Analiza patogene crijevne mikroflore. Uslovno patogeni i patogeni mikroorganizmi. Analiza fecesa kod djece

Odredite stanje crijevne mikroflore kod djeteta. Zašto lekar može da prepiše takvu studiju i šta roditelji treba da znaju o tome?

Indikacije

Takva studija je posebno važna za dojenčad, kod kojih postoji povećan rizik od razvoja crijevne patologije. Također se savjetuje da se pravi djeci koja često obolijevaju, na primjer, od čestih SARS-a.

Najčešće se analiza stolice radi na crijevne smetnje.

Vrste

1. Koprološki pregled fecesa. On se propisuje prvi u slučaju sumnje na probleme sa crijevima. Analiza će pokazati kako se hrana probavlja u crijevima i otkriti upalni proces.
2. Biohemijska analiza fecesa. Pomaže u identifikaciji fermentopatije.
3. Ekspresno sejanje fekalija. Ovo je brza metoda istraživanja, tokom koje se u procentima utvrđuje normalna mikroflora.
4. Sjetva izmeta za disbakteriozu. Takva studija nam omogućuje procjenu koncentracije i broja bakterija koje su predstavnici normalne mikroflore, kao i uvjetno patogene flore. Izmet djeteta se sije na hranljivi medij. U roku od nekoliko dana rastu kolonije bakterija koje se pregledavaju pod mikroskopom i broje. Obrazac označava broj mikroorganizama po 1 gramu fecesa, označavajući broj bakterija koje formiraju kolonije (CFU). Ako se otkrije patogena flora, dodatno se utvrđuje osjetljivost/rezistencija na antibiotike.

Testovi stolice imaju za cilj utvrđivanje broja različitih bakterija u crijevima i njihovog omjera.

Gdje se možete testirati?

Testovi na disbakteriozu mogu se raditi i u javnim klinikama iu privatnim laboratorijama. Istovremeno, roditelji treba da imaju na umu da javne zdravstvene ustanove imaju svoje radno vrijeme i ne provode istraživanja vikendom.

Da li je potrebna posebna obuka?

Ako je analiza dodijeljena dojenčetu koje je počelo da se hrani, tri dana prije studije isključeno je uvođenje novih proizvoda. Također, u roku od nekoliko dana prije porođaja, trebate prestati davati bebi bilo kakve lijekove, uključujući aktivni ugalj i lijekove protiv grčeva.

Također je nemoguće napraviti klistir, koristiti rektalne supozitorije i dati djetetu laksative prije testiranja na disbakteriozu.

Kako sakupljati izmet?

Uzorak stolice treba uzeti od djeteta koje je već uriniralo kako bi se spriječilo da urin uđe u posudu za testiranje. Također, prije sakupljanja materijala, dijete se mora oprati.

Za studiju će vam trebati oko 10 ml bebinog izmeta, koji se stavlja u sterilnu posudu. Najbolje je uzeti čestice stolice iz različitih dijelova bebine stolice. Ukoliko u izmetu ima bilo kakvih nečistoća, oni se takođe stavljaju u posudu sa izmetom na analizu.

Prije uzimanja fecesa, potrebno je oprati genitalije bebe

Koliko i gdje možete čuvati fekalije?

Izmet se obično sakuplja ujutro i uzima na analizu u roku od 1-3 sata nakon pražnjenja crijeva. Ako svježi jutarnji izmet nije odmah dostupan, spremnik za uzorke za analizu može se čuvati u hladnjaku do 6 sati. Čuvanje stolice na sobnoj temperaturi će iskriviti rezultate studije.

Norme vrijednosti

Dešifrovanje

Najviše u uzorku stolice zdravog djeteta treba da budu bifidobakterije. Obično čine oko 95% ukupne mikroflore. Upravo te bakterije obavljaju sve glavne funkcije crijevne mikrobne flore - pomoć u apsorpciji minerala i vitamina, sintezu vitamina, stimulaciju crijevne pokretljivosti, neutralizaciju toksina i druge.

Ništa manje važni nisu ni laktobacili, koji obezbeđuju i rad creva, proizvode laktazu i štite dete od alergena. Oni u zdravom crijevu sadrže oko 6% svih mikroorganizama. Normalna mikroflora se također sastoji od Escherichia coli (Escherichia), koji pomažu u uklanjanju kisika i otpornosti na patogenu floru.

Takav predstavnik crijevne flore kao što su bakteroidi pojavljuju se u izmetu dojenčadi starijih od 6 mjeseci. Ove bakterije pomažu u razgradnji masti. Također u zdravom debelom crijevu beba normalno se nalaze peptostreptokoki i enterokoki.

Normalno, patogene enterobakterije, poput salmonele ili šigele, ne otkrivaju se u fecesu djece. Njihovo otkrivanje ne ukazuje na disbakteriozu, već na ozbiljne bolesti crijeva. Također u fecesu djeteta treba biti odsutan Staphylococcus aureus i hemolitička ešerihija.

Prisustvo patogenih bakterija u fecesu djeteta ukazuje na prisustvo bolesti kod djeteta

Razlozi odstupanja

• Ako je smanjen broj bifidobakterija i laktobacila, a povećani pokazatelji oportunističke flore, to su znaci disbakterioze. Također, ova slika je tipična za crijevne infekcije i patologije enzima.
• Na sastav mikrobne flore crijeva utiče i pothranjenost djeteta. Prekomjerna konzumacija masti promijenit će pokazatelj bakteroida, a višak ugljikohidratne hrane će utjecati na broj peptostreptokoka i enterokoka.
• Smanjenje broja tipičnih Escherichia coli često se javlja kod helmintičkih invazija. Nepatogena ešerihija također postaje manje s kršenjem hranjenja djeteta, crijevnim infekcijama i antibiotskom terapijom.
• Povećanje broja Escherichia coli, kod kojih je aktivnost smanjena, ukazuje na početnu fazu disbakterioze.
• Povećanje broja gljivica Candida karakteristično je za kandidijazu.

> Sjetva na patogenu crijevnu floru, utvrđivanje njene osjetljivosti na antimikrobna sredstva i bakteriofage

Ove informacije se ne mogu koristiti za samoliječenje!
Obavezno se posavjetujte sa specijalistom!

