Jinsi ya kuchukua damu kwa pcr dna hiv. Vipimo vya PCR kwa VVU: kuaminika na vipengele vya utaratibu. Ni vipimo vingapi vya VVU vinafanywa

Moja ya magonjwa makubwa ambayo bado hayajatibiwa ni virusi vya ukimwi wa binadamu.

Si rahisi kuchunguza pathojeni katika mwili: kwa sasa, mbinu chache tu za utafiti hutumiwa kwa hili.

Moja ya majaribio haya ni mmenyuko wa mnyororo wa polymerase (PCR).

Ili kuelewa korti ya njia ya mmenyuko wa mnyororo wa polymerase, unahitaji kukumbuka upekee wa muundo wa seli kutoka kwa kozi ya shule.

Kiini chochote kilicho hai kina protini na aina mbili za asidi ya nucleic: DNA na RNA. Ni miundo muhimu zaidi ya seli kwa sababu ina taarifa za kijeni zilizosimbwa kwa njia maalum.

Nambari ya DNA ni mlolongo mkali wa miundo ndogo ambayo huunda mlolongo mrefu.

Rejea! Uwezo wa asidi ya nucleic kujizalisha yenyewe hutumiwa kama msingi wa PCR.

Wakati virusi huingia kwenye seli zenye afya, huharibu nyuzi za DNA.

Katika kesi hii, kiini haitakuwa na minyororo kamili, lakini vipande vidogo tu - nucleotides. Kwa kuongeza, hata chembe ndogo zaidi za virusi zitaonekana.

Ni juu ya ugunduzi wa minyororo ya DNA iliyoharibiwa na seli za mabaki ndipo njia ya mmenyuko wa mnyororo wa polymerase hujengwa.

Kuna aina mbili za uchunguzi wa PCR:

• ubora. Inafaa kwa wale ambao utambuzi wao haujathibitishwa: inaonyesha tu ikiwa virusi iko kwenye seli.
• kiasi. Mgonjwa hupokea matokeo "DNA ya virusi haipatikani", ambayo ina maana kutokuwepo kwa VVU, au habari kuhusu kuwepo kwa pathogen, ambayo ina maana kwamba mtu ameambukizwa VVU.

Ikiwa kuna uchunguzi uliothibitishwa, uchambuzi wa kiasi unapewa. Kwa msaada wake, idadi ya nakala za RNA (DNA) ya virusi katika damu (seli) imedhamiriwa. Uchambuzi wa kiasi hufanya iwezekanavyo kutathmini ufanisi wa matibabu kwa watu walioambukizwa VVU, kuamua ukali wa ugonjwa huo, maendeleo yake.

Ni njia gani za utambuzi zinaweza kugundua maambukizo ya VVU zinaelezewa kwenye video:

Faida na hasara za njia hii ya uchunguzi

Kama kipimo chochote cha uchunguzi, PCR ina faida na hasara zake.

Faida za mbinu ni pamoja na:

• Kuegemea juu. Kwa PCR, inawezekana kuchunguza mabaki madogo zaidi ya virusi, uwezekano wa kugundua pathogen hufikia 80% siku 4-5 baada ya kuambukizwa, 100% - siku 14 baada ya kuambukizwa. Kwa hivyo, usahihi mkubwa zaidi unapatikana wakati wa kusoma DNA ya virusi katika seli za damu: virusi vinaweza kugunduliwa wakati idadi yake ni nakala 1-5 kwa seli milioni 1.
• Uwezekano wa kutumia biomatadium mbalimbali(Mate, mkojo, jasho na machozi havifaa kwa PCR, lakini damu, shahawa na usiri wa uzazi kutoka kwa wanawake unaweza kutumika).
• Uwezekano wa kufanya uchambuzi juu ya magonjwa mbalimbali kwenye mtihani mmoja. Kutumia PCR, unaweza kuchunguza VVU, chlamydia, herpes, cytomegalovirus, ureaplasma, mycoplasma, gonorrhea, trichomoniasis, toxoplasmosis.
• Kasi ya haraka ya kupata matokeo. Kuna uchunguzi wa moja kwa moja wa PCR unaokuwezesha kupata matokeo ya uchunguzi katika saa chache.
• Unyeti wa juu: PCR, tofauti, kwa mfano, ELISA, husaidia kuchunguza virusi tayari katika wiki za kwanza baada ya kuambukizwa.
• Uwezekano wa kupata matokeo ndani ya siku chache baada ya kuambukizwa. Inapoambukizwa, virusi vinaweza kuamua baada ya siku 5-14, wakati ELISA inashauriwa kutekeleza tu baada ya wiki 6.
• Hakuna vikwazo vya umri. PCR inaweza kufanywa kwa watu wazima na watoto kutoka wakati wa kuzaliwa.

Kipengele kikuu cha uchambuzi wa PCR ni kwamba hauoni antibodies kwa virusi, lakini virusi yenyewe.

Kuna hasara chache tu dhidi ya faida:

• Gharama kubwa.
• Uwezekano wa kupata matokeo chanya ya uwongo ni karibu 20%. Kawaida hii hutokea kwa sababu ya kosa la wafanyakazi (makosa katika ukusanyaji au usafiri wa biomaterial, katika utafiti wa biomaterial na tafsiri ya matokeo).
• Haja ya kutumia vifaa vya hali ya juu vya hali ya juu, ambavyo ni kliniki zingine tu zilizo na vifaa.

Makini! Kwa wazi, faida za mbinu ni kubwa zaidi kuliko hasara. Ni muhimu sana kwamba kwa msaada wa PCR inawezekana kugundua ugonjwa huo katika hatua ya awali ya maendeleo na kuanza matibabu kwa wakati.

Matokeo ya uchambuzi wa PCR inaweza kuwa chanya tayari siku 14-21 baada ya maambukizi iwezekanavyo. Lakini ikiwa uchambuzi ni mbaya, hii haina dhamana ya kutokuwepo kwa maambukizi. Ni bora kufanya mtihani wa uthibitisho na asali ya ELISA baada ya wiki 2.

Jinsi kipimo cha PCR cha VVU kinafanywa imeelezewa kwenye video:

Nani amepewa?

Kwanza kabisa, PCR imeagizwa kwa watuhumiwa wa VVU. Mbinu hiyo pia inaweza kuwa dalili ya kugundua magonjwa ya zinaa, magonjwa ya urithi.

