Aju histohemaatilised ja hematoentsefaalbarjäärid. BBB ehk hematoentsefaalbarjäär: selle struktuur ja tähtsus tungib läbi GEB-i kesknärvisüsteemi

Hematoentsefaalbarjäär on olemas kõigil selgroogsetel. See liigub kesknärvisüsteemi ja vereringesüsteemi vahel. Järgmisena käsitleme üksikasjalikumalt sellist terminit nagu "vere-aju barjäär": mis see on, milliseid ülesandeid see täidab.

Ajalooline teave

Esimesed tõendid hematoentsefaalbarjääri olemasolu kohta sai Paul Ehrlich 1885. aastal. Ta leidis, et roti vereringesse viidud värvaine sattus kõikidesse kudedesse ja organitesse, välja arvatud aju. Ehrlich väitis, et aine ei levinud veenisisese manustamise ajal ajukoesse, kuna sellel polnud nendega mingit seost. See järeldus osutus valeks. 1909. aastal tegi Ehrlichi õpilane Goldman kindlaks, et trüpaansinine ei tunginud intravenoossel süstimisel ajju, vaid värvis vatsakeste vaskulaarset põimikut. 1913. aastal demonstreeris ta, et hobuse või koera tserebrospinaalvedelikku süstitud kontrastaine jaotub seljaaju ja aju kudedes, kuid ei mõjuta perifeerseid organeid ja süsteeme. Katsete tulemuste põhjal pakkus Goldman välja, et vere ja aju vahel on takistus, mis takistab neurotoksiliste ühendite läbitungimist.

inimese füsioloogia

Aju kaal on ligikaudu 2% kogu kehamassist. Kesknärvisüsteemi hapnikutarbimine jääb 20% piiridesse kehasse sisenevast kogumahust. Aju erineb teistest organitest toitainete väikseima varu poolest. Ainult anaeroobse glükolüüsi abil ei suuda närvirakud oma energiavajadusi rahuldada. Kui verevool ajju lakkab, tekib mõne sekundi pärast teadvusekaotus ja 10 minuti pärast neuronid surevad. Inimese füsioloogia on üles ehitatud nii, et ajustruktuuride energiavajadus on tagatud toitainete ja hapniku aktiivse transpordi kaudu läbi BBB. Kesknärvisüsteemi veresoontel on mõned struktuursed ja funktsionaalsed omadused. See eristab neid teiste süsteemide ja elundite vereringevõrkudest. Need eripärad tagavad toitumise, homöostaasi säilitamise ja jääkainete väljutamise.

Vere aju barjäär: füsioloogia

Normaalne ajutegevus on võimalik ainult biokeemilise ja elektrolüütide homöostaasi tingimustes. Kaltsiumisisalduse kõikumine veres, pH ja muud näitajad ei tohiks mõjutada närvikoe seisundit. Samuti tuleb seda kaitsta neurotransmitterite tungimise eest, mis ringlevad veres ja võivad muuta neuronite aktiivsust. Võõrained ei tohiks ajju sattuda: patogeensed mikroorganismid ja ksenobiootikumid. BBB struktuursed omadused aitavad kaasa asjaolule, et see on ka immunoloogiline takistus, kuna see on läbimatu paljudele antikehadele, mikroorganismidele ja leukotsüütidele. Hematoentsefaalbarjääri häired võivad esile kutsuda kesknärvisüsteemi kahjustusi. Paljud neuroloogilised patoloogiad on kaudselt või otseselt seotud BBB kahjustusega.

Struktuur

Milline on hematoentsefaalbarjääri struktuur? Endoteelirakud toimivad põhielemendina. Hematoentsefaalbarjäär hõlmab ka astrotsüüte ja peritsüüte. Ajuveresoontes on endoteelirakkude vahel tihedad ühendused. BBB elementide vahelised vahed on väiksemad kui teistes kehakudedes. Endoteelirakud, astrotsüüdid ja peritsüüdid toimivad hematoentsefaalbarjääri struktuurse alusena mitte ainult inimestel, vaid ka enamikul selgroogsetel.

Moodustamine

Kuni 20. sajandi lõpuni arvati, et hematoentsefaalbarjäär ja selle funktsioonid ei ole vastsündinutel ja embrüotel täielikult välja arenenud. See üsna laialt levinud arvamus oli tingitud mitmetest ebaõnnestunud katsetest. Katsete käigus süstiti embrüotesse ja täiskasvanud loomadesse valguga seotud värvaineid või muid markereid. Esimesed sellised katsed viidi läbi 1920. aastal. Embrüotesse süstitud markerid levisid kogu aju- ja seljaajuvedelikus. Täiskasvanud loomadel seda ei täheldatud. Katsete käigus tehti mõningaid vigu. Eelkõige kasutati mõnes katses liiga palju värvainet, teistes aga suurendati osmootset rõhku. Selle tulemusena tekkis veresoone seinas osaline kahjustus, mille tulemusena levis marker kogu ajukoes. Katse õige seadistuse korral ei täheldatud vere-aju barjääri läbimist. Embrüo veres on suurtes kogustes selliste ühendite molekulid nagu transferriin, alfa1-fetoproteiin ja albumiin. Neid aineid ei tuvastata, kuid ajukoe rakkudevahelises ruumis, embrüonaalses endoteelis, leiti P-glükoproteiini transporter. See omakorda viitab hematoentsefaalbarjääri olemasolule sünnieelsel perioodil.

Läbilaskvus

Organismi arenguprotsessis märgitakse BBB paranemist. Polariseeritud väikeste molekulide, nagu sahharoos ja inuliin, puhul on hematoentsefaalbarjääri läbilaskvus vastsündinul ja embrüos oluliselt suurem kui täiskasvanutel. Sarnane toime leiti ka ioonide puhul. Insuliini ja aminohapete läbimine läbi hematoentsefaalbarjääri kiireneb oluliselt. Tõenäoliselt on see tingitud kasvava aju suurest vajadusest. Samal ajal on embrüol koe ja tserebrospinaalvedeliku vahel barjäär - "vöökontaktid" ependüümi elementide vahel.

BBB läbimise mehhanismid

Barjääri ületamiseks on kaks peamist viisi:

Lihtsaim viis läbi hematoentsefaalbarjääri tungida on väikesed molekulid (näiteks hapnik) või elemendid, mis lahustuvad kergesti gliiarakkudes asuvates lipiidmembraani komponentides (näiteks etanool). Tänu kõrgelt spetsialiseeritud mehhanismide kasutamisele hematoentsefaalbarjääri ületamiseks tungivad läbi selle seened, bakterid ja viirused. Näiteks herpese patogeenid läbivad nõrga organismi närvirakke ja satuvad kesknärvisüsteemi.

BBB omaduste kasutamine farmakoloogias

Kaasaegsed tõhusad ravimid töötatakse välja, võttes arvesse hematoentsefaalbarjääri läbilaskvust. Näiteks farmaatsiatööstus toodab morfiinil põhinevaid sünteetilisi analgeetikume. Kuid erinevalt temast ei läbi narkootikumid BBB-d. Tänu sellele leevendavad ravimid tõhusalt valu, muutmata patsienti morfiinist sõltuvaks. On erinevaid antibiootikume, mis läbivad hematoentsefaalbarjääri. Paljusid neist peetakse teatud nakkuspatoloogiate ravis asendamatuks. Tuleb meeles pidada, et ravimite üleannustamine võib põhjustada tõsiseid tüsistusi - halvatus ja närvide surm. Sellega seoses ei soovita eksperdid tungivalt antibiootikumidega ise ravida.

BBB-d läbivad ravimid

Hematoentsefaalbarjäär on selektiivselt läbilaskev. Nii et mõned bioloogiliselt aktiivsed ühendid - näiteks katehhoolamiinid - ei läbi BBB-d. Siiski on hüpofüüsi, käbinääre ja mitmete hüpotalamuse piirkondade läheduses väikesed alad, kus need ained võivad läbida hematoentsefaalbarjääri. Ravi määramisel võtab arst arvesse BBB omadusi. Näiteks praktilises gastroenteroloogias arvestatakse barjääri läbilaskvust teatud ravimite seedeorganitele avalduvate kõrvaltoimete intensiivsuse hindamisel. Sel juhul püüavad nad eelistada neid ravimeid, mis läbivad BBB-d halvemini. Antibiootikumide osas, mis tungivad hästi läbi barjääri, tuleb märkida ravimit "Nifuratel". Seda tuntakse ka nime all "Macmirror". Hästi ületage esimese põlvkonna BBB prokineetika. Nende hulka kuuluvad eelkõige sellised vahendid nagu Bimaral, Metoclopramid. Nendes sisalduv toimeaine on bromopriid.

Prokineetika järgmiste põlvkondade BBB ja ravimid läbivad hästi. Nende hulgas on sellised ravimid nagu "Motilak", "Motilium". Nendes sisalduv toimeaine on domperidoon. Mis veelgi hullem, sellised ravimid nagu Itomed ja Ganaton tungivad läbi vere-aju barjääri. Nende toimeaineks on itopriid. Parimat BBB läbimist täheldatakse selliste ravimite puhul nagu ampitsilliin ja tsefasoliin. Samuti tuleb öelda, et rasvlahustuvate ühendite võime tungida läbi hematoentsefaalbarjääri on suurem kui vees lahustuvatel.

Teadlased seletavad üha suuremat hulka haigusi hematoentsefaalbarjääri (BBB) ​​funktsioonide rikkumisega. Selle patoloogiline läbilaskvus areneb peaaegu igat tüüpi kesknärvisüsteemi patoloogiate korral. Teisest küljest, et tagada teatud ravimite ajju tungimine, muutub BBB ületamine prioriteediks. Võtted, mis võimaldavad sihikindlalt ületada kaitsebarjääri vereringe ja ajustruktuuride vahel, võivad anda olulise tõuke paljude haiguste ravile.

Ühes oma kuulsatest katsetest värvainetega avastas nüüdseks tuntud teadlane Paul Ehrlich 19. sajandi lõpus huvitava nähtuse, mis hõivab teadlasi tänaseni: pärast orgaanilise värvaine viimist katsehiire verre. , jälgides mikroskoobi all erinevate organite rakke, sealhulgas kesknärvisüsteemi organitega seotud rakke, märkis Ehrlich, et värvaine tungis kõikidesse kudedesse, välja arvatud aju. Pärast seda, kui teadlase assistent värvaine otse ajju süstis, oli mikroskoobi all vaadeldud pilt täpselt vastupidine: aju ainet värviti tumevioletsinise värvainega, samas kui teiste organite rakkudest värvainet ei leitud. Oma tähelepanekutest järeldas Ehrlich, et aju ja süsteemse verevoolu vahel peab olema barjäär.

