Анализ на патогенную микрофлору кишечника. Условно-патогенные и патогенные микроорганизмы. Анализ кала у детей

Определяют состояние кишечной микрофлоры у ребенка. Почему врач может назначить такое исследование и что следует знать о нем родителям?

Показания

Такое исследование особенно важно для младенцев, у которых риски развития патологии кишечника повышены. Также его советуют сделать детям, которые часто болеют, например, при частых ОРВИ.

Часто всего анализ кала делают при расстройствах кишечника

Виды

  1. Копрологическое исследование кала . Его назначают самым первым при подозрении на проблемы с кишечником. Анализ покажет, как переваривается пища в кишечнике и выявит воспалительный процесс.
  2. Биохимический анализ кала. Помогает выявить ферментопатии.
  3. Экспресс-посев кала. Это быстрый метод исследования, во время которого определяется нормальная микрофлора в процентном соотношении.
  4. Посев кала на дисбактериоз. Такое исследование позволяет оценить концентрацию и количество бактерий-представителей нормальной микрофлоры, а также условно-патогенной флоры. Кал ребенка высевается на питательную среду. В течение нескольких дней вырастают колонии бактерий, которые изучаются под микроскопом и подсчитываются. В бланке обозначают количество микроорганизмов на 1 грамм кала, указывая число бактерий, образующих колонии (КОЕ). Если выявлена патогенная флора, дополнительно определяется чувствительность/стойкость к антибиотикам.


Анализы кала направлены на выявление количества различных бактерий в кишечнике и их соотношение

Где можно сдать анализы?

Анализы на дисбактериоз можно сдать как в государственных поликлиниках, так и в частных лабораториях. При этом родителям следует помнить, что в государственных медучреждениях есть свои часы работы и они не проводят исследования по выходным.

Нужна ли специальная подготовка?

Если анализ назначен грудному малышу, которого начали прикармливать, то за три дня до исследования введение новых продуктов исключают. Также в течение нескольких дней до сдачи кала нужно прекратить давать малышу любые медикаменты, включая активированный уголь и препараты от колик.

Делать клизму, пользоваться ректальными свечками и давать ребенку слабительные препараты перед исследованием на дисбактериоз тоже нельзя.

Как собрать кал?

Образец каловых масс следует собирать у ребенка, который уже помочился, чтобы моча не попала в емкость для анализа. Также перед сбором материала ребенка обязательно подмывают.

Для исследования понадобится около 10 мл кала малыша, который помещают в стерильную тару. Лучше всего брать частички кала из разных участков каловых масс ребенка. Если в испражнениях имеются какие-либо примеси, их также непременно помещают в емкость с калом для анализа.


Перед взятием кала нужно обязательно помыть половые органы малыша

Сколько и где можно хранить кал?

Каловые массы обычно собирают утром и отвозят на анализ в течение 1-3 часов после испражнения. Если возможности отвезти свежий утренний кал сразу же нет, емкость с образцом для анализа можно хранить в холодильнике до 6 часов. Хранение кала при комнатной температуре исказит результаты исследования.

Значения нормы

Показатель

Норма для ребенка (в КОЕ)

Бифидобактерии

Не меньше 109

Лактобактерии

От 106 до 107

Энтерококки

От 105 до 107

Кишечная палочка (типичная)

От 107 до 108

Кишечная палочка лактозонегативная

Меньше 10%

Кишечная палочка гемолитическая

Отсутствует

Бактероиды

От 107 до 108

Пептострептококки

От 103 до 105

Сапрофитные стафилококки

Клостридии

Грибки кандида

Микробы протей

Патогенные энтеробактерии

Отсутствуют

Патогенные стафилококки

Отсутствуют

Общее количество кокков

Не больше 25%

Клебсиеллы, цитробактер и другие условно-патогенные микроорганизмы

Псевдомонады и ацинетобактер

Расшифровка

Больше всего в образце кала здорового ребенка должно быть бифидобактерий. В норме они составляют около 95% всей микрофлоры. Именно эти бактерии выполняют все основные функции микробной флоры кишечника – помощь во всасывании минералов и витаминов, синтез витаминов, стимуляция моторики кишечника, нейтрализация токсинов и другие.