Ljudsko crijevo je normalno naseljeno velikim brojem mikroorganizama. To su različiti predstavnici laktobacila, bakteroida, enterobakterija, peptostreptokoka itd. Ove bakterije čine tzv. crijevnu mikrofloru, učestvuju u procesu probave, podržavaju lokalni imunitet, sprječavaju razvoj infekcija. Crijevne infekcije nastaju kada patogeni mikroorganizmi (koji izazivaju bolest) uđu u lumen crijeva i razmnožavaju se. Najčešći uzročnici crijevnih infekcija su Shigella i Salmonella. Vibrio cholerae, klostridija (uzrokujući botulizam itd.), Yersinia i Staphylococcus aureus otkrivaju se nešto rjeđe. Sjetvom na patogenu crijevnu floru utvrđuje se uzrok crijevne infekcije, a određivanje osjetljivosti mikroorganizama na antibiotike i bakteriofage pomaže u odabiru prave terapije.

Koje su manifestacije akutnih crijevnih infekcija?

Simptomi i tegobe donekle variraju ovisno o uzročniku infekcije. Kada se zarazi šigelom, početak bolesti je akutan. Pojavljuju se grčeviti bolovi u trbuhu, temperatura raste. Karakterizira ga česti, bolni nagon za nuždu, koji nije praćen odvajanjem fecesa, ili je izmet odvojen u malim količinama s primjesom sluzi i krvi. Salmonelozu karakterizira istovremena pojava povraćanja i proljeva. Stolica u isto vrijeme može biti i žućkasta i zelenkasta. Bol i kruljenje u abdomenu su izraženiji desno od pupka. Sve crijevne infekcije, praćene proljevom ili povraćanjem, dovode do intoksikacije i dehidracije. To se manifestira suhoćom kože i sluznica, u teškim slučajevima - smanjenjem tjelesne težine.

Kada se propisuje setva na patogenu crijevnu floru?

Studiju propisuje infektolog, terapeut ili pedijatar u slučaju sumnje na akutnu crijevnu infekciju. Sjetva s određivanjem osjetljivosti na antibiotike i bakteriofage u ovom slučaju pomaže u identifikaciji uzročnika mikroorganizma, provođenju diferencijalne dijagnoze s drugim bolestima koje imaju slične simptome i odabiru prave terapije. Na kraju tretmana potrebno je ponovno uzorkovanje materijala za setvu kako bi se kontrolisalo uništavanje patogena.

Analiza se vrši prilikom izdavanja ličnih zdravstvenih knjižica za radnike u javnom sektoru (ishrana, zdravstvena zaštita, obrazovanje i dr.). Ako je otkriven bakterionosač, provodi se terapija usmjerena na uništavanje mikroorganizma, nakon čega treba ponoviti analizu.

Kako se provodi studija i kako se pravilno pripremiti za nju?

Studija se izvodi bez prethodne pripreme. Materijal za bakteriološku kulturu je svježi izmet. Unosi se lopaticom u dobro zatvorenu sterilnu posudu. Defekcija se prije toga vrši u čistu posudu ili lonac. Prilikom sakupljanja materijala ne smije biti kontaminiran urinom i izlučevinama iz genitalnog trakta. Ako u izmetu ima sluzi i gnoja, preporučljivo je odabrati upravo takve fragmente, jer je koncentracija patogena u njima mnogo veća.

Materijal se može uzeti iz rektuma sterilnim brisom. Nakon uvođenja tampona u anus, izvode se rotacijski pokreti u oba smjera, a dobiveni materijal se prenosi u sterilnu posudu.

Kako se tumače rezultati?

Normalno, prilikom sjetve ne bi trebalo biti rasta patogenih mikroorganizama. Ako se otkrije rast, možemo govoriti o akutnoj crijevnoj infekciji ili o prijenosu bakterija. Određivanje osjetljivosti na antibiotike i bakteriofage u ovom slučaju pomoći će odabiru pravog lijeka za liječenje.

Ako u stolici ima malo patogenih bakterija, rezultat može biti negativan. Indirektni znak prisustva patogena može biti smanjenje rasta normalne flore.

Poznato je da mikroorganizmi, uprkos svom “malom rastu”, imaju i “ovisnost” o hrani, optimalnu temperaturu, općenito, okruženje koje im savršeno odgovara, u kojem se osjećaju ugodno i dobro, te stoga počinju da se razmnožavaju i intenzivno rastu.

Bakteriološka inokulacija ili, kako se to skraćeno naziva - inokulacija rezervoara, koristi se za dobijanje velikog broja mikroba iste vrste (čista kultura) radi proučavanja njihovih fizičko-hemijskih i bioloških svojstava, kako bi se potom dobijeni podaci mogu se koristiti za dijagnostiku zaraznih bolesti.

Nažalost, čak i sada popularne i druge metode, čiji su glavni nedostatak lažno pozitivni ili lažno negativni rezultati, ne mogu uvijek identificirati patogena. Osim toga, nisu u mogućnosti da pokupe ciljane antibakterijske lijekove. Sličan problem rješava i sjetveni rezervoar, koji se često ne žuri sa imenovanjem, s obzirom na to da se, na primjer, polako obrađuje, a cijena analize je poprilična. Ipak, zdravlje se isplati!

Uslovi potrebni za hranu i disanje

Mikrobiolozi sada znaju da je svakom patogenu potrebno vlastito "prirodno" okruženje, uzimajući u obzir njegov pH, redoks potencijale, viskozitet, vlažnost i osmotska svojstva. Okruženje može biti mekano i tvrdo, jednostavno i složeno, univerzalno i ne baš raznovrsno, ali u svim slučajevima mora osigurati ishranu, disanje, reprodukciju i rast bakterijske ćelije.

primjer rasta mikroorganizama nakon inokulacije rezervoara u hranljivi medij

Neki mediji (tioglikol, Sabouraud) su pogodni za širok spektar mikroorganizama i nazivaju se univerzalnim. Drugi su namijenjeni samo određenim vrstama, na primjer, pneumokok i Staphylococcus aureus, koji proizvode hemolizine, rastu na krvnom agaru, koji služi za izolaciju posebno "kapricioznih" i, istovremeno, opasnih sojeva. Dakle, postoji mnogo varijanti medija, gdje svaki od njih uzgaja svoj niz mikroorganizama.