Rejea! Uchunguzi wa PCR mara nyingi huanzishwa na mtu ambaye hajaonyesha dalili za ugonjwa huo, lakini kuna mawazo na wasiwasi juu ya maambukizi iwezekanavyo, kwa mfano, baada ya kujamiiana bila kinga, uhamisho wa damu hivi karibuni, kuwasiliana na mtu aliyeambukizwa.

Nani mwingine anaonyeshwa mtihani?

• Watu ambao wamejaribiwa kuwa na ELISA mara mbili. PCR itawawezesha kuanzisha uchunguzi wa mwisho.
• Wafadhili wanaopanga kuchangia damu.
• Watu ambao immunoblotting walithibitisha utambuzi. Uzuiaji wa kinga ni njia ya kutambua UKIMWI na kwa kawaida hufanywa kwa kushirikiana na PCR.
• Watu ambao wako katika hatua ya matibabu ya magonjwa yanayosababishwa na VVU. PCR inakuwezesha kutathmini ufanisi wa tiba.
• Watoto wachanga ambao mama yao ana VVU (maambukizi ya virusi hutokea katika takriban 30% ya matukio). Tayari wiki 2-3 baada ya kuzaliwa, inawezekana kuamua ikiwa maambukizi yametokea.

Baadhi ya watu huchunguzwa kama hatua ya kuzuia, lakini hii ni nadra kwa sababu gharama ya kupima PCR ni kubwa.

Uchambuzi huchukua muda gani na ninaweza kuupeleka wapi?

Uchunguzi wa PCR kwa VVU unafanywa katika maabara.

Sampuli ya damu yenyewe inachukua dakika 5-10, na matokeo ni tayari siku inayofuata.

Wakati wa kuchagua uchunguzi wa kueleza (kwa mfano, katika maabara "Invitro" au "Hemotest"), tafsiri ya matokeo na mtaalamu inachukua saa 2 tu.

Katika kliniki za kibinafsi, uchunguzi, ikiwa unataka, unaweza kufanywa bila kujulikana. Ili kufanya hivyo, unahitaji kuripoti hili wakati wa ziara ya kibinafsi: kila mgonjwa amepewa nambari ya serial na kupewa ufikiaji wa akaunti ya kibinafsi. Kisha mtu anaweza kujua matokeo hata bila ziara ya pili kwenye maabara.

Kuegemea kwa matokeo ya utafiti wa PCR imeelezewa kwenye video:

Gharama ya utafiti

Uchunguzi wa PCR sio nafuu, kwani wanahitaji vifaa fulani vya juu, pamoja na ujuzi maalum wa mtaalamu.

Vifaa vinapatikana tu katika baadhi ya maabara ya matibabu, ambayo inakuwezesha kuweka gharama kubwa ya uchambuzi.

Bei ya wastani ya utafiti ni rubles 3000-5000. Katika baadhi ya mikoa, gharama hazizidi rubles 1500-2000.

Kwa kuwa kuna uwezekano wa matokeo mabaya ya uongo na ya uongo, au mtu aliomba mapema sana (virusi bado haijavunja muundo wa DNA, lakini tayari iko katika mwili), mtihani wa pili unaweza kuhitajika.

Gharama kubwa pia ni kwa sababu ya ukweli kwamba idadi ya vifaa vinahitajika kwa utambuzi:

1. Sehemu ya DNA (matrix) iliyokusudiwa kukuza;
2. primers mbili;
3. Polymerase - sehemu ya kazi ya kemikali ambayo huharakisha ongezeko la idadi ya chembe za virusi kwa kasi;
4. Deoxyribonucleoside triphosphates;
5. Chembe za kushtakiwa za magnesiamu ya divalent;
6. Suluhisho maalum ambalo mchakato wa upolimishaji unafanywa. Suluhisho hili limeundwa ili kudumisha kiwango cha kufaa cha asidi, mkusanyiko wa chumvi, kiasi cha magnesiamu katika kioevu.

Pia, utafiti unahitaji kiasi kidogo cha mafuta ya petroli: ina mafuta na majipu kwenye joto la juu, ambayo inalinda sampuli chini ya utafiti kutokana na joto.

Kufanya uchambuzi

Damu, shahawa na kutokwa kwa uke vinafaa kwa uchambuzi. Kwa kawaida, mara nyingi hutumia damu ya venous.

Sampuli ya damu inafanywa asubuhi juu ya tumbo tupu.

Kwa kuongeza, unahitaji kujiandaa kwa uchambuzi:

• Siku 2-3 kabla ya utambuzi, vyakula vya mafuta vinapaswa kutengwa na lishe.
• Pombe hutolewa siku 1-2 kabla ya uchambuzi.
• Wiki 2 kabla ya uchambuzi, unahitaji kuacha kuchukua dawa za immunostimulating.
• Mlo wa mwisho unapaswa kutokea kabla ya masaa 8 kabla ya utoaji wa damu.

Wakati wa kuchukua damu kutoka kwa mshipa, bend ya ndani ya kiwiko inatibiwa na suluhisho maalum, baada ya hapo mtaalamu hupiga ngozi, huweka sindano ya sindano ya mshipa na kuchukua kiasi sahihi cha damu. Kisha sindano imeondolewa, mahali hutibiwa tena na pombe, mgonjwa hupewa swab ya pamba.

Mgonjwa lazima apige mkono kwa muda ili kuacha damu. Ikiwa mtu anahisi vizuri, anaweza kwenda nyumbani mara moja. Kwa kizunguzungu, kichefuchefu na kukata tamaa, anapewa huduma ya kwanza.

Msaidizi wa maabara huweka biomaterial iliyopatikana kwenye chupa safi na kuituma kwa uchunguzi. Mtaalamu huchanganya nyenzo za kibaolojia zilizogawanyika katika reactor maalum na vimeng'enya vinavyounganisha maambukizi mbalimbali.

Ikiwa kuna chembe chache za virusi katika damu, idadi yao huongezeka kwa kasi wakati wa kuingiliana na enzymes: reagents kuchanganya na DNA ya virusi na duplicate yake.

Uchambuzi unafanywa katika hatua kadhaa, tangu mgawanyiko wa molekuli hutokea kwa kasi. Kutoka kwa seli moja inageuka 2, kutoka 2 - 4 na kadhalika.

