पीसीआर डीएनए एचआईवी के लिए रक्त कैसे लें। एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण: प्रक्रिया की विश्वसनीयता और विशेषताएं। कितने एचआईवी परीक्षण किए जाते हैं

सबसे गंभीर बीमारियों में से एक जो अभी तक ठीक नहीं हुई है, वह मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस के कारण होती है।

शरीर में एक रोगज़नक़ का पता लगाना आसान नहीं है: वर्तमान में, इसके लिए केवल कुछ शोध विधियों का उपयोग किया जाता है।

इनमें से एक परीक्षण है पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर)।

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन विधि के कोर्ट को समझने के लिए, आपको स्कूल के पाठ्यक्रम से कोशिकाओं की संरचना की ख़ासियत को याद रखना होगा।

किसी भी जीवित कोशिका में प्रोटीन और दो प्रकार के न्यूक्लिक एसिड होते हैं: डीएनए और आरएनए। वे सबसे महत्वपूर्ण सेलुलर संरचनाएं हैं क्योंकि उनमें एक विशेष तरीके से एन्कोडेड आनुवंशिक जानकारी होती है।

डीएनए कोड सूक्ष्म संरचनाओं का एक सख्त क्रम है जो एक लंबी श्रृंखला बनाते हैं।

संदर्भ!एक न्यूक्लिक एसिड की खुद को पुन: उत्पन्न करने की क्षमता का उपयोग पीसीआर के आधार के रूप में किया जाता है।

जब वायरस स्वस्थ कोशिकाओं में प्रवेश करता है, तो यह डीएनए स्ट्रैंड को नष्ट कर देता है।

इस मामले में, सेल में अब पूरी श्रृंखला नहीं होगी, लेकिन केवल छोटे टुकड़े - न्यूक्लियोटाइड होंगे। साथ ही वायरस के छोटे से छोटे कण भी दिखाई देंगे।

यह क्षतिग्रस्त डीएनए श्रृंखलाओं और अवशिष्ट कोशिकाओं का पता लगाने पर है कि पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन विधि बनाई गई है।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स दो प्रकार के होते हैं:

• गुणवत्ता. उन लोगों के लिए उपयुक्त जिनके निदान की पुष्टि नहीं हुई है: यह केवल दिखाता है कि कोशिकाओं में वायरस मौजूद है या नहीं।
• मात्रात्मक. रोगी को "वायरस के डीएनए का पता नहीं चला" परिणाम प्राप्त होता है, जिसका अर्थ है एचआईवी की अनुपस्थिति, या रोगज़नक़ की उपस्थिति के बारे में जानकारी, जिसका अर्थ है कि व्यक्ति एचआईवी संक्रमित है।

यदि एक पुष्टि निदान है, तो एक मात्रात्मक विश्लेषण सौंपा गया है। इसकी मदद से रक्त (कोशिकाओं) में वायरस के आरएनए (डीएनए) की प्रतियों की संख्या निर्धारित की जाती है। मात्रात्मक विश्लेषण एचआईवी संक्रमित लोगों में उपचार की प्रभावशीलता का आकलन करना, रोग की गंभीरता, इसकी प्रगति का निर्धारण करना संभव बनाता है।

एचआईवी संक्रमण का पता लगाने के लिए कौन से नैदानिक ​​तरीके वीडियो में वर्णित हैं:

इस निदान पद्धति के फायदे और नुकसान

किसी भी नैदानिक ​​​​उपाय की तरह, पीसीआर के अपने फायदे और नुकसान हैं।

विधि के फायदों में शामिल हैं:

• उच्च विश्वसनीयता।पीसीआर के साथ, वायरस के सबसे छोटे अवशेषों का पता लगाना संभव है, संक्रमण के बाद रोगज़नक़ का पता लगाने की संभावना 80% 4-5 दिनों के बाद, 100% - संक्रमण के 14 दिनों के बाद तक पहुंच जाती है। इस प्रकार, रक्त कोशिकाओं में एक वायरस के डीएनए का अध्ययन करते समय सबसे बड़ी सटीकता प्राप्त की जाती है: एक वायरस का पता लगाया जा सकता है जब इसकी संख्या प्रति 1 मिलियन कोशिकाओं में 1-5 प्रतियां होती है।
• विभिन्न बायोमैटिरियल्स के उपयोग की संभावना(लार, मूत्र, पसीना और आंसू पीसीआर के लिए उपयुक्त नहीं हैं, लेकिन महिलाओं से रक्त, वीर्य और जननांग स्राव का उपयोग किया जा सकता है)।
• एक परीक्षण पर विभिन्न रोगों पर विश्लेषण करने की संभावना।पीसीआर का उपयोग करके, आप एचआईवी, क्लैमाइडिया, दाद, साइटोमेगालोवायरस, यूरियाप्लाज्मा, मायकोप्लाज्मा, गोनोरिया, ट्राइकोमोनिएसिस, टोक्सोप्लाज्मोसिस का पता लगा सकते हैं।
• परिणाम प्राप्त करने की तेज गति।एक एक्सप्रेस पीसीआर परीक्षा है जो आपको कुछ घंटों में नैदानिक ​​​​परिणामों का पता लगाने की अनुमति देती है।
• उच्च संवेदनशील: पीसीआर, उदाहरण के लिए, एलिसा के विपरीत, संक्रमण के बाद पहले हफ्तों में ही वायरस का पता लगाने में मदद करता है।
• संक्रमण के कुछ दिनों के भीतर परिणाम प्राप्त होने की संभावना।संक्रमित होने पर, वायरस को 5-14 दिनों के बाद निर्धारित किया जा सकता है, जबकि एलिसा को केवल 6 सप्ताह के बाद ही बाहर ले जाने की सलाह दी जाती है।
• कोई आयु प्रतिबंध नहीं।पीसीआर जन्म के क्षण से वयस्कों और बच्चों दोनों में किया जा सकता है।

पीसीआर विश्लेषण की मुख्य विशेषता यह है कि यह वायरस के प्रति एंटीबॉडी का पता नहीं लगाता है, बल्कि वायरस का ही पता लगाता है।

फायदे के खिलाफ केवल कुछ नुकसान हैं:

• उच्च लागत।
• झूठे सकारात्मक परिणाम प्राप्त करने की संभावना लगभग 20% है। आमतौर पर यह कर्मियों की गलती के कारण होता है (जैव सामग्री के संग्रह या परिवहन में त्रुटियां, जैव सामग्री के अध्ययन और परिणामों की व्याख्या में)।
• उन्नत उच्च तकनीक वाले उपकरणों का उपयोग करने की आवश्यकता है, जो केवल कुछ क्लीनिकों से सुसज्जित हैं।

ध्यान!जाहिर है, तकनीक के फायदे नुकसान की तुलना में बहुत अधिक हैं। यह विशेष रूप से महत्वपूर्ण है कि पीसीआर की मदद से विकास के प्रारंभिक चरण में बीमारी का पता लगाना और समय पर उपचार शुरू करना संभव है।

संभावित संक्रमण के 14-21 दिन बाद ही पीसीआर विश्लेषण का परिणाम सकारात्मक हो सकता है। लेकिन अगर विश्लेषण नकारात्मक है, तो यह संक्रमण की अनुपस्थिति की गारंटी नहीं देता है। 2 सप्ताह के बाद एलिसा शहद के साथ एक पुष्टिकरण परीक्षण करना बेहतर है।

एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण कैसे किया जाता है, इसका वर्णन वीडियो में किया गया है:

किसे सौंपा गया है?