Pool sajandit pärast Paul Ehrlichi avastust, kui tulid võimsamad mikroskoobid, mis suudavad objekte vaadelda Ehrlichi mikroskoobist 5000-kordse suurendusega, tuvastati tõepoolest vere-aju barjäär. See asub mitme kilomeetri pikkuse veresoonte võrgustiku seintes, mis varustavad kõiki sadu miljardeid närvirakke inimese ajus. Nagu kõik veresooned, on ka ajuveresooned sisemiselt vooderdatud endoteelirakkudega. Ent endoteliotsüüdid, mis on osa aju neurovaskulaarsest üksusest, külgnevad üksteisega tihedamalt kui kogu ülejäänud veresoonkonnas. Nendevahelisi rakkudevahelisi kontakte nimetatakse "tihedateks ristmikeks" (tihedad ristmikud). Võime moodustada kompaktne, fenestreerimata monokiht, väga spetsiifiliste transpordimolekulide ja raku adhesioonivalkude ekspressioon võimaldavad endoteliotsüütidel säilitada madalat transtsütoosi taset. Samuti on endoteel peritsüütide, astrotsüütide, neuronite ja rakuvälise maatriksi molekulide reguleerimise mõju all, mis teeb selgeks, et BBB ei ole lihtsalt endoteliotsüütide kiht, vaid aktiivne organ, mis sisaldab erinevat tüüpi rakke. Selline rakkude interaktsioon, mis tagab barjäärifunktsiooni, takistades vedelike, makromolekulide, ioonide vaba liikumist, selgitab, miks ei Paul Ehrlichi värvaine ega ka mõned ravimid ei pääse verest ajukoesse.

Juba enne, kui BBB olemasolu selgeks sai, olid arstid ja teadlased selle tähtsusest teadlikud. Ja selle barjääri toimimise segamist peeti halvaks mõtteks. Aja jooksul see idee muutus, kuna BBB osutus väga aktiivseks struktuuriks. Mõlemal pool barjääri olevad rakud on pidevas kontaktis, mõjutades üksteist vastastikku. Erinevad rakusisesed molekulaarsed signalisatsiooniteed määravad BBB võimekuse erinevat tüüpi molekulide suhtes (siinkohal tahaksin meenutada Wnt signaalirada, mis koordineerib paljusid rakkude diferentseerumisega seotud protsesse ja on samuti seotud rakkude terviklikkuse säilitamisega. BBB). Näiteks leukotsüüdid, mida arvati pikka aega olevat liiga suured, et ületada BBB-d, läbivad seda tegelikult "immunoloogilise järelevalve" abil. Mikroskoopilised seadmed ja mikroskoobid ise ei peatu arengus ka praegu, need muutuvad pidevalt keerukamaks ja avavad üha rohkem võimalusi elusorganismi peenelt korrastatud struktuuride visualiseerimiseks. Näiteks kahe footoni mikroskoobi kasutamine võimaldab vaadelda ajukoore eluskudet umbes 300 mikroni sügavusel, mille viis läbi MD Maiken Nedergaard Rochesteri ülikoolist. Ta tegi järgmised manipulatsioonid: osa hiire koljust eemaldati, seejärel süstiti vereringesse värvaine, mis võimaldas jälgida BBB-d reaalajas. Teadlasel õnnestus jälgida, kuidas üksikud rakud liikusid vereringest läbi kapillaari seina – läbi just selle endoteelirakkude kihi, mida veel 20 aastat tagasi peeti nende jaoks mitteläbilaskvaks.

Enne kahefotonilise mikroskoobi ehitamist kasutasid teadlased klassikalisi meetodeid: näiteks vaatlesid nad surnud koerakke läbi mikroskoobi, mis ei andnud BBB toimimise kohta kuigi palju selgitusi. Väärtuslik on jälgida BBB tööd dünaamikas. Katsete seerias stimuleerisid Nedergaard ja tema kolleegid teatud rühma närvirakke, mis paljastas BBB uskumatu dünaamilisuse: närvirakkude stimuleerimisel laienesid neuroneid ümbritsevad veresooned, mis suurendas verevoolu, kui stimuleeritud neuronid hakkasid paljunema. tegevuspotentsiaal; ärritavate impulsside vähenemisega kitsenesid veresooned kohe uuesti. Samuti on BBB funktsioonide hindamisel oluline pöörata tähelepanu mitte ainult endoteliotsüütidele, vaid ka juba mainitud astrotsüütidele ja peritsüütidele, mis ümbritsevad veresooni ja hõlbustavad vere, endoteeli ja neuronite vahelist koostoimet. Raku ümber ringlevaid mikrogliiarakke ei tohiks alahinnata, kuna nende funktsioonide defektid võivad mängida olulist rolli neurodegeneratiivsete haiguste esinemisel, kuna sel juhul on BBB immuunkaitse nõrgenenud. Kui endoteelirakud surevad kas loomulikul teel või kahjustuse tagajärjel, tekivad hematoentsefaalbarjääris "lüngad" ja endoteelirakud ei suuda seda piirkonda kohe sulgeda, kuna tihedate ühenduste teke võtab aega. See tähendab, et selle piirkonna endoteliotsüüdid tuleb ajutiselt asendada mõnda muud tüüpi rakkudega. Ja just mikrogliia rakud tulevad appi, taastavad barjääri seni, kuni endoteelirakud on täielikult taastunud. Seda näitas dr Nedergaardi töörühma katse, kui 10-20 minutit pärast hiire aju kapillaari kahjustamist laserkiirte poolt täitsid mikrogliia rakud kahjustuse. Sel põhjusel on üks hüpoteese, mille abil teadlased neurodegeneratiivsete haiguste esinemist selgitada püüavad, mikrogliiarakkude talitlushäired. Näiteks leiab kinnitust BBB häirete roll hulgiskleroosi rünnakute tekkes: immuunrakud migreeruvad suurel hulgal ajukudedesse, käivitades müeliini ründavate antikehade sünteesi, mille tulemusena hävib aksonite müeliinkesta.

BBB patoloogiline läbilaskvus mängib samuti rolli epilepsia tekkes ja kulgemises. On juba ammu teada, et epilepsiahood on seotud BBB terviklikkuse mööduva rikkumisega. Tõsi, kuni viimase ajani arvati, et see on epilepsiahoogude tagajärg, mitte põhjus. Kuid uute uurimistulemuste saamisega on see seisukoht järk-järgult muutunud. Näiteks Amsterdami ülikooli labori andmetel suurenes krampide sagedus rottidel vastavalt BBB avanemisele. Mida tugevam oli barjääri rikkumine, seda tõenäolisemalt tekkis loomadel epilepsia ajaline vorm. Need andmed korreleeruvad ka Clevelandi kliinikus (USA) sigade testide tegemisel saadud tulemustega, aga ka inimeste näitel: mõlemal juhul tekkisid krambid pärast BBB avamist, kuid mitte kunagi varem.

Teadlased tegelevad ka BBB toimimise ja Alzheimeri tõve vahelise seosega. Näiteks õnnestus tuvastada kaks BBB valku, mis tõenäoliselt mängivad rolli selle haiguse tekkes. Üks neist valkudest, RAGE, vahendab beeta-amüloidmolekulide tungimist verest ajukoesse ja teine, LRP1, transpordib need välja. Kui nende valkude aktiivsuse tasakaal on häiritud, tekivad iseloomulikud amüloidnaastud. Kuigi nende teadmiste rakendamine teraapias on alles tulevik, on paljulubavaid tulemusi: hiiremudelis on võimalik ära hoida beeta-amüloidi ladestumist, blokeerides endoteelirakkudes RAGE valkude sünteesi eest vastutava geeni. Võimalik, et juba väljatöötamisel olevad RAGE valku blokeerivad ravimid avaldavad inimestele sarnast mõju.

Lisaks BBB terviklikkuse taastamise probleemile on veel üks selle toimimisega seotud probleem, nagu juba mainitud, ravimite ülekandmine läbi vereringe ja aju vahelise barjääri. BBB kaudu toimuv ainevahetus allub teatud reeglitele. Barjääri ületamiseks ei tohi aine mass ületada 500 kDa (see parameeter vastab enamikule antidepressantidele, antipsühhootikumidele ja hüpnootilistele ravimitele) või kasutada BBB üleminekuks loomulikke mehhanisme, nagu näiteks L-dopa, mis on dopamiini eelkäija ja mida transporditakse läbi BBB spetsiaalse kandjaga; või aine peab olema lipofiilne, kuna afiinsus rasva sisaldavate ühendite suhtes tagab läbipääsu basaalmembraanist. 98% ravimitest ei vasta isegi ühele neist kolmest kriteeriumist, mis tähendab, et nad ei suuda oma farmakoloogilist toimet ajus realiseerida. Tehnoloogid üritavad ülaltoodud kriteeriume ravimvormide väljatöötamisel edutult rakendada. Kuigi rasvlahustuvad vormid tungivad kergesti BBB-sse, erituvad osad neist koheselt tagasi vereringesse, teised jäävad membraani paksusesse kinni, ilma et jõuaks lõpp-eesmärgini. Lisaks ei ole lipofiilsus BBB membraanide selektiivne omadus ja seetõttu võivad sellised ravimid praktiliselt valimatult läbida mis tahes kehaorganite rakumembraane, mis on loomulikult ka miinus.

Vere-aju barjääri ületamise viisid

Tõeline läbimurre oli kirurgilise meetodi kasutamine BBB ületamiseks, mille töötas välja Dallase Texase ülikooli neurokirurg. Meetod seisneb mannitooli hüperosmolaarse lahuse sisestamises ajju viivasse arterisse. Osmolaarse toime tõttu (mannitooli hüperosmolaarses lahuses ületab lahustunud aine kogus endoteelirakkude sees olevat, seetõttu liigub vesi osmoosiseaduse kohaselt lahustunud aine suurema kontsentratsiooni suunas) endoteelirakud kaotavad vett, kahanevad, nendevahelised tihedad kontaktid katkevad ja BBB-s tekib ajutine defekt, mis võimaldab samasse arterisse süstitud ravimitel ajukoesse pääseda. Selline ajutine BBB avanemine kestab 40 minutit kuni 2 tundi, pärast mida taastuvad endoteliotsüüdid ja nendevahelised kontaktid. See meetod on ajukasvaja diagnoosiga patsientidele elupäästev, kui kasvaja reageerib keemiaravile hästi, kuid ainult siis, kui keemiaravi ravim jõuab ajukoesse ja koguneb vajalikus kontsentratsioonis pahaloomuliste rakkude infiltratsiooni piirkonda.