Svrha uzgoja mikroorganizama i njegov značaj za dijagnostiku

Pored vode, vazduha, tla, koji sadrže različite mikroorganizme u različitim koncentracijama, uključujući i one koji donose bolesti (patogene), mnoge grane medicinske nauke zanimaju mikrobi koji žive na koži i sluznicama ljudskog tela, a koji se mogu predstaviti od:

• Stalni stanovnici, ne predstavljaju nikakvu opasnost po čovjeka, odnosno normalna mikroflora organizma, bez koje jednostavno ne možemo živjeti. Na primjer, nestanak bakterija koje žive u crijevima i učestvuju u procesu probave dovodi do disbakterioze koju nije lako liječiti. Isto se događa i s nestankom vaginalne mikroflore. Odmah se naseljava uslovno patogenim mikroorganizmima, na primjer gardnerelom, koji uzrokuju;
• uslovno patogena flora, koja je štetna samo u velikim količinama pod određenim uslovima (imunodeficijencija). Navedena gardnerela je predstavnik ove vrste mikroorganizama;
• Prisustvo patogenih mikroba kojih nema u zdravom tijelu. Oni su tuđi ljudskom tijelu, gdje slučajno uđu u kontakt s drugom (bolesnom) osobom i uzrokuju razvoj zaraznog procesa, ponekad prilično teškog ili čak fatalnog. Na primjer, susret sa patogenima je i dalje u redu, u početku se liječi, ali (ne daj Bože!) oslobodiće koleru, kugu, male boginje itd.

Srećom, mnogi od njih su poraženi i trenutno se nalaze "iza sedam pečata" u posebnim laboratorijama, ali čovječanstvo u svakom trenutku mora biti spremno za invaziju nevidljivog neprijatelja sposobnog da uništi čitave nacije. Bakteriološka kultura u takvim slučajevima igra, možda, glavnu ulogu u identifikaciji mikroorganizma, odnosno određivanju roda, vrste, tipa itd. (toksonomski položaj), što je veoma važno za dijagnostiku infektivnih procesa, uključujući i polno prenosive bolesti.

Stoga su metode sjetve, poput hranljivih podloga, različite, ali imaju isti cilj: dobiti čistu kulturu bez nečistoća u obliku mikroba drugih klasa, koji žive svuda: u vodi, u vazduhu, na površinama, na čoveku i u njemu.

Kada se postavlja rezervoar za sjetvu i kako razumjeti odgovore?

Naziv mikroorganizma i njegova količina

Pacijenti sami sebi ne propisuju bakteriološku analizu, to radi liječnik ako sumnja da su problemi pacijenta koji ima različite tegobe povezani s prodiranjem patogenog patogena u organizam ili s pojačanom reprodukcijom mikroorganizama koji stalno žive sa osobu, ali ispoljavaju patogena svojstva samo u određenim uslovima. Nakon što je prošao analizu i nakon nekog vremena dobio odgovor u svoje ruke, osoba je izgubljena, a ponekad čak i uplašena, kada vidi nerazumljive riječi i oznake, stoga, kako se to ne bi dogodilo, želio bih dati kratko objašnjenje po ovom pitanju:

Prilikom ispitivanja biološkog materijala na prisustvo patogenih mikroorganizama, odgovor može biti negativan ili pozitivan („loša posuda za sjetvu“), jer im je ljudsko tijelo samo privremeno sklonište, a ne prirodno stanište.

Ponekad, u zavisnosti od materijala koji se inokuliše, možete videti broj mikroorganizama izražen u jedinicama koje formiraju kolonije po ml (jedna živa ćelija će dati rast cele kolonije) - CFU / ml. Na primjer, inokulacija urina za bakteriološki pregled normalno daje do 10 3 CFU / ml svih otkrivenih bakterijskih ćelija, u sumnjivim slučajevima (ponovite analizu!) - 10 3 - 10 4 CFU / ml, sa upalnim procesom infektivnog porijekla - 10 5 i više CFU /ml O posljednje dvije opcije u kolokvijalnom govoru, ponekad se jednostavno izražavaju: "Loš sijevni rezervoar."

Kako "pronaći kontrolu" na patogenom mikroorganizmu?

Istovremeno sa sjetvom materijala u takvim situacijama, sije se mikroflora na osjetljivost na antibiotike, što će liječniku dati jasan odgovor - koji će antibakterijski lijekovi i u kojim dozama "uplašiti" "uljeza". I ovdje postoji dešifriranje, na primjer:

• Vrsta mikroorganizma, na primjer, ista E. coli u količini od 1x10 ^ 6;
• Naziv antibiotika s oznakom (S) ukazuje na osjetljivost patogena na ovaj lijek;
• Tip antibiotika koji ne djeluje na mikroorganizam označen je simbolom (R).

Bakteriološka analiza je od posebne važnosti u određivanju osjetljivosti na antibiotike, jer glavni problem u borbi protiv hlamidije, mikoplazme, ureaplazme itd. ostaje izbor efikasnog tretmana koji ne šteti tijelu i ne pogađa pacijentov džep.

Tabela: Alternativni primjer rezultata akvarijske kulture koji pokazuju efikasne antibiotike

Pravilna priprema za bakteriološku analizu ključ je pouzdanog rezultata

Svaki biološki materijal uzet od osobe može biti podvrgnut bakteriološkoj analizi.(koža, krv, sperma, sluzokože usne duplje, respiratornog i urinarnog trakta, gastrointestinalnog trakta, organa vida, sluha i mirisa itd.). Najčešće, rezervoar za sjetvu propisuju ginekolozi i urolozi, tako da se na tome treba malo zadržati.

Pravilna priprema za bakteriološku kulturu bit će ključ za ispravan rezultat, jer će se u suprotnom analiza morati ponovo uzeti i čekati zakazano vrijeme. Kako donirati krv za sterilitet iz vene zadatak je zdravstvenih radnika. Ovdje u pravilu ništa ne ovisi o pacijentu, on jednostavno daje pregib lakta, a medicinska sestra ga unosi u sterilnu epruvetu uz poštovanje svih pravila asepse i antisepse.