सबसे पहले, संदिग्ध एचआईवी के लिए पीसीआर निर्धारित है। यह तकनीक यौन संचारित रोगों, वंशानुगत रोगों का पता लगाने के लिए भी सूचक हो सकती है।

संदर्भ!पीसीआर निदान अक्सर एक ऐसे व्यक्ति द्वारा शुरू किया जाता है जिसने रोग के लक्षण नहीं दिखाए हैं, लेकिन संभावित संक्रमण के बारे में अटकलें और चिंता है, उदाहरण के लिए, असुरक्षित संभोग के बाद, हाल ही में एक रक्त आधान, एक संक्रमित व्यक्ति के साथ संपर्क।

परीक्षा में और किसे दिखाया जाता है?

• जिन लोगों ने दो बार एलिसा के लिए सकारात्मक परीक्षण किया है। पीसीआर आपको अंतिम निदान स्थापित करने की अनुमति देगा।
• रक्तदान करने की योजना बना रहे दाता।
• जिन लोगों में इम्युनोब्लॉटिंग ने निदान की पुष्टि की। इम्यून ब्लॉटिंग एड्स के निदान के लिए एक तरीका है और आमतौर पर पीसीआर के साथ संयोजन में किया जाता है।
• जो लोग एचआईवी के कारण होने वाली बीमारियों के उपचार के चरण में हैं। पीसीआर आपको चिकित्सा की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने की अनुमति देता है।
• नवजात जिनकी मां एचआईवी पॉजिटिव है (लगभग 30% मामलों में वायरस का संचरण होता है)। जन्म के 2-3 सप्ताह बाद ही यह पता लगाया जा सकता है कि संक्रमण हुआ है या नहीं।

कुछ लोगों की निवारक उपाय के रूप में जांच की जाती है, लेकिन यह दुर्लभ है क्योंकि पीसीआर परीक्षण की लागत अधिक है।

विश्लेषण में कितना समय लगता है और मैं इसे कहां ले सकता हूं?

एचआईवी के लिए पीसीआर विश्लेषण प्रयोगशाला में किया जाता है।

रक्त के नमूने में 5-10 मिनट का समय लगता है, और परिणाम अगले दिन तैयार होते हैं।

एक्सप्रेस डायग्नोस्टिक्स चुनते समय (उदाहरण के लिए, प्रयोगशालाओं "इनविट्रो" या "हेमोटेस्ट") में, किसी विशेषज्ञ द्वारा परिणामों की व्याख्या में केवल 2 घंटे लगते हैं।

निजी क्लीनिकों में, निदान, यदि वांछित हो, गुमनाम रूप से किया जा सकता है। ऐसा करने के लिए, आपको व्यक्तिगत यात्रा के दौरान इसकी रिपोर्ट करने की आवश्यकता है: प्रत्येक रोगी को एक सीरियल नंबर दिया जाता है और एक व्यक्तिगत खाते तक पहुंच प्रदान की जाती है। तब एक व्यक्ति प्रयोगशाला में दूसरी बार देखे बिना भी परिणामों का पता लगा सकता है।

पीसीआर अध्ययन के परिणामों की विश्वसनीयता वीडियो में वर्णित है:

अनुसंधान लागत

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स सस्ते नहीं हैं, क्योंकि उन्हें कुछ उन्नत उपकरणों के साथ-साथ विशेष विशेषज्ञ ज्ञान की आवश्यकता होती है।

उपकरण केवल कुछ चिकित्सा प्रयोगशालाओं में उपलब्ध है, जो आपको विश्लेषण की उच्च लागत निर्धारित करने की अनुमति देता है।

एक अध्ययन की औसत कीमत 3000-5000 रूबल है। कुछ क्षेत्रों में, लागत 1500-2000 रूबल से अधिक नहीं है।

चूंकि झूठे सकारात्मक और झूठे नकारात्मक परिणामों की संभावना है, या व्यक्ति ने बहुत जल्दी आवेदन किया है (वायरस ने अभी तक डीएनए संरचना को नहीं तोड़ा है, लेकिन पहले से ही शरीर में मौजूद है), एक दूसरे परीक्षण की आवश्यकता हो सकती है।

उच्च लागत इस तथ्य के कारण भी है कि निदान के लिए कई घटकों की आवश्यकता होती है:

1. डीएनए खंड (मैट्रिक्स) प्रवर्धन के लिए अभिप्रेत है;
2. दो प्राइमर;
3. पोलीमरेज़ - एक रासायनिक रूप से सक्रिय घटक जो वायरल कणों की संख्या में तेजी से वृद्धि करता है;
4. डीऑक्सीराइबोन्यूक्लियोसाइड ट्राइफॉस्फेट;
5. द्विसंयोजक मैग्नीशियम के आवेशित कण;
6. एक विशेष समाधान जिसमें पोलीमराइजेशन प्रक्रिया की जाती है। यह घोल तरल में उपयुक्त स्तर की अम्लता, नमक सांद्रता, मैग्नीशियम की मात्रा को बनाए रखने के लिए बनाया गया है।

इसके अलावा, अध्ययन के लिए थोड़ी मात्रा में पेट्रोलियम जेली की आवश्यकता होती है: इसमें उच्च तापमान पर वसा और फोड़े होते हैं, जो अध्ययन किए गए नमूने को अधिक गरम होने से बचाता है।

विश्लेषण का संचालन

रक्त, वीर्य और योनि स्राव विश्लेषण के लिए उपयुक्त हैं। आमतौर पर, अक्सर शिरापरक रक्त का उपयोग करते हैं।

सुबह खाली पेट ब्लड सैंपलिंग की जाती है।

इसके अलावा, आपको विश्लेषण के लिए तैयार करने की आवश्यकता है:

• निदान से 2-3 दिन पहले, वसायुक्त खाद्य पदार्थों को आहार से बाहर रखा जाना चाहिए।
• विश्लेषण से 1-2 दिन पहले शराब को बाहर रखा गया है।
• विश्लेषण से 2 सप्ताह पहले, आपको इम्यूनोस्टिम्युलेटिंग ड्रग्स लेना बंद करना होगा।
• अंतिम भोजन रक्तदान से 8 घंटे पहले नहीं होना चाहिए।

नस से रक्त लेते समय, कोहनी के अंदरूनी मोड़ को एक विशेष घोल से उपचारित किया जाता है, जिसके बाद विशेषज्ञ त्वचा को छेदता है, शिरा सिरिंज की सुई लगाता है और सही मात्रा में रक्त लेता है। फिर सुई को हटा दिया जाता है, उस जगह को फिर से शराब से उपचारित किया जाता है, रोगी को एक कपास झाड़ू दिया जाता है।

रक्तस्राव को रोकने के लिए रोगी को अस्थायी रूप से हाथ मोड़ना चाहिए। अगर कोई व्यक्ति ठीक महसूस करता है, तो वह तुरंत घर जा सकता है। चक्कर आने, जी मिचलाने और बेहोशी की स्थिति में उसे प्राथमिक उपचार दिया जाता है।

प्रयोगशाला सहायक प्राप्त बायोमटेरियल को एक बाँझ फ्लास्क में रखता है और इसे निदान के लिए भेजता है। विशेषज्ञ एक विशेष रिएक्टर में विभाजित जैविक सामग्री को एंजाइमों के साथ मिलाता है जो विभिन्न संक्रमणों को संश्लेषित करते हैं।