See on vaid üks viise, kuidas BBB-st üle saada. Pole vähem huvitavaid viise, need on toodud alloleval diagrammil. Loodan, et pärast nende lugemist tekib kellelgi soov teemasse süveneda, et mõista hematoentsefaalbarjääriga manipuleerimise võimalusi ja seda, kuidas täpselt selle toimimise kontroll erinevate haiguste vastu aitab.

Allikad:
Neuroteaduste kaasamine ajubarjääri bioloogia translatiivsete uuringute edendamiseks - artikli täistekst, millest postituses kasutati väljavõtteid, BBB osalemise kohta erinevate haiguste arengus ja selle ületamiseks
J. Interlandi Wege durch die Blut-Hirn-Schranke, Spektrum der Wissenschaft, spezielle Auflage, 2/2016
Blood-Brain Barrier Opening – ülevaade BBB avamise viisidest
Endoteeli eellasrakud aju endoteeli arendamisel ja taastamisel – BBB moodustumisel ja modelleerimisel

M.I. Saveljeva, E.A. Sokova

4.1. ÜLEVAADE RAVIMI LEVITAMISEST JA SUHTEST PLASMAVALKUDEGA

Pärast ühe manustamisviisi kaudu süsteemsesse vereringesse pääsemist jaotuvad ksenobiootikumid elunditesse ja kudedesse. Mitmed üheaegselt toimuvad füüsikalised ja füsioloogilised protsessid sõltuvad ravimite füüsikalis-keemilistest omadustest ja moodustavad seega erinevaid viise nende jaotumiseks organismis. Füüsikaliste protsesside näideteks on ravimi lihtne lahjendamine või lahustamine intratsellulaarses ja rakuvälises vedelikus. Füsioloogiliste protsesside näideteks on plasmavalkudega seondumine, koekanalite juurdepääsetavus ja ravimite tungimine läbi erinevate kehabarjääride. Ravimi levikut võivad mõjutada järgmised tegurid:

vere voolamine;

Plasmavalkudega seondumise määr;

preparaatide füüsikalis-keemilised omadused;

Ravimi läbitungimise määr (sügavus) ja ulatus läbi füsioloogiliste barjääride;

Eliminatsiooni aste, mille tõttu ravim pidevalt organismist eemaldatakse ja mis konkureerib jaotumise nähtusega.

vere voolamine

vere voolamine- vere hulk, mis jõuab teatud kehapiirkonda ajaühikus. Mahu/aja suhe ja verevoolu hulk erinevates kehapiirkondades on erinev. Üldine verevool on 5000 ml/min ja vastab südame mahutavusele rahuolekus. Südame mahtuvus(südame minutimaht) – südame poolt ühe minuti jooksul pumbatud vere maht. Lisaks südame väljundile on selline oluline tegur nagu vere maht süsteemse vereringe erinevates osades. Keskmiselt sisaldab süda 7% kogu veremahust, kopsusüsteem - 9%, arterid - 13%, arterioolid ja kapillaarid - 7% ning veenid, veenid ja kogu venoosne süsteem - ülejäänud 64%. Kapillaaride läbilaskvate seinte kaudu toimub ravimite, toitainete ja muude ainete vahetus elundite / kudede interstitsiaalse vedelikuga, mille järel kapillaarid ühinevad veenidega, mis koonduvad järk-järgult suurteks veenideks. Transkapillaarse vahetuse tulemusena transporditakse ravim läbi kapillaari seina koesse tänu rõhuerinevusele (osmootne ja hüdrostaatiline rõhk) kapillaari sisemise ja välimise osa või kontsentratsioonigradiendi vahel. Ksenobiootikumi kohaletoimetamine teatud kehapiirkondadesse sõltub verevoolu kiirusest ja ravimi manustamiskohast.

Verevool on peamine tegur ravimite jaotumisel inimkehas, samas kui kontsentratsioonigradient mängib ebaolulist rolli (või ei osale üldse) ravimi massilisel kohaletoimetamisel organitesse ja kudedesse. Verevool määrab oluliselt ravimi kohaletoimetamise kiiruse teatud kehapiirkonda ja peegeldab ksenobiootilise kontsentratsiooni suhtelist kasvukiirust, mille juures tekib tasakaal elundi/koe ja vere vahel. Kudes säilitatavate või jaotatavate ravimite kogus sõltub koe suurusest ja ravimi füüsikalis-keemilistest omadustest, elundi/koe ja vere eraldustegurist.

Nähtus, mis piirab verevoolu(perfusiooniga piiratud jaotus; ülekandega piiratud nähtus; läbilaskvusega piiratud jaotus) - transkapillaarvahetuse sõltuvus

ja ravimi säilitamine koes, lähtudes ravimi füüsikalis-keemilistest omadustest.

Perfusiooniga piiratud transkapillaarne ravimivahetus

Kahe jaotuse tüübi eristamiseks oletame, et kapillaar on õõnes silinder pikkusega L ja raadius r , milles veri voolab kiirusega ν positiivses suunas X. Ravimi kontsentratsioon kapillaari ümbritsevas koes - c riie ja kontsentratsioon veres C veri. Ravim läbib

kapillaarmembraan vere ja koe vahelise kontsentratsioonigradiendi tõttu. Vaatleme vahelise suuna lõiku või lõiku X ja x+dx, kus on ravimi voolu massi erinevus segmendi alguse ja lõpu vahel dx võrdne massivooluga läbi kapillaari seina. Kirjutame võrdsuse järgmisel kujul (4-1):

siis on võrrand (4-4) järgmisel kujul:

Massivool läbi kapillaari seina koesse on j kangast väljenduses

teatud pikkusega kapillaarist väljuva voolu netomass L(4-6):

Pärast võrrandi (4-6) teisendamist võrrandi (4-5) abil saame:

Leiame kapillaaride kliirensi:

Kapillaarkliirens on vere maht, millest ksenobiootikum levib koesse ajaühikus. Ekstraheerimissuhte (väljatõmbesuhte) jaotus:

Võrrandit (4-9) saab teisendada:

Võrrand (4-10) näitab, et taastumissuhe väljendab tasakaalustavat osa ravimi kontsentratsiooni vahel kapillaaride venoossel küljel koes, arteriaalsetes kapillaarides. Võrreldes võrrandeid (4-5) ja (4-10) leiame, et kapillaaride kliirens võrdub verevoolu korrutisega taastumissuhtega.

Mõelge difusioonipiiranguga jaotusele (või läbilaskvusega piiratud jaotusele). Kell Q>PS või C arter≈ C veen

ravim on kergelt lipofiilne ja taastumismäär on alla ühe ning ravimi jaotumist piirab väga kiire difusioon läbi kapillaarmembraani. Määrame ravimi massilise ülekandumise koesse:

Ksenobiootikumi kudedesse ülekandmise liikumapanev jõud on kontsentratsioonigradient. Mõelge perfusiooniga piiratud jaotusele (või verevooluga piiratud jaotusele). Kell K või C veen≈ C koe ravimi kontsentratsioon koes on tasakaalus

ravimi kontsentratsiooniga kapillaaride venoossel küljel ja ravim on väga lipofiilne. Taastumissuhe on võrdne või sellele lähedane ja seetõttu on ravimi imendumine kudedesse termodünaamiliselt palju soodsam kui selle esinemine veres ning jaotumist piirab ainult ravimi koesse jõudmise kiirus. . Kui ravim jõuab kudedesse, imendub see kohe. Määrame ravimi massilise ülekandumise koesse:

Ravimite seondumine valkudega

Ravimite seondumine plasmavalkudega mõjutab oluliselt nende jaotumist organismis. Valkudega seotud väikesed ravimimolekulid võivad kergesti tungida läbi barjääride. Sellega seoses erineb valguga seotud ksenobiootikumi jaotumine seondumata ravimi jaotumisest. Ravimi funktsionaalrühmade koostoime membraani või rakusiseste retseptoritega võib olla lühike. Seondumine valkudega ei mõjuta mitte ainult ravimi jaotumist organismis, vaid mõjutab ka ravitulemust. Seetõttu on farmakokineetiliseks analüüsiks, annustamisskeemi reguleerimiseks ja optimaalse terapeutilise toime jaoks vaja kasutada vaba ravimi kontsentratsiooni plasmas.

Koos teiste ravimitega kasutatavate ravimite seonduvus valkudega võib erineda eraldivõetavatest ravimitest. Muutused valkudega seondumises on tingitud ühe ravimi asendamisest teisega kombinatsioonis plasmavalkudega. Sarnane asendus võib toimuda ka raku tasandil teiste valkude ja koeensüümidega. Asendamine põhjustab ravimi vaba fraktsiooni suurenemist plasmas ja selle akumuleerumist retseptori kohtades proportsionaalselt ravimi kontsentratsiooniga. Ravimite samaaegsel manustamisel on oluline kohandada annustamisskeemi. Ravimite valkudega seondumise muutmine on oluline küsimus, eriti kitsa terapeutilise aknaga ravimite puhul.

Plasmavalgud, mis osalevad valgu ja ravimi koostoimes

Albumiin- ravimitega seondumise eest vastutav plasma ja kudede peamine valk, mida sünteesivad eranditult maksa hepatotsüüdid. Albumiini molekulmass on 69 000 Da; poolväärtusaeg on ligikaudu 17-18 päeva. Valk jaotub peamiselt veresoonkonnas ja vaatamata suurele molekuli suurusele võib see lisaks jaotuda ka ekstravaskulaarses tsoonis. Albumiinil on negatiivselt ja positiivselt laetud piirkonnad. Ravim interakteerub albumiiniga vesiniksidemete (hüdrofoobse sidumise) ja van der Waalsi jõudude tõttu. Mõned tegurid, millel on oluline mõju organismile, nagu rasedus, operatsioon, vanus, etnilised ja rassilised erinevused, võivad mõjutada ravimite koostoimet albumiiniga. Neerud ei filtreeri albumiini ja seetõttu ei filtreerita ka albumiiniga seonduvaid ravimeid. Seondumisaste ei mõjuta mitte ainult ravimi jaotumist, vaid ka ravimi neerude kaudu eritumist ja metabolismi. Maksa hepatotsüüdid võivad omastada ainult vaba ravimit. Seega, mida suurem on valkudega seotud ravimi protsent, seda madalam on imendumine maksas ja ravimi metabolismi kiirus. Nagu varem mainitud, võib ravimi plasmaalbumiiniga seondumise astet oluliselt muuta ka teiste põhiravimit asendavate ravimite manustamine, mille tulemusena suureneb vaba ravimi kontsentratsioon plasmas.