Не менее важны и лактобактерии, которые также обеспечивают функционирование кишки, вырабатывают лактазу и защищают ребенка от аллергенов. Их в здоровом кишечнике содержится примерно 6% от всех микроорганизмов. Нормальная микрофлора также состоит из кишечных палочек (эшерихий), помогающих выводить кислород и противостоять патогенной флоре.

Такой представитель кишечной флоры, как бактероиды, появляются в кале младенцев старше 6 месяцев. Эти бактерии способствуют расщеплению жиров. Также в здоровом толстом кишечнике малышей в норме встречаются пептострептококки и энтерококки.

В норме в детском кале не выявляются патогенные энтеробактерии, например, такие как сальмонелла или шигелла. Их выявление указывает не на дисбактериоз, а на серьезные заболевания кишечника. Также в кале ребенка должны отсутствовать золотистые стафилококки и гемолитические эшерихии.


Наличие патогенных бактерий в кале ребенка свидетельствуют о наличии болезни у ребенка

Причины отклонений

  • Если число бифидобактерий и лактобактерий снижено, а показатели условно-патогенной флоры повышены, это признаки дисбактериоза. Также такая картина характерна для кишечных инфекций и патологий ферментов.
  • На состав микробной флоры кишечника влияют также нарушения питания ребенка. Избыточное потребление жиров изменит показатель бактероидов, а избыток углеводистой пищи повлияет на число пептострептококков и энтерококков.
  • Снижение количества типичных кишечных палочек часто бывает при глистных инвазиях. Непатогенных эшерихий также становится меньше при нарушениях вскармливания ребенка, кишечных инфекциях и антибиотикотерапии.
  • Повышение числа кишечных палочек, у которых снижена активность, свидетельствует о начальной стадии дисбактериоза.
  • Увеличение числа грибков кандида характерно для кандидоза.

> Посев на патогенную кишечную флору, определение ее чувствительности к антимикробным препаратам и бактериофагам

Данная информация не может использоваться при самолечении!
Обязательно необходима консультация со специалистом!

Что выявляет посев на патогенную кишечную флору?

Кишечник человека в норме заселен большим количеством микроорганизмов. Это разнообразные представители лактобацилл, бактероидов, энтеробактерий, пептострептококков и др. Данные бактерии составляют так называемую кишечную микрофлору, участвуют в процессе пищеварения, поддерживают местный иммунитет, препятствуя развитию инфекций. Кишечные инфекции развиваются при попадании в просвет кишки и размножении патогенных (вызывающих заболевания) микроорганизмов. Наиболее частые возбудители кишечных инфекций – шигеллы и сальмонеллы. Несколько реже выявляются холерный вибрион, клостридии (вызывающие ботулизм и пр.), иерсинии, золотистый стафилококк. Посев на патогенную кишечную флору устанавливает причину кишечной инфекции, а определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам и бактериофагам помогает выбрать верную терапию.

Каковы проявления острых кишечных инфекций?

Симптомы и жалобы несколько различаются в зависимости от возбудителя инфекции. При инфицировании шигеллами начало болезни острое. Возникают схваткообразные боли в животе, поднимается температура. Характерны частые, болезненные позывы к дефекации, не сопровождающиеся отделением кала, либо кал отделяется в малом количестве с примесью слизи и крови. Сальмонеллезам свойственно одновременное возникновение рвоты и диареи. Стул при этом может быть и желтоватым, и зеленоватым. Болезненность и урчание в животе больше выражены справа от пупка. Все кишечные инфекции, сопровождающиеся диареей или рвотой, приводят к интоксикации и обезвоживанию. Это проявляется сухостью кожи и слизистых, в тяжёлых случаях – снижением массы тела.

Когда назначают посев на патогенную кишечную флору?

Исследование назначает врач-инфекционист, терапевт или педиатр при подозрении на острую кишечную инфекцию. Посев с определением чувствительности к антибиотикам и бактериофагам в этом случае помогает выявить микроорганизм-возбудитель, провести дифференциальную диагностику с другими заболеваниями, имеющими схожую симптоматику, подобрать правильную терапию. По окончании лечения требуется повторное взятие материала для посева с целью контроля уничтожения возбудителя.

Анализ проводят при оформлении личных медицинских книжек работников общественных сфер (питания, здравоохранения, образования и пр.). Если было выявлено бактерионосительство, проводят терапию, направленную на уничтожение микроорганизма, после чего анализ следует пересдать.

