Analiza na patogenu crijevnu mikrofloru. Uvjetno patogeni i patogeni mikroorganizmi. Analiza izmeta kod djece

Odredite stanje crijevne mikroflore u djeteta. Zašto liječnik može propisati takvu studiju i što bi roditelji trebali znati o tome?

Indikacije

Takva je studija posebno važna za dojenčad, koja ima povećan rizik od razvoja crijevne patologije. Također se savjetuje da ga napravite za djecu koja se često razboljevaju, na primjer, s čestim SARS-om.

Najčešće se radi analiza stolice za crijevne poremećaje.

Vrste

1. Koprološki pregled fecesa. On je prvi propisan u slučaju sumnje na probleme s crijevima. Analiza će pokazati kako se hrana probavlja u crijevima i otkriti upalni proces.
2. Biokemijska analiza izmeta. Pomaže u prepoznavanju fermentopatije.
3. Ekspresno sijanje izmeta. Ovo je brza metoda istraživanja, tijekom koje se normalna mikroflora određuje kao postotak.
4. Sjetva izmeta za disbakteriozu. Takva studija omogućuje procjenu koncentracije i broja bakterija koje su predstavnici normalne mikroflore, kao i uvjetno patogene flore. Izmet djeteta se sije na hranjivi medij. Unutar nekoliko dana narastu kolonije bakterija koje se ispituju pod mikroskopom i broje. Obrazac označava broj mikroorganizama po 1 gramu izmeta, označavajući broj bakterija koje tvore kolonije (CFU). Ako se otkrije patogena flora, dodatno se određuje osjetljivost / otpornost na antibiotike.

Testovi stolice imaju za cilj identificirati broj različitih bakterija u crijevima i njihov omjer.

Gdje se možete testirati?

Testovi za disbakteriozu mogu se uzeti iu javnim klinikama iu privatnim laboratorijima. Istodobno, roditelji bi trebali zapamtiti da javne zdravstvene ustanove imaju svoje radno vrijeme i ne provode istraživanja vikendom.

Je li potrebna posebna obuka?

Ako je analiza dodijeljena djetetu koje se počelo hraniti, tada je tri dana prije studije isključeno uvođenje novih proizvoda. Također, nekoliko dana prije isporuke izmeta, trebate prestati davati bebi bilo kakve lijekove, uključujući aktivni ugljen i lijekove protiv grčeva.

Također je nemoguće napraviti klistir, koristiti rektalne čepiće i dati djetetu laksative prije testiranja na disbakteriozu.

Kako skupljati izmet?

Uzorak stolice treba uzeti od djeteta koje je već mokrilo kako bi se spriječilo da urin uđe u spremnik za testiranje. Također, prije prikupljanja materijala, dijete se mora isprati.

Za studiju će vam trebati oko 10 ml bebinog izmeta koji se stavlja u sterilnu posudu. Najbolje je uzeti čestice stolice iz različitih dijelova bebine stolice. Ako u izmetu ima nečistoća, one se također stavljaju u posudu s izmetom za analizu.

Prije uzimanja izmeta potrebno je oprati genitalije bebe

Koliko i gdje možete pohraniti izmet?

Izmet se obično uzima ujutro i uzima na analizu unutar 1-3 sata nakon pražnjenja crijeva. Ako svježi jutarnji izmet nije odmah dostupan, spremnik s uzorkom za analizu može se čuvati u hladnjaku do 6 sati. Čuvanje stolice na sobnoj temperaturi će iskriviti rezultate studije.

Normirane vrijednosti

Dešifriranje

Najviše bi u uzorku stolice zdravog djeteta trebalo biti bifidobakterija. Normalno, oni čine oko 95% ukupne mikroflore. Upravo te bakterije obavljaju sve glavne funkcije crijevne mikrobne flore - pomoć u apsorpciji minerala i vitamina, sintezi vitamina, stimulaciji crijevnog motiliteta, neutralizaciji toksina i dr.

Ništa manje važni su laktobacili, koji također osiguravaju funkcioniranje crijeva, proizvode laktazu i štite dijete od alergena. Oni u zdravom crijevu sadrže približno 6% svih mikroorganizama. Normalna mikroflora također se sastoji od Escherichia coli (Escherichia), koja pomaže ukloniti kisik i oduprijeti se patogenoj flori.

Takav predstavnik crijevne flore kao bakteroidi pojavljuju se u izmetu dojenčadi starijih od 6 mjeseci. Ove bakterije pomažu u razgradnji masti. I u zdravom debelom crijevu beba normalno se nalaze peptostreptokoki i enterokoki.

Normalno, patogene enterobakterije, poput salmonele ili šigele, ne otkrivaju se u dječjem izmetu. Njihovo otkrivanje ne ukazuje na disbakteriozu, već na ozbiljne crijevne bolesti. Također u izmetu djeteta treba biti odsutan Staphylococcus aureus i hemolitička Escherichia.

Prisutnost patogenih bakterija u izmetu djeteta ukazuje na prisutnost bolesti u djeteta

Razlozi odstupanja

• Ako je broj bifidobakterija i laktobacila smanjen, a pokazatelji oportunističke flore povećani, to su znakovi disbakterioze. Također, ova slika je tipična za crijevne infekcije i patologije enzima.
• Na sastav mikrobne flore crijeva utječe i pothranjenost djeteta. Prekomjerna konzumacija masti promijenit će pokazatelj bakteroida, a višak ugljikohidratne hrane utjecati će na broj peptostreptokoka i enterokoka.
• Smanjenje broja tipične Escherichia coli često se javlja kod helmintičkih invazija. Nepatogena Escherichia također se smanjuje s kršenjem prehrane djeteta, crijevnim infekcijama i antibiotskom terapijom.
• Povećanje broja Escherichia coli, čija je aktivnost smanjena, ukazuje na početni stadij disbakterioze.
• Za kandidijazu je karakteristično povećanje broja gljivica Candida.

> Sjetva na patogenu crijevnu floru, utvrđivanje njezine osjetljivosti na antimikrobna sredstva i bakteriofage

Ove informacije se ne mogu koristiti za samoliječenje!
Svakako se posavjetujte sa stručnjakom!