Teised plasmavalgud on fibrinogeen, globuliinid (γ- ja β 1 ​​-globuliin - transferriin), tseruloplasmiin ning α- ja β-lipoproteiinid. Fibrinogeen ja selle polümeriseeritud vorm fibriin osalevad verehüüvete moodustumisel. Globuliinid, nimelt y-globuliinid, on antikehad, mis interakteeruvad teatud antigeenidega. Transferriin osaleb raua transpordis, tseruloplasmiin osaleb vase ülekandes ning α- ja β-lipoproteiinid on rasvlahustuvate komponentide edastajad.

Valkudega seondumise parameetrite hindamine

Ravimite seondumine plasmavalkudega määratakse tavaliselt in vitro pH ja kehatemperatuuri füsioloogilistes tingimustes. Määramismeetodid - tasakaalu dialüüs, dünaamiline dialüüs, ultrafiltratsioon, geelfiltratsioonkromatograafia, ultratsentri-

fusioon, mikrodialüüs ja mitmed uued ja kiiresti arenevad metoodikad suure läbilaskevõimega katseteks. Eesmärk on hinnata vaba ravimi kontsentratsiooni tasakaalus valgu-ravimi kompleksiga. Valitud metoodika ja katsetingimused peaksid olema sellised, et säiliks kompleksi stabiilsus ja tasakaal ning ei hinnataks vaba ravimi kontsentratsiooni üle kompleksi liiga kiire lagunemise tõttu mõõtmise ajal. Pärast seda hoiab enamikku ravimi-valgu komplekse koos nõrk keemiline interaktsioon, elektrostaatiline tüüp (van der Waalsi jõud) ja vesinikside kipub eralduma kõrgemal temperatuuril, osmootsel rõhul ja mittefüsioloogilisel pH-l.

Tavaline plasma dialüüsimeetod või valgulahus, mille pH on 7,2–7,4, ei ole ravimi erinevatel kontsentratsioonidel efektiivne. Pärast dialüüsi muutub segu NaCl-ga isotooniliseks [temperatuuril 37 °C läbi dialüüsimembraani molekulaarsete kontraktsioonidega ligikaudu 12 000-14 000 Da ekvivalentse mahu fosfaatpuhvrite vastu (≈67, pH 7,2-7,4)]. Valku ja ravimit sisaldava koti kujul olev dialüüsimembraan asetatakse puhverlahusesse. Koti kokkupandaval modifitseeritud versioonil on kaks sektsiooni, mis on eraldatud dialüüsimembraaniga. Membraani läbiva vaba ravimi tasakaal saavutatakse tavaliselt umbes 2-3 tunniga.Vaba ravimi kontsentratsiooni mõõdetakse puhvri küljel, st. väljaspool kotti või sektsiooni, eraldatuna membraaniga, mis peaks olema võrdne kotis või sektsioonis oleva vaba ravimi kontsentratsiooniga; vaba ravimi kontsentratsioon kotis peab olema tasakaalus valgu külge kinnitatud ravimiga. Dialüüsis kasutatakse albumiini lahust või albumiini sisaldavat puhast plasmaproovi. Ravimi sidumise parameetrid on vaba fraktsioon või sellega seotud konstant, mida saab määrata massi toime seadusega:

kus K a- assotsiatsioonikonstant; C D- vaba ravimi kontsentratsioon molekulides; C Pr- vabade kinnituskohtadega valgu kontsentratsioon; CDP- ravimi-valgu kompleksi kontsentratsioon; k 1 ja k 2 - otse- ja pöördreaktsiooni tasemekonstandid,

vastavalt. Vastastikused sidemed on püsivad ja neid tuntakse dissotsiatsioonikonstantidena (4-14):

Seotud konstandi väärtus K a tähistab ravimi valkudega seondumise astet. Ravimitel, mis seonduvad ulatuslikult plasmavalkudega, on tavaliselt suur assotsiatsioonikonstant. Võrrandi (4-14) põhjal saab määrata ravimi-valgu kompleksi kontsentratsiooni:

Kui üldvalgu (C) kontsentratsioon katse alguses katseklaasis on teada ja ravimi-valgu kompleksi (C) kontsentratsioon on eksperimentaalselt hinnatud, saab määrata vaba valgu kontsentratsiooni. (C Pr), tasakaalus kompleksiga:

Võrrandi (4-15) asendamine võrrandiga (4-16) jaoks C Pr viib:

Teisendame võrrandi (4-18):

Asutamisel CDP/ Koos PT-ga(seotud ravimi moolide arv valgu mooli kohta tasakaalu saavutamiseks) on võrdne r-ga, s.o. r = CDP/ C PT , siis võrrand (4-19) muutub:

Võrrandi (4-20) korrutamisel n(n on kinnituskohtade arv valgu mooli kohta), saame Langmuiri võrrandi:

Langmuiri võrrand (4-21) ja graafik r vastu C D tulemuseks on hüperboolne isoterm (joonis 4-1). Lihtsusta võrrand (4-21). Võtame Langmoori võrrandi (4-21) vastupidises vormis. Topeltpöördvõrrand (4-22) näitab, et graafik 1/r vs 1/C D on lineaarne kaldega 1/nK a ja lõikepunkt piki y-telge 1/ n(Joonis 4-2):

Riis. 4-1. Langmoori isoterm. Y-teljel - kinnitunud ravimi moolide arv valgu mooli kohta; abstsissteljel - vaba ravimi kontsentratsioon

Võrrandi (4-21) teisendamisel on võimalik saada lineaarvõrrandi kaks versiooni:

Scatchardi süžee kirjeldab suhet r/C D ja r sirgjoonena, mille kalle on võrdne assotsiatiivse konstandiga K a(Joon. 4-3). Lõikepunkt teljega X on võrdne ühendatud lõikude arvuga n, lõikepunkt teljega juures on võrdne pK a..

Lisaks saab võrrandit (4-21) ümber korraldada, et saada sirge seos vaba ja seotud ravimi kontsentratsiooni osas:

Riis. 4-2. Kahekordne vastastikune Klotzi süžee

Võrrand (4-21) näitab vastastikkuse vahelist seost r(seotud ravimi moolid valgu mooli kohta) ja C D

Riis. 4-3. CDP/CD joondiagramm (seotud kohtade ja vaba ravimi suhe) vs CDP (seotud ravimi kontsentratsioon)

(vaba ravimi kontsentratsioon). Lõikepunkt teljega juures on seotud kohtade arvu pöördväärtus valgu mooli kohta ning kalde ja lõikepunkti suhe juures- assotsiatiivne tasakaalukonstant.

Ajakava c dp / c d vastu c dp -

sirge, mille kalle on võrdne -K a-ga ja lõikepunkt piki y-telge nKC PT. Seda võrrandit kasutatakse juhul, kui valgu kontsentratsioon pole teada. Ka hinnang põhineb puhverkambris mõõdetud ravimi kontsentratsioonil. Valkudega seotud ravimi määramine põhineb vaba fraktsiooni hindamisel

Scatchardi maatükk (joonis 4-4) on sirgjoon (üht tüüpi ühendatud maatükkide jaoks).

Langmoori võrrand mitut tüüpi ühendatud maatükkide jaoks:

kus n 1 ja K a1 - sama tüüpi identselt ühendatud sektsioonide parameetrid; n 2 ja K a2 - teist tüüpi identselt ühendatud sektsioonide parameetrid ja nii edasi. Näiteks asparagiinhappe või glutamiinhappe jääk, -COO -, võib olla ühte tüüpi kinnituskoht ja -S - tsüsteiinijääk või -NH2± -histidiini jääk - teist tüüpi kinnituskoht. Kui ravimil on afiinsus kahte tüüpi sidumissaitide suhtes, siis graafik

Riis. 4-4. Scatchardi süžee

Scatchard r/D vastu r tähistab mitte sirget, vaid kõverat (joon. 4-5). Kõvera algus- ja lõppjoone segmentide ekstrapoleerimisel saadakse sirged, mis sobivad võrranditega:

Riis. 4-5. Scatchardi süžee

Scatchardi graafik kujutab kahe erineva piirkonna klassi valkudega seondumist. Kõver tähistab kahte esimest elementi

võrrandid (4-26), mis on defineeritud sirgjoontena – kõvera alg- ja lõpuosa lineaarsegmentide jätkud. Rida 1 tähistab kõrge afiinsusega (afiinsusega) ja väikese võimsusega seondumissaite ning rida 2 – madala afiinsusega ja suure võimsusega seondumissaite.

Kui kahe sidumiskoha afiinsus ja läbilaskevõime on erinevad, siis joon suurema lõikepunktiga juures ja väiksem ristumispunkt X määratleb kõrge afiinsuse ja väikese saidi läbilaskevõime, samas kui joon väiksema lõikepunktiga juures ja suurem ristumispunkt X määrab sidumissaitide madala afiinsuse ja suure läbilaskevõime.

4.2. ARVIMITTE LÄBIMINE LÄBI HISTOHEMAATiliste tõkete

Enamik ravimeid pärast imendumist ja verre sattumist jaotuvad erinevatesse organitesse ja kudedesse ebaühtlaselt ning alati ei ole võimalik saavutada ravimi soovitud kontsentratsiooni sihtorganis. Ravimite leviku olemust mõjutavad oluliselt histohemaatilised barjäärid, mis esinevad nende leviku teel. Aastal 1929 akadeemik L.S. Stern teatas esimest korda Bostonis toimunud rahvusvahelisel füsioloogiakongressil selle olemasolust

füsioloogiliste kaitsvate ja reguleerivate histohemaatiliste barjääride (HGB) keha. On tõestatud, et füsioloogiline histohemaatiline barjäär on kõige keerulisemate füsioloogiliste protsesside kompleks, mis toimub vere ja koevedeliku vahel. GGB reguleerib nende tegevuseks vajalike ainete voolu verest elunditesse ja kudedesse ning rakulise ainevahetuse lõpp-produktide õigeaegset väljutamist, tagab koe (rakuvälise) vedeliku optimaalse koostise püsivuse. Samal ajal takistab HGB võõrkehade sisenemist verest elunditesse ja kudedesse. GGB eripäraks on selle selektiivne läbilaskvus, st. võime teatud aineid läbida ja teisi säilitada. Enamik teadlasi tunnistab spetsiaalse füsioloogilise HGB olemasolu, mis on oluline üksikute elundite ja anatoomiliste struktuuride normaalseks toimimiseks. Nende hulka kuuluvad: hematoentsefaalne (vere ja kesknärvisüsteemi vahel), hematooftalmiline (vere ja silmasisese vedeliku vahel), hematolabürint (vere ja labürindi endolümfi vahel), barjäär vere ja sugunäärmete vahel (hematoovariaalne, hematotestikulaarne). Platsental on ka "barjääri" omadused, mis kaitsevad arenevat loodet. Histohemaatiliste barjääride peamised struktuurielemendid on veresoonte endoteel, basaalmembraan, mis sisaldab suurt hulka neutraalseid mukopolüsahhariide, peamine amorfne aine, kiud jne. HGB struktuuri määravad suurel määral elundi struktuursed iseärasused ning see varieerub sõltuvalt elundi ja koe morfoloogilistest ja füsioloogilistest iseärasustest.