Как проводят исследование, и как правильно подготовиться к нему?

Исследование проводят без предварительной подготовки. Материалом для бактериологического посева является свежий кал. Он забирается в плотно закрывающийся стерильный контейнер лопаточкой. Дефекация перед этим осуществляется в чистое судно или горшок. При наборе материала следует не загрязнить его мочой и выделениями из половых путей. Если в кале имеется слизь и гной, целесообразно отбирать именно такие его фрагменты, так как концентрация возбудителя в них значительно выше.

Материал может быть собран из прямой кишки стерильным тампоном. После введения тампона в анус совершают вращательные движения в обе стороны, полученный материал переносят в стерильный контейнер.

Как трактуют результаты?

В норме при посеве роста патогенных микроорганизмов быть не должно. Если выявлен рост, можно говорить об острой кишечной инфекции или бактерионосительстве. Определение чувствительности к антибиотикам и бактериофагам в этом случае поможет подобрать правильный препарат для лечения.

Если патогенных бактерий в кале мало, результат может быть отрицательным. Косвенным признаком наличия возбудителей может стать снижение роста нормальной флоры.

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче , и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Для питания и дыхания нужны условия

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Цель культивирования микроорганизмов и значимость ее для диагностики

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

  • Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают ;
  • Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
  • Наличием патогенных микробов , которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов , которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Когда назначается бак посев и как разобраться в ответах?

Название микроорганизма и его количество

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Как «найти управу» на патогенный микроорганизм?

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

  • Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
  • Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
  • Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Таблица: альтернативный пример результатов бак-посева с выявлением эффективных антибиотиков

Правильная подготовка к бактериологическому анализу – залог достоверного результата

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

  • У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
  • У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
    1. дифтероидами;
    2. стафилококками;
    3. некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала , перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку , окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Другие вопросы, волнующие пациентов

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14 , поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный (обычно это Candida albicans), и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Видео: ролик-демонстрация по бак-посеву из цервикального канала

Частные случаи, особо интересные сдающим анализы

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает , приносящая большой вред не только при беременности . Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Методы посева

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

  • Бактериальной петлей;
  • Пастеровской пипеткой;
  • Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

  1. Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
  2. Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
  3. Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов и изучение чистых культур

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1: 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

  • Размер и форму бактериальной клетки;
  • Наличие капсул, жгутиков, спор;
  • Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном . Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).

Кишечная инфекция – частая причина расстройства пищеварения у детей. Чтобы быстро вылечить ваше чадо, нужно сдать анализы и выявить истинную причину расстройства кишечника. Лабораторная диагностика кишечных инфекций включает анализ кала на условно-патогенную группу микроорганизмов и анализ на патогенную флору (анализ на дизгруппу и тифопаратифозную группу бактерий).

Анализ кала на дизгруппу – это исследование фекальных масс на присутствие возбудителей кишечных инфекций. В эту группу входят бактерии, которые не являются постоянными обитателями кишечника у здоровых детей и потенциально могут вызвать инфекционный процесс. К ним относятся возбудители дизентерии (шигелла) и сальмонелла.

Условно-патогенные микроорганизмы (энтерококки, стафилококки, клостридии, грибы) наряду с «полезными» бактериями составляют естественную микрофлору кишечника. Условными они называются, т.к. их способность вызывать инфекцию зависит от конкретных обстоятельств: ослабление иммунитета, резкое уменьшение числа «бактерий-помощников» (лактобактерии, бифидобактерии), испорченные продукты питания.

В каких случаях надо исследовать кал?

Сдавать кал на дизгруппу нужно для уточнения диагноза при подозрении на кишечную инфекцию или в рамках профилактических мероприятий.

Для развития кишечной инфекции необходимо попадание патогенных микробов в кишечник ребенка. Источником заражения являются фекалии зараженного человек. Передача микробов может произойти при контакте с больным человеком или носителем инфекции, при употреблении зараженной пищи или воды. Водный путь считается самым распространенным.

Добраться до кишечника удается не всем бактериям – желудочный сок вызывает гибель большинства из них. Поскольку у младенцев (особенно у новорожденных), желудочный сок вырабатывается в малом количестве, то риск инфицирования у них выше. У грудничка может возникнуть кишечная инфекция при добавлении прикорма. Если прикорм готовится без соблюдения санитарных правил или не прошел термической обработки, то в нем могут присутствовать условно-патогенный микробы.