Ljudsko crijevo inače je naseljeno velikim brojem mikroorganizama. To su razni predstavnici laktobacila, bakteroida, enterobakterija, peptostreptokoka itd. Ove bakterije čine takozvanu crijevnu mikrofloru, sudjeluju u procesu probave, podržavaju lokalni imunitet, sprječavajući razvoj infekcija. Crijevne infekcije nastaju kada patogeni (uzročnici bolesti) mikroorganizmi uđu u lumen crijeva i razmnože se. Najčešći uzročnici crijevnih infekcija su Shigella i Salmonella. Nešto rjeđe se otkrivaju Vibrio cholerae, klostridije (uzročnici botulizma i dr.), Yersinia i Staphylococcus aureus. Sjetvom na patogenu crijevnu floru utvrđuje se uzročnik crijevne infekcije, a utvrđivanjem osjetljivosti mikroorganizama na antibiotike i bakteriofage pomaže u odabiru pravilne terapije.

Koje su manifestacije akutnih crijevnih infekcija?

Simptomi i tegobe donekle se razlikuju ovisno o uzročniku infekcije. Kada je zaražen šigelom, početak bolesti je akutan. Javljaju se grčeviti bolovi u abdomenu, temperatura raste. Karakterizira ga česta, bolna potreba za defekacijom, koja nije popraćena odvajanjem izmeta ili se izmet izdvaja u malim količinama s primjesom sluzi i krvi. Salmonelozu karakterizira istodobna pojava povraćanja i proljeva. Stolica u isto vrijeme može biti i žućkasta i zelenkasta. Bolnost i kruljenje u abdomenu su izraženiji desno od pupka. Sve crijevne infekcije praćene proljevom ili povraćanjem dovode do intoksikacije i dehidracije. To se očituje suhoćom kože i sluznice, u teškim slučajevima - smanjenjem tjelesne težine.

Kada se propisuje sjetva na patogenu crijevnu floru?

Studiju propisuje specijalist za zarazne bolesti, terapeut ili pedijatar u slučaju sumnje na akutnu crijevnu infekciju. Sjetva s određivanjem osjetljivosti na antibiotike i bakteriofage u ovom slučaju pomaže identificirati uzročni mikroorganizam, provesti diferencijalnu dijagnozu s drugim bolestima koje imaju slične simptome i odabrati pravu terapiju. Na kraju tretiranja potrebno je ponovljeno uzorkovanje materijala za sjetvu radi kontrole uništavanja uzročnika.

Analiza se provodi prilikom izdavanja osobnih zdravstvenih knjižica za radnike u javnom sektoru (prehrana, zdravstvena njega, obrazovanje i dr.). Ako se otkrije bakterionositelj, provodi se terapija usmjerena na uništavanje mikroorganizma, nakon čega treba ponoviti analizu.

Kako se provodi studija i kako se pravilno pripremiti za nju?

Studija se izvodi bez prethodne pripreme. Materijal za bakteriološku kulturu je svježi izmet. Spatulom se uzima u dobro zatvorenu sterilnu posudu. Defekacija prije toga obavlja se u čistoj posudi ili loncu. Prilikom uzimanja materijala ne smije biti kontaminiran urinom i sekretom iz genitalnog trakta. Ako u izmetu ima sluzi i gnoja, preporučljivo je odabrati upravo takve fragmente jer je koncentracija patogena u njima mnogo veća.

Materijal se može uzeti sterilnim brisom iz rektuma. Nakon uvođenja tampona u anus, rotacijski pokreti se izvode u oba smjera, dobiveni materijal se prenosi u sterilnu posudu.

Kako se tumače rezultati?

Normalno, prilikom sjetve, rast patogenih mikroorganizama ne bi trebao biti. Ako se otkrije rast, možemo govoriti o akutnoj crijevnoj infekciji ili bakterionositelju. Određivanje osjetljivosti na antibiotike i bakteriofage u ovom slučaju pomoći će odabrati pravi lijek za liječenje.

Ako u stolici ima malo patogenih bakterija, nalaz može biti negativan. Neizravni znak prisutnosti patogena može biti smanjenje rasta normalne flore.

Poznato je da mikroorganizmi, usprkos svom “malom rastu”, imaju i “ovisnosti” o hrani, optimalnoj temperaturi, općenito, okruženju koje im savršeno odgovara, gdje se osjećaju ugodno i dobro, te se stoga počinju intenzivno razmnožavati i rasti.

Bakteriološka inokulacija ili, kako se kraće kaže - tank inokulacija, koristi se za dobivanje većeg broja mikroba iste vrste (čiste kulture) radi proučavanja njihovih fizikalno-kemijskih i bioloških svojstava, da bi se zatim dobiveni podaci mogu se koristiti za dijagnostiku zaraznih bolesti.

Nažalost, čak i sada popularne i druge metode, čiji su glavni nedostatak lažno pozitivni ili lažno negativni rezultati, ne mogu uvijek identificirati patogena. Osim toga, oni nisu u mogućnosti pokupiti ciljane antibakterijske lijekove. Sličan problem rješava spremnik za sjetvu, koji se često ne žuri s imenovanjem, pozivajući se na činjenicu da se, na primjer, sporo uzgaja, a trošak analize je znatan. Međutim, zdravlje se isplati!

Uvjeti potrebni za ishranu i disanje

Mikrobiolozi sada znaju da svaki patogen treba vlastitu "prirodnu" okolinu, uzimajući u obzir njegov pH, redoks potencijale, viskoznost, vlažnost i osmotska svojstva. Okoline mogu biti meke i tvrde, jednostavne i složene, univerzalne i ne baš svestrane, ali u svim slučajevima moraju osigurati prehranu, disanje, razmnožavanje i rast bakterijske stanice.

primjer rasta mikroorganizama nakon inokulacije spremnika u hranjivi medij

Neki mediji (tioglikol, Sabouraud) pogodni su za širok spektar mikroorganizama i nazivaju se univerzalnima. Drugi su namijenjeni samo određenim vrstama, na primjer, pneumokok i zlatni stafilokok, koji proizvode hemolizin, rastu na krvnom agaru, koji služi za izolaciju posebno "kapricioznih" i, ujedno, opasnih sojeva. Dakle, postoje mnoge vrste medija, gdje svaki od njih uzgaja vlastiti niz mikroorganizama.