Ravimite tungimine läbi vere-aju barjääri

Peamised liidesed kesknärvisüsteemi ja perifeerse vereringe vahel on hematoentsefaalbarjäär (BBB) ​​ja hematolikööri barjäärid. BBB pindala on ligikaudu 20 m 2 ja tuhandeid kordi suurem kui hematolikööri barjääri pindala, seega on BBB peamine barjäär kesknärvisüsteemi ja süsteemse vereringe vahel. BBB olemasolu ajustruktuurides, mis eraldab vereringe interstitsiaalsest ruumist ja takistab mitmete polaarsete ühendite sisenemist otse aju parenhüümi, määrab ravimiteraapia omadused.

PII neuroloogilised haigused. BBB läbilaskvuse määravad aju kapillaaride endoteelirakud, millel on epiteelitaolised, väga vastupidavad tihedad ühenduskohad, mis välistab paratsellulaarsed rajad ainete kõikumiseks läbi BBB ja ravimite tungimine ajju sõltub transtsellulaarsest. transport. Teatud tähtsusega on ka gliaalelemendid, mis ääristavad endoteeli välispinda ja mängivad ilmselgelt täiendava lipiidmembraani rolli. Lipofiilsed ravimid difundeeruvad enamasti kergesti läbi BBB, erinevalt hüdrofiilsetest ravimitest, mille passiivset transporti piiravad väga vastupidavad endoteelirakkude tihedad ühendused. Rasvades lahustuvuse koefitsient on hematoentsefaalbarjääri läbimisel otsustava tähtsusega. Tüüpiliseks näiteks on üldanesteetikumid – nende narkootilise toime kiirus on otseselt võrdeline rasvades lahustuvuse koefitsiendiga. Süsinikdioksiid, hapnik ja lipofiilsed ained (mis sisaldavad enamikku anesteetikume) läbivad kergesti BBB-d, samas kui enamiku ioonide, valkude ja suurte molekulide (nt mannitool) jaoks on see praktiliselt mitteläbilaskev. Aju kapillaarides pinotsütoosi praktiliselt ei esine. On ka teisi viise ühendite tungimiseks läbi BBB, kaudselt läbi retseptori, spetsiifiliste kandjate osalusel. On näidatud, et teatud tsirkuleerivate plasmapeptiidide ja valkude spetsiifilised retseptorid ekspresseeruvad aju kapillaaride endoteelis. BBB peptiidi retseptori süsteem sisaldab insuliini, transferriini, lipoproteiinide jne retseptoreid. Suurte valgumolekulide transport on tagatud nende aktiivse püüdmisega. On kindlaks tehtud, et ravimite ja ühendite ajju tungimist saab läbi viia aktiivse transpordiga aktiivsete “sissepumpamise” ja “väljapumpamise” transpordisüsteemide osalusel (joonis 4.6). See võimaldab kontrollida ravimite selektiivset transporti läbi BBB ja piirata nende mitteselektiivset levikut. "Pumbavate" transporterite – glükoproteiin-P (MDR1), mitme ravimiresistentsusega (MRP) seotud valkude perekonna transporterite, rinnavähi resistentsuse valgu (BCRP) – avastamine on andnud olulise panuse ravimite transpordi mõistmisse. BBB. On näidatud, et P-glükoproteiin piirab paljude ainete transporti ajju. See paikneb endoteelirakkude apikaalses osas ja viib läbi valdavalt hüdrofiilsete katioonide eritumise ajust veresoonte luumenisse.

Riis. 4.6. Vedajad, kes tegelevad narkootikumide transportimisega läbi BBB (Ho R.H., Kim R.B., 2005)

uued ravimid, näiteks tsütostaatikumid, retroviirusevastased ravimid jne. P-glükoproteiini olulisust ravimite BBB kaudu transportimise piiramisel saab näidata loperamiidi näitel, mis on oma seedetraktile avalduva toimemehhanismi poolest potentsiaalne opioidravim. trakti retseptorid. Siiski puudub mõju kesknärvisüsteemile (eufooria, hingamisdepressioon), kuna loperamiid, mis on P-glükoproteiini substraat, ei tungi kesknärvisüsteemi. Inhibiitori juuresolekul mdrl kinidiiniga, suureneb loperamiidi keskne toime. MRP perekonna transporterid asuvad kas endoteelirakkude basaal- või apikaalses osas. Need transporterid eemaldavad glükuroonitud, sulfaaditud või glutatiooni konjugaate. Katses leiti, et multiresistentsusvalk MRP2 osaleb BBB toimimises ja piirab epilepsiavastaste ravimite aktiivsust.

Mõned orgaanilise aniooni transporteri (OAT3) perekonna liikmed ekspresseeruvad aju kapillaaride endoteliotsüütides, mis mängivad samuti olulist rolli mitmete ravimite jaotumisel kesknärvisüsteemis. Nende transporterite ravimsubstraadid on näiteks feksofenadiin, indometatsiin. Orgaanilisi anioone transportivate polüpeptiidide (OATP1A2) isovormide ekspressioon BBB-s on oluline ravimite ajju tungimiseks. Siiski arvatakse, et "väljapumpatavate" transporterite (MDR1, MRP, BCRP) ekspressioon on põhjuseks ravimite piiratud farmakoloogilisele ligipääsule ajju ja muudesse kudedesse, kui kontsentratsioon võib olla madalam kui vajalik soovitud efekti. Märkimisväärne

mitokondrite arv aju kapillaaride endoteelis näitab võimet säilitada energiast sõltuvaid ja metaboolseid protsesse, mis on kättesaadavad ravimite aktiivseks transportimiseks läbi BBB. Aju kapillaaride endoteelirakkudes leiti ensüüme, mis on võimelised oksüdeerima, konjugeerima ühendeid, et kaitsta rakke endid ja vastavalt ka aju võimalike toksiliste mõjude eest. Seega on vähemalt kaks põhjust, mis piiravad ravimite voolu kesknärvisüsteemi. Esiteks on need BBB struktuurilised omadused. Teiseks sisaldab BBB aktiivset ensüümide metaboolset süsteemi ja transporterite väljapumpamise süsteemi, mis moodustab enamiku ksenobiootikumide jaoks biokeemilise barjääri. See BBB endoteeli füüsikaliste ja biokeemiliste omaduste kombinatsioon takistab enam kui 98% potentsiaalsetest neurotroopsetest ravimitest ajju sisenemast.

Ravimi transportimist ajju mõjutavad tegurid

Endogeensete ainete ja haiguste farmakodünaamilised mõjud mõjutavad BBB funktsioone, põhjustades muutusi ravimite transpordis ajju. Erinevad patoloogilised seisundid võivad häirida vere-koebarjääride läbilaskvust, näiteks meningoentsefaliidi korral suureneb järsult hematoentsefaalbarjääri läbilaskvus, mis põhjustab ümbritsevate kudede terviklikkuse mitmesuguseid rikkumisi. BBB läbilaskvuse suurenemist täheldatakse hulgiskleroosi, Alzheimeri tõve, HIV-nakkusega patsientide dementsuse, entsefaliidi ja meningiidi, kõrge vererõhu, vaimsete häirete korral. Märkimisväärne hulk neurotransmittereid, tsütokiine, kemokiine, perifeerseid hormoone, kokkupuude O2 aktiivsete vormidega võib muuta BBB funktsioone ja läbilaskvust. Näiteks suurendab histamiin, mis toimib H2 retseptoritele, mis on suunatud endoteelirakkude valendiku poole, barjääri läbilaskvust madala molekulmassiga ainete suhtes, mis on seotud epiteelirakkude vaheliste tihedate ühenduste rikkumisega. Histohemaatiliste barjääride läbilaskvust saab suunata muuta, mida kliinikus kasutatakse (näiteks kemoterapeutiliste ravimite efektiivsuse tõstmiseks). BBB barjäärifunktsioonide vähenemist tihedate ristmike struktuuri rikkumise tõttu kasutatakse ravimite ajju toimetamiseks, näiteks mannitooli, uurea kasutamine. BBB osmootne "avamine" võimaldab pakkuda esmase lümfoomiga patsiente

aju ja glioblastoom suurendasid tsütostaatikumide (nt metotreksaat, prokarbasiin) transporti ajju piiratud aja jooksul. Õrnem meetod BBB mõjutamiseks on selle "biokeemiline" avamine, mis põhineb prostaglandiinide, põletikuliste vahendajate võimel suurendada ajuveresoonte poorsust. Põhimõtteliselt erinev võimalus ravimite ajju jõudmise suurendamiseks on eelravimite kasutamine. Spetsiifiliste transpordisüsteemide olemasolu ajus selle elu toetavate komponentide (aminohapped, glükoos, amiinid, peptiidid) kohaletoimetamiseks võimaldab neid kasutada hüdrofiilsete ravimite ajju suunatud transportimiseks. Polaarsete ühendite transpordivahendite otsimine, mida iseloomustab madal läbilaskvus BBB kaudu, laieneb pidevalt. Paljutõotav võib selles osas olla looduslikel katioonsetel valkudel – histoonidel – põhinevate transpordisüsteemide loomine. Usutakse, et edusamme uute tõhusate ravimite loomisel on võimalik saavutada, täiustades paljutõotavate keemiliste ühendite valimise meetodeid ning optimeerides peptiid- ja valguravimite ning ka geneetilise materjali manustamisviise. Uuringud on näidanud, et teatud nanoosakesed on võimelised transportima ajju peptiidstruktuuriga ühendeid (delargiin), hüdrofiilseid aineid (tubokurariin), P-glükoproteiiniga ajust välja pumbatavaid ravimeid (loperamiid, doksorubitsiin). Üks paljutõotav suund histagemaatilisi tõkkeid läbistavate ravimite loomisel on modifitseeritud ränidioksiidil põhinevate nanosfääride väljatöötamine, mis on võimelised tagama geneetilise materjali tõhusa kohaletoimetamise sihtrakkudesse.

