Kako uzeti sputum za analizu. Uzimanje sputuma za bakteriološku pretragu Opća klinička analiza sputuma Svrha studije
Bakteriološki pregled sputuma može otkriti uzročnike plućnih bolesti. Gnojni, krvavi grumen sputuma trlja se između dva predmetna stakla. Osušeni razmazi se fiksiraju na vatri, zatim se jedan boji po Gramu (vidi metodu bojenja po Gramu), drugi po Tsil-Nelsenu. Bojanje po Gramu omogućuje vam otkrivanje gram-pozitivnih mikroba - kapsularnog pneumokoka (slika 17),; gram negativne - Friedlanderov kapsularni diplobacillus (slika 18), Pfeifferov bacillus (slika 19) itd. Mycobacterium tuberculosis se traži u razmazu obojenom Tsil-Nelsenom. Na razmaz se stavi komad filtar papira, površine jednake razmazu, na njega se sipa cilija fuksina (1 g bazičnog fuksina se samelje u mužaru s nekoliko kapi glicerina, zatim s 10 ml 96% alkohola). i ulije u 90 ml 5% otopine fenola) i zagrijava na laganoj vatri dok se ne pojave pare. Papir se baci, razmaz se umoči u 5-10% otopinu (ili 3% otopinu u alkoholu) do promjene boje, dobro ispere vodom, boji 20-30 sekundi. 0,5% otopinom metilen modrila i isprana vodom. Crvene mikobakterije su jasno vidljive (s imerzijskim sustavom) na plavoj pozadini preparata (slika 20). Ako se u razmazu ne pronađe mycobacterium tuberculosis, pribjegava se metodi njihove akumulacije - flotaciji. 10-15 ml ispljuvka stavi se u bočicu od 250 ml s kosim ramenima, doda dvostruki volumen 0,5% otopine i protrese dok se ispljuvak potpuno ne otopi. Dodajte 100 ml destilirane vode i 1 ml (ksilol, benzin), mućkajte 10-15 minuta, dodajte vodu do vrata i ostavite 1-2 sata. Kremasti sloj koji se stvori na vrhu usisava se pipetom sa raspršivačem i kap po kap nanosi na zagrijano staklo, svaki put na prethodnu osušenu kap. Preparat se fiksira i boji po Tsil - Nelsenu. Ako je rezultat negativan, pribjegavaju se sijanju sputuma (bakteriološki pregled) ili inokulaciji u životinju (biološki pregled). Također se koriste kulture sputuma za određivanje osjetljivosti njegove flore na antibiotike.
Kemijska istraživanja. Reakcija sputuma na lakmus u pravilu je blago alkalna, može postati kisela kada se sputum raspada i kada se želučani sadržaj miješa (kiselo podrigivanje, gastrobronhijalna fistula). Protein u sputumu dolazi od upalnog eksudata i od razgradnje leukocita. Malo ga ima (u tragovima) u mukoznom ispljuvku, mnogo (1-2%) u ispljuvku kod upale pluća, još više kod plućnog edema. Da bi se to odredilo, u ispljuvak se doda dvostruka količina 3% otopine octene kiseline, snažno se protrese, filtrira, a protein se odredi u filtratu jednom od uobičajenih metoda (vidi Urin). U obzir se uzima trostruko razrjeđenje.
Bakterioskopska, bakteriološka i biološka istraživanja. Proučavanje mikrobne flore sputuma potrebno je za razjašnjavanje dijagnoze i odabir prave metode liječenja. U tu svrhu služe bakterioskopska, bakteriološka i biološka istraživanja. Bakterioskopski pregled postiže svoj cilj s relativno visokim sadržajem mikroba u ispljuvku. Za pripremu pripravaka gnojna kvržica se prenese na vanjsku trećinu stakalca, prekrije istim dijelom drugog stakalca i utrlja između njih. Razmazi se ostave da se osuše, fiksiraju prolaskom kroz plamen plinskog plamenika tri puta i oboju, jedan po Gramu (vidi metodu bojenja po Gramu), drugi po Ziehl-Nelsenu (vidi Tuberkuloza, laboratorijske pretrage). Bojanje po Gramu otkriva gram-pozitivni kapsularni pneumokok, gram-negativni kapsularni pneumokok Friedlander, Pfeifferov bacil (tisak. sl. 5, 6 i 8), staphylococcus aureus, streptokok, Vincentov bacil, spirila, kataralni mikrokok, itd. U istraživanju, zabilježite broj pronađenih bakterija u vidnom polju (malo, umjereno, mnogo) i prevlast bilo koje vrste. Ziel-Nelsen metoda boji mikrobe otporne na kiseline, uglavnom Mycobacterium tuberculosis. Mikobakterije ove boje su crvene i jasno su vidljive na plavoj pozadini (tsvetn. Slika 1).
Nešto veći postotak Mycobacterium tuberculosis otkriva se pomoću fluorescentne mikroskopije (vidi). Svjetleće mikobakterije jasno su vidljive pri pregledu razmaza suhim X40 objektivom s XYu okularom. Brisevi se pripremaju i fiksiraju kao i obično, zatim se izlijevaju 5-10 minuta. otopina boje (auramin 1:1000, akridin narančasta, mješavina auramina i rodamina), isprana vodom, obezbojena 5 minuta. klorovodičnog alkohola, ponovno ispere s vodom i obradi
otopina kiselog fuksina (kiseli fuksin 1 g, octena kiselina 1 ml, destilirana voda 500 ml) ili metilensko plavo, koji gase pozadinski sjaj. Lijek se promatra u ultraljubičastom svjetlu (tsvetn. Slika 2).