Kuchambua maoni na hakiki za madaktari, tunaweza kusema kwa ujasiri: kwa sasa, uchunguzi wa PCR ndiyo njia sahihi zaidi ya kupima maambukizi ya VVU.

Rejea! Kutumia uchambuzi, inawezekana kuanzisha uwepo wa virusi katika mwili tayari siku chache baada ya kuambukizwa, hata ikiwa idadi ya miundo ya virusi ni vitengo 1-5 tu kwa seli milioni. Hata hivyo, usisahau kuhusu mapungufu ya njia, kwa mfano, uwezekano wa kupata matokeo mazuri ya uongo.

Hata hivyo, PCR inabakia kuwa mojawapo ya vipimo vichache vinavyokuwezesha kutambua ugonjwa huo kwa wakati na kuanza matibabu.

Mbinu ya uchunguzi wa PCR ilitengenezwa awali miaka 35 iliyopita na mwanasayansi wa Marekani Kari Mullis. Mvumbuzi wa utafiti alipokea Tuzo ya Nobel ya kimataifa mwaka wa 1993 kwa kazi yake ya upainia. Imekuwa muhimu kwa shughuli yoyote ya maabara.

PCR hutumiwa katika biolojia ya molekuli kutengeneza nakala nyingi (kukuza) za sehemu ndogo za DNA. DNA polima inaweza tu kuongeza nyukleotidi kwa kundi lililokuwepo awali la 3-OH. Kwa hiyo anahitaji primer ambayo anaweza kuongeza nucleotide ya kwanza. Sharti hili hukuruhusu kufafanua sehemu maalum ya mlolongo wa muundo unaohitaji kutambuliwa. Mwishoni mwa mmenyuko wa PCR, mlolongo fulani utajilimbikiza katika mabilioni ya nakala (amplicons).

PCR inahusisha mchakato wa kupokanzwa na kupoeza unaoitwa baiskeli ya joto, ambayo hufanywa na mashine maalum. Mmenyuko wa mnyororo wa polymerase (PCR) ni mbinu rahisi. Inakuza kiolezo cha DNA ili kupata vipande maalum vya DNA katika vitro (uchambuzi wa in vitro). Mbinu za kimapokeo za kuunda mfuatano wa DNA katika vekta na kuiiga katika chembe hai mara nyingi huhitaji utafiti kutoka siku kadhaa hadi wiki kadhaa za kazi. Lakini unaweza kupata matokeo ya ukuzaji wa mlolongo wa DNA kwa kutumia PCR baada ya saa kadhaa.

Uchambuzi mwingi wa biochemical unaotumika katika utambuzi wa magonjwa ya kuambukiza unahitaji kiasi kikubwa cha nyenzo za kibaolojia. Kwa PCR, hali hii sio lazima. Kwa hivyo, PCR inaweza kutoa utambuzi nyeti zaidi wa pathojeni. Na viwango vya juu vya ukuzaji wa mifuatano fulani kwa muda mfupi na kiasi kidogo cha biomaterial. Vipengele hivi hufanya mbinu kuwa muhimu sana. Sio tu katika utafiti wa kimsingi, lakini pia kwa madhumuni ya kibinafsi. Ikiwa ni pamoja na upimaji wa utambulisho wa jeni, uchunguzi, udhibiti wa ubora wa viwanda.

Thamani kuu ya uchambuzi iko katika uwezekano wa kugundua patholojia za zinaa kabla ya ishara za kwanza kuendeleza. Uchunguzi wa PCR hutumiwa ikiwa utambuzi wa mapema wa maambukizi ya VVU ni muhimu. Pamoja na kuamua RNA ya virusi katika damu ya wafadhili. Kutokana na unyeti mkubwa wa uchunguzi, majibu yanaweza kupatikana siku 7-14 baada ya maambukizi ya madai. Uaminifu wa utambuzi utafikia kutoka 85 hadi 98%. Hata hivyo, mtihani wa PCR haujatolewa kwa kila mtu. Kwa sababu ni gharama kubwa ya utafiti. Muhimu zaidi, inahitaji vifaa vya gharama kubwa na ujuzi fulani wa kitaaluma kutoka kwa wafanyakazi wa maabara. Ikiwa mgonjwa hajawahi kuwa katika hali zinazohusiana na kuongezeka kwa hatari ya kuambukizwa, mmenyuko wa polymerase haupendekezi.

Mmenyuko wa aina ya polimasi ya ubora kwa VVU

Kufanya PCR ya ubora wa juu kwa VVU inakuwezesha kuamua uwepo wa ugonjwa wa virusi katika mwili. Mgonjwa anaweza kupata matokeo kwa namna ya alama zifuatazo: chanya, chanya cha uongo, hasi. Lakini utafiti haufanyi iwezekanavyo kuamua idadi ya nakala za retrovirus. Uchunguzi wa ubora haufanyiki kwa wagonjwa ambao hapo awali wamegunduliwa na maambukizi. Haijaamriwa kama udhibiti wa ufanisi wa tiba ya antiviral.

PCR aina ya upimaji kwa VVU

Inafanywa ili kuamua nakala za virusi vya RNA katika nyenzo za kibaolojia za mgonjwa. Kiwango cha PCR kinawekwa tu kwa wagonjwa walio na maambukizo yaliyotambuliwa hapo awali, kama ufuatiliaji wa matibabu yanayoendelea.

PCR ya wakati halisi

Inatumika katika uchunguzi wa maabara kwa ajili ya kuunda nakala za sehemu za DNA. Pia kwa ajili ya utafiti wa kiasi cha wakati mmoja na kugundua mlolongo wa DNA katika biomaterial. Kwa kweli, utambuzi ni PCR ya kiasi.

Kumbuka!

Katika maabara mbalimbali, unaweza kupata uundaji kadhaa wa uchunguzi: "Uamuzi wa upimaji wa PCR" na "PCR ya wakati halisi".

Uchambuzi wote ni sawa.

