Искусственное оплодотворение. Как часто применяется ЭКО

Экстракорпоральное оплодотворение (от лат. extra - снаружи, вне и лат. corpus - тело, то есть оплодотворение вне тела, сокр. ЭКО́) - вспомогательная репродуктивная технология, используемая в случае бесплодия. Синонимы: «оплодотворение в пробирке», «оплодотворение in vitro», «искусственное оплодотворение», в английском языке обозначается аббревиатурой IVF (in vitro fertilisation).Эта технология позволяет стать матерями женщинам в самых безнадежных случаях. ЭКО проводится во всех развитых странах мира и ежегодно на свет рождается несколько тысяч «детей из пробирки». У верующих людей, среди которых тоже есть бездетные, вполне обоснованно возникает вопрос: приемлем ли этот метод с точки зрения Православной Церкви? Попробуем разобраться в том, как происходит ЭКО и к каким последствиям она приводит.

Немного истории

Во время ЭКО яйцеклетку извлекают из организма женщины и оплодотворяют искусственно в условиях «in vitro» («в пробирке»), полученный эмбрион содержат в условиях инкубатора, где он развивается в течение 2-5 дней, после чего эмбрион переносят в полость матки для дальнейшего развития.

Впервые успешно эта медицинская технология была применена в Великобритании в 1977 году, в результате чего в 1978 году родилась Луиз Браун (англ. Louise Brown) первый человек, «зачатый в пробирке». Первый ребёнок (девочка), зачатый с помощью ЭКО в Советском Союзе, был рождён в феврале 1986 года. Процедура была выполнена в Москве, в Центре охраны здоровья матери и ребёнка, называемом в наши дни Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии (НЦ АГиП). Чуть позже в Ленинграде в том же 1986 году родился мальчик Кирилл. Данным событиям предшествовали серьёзные исследования, которые начинают целенаправленно проводиться в Советском Союзе с 1965 года. В это время создаётся группа раннего эмбриогенеза, которая в 1973 году переросла в лабораторию экспериментальной эмбриологии (руководитель - проф. Б. Леонов). По данным на 1994 год, в этой лаборатории родилось более 1,5 тыс. детей. В 1990 году на нашей планете насчитывалось свыше 20 тыс. детей, зачатых в пробирке. В 2010 году - около 4 млн. Наибольшей интенсивности применения процедура ЭКО достигает в Израиле, где на 1 миллион жителей приходится 3400 процедур ЭКО в год.

Показания:
Показанием к проведению процедуры ЭКО являются различные формы мужского и женского бесплодия. Согласно приказу N67 Минздрава РФ показанием к ЭКО является «бесплодие, не поддающееся терапии, или вероятность преодоления которого с помощью ЭКО выше, чем другими методами. При отсутствии противопоказаний ЭКО может проводиться по желанию супружеской пары (женщины, не состоящей в браке) при любой форме бесплодия».

Противопоказания: Противопоказаниями для проведения ЭКО являются состояния женщины, при которых беременность и роды угрожают здоровью матери или ребёнка, а именно:

соматические и психические заболевания, являющиеся противопоказаниями для вынашивания беременности и родов;
врожденные пороки развития или приобретенные деформации полости матки, при которых невозможна имплантация эмбрионов или вынашивание беременности;
опухоли яичников;
доброкачественные опухоли матки, требующие оперативного лечения;
острые воспалительные заболевания любой локализации;
злокачественные новообразования любой локализации, в том числе в анамнезе.

Противопоказания для проведения ЭКО со стороны мужчины отсутствуют.

Технология

Технологию ЭКО осуществляют в специализированных медицинских учреждениях в условиях амбулаторного лечения. Для проведения процедуры экстракорпорального оплодотворения необходимо получить яйцеклетки, получить сперматозоиды, провести оплодотворение in vitro, вырастить эмбрион, ввести эмбрион в полость матки женщины.

Как правило, для экстракорпорального оплодотворения стараются получить несколько яйцеклеток, так как это повышает эффективность лечения бесплодия этим методом. Поскольку в норме у женщины в течение одного менструального цикла созревает одна яйцеклетка, то для получения нескольких яйцеклеток проводят так называемую процедуру «стимуляции суперовуляции». Для этого пациентке назначают инъекции гормональных препаратов.

Созревание яйцеклеток непосредственно не может быть определено неинвазивными методами. Поэтому о созревании яйцеклеток судят косвенно по росту фолликулов яичника. Рост фолликулов наблюдают с помощью аппаратов ультразвукового исследования. При достижении доминантным фолликулом определенного размера (16-20 мм) назначают процедуру извлечения яйцеклеток - пункцию фолликулов яичника. Пункцию фолликулов проводят под общей (чаще) или местной (реже) анестезией, иглу проводят трансвагинально, ход иглы контролируют аппаратом УЗИ. Целью пункции является аспирация (отсасывание) содержимого фолликула (фолликулярной жидкости). Полученную жидкость исследуют с помощью микроскопа для обнаружения яйцеклеток.

Обнаруженные яйцеклетки отмывают от фолликулярной жидкости и переносят в лабораторную посуду с культуральной средой. В качестве лабораторной посуды используют чашки Петри, либо культуральные планшеты. Посуду с яйцеклетками помещают в инкубаторы, где они содержатся до оплодотворения.