Kako bi se olakšala potraga za Mycobacterium tuberculosis, pribjegavaju se metodama akumulacije, od kojih se češće koristi metoda flotacije. U Erlenmeyerovu tikvicu ili bocu kosih ramena zapremine 250 ml stavi se 10-15 ml sputuma, doda se jednaki volumen 0,5% otopine natrijevog hidroksida i smjesa se mućka dok se ne homogenizira. Dodati 50 ml destilirane vode i 1 ml toluena (ksilol, benzin), promućkati, ponovo dodati vode do pola boce i mućkati 10-15 minuta, zatim dodati vode do grla i ostaviti 1-2 sata. Kremasti sloj formiran na vrhu se usisava pipetom sa sprejom, nanosi na zagrijano predmetno staklo, suši, fiksira i boji prema Ziehl-Nelsenu.
Bakteriološkim istraživanjem identificiraju se mikrobi, utvrđuje njihova rezistencija na lijekove, virulencija itd. Sputum se inokulira na odgovarajuće hranjive medije - guste (krvni agar) ili tekuće (šećerna juha, Tarozzi mediji), Shkolnikova polusintetička podloga; (tsvetn. sl. 3 i 4). Mikrobi uzgojeni na odgovarajućim hranjivim podlogama identificiraju, određuju njihovu patogenost (u nekim slučajevima) i rezistenciju na lijekove te preliminarno određuju rezistenciju na lijekove cjelokupne flore sputuma u cjelini. To se radi inokulacijom komadića sputuma, prethodno ispranog fiziološkom otopinom, na površinu krvnog agara u petrijevoj zdjelici. Za sjetvu se postavljaju standardni antibakterijski papirnati diskovi. Osjetljivost flore prosuđuje se prema veličini zone inhibicije rasta flore oko diska. Zatim se zasebno provodi konačno određivanje rezistencije svake bakterijske vrste izolirane iz sputuma. Da biste to učinili, 18-satna bujonska kultura svake vrste bakterija (stafilokoki, streptokoki, Klebsiella, itd.) posijana je travnjakom na Petrijeve zdjelice s krvnim agarom. Standardni papirnati diskovi s antibioticima polažu se na travnjak, pincetom ih pritiskaju na površinu agara tako da cijelom površinom čvrsto dodiruju agar. Šalice se ostavljaju na sobnoj temperaturi 1,5-2 sata; tijekom tog vremena postoji dovoljna difuzija lijeka s diskova u okolne slojeve agara. Zatim se Petrijeve zdjelice stave u termostat na t°37° 18-24 sata. Stabilnost ispitivanog soja procjenjuje se zonom inhibicije rasta bakterija oko diskova. U nedostatku zone odgode, soj se smatra otpornim. Ako se formira zona promjera 1,5-2 cm, soj se smatra slabo osjetljivim, a ako je zona veća od 2 cm, soj je osjetljiv na ovaj antibiotik.
Za kulture sputuma na Mycobacterium tuberculosis, pogledajte Plućna tuberkuloza, Test sputuma na Mycobacterium tuberculosis; za određivanje njihove osjetljivosti na antibiotike, vidi Plućna tuberkuloza, otpornost mikobakterija na lijekove.
U biološkoj studiji sputuma, životinje su zaražene. Kao dijagnostičku metodu ovu metodu istiskuju kulturološke metode.
Cilj:
Dijagnostički.
Indikacije:
Bolesti dišnog sustava i kardiovaskularne bolesti.
Oprema:
Prozirna staklenka sa širokim grlom od prozirnog stakla, smjer.
Sekvenciranje:
1. Objasniti pravila prikupljanja, dobiti suglasnost.
2. Ujutro operite zube i isperite usta prokuhanom vodom.
3. Iskašljajte i skupite 3-5 ml ispljuvka u staklenku, zatvorite poklopac.
4. Izdajte uputnicu.
5. Dostaviti u klinički laboratorij unutar 2 sata.
Bilješka:
Za određivanje dnevne količine ispljuvak se tijekom dana skuplja u jednu veću posudu i čuva na hladnom mjestu.
Nije dopušteno kontaminirati limenku izvana.
Procijenjeno: konzistencija (viskozna, želatinasta, staklasta), boja (prozirna, gnojna, siva, krvava), stanični sastav (prisutnost leukocita, eritrocita, epitela, dodatnih inkluzija).
Uzimanje sputuma za bakteriološku pretragu:
Cilj:
Identifikacija uzročnika bolesti i određivanje njegove osjetljivosti na antibiotike.
Oprema:
Sterilna epruveta ili staklenka s poklopcem (naručuju se u laboratorijskom spremniku), smjer.
Sekvenciranje:
1. Objasniti svrhu i bit prikupljanja ispljuvka, dobiti pristanak.
2. Ujutro na prazan želudac nakon toalete usne šupljine i prije imenovanja a / b.
3. Prinesite epruvetu ili staklenku ustima, otvorite je bez dodirivanja rubova posuđa rukama i iskašljajte ispljuvak ustima te odmah zatvorite poklopac, poštujući sterilnost.