Svrha uzgoja mikroorganizama i njegov značaj za dijagnostiku

Osim vode, zraka, tla, koji sadrže različite mikroorganizme u različitim koncentracijama, uključujući i one koji donose bolesti (patogene), mnoge grane medicinske znanosti zanimaju i mikrobi koji žive na koži i sluznicama ljudskog tijela, a koji se mogu predstaviti po:

• Stalni stanovnici, koji ne predstavljaju nikakvu opasnost za ljude, odnosno normalne mikroflore organizma bez koje jednostavno ne možemo živjeti. Na primjer, nestanak bakterija koje žive u crijevima i sudjeluju u procesu probave dovodi do disbakterioze, koju nije lako liječiti. Isto se događa s nestankom vaginalne mikroflore. Odmah ga naseljavaju uvjetno patogeni mikroorganizmi, na primjer gardnerella, koji uzrokuju;
• uvjetno patogena flora, koji je štetan samo u velikim količinama pod određenim uvjetima (imunodeficijencija). Gore spomenuta gardnerella je predstavnik ove vrste mikroorganizama;
• Prisutnost patogenih mikroba kojih u zdravom tijelu nema. Oni su strani ljudskom tijelu, gdje slučajno ulaze u kontakt s drugom (bolesnom) osobom i uzrokuju razvoj zaraznog procesa, ponekad vrlo teškog ili čak smrtonosnog. Na primjer, susret s patogenima još uvijek je u redu, u početku se liječi, ali (ne daj Bože!) oslobodit će kolere, kuge, velikih boginja itd.

Srećom, mnogi od njih su poraženi i trenutno se nalaze "iza sedam pečata" u posebnim laboratorijima, ali čovječanstvo u svakom trenutku mora biti spremno za invaziju nevidljivog neprijatelja sposobnog uništiti čitave narode. Bakteriološka kultura u takvim slučajevima igra možda glavnu ulogu u identifikaciji mikroorganizma, odnosno određivanju roda, vrste, vrste itd. (toksonomski položaj), što je vrlo važno za dijagnostiku zaraznih procesa, uključujući i spolno prenosive bolesti.

Dakle, metode sjetve, kao i hranjive podloge, razlikuju se, ali imaju isti cilj: dobiti čistu kulturu bez nečistoća u obliku mikroba drugih klasa, koji žive posvuda: u vodi, u zraku, na površinama, na čovjeku iu njemu.

Kada je imenovan spremnik za sjetvu i kako razumjeti odgovore?

Naziv mikroorganizma i njegova količina

Pacijenti ne propisuju sami sebi bakteriološku analizu, to radi liječnik ako sumnja da su problemi pacijenta s različitim tegobama povezani s prodorom patogenog uzročnika u tijelo ili s pojačanim razmnožavanjem mikroorganizama koji stalno žive s osoba, ali pokazuju patogena svojstva samo u određenim uvjetima. Nakon što je prošao analizu i nakon nekog vremena dobio odgovor u rukama, osoba se izgubi, a ponekad čak i uplaši, kada vidi nerazumljive riječi i oznake, stoga, kako se to ne bi dogodilo, želim dati kratko objašnjenje po ovom pitanju:

Prilikom ispitivanja biološkog materijala na prisutnost patogenih mikroorganizama, odgovor može biti negativan ili pozitivan ("loš spremnik za sjetvu"), budući da je ljudsko tijelo za njih samo privremeno sklonište, a ne prirodno stanište.

Ponekad, ovisno o materijalu koji se želi inokulirati, možete vidjeti broj mikroorganizama izražen u jedinicama koje stvaraju kolonije po ml (jedna živa stanica će dati rast cijele kolonije) - CFU / ml. Na primjer, inokulacija urina za bakteriološki pregled obično daje do 10 3 CFU / ml svih otkrivenih bakterijskih stanica, u sumnjivim slučajevima (ponoviti analizu!) - 10 3 - 10 4 CFU / ml, s upalnim procesom infektivnog podrijetla - 10 5 i više CFU / ml O posljednje dvije opcije u kolokvijalnom govoru, ponekad se jednostavno izražavaju: "Loš spremnik za sjetvu."

Kako "naći kontrolu" na patogenom mikroorganizmu?

Istovremeno sa sjetvom materijala u takvim situacijama, mikroflora se sije na osjetljivost na antibiotike, što će dati jasan odgovor liječniku - koji će antibakterijski lijekovi iu kojim dozama "uplašiti" "uljeza". Ovdje također postoji dešifriranje, na primjer:

• Vrsta mikroorganizma, na primjer, ista E. coli u količini od 1x10 ^ 6;
• Naziv antibiotika s oznakom (S) ukazuje na osjetljivost patogena na ovaj lijek;
• Vrsta antibiotika koja ne djeluje na mikroorganizam označena je simbolom (R).

Bakteriološka analiza je od posebne vrijednosti u određivanju osjetljivosti na antibiotike, budući da glavni problem u borbi protiv klamidije, mikoplazme, ureaplazme itd. ostaje odabir učinkovitog tretmana koji ne šteti tijelu i ne pogodi džep pacijenta.

Tablica: Alternativni primjer rezultata kulture iz spremnika koji pokazuju učinkovite antibiotike

Pravilna priprema za bakteriološku analizu ključ je pouzdanog rezultata

Svaki biološki materijal uzet od osobe može se podvrgnuti bakteriološkoj analizi.(koža, krv, sjemena tekućina, sluznice usne šupljine, dišnog i mokraćnog sustava, probavnog trakta, organa vida, sluha i njuha itd.). Najčešće, spremnik za sjetvu propisuju ginekolozi i urolozi, pa biste se trebali malo zadržati na njemu.

Pravilna priprema za bakteriološku kulturu bit će ključ za ispravan rezultat, jer u suprotnom, analiza će se morati ponoviti i čekati određeno vrijeme. Kako donirati krv za sterilitet iz vene zadatak je zdravstvenih radnika. Ovdje u pravilu ništa ne ovisi o pacijentu, on jednostavno savije lakat, a medicinska sestra ga unese u sterilnu epruvetu uz poštivanje svih pravila asepse i antisepse.