Kuchukua nyenzo za utambuzi wa VVU

Sampuli ya nyenzo za kibiolojia kwa uchunguzi wa VVU kwa kutumia PCR hufanyika kulingana na viwango fulani. Udanganyifu unafanywa katika chumba cha matibabu. Vyombo vya kuzaa vinavyoweza kutupwa hutumiwa. Ufunguzi wa mfuko na vyombo unafanywa moja kwa moja karibu na mgonjwa. Nyenzo zilizokusanywa zimewekwa kwenye mirija tasa iliyotibiwa awali na CrO3 (mchanganyiko wa chromium). Nyenzo ya kibiolojia ni damu ya venous, ambayo hutolewa asubuhi na kwenye tumbo tupu. Siku chache kabla ya mtihani, unapaswa kuwatenga matumizi ya pombe, mafuta na vyakula vya spicy, kuacha kuchukua dawa.

Ikiwa haiwezekani kuondoa bidhaa za dawa, hii inapaswa kuripotiwa kabla ya uchambuzi.

Zaidi ya hayo, swab kutoka kwa urethra na uke inaweza kuchukuliwa kutambua magonjwa ya zinaa yanayoambatana. Utafiti unafanywa bila kujulikana, mgonjwa hupokea matokeo binafsi. Inapendekezwa kuwa na kitambulisho nawe.

Ninaweza kuchukua PCR kwa muda gani kwa VVU

Inawezekana kugundua uwepo wa virusi vya ukimwi baadaye 4-6 siku baada ya kuambukizwa. Katika kesi hii, maudhui ya habari ya uchambuzi yatafikia 85%. Baada ya siku 10-13, uchambuzi unaweza kuamua ugonjwa huo kwa usahihi wa 98%. Matokeo mabaya yatakuwa halali tu ikiwa yatawasilishwa hakuna mapema zaidi ya wiki 2 baada ya maambukizi ya madai.

Sababu za matokeo chanya ya uwongo

Ni ngumu kupata matokeo chanya ya uwongo.

Hili linawezekana katika kesi ya kutofuata sheria za sampuli za nyenzo za kibaolojia, uwekaji lebo usio sahihi wa bomba, matumizi ya mfumo wa majaribio ya ubora wa chini, na mambo mengine sawa. Katika hali nyingine, nafasi ya kupata matokeo hayo si zaidi ya 2%.

Inachukua muda gani kupata matokeo ya mtihani?

Kwa mtazamo wa kiufundi, matokeo ya PCR yanaweza kupatikana ndani ya masaa 4. Hata hivyo, katika mazoezi, mgonjwa hupokea hitimisho la maabara kutoka siku moja hadi kadhaa. Kwa ujumla, muda unategemea mzigo wa kazi wa maabara na jinsi kazi yake imepangwa.

Kufanya mmenyuko wa polymerase katika mtoto mchanga

PCR inaagizwa wakati mtoto anazaliwa kutoka kwa mama aliye na VVU. Kufanya ELISA katika kesi hii sio habari. Kwa kuwa mtoto ana antibodies dhidi ya retrovirus hadi umri wa miaka 2. Kwa sababu hii, immunoassay ya enzyme haitatoa jibu sahihi. Wakati wa kufanya PCR kwa mtoto mwenye umri wa wiki 4-6 na kupokea matokeo mazuri, tutazungumzia kuhusu maambukizi.

Ikiwa PCR iliyofanywa katika umri wa wiki 8 hadi miezi sita inaonyesha matokeo mabaya (mradi mtoto hakulisha maziwa ya mama ya mama), maambukizi yametengwa.

Kwa nini ELISA ni bora kwa kuamua VVU?

Mmenyuko wa polymerase inakuwezesha kutambua RNA ya virusi, uwepo wake katika mwili, ikiwa ni pamoja na kiasi. Kazi ya ELISA ni kuamua antibodies kwa maambukizi ya VVU. Uchunguzi wa immunoassay wa enzyme kwa kuamua maambukizi iwezekanavyo sio duni kwa PCR, usahihi wake unafikia 99%. Hata hivyo, tofauti na PCR, haiwezi kuamua ugonjwa huo katika hatua za mwanzo za maendeleo yake.

Faida za PCR kwa VVU

• Mmenyuko wa polymerase huamua moja kwa moja uwepo wa wakala wa kuambukiza. Kwa mfano, ELISA inaweza tu kuchunguza antibodies na bidhaa za taka za microorganism.
• Kipimo kinabainisha wazi pathojeni fulani, hata kama kuna nyingi zinazoathiriwa.
• Mbinu hiyo inaruhusu kujifunza aina yoyote ya nyenzo za kibiolojia, ikiwa ni pamoja na matone kavu ya damu.

Miongoni mwa mapungufu ya PCR, mtu anaweza kubainisha unyeti ulioongezeka wa uchambuzi. Hii wakati mwingine husababisha matokeo chanya ya uwongo. Hii hutokea wakati hata kiasi kidogo cha DNA ya kigeni iko kwenye tube ya mtihani au kwenye vyombo.

Utambuzi wa VVU kwa kutumia PCR na ELISA: tafsiri, uaminifu wa matokeo

ELISA, ambayo matokeo ya mtihani yanaonyesha kutokuwepo kwa antibodies kwa VVU na antigen p24 katika mwili, ni hasi. Ikiwa molekuli hizi zipo, hitimisho chanya ya uchunguzi hutolewa. Katika hali nyingine, mgonjwa anaweza kupokea matokeo chanya ya uwongo au ya uwongo. Hii ni matokeo ya ujauzito wa mapema, uwepo wa maambukizi ya herpes, sampuli zisizo sahihi za nyenzo, na ukiukwaji wa usafiri wa zilizopo za mtihani. Kwa kuongeza, matokeo sawa yanapatikana kwa wagonjwa wenye magonjwa yanayoendelea ya autoimmune na hepatitis ya aina mbalimbali. Western Blot (kinga ya kinga) inaweza kufanywa, ambayo inachanganya ELISA na mgawanyo wa protini za virusi.

Kisha matokeo mazuri yatakuwa mbele ya glycoprotein ya maambukizi ya virusi gp160. Ni mtangulizi wa bahasha ya VVU glycoproteins gp41 na gp120. Ikiwa molekuli hizi hazipo, hitimisho la mtihani wa maabara inachukuliwa kuwa hasi. Kufanya Western Blot pamoja na ELISA hukuruhusu kupata matokeo ambayo uaminifu wake unazidi 98%. Katika kesi wakati ELISA ni chanya na Blot Magharibi ni hasi, upimaji unachukuliwa kuwa wa shaka na unahitaji PCR.