При кишечной инфекции у ребенка могут появиться следующие жалобы:

  • боли в животе;
  • тошнота, рвота;
  • жидкий стул;
  • повышение температуры тела, озноб, общая слабость.

Острая кишечная инфекция у детей может протекать в виде гастрита, энтерита или колита, развивается она быстро. Понос – это защитная реакция организма для удаления возбудителя. Но вместе с жидким и обильным стулом теряются и полезные вещества и, если вовремя не начать лечение, то от обильного поноса и рвоты у ребенка развивается обезвоживание. Кожа и видимые слизистые оболочки становятся сухими, ребенок – вялым, уменьшается количество мочи, отсутствует пот и слезы. У новорожденного западает родничок. В очень тяжелых случаях развивается шок и полиорганная недостаточность. У грудных детей обезвоживание развивается намного быстрее.

Показанием для анализа является выявление носительства. Это те случаи, когда дети, уже переболевшие кишечной инфекцией, продолжают выделять патогенный микроб с калом. Поэтому анализ кала на кишечную группу для госпитализации – непременная процедура, если ребенку нужно провести хирургическое вмешательство и лечение в стационаре по поводу другого заболевания.

Профилактическое исследование на носительство возбудителей кишечных инфекций проводится также у практикующих медработников, работников пищевой промышленности и общеобразовательных учреждений и входит в обязательное ежегодное обследование.

Может показать, присутствуют ли в организме необходимые пищеварительные ферменты.

Как сдавать анализ? Правила забора кала

Перед тем, как сдать кал на кишечную группу, нужно знать, как правильно это сделать. Техника взятия не является сложной. Собираться кал должен в специальный пластмассовый флакончик, который можно купить в аптеке. Перед взятием кала нужно подготовить ребенка: несколько дней не принимать активированный уголь, касторовое масло, не ставить ректальных свечей и не принимать антибиотиков. Берут кал после того, как ребенок сходит в туалет «по маленькому».

Соберите кал из нескольких мест и заполните одну треть емкости, это около 2 см. Если естественной дефекации приходится ждать долго, то в качестве материала для анализа подойдет кал, взятый с нижнего белья (обязательно свежего). Чтобы собрать кал, можно использовать пипетку, если стул очень жидкий. Забор экскрементов производится из участков, где много патологических примесей, таких как гной, слизь, хлопья. В выбранном материале не должно быть крови. Собираем кал утром. Бывают случаи, когда взятие кала не требуется, на анализ отправляют ректальный мазок. Он берется в поликлинике специальным тампоном в положении ребенка лежа на боку. Взятый кал или мазок сдают в лабораторию в течение 3-х часов после забора.


Лабораторная диагностика

Анализ кишечной инфекции у детей включает бактериоскопическое и бактериологическое исследование кала. Бактериоскопический метод показывает наличие бактерий и простейших микроорганизмов в кале под микроскопом. Бактериологический анализ испражнений – это выращивание колонии микроорганизмов.

Для этого на питательную среду делают бак посев кала. По характеру роста определяют вид инфекционных возбудителей и их концентрацию. При обнаружении патогенных микроорганизмов определяется их чувствительность к антибиотикам.

Самый часто задаваемый вопрос: «Сколько делается анализ на кишечные инфекции?» Для роста колонии необходимо время. Сколько дней будет расти культура – зависит от конкретного вида микроба. Данные получают обычно в течение 1–2 недель.

Иногда анализ на кишечную группу может быть недостаточно информативным. Например, если причина инфекции – вирус или простейшие микроорганизмы, или если в кале обнаружился не сам возбудитель, а его отходы. В этом случае сдают кал на полимеразную цепную реакцию. ПЦР кала определяет ДНК возбудителя, даже если в кал попала всего одна бактерия. Данные приходят за сутки.

К дополнительным диагностическим методам исследования при кишечных инфекциях относится анализ крови, бакпосев крови (если лихорадка у ребенка длится более 3-х дней) и серологический анализ (позволяет выявить антитела к возбудителям).

