga sastoji od mijelina, jasno je da mozak sadrži najveću količinu kolesterola u odnosu na druge organe. Visoka koncentracija kolesterola u mozgu, posebno u mijelinu, određena je glavnom funkcijom neuronskog tkiva - generiranjem i provođenjem nervnih impulsa. Visok sadržaj kolesterola u mijelinu i posebnost njegove strukture dovode do smanjenja curenja jona kroz membranu neurona (zbog njegove visoke otpornosti).

Fosfatidilholin je također esencijalni sastojak mijelina, iako je sfingomijelin prisutan u relativno malim količinama.

Sastav lipida i sive i bijele tvari mozga značajno se razlikuje od mijelina. Sastav mijelina u mozgu svih proučavanih vrsta sisara je skoro isti; postoje samo male razlike (npr. mijelin pacova ima manje sfingomijelina od goveđeg ili ljudskog mijelina). Postoje neke varijacije ovisno o lokalizaciji mijelina, na primjer, mijelin izoliran iz kičmene moždine ima veći omjer lipida i proteina nego mijelin iz mozga.

Sastav mijelina uključuje i polifosfatidilinozitide, od kojih trifosfoinozitid čini od 4 do 6% ukupnog mijelinskog fosfora, a difosfoinozitid - od 1 do 1,5%. Manje komponente mijelina uključuju najmanje tri cerebrozidna estra i dva lipida na bazi glicerola; mijelin takođe sadrži neke dugolančane alkane. Mijelin sisara sadrži 0,1 do 0,3% gangliozida. Mijelin sadrži više monosialogangliozida bM1 u poređenju sa onim što se nalazi u moždanim membranama. Mijelin mnogih organizama, uključujući ljude, sadrži jedinstveni gangliozid sialozilgalaktozilceramid OM4.

Mijelinski lipidi PNS

Mijelinski lipidi perifernog i centralnog nervnog sistema su kvalitativno slični, ali među njima postoje kvantitativne razlike. PNS mijelin sadrži manje cerebrozida i sulfata i značajno više sfingomijelina od CNS mijelina. Zanimljivo je primijetiti prisustvo gangliozida OMP, koji je karakterističan za PNS mijelin u nekim organizmima. Razlike u sastavu mijelinskih lipida centralnog i perifernog nervnog sistema nisu toliko značajne kao njihove razlike u sastavu proteina.

Proteini mijelina u CNS-u

Proteinski sastav mijelina CNS-a je jednostavniji od ostalih moždanih membrana, a predstavljen je uglavnom proteolipidima i bazičnim proteinima, koji čine 60-80% ukupnog broja. Glikoproteini su prisutni u znatno manjim količinama. Mijelin centralnog nervnog sistema sadrži jedinstvene proteine.

Mijelin ljudskog CNS-a karakterizira kvantitativna prevalencija dva proteina: pozitivno nabijenog kationskog proteina mijelina (bazni protein mijelina, MBP) i mijelinskog proteolipidnog proteina (PLP). Ovi proteini su glavni sastojci mijelina u CNS-u svih sisara.

Mijelinski proteolipid PLP (proteolipidni protein), također poznat kao Folch protein, ima sposobnost rastvaranja u organskim rastvaračima. Molekularna težina PLP-a je približno 30 kDa (Da - dalton). Njegova aminokiselinska sekvenca je izuzetno očuvana, molekul formira nekoliko domena. PLP molekul se sastoji od tri masne kiseline, tipično palmitinske, oleinske i stearinske, esterski vezane za radikale aminokiselina.

CNS mijelin sadrži nešto manje količine drugog proteolipida, DM-20, nazvanog po svojoj molekularnoj težini (20 kDa). I analiza DNK i rasvjetljavanje primarne strukture pokazali su da DM-20 nastaje cijepanjem 35 aminokiselinskih ostataka iz PLP proteina. Tokom razvoja, DM-20 se pojavljuje ranije od PLP (u nekim slučajevima čak i prije pojave mijelina); sugeriraju da, pored svoje strukturne uloge u formiranju mijelina, može biti uključen u diferencijaciju oligodendrocita.

Suprotno shvatanju da je PLP neophodan za formiranje kompaktnog multilamelarnog mijelina, proces formiranja mijelina kod PLP/DM-20 nokaut miševa odvija se sa samo manjim odstupanjima. Međutim, ovi miševi imaju skraćeni životni vijek i smanjenu opću pokretljivost. Naprotiv, prirodne mutacije u PLP-u, uključujući njegovu povećanu ekspresiju (normalna prekomjerna ekspresija PLP), imaju ozbiljne funkcionalne posljedice. Treba napomenuti da su značajne količine PLP i DM-20 proteina prisutne u CNS-u, glasnička RNK za PLP je također prisutna u PNS-u, a mala količina proteina se tamo sintetiše, ali nije uključena u mijelin.