Druga stvar je urin ili iz genitalnog trakta. Ovdje pacijent mora osigurati prvu fazu (ogradu), slijedeći propisana pravila. Treba napomenuti da je urin žena i muškaraca nešto drugačiji, iako je u mjehuru oba spola sterilan:

• U žena, pri prolasku kroz uretru, može se uhvatiti mala količina nepatogenih koka, iako općenito često ostaje sterilna;
• Kod muškaraca stvari stoje nešto drugačije. Prednji dio uretre može opskrbljivati ​​urin sa sljedećim:
  1. difteroidi;
  2. stafilokok;
  3. neke nepatogene gram-negativne bakterije, što će naknadno pokazati bakteriološka analiza.

Međutim, ako su u prihvatljivoj koncentraciji (do 10 3 CFU / ml), onda se nema čega bojati, ovo je varijanta norme.

Kako bi se izbjegla prisutnost drugih mikroorganizama i što je više moguće osigurala sterilnost uzetog materijala, prije analize se provodi temeljita toaleta spolnih organa (ulaz u rodnicu kod žena se zatvara vatom - zaštita od ulazak odvojenih spolnih organa). Za analizu se uzima prosječna porcija urina (početak mokrenja u WC školjku, približno 10 ml srednje količine u sterilnu staklenku, završava u WC-u). Pacijenti trebaju znati: urin uzet za kulturu mora se obraditi najkasnije dva sata ako se ne čuva na višoj temperaturi od 20 °C, stoga treba uzeti u obzir vrijeme transporta.

Osim toga, materijal za spremnik za sijanje, ako je potrebno, uzima se iz uretre i rektuma kod muškaraca, iz uretre, rektuma, vagine, cerviksa i cervikalnog kanala - kod žena, ali to se događa u medicinskoj ustanovi gdje bi pacijent trebao stići. Zabranjeno je pranje, ispiranje i uporaba antiseptika u takvim slučajevima.

Ostala pitanja od interesa za pacijente

Mnogi pacijenti su zainteresirani za koliko dana se radi analiza. Nemoguće je jednoznačno odgovoriti na ovo pitanje, sve ovisi o tome koji se materijal proučava i koji patogen treba tražiti. Ponekad je odgovor spreman za 3 dana, ponekad za tjedan ili čak 10-14 dana, jer neki uzorci zahtijevaju subkulturu u drugi medij.

Nemojte zaobići ljude koji idu u spremnik za sjetvu i pitanje cijene analize. Približna cijena u Moskvi je oko 800 - 1500 rubalja. Naravno, može biti i veći i ovisi o širini spektra bakteriološkog pretraživanja. Vjerojatno možete uzeti besplatnu analizu tijekom trudnoće u antenatalnoj klinici ili u klinici iz posebnih medicinskih razloga.

Za trudnice je posuda za sjetvu obavezna, daje se 2 puta(prilikom registracije i u 36. tjednu), dok se bris ne uzima samo iz genitalnog trakta, već i sa sluznice nosa i grla. Predmet pretrage u ovom slučaju, osim urogenitalnih infekcija, bit će Staphylococcus aureus (Stafilokok aureus), koji u postporođajnom razdoblju može učiniti mnogo problema (gnojni mastitis i sl.). Osim toga, trudnice su obavezne učiniti urinokulturu, struganje epitela rodnice i briseve s vrata maternice i cervikalnog kanala.

Mnoge žene, prije odlaska na postupak, jako se boje takvih strašnih riječi i počinju razmišljati: "Je li to potrebno? Možda ne idi." Uvjeravamo vas da su testovi apsolutno bezbolni. Bris iz cerviksa i cervikalnog kanala uzima se sterilnom citočetkicom, ne uzrokujući apsolutno nikakvu bol ženi, ali naknadno spremnik za sjetvu iz s / m i s / c zaštitit će i trudnicu i fetus od mogućih komplikacija. Predmet pretrage tijekom trudnoće su uzročnici klamidije, urea- i mikoplazme, gljivice (obično Candida albicans) i drugi oportunistički i patogeni mikroorganizmi.

Video: pokazni video o kulturi spremnika iz cervikalnog kanala

Posebni slučajevi od posebnog interesa za one koji polažu testove

Nakon što uđu u genitalni trakt, patogeni mikroorganizmi nakon vrlo kratkog vremena bivaju ovladani i započinju svoje štetno djelovanje. Na primjer, uvijek patogeni gonokoki (Neisseria), koji su uzročnici prilično neugodne bolesti, nazvane i povezane sa spolno prenosivim bolestima, osjećaju se "kod kuće" doslovno trećeg dana. Počinju se aktivno razmnožavati i hrabro se kretati genitalnim traktom, zauzimajući sve više i više novih teritorija. Svi znaju da se gonoreja danas dobro liječi i da je se gotovo nitko ne boji. Ali prvo ga morate pronaći. Glavna metoda traženja ove infekcije je sjetva u spremniku, kultivacija, identifikacija bojanjem po Gramu, mikroskopija.

Pronađeni u razmazu uzetom "na floru" iz genitalnog trakta, ležeći u parovima "zrna kave" (diplococci), ne ukazuju na prisutnost spolne bolesti. Takva mikroflora vagine često se javlja u postmenopauzi i ne znači ništa loše. Bris uzet u nesterilnim uvjetima na stakalcu i obojen metilenskim modrilom ili Romanovsky (citologija) ne može diferencirati mikroorganizam. On može samo pretpostaviti i uputiti pacijenta na dodatna istraživanja (dobivanje izolirane kulture).

Treba napomenuti da ako struganje sa sluznice mokraćnog trakta, uzeto za sijanje na ureaplazmu, nije tako rijetka pojava, onda sami liječnici često izbjegavaju sijanje urina, jer je s njim teže raditi.

To stvara poteškoće u dijagnozi, što donosi veliku štetu ne samo tijekom trudnoće. Osim toga, klamidija uzrokuje mnoge bolesti koje su uobičajene ne samo za žene, već i za mušku populaciju, pa se sije, uzgaja, proučava, utvrđuje osjetljivost na antibiotsku terapiju i na taj način se bori protiv nje.

Tijekom trudnoće općenito je teško bez bakteriološke kulture, jer se mnogi mikroorganizmi, maskirani u citološkom razmazu, mogu propustiti. U međuvremenu, učinak nekih spolno prenosivih bolesti na fetus može biti štetan. Osim toga, mnogo je teže liječiti trudnicu, a propisivanje antibiotika "na oko" jednostavno je neprihvatljivo.