Обычно использование гормональных препаратов и проведение пункции фолликулов не вызывает негативных реакций у пациентки, но иногда могут возникнуть осложнения. Осложнением стимуляции суперовуляции является синдром гиперстимуляции яичников (СГЯ), который может развиться спустя несколько дней после окончания стимуляции. СГЯ возникает при созревании большого количества фолликулов, которые, трансформируясь в желтые тела, секретируют большое количество эстрогенов. При тяжелом течении СГЯ может потребоваться госпитализация больной. Осложнением пункции фолликулов может явиться гематома яичника.

При невозможности получить яйцеклетки у пациентки (отсутствие яичников, менопауза и пр.) возможно использование донорских яйцеклеток (то есть яйцеклеток другой женщины). В качестве донора яйцеклеток может выступать бескорыстный донор (родственница, знакомая) или платный донор. Условия работы с донором яйцеклеток регламентирует приказ N67 Минздрава РФ

При невозможности использования спермы мужа (по медицинским показаниям) или при отсутствии у пациентки полового партнёра, возможно использование спермы донора. Использование спермы донора производится при обязательном письменном согласии супруга и регламентируется приказом N67 Минздрава РФ. Согласно этому приказу сперма донора используется не ранее, чем через 6 месяцев хранения в замороженном состоянии с целью получения в этот период данных об отсутствии инфекционных заболеваний у донора спермы.

Непосредственно ЭКО проводится врачами-эмбриологами в условиях эмбриологической лаборатории. Собственно оплодотворение проводят одним из двух способов:

1) инсеминация in vitro;

2) интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ICSI, ИКСИ).

При первом, более простом способе к яйцеклеткам, которые находятся в питательной среде, добавляют суспензию сперматозоидов. Сперматозоиды добавляют из расчета 100-200 тыс. на одну яйцеклетку. В течение 2-3 часов один из сперматозоидов проникает в яйцеклетку и тем самым оплодотворяет её. При втором способе (ИКСИ) сперматозоид вводят в яйцеклетку «вручную» с помощью микрохирургических инструментов. ИКСИ используют при очень плохом качестве спермы, когда оплодотворение не может быть получено даже в чашке.

После проникновения сперматозоида яйцеклетка считается эмбрионом. Вероятность успешного оплодотворения 60-70 % . Эмбрионы содержат в искусственных условиях от 2 до 6 дней

Перенос эмбриона в матку осуществляют через 2-5 дней после оплодотворения яйцеклетки. Процедура не требует анестезии (обезболивания) и выполняется на гинекологическом кресле в течение нескольких минут. Эмбрион переносят в матку, проводя через шейку матки специальный эластичный катетер. Согласно приказу N 67 Минздрава РФ в полость матки не рекомендуется переносить более 4 эмбрионов, чтобы избежать многоплодной беременности. Современная практика ЭКО в России такова, что обычно осуществляют перенос 2 эмбрионов.

Эффективность экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) в целом составляет порядка 30-35 %. Значение может изменяться в зависимости от возраста, причин бесплодия, квалификации врачей и уровня клиники (в связи с тем, что материально-техническое оснащение имеет немаловажное значение). Из 20 наступивших беременностей родами заканчиваются в среднем 18. После введения эмбрионов один раз в 3 дня нужно контролировать уровень гормонов в крови. Через 12 дней выполняется тест на беременность.

В случае многоплодной беременности по желанию женщины выполняют редукцию - удаление ненужных эмбрионов. Редукция проводится на сроке от 5 до 13 недель, наилучшим периодом считаются 8 и 9 недели. По своему смыслу редукция это тот же аборт, только при ней уничтожаются не все зачатые дети, а один или несколько, а один, два или (реже три) остаются жить и развиваться.

На сроке до 6 недель редукция производится при помощи вакуум-аспиратора, которой вводят в полость матки к «ненужному» эмбриону и отсасывают его. На сроке 7-8 недель специальной иглой инвагинально проникают в грудную полость эмбриона и делают впрыскивание хлорида кальция, после чего младенец погибает и его тело рассасывается. На сроках от 9 до 13 недель орудием редукции остается точно такая же игла, только вводят ее через живот беременной. Этот способ считается наиболее удобным и наиболее безопасным для остальных плодов и самой женщины.

Роды

Роды при беременности после ЭКО ничем не отличаются от обычных. В тех случаях, когда причина бесплодия - болезнь женщины, роды проводятся с учётом конкретной болезни и к способу оплодотворения это уже не имеет никакого отношения.

По мнению врачей, зачатые в пробирке дети ничем не отличаются от остальных. Тем не менее есть мнение, что такие дети лучше учатся, но значительно более импульсивные и чаще болеют. Некоторые врачи считают, что это может быть связано с чрезмерной опекой желанного ребёнка.

Мнение Церкви

В своем официальном документе «Основы социальной концепции» (2000) Русская православная церковь рассматривает различные проблемы биоэтики, к которым относятся и вопросы преодоления бесплодия. К нравственно допустимым методам преодоления бесплодия отнесено «искусственное оплодотворение половыми клетками мужа, поскольку оно не нарушает целостности брачного союза, не отличается принципиальным образом от естественного зачатия и происходит в контексте супружеских отношений».