Mijelinski kationski protein (MBP) privlači pažnju istraživača zbog svoje antigenske prirode - kada se daje životinjama, izaziva autoimunu reakciju, takozvani eksperimentalni alergijski encefalomijelitis, koji je model teške neurodegenerativne bolesti - multiple skleroze.

Aminokiselinska sekvenca MBP je visoko očuvana u mnogim organizmima. MBP se nalazi na citoplazmatskoj strani mijelinskih membrana. Ima molekularnu težinu od 18,5 kDa i lišen je znakova tercijarne strukture. Ovaj osnovni protein pokazuje mikroheterogenost kada se podvrgne elektroforezi u alkalnim uslovima. Većina proučavanih sisara sadržavala je različite količine MBR izoforma koje su dijelile značajan dio sekvence aminokiselina. Molekularna težina MBR miševa i pacova je 14 kDa. MBR male molekularne težine ima iste sekvence aminokiselina na N- i C-terminalnim dijelovima molekula kao i ostatak MBR-a, ali se razlikuje po redukciji od oko 40 aminokiselinskih ostataka. Odnos ovih glavnih proteina se menja tokom razvoja: zreli pacovi i miševi imaju više MBR sa molekulskom težinom od 14 kDa nego MBR sa molekulskom težinom od 18 kDa. Dvije druge izoforme MBR-a, koje se također nalaze u mnogim organizmima, imaju molekulsku težinu od 21,5 i 17 kDa, respektivno. Nastaju vezivanjem za glavnu strukturu polipeptidne sekvence mase od oko 3 kDa.

Elektroforetsko odvajanje proteina mijelina otkriva proteine ​​veće molekularne težine. Njihov broj zavisi od vrste organizma. Na primjer, miševi i pacovi mogu sadržavati do 30% takvih proteina od ukupnog broja. Sadržaj ovih proteina također se mijenja ovisno o dobi životinje: što je mlađa, to je manje mijelina u mozgu, ali je više proteina veće molekularne težine.

Enzim 2 "3"-ciklički nukleotid 3"-fosfodiesteraza (CNP) čini nekoliko procenata ukupnog sadržaja proteina mijelina u CNS ćelijama. Ovo je mnogo više nego u drugim tipovima ćelija. CNP protein nije glavna komponenta kompaktnog mijelina, koncentrisan je samo u određenim područjima mijelinske ovojnice koja je povezana sa citoplazmom oligodendrocita. Protein je lokaliziran u citoplazmi, ali dio je povezan sa citoskeletom membrane - F-aktinom i tubulinom. Biološka funkcija CNP-a može biti da reguliše strukturu citoskeleta kako bi se ubrzali procesi rasta i diferencijacije u oligodendrocitima.

Glikoprotein povezan sa mijelinom (MAG) je kvantitativno manja komponenta pročišćenog mijelina, ima molekulsku težinu od 100 kDa, sadržan je u CNS-u u maloj količini (manje od 1% ukupnog proteina). MAG ima jednu transmembransku domenu koja odvaja visoko glikoziliran ekstracelularni dio, sastavljen od pet imunoglobulinskih domena, od intracelularnog domena. Njegova ukupna struktura je slična proteinu adhezije neuronskih stanica (NCAM).

MAG nije prisutan u kompaktnom, multilamelarnom mijelinu, ali se nalazi u periaksonalnim membranama oligodendrocita koji formiraju mijelinske slojeve. Podsjetimo da se periaksonalna membrana oligodendrocita nalazi najbliže plazma membrani aksona, ali se ipak ove dvije membrane ne spajaju, već su odvojene ekstracelularnim jazom. Slična karakteristika lokalizacije MAG-a, kao i činjenica da ovaj protein pripada superfamiliji imunoglobulina, potvrđuje njegovo učešće u procesima adhezije i prenosa informacija (signalizacije) između aksoleme i oligodendrocita koji formiraju mijeline tokom mijelinizacije. Osim toga, MAG je jedna od komponenti bijele tvari CNS-a koja inhibira rast neurita u kulturi tkiva.

Od ostalih glikoproteina bijele tvari i mijelina, treba napomenuti manji mijelin-oligodendrociti glikoprotein (MOG). MOG je transmembranski protein koji sadrži jedan domen sličan imunoglobulinu. Za razliku od MAG-a, koji se nalazi u unutrašnjim slojevima mijelina, MOG je lokaliziran u njegovim površinskim slojevima, zbog čega može sudjelovati u prijenosu ekstracelularnih informacija do oligodendrocita.

Male količine karakterističnih membranskih proteina mogu se identifikovati elektroforezom na poliakrilamidnom gelu (PAGE) (npr. tubulin). Elektroforeza visoke rezolucije pokazuje prisustvo drugih manjih proteinskih traka; mogu biti posljedica prisustva brojnih enzima mijelinske ovojnice.

Mijelinski proteini PNS-a

PNS mijelin sadrži i neke jedinstvene proteine ​​i nekoliko proteina zajedničkih sa proteinima mijelina CNS-a.