Посев кала на патогенную кишечную флору также позволяет дифференцировать кишечную инфекцию от других состояний, которые могут вызывать такие же симптомы. Дифференциальная диагностика кишечного заражения проводится с дисбактериозом и пищевыми токсико-инфекциями. Для диагностики дисбактериоза сдается анализ кала на УПФ.

Расшифровка полученных данных

У здорового ребенка в кале отсутствуют патогенные микроорганизмы, т.е. анализ должен быть отрицательным на дизгруппу и сальмонеллез, а также на дизентерийную амебу и тифопаратифозную группу. В норме отсутствуют и такие простейшие микроорганизмы как кишечные трихомонады, балантидий.

Высокие значения болезнетворных бактерий, не входящих в нормальную микрофлору, обнаруживаются в двух случаях: острая кишечная инфекция и бактерионосительство.

Анализ на УПФ расскажет, сколько этих бактерий насчитывается в 1 грамме кала. Низкие значения энтерококков, клостридий, грибов candida и бактероидов считается отрицательным результатом, т.к. для развития инфекции необходимо определенное количество возбудителя, а не только его присутствие. Если условно-патогенная микрофлора преобладает над концентрацией лактобактерий в кале – это дисбактериоз.

Если обнаружена кишечная группа - анализ дополняют тестом на чувствительность бактерий к антибиотикам.

Антибиотикочувствительность обозначается следующими буквенными обозначениями

  • S - чувствительный (ч);
  • R - устойчивый, резистентный (у);
  • I - умеренно устойчивый (уу).

Лечение

Если анализ кала пришел положительным, то больного ребенка нужно изолировать. При легком течение заболевания лечение можно проводить дома. Необходимо восстановить количество потерянной с калом жидкости (регидратация). Врач назначает антибиотикотерапию. При тяжелом обезвоживании ребенок должен быть срочно госпитализирован!

Дифференциальная диагностика может быть затруднена, если одно заболевание протекает под маской другого. В таких случаях точный диагноз устанавливается по итогам успешного лечения. Если терапия оказалась эффективной – диагноз верен.

Является достаточно простым, однако, в тоже время, очень информативным анализом – он позволяет диагностировать практически все заболевания органов пищеварения, уточнить локализацию поражения (желудок, токая или толстая кишка) и обнаружить присутствие непрошенных гостей - паразитов и патогенных микробов. Однако, большинство родителей под анализом кала подразумевают только «анализ на дисбактериоз», который так любят назначать всем малышам. Однако, анализов кала несколько и микробиологический посев («на дисбактериоз»), выполняется самым последним, когда исключены все другие проблемы.

У детей первого года жизни анализ кала позволяет выявить различные проблемы пищеварения – нарушения работы желудка. Кишечника, проблемы с печенью и поджелудочной железой, инфекционные болезни и наследственную патологию обмена веществ. Какие же анализы сдаются и что в них смотрят?

Этот анализ оценивает основные характеристики кала – физические, химические и микроскопические, кроме того, в зависимости от вида вскармливания и возраста малыша будет иметь характерные особенности. Но чтобы анализ показал достоверные данные, необходимо его правильно собрать, что у маленьких детей представляет собой достаточно сложную задачу.
Собирают анализ с пеленки или клеенки, так как подгузник впитывает часть жидкости, и анализ будет недостоверным.

Для анализа необходимо не менее 1-2 чайных ложек кала, собранных в сухую чистую тару. Но баночки из-под детского питания использовать не стоит – на их дне и стенках остаются микроскопические частицы питания, что исказит результат. В идеале это должен быть свежий анализ – малыш сходил по-большому, вы собрали и доставили в лабораторию анализ. Но если это невозможно, соберите его в тару, плотно закройте крышкой и поместите в дверцу холодильника – хранить его можно максимум 6-8 часов.
Недопустимо собирать материал после клизмы или использования слабящих продуктов или медикаментов, в кале не должно быть частиц мочи.

Как его оценивают и что должно быть в норме?
Консистенция. Для детей первых двух лет жизни стул допустим в виде кашки и неоформленный. На полном грудном вскармливании жидкой кашкой, с небольшим количеством водички, может быть густой сметаны. На ИВ стул может быть мягкой колбаской или кашицей. С ведением прикорма стул начинает оформляться и становится гуще, к двум годам это обычно неплотная колбаска. Стул в виде «сухой копченой колбаски» или «овечьих шариков» - это запор. Стул жидкий, водой с примесями и часто – это запор.