Druga stvar je urin ili iz genitalnog trakta. Ovdje pacijent mora osigurati prvu fazu (ogradu), poštujući propisana pravila. Treba napomenuti da je urin žena i muškaraca nešto drugačiji, iako je u mjehuru oba spola sterilan:

• Kod žena, prilikom prolaska kroz uretru, može se uhvatiti mala količina nepatogenih koka, iako općenito često ostaje sterilna;
• Kod muškaraca stvari stoje nešto drugačije. Prednji dio uretre može opskrbiti mokraću sa sljedećim:
  1. difteroidi;
  2. stafilokoki;
  3. neke nepatogene gram-negativne bakterije, što će se naknadno pokazati bakteriološkom analizom.

Međutim, ako su u prihvatljivoj koncentraciji (do 10 3 CFU / ml), onda se nema čega bojati, ovo je varijanta norme.

Kako bi se izbjeglo prisustvo drugih mikroorganizama i osigurala što je moguće veća sterilnost uzetog materijala, prije analize se vrši temeljna toaleta genitalnih organa (ulaz u vaginu kod žena se zatvara vatom - zaštita od prodiranje odvojenih genitalnih organa). Za analizu se uzima prosječna porcija urina (početak mokrenja u toalet, približno 10 ml medijuma za serviranje u sterilnoj tegli, završavajući u toaletu). Pacijenti moraju znati: urin uzet za kulturu mora se obraditi najkasnije dva sata kada se čuva na temperaturi ne višoj od 20°C, tako da treba uzeti u obzir vrijeme za transport.

Osim toga, materijal za sijevku, ako je potrebno, uzima se iz mokraćne cijevi i rektuma kod muškaraca, iz uretre, rektuma, vagine, cerviksa i cervikalnog kanala - kod žena, ali to se događa u medicinskoj ustanovi gdje pacijent treba stići. Pranje, ispiranje i upotreba antiseptika u takvim slučajevima je zabranjeno.

Ostala pitanja koja zabrinjavaju pacijente

Mnoge pacijente zanima koliko dana se radi analiza. Nemoguće je jednoznačno odgovoriti na ovo pitanje, sve ovisi o tome koji se materijal proučava i koji patogen treba tražiti. Nekada je odgovor gotov za 3 dana, nekad za nedelju dana ili čak 10-14 dana, jer neki uzorci zahtijevaju subkulturu na drugu podlogu.

Nemojte zaobići ljude koji se kreću u rezervoar za sjetvu i pitanje cijene analize. Približna cijena u Moskvi je oko 800 - 1500 rubalja. Naravno, može biti veća i ovisi o širini spektra bakteriološkog pretraživanja. Analizu za vrijeme trudnoće vjerovatno možete besplatno uzeti u prenatalnoj ambulanti, ili u klinici iz posebnih zdravstvenih razloga.

Za trudnice je posuda za sjetvu obavezna, daje se 2 puta(prilikom registracije i u 36. sedmici), dok se bris uzima ne samo iz genitalnog trakta, već i sa sluzokože nosa i grla. Predmet pretrage u ovom slučaju, osim urogenitalnih infekcija, bit će i Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus), koji u postporođajnom periodu može uzrokovati mnogo nevolja (gnojni mastitis itd.). Uz to, trudnice su obavezne da urade urinokulturu, struganje vaginalnog epitela i brisove iz cerviksa i cervikalnog kanala.

Mnoge se žene, prije odlaska na proceduru, jako plaše takvih strašnih riječi i počnu razmišljati: „Da li je to potrebno? Možda nemoj ići." Požurimo da uvjerimo da su testovi apsolutno bezbolni. Bris iz cerviksa i cervikalnog kanala uzima se sterilnom citočetkicom, ne izazivajući apsolutno nikakvu bol ženi, ali naknadno će spremnik za sjetvu iz s/m i s/c zaštititi i buduću majku i fetus od mogućih komplikacija. Predmet pretrage u trudnoći su uzročnici klamidije, urea- i mikoplazme, gljivice (obično Candida albicans) i drugi oportunistički i patogeni mikroorganizmi.

Video: demonstracijski video o kulturi rezervoara iz cervikalnog kanala

Posebni slučajevi od posebnog interesa za one koji se testiraju

Nakon što uđu u genitalni trakt, patogeni mikroorganizmi se nakon vrlo kratkog vremena savladavaju i počinju svoju štetnu aktivnost. Na primjer, uvijek patogeni gonokoki (Neisseria), koji su krivci prilično neugodne bolesti, nazvane i povezane sa spolno prenosivim bolestima, osjećaju se "kao kod kuće" doslovno trećeg dana. Počinju se aktivno razmnožavati i hrabro se kretati prema genitalnim putevima, zauzimajući sve više i više novih teritorija. Svi znaju da se gonoreja sada dobro liječi i da je se gotovo niko ne boji. Ali prvo ga morate pronaći. Glavna metoda traženja ove infekcije je akumulacija, kultivacija, identifikacija bojenjem po Gramu, mikroskopija.

Pronađene u brisu uzetom "na floru" iz genitalnog trakta, koje leže u paru "zrna kafe" (diplokoke), ne ukazuju na prisustvo venerične bolesti. Takva mikroflora vagine često se pojavljuje u postmenopauzi i ne znači ništa loše. Razmaz uzet u nesterilnim uslovima na predmetno staklo i obojen metilenskim plavim ili po Romanovskom (citologija) ne može razlikovati mikroorganizam. On može samo pretpostaviti i uputiti pacijenta na dodatna istraživanja (dobivanje izolirane kulture).

Treba napomenuti da ako struganje sa sluzokože urinarnog trakta, uzeto za sjetvu na ureaplazmu, nije tako rijetka pojava, onda sami liječnici često izbjegavaju sjetvu mokraće, jer je s njom teže raditi.

To stvara poteškoće u dijagnostici, što donosi veliku štetu ne samo tokom trudnoće. Osim toga, klamidija uzrokuje mnoge bolesti koje su uobičajene ne samo za žene, već i za mušku populaciju, pa se sije, uzgaja, proučava, utvrđuje osjetljivost na antibiotsku terapiju i samim tim se bori protiv nje.

U trudnoći, bakteriološku kulturu je općenito teško bez, jer se mnogi mikroorganizmi maskirani u citološkom brisu mogu propustiti. U međuvremenu, učinak nekih spolno prenosivih bolesti na fetus može biti štetan. Osim toga, mnogo je teže liječiti trudnicu, a propisivanje antibiotika "na oko" jednostavno je neprihvatljivo.