Церковь даёт неодобрительную оценку тем вариантам экстракорпорального оплодотворения, при которых используются донорская сперма, донорские яйцеклетки или суррогатная мать: «Использование донорского материала подрывает основы семейных взаимосвязей, поскольку предполагает наличие у ребёнка, помимо „социальных“, ещё и так называемых биологических родителей. „Суррогатное материнство“, то есть вынашивание оплодотворённой яйцеклетки женщиной, которая после родов возвращает ребёнка „заказчикам“, противоестественно и морально недопустимо…». Также Церковь выступает против тех вариантов ЭКО, при которых могут быть получены заведомо большее количество эмбрионов, чем это необходимо для переноса в матку: «Нравственно недопустимыми с православной точки зрения являются также все разновидности экстракорпорального (внетелесного) оплодотворения, предполагающие заготовление, консервацию и намеренное разрушение „избыточных“ эмбрионов. Именно на признании человеческого достоинства даже за эмбрионом основана моральная оценка аборта, осуждаемого Церковью». Именно процедура редукции вынуждает говорить «Нет» ЭКО, поскольку уничтожение живых эмбрионов считается убийством.

Также Церковь обращает внимание на то, что: «Употребление репродуктивных методов вне контекста благословенной Богом семьи становится формой богоборчества, осуществляемого под прикрытием защиты автономии человека и превратно понимаемой свободы личности».

Искусственное оплодотворение

Искусственное оплодотворение

Искусственное оплодотворение – это процесс оплодотворения, который производится с помощью введения спермы непосредственно в матку (искусственная инсеминация) или методом in vitro (вне организма, «в пробирке»), т.е. экстракорпорально (ЭКО).

Виды искусственного оплодотворения:

1. искусственная инсеминация спермой мужа или донора (ИИСМ/ИИСД);
2. экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО).

В зависимости от показаний женщине подбирается программа искусственного оплодотворения.

1. Внутриматочная инсеминация – это введение специально подготовленной спермы с помощью специального катетера непосредственно в полость матки.

   Таким образом, сперма не проходит барьеры кислой среды влагалища и плотной защитной слизи шейки матки, и сразу попадает в нейтральную среду полости матки.

   После этого сперматозоиды самостоятельно продвигаются к маточным трубам и происходит оплодотворение яйцеклетки так же, как при естественном половом контакте.

   По данным литературы искусственного оплодотворения женщины в качестве лечения бесплодия применяется уже более 100 лет. Данная процедура проводится только в специализированных медицинских клиниках при условии полного обследования мужчины и женщины.

   Обязательным является исследования состояния матки и маточных труб – гистеросальпингография (рентгенологическое исследование с применением контрастного вещества) или лапароскопия (осмотр матки с помощью оптического прибора – лапароскопа), чтобы удостоверится в проходимости репродуктивных путей.

   Для инсеминации может быть использована как нативная («живая»), так и криоконсервированная сперма (предварительно размороженная). Сперма перед искусственной инсеминацией очищается и концентрируется.

   Искусственная инсеминация рекомендована женщинам с повышенной вязкостью шеечной слизи или кислотностью влагалищной среды. Со стороны партнёра могут быть такие показания, как эрректильная дисфункция, снижение количества подвижных сперматозоидов или повышенная вязкость спермы др.

   Процедура проводится в операционной клиники, на гинекологическом кресле специальным шприцом с катетером, с помощью которого сперма и вводится в полость матки. После указанной процедуры необходимо полежать в течение 15-20 минут. Процедура не требует обезболивания.

2. ЭКО – экстракорпоральное оплодотворение – это метод искусственного оплодотворения, при котором мужские сперматозоиды и женские яйцеклетки (предварительно извлечённые из яичников), соединяются вне организма, in vitro (в «стекле», т.е. в лабораторной пробирке).

   Там происходит самостоятельное оплодотворение, и полученные эмбрионы (1 или 2) спустя несколько дней переносят в матку женщины, где один или сразу оба имплантируются в эндометрий (слизистая оболочка полости матки) и развиваются на протяжении 9 месяцев.

   Для получения яйцеклеток на протяжении 2-3 недель проводится стимуляция овуляции гормональными препаратами. После того, как созреют сразу несколько яйцеклеток репродуктолог извлекает их из яичников (проводит пункцию фолликулов) и передаёт в эмбриологическую лабораторию.

   Искусственное оплодотворение методом ИКСИ - это одна из разновидностей ЭКО. В этом случае врач эмбриолог с помощью специальных инструментов под сильным увеличением микроскопа вводит в яйцеклетку наиболее фертильный сперматозоид.

   Полученный после такого оплодотворения эмбрион ничем не отличается от эмбрионов, зачатых естественным путём, и также, через несколько дней переносится в матку женщины и развивается на протяжении 9 месяцев. Данный метод успешно применяется у пациентов с мужским фактором бесплодия, когда имеются отклонения от нормальных показателей спермы или после биопсии TESA при азооспермии.

Донорские программы при искусственном оплодотворение

Если у кого-то из супругов отсутствуют свои здоровые половые клетки ЭКО может быть осуществлено также и с донорской спермой , донорской яйцеклеткой . Донор перед сдачей своих половых клеток проходит тщательное медико-генетическое обследование. Искусственное оплодотворение спермой донора проводится только после двукратного обследования с интервалом в 3 месяца.