Цвет. У малышей первого года жизни кал обычно желтый, с небольшими допустимыми примесями зелени в первые 3-4 месяца. Затем кал становится желто-коричневый, и к двум годам становится примерно как у взрослых. Допустимы кусочки пищи, особенно в первые месяцы прикорма, а при употреблении ярких продуктов – окраска кала в цвет продукта (свекла, ревень, тыква).
Запах. В первые месяцы жизни стул малышей на грудном скармливании имеет запах кислого молочка, а у искусственников пахнет резче. С введением прикорма, особенно мясного, стул приобретает обычный каловый запах.

РН (реакция). Нормальной является нейтральная или слабо-щелочная реакция, но в первые месяцы при питании смесью или грудным молочком может быть и слабокислой.
Белок. у здоровых детей белка в кале быть не должно – его наличие говорит о воспалении кишечника, наличии слизи, кровотечения, экссудата, не переваренной пищи.
Реакция на скрытую кровь. В норме в здоровом кишечнике крови быть не должно – это всегда указывает на проблемы. Чаще всего кровь появляется при аллергии, воспалении кишечника. трещинах прямой кишки. выпадении прямой кишки, геморрое, полипах и пороках развития кишечника.
Реакция на билирубин. Билирубин – это один из продуктов распада гемоглобина, который допустим в кале до примерно трехмесячного возраста, позже он под действием ферментов и микрофлоры полностью трансформируется в стеркобилин, дающих коричневую окраску. Появление его в кале позже данного возраста говорит о проблемах в здоровье.

Слизь. Слизью называют желеподобные выделения прозрачного или беловатого цвета. Они предназначены для защиты от агрессивного воздействия кишечного содержимого. Однако, в норме слизи выделяется немного, и она на выходе полностью смешивается с каловыми массами. Заметное присутствие слизи в кале допустимы до 3-5 месяцев жизни, особенно у грудничков. А после этого говорят о наличии воспалительного процесса.
Лейкоциты. Небольшое количество лейкоцитов, особенно в первые месяцы жизни допустимо, однако, если они выделяются в большом количестве в комплексе с слизью и кровью, это говорит о воспалении и повреждении стенки кишечника.

Мышечные волокна. Говорят о степени переваривания белковой пищи, у ребенка до введения мясных прикормов их практически не бывает, а в дальнейшем они должны быть единичными. Если их много – это говорит о нарушении пищеварения в желудке и кишечнике, проблемах с поджелудочной железе, воспалении кишечника.

Соединительная ткань. В норме ее быть не должно, встречается только после введения прикорма при недостаточной секреции желудка, проблемах с поджелудочной железой.
Нейтральный жир. Жирные кислоты. Мыла. В раннем детском возрасте могут встречаться небольшие его количества, но после полугода он появляется при нарушении работы поджелудочной железы, печени или болезнях тонкой кишки.

Остатки не переваренной пищи. В первые годы жизни в кале допустимо наличие остатков растительной пищи – особенно кукурузы, моркови, шкурок яблок и т.д. Если в кале много перевариваемой клетчатки, это может говорить о слишком быстром прохождении пищи по кишечнику. Непереваренная клетчатка может быть в норме.

Крахмал. Появляется в пище с введением прикорма, если его много – это горит о плохой работе поджелудочной железы, нарушении пищеварения в кишечнике, кишечной инфекции.
Йодофильная флора. Это особые виды бактерий, избыточный рост которых возникает при диспепсии (нарушении переваривания), нарушении работы тонкой кишки, нарушении работы желудка и поджелудочной железы.

Тест на содержание углеводов кала.
Данное исследование проводится при подозрении на лактазную недостаточность – снижение количества фермента, расщепляющего в кишечнике молочных сахар (лактозу). Обычно его назначают при диспепсических явлениях – жидком, пенистом стуле, нарушении набора веса, возникающих при употреблении молочных продуктов. Истинная лактазная недостаточность (когда есть дефицит ферментов) бывает редко. В большинстве своем встречаются ложные или вторичные варианты лактазной недостаточности, когда фермент есть, но он либо еще не дозрел, либо заблокирован в результате перенесенной кишечной инфекции, либо возникает перегрузка молочным сахаром (как например, при дисбалансе переднего и заднего молока у грудничков).