Metode sjetve

Da bi se izolovale čiste kulture patogena, u prvoj fazi pribegavaju se njihovoj inokulaciji na odgovarajuće podloge, koja se vrši u posebnim (sterilnim!) uslovima. U osnovi, prijenos materijala u okolinu vrši se uz pomoć uređaja koje je još u 19. stoljeću koristio veliki Louis Pasteur:

• bakterijska petlja;
• Pasteur pipeta;
• Staklena šipka.

Naravno, mnogi instrumenti su doživjeli promjene tokom 2 stoljeća, zamijenili su ih plastični sterilni i jednokratni, međutim, stari nisu ostali u prošlosti, nastavljajući služiti mikrobiološkoj nauci do danas.

Prva faza dobivanja kolonija zahtijeva poštivanje određenih pravila:

1. Sjetva se vrši preko alkoholne lampe u kutiju prethodno tretiranu dezinfekcijskim sredstvima i kvarcnom obradom, ili u laminarni ormar koji osigurava sterilnost radnog prostora;
2. Odjeća, rukavice i okoliš zdravstvenog radnika također moraju biti sterilni, jer suprotno sprječava izolaciju izolovanih sojeva;
3. U boksu treba raditi brzo, ali pažljivo, ne smijete pričati i biti ometani, a morate imati na umu ličnu sigurnost, jer materijal može biti zarazan.

Izolacija sojeva i proučavanje čistih kultura

Izolacija sojeva nije uvijek ista, jer neke biološke podloge koje se nalaze u ljudskom organizmu zahtijevaju individualni pristup, npr. hemokultura (krv) prvo u tečnom mediju (odnos 1:10) je malo "rast", jer krv (nerazrijeđena) može ubiti mikroorganizme, a zatim, nakon jednog dana ili više, subkultivirati na Petrijevim zdjelicama.

Sjetva mokraće, ispiranje želuca i drugih tekućih materijala također ima svoje karakteristike, gdje da bi se dobila čista kultura tečnost se prvo mora centrifugirati (aseptični uslovi!), pa tek onda sijati, i to ne sama tečnost, već njen talog. .

Uzgoj i kultivacija kolonija vrši se na Petrijevim zdjelicama ili se prvo stavlja u tečni medij koji se sipa u sterilne bočice, a zatim se izolirane kolonije ponovo sije, ali na kosi agar i materijal se stavlja u termostat na jedan dan. Nakon što se uvjeri da je dobivena kultura čista, sojevi se prenose na stakalce, radi se razmaz i boji se po Gramu (najčešće), Ziehl-Neelsenu itd., a za diferencijaciju se morfologija mikroba proučavano pod mikroskopom:

• Veličina i oblik bakterijske ćelije;
• Prisutnost kapsula, flagela, spora;
• Tinktorijalna svojstva (odnos mikroorganizma i bojenja) *.

* Čitalac je verovatno čuo za takav patogen kao što je bleda treponema? Ovo je uzročnik sifilisa, pa se stoga njegovo ime (blijedo) pojavilo jer ne percipira dobro boju i ostaje blago ružičasto kada se boji prema Romanovskom. Mikroorganizmi koji ne percipiraju anilinske boje nazivaju se gram-negativni, a percepcijski - gram-pozitivni. Gram-negativne bakterije dobijaju ružičastu ili crvenu boju bojenjem po Gramu dodatnim bojama (magenta, safranin).

Sjetva u rezervoar može se nazvati drevnom analizom, ali njena popularnost ne pada iz toga, iako moderna bakteriologija ima sposobnost da iz nje izoluje ne samo sojeve, već i jednu ćeliju, koja se zove klon. Međutim, za dobivanje klona potreban je poseban uređaj - mikromanipulator, koji nije dostupan u konvencionalnim laboratorijama, jer se koristi uglavnom u istraživačke svrhe (genetske studije).

Infekcija crijeva je čest uzrok probavne smetnje kod djece. Da biste brzo izliječili svoje dijete, morate poduzeti testove i identificirati pravi uzrok crijevnih smetnji. Laboratorijska dijagnostika crijevnih infekcija uključuje analizu fecesa na uslovno patogenu grupu mikroorganizama i analizu na patogenu floru (analizu za disgrupu i tifusnu i paratifusnu grupu bakterija).

Analiza fecesa za disgrupu je studija fekalnih masa na prisustvo patogena crijevnih infekcija. U ovu grupu spadaju bakterije koje nisu stalni stanovnici crijeva kod zdrave djece i potencijalno mogu izazvati zarazni proces. To uključuje uzročnike dizenterije (šigele) i salmonele.

Uvjetno patogeni mikroorganizmi (enterokoki, stafilokoki, klostridije, gljivice), zajedno s "korisnim" bakterijama, čine prirodnu crijevnu mikrofloru. Nazivaju se uslovnim, jer. njihova sposobnost da izazovu infekciju ovisi o specifičnim okolnostima: oslabljen imunitet, naglo smanjenje broja "bakterija pomagača" (laktobacili, bifidobakterije), pokvarena hrana.

U kojim slučajevima je potrebno pregledati izmet?

U slučaju sumnje na crijevnu infekciju ili u sklopu preventivnih mjera, potrebno je donirati fekalije za disgrupu radi razjašnjenja dijagnoze.

Za razvoj crijevne infekcije, patogeni mikrobi moraju ući u crijeva djeteta. Izvor infekcije je izmet zaražene osobe. Do prijenosa mikroba može doći kontaktom sa bolesnom osobom ili nosiocem infekcije, upotrebom kontaminirane hrane ili vode. Vodeni put se smatra najčešćim.

Ne uspijevaju sve bakterije doći do crijeva - želučani sok uzrokuje smrt većine njih. Budući da novorođenčad (posebno novorođenčad) proizvodi manje želudačnog soka, izložena je većem riziku od infekcije. Kod dojenčadi može doći do crijevne infekcije ako se doda komplementarna hrana. Ako se komplementarna hrana priprema bez poštivanja sanitarnih pravila ili nije podvrgnuta toplinskoj obradi, tada u njoj mogu biti prisutni oportunistički mikrobi.

Kod crijevne infekcije dijete može imati sljedeće tegobe:

• bol u stomaku;
• mučnina, povraćanje;
• tečna stolica;
• groznica, drhtavica, opšta slabost.