P0 je glavni protein PNS mijelina, ima molekularnu težinu od 30 kDa i čini više od polovine proteina mijelina PNS-a. Zanimljivo je napomenuti da iako se razlikuje od PLP-a po sekvenci aminokiselina, putevima post-translacijske modifikacije i strukturi, oba ova proteina su podjednako važna za formiranje strukture CNS-a i PNS-a mijelina.

Sadržaj MBP u mijelinu PNS-a iznosi 5-18% ukupne količine proteina, za razliku od CNS-a, gdje njegov udio dostiže trećinu ukupnog proteina. Ista četiri oblika proteina MBP sa molekularnim masama od 21, 18,5, 17 i 14 kDa, respektivno, pronađena u CNS mijelinu, takođe su prisutna u PNS. Kod odraslih glodara, MBP, sa 14 kDa (nazvan "Pr" u klasifikaciji perifernih mijelinskih proteina), je najznačajnija komponenta svih kationskih proteina. U mijelinu PNS-a postoji i MBP molekularne težine od 18 kDa (u ovom slučaju se zove „P1 protein“). Treba napomenuti da važnost MBP porodice proteina nije toliko velika za mijelinsku strukturu PNS-a koliko za CNS.

Mijelinski glikoproteini PNS-a

Kompaktni mijelin u PNS-u sadrži glikoprotein od 22 kDa nazvan periferni mijelinski protein 22 (PMP-22), koji čini manje od 5% ukupnog sadržaja proteina. PMP-22 ima četiri transmembranska domena i jedan glikozilovani domen. Ovaj protein ne igra značajnu strukturnu ulogu. Međutim, abnormalnosti gena pmp-22 odgovorne su za neke ljudske nasljedne neuropatologije.

Prije nekoliko desetljeća vjerovalo se da mijelin čini inertnu ovojnicu koja ne obavlja nikakvu biohemijsku funkciju. Međutim, kasnije je u mijelinu pronađen veliki broj enzima uključenih u sintezu i metabolizam komponenti mijelina. Brojni enzimi prisutni u mijelinu uključeni su u metabolizam fosfoinozitida: fosfatidilinozitol kinaza, difosfatidilinozitol kinaza, odgovarajuće fosfataze i diglicerid kinaze. Ovi enzimi su od interesa zbog visoke koncentracije polifosfoinozitida u mijelinu i njihovog brzog metabolizma. Postoje dokazi o prisutnosti u mijelinu muskarinskih holinergičkih receptora, G proteina, fosfolipaza C i E i protein kinaze C.

U mijelinu PNS-a pronađena je Na/K-ATPaza koja prenosi monovalentne katjone, kao i 6"-nukleotidazu. Prisustvo ovih enzima sugerira da mijelin može aktivno učestvovati u aksonskom transportu.

Određivanje koncentracije bazičnog proteina mijelina u likvoru, koji se koristi za dijagnosticiranje, procjenu prognoze i kontrolu liječenja multiple skleroze.

ruski sinonimi

MBP u cerebrospinalnoj tečnosti, u likvoru.

Sinonimiengleski

Bazni protein mijelina (MBP), CSF.

Metoda istraživanja

Enzimski imunotest (ELISA).

Jedinice

ng/mL (nanogram po mililitru).

Koji se biomaterijal može koristiti za istraživanje?

Kako se pravilno pripremiti za istraživanje?

Nije potrebna priprema.

Opće informacije o studiji

Osnovni protein mijelina, MBP, jedna je od glavnih komponenti unutrašnjeg sloja mijelinske ovojnice. Tokom demijelinizacije, MBP i/ili njegovi fragmenti ulaze u cerebrospinalnu tekućinu i stoga se mogu koristiti kao klinički i laboratorijski marker destrukcije mijelina za dijagnosticiranje, procjenu prognoze i praćenje liječenja multiple skleroze.

Pokazalo se da je povećanje nivoa MBP u likvoru uočeno u približno 80% slučajeva egzacerbacije multiple skleroze i samo kod nekoliko pacijenata u remisiji bolesti. Povećanje nivoa MBP korelira sa progresijom promjena prema MR i perzistira 5-6 sedmica nakon pojave egzacerbacije. Tokom terapije glukokortikosteroidima, koncentracija MBP se smanjuje.

Ako se multipla skleroza manifestira samo u obliku retrobulbarnog neuritisa, povećanje OBM u cerebrospinalnoj tekućini u pravilu se ne opaža. To je vjerojatno zbog činjenice da se žarište demijelinizacije u ovom slučaju nalazi na relativno velikoj udaljenosti od četvrte komore mozga. Još jedna karakteristika MBM-a je da nakon oslobađanja iz mijelina, MBM se može podvrgnuti fragmentaciji sa formiranjem mnogih strukturno različitih komponenti, od kojih se sve ne mogu identificirati korištenjem standardnih test sistema. Rezultat studije u ovom slučaju ne odgovara uvijek stvarnoj koncentraciji MBP u cerebrospinalnoj tekućini.