Metode sjetve

Za izolaciju čistih kultura patogena, u prvoj fazi pribjegavaju njihovoj inokulaciji na odgovarajućim medijima, koja se provodi u posebnim (sterilnim!) uvjetima. U osnovi, prijenos materijala u okoliš provodi se uz pomoć uređaja koje je još u 19. stoljeću koristio veliki Louis Pasteur:

• bakterijska petlja;
• Pasteurova pipeta;
• Stakleni štap.

Naravno, mnogi su alati tijekom 2 stoljeća doživjeli promjene, zamijenili su ih plastični sterilni i jednokratni, ali ni stari nisu ostali u prošlosti, već služe mikrobiološkoj znanosti do danas.

Prva faza dobivanja kolonija zahtijeva poštivanje određenih pravila:

1. Sjetva se provodi preko alkoholne svjetiljke u kutiji prethodno tretiranoj dezinficijensom i tretiranom kvarcom ili u laminarnom ormaru koji osigurava sterilnost u radnom prostoru;
2. Odjeća, rukavice i okolina zdravstvenog radnika također bi trebali biti sterilni, budući da suprotno sprječava izolaciju izoliranih sojeva;
3. U boksu morate raditi brzo, ali pažljivo, ne možete razgovarati i biti ometeni, dok se morate sjetiti osobne sigurnosti, jer materijal može biti zarazan.

Izolacija sojeva i proučavanje čistih kultura

Izdvajanje sojeva nije uvijek isto, budući da neki biološki mediji koji se nalaze u ljudskom organizmu zahtijevaju individualan pristup, npr. hemokultura (krv) prvo u tekućem mediju (omjer 1:10) malo se “naraste”, budući da krv (nerazrijeđena) može ubiti mikroorganizme, a zatim, nakon jednog dana ili više, subkultivirana na Petrijevim zdjelicama.

Sjetva urina, ispiranje želuca i drugi tekući materijali također imaju svoje karakteristike, gdje se za dobivanje čiste kulture tekućina prvo mora centrifugirati (aseptični uvjeti!), A tek onda sijati, i to ne sama tekućina, već njen sediment .

Uzgoj i uzgoj kolonija provodi se na Petrijevim zdjelicama ili se prvo stavlja u tekući medij uliven u sterilne bočice, a zatim se izolirane kolonije ponovno siju, ali na kosi agar i materijal se stavlja u termostat na jedan dan. Nakon provjere čistoće dobivene kulture, sojevi se prenose na predmetno staklo, pravi se razmaz i boji po Gramu (najčešće), Ziehl-Neelsenu itd., a za diferencijaciju se proučava morfologija mikroba. pod mikroskopom:

• Veličina i oblik bakterijske stanice;
• Prisutnost kapsula, flagela, spora;
• Tinktorijalna svojstva (omjer mikroorganizma i bojenja) *.

* Čitatelj je vjerojatno čuo za takav patogen kao blijeda treponema? Ovo je uzročnik sifilisa, pa se njegovo ime (blijedo) pojavilo jer ne percipira dobro boju i ostaje blago ružičasto kada se boji prema Romanovskom. Mikroorganizmi koji ne percipiraju anilinske boje nazivaju se gram-negativni, a percipirajući - gram-pozitivni. Gram-negativne bakterije dobivaju ružičastu ili crvenu boju bojenjem po Gramu dodatnim bojama (magenta, safranin).

Sjejanje u spremnik može se nazvati drevnom analizom, ali njegova popularnost time ne pada, iako moderna bakteriologija ima sposobnost izolirati ne samo sojeve, već i jednu stanicu iz njih, koja se naziva klon. Međutim, za dobivanje klona potreban je poseban uređaj - mikromanipulator, koji nije dostupan u konvencionalnim laboratorijima, jer se koristi uglavnom u istraživačke svrhe (genetske studije).

Crijevne infekcije čest su uzrok probavnih smetnji kod djece. Da biste brzo izliječili svoje dijete, morate uzeti testove i identificirati pravi uzrok crijevnih smetnji. Laboratorijska dijagnostika crijevnih infekcija uključuje analizu fecesa na uvjetno patogenu skupinu mikroorganizama i analizu na patogenu floru (analiza na disgrupu i tifusnu i paratifusnu skupinu bakterija).

Analiza izmeta na disgrupu je proučavanje fekalnih masa na prisutnost uzročnika crijevnih infekcija. U ovu skupinu spadaju bakterije koje kod zdrave djece nisu stalni stanovnici crijeva, a potencijalno mogu izazvati infekcijski proces. Tu spadaju uzročnici dizenterije (shigella) i salmonela.

Uvjetno patogeni mikroorganizmi (enterokoki, stafilokoki, klostridije, gljivice), uz "korisne" bakterije, čine prirodnu crijevnu mikrofloru. Nazivaju se uvjetno, jer. njihova sposobnost da izazovu infekciju ovisi o specifičnim okolnostima: slabljenje imunološkog sustava, naglo smanjenje broja "bakterija pomoćnika" (laktobacila, bifidobakterija), pokvarena hrana.

U kojim slučajevima je potrebno ispitati izmet?

Neophodno je donirati izmet za razjašnjavanje dijagnoze ako se sumnja na crijevnu infekciju ili kao dio preventivnih mjera.

Za razvoj crijevne infekcije, patogeni mikrobi moraju ući u crijeva djeteta. Izvor zaraze je izmet zaražene osobe. Prijenos mikroba može se dogoditi kontaktom s bolesnom osobom ili nositeljem infekcije, korištenjem zaražene hrane ili vode. Vodeni put se smatra najčešćim.

Ne uspijevaju sve bakterije doći do crijeva - želučani sok uzrokuje smrt većine njih. Budući da dojenčad (osobito novorođenčad) proizvodi manje želučanog soka, izložena je većem riziku od infekcije. Kod dojenčadi može doći do crijevne infekcije kada se doda komplementarna hrana. Ako se komplementarna hrana priprema bez poštivanja sanitarnih pravila ili nije podvrgnuta toplinskoj obradi, tada u njoj mogu biti prisutni oportunistički mikrobi.

Uz crijevnu infekciju, dijete može doživjeti sljedeće pritužbe:

• bol u trbuhu;
• mučnina, povraćanje;
• tekuća stolica;
• groznica, zimica, opća slabost.