Akutna crijevna infekcija kod djece može se javiti u obliku gastritisa, enteritisa ili kolitisa, brzo se razvija. Dijareja je zaštitna reakcija organizma na uklanjanje patogena. Ali uz tečnu i obilnu stolicu gube se i korisne tvari, a ako se liječenje ne započne na vrijeme, dolazi do dehidracije od obilnog proljeva i povraćanja. Koža i vidljive sluzokože postaju suhe, dijete postaje letargično, smanjuje se količina mokraće, nema znoja i suza. Novorođenče ima fontanelu. U vrlo teškim slučajevima dolazi do šoka i višestrukog zatajenja organa. Bebe mnogo brže razvijaju dehidraciju.

Indikacija za analizu je identifikacija vagona. To su slučajevi kada djeca koja su već imala crijevnu infekciju nastavljaju izlučivati ​​patogeni mikrob izmetom. Stoga je analiza fecesa za crijevnu grupu za hospitalizaciju neizostavan postupak ukoliko dijete treba podvrgnuti operaciji i bolničkom liječenju zbog druge bolesti.

Preventivnu studiju na prijenos uzročnika crijevnih infekcija provode i ljekari, radnici u prehrambenoj industriji i obrazovnim ustanovama i uključena je u obavezni godišnji pregled.

Može pokazati da li su esencijalni probavni enzimi prisutni u tijelu.

Kako uzeti analizu? Pravila prikupljanja stolice

Prije nego što donirate izmet crijevnoj grupi, morate znati kako to učiniti ispravno. Tehnika uzimanja nije teška. Izmet treba sakupljati u posebnu plastičnu bocu, koja se može kupiti u ljekarni. Prije uzimanja fecesa, morate pripremiti dijete: nekoliko dana nemojte uzimati aktivni ugalj, ricinusovo ulje, ne stavljajte rektalne čepiće i ne uzimajte antibiotike. Uzimaju izmet nakon što dijete ode u toalet “malo po malo”.

Sakupite izmet sa nekoliko mjesta i napunite jednu trećinu posude, to je oko 2 cm.Ako morate dugo čekati na prirodnu defekaciju, onda je izmet uzet iz donjeg rublja (obavezno svježeg) prikladan kao materijal za analizu. Pipeta se može koristiti za sakupljanje stolice ako je stolica veoma rahla. Izmet se uzima sa područja gdje ima puno patoloških nečistoća, kao što su gnoj, sluz, ljuspice. Odabrani materijal ne bi trebao biti bez krvi. Izmet sakupljamo ujutro. Postoje slučajevi kada uzimanje fecesa nije potrebno, rektalni bris se šalje na analizu. Uzima se u ambulanti posebnim brisom u položaju djeteta koje leži na boku. Uzeti izmet ili razmaz se predaje u laboratoriju u roku od 3 sata nakon uzorkovanja.

Laboratorijska dijagnostika

Analiza crijevne infekcije kod djece uključuje bakterioskopski i bakteriološki pregled fecesa. Bakterioskopska metoda pokazuje prisustvo bakterija i protozoa u fecesu pod mikroskopom. Bakteriološka analiza fecesa je uzgoj kolonije mikroorganizama.

Da biste to učinili, spremnik za kulturu stolice napravljen je na hranjivom mediju. Po prirodi rasta određuje se vrsta infektivnih patogena i njihova koncentracija. Kada se otkriju patogeni mikroorganizmi, utvrđuje se njihova osjetljivost na antibiotike.

Najčešće postavljano pitanje je: „Koliko je vremena potrebno za testiranje na crijevne infekcije?“ Potrebno je vrijeme da kolonija naraste. Koliko dana će kultura rasti ovisi o specifičnoj vrsti mikroba. Podaci se obično dobijaju u roku od 1-2 nedelje.

Ponekad analiza crijevne grupe možda neće biti dovoljno informativna. Na primjer, ako je uzrok infekcije virus ili protozoa, ili ako u izmetu nije pronađen sam patogen, već njegovi otpadni proizvodi. U ovom slučaju, oni doniraju izmet za lančanu reakciju polimeraze. PCR izmeta određuje DNK patogena, čak i ako je samo jedna bakterija ušla u izmet. Podaci dolaze u roku od jednog dana.

Dodatne dijagnostičke metode istraživanja crijevnih infekcija uključuju analizu krvi, hemokulturu (ako dijete ima temperaturu duže od 3 dana) i serološke analize (omogućava otkrivanje antitijela na patogene).

Kultura stolice na patogenu crijevnu floru također pomaže u razlikovanju crijevne infekcije od drugih stanja koja mogu uzrokovati iste simptome. Diferencijalna dijagnoza crijevnih infekcija provodi se s disbakteriozom i infekcijama toksičnim hranom. Za dijagnozu disbakterioze daje se analiza fekalija na UPF.

Dešifrovanje primljenih podataka

Kod zdravog djeteta u fecesu nema patogenih mikroorganizama, tj. analiza treba da bude negativna na disgrupu i salmonelozu, kao i na dizenterijsku amebu i grupu tifusa i paratifusa. Normalno, ne postoje tako jednostavni mikroorganizmi kao što su crijevne trichomonas, balantidia.

Visoke vrijednosti patogenih bakterija koje nisu dio normalne mikroflore nalaze se u dva slučaja: akutna crijevna infekcija i bakterionosac.

UPF analiza će vam reći koliko ovih bakterija ima u 1 gramu izmeta. Niske vrijednosti enterokoka, klostridija, gljivica candida i bakteroida smatraju se negativnim rezultatom, jer. za razvoj infekcije neophodna je određena količina uzročnika, a ne samo njegovo prisustvo. Ako uvjetno patogena mikroflora prevladava nad koncentracijom laktobacila u izmetu, to je disbakterioza.

Ako se otkrije crijevna grupa, analiza se dopunjuje testom na osjetljivost bakterija na antibiotike.

Osetljivost na antibiotike je označena sledećim slovnim oznakama

• S - osjetljiv (h);
• R - stabilan, otporan (y);
• I - umjereno stabilan (yy).

Tretman

Ako je test stolice pozitivan, onda bolesno dijete treba izolirati. Uz blagi tok bolesti, liječenje se može provoditi kod kuće. Potrebno je vratiti količinu izgubljene tečnosti u fecesu (rehidracija). Lekar propisuje terapiju antibioticima. Kod teške dehidracije dijete treba hitno hospitalizirati!