Povećanje MBP se uočava ne samo kod multiple skleroze, već i kod drugih bolesti centralnog nervnog sistema, kao što su moždani udar, neke encefalopatije i encefalitis. Štaviše, budući da se MBP nalazi i u perifernim nervima, njegova koncentracija u CSF može se promijeniti u prisustvu demijelinizacije nervnih vlakana izvan CNS-a. Dakle, MBP je nespecifičan marker multiple skleroze.

Treba napomenuti da je danas MBP dodatni marker multiple skleroze. Kao i drugi markeri likvora (oligoklonalni imunoglobulini G, IgG indeks), nije uključen u glavni algoritam za dijagnostiku multiple skleroze.

Za šta se koristi istraživanje?

• Za dijagnozu, procjenu prognoze i kontrolu liječenja multiple skleroze.

Kada je predviđeno učenje?

• U prisustvu simptoma multiple skleroze: zamagljen vid (zamagljen, dvostruki vid), slabost, utrnulost, trnci u rukama i nogama, neravnoteža, pojačano mokrenje, posebno ako su simptomi povremeni i uočeni kod mlade žene;
• kada dobijete dvosmislene rezultate magnetne rezonancije mozga (MRI).

Šta znače rezultati?

Referentne vrijednosti: manje od 1 ng/ml.

Pozitivan rezultat:

• multipla skleroza i druge demijelinizirajuće bolesti centralnog nervnog sistema;
• moždani udar;
• encefalopatija;
• encefalitis.

Negativan rezultat:

• norma;
• efikasnog lečenja bolesti.

Šta može uticati na rezultat?

• Fragmentacija bazičnog proteina mijelina kada se oslobodi iz mijelina;
• prisustvo komorbiditeta.

Važne napomene

• Osnovni protein mijelina je nespecifičan marker za multiplu sklerozu i druge demijelinizirajuće bolesti;
• rezultate analiza treba tumačiti uzimajući u obzir dodatne kliničke, laboratorijske i instrumentalne podatke.

• Dijagnoza multiple skleroze (izoelektrično fokusiranje oligoklonskih IgG u likvoru i serumu)

Ko naručuje studiju?

Neurolog, lekar opšte prakse.

Književnost

• Giovannoni G. Biomarkeri cerebrospinalne tečnosti multiple skleroze. Dis Markers. 2006;22(4):187-96. recenzija.
• Greene DN, Schmidt RL, Wilson AR, Freedman MS, Grenache DG Osnovni protein mijelina cerebrospinalne tečnosti se često naručuje, ali ima malu vrijednost: studija upotrebe testa. Am J Clin Pathol. 2012. avgust;138(2):262-72.

Koncentracija bazičnog proteina mijelina (MBP) i neuron-specifične enolaze (NSE) u krvnom serumu proučavana je kod 84 bolesnika sa hroničnim hepatitisom (CH) (virusna etiologija HBV, HCV - 38; alkoholna etiologija - 17; autoimuni hepatitis - 11; hepatitis mješovite etiologije - 18 ) i 77 ciroza jetre (LC) (virusna etiologija HBV, HCV, HBV + HCV - 27; primarna bilijarna ciroza - 10, alkoholna etiologija - 18; mješovita etiologija - 22). Kontrolna grupa - 30 praktično zdravih osoba (donora). Koncentracije MBP i NSE u serumu određene su enzimskim imunosorbentnim testom korištenjem komercijalnih testnih kompleta 449-5830 DSL MBP i 420-10 Fujirebio NSE. Prema rezultatima istraživanja, kod alkoholnih lezija jetre, kako u fazi kroničnog hepatitisa tako i formirane ciroze, uočeno je značajno povećanje koncentracije MBP u krvi u odnosu na virusne lezije. Koncentracija NSE kod pacijenata sa cirozom ispitivanih etioloških grupa, za razliku od CG, nije se značajno razlikovala.

bazični protein mijelina

neuron-specifična enolaza

hronični hepatitis

ciroza jetre

hepatična encefalopatija.

1. Žukova I.A. Neuron-specifična enolaza kao nespecifični marker neurodegenerativnog procesa / I.A. Žukov, V.M. Alifirova, N.G. Žukov // Bilten sibirske medicine. - 2011. - T. 10. - Br. 2. - S. 15-21.

2. Belopasov V.V. Klinička diferencijacija hepatične encefalopatije u bolesnika s cirozom jetre / V.V. Belopasov, R.I. Mukhamedzyanova, M.K. Andreev, B.N. Levitan // Vyatka Medical Bulletin. - 2002. - br. 1. - S. 46-47.

3. Ivaškin V.T. Bolesti jetre i hepatična encefalopatija / V.T. Ivaškin, F.I. Komarov, I.O. Ivanikov // Ruski medicinski časopis. - 2001. - T. 3. - Br. 12. - S. 150-155.