4. Pošaljite analizu u bakteriološki laboratorij u roku od 2 sata u kontejneru posebnim transportom. Bilješka: sterilnost posuđa održava se 3 dana.
Uzimanje sputuma za MBT (mycobacterium tuberculosis):
Cilj:
Dijagnostički.
Postupak prikupljanja ispljuvka:
1. Objasnite bit i svrhu imenovanja, pribavite suglasnost.
2. Izdajte uputnicu.
3. Ujutro na prazan želudac nakon toalete usne šupljine, nakon nekoliko dubokih udisaja, iskašljati ispljuvak u čistu, suhu staklenku (15-20 ml), zatvoriti poklopac. Ako ima malo ispljuvka, može se prikupiti u roku od 1-3 dana, čuvajući na hladnom mjestu.
4. Dostaviti analizu u klinički laboratorij.
Bilješka: Ako je propisana kultura sputuma za VC, tada se sputum skuplja u sterilnu posudu 1 dan, čuva na hladnom mjestu i dostavlja u bakteriološki laboratorij.
Prikupljanje sputuma za atipične stanice:
Cilj:
Dijagnostički (dijagnoza, isključivanje onkopatologije).
Redoslijed prikupljanja:
1. Objasnite pacijentu pravila za prikupljanje sputuma.
2. Ujutro nakon korištenja usne šupljine sakupite ispljuvak u čistu, suhu posudu.
3. Izdajte uputnicu.
4. Odmah dostaviti u citološki laboratorij jer abnormalne stanice se brzo uništavaju.
Pravila za korištenje džepne pljuvačke:
Pljuvačnicu koriste bolesnici koji proizvode ispljuvak.
Zabranjeno je:
Ispljunuti ispljuvak na ulici, u zatvorenom prostoru, u rupčić, ručnik;
Progutati sluz.
Pljuvačnica se dezinficira kako se puni, a najmanje jednom dnevno. S velikom količinom ispljuvka - nakon svake uporabe.
Za dezinfekciju sputuma: ulijte 10% izbjeljivač u omjeru 1:1 60 minuta ili suhi izbjeljivač u količini od 200 g/l sputuma 60 minuta.
Kada se dodjeljuje ili sumnja na VK- 10% izbjeljivač 240 minuta ili suhi izbjeljivač 240 minuta u istim omjerima; 5% kloramina 240 min.
Nakon dezinfekcije ispljuvak se ispusti u kanalizaciju, a posuđe u kojem je ispljuvak dezinficiran opere se na uobičajeni način, nakon čega slijedi dezinfekcija.
Dezinfekcija džepnih pljuvaonica: kuhanje u 2% otopini sode 15 minuta ili u 3% kloraminu 60 minuta.
Pregled sputuma obuhvaća određivanje fizikalnih svojstava sputuma, njegovu mikroskopsku pretragu u nativnom brisu i bakteriološku pretragu u obojenim preparatima.
Prikupljanje građe
Iskašljaj dobiven iskašljavanjem ujutro prije jela skuplja se u čistu, suhu bocu. Prije pregleda pacijent treba oprati zube i temeljito isprati usta vodom.
Fizička svojstva
Sputum se stavi u Petrijevu zdjelicu, pregleda na svijetloj i tamnoj podlozi i opisuju se njegova svojstva. Količina ispljuvka dnevno za različite patološke procese može biti različita: na primjer, s bronhitisom - oskudna (5-10 ml), s apscesom pluća, bronhiektazijama - velika količina (do 200--300 ml).
Podjela na slojeve opaža se u slučajevima pražnjenja velikih šupljina u plućima, na primjer, apsces pluća. U ovom slučaju, ispljuvak se sastoji od 3 sloja: donji sloj sastoji se od detritusa, gnoja, gornji sloj je tekući, ponekad se na njegovoj površini nalazi treći sloj - pjenasti sloj. Takav ispljuvak naziva se troslojni.
Karakter: priroda sputuma određuje sadržaj sluzi, gnoja, krvi, serozne tekućine, fibrina. Karakter mu može biti mukozan, mukozno-hioidni, mukozno-gnojno-krvav itd.
Boja: ovisi o prirodi sputuma, o izdahnutim česticama koje mogu obojiti sputum. Na primjer, žućkasta, zelenkasta boja ovisi o prisutnosti gnoja, "hrđavog" ispljuvka - od razgradnje crvenih krvnih stanica, javlja se s krupoznom upalom pluća. Pruge krvi u ispljuvku ili crveni ispljuvak mogu biti pomiješani s krvlju (tuberkuloza, bronhiektazije). Siva i crna boja daje ispljuvak ugljen.
Konzistencija: ovisi o sastavu sputuma, tekućina - uglavnom o prisutnosti serozne tekućine, ljepljiva - u prisutnosti sluzi, viskozna - fibrin.
Miris: Svježi ispljuvak je obično bez mirisa. Neugodan miris svježe izlučenog sputuma obično se pojavljuje s apscesom pluća, s gangrenom pluća - truljenjem.
mikroskopski pregled
Nativni preparati pripremaju se odabirom materijala s različitih mjesta sputuma, a za istraživanje se uzimaju i sve čestice koje se ističu bojom, oblikom i gustoćom.
Odabir materijala provodi se metalnim štapićima koji se stave na predmetno stakalce i prekriju pokrovnim stakalcem. Materijal ne smije prelaziti preko pokrovnog stakalca.