यदि रक्त में बहुत कम वायरस कण होते हैं, तो एंजाइमों के साथ बातचीत करते समय उनकी संख्या तेजी से बढ़ जाती है: अभिकर्मक वायरस के डीएनए के साथ जुड़ते हैं और इसकी नकल करते हैं।

विश्लेषण कई चरणों में किया जाता है, क्योंकि अणुओं का विभाजन तेजी से होता है। एक सेल से यह 2 निकलता है, 2 - 4 से और इसी तरह।

डॉक्टरों की राय और समीक्षाओं का विश्लेषण करते हुए, हम विश्वास के साथ कह सकते हैं: वर्तमान में, एचआईवी संक्रमण के परीक्षण के लिए पीसीआर डायग्नोस्टिक्स सबसे सटीक तरीका है।

संदर्भ!विश्लेषण का उपयोग करके, संक्रमण के कुछ दिनों बाद ही शरीर में वायरस की उपस्थिति स्थापित करना संभव है, भले ही वायरल संरचनाओं की संख्या प्रति मिलियन कोशिकाओं में केवल 1-5 यूनिट हो। हालांकि, विधि की कमियों के बारे में मत भूलना, उदाहरण के लिए, झूठे सकारात्मक परिणाम प्राप्त करने की संभावना।

फिर भी, पीसीआर उन कुछ परीक्षणों में से एक है जो आपको समय पर बीमारी का निदान करने और उपचार शुरू करने की अनुमति देता है।

पीसीआर डायग्नोस्टिक तकनीक मूल रूप से 35 साल पहले अमेरिकी वैज्ञानिक कारी मुलिस द्वारा विकसित की गई थी। अध्ययन के आविष्कारक को उनके अग्रणी कार्य के लिए 1993 में एक अंतरराष्ट्रीय नोबेल पुरस्कार मिला। यह किसी भी प्रयोगशाला गतिविधि के लिए अनिवार्य हो गया है।

पीसीआर का उपयोग आणविक जीव विज्ञान में डीएनए के छोटे वर्गों की कई प्रतियां (प्रवर्धित) करने के लिए किया जाता है। डीएनए पोलीमरेज़ केवल पहले से मौजूद 3-OH समूह में एक न्यूक्लियोटाइड जोड़ सकता है। इसलिए उसे एक प्राइमर की जरूरत है जिसमें वह पहला न्यूक्लियोटाइड जोड़ सके। यह आवश्यकता आपको पैटर्न अनुक्रम के एक विशिष्ट खंड को परिभाषित करने की अनुमति देती है जिसका निदान करने की आवश्यकता है। पीसीआर प्रतिक्रिया के अंत में, एक विशेष अनुक्रम अरबों प्रतियों (एम्पलीकॉन्स) में जमा हो जाएगा।

पीसीआर में एक हीटिंग और कूलिंग प्रक्रिया शामिल होती है जिसे थर्मल साइकलिंग कहा जाता है, जो विशेष मशीनरी द्वारा किया जाता है। पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) एक अपेक्षाकृत सरल तकनीक है। यह इन विट्रो (इन विट्रो विश्लेषण) में विशिष्ट डीएनए टुकड़े प्राप्त करने के लिए डीएनए टेम्पलेट को बढ़ाता है। एक वेक्टर में डीएनए अनुक्रम को क्लोन करने और इसे एक जीवित कोशिका में दोहराने के पारंपरिक तरीकों में अक्सर कई दिनों से लेकर कई हफ्तों तक काम करने की आवश्यकता होती है। लेकिन आप कुछ घंटों के बाद पीसीआर का उपयोग करके डीएनए अनुक्रमों के प्रवर्धन के परिणाम प्राप्त कर सकते हैं।

संक्रामक रोगों के निदान में उपयोग किए जाने वाले अधिकांश जैव रासायनिक विश्लेषणों में काफी बड़ी मात्रा में जैविक सामग्री की आवश्यकता होती है। पीसीआर के लिए यह शर्त अनिवार्य नहीं है। इस प्रकार, पीसीआर अधिक संवेदनशील रोगज़नक़ पहचान प्रदान कर सकता है। और बायोमटेरियल की काफी सीमित मात्रा के साथ कम समय में कुछ अनुक्रमों के प्रवर्धन के उच्च स्तर। ये विशेषताएं तकनीक को बेहद उपयोगी बनाती हैं। न केवल मौलिक शोध में, बल्कि व्यक्तिगत उद्देश्यों के लिए भी। आनुवंशिक पहचान परीक्षण, फोरेंसिक, औद्योगिक गुणवत्ता नियंत्रण सहित।

विश्लेषण का मुख्य मूल्य पहले लक्षण विकसित होने से पहले यौन संचारित विकृति का पता लगाने की संभावना में निहित है। यदि एचआईवी संक्रमण का शीघ्र निदान आवश्यक है तो पीसीआर विश्लेषण का उपयोग किया जाता है। साथ ही डोनर के खून में वायरस के आरएनए का निर्धारण करना। परख की उच्च संवेदनशीलता के कारण, कथित संक्रमण के 7-14 दिनों के बाद प्रतिक्रिया प्राप्त की जा सकती है। निदान की विश्वसनीयता 85 से 98% तक पहुंच जाएगी। हालांकि, पीसीआर परीक्षण सभी को नहीं सौंपा गया है। क्योंकि यह काफी महंगा शोध है। सबसे महत्वपूर्ण बात यह है कि इसके लिए प्रयोगशाला के कर्मचारियों से महंगे उपकरण और कुछ पेशेवर कौशल की आवश्यकता होती है। यदि रोगी पहले संक्रमण के बढ़ते जोखिम से जुड़ी स्थितियों में नहीं रहा है, तो पोलीमरेज़ प्रतिक्रिया की सलाह नहीं दी जाती है।

एचआईवी के लिए गुणात्मक प्रकार पोलीमरेज़ प्रतिक्रिया

एचआईवी के लिए उच्च गुणवत्ता वाले पीसीआर का संचालन आपको शरीर में एक वायरल बीमारी की उपस्थिति का निर्धारण करने की अनुमति देता है। रोगी निम्नलिखित अंकों के रूप में परिणाम प्राप्त कर सकता है: सकारात्मक, गलत सकारात्मक, नकारात्मक। लेकिन अध्ययन रेट्रोवायरस की प्रतियों की संख्या निर्धारित करना संभव नहीं बनाता है। उन रोगियों में गुणात्मक विश्लेषण नहीं किया जाता है जिन्हें पहले संक्रमण का निदान किया गया है। यह एंटीवायरल थेरेपी की प्रभावशीलता पर नियंत्रण के रूप में निर्धारित नहीं है।

एचआईवी के लिए पीसीआर मात्रात्मक प्रकार

यह रोगी की जैविक सामग्री में वायरस आरएनए की प्रतियां निर्धारित करने के लिए किया जाता है। चल रहे उपचार की निगरानी के रूप में, मात्रात्मक पीसीआर केवल पहले से पहचाने गए संक्रमण वाले रोगियों के लिए निर्धारित है।

वास्तविक समय पीसीआर

इसका उपयोग प्रयोगशाला निदान में डीएनए अनुभागों की प्रतियों के निर्माण के लिए किया जाता है। साथ ही जैव सामग्री में डीएनए अनुक्रम का एक साथ मात्रात्मक अध्ययन और पता लगाने के लिए। वास्तव में, निदान एक मात्रात्मक पीसीआर है।

एक नोट पर!