4. Levitan B.N. Kronična patologija jetre i crijevna mikrobiocenoza (klinički i patogenetski aspekti) / B.N. Levitan, A.R. Umerova, N.N. Larina. - Astrakhan: AGMA, 2010. - 135 str.

5. Levitan B.N. Promjene koncentracije bazičnog proteina mijelina u krvnom serumu kod bolesti jetre / B.N. Levitan, A.V. Astakhin, O.O. Evlasheva // Eksperimentalna i klinička gastroenterologija. - 2015. - br. 2. - Str. 93.

6. Pavlov Ch.S. Hepatična encefalopatija: patogeneza, klinika, dijagnoza, terapija / Ch.S. Pavlov, I.V. Damulin, V.T. Ivaškin // Ruski časopis za gastroenterologiju, hepatologiju, koloproktologiju. - 2016. - br. 1. - Str. 44-53.

7. Toropova N.E. Procjena informativnog sadržaja neuron-specifične enolaze određene enzimskim imunotestom / N.E. Toropova, E.A. Dorofeeva, S.P. Dvoryaninova, Zh.P. Vasieva // Klinička laboratorijska dijagnostika. - 1995. - br. 1. - S. 15–17.

8. Čehonjin V.P. Osnovni protein mijelina. Struktura, svojstva, funkcije, uloga u dijagnostici demijelinizacijskih bolesti / V.P. Čehonjin, O.I. Gurina, T.B. Dmitrieva i dr. // Biomedicinska hemija. - 2000. - T. 46. - Br. 6. - S. 549–563.

9. Arguedas M.R. Utjecaj hepatične encefalopatije na zdrav kvalitet života bolesnika s cirozom / M.G. Arguedas, T.G. Delawrence, B.M. Mcguire // Probavne bolesti i znanosti. - 2003. - V. 48. - P. 1622-1626.

10. Butterworth R.F. Patofiziologija hepatične encefalopatije: Koncept sinergizma // Hepatol. Res. - 2008. - V. 38. - P. 116-121.

11. Isgro M. Neuron – specifična enolaza kao biomarker: biohemijski i klinički aspekti / M. Isgro, P. Bottoni, R. Scatena // AdvExp Mad Biol. - 2015. - Vol. 867. - P. 125-143.

12. Persson L. 100 protein i neuron-specifična enolaza u cerebrospinalnoj tečnosti i serumu: markeri oštećenja ćelija u centralnom nervnom sistemu čoveka / L. Persson, H.G. Hardemark, J. Gustaffson et al. // Stroke. - 1987. - Vol. 18. - P. 911-918.

13. Rabinowicz A. NSE kao koristan prognostički faktor za pacijente nakon cerebralne hipoksije / A. Rabinowicz, H. Reiber // Epilepsija. - 1996. - Vol. 37. - P. 122-125.

14. Tzakos A. Struktura i funkcija mijelinskih proteina: trenutni status i perspektive u vezi s multiplom sklerozom / A. Tzakos, A. Troganis, V. Theodorou // Curr. Med. Chem. - 2005. - Vol. 12. - P. 1569-1587.

Hronični hepatitis (CH) i ciroza jetre (LC) su polietiološke bolesti. Poznato je da je infekcija hepatotropnim virusima glavni etiološki faktor koji dovodi do razvoja CG, a zloupotreba alkohola je, zauzvrat, drugi glavni uzrok ove patologije.

Tok i prognoza bolesti jetre u velikoj mjeri je određen prisustvom i težinom oštećenja centralnog nervnog sistema (CNS). Hepatična encefalopatija (PE) je kompleks potencijalno reverzibilnih neuropsihijatrijskih poremećaja uzrokovanih oštećenjem centralnog nervnog sistema toksičnim supstancama koje nisu neutralisane patološki izmenjenom jetrom, a nastaju prvenstveno kao posledica akutnog ili hroničnog zatajenja jetre. S obzirom na ekstremnu agresivnost ovih supstanci, može se pretpostaviti da pod njihovim utjecajem dolazi do razaranja nervnog tkiva s oslobađanjem njegovih produkata raspadanja u tekući medij tijela.

Prilično veliki broj studija posvećen je proučavanju dijagnostičkog i prognostičkog značaja takvih markera neurodestrukcije kao što su bazični protein mijelina (MBP) i neuron-specifična enolaza (NSE) u različitim patološkim stanjima CNS-a. U isto vrijeme, pitanje njihove dijagnostičke vrijednosti u kroničnim difuznim bolestima jetre (CDLD) različite etiologije ostaje slabo razjašnjeno. U tom smislu, relevantno je i obećavajuće proučavanje MBP i NSE, u zavisnosti od etiologije CDPD.

Svrha: ispitati dijagnostički značaj određivanja koncentracije bazičnog proteina mijelina i neuron specifične enolaze u krvnom serumu, ovisno o etiologiji CDPD-a.