Leukociti: uvijek se nalaze u sputumu, njihov broj ovisi o prirodi sputuma.
Eozinofili: prepoznaju se u nativnom preparatu po tamnijoj boji i prisutnosti jasne, ujednačene zrnatosti u citoplazmi koja lomi svjetlost. Često se nalaze u velikim skupinama. Eozinofili se nalaze u bronhijalnoj astmi, drugim alergijskim stanjima, helmintijazi, plućnom ehinokoku, neoplazmi, eozinofilnom infiltratu.
Eritrociti: imaju izgled žutih diskova. Pojedinačni eritrociti mogu se naći u bilo kojem ispljuvku, u velikom broju - u ispljuvku s primjesom krvi: neoplazme pluća, tuberkuloza, infarkt pluća.
Stanice skvamoznog epitela: ulaze u ispljuvak iz usne šupljine, nazofarinksa, ne tinjaju od velike dijagnostičke vrijednosti.
Cilindrični trepljasti epitel: oblaže sluznicu grkljana, dušnika, bronha. U velikim količinama nalazi se kod akutnih katara gornjih dišnih putova, bronhitisa, bronhijalne astme, neoplazmi pluća, pneumoskleroze i dr.
Alveolarni makrofagi: velike stanice različite veličine, često okrugle, s crno-smeđim inkluzijama u citoplazmi. Češće se javljaju u mukoznom ispljuvku s malom količinom gnoja. Nalazimo ih u raznim patološkim procesima: upala pluća, bronhitis, profesionalne bolesti pluća itd. Alveolarni makrofagi koji sadrže hemosiderin, stari naziv je "stanice srčanih bolesti", imaju zlatnožute inkluzije u citoplazmi. Za njihovu identifikaciju koristi se reakcija na prusko plavo. Tijek reakcije: komadić sputuma stavi se na predmetno staklo, dodaju se 2 kapi 5% solne otopine KIOLOTE i 1-2 kapi 5% otopina žute krvne soli. Promiješajte staklenim štapićem i pokrijte pokrovnim stakalcem. Hemosiderin koji leži intracelularno boji plavo ili plavo. Ove se stanice nalaze u ispljuvku tijekom zagušenja u plućima, infarkta pluća.
Masna degeneracija stanica (lipofagi, masne kuglice): češće su zaobljene, citoplazma im je ispunjena masnoćom. Kada se pripravku doda Sudan III, kapi postaju narančaste. Skupine takvih stanica nalaze se u neoplazmama pluća, aktinomikozi, tuberkulozi itd.
Elastična vlakna: u ispljuvku izgledaju kao zgužvana sjajna vlakna. U pravilu se nalaze na pozadini leukocita i detritusa. Njihova prisutnost ukazuje na propadanje plućnog tkiva. Nalaze se u apscesu, tuberkulozi, neoplazmi pluća.
Koraljna vlakna: grube razgranate tvorevine s gomoljastim zadebljanjima zbog taloženja masnih kiselina i sapuna na vlaknima. Nalaze se u ispljuvku s kavernoznom tuberkulozom.
Kalcificirana elastična vlakna su grube štapićaste tvorevine impregnirane vapnenim solima. Nalaze se tijekom kolapsa petrificiranog žarišta, apscesa pluća, neoplazme, element raspada petrificiranog žarišta naziva se Ehrlichova tetrada: I) kalcificirana elastična vlakna; 2) amorfne vapnene soli; 3) kristali kolesterola; 4) Mycobacterium tuberculosis.
Spirale Kurshma na_- sluzne tvorevine su zbijene, uvijene u spiralu. Središnji dio oštro lomi svjetlost i izgleda kao spirala, duž periferije slobodno ležeća sluz tvori plašt. Formiraju se Curshmanove spirale s bronhijalnim as tme.
Kristalne formacije: Charcot-Leidenovi kristali, duguljasti sjajni dijamanti, mogu se naći u žućkastim komadićima ispljuvka koji sadrže veliki broj eozinofila. Njihov nastanak povezan je s razgradnjom eozinofila,
Kristali hematoidina: imaju oblik rombova i zlatnih iglica. Nastaju tijekom razgradnje hemoglobina tijekom krvarenja, propadanja neoplazmi. U pripremi sputuma obično su vidljivi na pozadini detirita, elastična vlakna.
Kristali kolesterola: bezbojni četverokuti s odlomljenim stepenastim kutom, nalaze se tijekom raspadanja masnih degeneriranih stanica, u šupljinama. Upoznajte se s tuberkulozom, apscesom pluća, neoplazmama.
Dietrichovi čepići: mala žućkasto-siva zrnca neugodna mirisa, nalaze se u gnojnom ispljuvku. Mikroskopski su to detritus, bakterije, kristali masnih kiselina u obliku iglica i kapljica masti. Nastaje tijekom stagnacije sputuma u šupljinama s apscesom pluća, bronhiektazije.
Bakteriološka istraživanja
Test na mikobakterije tuberkuloze: Lijek se priprema od osušenih gnojnih čestica ispljuvka.
u zraku i fiksiran iznad plamena plamenika. Obojeno od
Tsil-Nilson.
Metoda bojenja: Reagensi:
I) karbolni fuksin,
2) 2% alkoholna otopina klorovodične kiseline,
3) vodena otopina 0,5% metilen modrila.