Ravimite transport läbi hematoplatsentaarse barjääri

Varasem oletus, et platsentaarbarjäär tagab loote loomuliku kaitse eksogeensete ainete, sealhulgas ravimite mõju eest, peab paika vaid piiratud määral. Inimese platsenta on keeruline transpordisüsteem, mis toimib poolläbilaskva barjäärina, mis eraldab ema ja loote. Raseduse ajal reguleerib platsenta ainete, gaaside, endogeensete ja eksogeensete molekulide, sealhulgas ravimite vahetust loote-ema kompleksis. Mitmed uuringud on näidanud, et platsenta täidab morfoloogiliselt ja funktsionaalselt ravimite transpordi eest vastutava organi rolli.

Inimese platsenta koosneb loote kudedest (kooriooniplaat ja koorioni villus) ja ema kudedest (decidua). Detsiduaalsed vaheseinad jagavad elundi 20-40 iduleheks, mis esindavad platsenta struktuurseid ja funktsionaalseid vaskulaarseid üksusi. Iga iduleht on kujutatud villipuuga, mis koosneb loote kapillaaride endoteelist, villoosest stroomast ja trofoblastikihist, mida pestakse ema verega ja mis paikneb villidevahelises ruumis. Iga villipuu väliskihi moodustab mitmetuumaline süntsütiotrofoblast. Polariseeritud süntsütiotrofoblastne kiht, mis koosneb ema vere poole suunatud mikrovilloossest apikaalsest membraanist ja basaalmembraanist (loote) on hemoplatsentaarne barjäär enamiku ainete transplatsentaalseks transpordiks. Raseduse kestel platsentaarbarjääri paksus väheneb peamiselt tsütotrofoblastse kihi kadumise tõttu.

Platsenta transpordifunktsiooni määrab peamiselt platsenta membraan (hematoplatsentaarne barjäär), mille paksus on umbes 0,025 mm, mis eraldab ema ja loote vereringesüsteemi.

Füsioloogilistes ja patoloogilistes tingimustes tuleks platsenta metabolismi pidada platsentamembraani aktiivseks funktsiooniks, mis selektiivselt kontrollib ksenobiootikumide läbimist läbi selle. Ravimite ülekandumist läbi platsenta võib käsitleda samade mehhanismide uurimise põhjal, mis toimivad siis, kui ained läbivad teisi bioloogilisi membraane.

On hästi teada, et platsenta täidab mitmeid funktsioone, nagu gaasivahetus, toitainete ja jääkainete transport, hormoonide tootmine, toimides edukaks raseduseks eluliselt olulise aktiivse endokriinse organina. Toitained, nagu glükoos, aminohapped ja vitamiinid, läbivad platsentat spetsiaalsete transpordimehhanismide abil, mis esinevad süntsütiotrofoblasti ema apikaalses membraanis ja loote basaalmembraanis. Samal ajal toimub spetsiaalsete transpordimehhanismide kaudu ka ainevahetusproduktide eemaldamine loote vereringest platsenta kaudu ema vereringesse. Mõnede ühendite puhul toimib platsenta arenevale lootele kaitsva barjäärina, takistades hävitava

isiklikud ksenobiootikumid emalt lootele, samas kui teiste jaoks hõlbustab see nende liikumist nii lootele kui ka looteruumist.

Ravimite transport platsentas

Tuntud on viis transplatsentaarse vahetuse mehhanismi: passiivne difusioon, hõlbustatud difusioon, aktiivne transport, fagotsütoos ja pinotsütoos. Kaks viimast mehhanismi on suhteliselt olulised ravimite transportimisel platsentas ja enamikule ravimitest on iseloomulik aktiivne transport.

Passiivne difusioon on platsenta metabolismi domineeriv vorm, mis võimaldab molekulil kontsentratsioonigradienti allapoole liikuda. Passiivse difusiooni teel läbi platsenta liikuvate ravimite hulk igal ajaperioodil sõltub nende kontsentratsioonist ema vereplasmas, selle füüsikalis-keemilistest omadustest ja platsenta omadustest, mis määravad, kui kiiresti see juhtub.

Selle leviku protsessi reguleerib Ficki seadus.

Passiivse difusiooni kiirus on aga nii madal, et tasakaalukontsentratsiooni ema ja loote veres ei ole kindlaks tehtud.

Platsenta on nagu kahekihiline lipiidmembraan ja seega võib ainult ravimite valkudega mitteseotud fraktsioon vabalt läbi selle difundeeruda.

Passiivne difusioon on iseloomulik madala molekulmassiga rasvlahustuvatele, valdavalt mitteioniseerunud ravimite vormidele. Lipofiilsed ained ioniseerimata kujul difundeeruvad kergesti läbi platsenta loote verre (antipüriin, tiopentaal). Platsenta kaudu levimise kiirus sõltub peamiselt konkreetse ravimi ioniseerimata vormi kontsentratsioonist antud vere pH juures, lipiidide lahustuvusest ja molekulide suurusest. Ravimid, mille molekulmass on > 500 Da, ei läbi sageli platsentat täielikult ja ravimid, mille molekulmass on > 1000 Da, tungivad läbi platsenta membraani aeglasemalt. Näiteks erinevad hepariinid (3000-15000 Da) ei läbi platsentat oma suhteliselt suure molekulmassi tõttu. Enamiku ravimite molekulmass on > 500 Da, seega piirab molekuli suurus harva nende läbipääsu platsentast.

Põhimõtteliselt on ravimid nõrgad happed või alused ja nende dissotsiatsioon toimub füsioloogilise pH väärtuse juures. Ioniseeritud kujul ei suuda ravimid tavaliselt lipiidmembraani läbida.

platsenta. Loote ja ema pH erinevus mõjutab vaba ravimifraktsiooni loote/ema kontsentratsiooni suhet. Normaalsetes tingimustes on loote pH praktiliselt sama, mis ema pH. Kuid teatud tingimustel võib loote pH väärtus oluliselt langeda, mille tulemusena väheneb oluliste ravimite transport lootelt emakambrisse. Näiteks lidokaiini platsenta ülekandumise uuring MEGX testiga näitas, et lidokaiini kontsentratsioon lootel on sünnituse ajal suurem kui emal, mis võib lootel või vastsündinul põhjustada soovimatuid toimeid.

Hõlbustatud difusioon

See transpordimehhanism on tüüpiline vähesele hulgale ravimitele. Sageli täiendab see mehhanism passiivset difusiooni, näiteks gantsükloviiri puhul. Hõlbustatud difusioon ei vaja energiat, vaja on kandjat. Tavaliselt on seda tüüpi ravimite platsenta kaudu transportimise tulemuseks sama kontsentratsioon ema ja loote vereplasmas. See transpordimehhanism on spetsiifiline peamiselt endogeensete substraatide (nt hormoonid, nukleiinhapped) suhtes.

Aktiivne ravimite transport

Ravimi aktiivse transpordi läbi platsentamembraani molekulaarsete mehhanismide uuringud on näidanud selle olulist rolli hematoplatsentaarse barjääri toimimises. See transpordimehhanism on tüüpiline ravimitele, millel on endogeensete ainetega struktuurne sarnasus. Sel juhul ei sõltu ainete ülekandeprotsess mitte ainult molekuli suurusest, vaid ka kandeaine (transporteri) olemasolust.

Ravimite aktiivne transport läbi platsentamembraani valgupumba abil nõuab energiakulu, mis on tavaliselt tingitud ATP hüdrolüüsist või Na+, Cl+ või H+ katioonide transmembraanse elektrokeemilise gradiendi energiast. Kõik aktiivsed transporterid võivad töötada kontsentratsioonigradienti vastu, kuid võivad muutuda ka neutraalseks.

Aktiivsed ravimitransporterid asuvad kas apikaalse membraani emaosas või basaalmembraani looteosas, kus nad transpordivad ravimeid süntsütiotrofoblasti.

või sellest. Platsenta sisaldab transportereid, mis hõlbustavad substraatide liikumist platsentast ema või loote vereringesse ("pumpamist"), samuti transportereid, mis viivad substraate nii platsentasse kui sealt välja, hõlbustades seega ksenobiootikumide transportimist platsentasse ja sealt välja. loote- ja emakambrisse (“ sissepumpamine”/ “väljapumpamine”). On olemas transportereid, mis reguleerivad substraatide liikumist ainult platsentasse ("pumpamine").

Viimase kümnendi teadusuuringud on pühendatud "pumpavate transporterite" kui platsenta "barjääri" "aktiivse komponendi" uurimisele. See on P-glükoproteiin (MDR1), mitme ravimiresistentsusega seotud valkude (MRP) ja rinnavähi resistentsuse valgu (BCRP) perekond. Nende transporterite avastamine on andnud olulise panuse transplatsentaarse farmakokineetika mõistmisse.

P-glükoproteiin, transmembraanne glükoproteiin, mida kodeerib inimese multiravimiresistentsuse geen MDR1, ekspresseerub süntsütiotrofoblasti platsentamembraani emapoolsel küljel, kus see eemaldab ATP hüdrolüüsi energia tõttu aktiivselt lipofiilseid ravimeid loote kambrist. Glükoproteiin-P on "heitgaaside" transporter, eemaldades aktiivselt ksenobiootikumid loote vereringest ema vereringesse. P-glükoproteiinil on lai substraadispekter, mis transpordib lipofiilseid ravimeid, neutraalseid ja laetud katioone, mis kuuluvad erinevatesse farmakoloogilistesse rühmadesse, sealhulgas antimikroobsed ained (nt rifampitsiin), viirusevastased ained (nt HIV proteaasi inhibiitorid), antiarütmikumid (nt verapamiil), kasvajavastased ravimid. (näiteks vinkristiin).