विभिन्न प्रयोगशालाओं में, आप कई नैदानिक ​​सूत्र पा सकते हैं: "पीसीआर मात्रात्मक निर्धारण" और "वास्तविक समय पीसीआर"।

दोनों विश्लेषण समान हैं।

एचआईवी निदान के लिए सामग्री लेना

पीसीआर का उपयोग करके एचआईवी के निदान के लिए जैविक सामग्री का नमूना कुछ मानकों के अनुसार किया जाता है। उपचार कक्ष में हेरफेर किया जाता है। डिस्पोजेबल बाँझ उपकरणों का उपयोग किया जाता है। उपकरणों के साथ पैकेज का उद्घाटन सीधे रोगी के पास किया जाता है। एकत्रित सामग्री को CrO3 (क्रोमियम मिश्रण) के साथ पूर्व-उपचारित बाँझ ट्यूबों में रखा जाता है। जैविक सामग्री शिरापरक रक्त है, जिसे सुबह और खाली पेट दान किया जाता है। परीक्षण से कुछ दिन पहले, आपको शराब, वसायुक्त और मसालेदार भोजन का सेवन बंद कर देना चाहिए, दवा लेना बंद कर देना चाहिए।

यदि औषधीय उत्पादों को वापस लेना संभव नहीं है, तो विश्लेषण से पहले इसकी सूचना दी जानी चाहिए।

इसके अतिरिक्त, सहवर्ती यौन संचारित रोगों की पहचान करने के लिए मूत्रमार्ग और योनि से एक स्वाब लिया जा सकता है। अध्ययन गुमनाम रूप से किया जाता है, रोगी व्यक्तिगत रूप से परिणाम प्राप्त करता है। आपके साथ एक आईडी रखने की अनुशंसा की जाती है।

मैं कब तक एचआईवी के लिए पीसीआर ले सकता हूं

बाद में एचआईवी वायरस की उपस्थिति का पता लगाना संभव है 4-6 संक्रमण के बाद के दिन। इस मामले में, विश्लेषण की सूचना सामग्री 85% तक पहुंच जाएगी। 10-13 दिनों के बाद, विश्लेषण 98% की सटीकता के साथ रोग का निर्धारण कर सकता है। एक नकारात्मक परिणाम केवल तभी मान्य होगा जब इसे कथित संक्रमण के 2 सप्ताह से पहले प्रस्तुत नहीं किया जाता है।

झूठे सकारात्मक परिणाम के कारण

गलत सकारात्मक परिणाम प्राप्त करना मुश्किल है।

यह जैविक सामग्री के नमूने के नियमों का पालन न करने, ट्यूब की गलत लेबलिंग, निम्न-गुणवत्ता परीक्षण प्रणाली के उपयोग और अन्य समान कारकों के मामले में संभव है। अन्य मामलों में, ऐसा परिणाम प्राप्त करने की संभावना 2% से अधिक नहीं है।

परीक्षण के परिणाम प्राप्त करने में कितना समय लगता है?

तकनीकी दृष्टि से पीसीआर के परिणाम 4 घंटे के भीतर प्राप्त किए जा सकते हैं। हालांकि, व्यवहार में, रोगी को एक से कई दिनों तक प्रयोगशाला निष्कर्ष प्राप्त होता है। सामान्य तौर पर, समय प्रयोगशाला के कार्यभार पर निर्भर करता है और यह इस बात पर निर्भर करता है कि उसका कार्य कितना व्यवस्थित है।

नवजात शिशु में पोलीमरेज़ प्रतिक्रिया करना

पीसीआर तब निर्धारित किया जाता है जब बच्चा एचआईवी पॉजिटिव मां से पैदा होता है। इस मामले में एलिसा का संचालन जानकारीपूर्ण नहीं है। चूंकि बच्चे में लगभग 2 वर्ष की आयु तक रेट्रोवायरस के प्रति एंटीबॉडी होती है। इस कारण से, एंजाइम इम्यूनोएसे सटीक उत्तर नहीं देगा। 4-6 सप्ताह की आयु के बच्चे में पीसीआर आयोजित करने और सकारात्मक परिणाम प्राप्त करने पर, हम संक्रमण के बारे में बात करेंगे।

यदि 8 सप्ताह से छह महीने की उम्र में किया गया पीसीआर नकारात्मक परिणाम दिखाता है (बशर्ते कि बच्चा मां के स्तन का दूध नहीं खाता है), संक्रमण को बाहर रखा गया है।

एचआईवी के निर्धारण के लिए एलिसा बेहतर क्यों है?

पोलीमरेज़ प्रतिक्रिया आपको वायरस के आरएनए की पहचान करने की अनुमति देती है, शरीर में इसकी उपस्थिति, मात्रात्मक सहित। एलिसा का कार्य एचआईवी संक्रमण के प्रति एंटीबॉडी का निर्धारण करना है। संभावित संक्रमण का निर्धारण करने के लिए एंजाइम इम्युनोसे पीसीआर से नीच नहीं है, इसकी सटीकता 99% तक पहुंच जाती है। हालांकि, पीसीआर के विपरीत, यह अपने विकास के शुरुआती चरणों में रोग का निर्धारण करने में सक्षम नहीं है।

एचआईवी के लिए पीसीआर के लाभ

• पोलीमरेज़ प्रतिक्रिया सीधे एक संक्रामक एजेंट की उपस्थिति निर्धारित करती है। उदाहरण के लिए, एलिसा केवल एक सूक्ष्मजीव के एंटीबॉडी और अपशिष्ट उत्पादों का पता लगा सकती है।
• परख स्पष्ट रूप से एक विशेष रोगज़नक़ की पहचान करता है, भले ही कई क्रॉस-रिएक्टिंग वाले हों।
• तकनीक रक्त की सूखी बूंदों सहित किसी भी प्रकार की जैविक सामग्री का अध्ययन करने की अनुमति देती है।

पीसीआर की कमियों के बीच, विश्लेषण की बढ़ी हुई संवेदनशीलता का पता लगाया जा सकता है। यह कभी-कभी एक गलत सकारात्मक परिणाम का कारण बनता है। यह तब होता है जब टेस्ट ट्यूब या उपकरणों पर थोड़ी मात्रा में विदेशी डीएनए भी मौजूद होता है।

पीसीआर और एलिसा का उपयोग करके एचआईवी का निदान: व्याख्या, परिणामों की विश्वसनीयता

एलिसा, जिसमें परीक्षण के परिणाम एचआईवी और शरीर में p24 एंटीजन के लिए एंटीबॉडी की अनुपस्थिति का संकेत देते हैं, नकारात्मक है। यदि ये अणु मौजूद हैं, तो एक सकारात्मक नैदानिक ​​​​निष्कर्ष जारी किया जाता है। कुछ मामलों में, रोगी को गलत सकारात्मक या गलत नकारात्मक परिणाम प्राप्त हो सकता है। यह प्रारंभिक गर्भावस्था, एक दाद संक्रमण की उपस्थिति, सामग्री का गलत नमूनाकरण और टेस्ट ट्यूब के परिवहन के उल्लंघन का परिणाम है। इसके अलावा, इसी तरह के परिणाम चल रहे ऑटोइम्यून रोगों और विभिन्न प्रकार के हेपेटाइटिस वाले रोगियों में पाए जाते हैं। एक वेस्टर्न ब्लॉट (इम्यून ब्लॉटिंग) किया जा सकता है, जो एलिसा और वायरस प्रोटीन को अलग करता है।