Napredak bojanja:
1. Na preparat se stavi komad filter papira i ulije otopina karbolnog fuksina.
2. Droga se zagrijava nad plamenom plamenika dok se ne pojave pare, ohladi i ponovo zagrijava (tako 3 puta).
3. Uklonite filter papir s ohlađenog stakla. Obezbojite razmaz u solnom alkoholu dok boja potpuno ne nestane.
4. Oprati vodom.
5. Završite pripremu metilenskim modrilom 20-30 sekundi.
6. Isperite vodom i osušite na zraku. Mikroskopski s imerzijskim sustavom. Mycobacterium tuberculosis boji se crveno
svi ostali elementi sputuma i bakterija - u plavoj boji. Tuberkulozne mikobakterije imaju izgled tankih, blago zakrivljenih štapića sa zadebljanjima na krajevima ili u sredini.
Saprofiti otporni na kiseline također se boje crveno kada se boje po Ziehl-Nielsonu. Diferencijalna dijagnoza tuberkuloznih mikrobakterija i saprofita otpornih na kiseline provodi se metodama sjetve i infekcije životinja.
Ispitivanje sputuma također se može provesti metodom flotacije. Potengerova metoda: napredak istraživanja:
1. Svježe izolirani ispljuvak (ne više od 10-15 ml) stavi se u bocu s uskim grlom, doda se dvostruka količina kaustične lužine, smjesa se snažno protrese (10-15 minuta).
2. Ulijte 1 ml ksilena (možete koristiti benzin, toluen) i oko 100 ml destilirane vode da razrijedite ispljuvak. Ponovno protresite 10-15 minuta.
3. Dolijte destiliranu vodu do grlića boce i ostavite stajati 10-50 minuta.
4. Dobiveni gornji sloj (bjelkast) uklanja se kap po kap pipetom i nanosi na stakalce prethodno zagrijano na 60°. Svaka sljedeća kap nanosi se na osušenu prethodnu.
5. Preparat se fiksira i boji po Ziehl-Nilsonu.
Test na druge bakterije:
Druge bakterije koje se nalaze u ispljuvku, kao što su streptokoki, stafilokoki, diplobacili itd., mogu se prepoznati samo kulturom. Bakteriološka pretraga preparata u ovim slučajevima ima samo približnu vrijednost. Preparati se boje metilenskim modrilom, fuksinom ili g okvir. Bojenje po Gramu: Reagensi: I) karbolna otopina gentianvioleta,
2) Lugolova otopina,
3) 96° alkohol,
4) 40% otopina karbolnog fuksina.
Napredak istraživanja:
1. Na fiksirani preparat stavi se traka filtar papira, ulije otopina encijan violeta, boji se 1-2 minute.
2. Papir se ukloni i lijek se prelije Lugolovom otopinom 2 minute.
3. Lugolova otopina se ocijedi i lijek se ispere u alkoholu do sive boje.
4. Isprano vodom i obojeno 10-15 sekundi otopinom magenta.
Bakteriološki pregled sputuma omogućuje otkrivanje uzročnika različitih bolesti. Za dijagnozu je važna prisutnost mikobakterija tuberkuloze u ispljuvku. Sputum za spremnik - istraživanje za sjetvu skuplja se u sterilnu posudu (široka usta). Posuđe izdaje cisterna - laboratorij.
PAŽNJA!!!
Ako nema dovoljno ispljuvka, može se sakupljati do 3 dana, čuvajući ga na hladnom mjestu.
Sputum na spremniku - sjetva u bolesnika s tuberkulozom radi pouzdanosti rezultata prikuplja se u roku od 3 dana, u različitim sterilnim spremnicima (3 staklenke).
Ako je potrebno propisati antibiotike, ispituje se sputum na osjetljivost na njih. Da bi to učinio, pacijent ujutro, nakon ispiranja usta, nekoliko puta (2-3 puta) nakašlje i ispljune ispljuvak u sterilnu Petrijevu zdjelicu, koja se odmah šalje u laboratorij.
PAŽNJA!!!
Dajte jasne upute pacijentu o korištenju sterilnog pribora za prikupljanje sputuma za analizu:
a) ne dodirujte rubove posuđa rukama
b) ne dodirujte rubove ustima
c) nakon iskašljavanja sputuma odmah zatvoriti posudu poklopcem.
ZATIM stavka 7
Do spremnika - laboratorija
Sputum za mikrofloru i
osjetljivost na
antibiotici (a/b)
Sidorov S.S. star 70 godina
3/IV–00 sign.m/s
Analiza sputuma za bakteriološki pregled.
Cilj: osigurati kvalitetnu pripremu za studiju i pravodobno primanje rezultata.
Trening: informiranje i edukacija bolesnika.
Oprema: sterilna staklenka (pljuvač), smjer.
Redoslijed izvršenja:
Objasniti pacijentu (članu obitelji) smisao i nužnost nadolazeće studije i dobiti njegov pristanak na studiju.
A) u stacionarnim uvjetima:
brifing i opskrba laboratorijskim staklenim posuđem koje treba obaviti večer prije;
B) u izvanbolničkim i bolničkim uvjetima objasniti pacijentu značajke pripreme:
noć prije temeljito operite zube;
ujutro nakon spavanja, temeljito isperite usta prokuhanom vodom
Uputite pacijenta kako postupati sa sterilnim laboratorijskim staklenim posuđem i kako sakupljati ispljuvak:
Iskašljati, otvoriti poklopac staklenke (pljuvač) i ispljunuti ispljuvak ne dodirujući rubove staklenke;
Odmah zatvorite poklopac.