Materijali i metode. Za rješavanje zadataka za period od 2012. do 2014. godine, 84 bolesnika sa hroničnim hepatitisom (virusna etiologija HBV, HCV - 38; alkoholna etiologija - 17; autoimuni hepatitis - 11; mješovita etiologija - 18) i 77 LC (virusna etiologija HCV HBV, ) su pregledani., HBV + HCV - 27; primarna bilijarna ciroza - 10, alkoholna etiologija - 18; mješovita etiologija - 22), koji su hospitalizirani na gastroenterološkom odjeljenju GBUZ AD "AMOKB". Među pregledanim pacijentima sa patologijom jetre identifikovana je grupa od 17 pacijenata, koja nije uvrštena na listu pacijenata sa hroničnim hepatitisom. Ovu grupu činili su pacijenti sa akutnim alkoholnim hepatitisom (AAH) sa simptomima teške hepatocelularne insuficijencije. Kontrolnu grupu činilo je 30 praktično zdravih osoba (donatora).

Studije su rađene na osnovu sopstvenih zapažanja i podataka iz medicinske dokumentacije (klinička istorija bolesti, ambulantna kartica, zaključci specijalista za parakliničke metode ispitivanja).

Pacijenti su primljeni u kliniku u fazi pogoršanja osnovne bolesti. U postavljanju dijagnoze korištene su trenutno prihvaćene klasifikacije. Klinička dijagnoza je postavljena na osnovu pritužbi pacijenata, anamneze, fizikalnih podataka, laboratorijskih i instrumentalnih metoda istraživanja. U anamnezi je posebna pažnja posvećena hirurškim intervencijama, transfuzijama krvi, uzimanja alkohola i intravenskih droga, dugotrajnoj upotrebi hepatotoksičnih lijekova, te prisutnosti nasljednih bolesti.

Kriterijumi isključenja: popratna patologija centralnog nervnog sistema, liječenje lijekovima koji imaju neurotoksične nuspojave.

Koncentracije MBP i NSE u serumu određene su enzimskim imunosorbentnim testom korištenjem kompleta reagensa komercijalnih test sistema 449-5830 DSL MBP i 420-10 Fujirebio NSE.

Statistička obrada podataka obavljena je pomoću softverskog paketa Statistica 6.0. Studentov parametarski test (t) korišten je za kvantifikaciju karakteristika dvije nepovezane grupe. Korelaciona analiza sa proračunom koeficijenta korelacije (r) izvršena je pomoću Spearmanovog testa. Razlike su smatrane statistički značajnim na postignutom nivou značajnosti str<0,05.

Rezultati i diskusija. Koncentracija MBP kod pacijenata sa CG virusne etiologije iznosila je u proseku 1,9±0,27 ng/ml, mešovitih - 2,3±0,3 ng/ml, autoimunih 2,17±0,19 ng/ml, što se nije značajno razlikovalo od rezultata dobijenih u grupi donora — 1,9±0,3 ng/ml (p>0,05) (slika 1). Značajnije povećanje nivoa MBP utvrđeno je kod pacijenata sa hroničnim hepatitisom alkoholne etiologije, u iznosu od 2,9±0,39 ng/ml, što je značajno premašilo vrednosti dobijene u kontrolnoj grupi, kao i kod pacijenata sa virusnom etiologijom. bolesti (str<0,05). Максимальная концентрация ОБМ в сыворотке крови была выявлена в группе больных ОАГ, составив в среднем 5,4±0,17 нг/мл, что достоверно превышало показатели, характерные как для здоровых лиц, так и для больных хроническим гепатитом вирусной, смешанной, аутоиммунной и алкогольной этиологии (р<0,05). В исследуемой группе пациентов ОАГ максимальная концентрация ОБМ в периферической крови наблюдалась в 75% случаев.

Rezultati dobijeni u ispitivanju koncentracije NSE kod pacijenata sa CG i OAH bili su nešto drugačiji (slika 2).

Koncentracija NSE kod pacijenata sa hroničnim hepatitisom virusne etiologije bila je 6,9±0,41 ng/ml, mešovitim - 7,4±0,37 ng/ml, autoimunim - 6,4±0,52 ng/ml. Dobijeni rezultati su bliski i nisu se značajno razlikovali od vrijednosti dobijenih u kontrolnoj grupi - 6,49±0,41 ng/ml (p>0,05).

Nivo NSE kod pacijenata sa hroničnim hepatitisom alkoholne etiologije iznosio je u proseku 8,1±0,51 ng/ml, što je značajno više nego u kontrolnoj grupi, kao i kod pacijenata sa autoimunim i hroničnim hepatitisom virusne etiologije (p<0,05).