फिर एक सकारात्मक परिणाम वायरल संक्रमण gp160 के ग्लाइकोप्रोटीन की उपस्थिति में होगा। यह एचआईवी लिफाफा ग्लाइकोप्रोटीन जीपी41 और जीपी120 का अग्रदूत है। यदि ये अणु अनुपस्थित हैं, तो प्रयोगशाला परीक्षण के निष्कर्ष को नकारात्मक माना जाता है। एलिसा के संयोजन में वेस्टर्न ब्लॉट का संचालन करने से आप ऐसे परिणाम प्राप्त कर सकते हैं जिनकी विश्वसनीयता 98% से अधिक है। मामले में जब एलिसा सकारात्मक है और पश्चिमी धब्बा नकारात्मक है, तो परीक्षण को संदिग्ध माना जाता है और इसके लिए पीसीआर की आवश्यकता होती है।

ज्यादातर महिलाओं और पुरुषों के लिए यह यौन संचारित रोग सबसे अधिक आशंका है। इस कारण से, बिना बाधा गर्भनिरोधक के एक आकस्मिक अंतरंग संबंध के साथ-साथ यौन साझेदारों के बार-बार परिवर्तन और सर्जिकल ऑपरेशन के बाद, एक उचित व्यक्ति एक निश्चित सतर्कता का अनुभव करता है। स्पष्ट करने का सबसे विश्वसनीय तरीका क्लिनिक में जाना और एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण करना है।

निम्नलिखित संकेतकों को निर्धारित करने के लिए रक्त परीक्षण का उपयोग किया जा सकता है:

• अव्यक्त अवधि में एचआईवी की उपस्थिति से इनकार / पुष्टि (संक्रमण के बाद पहले हफ्तों में, एलिसा परीक्षणों में उनकी अनुपस्थिति या बहुत कम एकाग्रता के कारण एंटीबॉडी का पता नहीं लगाया जाता है)।
• HIV-1, HIV-2 के जीनोटाइप का निर्धारण।
• मां-वाहक से पैदा हुए बच्चों में स्थिति की पहचान (एचआईवी संक्रमित महिलाओं से पैदा हुए सभी बच्चों में लंबे समय तक एचआईवी के एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है। 48 वर्ष से कम उम्र के बच्चों में वायरस के डीएनए को निर्धारित करना वांछनीय है। जीवन के घंटे, 1-2 महीने, 3- 6 महीने)।
• एलिसा परीक्षणों के झूठे-नकारात्मक, झूठे-सकारात्मक और संदिग्ध परिणाम।
• एचआईवी की मात्रा का निदान और समय के साथ वायरल लोड में परिवर्तन की निगरानी (एड्स के पहले से स्थापित निदान के मामले में, पीसीआर विश्लेषण का उपयोग रोग का निदान, गतिशील निगरानी और चल रही चिकित्सा की निगरानी के लिए किया जाता है)।

एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण की कीमत

एचआईवी के लिए पीसीआर विश्लेषण - यह कब, क्यों और किस समय किया जाता है

1. एचआईवी डीएनए।मानव इम्यूनोडेफिशियेंसी वायरस (एचआईवी) डीएनए डायग्नोस्टिक्स का उपयोग उच्च जोखिम वाली घटना के बाद प्रारंभिक संभावित संक्रमण का पता लगाने के लिए किया जा सकता है (संभावित संक्रमण के 10 दिन बाद रक्त परीक्षण किया जाता है)। हालांकि, संक्रमण को पूरी तरह से बाहर करने के लिए, बाद में 4 और 12 सप्ताह में दूसरा अध्ययन और एलिसा निदान करना आवश्यक है।
   विश्लेषण के परिणाम: एचआईवी डीएनए (गुणात्मक विश्लेषण)- "नहीं मिला" या "मिला"। बाद के मामले में, एचआईवी संक्रमण की पुष्टि के लिए बार-बार अतिरिक्त अध्ययन की आवश्यकता होती है। यदि परिणाम नकारात्मक है, लेकिन संक्रमण का उच्च जोखिम है, तो दूसरी जांच की आवश्यकता है - थोड़ी देर बाद पीसीआर या एलिसा द्वारा रक्तदान।
2. एचआईवी आरएनए।पीसीआर (तथाकथित "वायरल लोड") द्वारा एचआईवी आरएनए का मात्रात्मक निर्धारण एचआईवी संक्रमण के पाठ्यक्रम के पूर्वानुमान का आकलन करने के लिए संकेतकों में से एक है और एंटीवायरल थेरेपी की प्रभावशीलता का सबसे पहला संकेतक है। परीक्षण को रोग के पाठ्यक्रम की निगरानी, ​​चिकित्सा शुरू करने का निर्णय लेने और इसकी प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए संकेत दिया गया है।
   पीसीआर द्वारा एचआईवी आरएनए के अध्ययन का उपयोग वयस्कों में उच्च जोखिम वाले प्रकरण (संभावित संक्रमण के लगभग 7-10 दिनों के बाद) के बाद संभावित संक्रमण के शीघ्र विश्वसनीय निदान के साथ किया जा सकता है। एंटीबॉडी की अनुपस्थिति में एचआईवी आरएनए के एक उच्च अनुमापांक की उपस्थिति तीव्र एचआईवी संक्रमण के निदान की अनुमति देती है। हालांकि, निदान को स्पष्ट करने के लिए, 1 और 3 महीने के भीतर बार-बार अध्ययन और एलिसा निदान करना आवश्यक है।
   इस संक्रमण के साथ गर्भवती महिलाओं में प्रसव की अपेक्षित तिथि से 3-4 सप्ताह पहले पीसीआर एचआईवी आरएनए की डिलीवरी प्रसव की विधि (प्राकृतिक जन्म नहर के माध्यम से या सीजेरियन सेक्शन के माध्यम से) के मुद्दे को हल करने के लिए इंगित की जाती है।
   विश्लेषण के परिणाम: एचआईवी टाइप 1 एचआईवी आरएनए (मात्रात्मक विश्लेषण)- "पता नहीं चला" (यह सामान्य है)।
3. एचआईवी प्रतिरोध।प्रोटीज और रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस इनहिबिटर के लिए एचआईवी के प्रतिरोध को निर्धारित करने के लिए एक विश्लेषण एचआईवी संक्रमित रोगियों के लिए अप्रभावी चिकित्सा के साथ-साथ एंटीवायरल उपचार शुरू करने से पहले एक तीव्र संक्रमण के दौरान संकेत दिया गया है। अध्ययन आपको दवाओं के लिए एचआईवी के प्रतिरोध को निर्धारित करने की अनुमति देता है। विश्लेषण के परिणामों के आधार पर, संक्रामक रोग विशेषज्ञ प्रोटीज इनहिबिटर्स, न्यूक्लियोसाइड और नॉन-न्यूक्लियोसाइड रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस इनहिबिटर के प्रतिरोध म्यूटेशन की उपस्थिति के बारे में सीखता है, साथ ही ड्रग रेजिस्टेंस म्यूटेशन से जुड़ी प्रत्येक अमीनो एसिड स्थिति के बारे में जानकारी देता है।
4. मल्टीप्राइम व्यापक निदान:हेपेटाइटिस सी वायरस आरएनए / हेपेटाइटिस बी वायरस डीएनए / मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस (एचआईवी) टाइप 1 और 2 आरएनए (अल्ट्रासेंसिटिव विधि) का गुणात्मक निर्धारण। विश्लेषण प्रारंभिक चरण में एचआईवी संक्रमण, वायरल हेपेटाइटिस सी और बी का निदान करने की अनुमति देता है। अध्ययन वायरल हेपेटाइटिस बी और सी, एचआईवी टाइप 1/2 के जोखिम वाले व्यक्तियों में जल्दी पता लगाने के लिए संकेत दिया गया है। डीएनए या आरएनए वायरस का पता लगाना संक्रमण का संकेत देता है।