Süntsütiotrofoblasti apikaalses membraanis ilmnes kolme tüüpi MRP perekonna (MRP1-MRP3) "pumpavate" transporterite ekspressioon, mis osalevad paljude ravimite substraatide ja nende metaboliitide transpordis: metatreksaat, vinkristiin, vinblastiin, tsisplatiin, viirusevastased ravimid, paratsetamool, ampitsilliin jne.

Platsentas leiti ATP-sõltuva rinnavähi resistentsuse valgu (BCRP) kõrge aktiivsus. BCRP võib aktiveerida kasvajarakkude resistentsust vähivastaste ravimite suhtes – topotekaani, doksorubitsiini jt. On näidatud, et

platsenta BCRP piirab topotekaani ja mitoksantrooni transporti tiinetel hiirtel lootele.

Orgaanilised katioonide transportijad

Kaks orgaanilist katiooni transporterit (OCT2) ekspresseeritakse süntsütiotrofoblasti basaalmembraanis ja transpordivad karnitiini läbi platsenta ema vereringest loote vereringesse. Platsenta OCT2 ravimisubstraadid on metamfetamiin, kinidiin, verapamiil ja pürilamiin, mis konkureerivad karnitiiniga, piirates selle läbimist platsenta.

Monokarboksülaadi ja dikarboksülaadi transportijad

Monokarboksülaadid (laktaat) ja dikarboksülaadid (suktsinaat) transporditakse aktiivselt platsentas. Monokarboksülaadi transportereid (MCT) ja dikarboksülaadi transportereid (NaDC3) ekspresseeritakse platsenta apikaalses membraanis, kuigi MCT-d võivad esineda ka basaalmembraanis. Neid transportereid juhib elektrokeemiline gradient; MCT-sid seostatakse H + katioonide liikumisega ja NaDC3 - Na + -ga. Teavet nende transportijate võimaliku mõju kohta ravimite liikumisele läbi platsenta on aga vähe. Seega kasutatakse valproehapet, vaatamata ilmsele toksilise toime ohule lootele, sealhulgas teratogeensusele, sageli epilepsia raviks raseduse ajal. Füsioloogilise pH juures läbib valproehape kergesti platsentat ja loote/ema kontsentratsiooni suhe on 1,71. Mitmete autorite uuringud on näidanud, et valproehappel on aktiivne transpordisüsteem. See transpordisüsteem sisaldab H + katioonidega seotud MCT-sid, mis põhjustavad valproehappe kiiret liikumist lootele läbi platsentaarbarjääri. Kuigi valproehape konkureerib laktaadiga, selgus, et see on ka substraadiks teistele transportijatele.

Seega toimib platsenta mõnede ühendite puhul areneva loote kaitsebarjäärina, takistades erinevate ksenobiootikumide sattumist emalt lootele, samas kui teiste puhul hõlbustab see nende liikumist nii lootele kui ka lootekambrist, toimides üldiselt Ksenobiootiline võõrutussüsteem. Juhtroll aktiivse trans-

Ravimi porti läbi platsenta viivad läbi substraadi spetsiifilisusega platsenta transporterid.

Praegu on üsna ilmne, et erinevate transportijate rolli mõistmine ja teadmine ravimite liikumisel läbi hematoplatsentaarse barjääri on vajalik selleks, et hinnata ravimite tõenäolist mõju lootele, samuti hinnata ravimi kasulikkuse ja riski suhet. emale ja lootele raseduse ajal farmakoteraapia ajal.

Ravimi transport läbi hematoentsefaalbarjääri

Hematooftalmiline barjäär (HOB) täidab barjäärifunktsiooni silma läbipaistva keskkonna suhtes, reguleerib silmasisese vedeliku koostist, tagades läätse ja sarvkesta selektiivse varustamise oluliste toitainetega. Kliinilised uuringud on võimaldanud selgitada ja laiendada hemato-oftalmilise barjääri, sealhulgas histagemaatilise süsteemi mõistet, samuti rääkida selle kolme komponendi olemasolust normaalsetes ja patoloogilistes tingimustes: iridocilaarne, koorioretinaalne ja papillaarne (tabel 4.1.).

Tabel 4.1. Hematooftalmiline barjäär

Silma verekapillaarid ei puutu otseselt kokku rakkude ja kudedega. Kogu kompleksne vahetus kapillaaride ja rakkude vahel toimub interstitsiaalse vedeliku kaudu ultrastruktuuri tasemel ja seda iseloomustatakse kapillaaride, rakkude ja membraanide läbilaskvuse mehhanismidena.

Ravimi transport läbi vere-munandite barjääri

Spermatogeensete rakkude normaalne talitlus on võimalik ainult spetsiaalse, selektiivselt läbilaskva hematotestikulaarse barjääri (HTB) olemasolu tõttu vere ja seemnetuubulite sisu vahel. GTB moodustavad kapillaaride endoteliotsüüdid, basaalmembraan, seemnetorukesed, Sertoli rakkude tsütoplasma, interstitsiaalne kude ja munandite albuginea. Lipofiilsed ravimid tungivad läbi GTB difusiooni teel. Hiljutised uuringud on näidanud, et ravimite ja ühendite tungimist munanditesse saab läbi viia aktiivse transpordiga glükoproteiin-P (MDR1), mitme ravimiresistentsusega (MRP1, MRP2) seotud valkude perekonna transportijate, rinnanäärme osalusel. vähiresistentsuse valk BCRP (ABCG2), millel on paljude ravimite, sealhulgas toksiliste ravimite (nt tsüklosporiin) väljavool munandites.

Ravimite tungimine läbi munasarjade hematofollikulaarse barjääri

Munasarja hematofollikulaarse barjääri (HFB) peamised struktuurielemendid on küpseva folliikuli teekarakud, follikulaarne epiteel ja selle basaalmembraan, mis määravad selle läbilaskvuse ja selektiivsed omadused hüdrofiilsete ühendite suhtes. Praegu on glükoproteiin-P (MDR1) roll näidatud HFB aktiivse komponendina, millel on kaitsev roll, takistades ksenobiootikumide tungimist munasarjadesse.

Kirjandus

Alyautdin R.N. Ajusse suunatud ravimite transpordi molekulaarsed mehhanismid // RMJ. - 2001. - ? 2. - S. 3-7.

Bradbury M. Hematoentsefaalbarjääri kontseptsioon: Per. inglise keelest. - M., 1983.

Goryukhina O.A. Katioonsete valkude kasutamise väljavaated ravimite transportimiseks ajukoesse. Füsioloogiliste funktsioonide biokeemilised ja molekulaarbioloogilised alused: laup. Art. - Peterburi, 2004. - S. 168-175.

Kukes V.G. Ravimi metabolism: kliinilised ja farmakoloogilised aspektid. - M., 2004.

Morozov V.I., Jakovlev A.A. Hematooftalmiline barjäär (kliinilised ja funktsionaalsed vaatlused) // Oftalmosirurgia. -

2002. - ? 2. - S. 45-49.

Stern L. Histohemaatiliste barjääride füsioloogia ja patoloogia. -

Allen J.D., Brinkhuis R.F., Wijnholds J. et al. Hiire Bcrp1/Mxr/Abcp geen: amplifikatsioon ja üleekspressioon rakuliinides, mis on valitud resistentsuse järgi topotekaani, mitoksantrooni või doksorubitsiini suhtes // Cancer Res. - 1999. - Vol. 59.-

Allikmets R, Schriml L.M., Hutchinson A. et al. Inimese platsentaspetsiifiline ATP-siduva kasseti geen (ABCP) kromosoomil 4q22, mis on seotud mitme ravimiresistentsusega // Cancer Res. - 1998. - Vol. 58. - Lk 5337-53379.

Balkovetz D.F., Leibach F.H., Mahesh V.B. et al. Prootoni gradient on laktaadi ülesmäge transportimise liikumapanev jõud inimese platsenta pintsliga piirnevates membraanides // J. Biol. Chem. - 1988. - Vol. 263.-

Must K.L. Hematoentsefaalbarjääri biokeemiline avamine // Adv. narkootikumide tarnimine. Rev. - 1995. - Vol. 15. - Lk 37-52.

Blamire A.M., Anthony D.C., Rajagopalan B. jt. Interleukiin-1-beeta-indutseeritud muutused hematoentsefaalbarjääri läbilaskvuses, näivas difusioonikoefitsiendis ja ajuvere mahus roti ajus: magnetresonantsuuring // J. Neurosci. - 2000. - Vol. kakskümmend. - ? 21. - Lk 8153-8159.

Borst P., Evers R, Kool M. jt. Mitme ravimiresistentsuse valgu perekond //

biochim. Biophys. acta. - 1999. - Vol. 1461. -? 2. - Lk 347-357.

Cavalli R. de, Lanchote V. L., Duarte G. jt. Lidokaiini ja selle metaboliidi farmakokineetika ja transplatsentaarne ülekanne rasedate naiste perineaalseks valuvaigistiks // Eur. J. Clin. Pharmacol. - 2004. - Vol. - 60. -? kaheksa. -

Collier A.C., Tingle M.D., Keelan J.A. et al. Väga tundlik fluorestseeruv mikroplaadi meetod UDP-glükuronosüültransferaasi aktiivsuse määramiseks kudedes ja platsenta rakuliinides // Drug Metab. Dispos. - 2000. -

Vol. 28. - Lk 1184-1186.

de Boer A.G., Gaillard P.J. Hematoentsefaalbarjäär ja ravimite transport ajju // STP Pharmasci. - 2002. - Vol. 12. - ? 4. - Lk 229-234.

Evseenko D., Paxton J W.W., Keelan J.A. Aktiivne transport läbi inimese platsenta: mõju ravimi efektiivsusele ja toksilisusele // Exp. Arvamus. Metab. Toksikool. - 2006. - Vol. 2. -? 1. - Lk 51-69.

Forestier F, Daffos F, Capella-Pavlovsky M. Madala molekulmassiga hepariin (PK 10169) ei läbida raseduse teise trimestri uuringus platsentat otsese loote vereproovi võtmise teel ultraheliga // Tromb.

Res. - 1984. - Vol. 34. - Lk 557-560.

Forestier F., Daffos F., Rainaut M. jt. Madala molekulmassiga hepariin (CY 216) ei läbi raseduse kolmandal trimestril platsentat // Tromb. hemost. - 1987. - Vol. 57. - lk 234.

Fromm M.F. P-glükoproteiini tähtsus vere-koebarjääridele //

Ganapathy V., Ganapathy M.E., Tirupathi C. et al. Naatriumiga juhitav, kõrge afiinsusega suktsinaadi transportimine ülesmäge inimese platsenta pintsliga membraani vesiikulites // Biochem. J. - 1988. - Kd. 249.-lk 179-184

Ganapathy V., Prasad P.D., Ganapathy M.E. et al. Platsenta transporterid, mis on olulised ravimite jaotumiseks ema ja loote liideses // J. Pharmacol.