Zamolite pacijenta da ponovi sve informacije, postavite pitanja o tehnici pripreme i prikupljanja sputuma.
Navesti posljedice kršenja preporuka medicinske sestre.
A) ambulantno:
Dati smjer za studij ispunjavanjem obrasca;
Objasniti pacijentu gdje i u koje vrijeme treba (obitelj) donijeti bankovnu uputnicu.
B) u bolničkim uvjetima:
Naznačiti mjesto i vrijeme gdje će teglu (pljuvačnicu) donijeti;
Prikupljeni materijal dostaviti u bakteriološki laboratorij najkasnije 1,5 - 2,0 sata nakon uzimanja materijala.
Skladištenje materijala čak iu hladnim uvjetima je neprihvatljivo!
Uzimanje izmeta na analizu.
Velika pomoć u prepoznavanju niza bolesti, uključujući i gastrointestinalne, je proučavanje izmeta. Određivanje glavnih svojstava izmeta pregledom omogućuje izvlačenje niza dijagnostičkih zaključaka i dostupno je sestri.
Dnevna količina fecesa u zdrave osobe ovisi o kvaliteti i količini hrane, au prosjeku iznosi 100 - 120 g. Ako je apsorpcija poremećena i brzina kretanja kroz crijeva pojačana (enteritis), količina fecesa može doseći 2500 g, uz zatvor, izmet je vrlo mali.
Fino- pražnjenje crijeva se obavlja jednom dnevno, najčešće u isto vrijeme.
PAŽNJA!!!
Za istraživanje je bolje uzeti izmet nakon samostalnog čina defekacije u obliku u kojem se izlučuje.
bakteriološki
makroskopski
Kal istražiti mikroskopski
kemijski
Makroskopski utvrđeno:
A) boja, gustoća (konzistencija)
B) oblik, miris, nečistoće
Boja–fino
s mješovitom hranom - žućkasto-smeđa, smeđa;
s mesom - tamno smeđa;
s mlijekom - žuta ili svijetlo žuta;
novorođenče je zelenkastožuto.
ZAPAMTITI!!! Boja izmeta može se promijeniti:
Voće, bobičasto voće (borovnice, ribizli, trešnje, makovi itd.) - u tamnoj boji.
Povrće (cikla, mrkva, itd.) - u tamnoj boji.
Ljekovite tvari (soli bizmuta, željeza, joda) - u crnoj boji.
Prisutnost krvi daje izmetu crnu boju.
Dosljednost(gustoća) izmet je mekan.
U različitim patološkim stanjima, izmet može biti:
polutekuće
Glitast (glinast), često sive boje i ovisi o znatnoj primjesi neprobavljene masti.
sentimentalan
umjereno gusta
Oblik izmeta- Obično cilindričnog ili kobasičastog oblika.
Kod grčeva crijeva izmet može biti vrpčast ili u obliku gustih kuglica (ovčji izmet).
Miris izmeta ovisi o sastavu hrane i intenzitetu procesa fermentacije i truljenja. Mesna hrana daje oštar miris. Mliječno - kiselo.
Nazivaju se patološki sekreti dišnih organa koji se izbacuju prilikom kašljanja. Prilikom provođenja laboratorijskih studija sputuma, postaje moguće karakterizirati patološki proces u dišnom sustavu, u nekim slučajevima postaje moguće odrediti njegovu etiologiju. Da biste to učinili, izvršite sljedeće radnje:
- sputum se prikuplja za opću kliničku analizu;
- ispljuvak se prikuplja za otkrivanje tuberkuloze u dišnim organima;
- prikuplja se ispljuvak radi traženja abnormalnih stanica;
- prikuplja se sputum kako bi se odredila osjetljivost na antibiotike.
Područje pleure zdrave osobe sadrži određenu količinu tekućine koja olakšava klizanje pleure tijekom disanja i po sastavu je vrlo bliska limfi. U slučajevima kršenja cirkulacije krvi i limfe u plućnoj šupljini, moguće je povećanje volumena pleuralne tekućine. To se može dogoditi i tijekom upalnih promjena u pleuri (eksudat), i tijekom procesa koji se javljaju u odsutnosti upale. Primarna klinička infekcija pleure može pridonijeti manifestaciji eksudata, ili može pratiti neke opće infekcije te u slučaju pojedinih bolesti pluća i medijastinuma, kao što su reumatizam, srčani udar, tuberkuloza i rak pluća, limfogranulomatoza. Pleuralna tekućina ispituje se u sljedeće svrhe: određivanje njegove prirode; proučavanje staničnog sastava tekućine, koje sadrži informacije o svojstvima patološkog procesa, au nekim slučajevima (s tumorima) io dijagnozi; s lezijama zarazne prirode, identifikaciju patogena i određivanje njegove osjetljivosti na antibiotike. Analiza pleuralne tekućine uključuje provođenje fizikalno-kemijskih, mikroskopskih, au nekim slučajevima mikrobioloških i bioloških studija.
Metode proučavanja sputuma
Za proučavanje sputuma u dišnim organima koriste se radiografija, fluoroskopija, bronhografija i tomografija pluća.