Diferencijalna dijagnoza može biti teška ako se jedna bolest javlja pod krinkom druge. U takvim slučajevima, tačna dijagnoza se postavlja na osnovu rezultata uspješnog liječenja. Ako je terapija bila efikasna, dijagnoza je tačna.

Prilično je jednostavna, međutim, u isto vrijeme vrlo informativna analiza - omogućava vam da dijagnosticirate gotovo sve bolesti probavnog sistema, razjasnite lokaciju lezije (želudac, struju ili debelo crijevo) i otkrijete prisustvo nepozvanih gostiju - paraziti i patogeni mikrobi. Međutim, većina roditelja pod analizom fecesa misli samo na "analizu za disbakteriozu", koju toliko vole propisivati ​​svim bebama. Međutim, postoji nekoliko analiza fecesa i mikrobiološka setva (“na disbakteriozu”) se radi kao posljednja, kada su isključeni svi drugi problemi.

Kod djece prve godine života analizom fekalija otkrivaju se različite probavne smetnje – poremećaji u želucu. Crijeva, problemi s jetrom i pankreasom, zarazne bolesti i nasljedna patologija metabolizma. Koji se testovi daju i na šta gledaju?

Ovom analizom procjenjuju se glavne karakteristike izmeta - fizičke, kemijske i mikroskopske, osim toga, ovisno o vrsti hranjenja i dobi bebe, imat će karakteristične karakteristike. Ali da bi analiza pokazala pouzdane podatke, potrebno ih je pravilno prikupiti, što je kod male djece prilično težak zadatak.
Analiza se uzima iz pelene ili uljane krpe, jer pelena apsorbira dio tečnosti i analiza će biti nepouzdana.

Za analizu je potrebno najmanje 1-2 kašičice fecesa prikupljenih u suhu, čistu posudu. Ali staklenke za hranu za bebe ne treba koristiti - mikroskopske čestice hrane ostaju na njihovom dnu i zidovima, što će iskriviti rezultat. U idealnom slučaju, ovo bi trebala biti svježa analiza - beba je krenula na veliko, vi ste prikupili i dostavili analizu u laboratoriju. Ali ako to nije moguće, sakupite ga u posudu, dobro zatvorite poklopac i stavite u vrata frižidera - možete ga čuvati najviše 6-8 sati.
Neprihvatljivo je prikupljanje materijala nakon klistiranja ili upotrebe laksativnih proizvoda ili lijekova, u izmetu ne smije biti čestica urina.

Kako se ocjenjuje i šta bi trebalo biti normalno?
Dosljednost. Za djecu prve dvije godine života stolica je prihvatljiva u obliku kaše i neformirana. Kod punog dojenja, tečna kaša sa malo vode može biti guste pavlake. Na IV, stolica može biti mekana kobasica ili kaša. Uvođenjem komplementarne hrane, stolica počinje da se oblikuje i postaje gušća, do druge godine obično je rastresita kobasica. Stolica u obliku "suhe dimljene kobasice" ili "ovčije kuglice" je zatvor. Stolica je tečna, voda sa nečistoćama i često je zatvor.

Boja. Kod beba prve godine života izmet je obično žut, sa malim dozvoljenim primesama zelenila u prva 3-4 meseca. Tada stolica postaje žuto-smeđa, a do druge godine postaje otprilike ista kao kod odraslih. Komadi hrane su prihvatljivi, posebno u prvim mesecima dohrane, a kod upotrebe svetle hrane, bojenje izmeta u boju proizvoda (cikla, rabarbara, bundeva).
Miris. U prvim mesecima života stolica dojenih beba ima miris kiselog mleka, dok veštačke imaju oštriji miris. Uvođenjem komplementarne hrane, posebno mesa, stolica poprima uobičajeni fekalni miris.

pH (reakcija). Normalna je neutralna ili blago alkalna reakcija, ali u prvim mjesecima hranjenja adaptiranim mlijekom ili majčinim mlijekom može biti i blago kisela.
Protein. zdrava deca ne bi trebalo da imaju proteine ​​u izmetu - njegovo prisustvo ukazuje na upalu creva, prisustvo sluzi, krvarenje, eksudat, nesvarenu hranu.
Reakcija na okultnu krv. Normalno, u zdravom crijevu ne bi trebalo biti krvi - to uvijek ukazuje na probleme. Najčešće se krv pojavljuje kod alergija, upale crijeva. rektalne fisure. prolaps rektuma, hemoroidi, polipi i malformacije crijeva.
odgovor na bilirubin. Bilirubin je jedan od proizvoda razgradnje hemoglobina, koji je prihvatljiv u fecesu do oko tri mjeseca starosti, kasnije se pod djelovanjem enzima i mikroflore potpuno transformiše u sterkobilin, dajući smeđu boju. Pojava u izmetu nakon ovog uzrasta ukazuje na zdravstvene probleme.

Slime. Sluz je želeast iscjedak koji je bistar ili bjelkaste boje. Osmišljeni su za zaštitu od agresivnog djelovanja crijevnog sadržaja. Međutim, obično se oslobađa malo sluzi, a na izlazu je potpuno pomiješana sa izmetom. Primjetno prisustvo sluzi u izmetu prihvatljivo je do 3-5 mjeseci života, posebno kod novorođenčadi. A onda govore o prisutnosti upalnog procesa.
Leukociti. Mala količina leukocita, posebno u prvim mjesecima života, je prihvatljiva, međutim, ako se oslobađaju u velikim količinama u kombinaciji sa sluzi i krvlju, to ukazuje na upalu i oštećenje crijevnog zida.

Mišićna vlakna. Govore o stepenu probave proteinske hrane, prije uvođenja mesne komplementarne hrane, one praktički ne postoje kod djeteta, a u budućnosti bi trebalo da budu samci. Ako ih ima puno, to ukazuje na kršenje probave u želucu i crijevima, probleme s pankreasom, upalu crijeva.

Vezivno tkivo. Normalno, ne bi trebalo da bude, javlja se tek nakon uvođenja komplementarne hrane sa nedovoljnim lučenjem želuca, problemima sa pankreasom.
Neutralna mast. Masna kiselina. Sapun. U ranom djetinjstvu može se pojaviti u malim količinama, ali nakon šest mjeseci javlja se kod oštećenja gušterače, jetre ili bolesti tankog crijeva.