Exp. Seal. - 2000. - Vol. 294. - Lk 413-420.

Garland M. Ravimite ülekandmise farmakoloogia läbi platsenta // Obstet. Gynecol. Clin. Põhja-Am. - 1998. - Vol. 25. - Lk 21-42.

Goodwin J.T., Clark D.E. In silico ennustused hematoentsefaalbarjääri läbitungimise kohta: kaalutlused "Pea meeles" // J. Pharmacol. Exp.Ther. - 2005. - Vol. 315. - Lk 477-483.

Gordon-Cardo C., O "Brien J.P., Casals D. et al. Mitme ravimiresistentsuse geeni (P-glükoproteiin) ekspresseerivad endoteelirakud hematoentsefaalbarjääri kohtades // Proc. Natl Acad. sci. - 1989. - Vol. 86.-lk 695-698.

Graff C.L., Pollack G.M. Ravimite transport hematoentsefaalbarjääris ja

koroidpõimik // Curr. ravimi metab. - 2004. - Vol. 5. - Lk 95-108.

Hahn T., Desoye G. Glükoosi transpordisüsteemide ontogenees platsentas ja selle eellaskudedes // Varajane rasedus. - 1996. - Vol. 2.-

Heidrun P., Maren F., Wolfgang L. Mitme ravimiresistentsuse valk MRP2 aitab kaasa hematoentsefaalbarjääri funktsioonile ja piirab epilepsiavastast toimet

ravimi aktiivsus // J. Pharmacol. Exp. Seal. - 2003. - Vol. 306. -? 1. - Lk 124-131.

Henderson G.I., Hu Z.Q., Yang Y. et al. Gantsükloviiri ülekanne inimese platsenta kaudu ja selle mõju roti looterakkudele // Am. J. Med. sci. - 1993. -

Vol. 306.-lk 151-156.

Hill M.D., Abramson F.P. Plasmavalkudega seondumise olulisus ravimite loote/ema jaotumisel püsiseisundis // Clin. Farmakokinett. -

1988. - Vol. 14. - Lk 156-170.

Ho R.H., Kim R.B. Transporterid ja ravimteraapia: mõju ravimite dispositsioonile ja haigustele // Clin. Pharmacol. Seal. - 2005. - Vol. 78.-

Jonker J.W., Smit J.W., Brinkhuis R.F. et al. Rinnavähi resistentsuse valgu roll topotekaani biosaadavuses ja loote tungimises // J. Natl

Cancer Inst. - 2000. - Vol. 92. - Lk 1651-1656.

Konig J., Nies A.T., Cui Y. et al. Mitme ravimiresistentsuse valgu (MRP) perekonna konjugeeritud ekspordipumbad: lokaliseerimine, substraadi spetsiifilisus ja MRP2-vahendatud ravimiresistentsus // Biochim. Biophys. acta. - 1999. -

Vol. 1461. - Lk 377-394.

Lagrange P., Romero I.A., Minn A. et al. Vabade radikaalide poolt põhjustatud transendoteliaalse läbilaskvuse muutused in vitro hematoentsefaalbarjääri mudel// Free Radic. Biol. Med. - 1999. - Vol. 27,? 5-6. -

Lee G., Dallas S., Hong M. et al. Narkootikumide transportijad kesknärvisüsteemis: ajubarjäärid ja aju parenhüümi kaalutlused // Pharmacol. Rev. - 2001. - Vol. 53. -? 4. - Lk 569-596.

Lehr C.-M. Narkootikumide transport bioloogilistel barjääridel: mehhanismid, mudelid ja meetodid ravimite kohaletoimetamise edendamisel // Pharm. Res. - 2003. - Vol. 54.-

Leslie E.M., Deeley R.G., Cole S.P. Mitme ravimiresistentsuse valgud: P-glükoproteiini, MRP1, MRP2 ja BCRP (ABCG2) roll kudede kaitses // Toxicol. Rakendus Pharmacol. - 2005, 1. mai. - Vol. 204.-? 3.-

Malone F.D., D "Alton M.E. Ravimid raseduse ajal: krambivastased ained // Semin. Perinatool. - 1997. - Vol. 21. - Lk 114-123.

Mattila K.M., Pirtila T., Blennow K. jt. Muutunud vere-aju barjääri funktsioon Alzheimeri tõve korral? // Acta Neurol. Scand. - 1994. -

Vol. 89. - Lk 192-198.

Muller N. Psühhoneuroimmunoloogia: mõju psühhiaatriliste häirete uimastiravile // KNS-ravimid. - 1995. - Vol. neli. - ? 2. - Lk 125-140.

Nakamura H, Usigome F, Koyabu N. et al. Valproehappe prootoni gradiendist sõltuv transport inimese platsenta pintsliga membraani vesiikulites //

Pharm. Res. - 2002. - Vol. 19. - Lk 154-161.

Nau H. Platsenta ravimite ülekannet reguleerivad füüsikalis-keemilised ja struktuursed omadused // Loote platsenta ravimiülekanne / Eds R.A. Polin, W.W. Rebane // Loote ja vastsündinu füsioloogia / Eds R.A. Polin, W.W. rebane. - Philadelphia: W.B. Saunders, 1992. - Lk 130-141.

Pacifici G.M., Nottoli R. Manustatud ravimite platsenta ülekandmine

ema // Clin. Farmakokinett. - 1995. - Vol. 28.-? 3. - Lk 235-269.

Pardridge W.M. Vere-aju barjääri kohaletoimetamine // Drug Discov. täna. - 2007 jaanuar. - Vol. 12. - ? 1-2. - Lk 54-61.

Pardridge W.M., Log B.B. PS-tooted ja ravimiaju in silico mudelid

penetratsioon // Drug Discov. täna. - 2004. - Vol. 9. - Lk 392-393.

Pienimaki P., Lampela E., Hakkola J. jt. Okskarbasepiini ja karbamasepiini farmakokineetika inimese platsentas // Epilepsia. - 1997. -

Vol. 38. - Lk 309-316.

Sadeque A.J., Wandel C., He H. et al. Suurenenud ravimite kohaletoimetamine ajju P-glükoproteiini inhibeerimise tõttu // Clin. Pharmacol. Seal. - 2000. - Vol. 68.-

Schinkel A.H., Borst P. P-glükoproteiinide vahendatud multiravimiresistentsus // Semin. Cancer biol. - 1991. - Vol. 2. - Lk 213-226.

Schinkel A.H., Wagenaar E., Mol C.A. et al. P-glükoproteiin hiirte hematoentsefaalbarjääris mõjutab paljude kaevamiste aju tungimist ja farmakoloogilist aktiivsust // J. Clin. Investeeri. - 1996. - Vol. 97. - Lk 2517-2524.

Seemned A.E. Platsenta siirdamine // Emakasisene areng / Toim. A.C. Barnes. - Philadelphia: Lea ja Febiger, 1968. - Lk 103-128.

Smith C.H., Moe A.J., Ganapathy V. Toitainete transporditeed läbi platsenta epiteeli // Annu. Rev. Nutr. - 1992. - Vol. 12. -

Syme M.R., Paxton J.W., Keelan J.A. Ravimi ülekandmine ja metabolism inimese platsenta poolt // Clin. Farmakokinett. - 2004. - Vol. 43.-? 8.-P 487-514.

Tamai I., Tsuji A. Transporteri poolt vahendatud ravimite läbitungimine

hematoentsefaalbarjäär // J. Pharm. sci. - 2000. - Vol. 89.-? 11. - Lk 1371-1388.

Takeda M., Khamdang S., Narikawa S. et al. Metotreksaadi transpordi ja selle ravimite koostoimete iseloomustus inimese orgaaniliste anioonide transportijatega //

J Pharmacol. Exp. Seal. - 2002. - Vol. 302.-lk 666-671.

Thiebaut F., Tsuruo T., Yamada H. jt. Mitme ravimiresistentsuse geeniprodukti rakuline lokaliseerimine normaalsetes inimkudedes // Proc. Natl Acad. sci. USA- 1987. - Vol. 84. - Lk 7735-7738.

Thuerauf N., Fromm M.F. Transporter P-glükoproteiini roll tsentraalselt toimivate ravimite dispositsioonis ja toimes ning kesknärvisüsteemi haiguste patogeneesis // Eur. Arch. Psühhiaatria kliin. neurosci. - 2006, august. -

Vol. 256.-? 5. - Lk 281-286.

Tsao N., Hsu H.P., Wu C.M. et al. Kasvajanekroosifaktor-alfa põhjustab sepsise ajal hematoentsefaalbarjääri läbilaskvuse suurenemist // J. Med. mikrobiol. - 2001. - Vol. viiskümmend. - ? 9. - Lk 812-821.

Tsuji A. Hematoentsefaalbarjäär ja ravimite kohaletoimetamine kesknärvisüsteemi // -

Tunkela A., Scheld W.M. Bakteriaalse meningiidi patogenees ja patofüsioloogia // Ann. Rev. Med. - 1993. - Vol. 44. - Lk 103-120.

Ushigome F., Takanaga H., Matsuo H. jt. Valproehappe omastamise mehhanism inimese platsenta kooriokartsinoomi rakuliinis (BeWo) // Eur. J.

Pharmacol. - 2001. - Vol. 417. - Lk 169-176.

Utoguchi N., Audus K.L. Valproehappe kandja-vahendatud transport inimese trofoblasti rakuliinis BeWo rakkudes // Int. J Pharm. - 2000. - Vol. 195. - Lk 115-124.

Ward R.M. Loote ravimteraapia // J. Clin. Pharmacol. - 1993. -

Vol. 33. - Lk 780-789.

Williams K.S., Hickey W.F. Hulgiskleroosi immunoloogia // Clin. neurosci. - 1994. - Vol. 2. - Lk 229-245.

Wu X., Huang W., Prasad P.D. Orgaanilise katiooni transporteri 2 (OCT2), orgaanilise katiooni/karnitiini transportija funktsionaalsed omadused ja kudede jaotusmuster // J. Pharmacol. Exp. Seal. - 1999. - Vol. 290.-

Zhang Y., Han H., Elmquist W.F. Erinevate mitme ravimiresistentsusega seotud valgu (MRP) homoloogide ekspressioon aju mikroveresoonte endoteelis