Fluoroskopija je najčešća metoda istraživanja koja vam omogućuje vizualno određivanje prozirnosti plućnog tkiva, otkrivanje mjesta zbijanja ili šupljina u njegovoj strukturi, određivanje prisutnosti zraka u pleuralnoj šupljini i druge patologije.
Radiografija se provodi kako bi se zabilježile i dokumentirale promjene u dišnom sustavu otkrivene tijekom fluoroskopije, a koje se pojavljuju na rendgenskom filmu. Patološki procesi koji se javljaju u plućima mogu dovesti do gubitka prozračnosti, praćenog zbijanjem plućnog tkiva (infarkt pluća, upala pluća, tuberkuloza). U tom će slučaju zdravo plućno tkivo na negativnom filmu biti tamnije od odgovarajućih područja pluća. Plućna šupljina, koja sadrži zrak, okružena upalnim grebenom, izgledat će kao ovalna tamna mrlja u blijedoj sjeni plućnog tkiva. Tekućina koja se nalazi u pleuralnoj ravnini propušta manju količinu rendgenskih zraka u odnosu na plućno tkivo, ostavlja sjenu na rendgenskom negativu filma koja ima tamniju nijansu u odnosu na sjenu plućnog tkiva. Provođenje radiografije omogućuje određivanje količine tekućine u pleuralnoj šupljini i njezine prirode. U slučaju da u pleuralnoj šupljini postoji upalna tekućina ili eksudat, njegova razina kontakta s plućima ima oblik kose linije usmjerene prema gore od linije srednje ključne kosti. Ako postoji akumulacija neupalne tekućine ili transudata u pleuralnoj šupljini, njegova razina se nalazi više vodoravno.
Bronhografija se izvodi za proučavanje bronha. Nakon što je provedena preliminarna anestezija dišnog trakta, kontrastno sredstvo se ubrizgava u lumen bronha, što odgađa rendgenske zrake. Nakon toga radi se rendgenska snimka pluća kako bi se na rendgenskoj snimci dobila jasna slika bronhalnog stabla. Ova metoda omogućuje dijagnosticiranje širenja bronha, kao i njihovo sužavanje kao rezultat tumora ili stranog tijela koje ulazi u lumen bronha.
Tomografija pluća je posebna vrsta radiografije, koja omogućuje slojeviti rendgenski pregled pluća. Provodi se kako bi se utvrdila prisutnost tumora u bronhima i plućima, šupljinama i šupljinama koje se nalaze u plućima na različitim dubinama.
Prikupljanje sputuma za istraživanje
Najbolje je prikupiti sputum za istraživanje ujutro, jer se nakuplja noću i prije jela. Preliminarno pranje zuba i ispiranje usta prokuhanom vodom osiguravaju pouzdanost analize sputuma. Sve to omogućuje značajno smanjenje kontaminacije usne šupljine bakterijama.
Za skupljanje sputuma koristi se posebna jednokratna zatvorena boca, izrađena od materijala dovoljne otpornosti na udarce i čvrsto zatvorenim poklopcem ili čepom koji se čvrsto privija. Potrebno je da boca ima zapreminu 25-50 ml i širok otvor. To je potrebno kako bi pacijent mogao ispljunuti ispljuvak u bočicu. Kako bi se mogla procijeniti kvaliteta i količina uzorka koji je prikupljen, materijal od kojeg je bočica izrađena mora biti potpuno proziran.
U slučaju potrebe transporta prikupljenog sputuma u drugu ustanovu, bočice s prikupljenim materijalom treba čuvati u hladnjaku najviše tri dana do slanja. Ako je potrebno duže čuvati, potrebno je koristiti konzervans. Tijekom transporta ispljuvak mora biti zaštićen od izlaganja vjetru i izravnoj sunčevoj svjetlosti.
Pregled sputuma za opću analizu
Ispitivanje sputuma za opću analizu obično počinje ispitivanjem njegovog izgleda. U ovom slučaju poštuju se neka opća pravila: prozirna sluz znači standardni vanjski ispljuvak, upalni proces karakterizira prisutnost mutnog ispljuvka. Serozni sputum nema boju, razlikuje se po tekućoj konzistenciji i prisutnosti pjene. Njegovo oslobađanje događa se s plućnim edemom.
Truli sputum karakterizira prisutnost gnoja. Boja mu je zelena i žuta. Najčešće se truležni ispljuvak opaža kada apsces pluća prodre u bronh, u većini slučajeva je u obliku mješavine gnoja i sluzi.
Zeleni sputum prisutan je u patologiji povezanoj s usporavanjem odljeva. To može biti sinusitis, bronhiektazije, poremećaji nakon tuberkuloze. U slučaju da se zeleni ispljuvak pojavi u adolescentnoj djeci, ne treba pretpostaviti kronični bronhitis, a također se može isključiti ENT patologija.
Alergijska reakcija i eozinofilija identificiraju se pojavom jantarno-narančastog ispljuvka.
Plućno krvarenje karakterizira pojava krvavog ili mješovitog ispljuvka, osobito mukopurulentnog s tragovima krvi. Kada se krv zadrži u respiratornom traktu, hemoglobin se pretvara u hemosiderin, nakon čega ispljuvak poprima hrđavu boju. Prisutnost krvi u ispljuvku alarmantan je čimbenik koji zahtijeva posebno ispitivanje.