Najznačajnije povećanje koncentracije NSE, kao i MBP, utvrđeno je kod pacijenata sa OAH, u proseku 14,3 ± 0,47 ng/ml, a kod 81% pregledanih pacijenata dobijeni rezultati su značajno premašili one karakteristične za donore, tj. kao i pacijenti sa hroničnim hepatitisom virusne, mješovite, autoimune i alkoholne etiologije (r<0,05), достигая 25 нг/мл.

Rice. 1. Koncentracija MBP u bolesnika s kroničnim hepatitisom, ovisno o etiologiji:

Rice. 2. Koncentracija NSE kod pacijenata sa hroničnim hepatitisom, zavisno od etiologije:

1 - virusni hepatitis (HBV, HCV); 2 - autoimuni hepatitis; 3 - alkoholni hepatitis;

4 - hepatitis mješovite etiologije; 5 - kontrola

Visoka koncentracija u perifernoj krvi proučavanih markera oštećenja nervnog tkiva, kao što su MBP i NSE, koje smo otkrili kod alkoholnog oštećenja jetre, vjerovatno je manifestacija demijelinizacijskih procesa, često uočenih u ovoj patologiji. Otkrivene zakonitosti govore u prilog tome da razlozi za nastanak atrofičnih promjena na mozgu i oštećenja nervnih vlakana (čiji su markeri MBP i NSE), koji se često nalaze kod osoba koje zloupotrebljavaju alkohol, nisu samo neurotoksični učinak etanola i njegovih metabolita, ali i faktori kao što su disfunkcija jetre, pothranjenost, kao i nedostatak vitamina B i nikotinske kiseline.

Kao što je već spomenuto, glavni etiološki faktor koji dovodi do nastanka kroničnog hepatitisa je hepatotropna virusna infekcija.

Koncentracije MBP i NSE u krvnom serumu bolesnika s kroničnim hepatitisom u zavisnosti od tipa hepatotropnog virusa (B i C) bile su bliske i nisu se značajno razlikovale jedna od druge, kao ni od pokazatelja dobijenih u kontroli (p >0,05). Takođe, nije bilo značajnih razlika u koncentracijama proučavanih markera destrukcije nervnog tkiva kod pacijenata sa KHK sa genotipom 1 i genotipom „non-1“ (2 i 3a). Shodno tome, nivo parametara koje smo proučavali u perifernoj krvi ne zavisi od vrste virusa.

Važno je napomenuti da se koncentracije MBP i NSE kod pacijenata sa CG virusne i CG mešovite etiologije (virusna + alkoholna) ne razlikuju značajno jedna od druge, kao ni od rezultata dobijenih u kontroli (p>0,05). Istovremeno je utvrđeno da kombinacija virusnih i alkoholnih faktora ima značajniji uticaj na stanje proučavanih markera neurodestrukcije nego samo kod virusne etiologije. Dakle, ako je kod pacijenata s mješovitom etiologijom razina MBP u 42% slučajeva premašila pokazatelje karakteristične za zdrave osobe, onda kod kroničnog virusnog hepatitisa samo u 30%. Koncentracija NSE je u 39% slučajeva premašila pokazatelje karakteristične za zdrave osobe s mješovitom etiologijom bolesti, a samo u 31% s virusnom. Po našem mišljenju, ovo indirektno ukazuje da je visoka koncentracija proučavanih markera oštećenja nervnog tkiva, otkrivena kod nekih pacijenata sa CG, karakterističnija za prisustvo takvog etiološkog faktora kao što je zloupotreba alkohola.

Provedena u opštoj grupi pacijenata sa CG korelacionom analizom vrednosti MBP i NSE pokazala je odsustvo značajnih veza između ovih pokazatelja. Istovremeno, u grupi pacijenata sa alkoholnim oštećenjem jetre utvrđena je slaba pozitivna korelacija između koncentracija MBP i NSE (r=0,45), što, po našem mišljenju, indirektno ukazuje na slične mehanizme koji dovode do povećanja nivo ovih markera oštećenja nervnog tkiva u ovoj patologiji.

Otkriveni obrasci omogućavaju da se određivanje nivoa MBP i NSE u krvnom serumu pacijenata sa hroničnim hepatitisom koristi kao dodatni marker u dijagnozi različitih etioloških oblika hroničnog hepatitisa, prvenstveno alkoholne etiologije, kao i za identifikaciju prisutnost demijelinizacijskih procesa u ovoj patologiji.

S obzirom da postoje etiološke karakteristike prirode toka ciroze, brzine progresije, razvoja komplikacija, rađena je studija koncentracije MBP i NSE u zavisnosti od etiologije bolesti. 27 pacijenata (35%) ima dijagnozu ciroze virusne etiologije, 18 (23%) - alkoholičara, 22 (29%) je imalo u anamnezi zloupotrebu alkohola i virusni hepatitis istovremeno (mešovita etiologija), 10 pacijenata (13%) ) dijagnosticirana primarna bilijarna ciroza. Koncentracije MBP i NSE kod pacijenata sa cirozom virusne etiologije bile su 2,3±0,42 i 8,2±0,56 ng/ml, mešovite - 2,7±0,34 i 7,8±0,43 ng/ml, žučne 3,2±0,39 i 8,3±0,56 ng/ml. alkoholno 3,4±0,3 i 8,9±044 ng/ml, respektivno.