इन रक्त परीक्षणों की तैयारी की शर्तें - 3 से 7 कैलेंडर दिनों तक। आप हमारे चिकित्सा केंद्र में मास्को में एचआईवी संक्रमण के निदान के लिए एक गुणात्मक और मात्रात्मक पीसीआर विश्लेषण पास कर सकते हैं। रक्त का नमूना प्रतिदिन, 10-00 से, सहित

एचआईवी के लिए पीसीआर आणविक आनुवंशिक निदान के सबसे सूचनात्मक तरीकों में से एक है। यह विधि रोगी के विभिन्न संक्रामक रोगों और विरासत में मिली बीमारियों की पहचान करने में मदद करती है। एचआईवी की उपस्थिति के लिए बायोमटेरियल की जांच के मामले में एक ही निदान पद्धति लागू होती है, एक गंभीर बीमारी जो रोगी के जीवन भर विकसित होती है। चिकित्सा सहायता के साथ, पीसीआर संदिग्ध मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस के लिए शुल्क के आधार पर किए जाने वाले अनुशंसित परीक्षणों में से एक बन गया है। हालांकि, अध्ययन की विश्वसनीयता 100 में से केवल 80 मामलों में ही सही साबित होती है।

एचआईवी के लिए पीसीआर डायग्नोस्टिक्स पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन के लिए है। इस प्रजाति के अध्ययन के लिए विभिन्न प्रकार की जैविक सामग्री का उपयोग किया जाता है। इनमें रक्त, इसके अलावा, रोगी की योनि से स्राव या पुरुषों में वीर्य द्रव का उपयोग किया जा सकता है।

ध्यान! एचआईवी के निदान में पीसीआर के लिए लार का उपयोग नहीं किया जाता है। इस तरह के दृष्टिकोण को अप्रभावी माना जाता है, क्योंकि एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी इस सामग्री में न्यूनतम एकाग्रता में हैं। यही बात पेशाब, पसीने और आंसुओं पर भी लागू होती है।

वर्णित अध्ययन के लिए संकेत एक डबल पॉजिटिव एलिसा (एंजाइमी इम्यूनोसे) है। वैकल्पिक गंतव्यों पर बाद में चर्चा की जाएगी।

विश्लेषण के सार के बारे में अधिक जानकारी

पीसीआर द्वारा एचआईवी के विश्लेषण का आधार न्यूक्लिक एसिड की खुद को पुन: पेश करने की क्षमता है। जीवित कोशिकाओं में प्रोटीन और यही एसिड होते हैं, दूसरे शब्दों में, आरएनए और डीएनए। अणु आनुवंशिक कोड के संरक्षक के रूप में कार्य करते हैं।
बायोमटेरियल में वायरल कणों (एचआईवी) की कम सांद्रता पर, नमूने में संपूर्ण डीएनए (डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड) श्रृंखला शामिल नहीं होती है, लेकिन केवल उनके घटक, जिन्हें न्यूक्लियोटाइड कहा जाता है। विश्लेषण आपको वायरस कोशिकाओं के महत्वहीन अवशेषों का भी पता लगाने की अनुमति देता है। यह वह तथ्य है जो एचआईवी संक्रमण के कुछ सप्ताह बाद - प्रारंभिक अवस्था में परिणाम प्रदर्शित करने के लिए पीसीआर की क्षमता की व्याख्या करता है।

शिरापरक रक्त के अध्ययन में पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन से सबसे गुणात्मक परिणाम की उम्मीद की जानी चाहिए। नमूना उपकरण के साथ पच जाता है। फिर अंशों को एंजाइमी उपचार के अधीन किया जाता है। वायरल डीएनए के कणों के साथ मिलकर प्रतिक्रियाशील पदार्थ इसकी नकल करते हैं। ऐसे तत्वों की संख्या श्रृंखला सिद्धांत के अनुसार तब तक बढ़ जाती है जब तक कि रोगी के रक्त में उनकी उपस्थिति (एंटीबॉडी नहीं) प्रयोगशाला सहायकों के लिए ध्यान देने योग्य हो जाती है। मौजूदा निदान विधियों में से कोई भी ठीक उसी सिद्धांत पर काम नहीं करता है।

प्रतिक्रिया घटक

पीसीआर पद्धति का उपयोग करके, आप शरीर में वायरस के विकास के बारे में पहले से पता लगा सकते हैं। इसे मुफ्त दवा के क्षेत्र में लोकप्रिय और हर जगह क्यों नहीं कहा जा सकता? तथ्य यह है कि ऐसा एचआईवी परीक्षण बहुत महंगा है और इसके लिए निम्नलिखित घटकों की आवश्यकता होती है:

• डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड का एक मैट्रिक्स, जिसमें प्रवर्धन के लिए डीएनए का एक खंड शामिल है;
• दो प्राइमर (प्रत्येक श्रृंखला खंड के लिए);
• वायरल कणों के पोलीमराइजेशन में तेजी लाने के लिए रासायनिक रूप से सक्रिय घटक पोलीमरेज़;
• डीऑक्सीराइबोन्यूक्लियोसाइड ट्राइफॉस्फेट;
• द्विसंयोजक मैग्नीशियम के कण (आवेशित);
• अनुकूल परिस्थितियों को बनाने के लिए एक विशेष समाधान, अम्लता का उचित स्तर, नमक एकाग्रता, तरल में मैग्नीशियम कणों की संख्या प्रदान करना।

ध्यान! नमूने को ज़्यादा गरम होने से बचाने के लिए, सामग्री में थोड़ी मात्रा में पेट्रोलियम जेली मिलाया जाता है, जिसमें वसा होता है और, तदनुसार, एक उच्च क्वथनांक।

विश्लेषण की सटीकता की अपेक्षाकृत उच्च दर इसकी बढ़ी हुई संवेदनशीलता के कारण है, जो अन्य वायरस के प्रति एंटीबॉडी की प्रतिक्रिया को उत्तेजित करती है।

एचआईवी के लिए पीसीआर तकनीक के फायदे और नुकसान

नीचे दी गई तालिका में विधि के वस्तुनिष्ठ मूल्यांकन के लिए, हम अध्ययन के कई फायदे और नुकसान प्रस्तुत करते हैं:

जाहिर है, तकनीक के फायदे अधिक हैं। यदि हम आगे के उपचार की उत्पादकता और रोगी के जीवन को बढ़ाने की संभावना के संदर्भ में निदान के प्रकार का मूल्यांकन करते हैं, तो पीसीआर सफलता का निश्चित तरीका है।

विश्लेषण विशेषताएं

वर्णित विश्लेषण की मुख्य विशेषता एचआईवी का शीघ्र निदान करने की इसकी क्षमता है, जो अन्य शोध विधियां सक्षम नहीं हैं। कथित संक्रमण के कितने दिनों बाद मैं पीसीआर के लिए रक्तदान कर सकता हूं? आमतौर पर यह समय अवधि 10-14 दिनों की होती है। अगले 24 घंटों के भीतर, रोगी को परिणाम प्राप्त होता है। नैदानिक ​​​​केंद्रों और क्लीनिकों की व्यक्तिगत कामकाजी परिस्थितियों के संदर्भ में संभावित विचलन को समझाया गया है।