У пар где женщине противопоказано вынашивание ребенка (например, при тяжёлых заболеваниях сердца) или оно физически невозможно (из-за отсутствия матки) применяется ЭКО с суррогатной матерью .

Большим преимуществом ЭКО является ещё и то, что во время культивации эмбрионов в эмбриологической лаборатории есть возможность проведения преимплантационной генетической диагностики эмбриона. Этот метод позволяет выявить (если имеются) генетические заболевания, хромосомные отклонения, аномалии развития (уродства). В отличие от многих других клиник, «ВитроКлиник» ПГД проводится на весь набор хромосом человека (т.е. на все 46 хромосом). После такого анализа в матку будут перенесены только здоровые эмбрионы.

Перед любой программой искусственного оплодотворения пара проходит тщательное медицинское обследование на предмет выявления возможных противопоказаний. Перечень такого обследования регламентирован Приказом Министерства здравоохранения и строго соблюдается в нашей клинике.

Где сделать искусственное оплодотворение?

Перед тем, как обратиться к врачу по поводу преодоления бесплодия любая супружеская пара задаётся вопросом: «Где можно сделать искусственное оплодотворение на высоком профессиональном уровне?»

Перед выбором такой клиники придерживайтесь следующих рекомендаций:

• В клинике должны работать узкие специалисты именно по лечению бесплодия: гинекологи-репродуктологи, урологи-андрологи, эмбриологи и генетики.
• Центр искусственного оплодотворения должн использовать в своей работе только качественные и оригинальные лекарственные препараты и расходные материалы для ЭКО.
• Настоящие профессионалы репродуктологи с каждой парой работают индивидуально, т.е. выбор метода, схем стимуляции и поддержка ранних сроков беременности подбирается специалистом только после тщательного изучения анамнеза супругов, прошлого опыта ЭКО (если таковы имелись), возраста, состояния здоровья на данный момент и мн.др.
• Опытные репродуктологи применяют щадящие схемы гормональных стимуляций, заботясь о здоровье своих пациентов и избегая гиперстимуляций.
• Для исключения многоплодной беременности репродуктолог должен переносить только одного или двух эмбрионов (по показаниям). Три и более – недопустимо.
• Специалисты выбранной Вами клиники должны владеть всеми самыми современными техниками в репродуктивной медицине: ИКСИ, ПИКСИ, вспомогательный хэтчинг, генетическая диагностика эмбриона и др.
• Анализы спермы должны выполняться в лаборатории самой клиники специалистами эмбриологами, которые оценивают не только морфологию сперматозоидов, но и их фертильность.
• Выбирайте клинику, которая сотрудничает с клинико-диагностической лабораторией, сертифицированной по международным стандартам ISO. Качество выполняемых анализов играет важнейшую роль при подготовке к ЭКО.
• Заранее убедитесь, что от первичной консультации и до конца всей программы ЭКО или искусственной инсеминации Вас будет вести один и тот же репродуктолог (за исключением форс-мажорных ситуаций). Это говорит об ответственности и нацеленности врача и клиники на положительный результат.
• Отдавайте предпочтение тем клиникам, где врачи оставляют пациентам свои контакты для связи. У Вас будет возможность позвонить или написать на электронную почту своему лечащему врачу, если потребуются какие-то уточнения или возникнут вопросы.
• Хорошо, если в этой же клинике, где Вы будете делать ЭКО есть возможность остаться для наблюдения беременности. Врачи, зная все нюансы Вашей беременности, и имея преемственность между собой, сделают всё, чтобы довести её до конца – рождения здорового ребёнка.
• Цена в Москве на программы искусственного оплодотворения в разных клиниках может существенно отличаться. Обязательно уточняйте у менеджера, сколько стоит искусственное оплодотворение и что конкретно входит в каждую интересующую Вас программу, можно ли добавлять туда какие-то дополнительные услуги, например, ИКСИ или хэтчинг, есть ли варианты с донорскими клетками и эмбрионами. Широкий ассортимент различных программ – большой плюс клинике. Это значит, что в этом центре искусственного оплодотворения врачи владеют всеми современными техниками ВРТ и могут позволить себе подобрать любую программу для каждой пары.

Искусственное оплодотворение является не методом лечениея бесплодия, а методом преодоления бесплодия. Таким образом, оно преодолевает препятствия для достижения беременности. В настоящее время искусственное оплодотворение используется для преодоления практически любых причин бесплодия и позволяет обойти многие проблемы с зачатием.

32. Оплодотворение яйцеклеток вне организма животного (in vitro)

Положительное значение - несмотря на низкий выход ооцитов, при каждом извлечении возможность многократного использования животного.

33. Особенности оплодотворения яйцеклеток in vitro у самок разных видов с.-х. животных

Разработка системы оплодотворения и обеспечения ранних стадий развития эмбрионов млекопитающих вне организма животного (in vitro) имеет огромное значение в решении ряда научных задач и практических вопросов, направленных на повышение эффективности разведения животных.

Для этих целей необходимы эмбрионы на ранних стадиях развития, которые можно извлечь только хирургическими методами из яйцеводов, что является трудоемким и не дает достаточного числа зародышей для проведения этой работы.

Оплодотворение яйцеклеток млекопитающих in vitro включает следующие основные этапы: созревание ооцитов, капацитацию сперматозоидов, оплодотворение и обеспечение ранних стадий развития.