Srednje vrijednosti koncentracije NSE u grupama bolesnika s cirozom virusne, bilijarne i alkoholne etiologije su značajne (p<0,05) превышали показатели в контрольной группе. В то же время отсутствовали достоверные различия концентраций НСЕ в периферической крови в зависимости от этиологии ЦП. Результаты проведённого исследования свидетельствуют, что на стадии ЦП, в отличие от ХГ, концентрация данного маркера нейродеструкции в периферической крови не связана с этиологией заболевания.

Shodno tome, u fazi formirane ciroze, uzroci koji izazivaju povećanje nivoa NSE u perifernoj krvi su nešto drugačiji od onih kod hepatitisa (OAG, CG). Vjerojatno vodeću ulogu igra neurotoksični učinak produkata endogene intoksikacije koji cirkuliraju u krvi u teškoj disfunkciji jetre, a ne direktno djelovanje etanola i njegovih metabolita.

Pored toga što se NSE prvenstveno odnosi na intracelularne enzime centralnog nervnog sistema i smatra se jednim od najspecifičnijih pokazatelja njegovog oštećenja, istovremeno postoji pet molekularnih oblika NSE izoenzima koji se nalaze ne samo u neuronima, već i također u neuroendokrinim stanicama, skeletnim mišićima, jetri, eritrocitima i trombocitima, a fluktuacije njegovog općeg nivoa mogu biti direktno povezane s teškim poremećajem funkcije jetre i razvojem različitih komplikacija karakterističnih za cirozu.

Rezultati dobijeni u ispitivanju nivoa MBP u perifernoj krvi pacijenata sa cirozom različite etiologije donekle su se razlikovali.

Dakle, rezultati studije pokazuju da su kod ciroze bilijarne (3,2±0,39 ng/ml) i alkoholne (3,4±0,3 ng/ml) etiologije vrijednosti MBP značajno povećane u odnosu na kontrolnu grupu - 1,9 ± 0,3 ng/ml i bolesnici sa cirozom jetre virusne etiologije - 2,3±0,42 ng/ml (p<0,05). При ЦП вирусной этиологии уровень ОБМ был наиболее низким, сопоставимым с показателями, полученными в контроле (р>0,05). Kod ciroze mješovite etiologije (2,7±0,34 ng/ml) njen nivo je bio nešto viši nego kod virusne ciroze, a samim tim i više nego u kontrolnoj, ali u poređenju dobijenih rezultata nisu nađene značajne razlike (p>0,05) . Uprkos značajnoj razlici u parametrima zapremine krvi kod pacijenata sa cirozom alkoholne etiologije i PBC u poređenju sa kontrolnom, nismo otkrili značajnu razliku u nivou proučavanog proteina između ovih ispitivanih grupa pacijenata (p>0,05). Prosječne vrijednosti koncentracije MBP u perifernoj krvi kod pacijenata s cirozom jetre mješovite i alkoholne etiologije neznatno su se razlikovale jedna od druge: 2,7±0,34 i 3,4±0,3 ng/ml, respektivno, nije pronađena značajna razlika (p> 0 .05). Dobijeni rezultati su prikazani na sl. 3 i 4.

Rice. 3. Koncentracija NSE kod pacijenata sa cirozom u zavisnosti od etiologije: 1 - ciroza virusne etiologije (HBV, HCV); 2 - primarna bilijarna ciroza; 3 - ciroza alkoholne etiologije; 4 - CP mješovite etiologije; 5 - kontrola

Rice. 4. Koncentracija MBP kod pacijenata sa cirozom u zavisnosti od etiologije: 1 - ciroza virusne etiologije (HBV, HCV); 2 - primarna bilijarna ciroza; 3 - ciroza alkoholne etiologije; 4 - CP mješovite etiologije; 5 - kontrola

Dakle, otkriveni obrasci su slični rezultatima dobijenim kod pacijenata sa CG, u čijoj grupi je uočena maksimalna koncentracija MBP u plazmi i kod alkoholne etiologije bolesti.

Zaključak. Kod alkoholnog oštećenja jetre, kako u fazi hroničnog hepatitisa tako i formirane ciroze, dolazi do značajnog povećanja koncentracije MBP u krvi u odnosu na virusne lezije, što potvrđuje našu pretpostavku da, pored neurotoksičnog dejstva produkata endogene intoksikacije koji cirkulišu u krvi kod teških oštećenja jetre, značajnu ulogu u procesima neurodestrukcije i demijelinizacije nervnih vlakana igra direktno štetno dejstvo etanola i njegovih metabolita.

Bibliografska veza

Predstavljamo Vam časopise koje izdaje izdavačka kuća "Akademija prirodne istorije"