Biserni sputum razlikuje se od zaobljenih opalescentnih inkluzija, koje se sastoje od detritusa i atipičnih stanica. Viđa se kod karcinoma skvamoznih stanica pluća.
Bakteriološko ispitivanje sputuma
Provođenje bakteriološkog pregleda sputuma omogućuje vam utvrđivanje prisutnosti patogena plućnih bolesti. Između dva stakla trlja se gnojni grumen ispljuvka s krvlju. Stvrdnuti razmazi podliježu fiksaciji vatrom, nakon čega se jedan od njih boji po metodi bojenja po Gramu, a drugi po metodi bojenja po Ziehl-Neelsenu. Prva metoda bojenja omogućuje otkrivanje gram-pozitivnih mikroba, druga - bakterije tuberkuloze. Na razmaz treba nanijeti komad filtar papira, površine jednake samom razmazu, uliti Tsilya fuksin i zagrijavati na laganoj vatri dok se ne pojave pare. Nakon što se papir baci, razmaz treba umočiti u otopinu sumporne kiseline koncentracije 5-10% ili otopinu klorovodične kiseline koncentracije 3% da bi se obezbojio, nakon čega se dobro ispere vodom. . Zatim se pola minute ponovno boji otopinom plavog metilena, koncentracije 0,5%, nakon čega se ponovno ispere vodom. Na plavoj podlozi lijeka dobro su vidljive crvene mikobakterije. U slučaju da se mycobacterium tuberculosis ne nađe u razmazu, koristi se metoda njihovog nakupljanja - flotacija. 15-25 ml ispljuvka stavi se u posudu volumena od četvrt litre, doda se dvostruki volumen otopine natrijevog hidroksida, koncentracije 0,5%, nakon čega se dobivena smjesa protrese do učinka. postiže se potpuno otapanje sputuma. U 100 ml destilirane vode doda se 2 ml toluena, smjesa se mućka petnaest minuta, nakon čega se dolije voda iz grlića boce i drži dva sata. Na vrhu se formira sloj koji svojom konzistencijom podsjeća na kremu, usisava se pipetom sa raspršivačem i nanosi kapi na zagrijano staklo, svaki put na prethodnu osušenu kap. Zatim se lijek fiksira i primjenjuje prema Ziehl-Neelsen principu. Ako je rezultat negativan, potrebno je pribjeći bakteriološkoj kulturi sputuma ili inokulaciji na životinju (biološka studija). Kako bi se utvrdilo koliko je flora sputuma osjetljiva na antibiotike, pribjegavaju se njegovim usjevima.
Mikroskopski pregled sputuma
Mikroskopski pregled sputuma sastoji se od proučavanja obojenih i nativnih (sirovih, prirodnih) pripravaka. Za potonje se odabiru gnojne, mrvičaste, krvave grudice, koje se stavljaju na predmetno staklo u takvom volumenu da se, kada se pokrije pokrovnim staklom, formira tanki proziran pripravak. Ako je povećanje mikroskopa malo, mogu se otkriti Kirschmanove spirale koje izgledaju kao strije sluzi različite debljine. Oni uključuju središnju aksijalnu liniju, koja je omotana spiralnim plaštom prošaranim leukocitima. Takve se spirale pojavljuju u ispljuvku s bronhospazmom. U nativnom preparatu uz veliko povećanje mogu se otkriti leukociti, alveolarni makrofagi, eritrociti, stanične tvorevine karakteristične za srčane mane, ravni i cilindrični epitel, sve vrste gljivica, stanice raka, eozinofili. Leukociti su okrugle zrnate stanice. Eritrociti se nazivaju žućkasti homogeni diskovi male veličine, čiji je izgled karakterističan za ispljuvak s upalom pluća, infarktom pluća i uništavanjem plućnog tkiva. Alveolarni makrofagi su stanice tri puta veće od eritrocita, s velikom, obilnom granularnošću u citoplazmi. Cilindrični epitel respiratornog trakta određen je vrčastim ili klinastim stanicama. U velikim količinama javlja se kod katara dišnih puteva i akutnog bronhitisa. Skvamozni epitel je velika stanična tvorevina s mnogo kutova, bez dijagnostičke vrijednosti, a potječe iz usne šupljine. Stanice raka određuju velike jezgre, za čije je prepoznavanje prirode potrebno značajno iskustvo istraživača. Ove stanice su velike veličine i nepravilnog oblika.
Makroskopski pregled sputuma
Pri provođenju makroskopskog pregleda sputuma pozornost se privlači njegovoj količini i prirodi, mirisu, boji, konzistenciji, prisutnosti raznih inkluzija i sluzi.
Sastav sputuma određuje njegov karakter.
Sluzavi ispljuvak uključuje sluz – produkt aktivnosti mukoznih žlijezda dišnog sustava. Njegovo oslobađanje javlja se kod akutnog bronhitisa, rješavanja napada bronhijalne astme, katara dišnog trakta.
Mukopurulentni ispljuvak je mješavina gnoja i sluzi, s prevladavanjem sluzi i uključivanjem gnoja u obliku malih grudica i žilica. Njegov izgled javlja se s gnojnom upalom, bronhopneumonijom, akutnim bronhitisom.
Gnojno-sluzavi ispljuvak sastoji se od gnoja i sluzi s prevladavanjem gnoja, dok je sluz prisutna u obliku niti. Njegov izgled karakterističan je za kronični bronhitis, apscesnu upalu pluća, bronhiektazije.