अध्ययन का उद्देश्य

पीसीआर ज्यादातर एचआईवी (ह्यूमन इम्युनोडेफिशिएंसी सिंड्रोम) का पता लगाने के लिए किया जाता है। हालांकि, विश्लेषण भी लिया जा सकता है यदि आपको यौन संचारित रोगों के विकास पर संदेह है। वंशानुगत रोगों के निदान के मामले में भी यही विधि लागू होती है।

पीडीआर डायग्नोस्टिक्स: संचालन के कारण

मुझे पीसीआर के लिए कब रक्तदान करना चाहिए? ज्यादातर मामलों में, जैविक सामग्री दान की जाती है जब मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस शरीर की स्थितियों के अनुकूल हो जाता है, एंटीबॉडी के उत्पादन को उत्तेजित करता है और एचआईवी के पहले लक्षणों का कारण बनता है। हालांकि, यह तभी उचित है जब संक्रमण के बाद पर्याप्त समय बीत चुका हो और इसमें एलिसा शामिल हो।

पीसीआर की आवश्यकता उस रोगी की पहल पर उत्पन्न होती है जो रोग का तुरंत निदान करना चाहता है (यदि कोई हो)। इसका कारण यह हो सकता है: असुरक्षित संभोग, संक्रमित व्यक्ति की जैविक सामग्री के संपर्क में आना, हाल ही में रक्त आधान आदि।

पीसीआर को किसे सौंपा गया है?

एक विशेषज्ञ की सिफारिश पर पीसीआर द्वारा एचआईवी संक्रमण का निर्धारण निम्नलिखित मामलों में किया जाता है:

• प्रारंभिक निदान।पीसीआर एलिसा परिणाम की सही पुष्टि या खंडन करता है;
• वेस्टर्न ब्लॉटिंग ने निदान की पुष्टि की. इम्यूनोब्लॉटिंग एड्स का अध्ययन करने का एक अतिरिक्त तरीका है . दोनों विधियों का एक साथ उपयोग किया जाता है, जो गलत निदान करने की संभावना को समाप्त करता है;
• पुष्टि एचआईवी स्थिति के साथपीसीआर का उपयोग करके, चयनित उपचार के प्रभाव की निगरानी की जाती है;
• दाता रक्त परीक्षण के लिएएचआईवी एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए;
• मां के सकारात्मक होने पर नवजात शिशु की एचआईवी स्थिति का निर्धारण करने के लिए। जीवन के पहले दिनों में पीसीआर आपको जन्म नहर से गुजरने के दौरान अंतर्गर्भाशयी संक्रमण या शिशु के संक्रमण का निर्धारण करने की अनुमति देता है। परीक्षण जन्म के 2 - 3 सप्ताह बाद किया जाता है।

पीसीआर विश्लेषण में कितना समय लगता है, और इसे कहाँ लिया जा सकता है?

एचआईवी के लिए पीसीआर विश्लेषण एक विशेष प्रयोगशाला में किया जाता है। परीक्षण और परिणाम की व्याख्या के लिए अधिक समय की आवश्यकता नहीं होती है: एक महीना या एक सप्ताह भी। रक्त खींचने में 6 मिनट तक का समय लगता है। सामान्य स्थिति में, निदान करने और निष्कर्ष निकालने के लिए एक विशेषज्ञ को एक दिन से अधिक की आवश्यकता नहीं होगी। पहले 8 घंटे रक्त का अध्ययन करते हैं, शेष समय पंजीकरण पर खर्च होता है। नमूना लेने के अगले ही दिन परिणाम प्राप्त किया जा सकता है। एक्सप्रेस परीक्षण की अवधि 2 घंटे है।

ध्यान! अनिवार्य चिकित्सा बीमा पॉलिसी सार्वजनिक स्वास्थ्य संस्थान में नि: शुल्क परीक्षण पास करना संभव बनाती है।

लगभग कोई भी व्यावसायिक प्रयोगशाला गुमनाम आधार पर अनुसंधान करने में सक्षम है। एक व्यक्ति को एक विशेष संख्या सौंपी जाती है, जिसके परिणाम तब बंधे होते हैं। यह जानकारी उपयोगकर्ता के व्यक्तिगत खाते में संस्था की वेबसाइट पर अपलोड की जाती है।

पीसीआर टेस्ट कराने में कितना खर्च आता है?

शोध करने का यह तरीका काफी महंगा है। यह इस तथ्य के कारण है कि नवीनतम चिकित्सा उपकरण पर पीसीआर करना आवश्यक है, हेरफेर के लिए विशेषज्ञों से पर्याप्त ज्ञान की आवश्यकता होती है।

एक अत्यावश्यक प्रश्न: एक व्यक्ति को एचआईवी के लिए एक पीसीआर परीक्षण करने में कितना खर्च आता है? इसके लिए लगभग 56-60 डॉलर की आवश्यकता होगी।

विश्लेषण का संचालन

एचआईवी के लिए एक पीसीआर परीक्षण आयोजित करना शामिल है:

• अनुसंधान के लिए रक्त का नमूना;
• एक पुरुष से शुक्राणु का अतिरिक्त नमूना और एक महिला से जननांग स्राव।

ध्यान! नतीजतन, परीक्षण डॉक्टरों को रोगी की स्थिति की निगरानी के लिए एक उच्च वायरल लोड निर्धारित करने की अनुमति देता है।

इस एचआईवी परीक्षण की अन्य विशेषताओं पर विचार करना चाहिए:

• परीक्षण से कुछ दिन पहले, रोगी को आहार में वसायुक्त खाद्य पदार्थों की मात्रा कम करनी चाहिए;
• रक्त का नमूना खाली पेट किया जाता है;
• विभिन्न संक्रमणों को संश्लेषित करने वाले एंजाइमों को एक विशेष रिएक्टर में विभाजित जैविक सामग्री में जोड़ा जाता है;
• विश्लेषण कई चरणों में किया जाता है, क्योंकि अणुओं का विभाजन अंकगणितीय प्रगति में होता है। एक विशेष कार्यक्रम एचआईवी का पता लगाने के लिए बड़ी संख्या में कोशिका संरचनाओं की तुलना करता है।

सटीक निदान विधियां, जिनमें पीसीआर शामिल है, महंगी हैं, लेकिन एचआईवी का जल्दी पता लगा सकती हैं। ऐसी विकृति के उपचार में, सबसे महत्वपूर्ण बात एक सही और समय पर निदान है, जो मानव जीवन की गुणवत्ता और इसकी अवधि में सुधार कर सकता है।

आणविक आनुवंशिक निदान के सबसे सटीक और विश्वसनीय तरीकों में से एक को पीसीआर, यानी पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन माना जाता है। यह विधि एक रोगी में वंशानुगत और संक्रामक प्रकृति के विभिन्न प्रकार के रोगों का निदान करने की अनुमति देती है।

पीसीआर - एक अध्ययन आपको ऐसी जटिल बीमारियों में से एक का निदान करने की अनुमति देता है, जिसका इलाज करना मुश्किल है। एचआईवी के लिए पीसीआर की विश्वसनीयता 100 में से केवल 80 मामलों में ही सही साबित होती है।