Akutna crijevna infekcija kod djece može se javiti u obliku gastritisa, enteritisa ili kolitisa, brzo se razvija. Proljev je obrambena reakcija tijela za uklanjanje uzročnika bolesti. Ali zajedno s tekućom i obilnom stolicom gube se i korisne tvari, a ako se liječenje ne započne na vrijeme, dijete razvija dehidraciju od obilnog proljeva i povraćanja. Koža i vidljive sluznice postaju suhe, dijete postaje letargično, smanjuje se količina mokraće, nema znojenja i suza. Novorođenče ima fontanel. U vrlo teškim slučajevima razvija se šok i zatajenje više organa. Bebe mnogo brže razvijaju dehidraciju.

Indikacija za analizu je identifikacija prijevoza. To su slučajevi kada djeca koja su već imala crijevnu infekciju nastavljaju izlučivati ​​patogeni mikrob izmetom. Stoga je analiza izmeta za crijevnu skupinu za hospitalizaciju neophodan postupak ako dijete treba podvrgnuti operaciji i liječenju u bolnici zbog druge bolesti.

Preventivnu studiju za prijenos uzročnika crijevnih infekcija također provode liječnici, radnici u prehrambenoj industriji i obrazovnim ustanovama i uključena je u obvezni godišnji pregled.

Može pokazati jesu li esencijalni probavni enzimi prisutni u tijelu.

Kako uzeti analizu? Pravila prikupljanja stolice

Prije nego što donirate izmet intestinalnoj skupini, morate znati kako to učiniti ispravno. Tehnika uzimanja nije teška. Izmet treba sakupljati u posebnu plastičnu bocu, koja se može kupiti u ljekarni. Prije uzimanja izmeta potrebno je pripremiti dijete: nekoliko dana nemojte uzimati aktivni ugljen, ricinusovo ulje, nemojte stavljati rektalne čepiće i nemojte uzimati antibiotike. Izmet uzimaju nakon što dijete ide na WC “malo po malo”.

Prikupite izmet s nekoliko mjesta i napunite jednu trećinu spremnika, to je oko 2 cm.Ako morate dugo čekati na prirodnu defekaciju, tada su izmet uzeti iz donjeg rublja (nužno svježe) prikladni kao materijal za analizu. Pipeta se može koristiti za prikupljanje stolice ako je stolica vrlo rijetka. Izmet se uzima iz područja gdje ima puno patoloških nečistoća, kao što su gnoj, sluz, ljuskice. Odabrani materijal treba biti bez krvi. Ujutro prikupljamo izmet. Postoje slučajevi kada uzimanje izmeta nije potrebno, rektalni bris se šalje na analizu. Uzima se u klinici posebnim brisom u položaju djeteta koji leži na boku. Uzeti izmet ili bris predaje se u laboratorij unutar 3 sata nakon uzorkovanja.

Laboratorijska dijagnostika

Analiza crijevne infekcije u djece uključuje bakterioskopski i bakteriološki pregled izmeta. Bakterioskopska metoda pokazuje prisutnost bakterija i protozoa u izmetu pod mikroskopom. Bakteriološka analiza izmeta je uzgoj kolonije mikroorganizama.

Da biste to učinili, spremnik za kulturu stolice izrađuje se na hranjivom mediju. Po prirodi rasta određuje se vrsta zaraznih uzročnika i njihova koncentracija. Kada se otkriju patogeni mikroorganizmi, određuje se njihova osjetljivost na antibiotike.

Najčešće postavljeno pitanje je: “Koliko dugo traje testiranje na crijevne infekcije?” Potrebno je vrijeme da kolonija naraste. Koliko će dana kultura rasti ovisi o specifičnoj vrsti mikroba. Podaci se obično dobivaju unutar 1-2 tjedna.

Ponekad analiza crijevne skupine možda neće biti dovoljno informativna. Na primjer, ako je uzročnik infekcije virus ili protozoa, ili ako u izmetu nije pronađen sam uzročnik, već njegov otpad. U ovom slučaju doniraju izmet za lančanu reakciju polimeraze. PCR izmeta određuje DNK uzročnika, čak i ako je samo jedna bakterija ušla u izmet. Podaci dolaze u roku od jednog dana.

Dodatne dijagnostičke metode istraživanja crijevnih infekcija uključuju krvni test, hemokulturu (ako dijete ima temperaturu dulje od 3 dana) i serološku analizu (omogućuje otkrivanje protutijela na patogene).

Kultura stolice na patogenu crijevnu floru također pomaže u razlikovanju crijevne infekcije od drugih stanja koja mogu uzrokovati iste simptome. Diferencijalna dijagnoza crijevne infekcije provodi se s disbakteriozom i toksičnim infekcijama hrane. Za dijagnozu disbakterioze daje se analiza izmeta na UPF.

Dešifriranje primljenih podataka

Kod zdravog djeteta u izmetu nema patogenih mikroorganizama, tj. analiza bi trebala biti negativna na disgroup i salmonelozu, kao i na dizenteričnu amebu i skupinu tifusa i paratifusa. Normalno, nema tako jednostavnih mikroorganizama kao što su crijevni Trichomonas, balantidia.

Visoke vrijednosti patogenih bakterija koje nisu dio normalne mikroflore nalaze se u dva slučaja: akutna crijevna infekcija i bakteriokarijera.

UPF analiza će vam reći koliko ovih bakterija ima u 1 gramu izmeta. Niske vrijednosti enterokoka, klostridija, gljivica candida i bakteroida smatraju se negativnim rezultatom, jer. za razvoj infekcije potrebna je određena količina uzročnika, a ne samo njegova prisutnost. Ako uvjetno patogena mikroflora prevladava nad koncentracijom laktobacila u izmetu, to je disbakterioza.

Ako se otkrije crijevna skupina, analiza se nadopunjuje testom osjetljivosti bakterija na antibiotike.

Osjetljivost na antibiotike označena je sljedećim oznakama slova

• S - osjetljiv (h);
• R - stabilan, otporan (y);
• I - umjereno stabilan (yy).

Liječenje

Ako je test stolice pozitivan, tada bolesno dijete treba izolirati. Uz blagi tijek bolesti, liječenje se može provesti kod kuće. Potrebno je nadoknaditi količinu tekućine izgubljenu fecesom (rehidracija). Liječnik propisuje antibiotsku terapiju. U teškoj dehidraciji dijete treba hitno hospitalizirati!