Созревание ооцитов in vitro. Большое число половых клеток в яичниках млекопитающих, в частности у крупного рогатого скота, овец и свиней с высоким генетическим потенциалом, представляет источник огромного потенциала воспроизводительной способности этих животных в ускорении генетического прогресса по сравнению с использованием возможностей нормальной овуляции. У этих видов животных, как и других млекопитающих, число ооцитов, овулирующих спонтанно во время охоты, составляет только незначительную часть от тысяч ооцитов, находящихся в яичнике при рождении животного. Остальные ооциты регенерируют внутри яичника или, как говорят обычно, подвергаются атрезии. Естественно возникал вопрос, нельзя ли выделить ооциты из яичников путем соответствующей обработки и провести их дальнейшее оплодотворение вне организма животного. В настоящее время не разработаны методы использования всего запаса ооцитов в яичниках животных, но значительное число ооцитов может быть получено из полостных фолликулов для дальнейшего их созревания и оплодотворения вне организма.

В настоящее время применение на практике нашло созревание in vitro только ооцитов крупного рогатого скота. Ооциты получают из яичников коров после убоя животных и путем прижизненного извлечения, 1-2 раза в неделю. В первом случае яичники берут от животных после убоя, доставляют в лабораторию в термостатированном контейнере в течение 1,5-2,0 ч. В лаборатории яичники дважды промывают свежим фосфатным буфером. Ооциты извлекают из фолликулов, диаметр которых 2-6 мм, путем отсасывания или разрезания яичника на пластинки. Ооциты собирают в среду ТСМ 199 с добавлением 10 % сыворотки крови от коровы в охоте, затем дважды промывают и отбирают для дальнейшего созревания in vitro только ооциты с компактным кумулюсом и однородной цитоплазмой.

В последнее время разработан способ прижизненного извлечения ооцитов из яичников коров с помощью ультразвукового прибора или лапароскопа. При этом ооциты отсасывают из фолликулов, диаметр которых не менее 2 мм, 1-2 раза в неделю от одного и того же животного. В среднем получают однократно 5-6 ооцитов на животное. Менее 50 % ооцитов пригодны для созревания in vitro.

Положительное значение - несмотря на низкий выход ооцитов, при каждом извлечении возможность многократного использования животного. Капацитация сперматозоидов. Важным этапом в разработке метода оплодотворения у млекопитающих было открытие явления капацитации спермиев. В 1951 г. М.К. Чанг и одновременно с ним Г.Р. Аустин установили, что оплодотворение у млекопитающих наступает только в том случае, если спермин в течение нескольких часов до овуляции находятся в яйцеводе животного. Основываясь на наблюдениях по изучению проникновения спермиев яйцеклетки крысы в различные сроки после спаривания Аустин ввел термин капацитации. Он означает, что в спермин должны произойти некоторые физиологические изменения до того, как сперматозоид приобретет способность к оплодотворению.

Разработано несколько методов капацитации эякулированных спермиев домашних животных. Для удаления белков с поверхности спермиев, которые, по-видимому, тормозят капацитацию спермиев, была использована среда с высокой ионной силой.

Однако наибольшее признание получил способ капацитации сперматозоидов с использованием гепарина (Дж. Парриш и др., 1985). Пайеты с замороженным семенем быка оттаивают в водяной бане при 39°С в течение 30-40 с. Примерно 250 мкл оттаянного семени подслаивают под 1 мл среды для капацитации. Среда для капацитации состоит из модифицированной среды Тиройда, без ионов кальция. После инкубации в течение одного часа верхний слой среды объемом 0,5-0,8 мл, содержащий большинство подвижных сперматозоидов, удаляют из пробирки и промывают дважды центрифугированием при 500 g в течение 7-10 мин. После 15 мин инкубации с гепарином (200 мкг/мл) суспензию разбавляют до концентрации 50 миллионов сперматозоидов в мл.

Оплодотворение in vitro и обеспечение ранних стадий развития эмбрионов. Оплодотворение яйцеклеток у млекопитающих осуществляется в яйцеводах. Это затрудняет доступ исследователя к изучению условий среды, в которой происходит процесс оплодотворения. Поэтому система оплодотворения in vitro была бы ценным аналитическим инструментом для изучения биохимических и физиологических факторов, включающихся в процесс успешного соединения гамет.

Применяют следующую схему оплодотворения in vitro и культивирования ранних эмбрионов крупного рогатого скота. Оплодотворение in vitro проводят в капле модифицированной среды Тироида. После созревания in vitro ооциты частично очищают от окружающих экспандированных кумулюсных клеток и переносят в микрокапле по пять ооцитов в каждой. Суспензия сперматозоидов объемом 2-5 мкл добавляется к среде с ооцитами, чтобы достичь концентрации сперматозоидов в каплях 1-1,5 млн/мл. Через 44-48 ч после осеменения определяют наличие дробления ооцитов. Затем эмбрионы помещают на монослой эпителиальных клеток для дальнейшего развития в течение 5 дней.

Итак, если зачатие ребенка традиционным способом (когда оплодотворение происходит в маточных трубах женщины спермой мужчины, попавшей туда в результате полового сношения) невозможно вследствие:
непроходимости или отсутствия маточных труб;
эндометриоза;
мужского фактора бесплодия (снижение подвижности сперматозоидов и количества сперматозоидов, вплоть до полного отсутствия сперматозоидов в эякуляте);
иммунологического фактора бесплодия -
и при условии, что предшествующие попытки преодолеть бесплодие в течение 12-18 месяцев оказались неэффективными, быть может, имеет смысл прибегнуть к возможностям, которые предоставляет ЭКО .