मानव शरीर में एचआईवी संक्रमण का निदान करने का मुख्य तरीका उसका खून माना जाता है, यानी इस बीमारी के लिए परीक्षण किया जाता है। निदान करने का सबसे सरल और सबसे सामान्य तरीका शिरापरक रक्त लेना और इसे एक विशेष प्रयोगशाला में संचालित करना है। बेशक, प्राप्त सकारात्मक परिणाम गलत हो सकता है, इसलिए, इसे संदर्भ प्रयोगशाला में अधिक सटीक शोध तरीके से फिर से जांचा जाता है।

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन को एक महंगी प्रक्रिया माना जाता है, और इसके कार्यान्वयन के लिए विशेष उपकरण और उच्च योग्य विशेषज्ञों की आवश्यकता होती है। यही कारण है कि इसे आबादी के बीच व्यापक वितरण नहीं मिला है।

एचआईवी के निदान के लिए पीसीआर विश्लेषण का उपयोग आपको रोग की उपस्थिति के बारे में एक सटीक और विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने की अनुमति देता है, हालांकि, यह अक्सर रोगी की तैयारी पर निर्भर करता है।

पीसीआर विश्लेषण निम्नलिखित मामलों में किया जाता है:

1. एड्स से संक्रमित मां से पैदा हुए नवजात शिशुओं में एचआईवी संक्रमण का निदान।
2. रोगी के रक्त में एचआईवी की सांद्रता को नियंत्रित करने के लिए
3. दाता रक्त परीक्षण।

यदि पीसीआर परीक्षण सकारात्मक परिणाम दिखाता है, तो निदान केवल इस तरह के परीक्षण से नहीं होता है। अक्सर इसका उपयोग विवादों को हल करने के लिए एक अतिरिक्त विधि के रूप में किया जाता है।

पीसीआर विश्लेषण, दुर्भाग्य से, एक सार्वभौमिक विधि नहीं कहा जा सकता है, जो मानव शरीर में संक्रमण की उपस्थिति या अनुपस्थिति के लिए सटीक परिणाम प्रदान करता है। यह इस तथ्य के कारण है कि इस प्रकार का अध्ययन अन्य तरीकों की तुलना में अधिक बार गलत सकारात्मक परिणाम देता है। इस निदान पद्धति का उपयोग किसी बीमारी का निदान करते समय या एचआईवी संक्रमण करते समय किया जाता है। यह मुख्य रूप से एड्स वायरस के निदान के लिए एक सहायक विधि के रूप में उपयोग किया जाता है।

हालांकि, झूठे सकारात्मक परिणाम की संभावना के बावजूद, इस तरह के एचआईवी परीक्षण के अन्य नैदानिक ​​​​विधियों की तुलना में कई फायदे हैं। पीसीआर विश्लेषण कथित संक्रमण की तारीख के 11-15 दिनों बाद तक किया जा सकता है, और अन्य सभी तरीकों से लंबे समय के बाद ही मानव शरीर में एड्स वायरस की उपस्थिति का आकलन करना संभव हो जाता है। इस विसंगति को इस तथ्य से समझाया गया है कि एचआईवी के लिए अधिकांश स्क्रीनिंग परीक्षण वायरस के निर्धारण पर आधारित होते हैं, जिसका गठन तीन महीने के भीतर होता है।

पीसीआर अध्ययन और अन्य निदान विधियों के बीच मुख्य अंतर यह है कि यह वायरस का पता नहीं लगाता है, बल्कि रोगी के शरीर में वायरस की उपस्थिति का पता लगाता है।

यही कारण है कि यदि शीघ्र पता लगाने की आवश्यकता हो तो बहुलक श्रृंखला प्रतिक्रिया विधि को आदर्श कहा जा सकता है। इसके अलावा, ऐसी विधि का सहारा लेना संभव है जब एंटीबॉडी की उपस्थिति एक विश्वसनीय संकेतक नहीं हो सकती है।

वीडियो में एचआईवी अनुसंधान के बारे में और जानें।

यदि मानव शरीर में विकृति की डिग्री या गंभीरता की पहचान करना आवश्यक है, तो वे मात्रात्मक तरीके से पीसीआर अध्ययन करने का सहारा लेते हैं। यह वह है जो आपको रोगी के शरीर में संक्रमण की एकाग्रता के स्तर के बारे में जानकारी प्राप्त करने की अनुमति देता है। रोग की प्रगति वायरस की एकाग्रता में क्रमिक वृद्धि के साथ होती है और मात्रात्मक पीसीआर निदान आपको संक्रमण के चरण और चल रही प्रभावशीलता को निर्धारित करने की अनुमति देता है। रोग के निदान से पहले और उपचार के बाद "वायरल लोड" का निदान करना आपको यह निष्कर्ष निकालने की अनुमति देता है कि उपचार कितना प्रभावी है।

अन्य एचआईवी निदान विधियां

आज तक, एचआईवी संक्रमण का निदान एक मानक प्रक्रिया है जिसमें विभिन्न प्रकार के निदान का उपयोग शामिल है:

एलिसा परीक्षण प्रणाली

इस तरह का एक स्क्रीनिंग टेस्ट मानव शरीर में प्रवेश करने के कुछ हफ्तों के भीतर वायरस का पता लगा सकता है। इस तरह के अध्ययन का उद्देश्य किसी रोगी में वायरस की उपस्थिति का निर्धारण करना नहीं है, बल्कि इसके प्रति एंटीबॉडी के उत्पादन का निदान करना है। एलिसा परीक्षणों की कई पीढ़ियां हैं, जिनमें से प्रत्येक की एक अलग संवेदनशीलता है। ऐसा परीक्षण कभी-कभी परिणाम देता है, जिसे अनुचित प्रसंस्करण और रोगी के शरीर में विभिन्न प्रकार के विकृति की उपस्थिति से समझाया जाता है।

प्रतिरक्षा सोख्ता

यदि प्रतिरक्षा धब्बा सकारात्मक परिणाम दिखाता है, तो हम एचआईवी का अंतिम निदान करने के बारे में बात कर सकते हैं। इसके कार्यान्वयन की मुख्य विधि एक नीरोसेल्यूलोज पट्टी का उपयोग है, जिस पर वायरल मूल के प्रोटीन लगाए जाते हैं।

एक्सप्रेस तरीके

एचआईवी संक्रमण के निदान के क्षेत्र में इसे एक नवीनता माना जाता है और परिणाम का मूल्यांकन किए जाने के कुछ ही मिनटों के भीतर किया जा सकता है। सबसे सटीक और विश्वसनीय परिणाम इम्यूनोक्रोमैटोग्राफिक परीक्षणों द्वारा दिए जाते हैं, जिसका उपयोग केशिका प्रवाह के सिद्धांत पर आधारित होता है।

आईबी विश्लेषण के साथ एलिसा परीक्षणों की पुष्टि के बाद ही शरीर में एचआईवी संक्रमण की उपस्थिति के बारे में बात करना संभव है।

मानव शरीर में एचआईवी संक्रमण का निदान उसकी अभ्यस्त जीवन शैली और दूसरों के साथ संबंधों में महत्वपूर्ण परिवर्तन करता है। परीक्षणों के परिणामों को रखने की जिम्मेदारी चिकित्सा कर्मचारियों की होती है, और केवल रोगी ही तय करता है कि उसकी बीमारी की रिपोर्ट किसको करनी है। पीसीआर नैदानिक ​​विधियों में से एक है जो कुछ ही हफ्तों में मानव शरीर में एक वायरस की उपस्थिति का पता लगा सकता है।