Diferencijalna dijagnoza može biti teška ako se jedna bolest javlja pod krinkom druge. U takvim slučajevima točna dijagnoza postavlja se na temelju rezultata uspješnog liječenja. Ako je terapija bila učinkovita, dijagnoza je točna.

Vrlo je jednostavna, ali u isto vrijeme vrlo informativna analiza - omogućuje vam dijagnosticiranje gotovo svih bolesti probavnog sustava, razjašnjavanje mjesta lezije (želudac, struja ili debelo crijevo) i otkrivanje prisutnosti nepozvanih gostiju - parazita i patogenih mikroba. Međutim, većina roditelja pod analizom izmeta misli samo na "analizu na disbakteriozu", koju tako rado propisuju svim bebama. Međutim, postoji nekoliko analiza fecesa, a mikrobiološka kultura (“na disbakteriozu”) radi se posljednja, kada se isključe svi drugi problemi.

U djece prve godine života analiza izmeta otkriva različite probavne smetnje - poremećaje želuca. Crijeva, problemi s jetrom i gušteračom, zarazne bolesti i nasljedna patologija metabolizma. Koji se testovi daju i na što se gleda?

Ova analiza procjenjuje glavne karakteristike izmeta - fizičke, kemijske i mikroskopske, osim toga, ovisno o vrsti hranjenja i dobi bebe, imat će karakteristične značajke. Ali kako bi analiza pokazala pouzdane podatke, potrebno ih je pravilno prikupiti, što je kod male djece prilično težak zadatak.
Analiza se prikuplja s pelene ili krpe, budući da pelena apsorbira dio tekućine, a analiza će biti nepouzdana.

Za analizu su potrebne najmanje 1-2 žličice izmeta prikupljenog u suhu, čistu posudu. Ali staklenke s dječjom hranom ne smiju se koristiti - mikroskopske čestice hrane ostaju na njihovom dnu i stijenkama, što će iskriviti rezultat. U idealnom slučaju, ovo bi trebala biti svježa analiza - beba je otišla u velikom stilu, prikupili ste i dostavili analizu u laboratorij. Ali ako to nije moguće, skupite ga u posudu, dobro zatvorite poklopac i stavite u vrata hladnjaka - možete ga čuvati najviše 6-8 sati.
Neprihvatljivo je prikupljanje materijala nakon klistira ili upotrebe laksativa ili lijekova, u izmetu ne bi trebalo biti čestica urina.

Kako se procjenjuje i što bi trebalo biti normalno?
Dosljednost. Za djecu prve dvije godine života, stolica je prihvatljiva u obliku kaše i neformirana. Na punom dojenju, tekuća kaša, s malo vode, može biti gusto kiselo vrhnje. Na IV, stolica može biti mekana kobasica ili kaša. S uvođenjem komplementarne hrane, stolica se počinje oblikovati i postaje gušća, do dobi od dvije godine obično je labava kobasica. Stolica u obliku "suhe dimljene kobasice" ili "ovčjih kuglica" je zatvor. Stolica je tekuća, voda sa nečistoćama i često je to zatvor.

Boja. U beba prve godine života izmet je obično žut, s malim dopuštenim primjesama zelenila u prva 3-4 mjeseca. Tada stolica postaje žuto-smeđa, a do druge godine postaje otprilike ista kao kod odraslih. Komadići hrane su prihvatljivi, posebno u prvim mjesecima dohrane, a pri korištenju svijetle hrane, bojanje izmeta u boji proizvoda (cikla, rabarbara, bundeva).
Miris. U prvim mjesecima života stolica dojene djece ima miris kiselog mlijeka, dok umjetne imaju oštriji miris. Uvođenjem komplementarne hrane, osobito mesa, stolica dobiva uobičajeni fekalni miris.

pH (reakcija). Normalna je neutralna ili blago alkalna reakcija, no u prvim mjesecima pri hranjenju adaptiranim mlijekom ili majčinim mlijekom može biti i blago kisela.
Protein. zdrava djeca ne bi trebala imati proteine ​​u izmetu - njegova prisutnost ukazuje na upalu crijeva, prisutnost sluzi, krvarenje, eksudat, neprobavljenu hranu.
Reakcija na okultnu krv. Normalno, u zdravom crijevu ne bi trebalo biti krvi - to uvijek ukazuje na probleme. Najčešće se krv pojavljuje s alergijama, upalom crijeva. rektalne fisure. prolaps rektuma, hemoroidi, polipi i malformacije crijeva.
odgovor na bilirubin. Bilirubin je jedan od proizvoda razgradnje hemoglobina, koji je prihvatljiv u izmetu do oko tri mjeseca starosti, kasnije se pod djelovanjem enzima i mikroflore potpuno transformira u sterkobilin, dajući smeđu boju. Njegova pojava u izmetu nakon ove dobi ukazuje na zdravstvene probleme.

Sluz. Sluz je želatinasti iscjedak koji je bistar ili bjelkaste boje. Dizajnirani su za zaštitu od agresivnog djelovanja crijevnog sadržaja. Međutim, normalno se oslobađa malo sluzi, a na izlazu je potpuno pomiješana s izmetom. Primjetna prisutnost sluzi u izmetu prihvatljiva je do 3-5 mjeseca života, osobito u dojenčadi. A onda govore o prisutnosti upalnog procesa.
Leukociti. Mala količina leukocita, osobito u prvim mjesecima života, prihvatljiva je, međutim, ako se oslobađaju u velikim količinama u kombinaciji sa sluzi i krvlju, to ukazuje na upalu i oštećenje stijenke crijeva.

Mišićna vlakna. Govore o stupnju probave proteinske hrane, prije uvođenja mesne komplementarne hrane, one praktički ne postoje kod djeteta, au budućnosti bi trebale biti pojedinačne. Ako ih ima puno, to ukazuje na kršenje probave u želucu i crijevima, probleme s gušteračom, upalu crijeva.

Vezivno tkivo. Normalno, to ne bi trebalo biti, to se događa samo nakon uvođenja komplementarne hrane s nedovoljnom sekrecijom želuca, problemima s gušteračom.
Neutralna mast. Masna kiselina. Sapun. U ranom djetinjstvu može se pojaviti u malim količinama, ali nakon šest mjeseci pojavljuje se u kršenju gušterače, jetre ili bolesti tankog crijeva.