Необходимые условия для проведения ЭКО :
согласие обоих партнеров;
отсутствие на момент начала лечения признаков острых и хронических воспалительных процессов в половых органах женщины и мужчины;
отсутствие патологических изменений в полости матки;
отсутствие патологических образований в яичниках.

Перед процедурой необходимо тщательное обследование супругов - для повышения шансов наступления беременности и уменьшения риска возможных осложнений.

Для женщины предварительное обследование включает:
консультацию и осмотр гинеколога-эндокринолога;
ультразвуковое исследование; консультацию терапевта и других специалистов - по назначению лечащего врача;
кольпоскопию (исследование шейки матки);
обследование на инфекции: токсоплазмоз, цитомегалию, герпес, хламидиоз, сифилис, гонорею, гепатит A и B, мазок из влагалища на степень чистоты, бактериологический анализ отделяемого цервикального канала;
гормональное обследование.

Для мужчины предварительное обследование включает:
консультацию и осмотр андролога;
ультразвуковое исследование (при необходимости);
расширенную спермограмму с определением морфологии сперматозоидов, бактериологический анализ спермы, гормональное обследование, биохимическое исследование спермы (фруктоза, лимонная кислота, цинк).

Как это делается?

1. Стимуляция суперовуляции. В первый-третий день цикла женщина начинает принимать лекарственный препарат (например, меногон), стимулирующий активность яичников. Дело в том, что обычно за один цикл созревает одна яйцеклетка. Под влиянием стимулирующих препаратов созревает несколько яйцеклеток, а это увеличивает шансы на успех ЭКО . Развивающиеся фолликулы («пузырьки», в которых происходит созревание яйцеклетки) находятся под постоянным контролем: на основании данных УЗИ оценивается их размер, в крови определяется уровень эстрогенов, прогестерона и лютеинизирующего гормона 2 , оценивается состояние цервикальной слизи (т.е. слизи, находящейся в шейке матки). Обычно фолликулы достигают требуемых размеров в течение 8-10 дней, после чего женщине вводится гормон хорионический гонадотропин, обеспечивающий окончательное созревание яйцеклеток.
2. Извлечение яйцеклеток. Ультразвуковой датчик с прикрепленной к нему специальной пункционной иглой вводится во влагалище. Врач осторожно прокалывает самые большие фолликулы и собирает созревшие яйцеклетки. Вся процедура проводится амбулаторно. Во время сбора яйцеклеток женщина находится в состоянии легкого медикаментозного сна (для анестезии применяются вводимые внутривенно препараты, успокаивающие и расслабляющие нервную систему).
3. Получение сперматозоидов. Сперматозоиды либо извлекают из эякулята, либо, при отсутствии или недостаточном количестве сперматозоидов в эякуляте, их «добывают» непосредственно из яичка или из придатка яичка. Сперматозоиды не обязательно использовать сразу после извлечения из организма: их можно заморозить и хранить в специальных резервуарах - при этом после размораживания все их свойства восстанавливаются.
4. Сортировка яйцеклеток и сперматозоидов. Под микроскопом отбираются наиболее зрелые и качественные яйцеклетки. Сперматозоиды помещаются в водную среду, причем самые жизнеспособные и подвижные тут же «устремляются в плавание» (затем их вылавливают), а малоподвижные остаются на месте.
5. Оплодотворение яйцеклеток и культивирование эмбрионов. После того как яйцеклетки поживут 4-6 часов в инкубаторе, в специальных культуральных чашках с питательной средой, к ним подсаживают подготовленные сперматозоиды (причем на одну яйцеклетку приходится от 50 000 до 100 000 сперматозоидов). Сперматозоиды облепляют яйцеклетку и выделяют фермент, который помогает им проникнуть внутрь. «Стремятся» все, но получится это только у одного. Как только один из сперматозоидов оказывается внутри, срабатывает барьер, перекрывающий доступ оставшимся «на воле». Проникший внутрь сперматозоид (мужская гамета) и ядро яйцеклетки объединяются. Оплодотворение произошло - две клетки слились в одну. Клетка начинает делиться. Через 48-72 часа эмбрионы состоят из 4-8 клеток и готовы к переносу в организм женщины.
6. Перенос эмбрионов в полость матки проводят с помощью специального катетера. Для увеличения шансов на успех, как правило, вводятся 2-3 эмбриона. Эта процедура безболезненна. После успешного переноса врач назначает препараты, поддерживающие развитие эмбрионов (прогестерон, хорионический гонадотропин - ХГ). Через две недели определяют уровень ХГ в крови. Через три недели плодное яйцо можно увидеть с помощью УЗИ.

После переноса нескольких эмбрионов в полость матки возможно замораживание оставшихся и хранение их в течение длительного времени для последующего использования в том случае, если не удастся сохранить данную беременность. Использование замороженных эмбрионов позволяет женщине избежать повторной гормональной стимуляции яичников, равно как и процедуры пункции яичников.