Ostaci neprobavljene hrane. U prvim godinama života prihvatljivo je prisustvo ostataka biljne hrane u izmetu - posebno kukuruza, šargarepe, kore jabuke itd. Ako u izmetu ima puno probavljivih vlakana, to može ukazivati ​​na to da hrana prebrzo prolazi kroz crijeva. Nesvarena vlakna mogu biti normalna.

Škrob. Pojavljuje se u hrani uvođenjem dohrane, ako je ima puno, peče zbog lošeg rada gušterače, probavne smetnje u crijevima i crijevne infekcije.
jodofilna flora. Riječ je o posebnim vrstama bakterija čiji se prekomjerni rast javlja kod dispepsije (poremećaja probave), poremećaja tankog crijeva, poremećaja želuca i gušterače.

Testirajte sadržaj ugljikohidrata u fecesu.
Ova studija je provedena uz sumnju na nedostatak laktaze – smanjenje količine enzima koji razgrađuje mliječni šećer (laktozu) u crijevima. Obično se propisuje kod dispeptičkih simptoma - tečne, pjenaste stolice, poremećenog debljanja koje se javlja pri upotrebi mliječnih proizvoda. Pravi nedostatak laktaze (kada postoji nedostatak enzima) je rijedak. Uglavnom postoje lažne ili sekundarne varijante nedostatka laktaze, kada je enzim prisutan, ali ili još nije zreo, ili je blokiran kao rezultat crijevne infekcije, ili dolazi do preopterećenja mliječnim šećerom (npr. sa neravnotežom prednjeg i zadnjeg mlijeka kod novorođenčadi).

Ovo stanje nestaje nakon korekcije prehrane, liječenja crijevnih infekcija i normalizacije mikroflore. Analiza fecesa na ugljikohidrate nije glavna u postavljanju dijagnoze, ali pomaže u određivanju prirode insuficijencije - primarne ili sekundarne.
Da bi se pravilno prikupio izmet za određivanje ugljikohidrata u izmetu, potrebno ga je prikupiti u čistu, suhu posudu, u zapremini od najmanje 1-2 kašičice. Izmet se mora dostaviti u laboratoriju najkasnije 3-4 sata, inače će rezultat biti iskrivljen. Normalne vrijednosti za djecu mlađu od godinu dana su:
Dojenje (prije dohrane) do 0,5-0,6%,
Na umjetnom hranjenju - do 0,3%,
Za djecu od druge polovine godine - do 0,25%,
Starije od godinu dana 0%.

Uz povećanje pokazatelja, propisuje se korekcija hranjenja, eliminira se neravnoteža mlijeka ako je u pitanju beba ili se privremeno daje mješavina s niskim sadržajem laktoze ako je beba na IV. Ako se potvrdi primarni nedostatak laktaze, liječenje će se sastojati od primjene enzima laktaze.

Analiza fecesa na oportunističku floru (UPF).
Upravo ova analiza izmeta, koja se obično naziva "disbakterioza", izaziva najveći broj pitanja kod roditelja. Međutim, ova analiza je uglavnom neinformativna i nije indikativna. Stvar je u tome što je crijevna mikroflora vrlo nestabilna, pa čak i ako se rade dvije analize uzastopno kod istog djeteta ujutro i uveče, one će se značajno razlikovati.

Da bismo shvatili odakle mikrobi dolaze u crijevima i koga se treba bojati, a koga ne, hajde da ukratko pričamo o tome kako crijeva rade. Neposredno nakon porođaja, kada se beba stavi na dojku, bebina crijeva se napune mikroflorom majke. Postaje kao višespratna zgrada - postoje mirni susjedi i većina njih su bifido- i laktoflora. I nasilnih susjeda ima, ali njihova manjina je takozvana uslovno patogena flora (staphylococcus aureus, Klebsiella, određene vrste Escherichia coli). Dok se svi mikrobi talože u crijevima, javlja se anksioznost – fiziološka disbakterioza, dok svi ne zauzmu svoja mjesta. Osim toga, naseljavanje i mirno postojanje u crijevima raznih potencijalno opasnih mikroba, poput stafilokoka i klebsiele, olakšava se uz pomoć majke - majčinog mlijeka s antitijelima na štetne mikrobe i posebnim tvarima koje pomažu u rastu korisnih laktobacila i bifidoflore. Odnosno, sve promjene u analizi fecesa na mikrofloru u prvih 4-6 mjeseci života su fiziološka postavka za rad i miran suživot mikroba.

Šta je dozvoljeno, a šta nije?
U ovoj analizi postoje neke posebne indikacije, pa je prisustvo uzročnika salmoneloze, kolere, trbušnog tifusa, dizenterije i patogenog tipa Escherichia coli u izmetu jasno neprihvatljivo. Ali roditelji su, međutim, više zabrinuti zbog prisutnosti stafilokoka, Proteusa, Klebsiella, enterokoka u izmetu. Međutim, samo po sebi, prisustvo bilo koje količine ovih mikroba, u nedostatku klinike za ove bolesti, odnosno ako dete nema temperaturu, dobija na težini, raste i razvija se u skladu sa godinama, predstavlja varijantu norma za ovu bebu. Mikroflora se naziva uslovno patogenom jer može postati aktivna i štetna samo pod određenim uvjetima.

To se događa kod djece sa imunodeficijencijama, naglim smanjenjem imunoloških snaga nakon teških i dugotrajnih bolesti, nakon izlaganja ili liječenja teškim lijekovima - antibioticima u dugom trajanju (tri ili više sedmica), antitumorskim sredstvima. Drugi razlog za aktivaciju ove flore mogu biti crijevne infekcije i teška trovanja - oni se jednostavno pridružuju klinici bolesti. U svim ostalim slučajevima korekcija mikroflore uopće nije potrebna - mikrobna ravnoteža će se sama obnoviti. Nije potrebna upotreba bilo kakvih lijekova za ispravljanje flore - većina njih jednostavno ne dospijeva u crijeva, uništavaju ih klorovodična kiselina želuca ili crijevni enzimi.

Naravno, ovo nisu sve pretrage stolice koje se mogu uraditi kod djeteta. Međutim, sve druge studije su prilično specifične i provode se samo ako se u općim analizama utvrde značajna odstupanja. Propisuje ih gastroenterolog i neophodni su za pojašnjenje dijagnoze, odnosno za praćenje efikasnosti liječenja.