Такое состояние проходит после коррекции питания, лечения кишечной инфекции и нормализации микрофлоры. Анализ кала на углеводы является не основным в постановке диагноза, но помогает определить природу недостаточности – первичная или вторичная.
Чтоб правильно собрать кал на определение углеводов в кале необходимо собрать его в чистую сухую посуду, в объеме не менее 1-2 чайных ложек. Кал необходимо доставить в лабораторию не позже 3-4 часа, иначе результат будет искажен. Нормальными значениями для детей до года считаются:
На грудном вскармливании (до прикорма) до 0.5-0.6%,
На искусственном вскармливании – до 0.3%,
Для детей со второго полугодия – до 0.25%,
Старше года 0%.

При повышении показателей назначается коррекция вскармливания, устраняется дисбаланс молока если это грудничок или временно водится низколактозная смесь, если это малыш на ИВ. Если подтверждена первичная лактазная недостаточность – лечение будет заключаться в применении фермента - лактазы.

Анализ кала на условно-патогенную флору (УПФ).
Именно этот анализ кала, именуемый обычно «на дисбактериоз», вызывает наибольшее число вопросов среди родителей. Однако – по большей части это анализ малоинформативный и не показательный. Все дело в том, что микрофлора кишечника очень непостоянна и даже если провести подряд два анализа у одного и того же ребенка утром и вечером, они будут существенно отличаться.

Чтобы понять – откуда в кишечнике берутся микробы, и кого надо бояться, а кого нет – вкратце поговорим о том, как кишечник работает. Сразу после родов, когда кроху прикладывают к груди, кишечник малыша заселяется микрофлорой от мамы. Он становится поход на многоэтажный дом – есть соседи мирные и их большинство – это бифидо- и лактофлора. А есть соседи буйные, но их меньшинство, это так называемая условно-патогенная флора (стафилококк, клебсиелла, отдельные виды кишечной палочки). Пока все микробы расселяются в кишечнике, происходит беспокойство – физиологический дисбактериоз, пока все займут свои положенные места. Кроме того, заселению и мирному существованию в кишечнике различных потенциально опасных микробов, таких как стафилококк и клебсиеллы, способствует помощь от мамы – грудное молоко с антителами к вредным микробам и особыми веществами, помогающими расти полезным лактобактериям и бифидофлоре. То есть все сдвиги в анализе кала на микрофлору в первые 4-6 месяцев жизни являются физиологической настройкой работы и мирного сосуществования микробов.

Что допустимо, а что нет?
В данном анализе есть некоторые особые указания, так однозначно в кале недопустимо наличие возбудителя сальмонеллеза, холеры, брюшного тифа, дизентерии и патогенного типа кишечной палочки. Но родителей, однако, больше беспокоит наличие в кале стафилококка, протея, клебсиеллы, энтерококков. Однако, само по себе наличие какого-либо количества этих микробов, при отсутствии клиники данных заболеваний, то есть если ребенок не лихорадит, набирает вес, растет и развивается по возрасту, - это вариант нормы для данного малыша. Микрофлора называется условно-патогенной потому, что может стать активной и вредной только при наличии определенных условий.

Это возникает у детей с иммунодефицитами, резкого снижения иммунных сил после тяжелых и длительных болезней, после облучения или лечения тяжелыми лекарствами – антибиотиками длительным курсом (три и более недель), противоопухолевыми средствами. Еще одной причиной активации этой флоры могут быть кишечные инфекции и тяжелые отравления – они просто присоединяются к клинике болезни. Во всех остальных случаях коррекция микрофлоры вообще не требуется – микробное равновесие восстановится самостоятельно. Применения каких-либо препаратов для коррекции флоры не требуется – большинство из них до кишечника просто не доходят, разрушаясь соляной кислотой желудка или кишечными ферментами.

Конечно, это далеко не все из анализов кала, которые можно проводить ребенку. Однако, все остальные исследования довольно специфичны и проводятся только в случае обнаружения существенных отклонений в общих анализах. Они назначаются врачом-гастроэнтерологом и необходимы для уточнения диагноза, либо для контроля за эффективностью лечения.

Похожие публикации