Результативность процедуры ЭКО зависит от лаборатории, где ее осуществляют. В среднем в мире она составляет от 20 до 40%. Однако беременность при ЭКО имеет свои особенности. Во-первых, зачастую при женском бесплодии гормональные механизмы женской репродуктивной системы оказываются не в состоянии должным образом поддерживать беременность, и приходится в течение большей части, а то и всей беременности назначать соответствующую заместительную гормональную терапию. Тем не менее, остается повышенная вероятность самопроизвольного прерывания беременности. Во-вторых, после ЭКО чаще, чем обычно, наступает многоплодная беременность. Это связано с тем, что в полость матки переносят несколько эмбрионов, чтобы увеличить вероятность имплантации. Многоплодная беременность довольно часто (до 50% случаев) осложняется самопроизвольными выкидышами и преждевременными родами. Для того чтобы снизить вероятность невынашивания, после срока 10 недель беременности может производиться редукция «лишних» плодов (остановка развития плода путем пункции плодного мешка под контролем УЗИ).

Как видите, ЭКО представляет собой сложный многоступенчатый процесс, успех которого зависит от множества факторов.

История Луизы Браун

Супруги Браун (Великобритания) всегда хотели иметь детей. Мальчика и девочку. Но несмотря на все их усилия, миссис Браун никак не удавалось забеременеть. Как раз в это время английские врачи объявили о создании революционной методики преодоления бесплодия. Миссис Браун решила, что это - ее последняя надежда. Врачи взяли у нее из яичника яйцеклетку и оплодотворили ее в пробирке спермой, полученной от мистера Брауна. Убедившись, что с оплодотворенной яйцеклеткой все в порядке и она начала делиться, врачи переместили ее в матку миссис Браун. Спустя девять месяцев миссис Браун родила дочку, которую назвали Луизой.
До рождения Луизы Браун (в 1978 году) женщины с непроходимостью маточных труб и мужчины с недостаточным количеством сперматозоидов в сперме были обречены на бесплодие. Метод «зачатия в пробирке» дал шанс многим парам, ранее не имевшим надежды родить ребенка.
Развитие метода оплодотворения в пробирке началось с искусственного осеменения, первый успешный случай которого датируется 1799 годом, когда сперма мужа была введена его жене с помощью теплого шприца. Для многих рождение Луизы Браун было знаком того, что ученые зашли слишком далеко, что они вздумали равняться с Богом, вмешиваться в сам процесс творения.

«Узкие места» оплодотворения
Для того чтобы зачатие и последующее развитие беременности было успешным, необходимо, чтобы «сошелся пасьянс», составленный из множества «карт». Например:
в головном мозге должны вовремя образоваться и выделиться гормоны, стимулирующие развитие яйцеклетки;
образующаяся яйцеклетка должна быть «качественной» и не иметь хромосомных дефектов;
яйцеклетка должна созреть;
в головном мозге должно образоваться достаточное количество лютеинизирующего гормона, стимулирующего окончательное созревание яйцеклетки;
яйцеклетка должна успешно выйти из фолликула (момент овуляции);
маточная труба должна «поймать» яйцеклетку;
сперматозоиды должны живыми попасть во влагалище, быстренько через него пройти, преодолеть слизистый барьер шейки матки, добраться до маточной трубы и найти там яйцеклетку;
сперматозоиды должны суметь пробраться через оболочки яйцеклетки;
сперматозоид должен подвергнуться целому ряду биохимических превращений и «внедрить» свою ДНК (23 хромосомы) в яйцеклетку;
оплодотворенная яйцеклетка должна обладать способностью делиться;
только что образовавшийся эмбрион должен нормально делиться и развиваться;
по истечении трех дней после оплодотворения эмбрион должен достичь матки;
эмбрион должен превратиться в двухслойного зародыша;
этот зародыш должен «вылупиться» из своих оболочек;
эндометрий - выстилка стенки матки - должен быть готов к принятию зародыша;
зародыш должен «пристать» к стенке матки и «внедриться» в нее…
Затем следует череда таинственных и важных событий, связанных с последующим развитием ребенка.

Донорство яйцеклетки
Использование донорской яйцеклетки - эффективный метод лечения бесплодия у всех женщин, за исключением тех, у кого бесплодие вызвано тяжелым заболеванием матки. ЭКО с донорской яйцеклеткой может рекомендоваться женщинам, у которых собственные яйцеклетки низкого качества или их не удается получить при стимуляции яичников.
Процедура:
1. Женщина - донор яйцеклетки, выбранная бесплодной парой, подвергается тщательному всестороннему обследованию на предмет выявления инфекционных и генетических заболеваний.
2. Подписывается соглашение между всеми участвующими сторонами.
3. Бесплодная женщина-реципиент принимает препараты, подготавливающие эндометрий к принятию зародыша.
4. Зрелые донорские яйцеклетки извлекаются из яичника и в лабораторных условиях оплодотворяются сперматозоидами, полученными от партнера бесплодной женщины.
5. В течение трех дней эмбрионы развиваются «в пробирке», а затем переносятся в матку.