Kwa wanawake na wanaume wengi, ugonjwa huu wa zinaa ni wa wasiwasi zaidi. Kwa sababu hii, baada ya uhusiano wa karibu wa ajali bila kuzuia uzazi wa kizuizi, pamoja na mabadiliko ya mara kwa mara ya washirika wa ngono na baada ya shughuli za upasuaji, mtu mwenye busara hupata tahadhari fulani. Njia ya kuaminika zaidi ya kufafanua ni kwenda kliniki na kuchukua kipimo cha PCR cha VVU.

Mtihani wa damu unaweza kutumika kuamua viashiria vifuatavyo:

• Kukataa / uthibitisho wa uwepo wa VVU katika kipindi cha latent (katika wiki za kwanza baada ya kuambukizwa, antibodies hazipatikani katika vipimo vya ELISA kutokana na kutokuwepo kwao au mkusanyiko mdogo sana).
• Uamuzi wa genotype ya VVU-1, VVU-2.
• Utambulisho wa hali ya watoto ambao walizaliwa na wabebaji wa mama (antibodies kwa VVU hugunduliwa kwa muda mrefu kwa watoto wote waliozaliwa na wanawake walioambukizwa VVU. Inashauriwa kuamua DNA ya virusi kwa watoto chini ya umri wa miaka 48. masaa ya maisha, miezi 1-2, miezi 3-6).
• Matokeo ya uwongo-hasi, ya uongo-chanya na yenye shaka ya vipimo vya ELISA.
• Utambuzi wa kiasi cha VVU na ufuatiliaji wa mabadiliko katika mzigo wa virusi kwa muda (katika kesi ya utambuzi tayari wa UKIMWI, uchambuzi wa PCR hutumiwa kwa ubashiri, ufuatiliaji wa nguvu na ufuatiliaji wa tiba inayoendelea).

Bei ya kipimo cha PCR kwa VVU

UCHAMBUZI WA PCR KWA VVU - LINI UMEFANYIKA, KWANINI NA WAKATI GANI

1. DNA ya VVU. Uchunguzi wa DNA wa Virusi vya Ukimwi (VVU) unaweza kutumika kugundua maambukizi mapema iwezekanavyo baada ya tukio la hatari kubwa (vipimo vya damu huchukuliwa mapema kama siku 10 baada ya uwezekano wa kuambukizwa). Walakini, ili kuwatenga kabisa maambukizo, inahitajika kufanya uchunguzi wa pili na utambuzi wa ELISA katika wiki 4 na 12.
   Matokeo ya uchambuzi: DNA ya VVU (uchambuzi wa ubora)- "haijapatikana" au "kupatikana". Katika kesi ya mwisho, masomo ya ziada ya mara kwa mara yanahitajika ili kuthibitisha maambukizi ya VVU. Ikiwa matokeo ni mabaya, lakini kuna hatari kubwa ya kuambukizwa, uchunguzi wa pili unahitajika - mchango wa damu na PCR au ELISA baada ya muda fulani.
2. VVU RNA. Uamuzi wa kiasi cha VVU RNA na PCR (kinachojulikana kama "mzigo wa virusi") ni moja ya viashiria vya kutathmini utabiri wa mwendo wa maambukizi ya VVU na kiashiria cha kwanza cha ufanisi wa tiba ya antiviral. Jaribio linaonyeshwa kwa ajili ya kufuatilia mwendo wa ugonjwa huo, kuamua kama kuanza matibabu, na kutathmini ufanisi wake.
   Utafiti wa VVU RNA na PCR inaweza kutumika kwa watu wazima na utambuzi wa mapema wa kuaminika wa maambukizi iwezekanavyo baada ya sehemu ya hatari (takriban siku 7-10 baada ya maambukizi yanayowezekana). Uwepo wa titer ya juu ya RNA ya VVU kwa kutokuwepo kwa antibodies inaruhusu uchunguzi wa maambukizi ya VVU ya papo hapo. Walakini, ili kufafanua utambuzi, inahitajika kufanya uchunguzi unaorudiwa na utambuzi wa ELISA ndani ya miezi 1 na 3.
   Utoaji wa PCR HIV RNA kwa wanawake wajawazito walio na maambukizi haya wiki 3-4 kabla ya tarehe inayotarajiwa ya kujifungua inaonyeshwa ili kutatua suala la njia ya kujifungua (kupitia njia ya asili ya kuzaliwa au kwa sehemu ya caesarean).
   Matokeo ya uchambuzi: VVU aina 1 VVU RNA (uchambuzi wa kiasi)- "haijagunduliwa" (hii ni kawaida).
3. Upinzani wa VVU. Uchambuzi wa kuamua upinzani wa VVU kwa protease na reverse transcriptase inhibitors unaonyeshwa kwa wagonjwa walioambukizwa VVU na tiba isiyofaa, pamoja na wakati wa maambukizi ya papo hapo kabla ya kuanza matibabu ya antiviral. Utafiti unakuwezesha kuamua upinzani wa VVU kwa madawa ya kulevya. Kulingana na matokeo ya uchambuzi, mtaalamu wa magonjwa ya kuambukiza hujifunza kuhusu kuwepo kwa mabadiliko ya upinzani kwa inhibitors ya protease, nucleoside na non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors, pamoja na taarifa juu ya kila nafasi ya amino asidi inayohusishwa na mabadiliko ya upinzani wa madawa ya kulevya.
4. Utambuzi tata wa mara nyingi: uamuzi wa ubora wa virusi vya hepatitis C RNA / virusi vya hepatitis B DNA / virusi vya ukimwi wa binadamu (VVU) aina 1 na 2 RNA (njia ya ultrasensitive). Uchunguzi unaruhusu kutambua maambukizi ya VVU, hepatitis C na B ya virusi katika hatua ya awali. Utafiti unaonyeshwa kwa utambuzi wa mapema wa hepatitis B na C ya virusi, aina ya VVU 1/2 kwa watu walio katika hatari. Kugundua virusi vya DNA au RNA inaonyesha maambukizi.