Ostaci neprobavljene hrane. U prvim godinama života prihvatljiva je prisutnost ostataka biljne hrane u izmetu - osobito kukuruza, mrkve, kore jabuke itd. Ako u izmetu ima puno probavljivih vlakana, to može značiti da hrana prebrzo prolazi kroz crijeva. Neprobavljena vlakna mogu biti normalna.

Škrob. Pojavljuje se u hrani s uvođenjem komplementarne hrane, ako ga ima puno, peče o lošem radu gušterače, probavnih smetnji u crijevima i crijevnih infekcija.
jodofilna flora. To su posebne vrste bakterija do čijeg se prekomjernog razmnožavanja javljaju dispepsije (probavne smetnje), poremećaji u radu tankog crijeva, poremećaji u radu želuca i gušterače.

Ispitivanje sadržaja ugljikohidrata u izmetu.
Ova studija se provodi sa sumnjom na nedostatak laktaze - smanjenje količine enzima koji razgrađuje mliječni šećer (laktozu) u crijevima. Obično se propisuje za dispeptičke simptome - tekuću, pjenastu stolicu, poremećeno povećanje tjelesne težine koje se javlja pri uporabi mliječnih proizvoda. Pravi nedostatak laktaze (kada postoji nedostatak enzima) je rijedak. Uglavnom postoje lažne ili sekundarne varijante nedostatka laktaze, kada je enzim prisutan, ali još nije zreo, ili je blokiran kao posljedica crijevne infekcije, ili postoji preopterećenost mliječnim šećerom (npr. , s neravnotežom prednjeg i stražnjeg mlijeka u dojenčadi).

Ovo stanje nestaje nakon korekcije prehrane, liječenja crijevne infekcije i normalizacije mikroflore. Analiza izmeta za ugljikohidrate nije glavna u postavljanju dijagnoze, ali pomaže u određivanju prirode insuficijencije - primarne ili sekundarne.
Za pravilno prikupljanje izmeta za određivanje ugljikohidrata u izmetu, potrebno ga je sakupiti u čistu, suhu posudu, u količini od najmanje 1-2 žličice. Izmet se mora dostaviti u laboratorij najkasnije 3-4 sata, inače će rezultat biti iskrivljen. Normalne vrijednosti za djecu mlađu od godinu dana su:
Dojenje (prije komplementarne hrane) do 0,5-0,6%,
Na umjetnom hranjenju - do 0,3%,
Za djecu od drugog polugodišta - do 0,25%,
Starije od godinu dana 0%.

Uz povećanje pokazatelja, propisana je korekcija hranjenja, uklanja se neravnoteža mlijeka ako je beba ili se privremeno daje smjesa s niskim sadržajem laktoze ako je beba na IV. Ako se potvrdi primarni nedostatak laktaze, liječenje će se sastojati od primjene enzima laktaze.

Analiza izmeta na oportunističku floru (UPF).
Upravo ova analiza izmeta, koja se obično naziva "disbakterioza", izaziva najveći broj pitanja među roditeljima. Međutim, ova analiza uglavnom je neinformativna i nije indikativna. Stvar je u tome što je crijevna mikroflora vrlo nestabilna, pa čak i ako se provode dvije analize zaredom kod istog djeteta ujutro i navečer, one će se značajno razlikovati.

Da bismo razumjeli odakle dolaze mikrobi u crijevima i koga se trebamo bojati, a koga ne, razgovarajmo ukratko o tome kako funkcioniraju crijeva. Neposredno nakon poroda, kada se beba prisloni na dojku, bebina crijeva su naseljena mikroflorom majke. On postaje poput višekatnice - tu su mirni susjedi, a većina njih su bifido- i laktoflora. I tu su nasilni susjedi, ali njihova manjina je takozvana uvjetno patogena flora (staphylococcus aureus, Klebsiella, određene vrste Escherichia coli). Dok se svi mikrobi nasele u crijevima, javlja se anksioznost - fiziološka disbakterioza, dok svi ne zauzmu svoje mjesto. Osim toga, naseljavanje i mirno postojanje u crijevima raznih potencijalno opasnih mikroba, poput stafilokoka i Klebsielle, olakšava pomoć majke - majčino mlijeko s antitijelima na štetne mikrobe i posebnim tvarima koje pomažu rast korisnih laktobacila i bifidoflore. Odnosno, sve promjene u analizi izmeta na mikrofloru u prvih 4-6 mjeseci života fiziološka su postavka za rad i miran suživot mikroba.

Što je dopušteno, a što nije?
U ovoj analizi postoje neke posebne indikacije, tako da je prisutnost uzročnika salmoneloze, kolere, trbušnog tifusa, dizenterije i patogenog tipa Escherichia coli očito neprihvatljiva u izmetu. Ali roditelji su, međutim, više zabrinuti zbog prisutnosti stafilokoka, Proteusa, Klebsielle, enterokoka u izmetu. Međutim, sama po sebi prisutnost bilo koje količine ovih mikroba, u nedostatku klinike za te bolesti, odnosno ako dijete nema temperaturu, dobiva na težini, raste i razvija se u skladu s dobi, varijanta je norma za ovu bebu. Mikroflora se naziva uvjetno patogenom jer samo pod određenim uvjetima može postati aktivna i štetna.

To se događa kod djece s imunodeficijencijama, naglim smanjenjem imunoloških snaga nakon teških i dugotrajnih bolesti, nakon izloženosti ili liječenja teškim lijekovima - antibioticima za dugi tečaj (tri ili više tjedana), antitumorskim sredstvima. Drugi razlog za aktivaciju ove flore mogu biti crijevne infekcije i teška trovanja - jednostavno se pridružuju klinici bolesti. U svim ostalim slučajevima korekcija mikroflore uopće nije potrebna - mikrobna ravnoteža će se sama uspostaviti. Upotreba bilo kakvih lijekova za ispravljanje flore nije potrebna - većina njih jednostavno ne dospijeva u crijeva, jer ih uništava klorovodična kiselina želuca ili crijevni enzimi.

Naravno, ovo nisu sve pretrage stolice koje se mogu napraviti kod djeteta. Međutim, sve druge studije su prilično specifične i provode se samo ako se u općim analizama utvrde značajna odstupanja. Propisuje ih gastroenterolog i potrebni su za razjašnjenje dijagnoze ili za praćenje učinkovitosti liječenja.