ИКСИ - ICSI - Introcytoplasmic sperm injection - введение сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки
ИКСИ подразумевает введение одного сперматозоида непосредственно в яйцеклетку (а не помещение яйцеклеток и сперматозоидов в одну культуральную чашку с питательной средой). Для начала, как всегда при ЭКО , яичники женщины подвергают лекарственной стимуляции, затем извлекают из них яйцеклетки. Для введения сперматозоидов используют специальные микроскопы, иглы и оборудование для микроманипуляций. Сперматозоиды извлекаются из эякулята. В случае отсутствии сперматозоидов в эякуляте прибегают к разновидности метода ИКСИ, «добывая» сперматозоиды непосредственно из яичка (ТЕЗА) или из придатка яичка (МЕЗА).
Кому показано ЭКО с ИКСИ?
Всем парам с тяжелым мужским бесплодием, которые отказываются от инсеминации донорской спермой.
Процедура ИКСИ:
1. Зрелую яйцеклетку удерживают специальной пипеткой.
2. Единичный сперматозоид удерживается и обездвиживается тонкой и острой полой иглой.
3. Этой же иглой аккуратно прокалывают оболочку яйцеклетки и вводят ее в цитоплазму яйцеклетки.
4. Сперматозоид вводят в цитоплазму и аккуратно вынимают иглу.
ИКСИ обеспечивает большую вероятность оплодотворения и, по некоторым данным, наступления беременности, чем в целом при ЭКО . Это объясняется, в частности, тем, что к ИКСИ прибегают обычно пары с мужским бесплодием, при этом яйцеклетки отличаются хорошим качеством, а организм женщины - готовностью к вынашиванию беременности. Однако следует учитывать, что мужское бесплодие часто бывает связано с генетическими дефектами У-хромосомы, которые, разумеется, передаются потомству мужского рода. Это следует учитывать при выборе ИКСИ как метода вспомогательной репродукции, по возможности проводя соответствующие генетические исследования.
Частота рождения детей с грубыми пороками развития, зачатых методом ЭКО и ИКСИ, не выше, чем при обычном зачатии.

Донорство спермы
Инсеминация донорской спермой является эффективным методом лечения мужского бесплодия (надо отметить, однако, что недавно разработанный метод ИКСИ позволяет даже при очень низких показателях спермы, т.е. в тех случаях, когда раньше требовалось донорская сперма, все-таки добиться оплодотворения сперматозоидами мужа) или решением проблемы для одинокой женщины, которая планирует беременность.
Процедура:
1. Специалисты банка спермы тщательно обследуют всех доноров на предмет инфекционных заболеваний, таких как СПИД, гепатит и другие инфекции. Сперма замораживается и сохраняется 6 месяцев, по истечении которых подвергается повторному исследованию.
2. Донор выбирается согласно желаемым внешним признакам: этнической принадлежности, цвету глаз, волос, росту, весу, группе крови и т.п.
3. Замороженная донорская сперма извлекается из банка спермы и доставляется в специальном контейнере в медицинскую клинику, где планируется ее использование.
4. У женщины определяется момент овуляции (методов для определения овуляции много - самых разнообразных).
5. В день овуляции обработанная сперма, содержащая очищенную фракцию подвижных сперматозоидов, вводится в полость матки с помощью тонкого и мягкого катетера. Эта операция совершенно безболезненна.
6. Успех донорского осеменения зависит от возраста женщины и ее репродуктивного здоровья.

Как оценить «качество» эмбрионов
К сожалению, в мире нет единой принятой системы оценки «качества» зародыша. Как правило, учитываются следующие показатели: количество клеток, упорядоченность их расположения, степень фрагментации, толщина оболочек вокруг эмбриона и т.п.
Обычно качество зародыша оценивается не ранее чем через 48 часов после извлечения яйцеклетки. К этому сроку (к концу второго дня) должно быть не менее двух клеток, лучше, если эмбрион состоит из 3-4 клеток. Через 72 часа (к концу третьего дня) эмбрион должен состоять по крайней мере из 6 клеток, а лучше - из 7 и более. В целом больше шансов выжить у эмбрионов, состоящих из большего числа клеток, упорядоченно расположенных и при отсутствии фрагментации. Качество эмбрионов оценивается под микроскопом в ЭКО -лаборатории, что позволяет прогнозировать вероятность развития беременности после переноса эмбриона. Однако в данный процесс вмешивается еще множество факторов, которые на современном уровне развития науки невозможно учесть, поэтому полученные прогнозы не всегда сбываются.

Суррогатное материнство
Суррогатное материнство - способ преодоления бесплодия женщины, которая сама не может выносить и родить ребенка (в связи с отсутствием матки, привычным невынашиванием).
В этом случае яйцеклетка бесплодной женщины, оплодотворенная спермой ее мужа, вводится в матку женщины, способной выносить и родить ребенка. Биологическими родителями ребенка считается пара, давшая яйцеклетку и сперму для образования эмбриона, а женщина, выносившая их ребенка, получила название суррогатной («вспомогательной», «заменяющей» матери).
Первоначально суррогатными матерями чаще всего были родственницы бездетной пары, но в последнее время суррогатное материнство становится профессией - биологические родители платят деньги здоровой женщине, согласной на имплантацию и вынашивание чужого эмбриона.
Суррогатное материнство - самая сложная (и, соответственно, дорогостоящая) программа в составе ЭКО . Привлечение к рождению ребенка третьего человека, ставшее возможным в результате почти фантастического прогресса медицинской науки, дало возможность ощутить радость материнства женщинам, чье бесплодие раньше было непреодолимым, но одновременно поставило перед врачами и пациентами ряд новых этических и юридических проблем.