Masharti ya utayari wa vipimo hivi vya damu - kutoka siku 3 hadi 7 za kalenda. Unaweza kupitisha uchambuzi wa ubora na kiasi wa PCR kwa uchunguzi wa maambukizi ya VVU huko Moscow katika kituo chetu cha matibabu. Sampuli ya damu kila siku, kutoka 10-00, ikiwa ni pamoja na

PCR kwa VVU ni mojawapo ya mbinu za taarifa zaidi za utambuzi wa maumbile ya molekuli. Njia hii husaidia kutambua magonjwa mbalimbali ya kuambukiza ya mgonjwa na magonjwa ambayo ni ya urithi. Njia hiyo ya uchunguzi inatumika katika kesi ya kupima biomaterial kwa uwepo wa VVU, ugonjwa mbaya unaoendelea katika maisha ya mgonjwa. Kwa usaidizi wa kimatibabu, PCR ilikuwa kati ya vipimo vilivyopendekezwa kufanywa kwa msingi wa ada kwa virusi vinavyoshukiwa vya upungufu wa kinga ya binadamu. Walakini, kuegemea kwa utafiti kunajihalalisha tu katika kesi 80 kati ya 100.

Uchunguzi wa PCR wa VVU unawakilisha mmenyuko wa mnyororo wa polymerase. Aina mbalimbali za nyenzo za kibiolojia hutumiwa kujifunza aina hii. Miongoni mwao, damu, kwa kuongeza, usiri kutoka kwa uke wa mgonjwa au maji ya seminal kwa wanaume inaweza kutumika.

Makini! Mate kwa PCR hayatumiki katika utambuzi wa VVU. Njia hiyo inatambuliwa kuwa haifai, kwa kuwa katika nyenzo hii antibodies kwa VVU ni katika mkusanyiko wa chini. Vile vile hutumika kwa mkojo, jasho na machozi.

Dalili ya utafiti ulioelezwa ni ELISA chanya mara mbili (enzymatic immunoassay). Maeneo mengine mbadala yatajadiliwa baadaye.

Zaidi juu ya kiini cha uchambuzi

Msingi wa uchambuzi wa VVU na PCR ni uwezo wa asidi ya nucleic kujizalisha yenyewe. Seli zilizo hai zinajumuisha protini na asidi hizi, kwa maneno mengine, ya RNA na DNA. Molekuli hufanya kama walinzi wa kanuni za maumbile.
Katika mkusanyiko wa chini wa chembe za virusi (VVU) katika biomaterial, sampuli haijumuishi minyororo ya DNA (deoxyribonucleic acid), lakini vipengele vyake tu, vinavyoitwa nucleotides. Uchambuzi unaruhusu kuchunguza hata mabaki yasiyo na maana ya seli za virusi. Ni ukweli huu unaoelezea uwezo wa PCR kuonyesha matokeo katika hatua za mwanzo - wiki chache baada ya kuambukizwa VVU.

Matokeo ya ubora zaidi kutoka kwa mmenyuko wa mnyororo wa polymerase yanapaswa kutarajiwa katika utafiti wa damu ya venous. Sampuli huchujwa na vifaa. Kisha sehemu hizo zinakabiliwa na matibabu ya enzymatic. Dutu tendaji, pamoja na chembe za DNA ya virusi, fanya nakala yake. Idadi ya vipengele vile huongezeka kulingana na kanuni ya mnyororo mpaka uwepo wao (sio antibodies) katika damu ya mgonjwa unaonekana kwa wasaidizi wa maabara. Hakuna njia zilizopo za uchunguzi zinazofanya kazi kwa kanuni sawa.

Vipengele vya majibu

Kutumia njia ya PCR, unaweza kujua mapema kuhusu maendeleo ya virusi katika mwili. Kwa nini haiwezi kuitwa maarufu katika uwanja wa dawa ya bure na kufanyika kila mahali? Ukweli ni kwamba kipimo kama hicho cha VVU ni ghali sana na kinahitaji vifaa vifuatavyo:

• tumbo la asidi ya deoxyribonucleic, ikiwa ni pamoja na sehemu ya DNA iliyokusudiwa kukuza;
• primers mbili (kwa kila sehemu ya mnyororo);
• kemikali hai sehemu polymerase ili kuharakisha upolimishaji wa chembe za virusi;
• deoxyribonucleoside triphosphates;
• chembe za magnesiamu ya divalent (kushtakiwa);
• suluhisho maalum la kuunda hali nzuri, kutoa kiwango sahihi cha asidi, mkusanyiko wa chumvi, idadi ya chembe za magnesiamu kwenye kioevu.

Makini! Ili kulinda sampuli kutokana na kuongezeka kwa joto, kiasi kidogo cha mafuta ya petroli huongezwa kwenye nyenzo, ambayo ina mafuta na, ipasavyo, kiwango cha juu cha kuchemsha.

Kiwango cha juu cha usahihi wa uchambuzi ni kutokana na kuongezeka kwa unyeti, ambayo huchochea majibu ya antibodies kwa virusi vingine.

Faida na hasara za mbinu ya PCR kwa VVU

Kwa tathmini ya lengo la mbinu katika jedwali hapa chini, tunawasilisha idadi ya faida na hasara za utafiti:

Kwa wazi, faida za mbinu ni kubwa zaidi. Ikiwa tunatathmini aina ya uchunguzi katika suala la tija ya matibabu zaidi na uwezekano wa kupanua maisha ya mgonjwa, PCR ndiyo njia ya uhakika ya mafanikio.

Vipengele vya uchambuzi

Kipengele kikuu cha uchambuzi ulioelezwa ni uwezo wake wa kutambua VVU mapema, ambayo mbinu nyingine za utafiti hazina uwezo. Je, ni siku ngapi baada ya maambukizi yanayodaiwa ninaweza kutoa damu kwa ajili ya PCR? Kawaida kipindi hiki ni siku 10-14. Ndani ya masaa 24 ijayo, mgonjwa hupokea matokeo. Upungufu unaowezekana katika suala unaelezewa na hali ya kazi ya mtu binafsi ya vituo vya uchunguzi na kliniki.

Madhumuni ya utafiti

PCR mara nyingi hufanywa ili kugundua VVU (syndrome ya upungufu wa kinga ya binadamu). Hata hivyo, uchambuzi unaweza pia kuchukuliwa ikiwa unashutumu maendeleo ya magonjwa ambayo yanaambukizwa ngono. Njia hiyo hiyo inatumika katika kesi ya utambuzi wa magonjwa ya urithi.

Utambuzi wa PDR: sababu za kufanya

Je, ni lini ninapaswa kuchangia damu kwa ajili ya PCR? Mara nyingi, nyenzo za kibiolojia hutolewa wakati virusi vya ukimwi wa binadamu vimezoea hali ya mwili, kuchochea uzalishaji wa antibodies na kusababisha dalili za kwanza za VVU. Hata hivyo, hii ni haki tu ikiwa muda wa kutosha umepita baada ya kuambukizwa na inahusisha ELISA.

Uhitaji wa PCR hutokea kwa hatua ya mgonjwa ambaye anataka kutambua mara moja ugonjwa huo (kama ipo). Sababu ya hii inaweza kuwa: kujamiiana bila kinga, kuwasiliana na nyenzo za kibaiolojia za mtu aliyeambukizwa, uhamisho wa hivi karibuni wa damu, nk.

Nani amepewa PCR?

Uamuzi wa maambukizi ya VVU na PCR kwa pendekezo la mtaalamu unafanywa katika kesi zifuatazo:

• utambuzi wa awali. PCR inathibitisha kwa usahihi au inakataa matokeo ya ELISA;
• Ukaushaji wa Magharibi ulithibitisha utambuzi. Immunoblotting ni njia ya ziada ya kujifunza UKIMWI . Njia zote mbili hutumiwa pamoja, ambayo huondoa uwezekano wa kufanya uchunguzi usio sahihi;
• na hali iliyothibitishwa ya VVU kwa kutumia PCR, athari ya matibabu iliyochaguliwa inafuatiliwa;
• kwa uchunguzi wa damu wa wafadhili kwa uwepo wa antibodies ya VVU;
• kuamua hali ya VVU ya mtoto mchanga wakati mama ana virusi. PCR katika siku za kwanza za maisha inakuwezesha kuamua maambukizi ya intrauterine au maambukizi ya mtoto mchanga wakati wa kifungu kupitia njia ya kuzaliwa. Uchunguzi unafanywa wiki 2-3 baada ya kuzaliwa.

Uchambuzi wa PCR unachukua muda gani, na unaweza kuchukuliwa wapi?

Uchunguzi wa PCR kwa VVU unafanywa katika maabara maalum. Mtihani yenyewe na tafsiri ya matokeo hauhitaji muda mwingi: mwezi au hata wiki. Inachukua hadi dakika 6 kutoa damu. Katika hali ya kawaida, mtaalamu hatahitaji zaidi ya siku kufanya uchunguzi na kutoa hitimisho. Masaa 8 ya kwanza ni utafiti wa damu, wakati uliobaki hutumiwa kwenye usajili. Matokeo yanaweza kuchukuliwa siku inayofuata baada ya kuchukua sampuli. Muda wa majaribio ya moja kwa moja ni masaa 2.

Makini! Sera ya bima ya matibabu ya lazima inafanya uwezekano wa kupita mtihani bila malipo katika taasisi ya afya ya umma.

Karibu maabara yoyote ya kibiashara ina uwezo wa kufanya utafiti, na kwa msingi usiojulikana. Mtu hupewa nambari maalum, ambayo matokeo yanafungwa. Taarifa hii imepakiwa kwenye tovuti ya taasisi katika akaunti ya kibinafsi ya mtumiaji.

Je, ni gharama gani kufanya mtihani wa PCR?

Njia hii ya kufanya utafiti ni ghali kabisa. Hii ni kutokana na ukweli kwamba ni muhimu kutekeleza PCR kwenye kifaa cha hivi karibuni cha matibabu, kudanganywa kunahitaji ujuzi wa kutosha kutoka kwa wataalamu.

Swali la dharura: ni kiasi gani cha gharama kwa mtu kuchukua kipimo cha PCR cha VVU? Hii itahitaji karibu dola 56-60.

Kufanya uchambuzi

Kufanya uchunguzi wa PCR wa VVU kunahusisha:

• sampuli ya damu kwa ajili ya utafiti;
• sampuli za ziada za manii kutoka kwa mwanamume na ute wa sehemu za siri kutoka kwa mwanamke.

Makini! Matokeo yake, mtihani unaruhusu madaktari kuamua mzigo mkubwa wa virusi ili kufuatilia hali ya mgonjwa.

Vipengele vingine vya kipimo hiki cha VVU cha kuzingatia:

• siku chache kabla ya mtihani, mgonjwa anapaswa kupunguza kiasi cha vyakula vya mafuta katika chakula;
• sampuli ya damu hufanyika kwenye tumbo tupu;
• Enzymes zinazounganisha maambukizo anuwai huongezwa kwa nyenzo za kibaolojia zilizogawanyika kwenye kinu maalum;
• uchambuzi unafanywa katika hatua kadhaa, tangu mgawanyiko wa molekuli hutokea katika maendeleo ya hesabu. Mpango maalum unalinganisha idadi kubwa ya miundo ya seli kwa ajili ya kugundua VVU.

Njia sahihi za uchunguzi, ambazo ni pamoja na PCR, ni ghali, lakini zinaweza kugundua VVU mapema. Katika matibabu ya patholojia hizo, jambo muhimu zaidi ni utambuzi sahihi na wa wakati, ambao unaweza kuboresha ubora wa maisha ya binadamu na muda wake.

Njia moja sahihi na ya kuaminika ya utambuzi wa maumbile ya Masi inachukuliwa kuwa PCR, ambayo ni, mmenyuko wa mnyororo wa polymerase. Njia hii inaruhusu kutambua aina mbalimbali za magonjwa ya asili ya urithi na ya kuambukiza kwa mgonjwa.

PCR - utafiti utapata kutambua moja ya magonjwa magumu kama, ambayo ni vigumu kutibu. Kuegemea kwa PCR kwa VVU kunajihalalisha tu katika kesi 80 kati ya 100.

Njia kuu ya kutambua maambukizi ya VVU katika mwili wa binadamu inachukuliwa kuwa damu yake, yaani, kupima ugonjwa huu unafanywa. Njia rahisi na ya kawaida ya utambuzi ni kuchukua damu ya venous na kuifanya katika maabara maalum. Bila shaka, matokeo mazuri yaliyopatikana yanaweza kuwa ya uongo, kwa hiyo, yanaangaliwa kwa njia sahihi zaidi ya utafiti katika maabara ya kumbukumbu.

Mmenyuko wa mnyororo wa polymerase unachukuliwa kuwa utaratibu wa gharama kubwa, na utekelezaji wake unahitaji vifaa maalum na wataalam waliohitimu sana. Ni kwa sababu hii kwamba haijapokea usambazaji mkubwa kati ya idadi ya watu.

Matumizi ya uchambuzi wa PCR kwa uchunguzi wa VVU inakuwezesha kupata matokeo sahihi na ya kuaminika kuhusu kuwepo kwa ugonjwa huo, hata hivyo, hii mara nyingi inategemea maandalizi ya mgonjwa mwenyewe.

Uchunguzi wa PCR unafanywa katika kesi zifuatazo:

1. Utambuzi wa maambukizi ya VVU kwa watoto wachanga waliozaliwa kutoka kwa mama aliyeambukizwa UKIMWI.
2. Ili kudhibiti ukolezi wa VVU katika damu ya mgonjwa
3. Upimaji wa damu ya wafadhili.

Hata kama mtihani wa PCR unaonyesha matokeo mazuri, basi utambuzi haufanyiki tu na mtihani huo. Mara nyingi hutumiwa kama njia ya ziada ya kutatua migogoro.

Uchunguzi wa PCR, kwa bahati mbaya, hauwezi kuitwa njia ya ulimwengu wote, ambayo hutoa matokeo sahihi kwa uwepo au kutokuwepo kwa maambukizi katika mwili wa binadamu. Hii ni kutokana na ukweli kwamba aina hii ya utafiti mara nyingi zaidi kuliko njia nyingine hutoa matokeo mazuri ya uongo. Njia hii ya uchunguzi hutumiwa wakati wa kutambua ugonjwa au wakati wa kufanya maambukizi ya VVU. Inatumika zaidi kama njia msaidizi ya kugundua virusi vya UKIMWI.

Hata hivyo, licha ya uwezekano wa matokeo mazuri ya uongo, mtihani huo wa VVU una faida kadhaa juu ya njia nyingine za uchunguzi. Uchunguzi wa PCR unaweza kufanyika mapema siku 11-15 baada ya tarehe ya maambukizi ya madai, na njia nyingine zote hufanya iwezekanavyo kutathmini uwepo wa virusi vya UKIMWI katika mwili wa binadamu tu baada ya muda mrefu. Tofauti hii inafafanuliwa na ukweli kwamba vipimo vingi vya uchunguzi wa VVU vinatokana na uamuzi wa virusi, malezi ambayo hutokea ndani ya miezi mitatu.

Tofauti kuu kati ya utafiti wa PCR na njia nyingine za uchunguzi ni ukweli kwamba hauoni virusi, lakini kuwepo kwa virusi yenyewe katika mwili wa mgonjwa.

Ni kwa sababu hii kwamba njia ya mmenyuko wa mnyororo wa polima inaweza kuitwa bora ikiwa kuna haja ya kugundua mapema. Kwa kuongeza, inawezekana kuamua kutekeleza njia hiyo katika kesi wakati uwepo wa antibodies hauwezi kuwa kiashiria cha kuaminika.

Jifunze zaidi kuhusu utafiti wa VVU kwenye video.

Ikiwa ni muhimu kutambua kiwango au ukali wa patholojia katika mwili wa binadamu, wanaamua kufanya utafiti wa PCR kwa njia ya kiasi. Ni yeye anayekuwezesha kupata taarifa kuhusu kiwango cha mkusanyiko wa maambukizi katika mwili wa mgonjwa. Kuendelea kwa ugonjwa huo kunafuatana na ongezeko la taratibu katika mkusanyiko wa virusi na uchunguzi wa upimaji wa PCR inakuwezesha kuamua hatua ya maambukizi na ufanisi wa unaoendelea. Kutambua "mzigo wa virusi" kabla ya utambuzi wa ugonjwa huo na baada ya matibabu inakuwezesha kufanya hitimisho kuhusu ufanisi wa matibabu.

Njia zingine za utambuzi wa VVU

Hadi sasa, utambuzi wa maambukizi ya VVU ni utaratibu wa kawaida unaohusisha matumizi ya aina mbalimbali za uchunguzi:

Mifumo ya mtihani wa ELISA

Uchunguzi kama huo wa uchunguzi unaweza kugundua virusi ndani ya wiki chache baada ya kuingia kwenye mwili wa mwanadamu. Utafiti kama huo sio lengo la kuamua uwepo wa virusi kwa mgonjwa, lakini kwa kugundua uzalishaji wa antibodies kwake. Kuna vizazi kadhaa vya vipimo vya ELISA, ambayo kila moja ina unyeti tofauti. Uchunguzi huo wakati mwingine hutoa matokeo, ambayo yanaelezewa na usindikaji usiofaa na kuwepo kwa aina mbalimbali za patholojia katika mwili wa mgonjwa.

kuzuia kinga

Katika tukio ambalo kuzuia kinga kunaonyesha matokeo mazuri, basi tunaweza kuzungumza juu ya kufanya uchunguzi wa mwisho wa VVU. Njia kuu ya utekelezaji wake ni matumizi ya ukanda wa nirocellulose, ambayo protini za asili ya virusi hutumiwa.

Mbinu za Kueleza

Hili linachukuliwa kuwa jambo geni katika uwanja wa utambuzi wa maambukizi ya VVU na matokeo yanaweza kutathminiwa ndani ya dakika chache baada ya kutekelezwa. Matokeo sahihi zaidi na ya kuaminika hutolewa na vipimo vya immunochromatographic, matumizi ambayo yanategemea kanuni ya sasa ya capillary.

Inawezekana kuzungumza juu ya uwepo wa maambukizi ya VVU katika mwili tu baada ya kuthibitisha vipimo vya ELISA na uchambuzi wa IB.

Utambuzi wa maambukizi ya VVU katika mwili wa binadamu hufanya mabadiliko makubwa katika maisha yake ya kawaida na mahusiano na wengine. Ni jukumu la wafanyikazi wa matibabu kuweka matokeo ya vipimo, na ni mgonjwa tu ndiye anayeamua ni nani wa kuripoti ugonjwa wake. PCR ni mojawapo ya njia za uchunguzi ambazo zinaweza kutambua uwepo wa virusi katika mwili wa binadamu katika wiki chache tu.